Neste projeto, objetivou-se o diagnóstico de riquétsias, utilizando metodologia molecular, em material de humanos, carrapatos, pulgas, cães e equinos de áreas endêmicas dos estados de São Paulo (SP) e Rio de Janeiro (RJ). Diagnosticou-se Rickettsia rickettsii infectando Amblyomma cajennense e humanos no estado de SP, indicando ser esta a única espécie responsável pela doença. Rickettsia conorii foi diagnosticada em um paciente procedente de Portugal. No estado do RJ, Rickettsia felis foi detectada Ctenocephalides felis e em Am. cajennense enquanto que R. rickettsii em Amblyomma aureolatum, Am. cajennense, Anocentor nitens, Boophilus microplus, Ct. felis e Rhipicephalus sanguineus. As frequências mínimas de vetores infectados do estado do RJ apresentaram valores superiores àqueles registrados em outras regiões do país. Demonstrou-se, de forma inédita, o envolvimento de algumas destas espécies no ciclo da bactéria. R. rickettsii foi diagnosticada em cães e equinos indicando a importância dos animais domésticos na manutenção do ciclo da riquetsiose. / This project aimed to diagnose rickettsial diseases using molecular analysis methods on human, tick, flea, dog and horse samples from endemic areas in the States of São Paulo (SP) and Rio de Janeiro (RJ). A diagnosis of Rickettsia rickettsii infecting Amblyomma cajennense and humans in the State of SP was made, indicating that this is the only species responsible for the disease. Rickettsia conorii was diagnosed in a patient from Portugal. In RJ, Rickettsia felis was detected in Ctenocephalides felis and Am. cajennense, while R. rickettsii was detected in Amblyomma aureolatum, Am. cajennense, Anocentor nitens, Boophilus microplus, Ct. felis and Rhipicephalus sanguineus. In the State of RJ the minimum frequency of infected vectors presented higher values than those recorded in other regions of the country. The involvement of some of these species in the bacterium cycle has been demonstrated for the first time. R. rickettsii was diagnosed in dogs and horses indicating the importance of livestock in the maintenance cycle of rickettsial infection.

Trata-se de um estudo desenvolvido numa Unidade de Conservação de São Paulo o Parque Estadual Alberto Lofgrën - PEAL, situado na zona norte da cidade e conhecido como Horto Florestal. Visou identificar iniciativas sobre as diretrizes de promoção da saúde no parque, e a relevância dos determinantes sociais, ambientais e de saúde frente à Febre Maculosa Brasileira - FMB. A área de visitação pública do parque tornou-se importante área de estudo por possuir características epidemiológicas, consideradas pelo programa de controle desta doença, como área de alerta e, portanto, potencial para transmissão. Buscou-se identificar também as ações pedagógicas oferecidas pelo Núcleo de Educação Ambiental para entender a atuação dos monitores ambientais e foi efetuado um levantamento da infraestrutura e funcionamento do PEAL. Foram elaboradas oficinas pedagógicas com os monitores e outros profissionais que mantinham uma atuação de interface com a população para abordagem de temas norteadores do estudo como: educação em saúde e ambiental, promoção da saúde, Febre Maculosa Brasileira, planejamento de ações educativas e controle de carrapatos. Para garantir um processo pedagógico participativo nas oficinas, foram discutidos temas de interesse do grupo e utilizadas uma diversidade de estratégias para estimular nos participantes sentimentos de co-responsabilidade e pertencimento ao processo. Um espaço de reflexão sobre promoção da saúde, qualidade de vida, o ambiente do parque, estratégias pedagógicas e ações de cuidados com a FMB, foi criado, com o objetivo de integrar ações de educação ambiental e de saúde, que articuladas poderiam amplificar a atuação dos profissionais. A coleta de dados foi feita por meio de análise documental, observação de campo, entrevista com a gestora e encontros pedagógicos com os monitores. A análise dos resultados foi construída a partir da triangulação dos dados obtidos das técnicas de pesquisa citadas. Os produtos deste estudo foram: um plano de mobilização intersetorial para o controle de carrapatos de importância médica e da FMB no PEAL, produzido pelos monitores; a inclusão do tema sobre cuidados com carrapatos e a FMB na orientação do professor utilizada pelos educadores ambientais; a participação de profissionais de saúde no Plano de Manejo do Parque garantindo um capítulo específico sobre zoonoses no documento oficial de gestão da unidade; um artigo técnico publicado em revista especializada sobre as principais zoonoses do PEAL; a qualificação profissional dos envolvidos nas oficinas pedagógicas; e a contribuição para as discussões sobre as temáticas de saúde e o cuidado ambiental numa área de lazer, porém de risco para zoonoses como pode vir a ser uma Unidade de Conservação com elevado número de visitação e próximo a áreas urbanas. / This is a study developed a Conservation Unit of the São Paulo State Park Alberto Lofgren - PEAL, located in the north of the city and known as \"Horto Florestal\". This research sought to identify initiatives on guidelines for health promotion in the park, and the relevance of social determinants, environmental and health problem facing the Brazilian Spotted Fever - FMB. The area of public visitation to the park has become important for the study of epidemiological characteristics have, as the program of control of FMB as the alert area and, therefore, potential for transmission of the disease. We tried to identify the educational activities offered by the Center for Environmental Education to understand the performance of monitors and has done a survey of infrastructure and operation of PEAL. Educational workshops were developed with tutors and others who had a role to interface with the population approach to guiding the study of topics such as education and environmental health, health promotion, spotted fever, educational planning and control of the FMB. To ensure a participatory process were discussed issues of interest and used a variety of pedagogical strategies in encouraging participants feelings of co-responsibility and belonging to the process. A space of reflection on health promotion, quality of life, the environment of the park, and care strategies for action with the FMB was established with the objective of integrating environmental education activities and health, which could amplify the coordinated action of professionals. Data collection was done by means of documentary analysis, observation of field, interview with the management and educational meetings with the monitors. The analysis was constructed from the triangulation of data and techniques of research cited. The products of this study, are: the plan to mobilize to control the inter FMB in PEAL, produced by monitors and the inclusion of the issue with FMB care about the teacher\'s book used by environmental educators and the participation of the health team in the Management Plan of the Park to a specific chapter on zoonoses in document management unit, a technical paper published in the magazine, on major zoonoses of Peale and the professional growth of those involved in educational workshops, and contribution to the discussions on issues of health and environmental care in an area of leisure but at risk for zoonoses to be of conservation unit.