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Natural and adaptive immune responses in humans against Toxoplasma gondii and Herpes simplex virus type 1Meek, Bob. January 1900 (has links)
Proefschrift Universiteit van Amsterdam. / Met lit. opg. - Met samenvatting in het Nederlands.
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Studies of hypersensitivity, specific, and nonspecific resistance to infection in guinea pigs and mice infected with Toxoplasma gondiiKrahenbuhl, James Lee, January 1970 (has links)
Thesis (Ph. D.)--University of Wisconsin--Madison, 1970. / Typescript. Vita. eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.
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"Real-Time-PCR-Untersuchungen zur Persistenz von infektiösen Toxoplasma-gondii-Dauerstadien in Rohwurst-Erzeugnissen"Rosa, Stefanie Ulrike January 2009 (has links)
Zugl.: Giessen, Univ., Diss., 2009
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Avaliação sorológica de anticorpos da classe IgG para Toxoplasma gondii em soros de ovinos da região da grande Porto Alegre/RS, através das técnicas de hemaglutinação indireta (HAI) r imunofluorescência indireta (IFI).Escopelli, Karla Scola January 2004 (has links)
A toxoplasmose é uma infecção comum nos animais causada pelo Toxoplasma gondii configurando-se como uma importante zoonose. O homem infecta-se, principalmente, através da ingestão de carne contaminada com cistos do protozoário. São encontradas altas taxas de prevalência de toxoplasmose nos rebanhos de ovinos do mundo todo, sendo a ingestão de alimentos e água contaminados com oocistos as mais importantes fontes de infecção da espécie. No ovino, a toxoplasmose pode ser assintomática ou causar distúrbios reprodutivos, notadamente abortos, levando a perdas econômicas consideráveis. Com o objetivo de contribuir com dados sobre a freqüência de anticorpos para o T. gondii em ovinos na região da Grande Porto Alegre-RS, foram estimadas as freqüências de anticorpos para T. gondii da classe IgG em soros de ovinos provenientes de propriedades da região citada, utilizando a técnica de Hemaglutinação Indireta (HAI) e Imunofluorescência Indireta (IFI). A freqüência estimada de anticorpos para T. gondii em uma amostragem de 250 ovinos foi de 13,6% pela técnica de HAI e 15,2% pela técnica de IFI. A amostragem foi estratificada em dois grupos experimentais de acordo com o sexo e a idade dos animais. No grupo I, composto de 127 machos, obteve-se 4,8% de positivos para HAI e 7,6% de positivos para IFI. Enquanto nas 123 fêmeas, detectou-se um percentual de 8,8% de positivas pela técnica de HAI e 7,6% reagiram para IFI. Em relação a faixa etária se encontrou: 11 positivos (4,4%) nos animais com menos de um ano e 23 (9,2%) para aqueles com mais de um ano na reação de HAI, num total de 34 (13,6%) animais; enquanto que para técnica de IFI obteve-se o resultado de 19 (7,6%) ovinos jovens e 19 (7,6%) ovinos adultos em 38 (15,2%) animais analisados. A percentagem de co-positividade entre as técnicas utilizados foi de 55,26% e a co-negatividade foi de 93,865, e a concordância total ficou em 88%, enquanto o índice de Kappa calculado foi de 0,513. / Toxoplasmosis is a serious zoonosis. It is a common infection in animals caused by a parasite called Toxoplasma gondii. Human infection occurs mainly for ingestion of meat contaminated with T. gondii cysts. A high prevalence rate of toxoplasmosis is found in sheep cattle all over the world, being the consumption of food and water contaminated with oocystes the major source of infection of the species. In ovine, toxoplasmosis can be assymptomatique or cause reproduction disorders, especially abortions, which leads to significant economic losses.With the objective of providing data about the frequency of T. gondii antibodies in sheep from the Greater Porto Alegre area, we estimated the frequency of IgG class antibodies to T. gondii in sheep sera. The techniques employed were the Indirect Hemagglutination Technique (HAI) and the Indirect Imunofluorescence Test (IFI). The estimated frequency of antibodies to T. gondii in a sample of 250 sheep sera was 13,6% (HAI), and 15,2% (IFI). The sample was stratified into two experimental groups, according to gender and age. In group one, composed by 127 males, 4,8% were HAI positive, and 7,6% were IFI positive, whereas in the group composed by 123 females, 8,8% were HAI positive, and IFI 7,6%. Concerning age group, there were 11 HAI positives (4,4%) among the animals with less than one year of age, and 23 HAI positive (9,2%) among the animals over one year, totalizing 34 animals. For the IFI technique, the results obtained showed 19 (7,6%) young sheep and 19 (7,6%) adults in 38 animals analyzed. The co-positivity between the techniques was 55,26% and the co-negativity was 93,865. Total agreement was 88% while the Kappa index calculated was 0,513.