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The Brazilian spotted fever is an infectious disease transmitted by ticks to humans. The occurrence of Rickettsia rickettsii agent has been reported in Brazil since 1920 and is considered the main bacteria involved in Brazilian Spotted Fever. Since 2000, four other current species have been identified in the country, as follows: Rickettsia riphicephali, Rickettsia amblyommi, Rickettsia parkeri and Rickettsia felis. R. parkeri was first isolated in Amblyomma maculatum on the Gulf Coast of the United States in 1937, but until 2004 was considered as non-pathogenic agent, when was the first recognized case of spotted fever in humans caused by this species. Recently a new human rickettsial infection was reported to cause disease in São Paulo, being called Rickettsia parkeri Strain Atlantic Forest. This study aimed to detect and identify proteins with potential to stimulate the immune system of the host of this new strain described. Therefore, we performed total protein extraction R. parkeri Strain Atlantic Forest from infected VERO cell samples. The extracted proteins were fractionated by electrophoresis in polyacrylamide gel in the presence of sodium dodecyl sulfate (SDS-PAGE). The proteins were transferred to nitrocellulose membranes by semi-dry electrotransfer system and subjected to Western blot. Subsequently, the membrane was incubated with domestic rabbit hyperimmune serum against R. parkeri Strain Atlantic Forest (primary antibodies) followed by incubation with anti-rabbit IgG peroxidase-conjugated antibody (secondary antibody) to detect the primary antibodies bound to the proteins . Obtaining the hyperimmune rabbit serum was performed by experimental infection of R. parkeri Strain Atlantic Forest in domestic rabbit, intraperitoneally. After incubation, the disclosure of immunoreactive proteins was performed using a chromogenic substrate. 2 immunoreactants were detected proteins with more than 78 kDa (200 e 130 kDa) and 5 with less than 78 kDa. By comparing existing proteomic maps and the molecular weight of these proteins showed that, it is suggested that rOmpA (200 kDa) and rOmpB (130 kDa) are among the proteins detected and the remaining proteins found are members of the family of surface antigens cell (Sca - Surface cell antigen). However, one can not say that these proteins represent only reactive immunity to R. parkeri Strain Atlantic Forest, or that are homologous to other species. However, studies using the Modern Liquid Chromatography technique associated with mass spectrometry (LC/MS/MS) must be conducted for protein characterization. Preliminary results obtained in this study allowed further elucidation of protein profile of this agent, providing subsidies for the development of highly sensitive and specific diagnoses, as well as studies allow for the realization of a vaccine, as an alternative for the control and prevention of Brazilian Spotted Fever. / A Febre Maculosa Brasileira é uma doença infecciosa, transmitida por carrapatos ao homem. A ocorrência do agente Rickettsia rickettsii tem sido relatada no Brasil desde 1920, sendo considerada a principal bactéria envolvida na Febre Maculosa Brasileira. Desde 2000, outras quatros espécies circulantes foram identificadas no país, sendo: Rickettsia riphicephali, Rickettsia amblyommi, Rickettsia parkeri e Rickettsia felis. R. parkeri foi isolada pela primeira vez em Amblyomma maculatum, na Costa do Golfo dos Estados Unidos da América em 1937, porém até 2004 era considerada como agente não patogênico, quando então houve o primeiro caso reconhecido de Febre Maculosa em humanos ocasionado por essa espécie. Uma nova riquetsiose humana foi descrita como causadora da doença no Estado de São Paulo, sendo denominada de Rickettsia parkeri cepa Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo detectar e identificar proteínas com potencial de estimular o sistema imune do hospedeiro desta nova cepa descrita. Para tanto, foi realizado a extração proteica total de R. parkeri cepa Mata Atlântica a partir de amostras de células VERO infectadas. As proteínas extraídas foram fracionadas por eletroforese em gel de poliacrilamida na presença de dodecil-sulfato de sódio (SDS-PAGE). Estas proteínas foram transferidas para membranas de nitrocelulose através do sistema semi-seco de eletrotransferência e submetidas à técnica de Western blot. Posteriormente, a membrana foi incubada com soro hiperimune de coelho doméstico contra R. parkeri cepa Mata Atlântica (anticorpos primários), seguido de incubação com anticorpo anti-IgG de coelho conjugado com peroxidase (anticorpo secundário), para detectar os anticorpos primários ligados às proteínas. A obtenção do soro de coelho hiperimune foi realizada através da infecção experimental de R. parkeri cepa Mata Atlântica em um coelho doméstico, via intraperitoneal. A revelação das proteínas imunorreativas foi efetuada através de substrato cromogênico. Foram detectadas 2 proteínas imunorreagentes com mais de 78 kDa (200 e 130 kDa ) e 5 com menos de 78 kDa. Através da comparação de mapas proteômicos existentes e pelo peso molecular que estas proteínas apresentaram, sugere-se que rOmpA (200 kDa) e rOmpB (130 kDa) estejam entre as proteínas detectadas e as demais proteínas encontradas, sejam membros da família de antígenos de superfície celular (Sca Surface cella ntigen). No entanto, não se pode afirmar que estas proteínas apresentam imunidade reativa única para R. parkeri cepa Mata Atlântica, ou se são homólogas a outras espécies de riquetsias. Contudo, estudos empregando a técnica de Cromatografia Líquida Moderna associada a Espectrometria de Massas (LC/MS/MS) deverão ser conduzidos para a caracterização proteica. Os resultados preliminares obtidos neste estudo permitiram maior elucidação do perfil proteico deste agente, fornecendo assim subsídios para o desenvolvimento de diagnósticos altamente sensíveis e específicos, bem como permitir estudos para a realização de uma vacina, como alternativa para o controle e prevenção da Febre Maculosa Brasileira.