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Estudos de cinética da resposta imunológica na toxoplasmose aguda em ovinos e aspectos epidemiológicosSantos, Patrícia Oliveira Meira 12 July 2013 (has links)
Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-07-12T18:11:30Z
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Tese_ICS_ Patricia Oliveira Santos.pdf: 1373839 bytes, checksum: 29a4da7d68cc1c212a78497b9ae8ec0d (MD5) / O protozoário Toxoplasma gondii tem os felídeos como seus hospedeiros definitivos e diversos outros animais como hospedeiros intermediários. Em ovinos e humanos, a toxoplasmose é responsável por abortamentos e doença neonatal quando a primoinfecção ocorre durante a gestação. Apesar da resposta imunológica desenvolvida pelos hospedeiros, o protozoário persiste no organismo parasitado, e a ingestão de carne ovina (crua ou mal cozida) contaminada constitui importante fonte de infecção humana. Recentemente, proteínas ligadas a glicosilfosfatidilinositol (GlyC) têm sido apontadas como importantes na ativação da resposta imune inata e constituem grande parte das proteínas de superfície de taquizoítos de T. gondii, além de serem reconhecidas por soros humanos na fase aguda da toxoplasmose. O presente estudo objetivou estudar a cinética da resposta imunológica humoral e celular na fase aguda da infecção pelo T. gondii em ovinos, e após imunização com GlyC, e desenvolver teste sorológico baseado em GlyC. O ELISA para detecção de IgG anti-lisado antigênico (LA) e anti-GlyC apresentou 100% e 30% de sensibilidade, e 96% e 94% de especificidade, respectivamente. Os ovinos infectados produziram IgM anti-LA e GlyC, e IgG anti-GlyC (p < 0.05); e os imunizados, IgM anti-LA e IgG anti-LA e GlyC (p < 0.05). A imunização com GlyC induziu aumento de células CD8+ e redução de células expressando MHC de classe II na circulação 60 dias após a injeção. O ELISA baseado em GlyC apresenta alta especificidade. GlyC é imunogênico para a espécie ovina e deve ser melhor avaliado como ferramenta diagnóstica e profilática na referida espécie. / Salvador
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Estudo da modulação do metabolismo lipídico de células dendríticas humanas na infecção por Toxoplasma gondii / Estudo da modulação do metabolismo lipídico de células dendríticas humanas na infecção por Toxoplasma gondiiCosta, Beatriz Guerreiro Basilio January 2012 (has links)
Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-03T11:40:07Z
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Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A toxoplasmose é uma doença de alta prevalência no mundo, causada pelo Toxoplasma gondii, um parasita intracelular obrigatório. O T. gondii possui mecanismos de modulação do metabolismo do seu hospedeiro que garantem sua sobrevivência e a instalação da infecção crônica. Um dos tipos celulares mais permissivos à infecção e multiplicação do T. gondii são as células dendríticas (DC), paradoxalmente as células apresentadoras de antígeno mais eficazes, com capacidade de deflagrar uma resposta imune protetora eficaz e duradoura. Neste trabalho, estudamos a modulação do metabolismo lipídico de células dendríticas humanas na infecção por T. gondii. Mostramos que o parasita induziu a maturação da célula e um padrão misto de resposta inflamatória, com altas concentrações das citocinas pró-inflamatórias IL-6 e TNF- e da citocina antiinflamatória IL-10. Após 3 horas de infecção, verificamos que T. gondii induziu a expressão gênica de ciclooxigenase-2 (COX-2). De forma importante, observamos por qRT-PCR que a infecção com T. gondii regulou positivamente a expressão do gene do receptor nuclear (RN) regulado por lipídios PPAR, mas não do LXR. Já a expressão do mRNA das moléculas envolvidas no transporte e estoque de lipídios, FABP4 e ADRP, alvos do