The recent and human caused environmental changes interfered with the evolutionary interactions between parasites and hosts. These changes accidentally benefited those few animals species, more adapted to the altered environment. However, the biodiversity of parasites was affected, and some parasitic species were benefited as well. In the case of ticks, those species which, after the changes, found abundant hosts and suitable environment were benefited. In Brazil, capybara (Hydrochaeris hydrochaeris Linnaeus 1766) and the associated ticks Amblyomma cajennense Fabricius 1787 and Amblyomma dubitatum Neumann 1899, expanded in many urban areas where they threaten human well-being and domestic animals. These ticks cause pruritic skin lesions and blood feed on their hosts moreover, they are associated, in some places, with the transmission of Spotted fever, a highly lethal disease for man. This study aimed to analyze the factors that determine the establishment and expansion of capybaras and ticks in urban areas in the city of Uberlandia, Minas Gerais State, Brazil. For this purpose in 2008 monthly direct counting of capybaras per transect in four urban areas and an ecological reserve were held and abundance and density index were calculated. Ticks were collected from the environment in the summer of 2008 using CO2 traps and flannel dragging on the same transects. It was observed that populations of capybara, in groups with number of individuals higher then those found in natural areas, were established in such places that, in addition to food and water bodies, were protected day and night surveillance. The greater abundance of ticks of the species A. cajennense and A. dubitatum was found at the site with the greatest abundance of capybaras. The results therefore indicate that beyond the minimum requirements for the establishment of capybaras such as food and water, protection from men itself, even though accidentally, is a major factor in the establishment and proliferation of capybaras in urban areas. This increase in the number of such host always implies in high environmental infestation of ticks and increased risk of bites and of pathogen transmission. Therefore, capybaras in urban areas should be considered synanthropic and effective methods of population control must be developed. / As modificações ambientais de origem antrópica beneficiaram acidentalmente alguns animais que se adaptaram a áreas modificadas. Contudo, a biodiversidade de parasitos também foi afetada com o favorecimento de algumas espécies em detrimento de outras. No caso de carrapatos foram beneficiadas aquelas espécies que encontraram hospedeiros e ambientes propícios. No Brasil capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris Linnaeus 1766) e os carrapatos Amblyomma cajennense Fabricius 1787 e Amblyomma dubitatum Neumann 1899, se expandiram em muitas áreas urbanas onde ameaçam o bem estar humano e de animais domésticos pelas lesões cutâneas infligidas e espoliação. Além disso, estão associados, em alguns locais, á transmissão da febre maculosa, doença de elevada letalidade ao homem. Este trabalho teve por objetivo analisar os fatores que determinam o estabelecimento e expansão de capivaras e carrapatos em áreas urbanas na cidade de Uberlândia. Em 2008 realizou-se mensalmente em quatro áreas urbanas e uma reserva ecológica a contagem direta de capivaras por transectos lineares calculando-se o índice de abundância e densidade. Coletou-se carrapatos do ambiente no verão de 2008 utilizando-se armadilhas de gelo seco e arraste de flanela nos mesmos transectos. Observou-se que populações de capivara em grupos com número de indivíduos superior ao encontrado em áreas naturais se estabeleciam em locais que, além de alimentação e corpos d água eram protegidos em locais com vigilância dia e noite. A maior abundância de carrapatos das espécies A. cajennense e A. dubitatum foi encontrada no local com a maior abundância de capivaras com 79% da amostra de carrapatos coletados. Os resultados indicam, portanto, que além das exigências mínimas para estabelecimento de capivaras como alimentação e água a proteção do próprio homem é um fator primordial no estabelecimento e proliferação de capivaras em áreas urbanas. Este aumento no número de hospedeiro sempre implica em maior infestação de carrapatos e maior risco de picadas e transmissão de patógenos. Portanto, capivaras em áreas urbanas devem ser consideradas espécies sinantrópicas e métodos eficazes de controle populacional precisam ser desenvolvidos. / Mestre em Ecologia e Conservação de Recursos Naturais

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edmeia de paula.pdf: 2653466 bytes, checksum: ad9e1a87d15b9af7be8e8cea4757bf4f (MD5) Previous issue date: 2010-04-15 / Brazilian Spotted Fever (BSF) is an acute, infectious, febrile disease of varying severity, its course ranging from asymptomatic cases to severe clinical forms with a high lethality rate. The absence of pathognomonic signs in this anthropozoonosis often results in late diagnosis, thereby serving as a stimulus for investigators to focus their attention on the weakest link of its epidemiological chain, the vector. In Brazil, the principal vector of Rickettsia rickettsii, the etiological agent of spotted fever in the New World, is the ixodid tick Amblyomma cajennense. In the present study, a systematic literature review was performed to search for publications on the epidemiology of BSF in the country. With the objective of improving control of the vector, its resistance to the principal acaricides applied against this tick was monitored. The systematic literature review was performed by searching for scientific papers dealing with BSF in the Cochrane Library, LILACS, MEDLINE and SciELO databases, using the keywords Amblyomma cajennense, Brazilian spotted fever and Rickettsia rickettsii. The search included articles published in English and Brazilian Portuguese that contained these keywords. To evaluate susceptibility and resistance to the synthetic acaricides, larvae had to be obtained from engorged female specimens of A. cajennense collected from naturally infested horses that had been free of acaricidal residue for at least 45 days, on farms belonging to five municipalities of the state of Goiás (Caldas Novas, Hidrolândia, Goiás, Terezópolis and Goiânia). The larvae were exposed to different concentrations of 12 commercially available acaricidal formulations using the larval packet test (LPT). The possible development of resistance of adult specimens of A. cajennense to the pyrethroid deltamethrin, the principal acaricide on the market in Goiás for the control of ticks in the region, was also evaluated. Unfed adult male and female specimens of A. Cajennense were collected on leaves of bushes along a nature trail in the municipality of Caldas Novas, Goiás, Brazil. They were immersed in different concentrations of deltamethrin and then placed in contact with filter paper impregnated with the substance. The control groups were exposed to distilled water alone. The bioassays were performed in quadruplicate at a temperature of 27oC, relative air humidity >80% and 12-hour light/dark cycles. From the systematic literature review, it was found that there are no records or even systematic studies of BSF in Brazil up to the present moment and the number of cases reported in the literature is lower than the figures published by the health surveillance authorities of the Ministry of Health. The data collected in this review should serve to stimulate investigators to design new studies and carry out further work, since the distribution of this disease may be more widespread than is currently supposed. Results from the bioassays showed a mean percentage of mortality ( ) of 72.6% of the adult specimens after 24 hours of exposure to the dose of deltamethrin prescribed by the manufacturer, characterizing a status of resistance to deltamethrin. The males were found to be more susceptible to this pyrethroid compared to the females. of 82%, 89%, 89.6% and 90% of the larvae were obtained, respectively, with deltamethrin, cypermethrin + piperonyl butoxide, amitraz and permethrin, characterizing a status of probable resistance of the larvae to these acaricides. The combination of cypermethrin with citronellal and with piperonyl butoxide did not significantly affect the lethal capacity of this pyrethroid against the larvae of this vector. Significant mortality was not found in the control groups (p = 0.05). These results encourage new studies to be conducted to develop alternative methods of integrated control of this vector that would be more effective and have less harm on the environment. / A Febre Maculosa Brasileira (FMB) é uma doença infecciosa febril aguda, de gravidade variável, podendo cursar desde formas assintomáticas até formas graves, com elevada taxa de letalidade. A ausência de sinais patognomônicos nesta antropozoonose, que muitas vezes leva ao seu diagnóstico tardio, suscita o ataque do elo mais fraco de sua cadeia epidemiológica seu vetor. No Brasil, o principal vetor da Rickettsia rickettsii, agente etiológico da Febre Maculosa da Região Neotropical é o ixodídeo Amblyomma cajennense. Neste trabalho foi feita uma revisão sistemática da literatura abordando a temática da epidemiologia da FMB no Brasil. Com finalidade de subsidiar o controle do vetor monitorou-se a resistência do mesmo aos principais produtos acaricidas utilizados em seu controle. A revisão sistemática da literatura foi feita utilizando artigos científicos que abordam a temática da FMB no Brasil, pesquisando nas bases de dados Biblioteca Cochrane, LILACS, MEDLINE e SciELO. Utilizando como descritores Amblyomma cajennense; Febre Maculosa; Rickettsia rickettsii. Participaram da revisão artigos publicados na língua inglesa e portuguesa do Brasil que apresentaram os descritores. Na parte experimental para avaliar a suscetibilidade e resistência dos acaricidas químicos sintéticos, fo ram obtidas larvas de teleóginas de A. cajennense. Estas foram coletadas de cavalos naturalmente infestados e livres de resíduos acaricidas há pelo menos 45 dias, em fazendas pertencentes a cinco municípios do Estado (Caldas Novas, Hidrolândia, Goiás, Terezópolis e Goiânia). As larvas foram expostas a diferentes concentrações das 12 formulações acaricidas comerciais, pelo método de Larval Packet Test (LPT). Para verificar o possível desenvolvimento de resistência de adultos de A. cajennense ao piretroide deltametrina, principal base carrapaticida comercializada em Goiás para o controle de carrapatos na região. Machos e fêmeas, adultos, de A. cajennense em jejum foram coletados em folhas de arbustos em uma trilha ecológica, no município de Caldas Novas, Goiás, Brasil. Estes foram submetidos a diferentes concentrações de deltametrina, através de imersão e posterior contato com papel filtro impregnado. Os grupos controles foram submetidos apenas à água destilada. Os bioensaios foram realizados em quadruplicata, a 27ºC, UR > 80% e 12h de luz. Através da Revisão Sistemática da Literatura verificou-se que não há registros ou mesmo estudos sistemáticos da Febre Maculosa no Brasil; até o momento o número de casos relatados na literatura são inferiores aos que a Secretaria de Vigilância em Saúde do Ministério da Saúde tem divulgado. Os dados levantados pela revisão sugerem que novas investigações e estudos sejam feitos, pois a distribuição desta doença pode ser mais ampla do que se supõe. Foi observado, nos bioensaios, que a mortalidade média percentual ( ) de 72,6% dos adultos após 24 h de exposição à dosagem de deltametrina prescrita pelo fabricante, caracterizando o status de resistência à deltametrina. Os machos mostraram-se mais suscetíveis que as fêmeas ao piretroide. de 82%, 89%, 89.6% e 90% das larvas foram obtidas, respectivamente, por deltametrina; cipermetrina + butóxido de piperolina; amitraz e permetrina, caracterizando o status de provável resistência larval a estes acaricidas. As associações de cipermetrina com citronelal e com butóxico de piperolina não interferiram significativamente na capacidade letal desse piretroide para larvas do vetor. Mortalidade significativa não foi evidenciada nos grupos controles (p = 0,05). Os resultados suscitam a realização de estudos para o desenvolvimento de medidas alternativas de controle integradas, mais eficientes e de menor impacto ambiental, para o controle deste vetor.

La fièvre boutonneuse Méditerranéenne (FBM) est due à Rickettsia conorii subsp. conorii, bactérie intracellulaire stricte. Cette maladie, initialement décrite comme bénigne, présente actuellement un taux de sévérité de l’ordre de 10% avec une augmentation de cette sévérité décrite dernièrement. Au cours d’une étude clinique rétrospective portant sur 161 cas de FBM, nous avons observé que le traitement par fluoroquinolones était associé à une évolution défavorable, ce qui à ce jour n’avait jamais été rapporté, alors que la doxycycline semble être protectrice. Nous avons également observé cet effet délétère des fluoroquinolones sur un modèle in vitro d’infection cellulaire à R. conorii, effet qui n’a pas été observé avec la doxycycline. Une des hypothèses pouvant expliquer cet effet est l’induction du module toxine-antitoxine par les fluoroquinolones. Ainsi nous avons montré que la ciprofloxacine modulait l’expression des gènes du couple toxine-antitoxine. Nous avons également montré que les statines pouvaient avoir un effet prophylactique au cours de l’infection par R. conorii. Enfin nous avons étudié la réponse de l’hôte au sein de l’escarre d’inoculation par une approche transcriptomique.Cette thèse a mis en évidence que les traitements reçus au cours de la FBM peuvent modifier le pronostic de cette maladie. Le choix des antibiotiques est donc crucial et doit faire l’objet d’études complémentaires. / Mediterranean spotted fever (MSF) is caused by Rickettsia conorii subsp. conorii, a strict intracellular bacterium. The disease initially described as benign presents currently rates of severity around 10% with an increase described recently. In a retrospective clinical study of 161 cases of MSF, we observed that treatment with fluoroquinolones was associated with an unfavourable outcome whereas doxycycline appeared to be protective. We also observed this deleterious effect of fluoroquinolones in vitro in a cellular model of R. conorii infection, which was not observed with doxycycline. One hypothesis that could explain this effect is the induction of toxin-antitoxin module by fluoroquinolones. Thus we have shown that ciprofloxacin modulates the gene expression of toxin-antitoxin module. We have also shown that statins may have a prophylactic effect during infection by R. conorii. Finally, we have studied the host response within the inoculation eschar by a transcriptomic approach. This thesis has shown that the treatment received during the MSF can change the prognosis of this disease. The choice of antibiotics is crucial, and should be subject to further studies.