PPAR, e ABCA1, alvo do LXR, foram aumentadas pela infecção de 3 horas com o parasita. Utilizando duas técnicas distintas (BODIPY e coloração com ósmio) avaliamos a biogênese de corpúsculos lipídicos (CL) após infecção com o T. gondii e constatamos que essas organelas não foram induzidas após 3 horas de infecção. Entretanto, após 24 horas, 90% das DC apresentaram CL e o número de CL por DC foi estatisticamente maior. Observamos a presença de CL em DC não infectadas pelo parasita, mostrando que a indução da biogênese de CL é um fenômeno parácrino, não dependente da infecção celular. Avaliamos também a importância do PPAR na infecção por T. gondii, através do tratamento das DC com seu agonista ou antagonista. Após 3 horas, apenas os genes ADRP, FABP4 e ABCA1, alvos dos receptores nucleares, foram modulados. Por último, investigamos a influência do T. gondii na expressão das moléculas apresentadoras de antígenos lipídicos. Por citometria de fluxo, constatamos que não há alteração na expressão de membrana dessas moléculas. Contudo, por qRT-PCR, observamos que o T. gondii regula negativamente a expressão dos genes cd1d e cd1e. Em conclusão, mostramos que T. gondii foi capaz de regular positivamente o metabolismo lipídico das DC e negativamente as moléculas apresentadoras de lipídios CD1, sem a participação essencial de PPAR nesses processos. / Toxoplasmosis is a worldwide high prevalence disease caused by Toxoplasma gondii, an obligate intracellular parasite. T. gondii developed mechanisms for modulating the metabolism of its host, ensuring their survival and the chronic infection. Dendritic cells (DC) are one of the most permissive cell types to T. gondii infection and replication and are, paradoxically, considered the most effective antigen presenting cells, triggering an effective and long-lasting protective immune response. In this work, we studied the modulation of lipid metabolism in human dendritic cells infected with T. gondii. We showed that the parasite induced cell maturation, and a mixed pattern of inflammatory response with high levels of proinflammatory cytokines IL-6 and TNF-, and anti-inflammatory cytokine IL-10. After 3h of infection, we found that T. gondii induced increased gene expression of cyclooxygenase-2 (COX-2). Importantly, we observed by qRT-PCR that T. gondii infection upregulated the nuclear receptor (RN) PPAR gene expression, while the levels of LXR were unchanged. Furthermore, the mRNA expression of molecules involved in the transport and storage of lipids, FABP4 and ADRP, PPARtargets, and ABCA1, LXR target, were also increased at 3h of infection with the parasite. In parallel, using two different techniques, (BODIPY and osmium staining), we evaluated the biogenesis of lipid droplets (LD) after infection with T. gondii, and observed that these organelles were not induced after 3 hours of infection. However, after 24 hours, 90% of DC showed LD and the number of LD per DC was statistically enhanced. We observed the presence of LD in DC not infected with the parasite, showing that induction of biogenesis of LD is a paracrine phenomenon not dependent on cell infection. We also evaluated the role of PPAR in T. gondii infection by treating DC with its agonist or antagonist. After 3 hours of infection only the nuclear receptor target genes ADRP, FABP4 and ABCA1 were modulated. Finally, we investigated the influence of T. gondii in the expression of lipid antigens presenting molecules. By flow cytometry, we observed no variation in expression of these molecules in cell membrane. However, by qRT-PCR, we found that the T. gondii downregulated gene expression of cd1d and cd1e. In conclusion, we showed that T. gondii was able to upregulate the DC lipid metabolism, and downregulate CD1 lipid presentation. Apparently, the RN PPAR has no essential role in this process.