Orientadores: Luiz Jacintho da Silva, Raquel Silveira Bello Stucchi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-18T15:04:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Angerami_RodrigoNogueira_D.pdf: 7670692 bytes, checksum: f6634d52b90eaf383ed11a180b9179aa (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Causada pela bactéria Rickettsia rickettsii e transmitida pelos carrapatos Amblyomma cajennense e Amblyomma aureolatum, a febre maculosa brasileira (FMB), após décadas de aparente silêncio epidemiológico, desde sua reemergência nos anos 80, vem figurando como importante problema de saúde pública no estado de São Paulo, sobretudo, em decorrência da aparente expansão das áreas de transmissão e da elevada letalidade a ela associada. O objetivo principal do presente estudo foi descrever características clínicas e epidemiológicas da FMB a partir da análise retrospectiva de casos confirmados da doença em áreas endêmicas no estado de São Paulo. Foi observado que manifestações inespecíficas como febre, cefaléia, mialgia e exantema, foram os sinais clínicos mais freqüentes e precoces. Embora variáveis, elevadas frequências de fenômenos hemorrágicos (22,9%-77,6%), icterícia (16,7%-52%), alterações neurológicas (27,2%-51,7%) e insuficiência respiratória (17,5%-62%) foram observadas. A taxa de letalidade média no estado de São Paulo no período de 2003 a 2008 foi de 29,6%(21,9%-40%). Trombocitopenia e elevação de transaminases hepáticas foram as alterações laboratoriais mais frequentes, ocorrendo em até 100% dos casos. Na faixa etária pediátrica, a FMB também se apresentou como doença severa, associando-se, embora em menor freqüência, às complicações acima mencionadas e à elevada letalidade (28,4%). Entretanto, em estudo comparativo entre o perfil clínico da FMB nos estados de São Paulo e Santa Catarina, observou-se no estado do Sul uma doença com evolução benigna, pequena frequência de sinais de gravidade e ausência de óbitos. Entre pacientes com FMB, as síndromes febris hemorrágica, icterohemorrágica e exantemática foram as mais comumente observadas (37,1%, 33,9%, 11,3%, respectivamente). Dentre os principais diagnósticos diferenciais da FMB, leptospirose, dengue e doença meningocócica foram as mais prevalentes (28,5%, 17,2%, 5,4%, respectivamente). Em 31% dos casos descartados para FMB não foi possível a identificação do diagnóstico etiológico. A doença foi mais incidente no gênero masculino e entre indivíduos da faixa etária de 20 a 49 anos. Em áreas em que o A. cajennense é o principal vetor foi possível observar maior incidência da doença entre o período de Junho a Setembro. Surtos de FMB se associaram a elevadas taxas de letalidade e a diferentes determinantes ecoepidemiológicos. Atividades de lazer e ocupacionais em áreas de mata, pastagem, próximas a coleções hídricas e/ou com presença de animais (cavalos, capivaras e, eventualmente, cães) foram consideradas importantes exposições de risco para infecção. O presente estudo permitiu observar que a infecção pela R. rickettsii no estado de São Paulo se associa à elevada morbimortalidade, sendo, aparentemente, mais severa que a febre das Montanhas Rochosas nos Estados Unidos. Exantema, icterícia e hemorragias são importantes marcadores clínicos que devem ser considerados na suspeição da doença e seus diagnósticos diferencias. O conhecimento das características epidemiológicas e dos fatores de risco para infecção deve fundamentar as ações de prevenção e controle da FMB. A maior severidade da infecção pela R. rickettsii no estado de São Paulo, a ocorrência de casos atípicos em Santa Catarina e a ausência de elucidação diagnóstica em casos descartados para FMB sugerem que cepas de R. rickettsii com distintos padrões de virulência, bem como outras espécies de riquétsias e, eventualmente, outros microorganismos transmitidos por carrapatos devam estar ocorrendo no Brasil / Abstract: Brazilian spotted fever (BSF) is caused by Rickettsia rickettsii and transmited by Amblyomma cajennense and Amblyomma aureolatum ticks. After decades of an apparent epidemiological silence, BSF reemerged as an important public health problem in São Paulo State in the 1980's, mostly because the possible expansion of its transmission areas and the high BSF related fatality-rate. The main objective of the present study was to describe clinical and epidemiological features of BSF through a retrospective analysis of BSF confirmed cases in endemic areas. Non-specific clinical signs like fever, myalgia, headache, and exanthema were the earliest and most frequent clinical signs. A high frequency of hemorrhagic manifestations (22.9%-77.6%), icterus (16.7%-52%), neurological signs (27.2%-51.7%), and respiratory distress (17.5%-62%) was also observed. Case-fatality ratio in São Paulo State between 2003 and 2008 was 29.6% (21.9%-40%). Thrombocytopenia and elevated liver enzymes were the most frequent laboratorial abnormalities, reaching 100% in some groups. In the pediatric age-group, BSF also presented as a severe disease with a slightly lower rate of clinical complications, but a similar high lethality rate (28.4%). Interestingly, when we compared the clinical profile of BSF cases between São Paulo state and Santa Catarina state, located in the southernmost part of Brazil, a milder disease, with a lower frequency of clinical signs of severity and no fatalities was observed in the latter. The most frequent clinical syndromes occurring in BSF patients were hemorrhagic, ictero-hemorrhagic, and exanthematic acute febrile syndromes (37.1%, 33.9% and 11.3% respectively). The most important differential diagnosis to BSF was leptospirosis, dengue fever, and meningococcal disease (28.5%, 17.2%, and 5.4%, respectively). In 31% of non-confirmed BSF cases, no etiological diagnosis was defined. A higher incidence of BSF was observed in males and in the 20-49 years age-group. In areas where A. cajennense is recognized as the most important vector, a higher BSF incidence was observed from June to September. Clusters of BSF were associated to elevated fatality rates and a wide number of ecoepidemiological determinants. Recreational and occupational activities in rural, periurban, and waterside areas, with presence of animals (mostly horses and capybaras, and eventually dogs) were considered the most important exposure risk factors to infection. The present study suggests a more severe pattern of R. rickettsii in São Paulo state when compared with Rocky Mountain spotted fever in United States. Exanthema, icterus, and hemorrhage are important clinical markers of BSF and should be considered in the suspicion of this disease and as a differential diagnosis. Knowledge of clinical, epidemiological, and risk factors for infection should be used to structure and improve the measures for control and prevention of BSF. Together, the higher severity of R. rickettsii infection in São Paulo state, the occurrence of atypical cases in Santa Catarina, and the unknown etiological diagnosis of a high percentage of post-tick exposure febrile patients suggest that more virulent R. rickettsii strains, other Rickttsiae species and, eventually, other tick-borne diseases could be occurring in Brazil / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Maria Rita Donalisio Cordeiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-27T05:43:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_CelsoEduardo_D.pdf: 10110328 bytes, checksum: 368a9a001209cacb6b58b814306f1b46 (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: A febre maculosa brasileira (FMB) é uma doença infecciosa aguda, cujo agente etiológico é a Rickettsia rickettsii, bactéria Gram negativa intracelular obrigatória e transmitida por meio da picada de carrapatos infectados. O objetivo deste estudo é descrever os fatores associados ao ciclo de transmissão e a distribuição espacial da FMB na Bacia do Rio Piracicaba, região de maior registro de casos da doença no estado de São Paulo. Realizou-se um estudo retrospectivo das fichas de investigação dos LPI da FMB realizadas pela equipe da Superintendência de Controle de Endemias (SUCEN) e de dados das investigações epidemiológicas do Sistema de Informações sobre Agravos de Notificação (SINAN) no período de 2003 a 2013. Foram analisados os casos confirmados pelos critérios laboratoriais e os descartados. Foi ajustado um modelo de regressão logística múltipla utilizando-se como variável resposta, os LPI dos casos confirmados de FMB e como variáveis explicativas, os fatores demográficos, ambientais, presença das espécies de vetores e de animais hospedeiros nos LPI. Para os estimadores Odds Ratio foi considerado intervalo de confiança de 95%. Após a identificação das coordenadas geográficas (X,Y) coletadas em campo, foram incorporadas superfícies no mapa da bacia contendo informações sobre índice de vegetação (Normalized Difference Vegetation Index), altitude, índice topográfico, declividade do terreno e hidrografia. As variáveis associadas à confirmação da FMB no modelo logístico múltiplo foram: idade (OR = 1,025 IC: 1,015-1,035), ocorrência em área urbana (OR = 1.515 IC: 1,036¿2.231), existência de pasto degradado (OR= 1,759 IC: 1,028¿3.003), presença de Amblyomma sculptum no ambiente (OR = 1,629 IC: 1,097¿2.439), coleta de carrapatos em equinos (OR = 1,939 IC: 0,999¿3, 764), presença de capivaras (OR= 1,467 IC: 1,009-2,138). Foram observados aglomerados de maior densidade na região mais central da bacia e em regiões de baixa altitude (valores entre 448 a 590 metros) e em ambientes com baixos níveis de NDVI, próximos a área urbana e periurbana e à coleções hídricas. Foram confirmados 119 (59%) casos em LPI na área delimitada pelo raio de 1 km dos rios da bacia e 87 (41%) se o raio for de 500 metros. Fatores ambientais associados à transmissão da FMB podem dirigir as investigações em campo, identificar área de maior risco de transmissão da FMB e facilitar a priorização de investimentos das medidas preventivas e de controle / Abstract: Brazilian spotted fever (BSF) is an acute infectious disease whose etiologic agent is Rickettsia rickettsii, obligate intracellular Gram negative bacteria and transmitted through the bite of infected ticks. The objective of this study is to describe the factors associated with the transmission cycle and the spatial distribution of FMB in Piracicaba River Basin, the largest region reported cases of the disease in the state of São Paulo. We conducted a retrospective study of the investigation forms of FMB of the IPL undertaken by staff of the Superintendency of Endemic Disease Control (SUCEN) and data from epidemiological investigations of the Information System of Notifiable Diseases (SINAN) in the 2003-2013 period. cases confirmed by laboratory criteria and discarded were analyzed. We adjusted a multiple logistic regression model using as dependent variable, the LPI of confirmed cases of FMB and as explanatory variables, demographic, environmental, presence of species of vectors and animal hosts in LPI. For estimators odds ratio was considered 95% confidence interval. After identifying the geographic coordinates (X, Y) collected in the field, surfaces were incorporated into the basin map containing information about vegetation index (Normalized Difference Vegetation Index), altitude, topographic index, land slope and hydrography. The variables associated with confirmation of FMB in multiple logistic regression were age (OR = 1.025 CI: 1.015 to 1.035), occurring in urban areas (OR = 1.515 CI: 1.036 to 2231), existence of degraded pasture (OR = 1.759 CI: 1.028 to 3003), the presence of Amblyomma sculptum the environment (OR = 1.629 CI: 1.097 to 2439), collection of ticks on horses (OR = 1.939 CI: 0.999 to 3, 764), presence of capybaras (OR = 1.467 CI: 1.009 -2.138). Higher density clusters were observed in the most central part of the basin and in low-lying regions (values between 448-590 meters) and in environments with low levels of NDVI, near urban and peri-urban and basins. 119 were confirmed (59%) cases in the area bounded by LPI 1 km radius of the basin's rivers and 87 (41%) if the radius is 500 meters. Environmental factors associated with the BSF transmission may conduct investigations in the field, identify area of greatest risk of transmission of FMB and facilitate the prioritization of investments of preventive and control measures / Doutorado / Epidemiologia / Doutor em Saude Coletiva