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Participação da autofagia na interação Toxoplasma gondii-célula hospedeiraSouto, Xênia Macedo January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii é um protozoário parasito intracelular obrigatório, agente causador da toxoplasmose, uma das zoonoses mais difundidas no mundo, podendo ser transmitido por via transplacentária, fecal-oral ou por carnivorismo. Durante a resposta imune do hospedeiro, ocorre a formação de cistos teciduais, possibilitando assim a manutenção do parasito no interior da célula hospedeira, sem ocorrência da fusão fagolisossomal. A autofagia, processo de degradação de componentes celulares, é crucial para a homeostase celular. Recentemente, vem sendo proposta a participação da via autofágica na interação de diferentes patógenos, como o T. gondii, com suas células hospedeiras. Assim, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o papel da via autofágica na interação de T. gondii com macrófagos e células musculares esqueléticas (CME e C2C12), células envolvidas na infecção natural in vivo. A autofagia nas células hospedeiras foi avaliada na presença ou na ausência de indutores autofágicos (rapamicina ou estresse nutricional), durante a infecção pelo T. gondii. Ambos os estímulos foram capazes de inibir a infecção e a proliferação intracelular do parasito nos diferentes tipos celulares
Foi observado ainda que a infecção na presença ou na ausência de estímulo induziu a autofagia em macrófagos e CME, indicando que este processo possa regular naturalmente a manutenção intracelular do parasito, auxiliando-o, por exemplo, na captação de nutrientes da célula hospedeira. Adicionalmente, os aspectos morfológicos das culturas de macrófagos e CME infectadas tratadas com rapamicina ou submetidas a estresse nutricional sugerem a eliminação do T. gondii por mecanismos que envolvem tanto a autofagia da célula hospedeira quanto a do parasito. Dessa forma, os resultados do presente trabalho sugerem a indução da autofagia da célula hospedeira como um mecanismo regulador importante durante a infecção, representando, no entanto, a sua exacerbação, uma via de eliminação desse parasito. Além disso, os nossos resultados encorajam a utilização da rapamicina como modelo para o estudo da autofagia in vivo durante a infecção aguda pelo T. gondii / Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan parasite, the causative agent of toxoplasmosis, one of the most widespread zoonoses in the world and can be transmitted by transplacental, fecal-oral or carnivorism routes. During the host immune response, there is the formation of tissue cysts, thus enabling the maintenance of parasite within the host cell without occurrence of phagolysosomal fusion. Autophagy, the degradation process of cellular components, is critical for cellular homeostasis. Recently, the autophagy has been proposed to participate during the interaction between different pathogens, such as T. gondii, with their host cell. Thus, the present study aimed to evaluate the role of the autophagic pathway in the interaction of T. gondii with macrophages and skeletal muscle cells (C2C12 and CME), cells involved in natural infection in vivo. Host cells autophagy was assessed in the presence or absence of autophagic inductors (rapamycin or nutritional stress) during the infection with T. gondii. Both stimuli were able to inhibit infection and proliferation of the intracellular parasite in different cell types. It was also observed that the infection in the presence or absence of stimulation induced autophagy in macrophages and CME, indicating that this process may naturally regulate the maintenance of intracellular parasites, assisting him, for example, in the nutrients uptake from the host cell. Additionally, the morphological aspects of cultures of infected macrophages and CME treated with rapamycin or subjected to nutritional stress suggest the elimination of T. gondii by mechanisms involving both, host cell and parasite autophagy. Thus, the present results suggest the induction of host cell autophagy as an important regulatory mechanism during the infection, however its exacerbation can represent one route of parasite elimination. Furthermore, our results encourage the use of rapamycin as a model for in vivo autophagic studies during acute infection of T. gondii.
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Efeitos in vitro e de 3-bromopiruvato e atovaquona na infecção por Toxoplasma gondii em células LLC-MK2Lima, Loyze Paola Oliveira de January 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii causa uma infecção comumente assintomática, porém pode se apresentar de forma grave durante a gravidez e em pacientes imunocomprometidos. A terapia atual para a toxoplasmose é restrita contra taquizoítos, e possuem pouco ou nenhum efeito sobre bradizoítos, que são mantidos em cistos teciduais como fonte recrudescente da infecção. Com isso, novas alternativas terapêuticas vêm sendo propostas, como o uso da Atovaquona, que apresentou alguma eficácia sobre taquizoítos e bradizoítos em cistos teciduais. Neste trabalho, foi estudado o efeito de 3-BrPA, um composto utilizado em testes sobre células cancerígenas, durante a interação de células LLC-MK2 infectadas com taquizoítos da cepa RH de T. gondii. Quanto à célula hospedeira não se observou efeito do composto sobre a proliferação e viabilidade celular. A avaliação da interferência de 3-BrPA sobre o crescimento in vitro do T. gondii evidenciou uma redução na proliferação intracelular do parasito de cerca de 55% após 24 h de tratamento e 61% após 48 h
O desenvolvimento intracelular do parasito, analisado por MEV, apresentou características morfológicas comumente encontradas em cistos teciduais. A incubação das culturas com lectina DBA confirmou o desenvolvimento de cistos e por MET se evidenciou a presença de bradizoítos. Além disso, foram revelados parasitos degradados e a influência do composto sobre a endodiogenia. Outra abordagem adotada foi o tratamento de culturas infectadas com a combinação de 3-BrPA e Atovaquona, que resultou em uma redução de parasitos intracelulares de 73% após 24 h de tratamento e 71% após 48 h, em comparação ao controle, além da ausência da formação de parede cística nessas culturas. Conclui-se, portanto, que a utilização de 3-BrPA pode se apresentar como uma importante ferramenta para o estudo:(i) da cistogênese in vitro;(ii)do metabolismo do parasito, necessitando de maior aprofundamento do alvo de ação do composto em T. gondii;(iii) das vias metabólicas alternativas do parasito, e (iv) dos mecanismos moleculares/celulares desencadeados que levaram a morte dos parasitos / Toxoplasma gondii
usually causes an asymptomatic infection, but it can present severity
during pregnancy and in immunocompromised
patients
.
Current therapies for
toxoplasmosis are restricted
only against tachyzoites, and have
little or no effect on
bradyzoites, which are kept in tissue cysts like source of the infection recrudescent.
Consequently, new therapeutic alternatives have been proposed, as the use of
Atovaquone that showed some effica
cy against tachyzoites and bradyzoites in tissue
cysts. In this work, we propose to study the effect of 3
-
BrPA,
a
compound
that is being
tested
against
cancer cells, on
the infection of
LLC
-
MK
2
cells with tachyzoites of
T.
gondii
(RH strain)
.
N
o effect of
3
-
BrPA
on
host
cell proliferation and viability was
observed. Evaluation of 3
-
BrPA interference on
in vitro
growth of
T. gondii
showed a
reduction in intracellular parasite proliferation about 55% after 24 h of treatment, and
61% after 48 h. Intracellular d
evelopment of parasite, analyzed by SEM, showed
morphological characteristics commonly found in tissue cysts. Incubation of cultures
with DBA lectin confirmed the development of cysts and TEM showed the presence of
bradyzoites. Moreover, we revealed the pr
esence of degraded parasites and the
influence of compound on endodyogeny. Another approach used was the treatment of
infected cultures with combination of 3
-
BrPA and Atovaquone.
This r
esulted in
the
reduction of intracellular parasites of 73% after 24 h o
f treatment and 71% after 48 h,
compared to control, besides the absence of cyst wall formation in these cultures.
The
refore, it is concluded that
use of 3
-
BrPA may pres
ent as an important tool for
study
of: (i)
in vitro
c
ystogenesis
, (ii) the metabolism o
f the parasite, requiring deeper
understanding of the target of action of the compound in
T. gondii
, (iii) the alternatives
metabolic pathways of the parasite, and (iv) the molecular / cellular triggered that led to
death of the parasites mechanisms.
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Toxoplasma gondii - células epiteliais de felinos: novos aspectos do ciclo enteroepitelial in vitroMuno, Renata Morley de January 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Toxoplasma gondii, agente etiológico da toxoplasmose, é um parasito intracelular obrigatório que infecta qualquer célula nucleada. Os felídeos são os únicos hospedeiros definitivos no ciclo de vida deste parasito, e suas células epiteliais intestinais são o nicho exclusivo para o desenvolvimento do ciclo sexuado do protozoário. A liberação de oocistos nas fezes de felinos contaminam o meio ambiente e este é o principal fator que explica a distribuição mundial da toxoplasmose. A infecção dos hospedeiros intermediários por oocistos, como aves e mamíferos de sangue quente, incluindo o homem, leva à formação de cistos teciduais, ampliando a transmissão do parasito, por meio do consumo de carne crua ou mal cozida. Os mecanismos que regem a diferenciação do T. gondii em células epiteliais e o conhecimento limitado do ciclo sexuado do parasito são as principais justificativas para o desenvolvimento desta tese. O emprego de células de felinos para o estudo da interação do T. gondii é pioneiro, criando novos campos de investigação sobre os aspectos da interação do parasito no hospedeiro definitivo. Assim, linhagens celulares oriundas do epitélio renal de felinos (CRFK) e de macaco verde (Vero), epitélio intestinal de ratos (IEC-6) e cultura primária de enterócitos de felinos (CEIF) foram utilizadas como modelo experimental da infecção pelo T. gondii. O desenvolvimento intracelular do parasito variou com a origem da célula epitelial e também com a relação parasito:célula hospedeira utilizada nos ensaios in vitro. As células de felino, CRFK, foram mais susceptível à infecção por bradizoítos do que as linhagens epiteliais de outras origens