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2015-12-01T10:18:13Z No. of bitstreams: 1 lilianesilvaduraes.pdf: 4940502 bytes, checksum: aad2827698668df37140c043979a25c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T10:18:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lilianesilvaduraes.pdf: 4940502 bytes, checksum: aad2827698668df37140c043979a25c4 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O município mineiro de Juiz de Fora se destaca no contexto epidemiológico por possuir indicadores de vulnerabilidade, como alto número de notificações do estado, com casos ocorrentes no perímetro urbano, que detém elevada densidade populacional, ocupação de áreas limítrofes com fragmento de mata, as quais margeiam áreas confirmadamente endêmicas, possibilitando o intercâmbio de artrópodes vetores com mamíferos hospedeiros. Tais áreas propiciam o desenvolvimento e a manutenção dos ciclos enzoótico e epidêmico para Febre Maculosa. Mediante ao exposto, o objetivo geral deste projeto foi investigar e mapear a relação natural entre espécies de Rickettsia sp. e seus potenciais vetores em cinco regiões de vulnerabilidade do município. Especificamente, objetivaram-se: a determinação da composição da fauna de ectoparasitos potencialmente vetores coletados sobre hospedeiros vertebrados, bem como livres no ambiente; análise do ciclo enzoótico através da detecção de rickettsias por meio de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR); a caracterização dos agentes rickettsias por sequenciamento e análises filogenéticas e a avaliação dos aspectos epidemiológicos da rickettsias circulantes, dos vetores e seus hospedeiros vertebrados. Os ectoparasitos foram coletados no período de 2013-2014 em localidades que carecem de informações sobre a manutenção do ciclo de transmissão de rickettsias: Caetés, Igrejinha, Paula Lima, Torreões e Valadares. No total foram coletados e identificados 12.692 ectoparasitos, entre pulgas do gênero Ctenocephalides e carrapatos dos gêneros Amblyomma, Rhipicephalus e Dermacentor, com posterior processamento de 2.379 espécimes de maneira individual ou reunidos em lotes de acordo com localidade, sexo, estádio de desenvolvimento, constituindo 249 amostras. O DNA genômico destas amostras foi extraído e submetido à pesquisa de genes rickettsiais gltA (gênero Rickettsia) e ompA (Grupo da Febre Maculosa-GFM). Foram obtidas 29 amostras positivas, exceto para Caetés; sendo 16 para o gene gltA, com 11 amostras sequenciáveis, e 13 amostras para o gene ompA, com sete sequenciáveis; com destaque para Amblyomma cajennense sendo a espécie mais prevalente e com 4,29% de taxa de infecção mínima. Sequências com 99 e 100% de identidade com a espécie patogênica Rickettsia felis foram diagnosticadas em Ctenocephalides canis e Ctenocephalides felis. E de forma inédita o registro de Rickettsia bellii em Amblyomma dubitatum na Microrregião de Juiz de Fora, apresentando sequências com 97% de homologia. O presente trabalho revela uma maior distribuição geográfica de rickettsias do GFM, incluindo R. felis causadora da rickettsiose felis, na Microrregião de Juiz de Fora. / The city of Juiz de Fora, in the Brazilian state of Minas Gerais, stands out in the epidemiologic context for possessing vulnerability indicators, such as a high number of this state´s notifications, with cases occurring in the urban perimeter, which contains an elevated population density, and the occupation of limit areas with forests´ fragments, which have a frontier with confirmed endemic areas, making possible the interchange of arthropod vectors with mammal hosts. Such areas propitiate the development and the maintenance of the enzootic and the epidemic cycles for the Spotted Fever. By the above, the general objective of this project was to investigate and to map the natural relation between Rickettsia sp. Species and its potential vectors in five regions of vulnerability in the city. Specifically, here are the objectives: the determination of the fauna composition for ectoparasites potentially vectors, collected on vertebrate hosts, as well as loose in the environment; analysis of the enzootic cycle through the detection of rickettsias by Polymerase Chain Reaction (PCR); the rickettsias agents characterization through sequencing and phylogenetic analyses and the evaluation of the epidemiologic aspects of the circulating rickettsias, of the vectors and their vertebrate hosts. The ectoparasites were collected in the period of 2013-2014 in places that need information on the maintenance of rickettsias transmission cycle: Caetés, Igrejinha, Paula Lima, Torreões e Valadares. As a total, there were collected and identified 12,692 ectoparasites, among fleas from the gender Ctenocephalides and ticks from the genders Amblyomma, Rhipicephalus and Dermacentor, with a posterior processing of 2,379 specimens in an individual way or gathered in lots according to place, sex, development state, constituting 249 samples. The genomic DNA from these samples was extracted and submitted to research of rickettsiais gltA (gênero Rickettsia) e ompA (Grupo da Febre Maculosa-GFM) genes. There were obtained 29 positive samples, except for Caetés; from which 16 for the gltA gene, with 11 sequenced samples, and 13 samples for the ompA gene, with seven sequenced; especially Amblyomma cajennense as the most prevalent species and with 4.29% of minimal infection rate. Sequences with 99 and 100% of identity with the pathogenic species Rickettsia felis were diagnosed in Ctenocephalides canis and Ctenocephalides felis. And in a surprising way the register of Rickettsia bellii in Amblyomma dubitatum in Juiz de Fora´s Micro-region, presenting sequences with 97% of homology. This paper reveals a bigger geographic distribution of rickettsias from GFM, including R. felis that causes rickettsiosis felis, in Juiz de Fora´s Micro-region.