A formação de cistos in vitro foi observada nas células CRFK e Vero ao se utilizar a relação de 1:10 (bradizoíto:célula hospedeira). Culturas de CEIF tiveram sua natureza epitelial revelada pela presença de citoqueratina, expressão de fosfatase alcalina intestinal, presença de microvilosidades e junções intercelulares. A infecção de CEIF com bradizoítos de T. gondii cepa ME49 demonstrou que a carga parasitária foi decisiva para o destino intracelular do parasito: a relação de 1:5 favoreceu a proliferação de taquizoítos e o ciclo lítico; 1:10 foi determinante para o estabelecimento da cistogênese; e estruturas semelhantes a esquizontes foram identificadas quando a carga de 1:20 foi utilizada. A análise morfológica da infecção por períodos de 1 a 9 dias apontou diferentes estágios do parasito em células intestinais de felinos, semelhantes aos observados em estudos in vivo. Explorar esta nova linha de pesquisa, num campo ainda limitado aos ensaios de infecção experimental de gatos e preencher as lacunas no conhecimento da biologia do T. gondii em enterócitos de felinos é inovador e desafiador. Novas perspectivas se abrem, nos estudos dos aspectos moleculares que possam governar esta interação, contribuindo para o desenvolvimento de novas estratégias de intervenção de uma das principais rotas de disseminação da toxoplasmose / Toxoplasma gondii, the etiologic agent of toxoplasmosis, is an obligate intracellular parasite
that infects any nucleated cell. The felines are the only definitive hosts in the life cycle of this
parasite, being the intestinal epithelial cells, the unique niche for the development of
protozoan sexual cycle. The release of oocysts in the feces of cats contaminates the
environment and is the main factor explaining the worldwide distribution of toxoplasmosis.
The infection by oocysts of intermediate hosts, such as warm-blooded birds and mammals,
including man, leads to the formation of tissue cysts, promoting the increase in the parasite
transmission through the consumption of raw or undercooked meat. The mechanisms
involved in T. gondii differentiation in epithelial cells and the knowledge of the parasite sexual
cycle are still unclear, justifying the development of this thesis. The use of feline cells for
study the T. gondii interaction is pioneer, evaluating novel fields of research on aspects of
the parasite relationship in definitive host. Therefore, cell lines derived from feline epithelial
kidney (CRFK) and Green Monkey epithelial kidney (Vero), rat intestinal epithelial (IEC-6)
and primary cultures of feline intestinal epithelial cells (FIEC) were used as an experimental
model for T. gondii infection. The intracellular parasite development was dependent on the
epithelial cell source and on parasite: host cell used in in vitro assays. The feline cells,
CRFK, were more susceptible to bradyzoites infection than epithelium from other sources. In
vitro cyst formation was observed in CRFK and Vero cells by using the ratio 1:10 (bradyzoite:
host cell). CEIF cultures had their epithelial nature revealed by presence of cytokeratin,
intestinal alkaline phosphatase expression, presence of intercellular junctions and microvilli.
The interaction FIEC-T. gondii bradyzoites ME49 strain demonstrated that the parasite load
is crucial to definy the Apicomplexan intracellular destiny: a ratio of 1:5 favored the
tachyzoites proliferation and the lytic cycle; 1:10 was crucial to the establishment of
cystogenesis; and schizont-like structures were identified when the load 1:20 was used.
Morphological analysis of the infection for periods of 1-9a days pointed to the different
parasite stages in the cats gut, as previous observed in in vivo studies. To explore this novel
research line, a still limited field for experimental infection to cats and to fill gaps in the
knowledge of T. gondii biology in cat’s enterocytes is exciting and poorly described. New
perspectives are open to study molecular aspects involved in this interaction, contributing to
the development of alternative intervention strategies of this crucial route of toxoplasmosis
spread. / 2017-07-26
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Detección de anticuerpos y factores de riesgo asociados con Toxoplasma gondii en animales silvestres en cautiverio del orden carnivora, primates, perissodactyla, cetartiodactyla y rodentiaPinedo Vicente, Rosa Ysabel January 2018 (has links)
Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina la presencia de anticuerpos contra Toxoplasma gondii en algunos animales silvestres en cautiverio de los ordenes Carnivora, Primates, Perissodactyla, Cetartiodactyla y Rodentia, así como identificar los factores de riesgo que intervienen en su presentación; estableciendo el rol que cumplen felinos domésticos (Felis silvestris f. catus) y roedores del género Rattus sp. libres en el centro en cautiverio en la transmisión del parásito. El trabajo se desarrolló en el zoológico del Patronato del Parque de las Leyendas, distrito de San Miguel, Lima Metropolitana. Se muestrearon 332 animales silvestres pertenecientes al orden Carnivora (75), Primates (71), Perissodactyla (32), Cetartiodactyla (134) y Rodentia (20); así como de 41 felinos domésticos libres que deambulan en el centro y 124 roedores del genero Rattus capturados mediante el uso de trampas de captura viva tipo Tomahawk. Muestras sanguíneas fueron colectadas de animales silvestres a través de la punción de la vena braquial, yugular, o femoral, usando vacutainers; en el caso de los felinos domésticos libres se obtuvo por medio de la punción de la vena cefálica y en roedores del género Rattus se obtuvo sangre mediante punción intracardiaca previa anestesia inhalatoria con cloroformo y posteriormente fueron sacrificados mediante sobredosis de entobarbital. La sangre obtenida fue colectada en crioviales y transportada al Laboratorio Parasitología de la Facultad de Medicina Veterinaria de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos (FMV-UNMSM) para su almacenamiento y posterior análisis serológico. Paralelamente, se colectaron muestras de cerebro, corazón, hígado y diafragma de los roedores (Rattus), las mismas que fueron fijadas en formalina tamponada al 10% y procesadas para la obtención de cortes histológicos teñidos con Hematoxilina-Eosina (HE) y sometidos a análisis inmunohistoquímico a fin de identificar estructuras con inmunopositividad a T. gondii. Para el diagnóstico serológico se utilizó la técnica de Hemaglutinación Indirecta, preparando diluciones de 1:64 a 1:2048, considerando en felinos, roedores y animales silvestres, como positivo títulos mayores o iguales 1/64. Se determinó anticuerpos (IgG, IgM) mediante el uso del 2-Mercaptoetanol para determinar una infección aguda o crónica. Para la evaluación de los factores de riesgo fueron consideradas las variables Orden (Carnivora, Primates, Perissodactyla y Rodentia), sexo (hembra y macho), tiempo en la institución (<5 años, 6 a 10 años, > 10 años) y exhibición de recinto (abierto y cerrado). Asimismo se obtuvo información concerniente en Rattus sp. (parámetros morfométricos, edad estimada y sexo) y Felis silvestris f. catus (edad, sexo). Con la información obtenida se creó una base de datos donde fueron adicionados los resultados serológicos con el objeto de interrelacionarlos y validarlos estadística y epidemiológicamente. El análisis de los factores de riesgo fue evaluado mediante análisis de regresión logística múltiple ajustado a Stepwise. Se consideró como asociación significativa el nivel de p<0.05. Se detectó una alta frecuencia (77.1 ± 4.4%) de anticuerpos contra T. gondii en animales silvestres en cautiverio, con reactividad serológica principal de IgG 73.4% (casos crónicos) y fuerte respuesta serológica (1/2048) en el 53.9% de los animales. Los factores de riesgo asociados a la transmisión de T. gondii en animales silvestres en cautiverio fueron las variables Orden Carnivora, Primates, Cetartiodactyla y Rodentia (OR: 2.6; 3.6; 4.9; 8.7); animales con >10 años de tiempo en la institución (OR: 4.18) y exhibición de recinto abierto (3.99) (p<0.05). Roedores (Rattus sp.) y gatos libres que deambulan en el centro en cautiverio exhibieron una baja (11.3 ± 6) y moderada (58.5 ± 15.2) frecuencia de anticuerpos anti-T. gondii respectivamente. Fueron detectados quistes tisulares en musculatura cardiaca y esquelética (diafragma) en roedores (Rattus sp.) 4% (5/124); sin embargo, no se pudo demostrar la presencia de T. gondii, mediante inmunohistoquímica. / Tesis
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