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2015-12-03T09:53:31Z No. of bitstreams: 1 lilianesilvaduraes.pdf: 4940502 bytes, checksum: aad2827698668df37140c043979a25c4 (MD5) / Rejected by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br), reason: Título: somente primeira letra da primeira palavra em maiúsculo e nomes próprios também. Palavras-chave: primeira letra de cada palavra em maiúsculo. Acrescentar uma em cada linha (não precisa colocar ponto e nem vírgula no final) on 2015-12-03T11:59:21Z (GMT) / Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2015-12-03T12:48:28Z No. of bitstreams: 1 lilianesilvaduraes.pdf: 4940502 bytes, checksum: aad2827698668df37140c043979a25c4 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2015-12-03T13:57:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lilianesilvaduraes.pdf: 4940502 bytes, checksum: aad2827698668df37140c043979a25c4 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-03T13:57:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lilianesilvaduraes.pdf: 4940502 bytes, checksum: aad2827698668df37140c043979a25c4 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O município mineiro de Juiz de Fora se destaca no contexto epidemiológico por possuir indicadores de vulnerabilidade, como alto número de notificações do estado, com casos ocorrentes no perímetro urbano, que detém elevada densidade populacional, ocupação de áreas limítrofes com fragmento de mata, as quais margeiam áreas confirmadamente endêmicas, possibilitando o intercâmbio de artrópodes vetores com mamíferos hospedeiros. Tais áreas propiciam o desenvolvimento e a manutenção dos ciclos enzoótico e epidêmico para Febre Maculosa. Mediante ao exposto, o objetivo geral deste projeto foi investigar e mapear a relação natural entre espécies de Rickettsia sp. e seus potenciais vetores em cinco regiões de vulnerabilidade do município. Especificamente, objetivaram-se: a determinação da composição da fauna de ectoparasitos potencialmente vetores coletados sobre hospedeiros vertebrados, bem como livres no ambiente; análise do ciclo enzoótico através da detecção de rickettsias por meio de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR); a caracterização dos agentes rickettsias por sequenciamento e análises filogenéticas e a avaliação dos aspectos epidemiológicos da rickettsias circulantes, dos vetores e seus hospedeiros vertebrados. Os ectoparasitos foram coletados no período de 2013-2014 em localidades que carecem de informações sobre a manutenção do ciclo de transmissão de rickettsias: Caetés, Igrejinha, Paula Lima, Torreões e Valadares. No total foram coletados e identificados 12.692 ectoparasitos, entre pulgas do gênero Ctenocephalides e carrapatos dos gêneros Amblyomma, Rhipicephalus e Dermacentor, com posterior processamento de 2.379 espécimes de maneira individual ou reunidos em lotes de acordo com localidade, sexo, estádio de desenvolvimento, constituindo 249 amostras. O DNA genômico destas amostras foi extraído e submetido à pesquisa de genes rickettsiais gltA (gênero Rickettsia) e ompA (Grupo da Febre Maculosa-GFM). Foram obtidas 29 amostras positivas, exceto para Caetés; sendo 16 para o gene gltA, com 11 amostras sequenciáveis, e 13 amostras para o gene ompA, com sete sequenciáveis; com destaque para Amblyomma cajennense sendo a espécie mais prevalente e com 4,29% de taxa de infecção mínima. Sequências com 99 e 100% de identidade com a espécie patogênica Rickettsia felis foram diagnosticadas em Ctenocephalides canis e Ctenocephalides felis. E de forma inédita o registro de Rickettsia bellii em Amblyomma dubitatum na Microrregião de Juiz de Fora, apresentando sequências com 97% de homologia. O presente trabalho revela uma maior distribuição geográfica de rickettsias do GFM, incluindo R. felis causadora da rickettsiose felis, na Microrregião de Juiz de Fora. / The city of Juiz de Fora, in the Brazilian state of Minas Gerais, stands out in the epidemiologic context for possessing vulnerability indicators, such as a high number of this state´s notifications, with cases occurring in the urban perimeter, which contains an elevated population density, and the occupation of limit areas with forests´ fragments, which have a frontier with confirmed endemic areas, making possible the interchange of arthropod vectors with mammal hosts. Such areas propitiate the development and the maintenance of the enzootic and the epidemic cycles for the Spotted Fever. By the above, the general objective of this project was to investigate and to map the natural relation between Rickettsia sp. Species and its potential vectors in five regions of vulnerability in the city. Specifically, here are the objectives: the determination of the fauna composition for ectoparasites potentially vectors, collected on vertebrate hosts, as well as loose in the environment; analysis of the enzootic cycle through the detection of rickettsias by Polymerase Chain Reaction (PCR); the rickettsias agents characterization through sequencing and phylogenetic analyses and the evaluation of the epidemiologic aspects of the circulating rickettsias, of the vectors and their vertebrate hosts. The ectoparasites were collected in the period of 2013-2014 in places that need information on the maintenance of rickettsias transmission cycle: Caetés, Igrejinha, Paula Lima, Torreões e Valadares. As a total, there were collected and identified 12,692 ectoparasites, among fleas from the gender Ctenocephalides and ticks from the genders Amblyomma, Rhipicephalus and Dermacentor, with a posterior processing of 2,379 specimens in an individual way or gathered in lots according to place, sex, development state, constituting 249 samples. The genomic DNA from these samples was extracted and submitted to research of rickettsiais gltA (gênero Rickettsia) e ompA (Grupo da Febre Maculosa-GFM) genes. There were obtained 29 positive samples, except for Caetés; from which 16 for the gltA gene, with 11 sequenced samples, and 13 samples for the ompA gene, with seven sequenced; especially Amblyomma cajennense as the most prevalent species and with 4.29% of minimal infection rate. Sequences with 99 and 100% of identity with the pathogenic species Rickettsia felis were diagnosed in Ctenocephalides canis and Ctenocephalides felis. And in a surprising way the register of Rickettsia bellii in Amblyomma dubitatum in Juiz de Fora´s Micro-region, presenting sequences with 97% of homology. This paper reveals a bigger geographic distribution of rickettsias from GFM, including R. felis that causes rickettsiosis felis, in Juiz de Fora´s Micro-region. Keywords: