Introdução: Imunidade inata é a primeira linha de defesa do hospedeiro contra microorganismos invasores, a qual é mediada por moléculas específicas que reconhecem patógenos, chamadas receptores toll-símile (TLRs). Os TLRs são também capazes de reconhecer ligantes endógenos, tais como conteúdos de células necróticas e proteínas de choque térmico (HSP), resultando na produção de citocinas e ativação do sistema imune adquirido. A função exata dos TLRs ainda é pouco entendida em transplante de órgãos. No entanto, tem sido sugerido que eles podem estar envolvidos na rejeição aguda ou crônica e atuar na resposta do enxerto a lesão por isquemia e reperfusão. Objetivo: Examinar as alterações na expressão gênica dos TLRs durante a fase inicial do transplante pulmonar em humanos e sua relação com citocinas potencialmente envolvidas na lesão por isquemia e reperfusão em transplante de órgãos. Métodos: Foram analisadas biópsias pulmonares de 14 pacientes submetidos a transplante pulmonar (LTx). Estas amostras foram coletadas no final do período de isquemia fria (TIF, n=14), no final do período de isquemia quente (TIQ, n=13),1 hora (n=12) e 2 horas (n=8) após a reperfusão do enxerto. RNA total foi isolado a partir de tecido pulmonar e os níveis de RNA mensageiro (mRNA) dos TLRs (1-10) bem como citocinas (IL-8, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-1β) e proteína de choque térmico 70 (HSP70) foram medidos por reação em cadeia pela polimerase em tempo real. Resultados: Foi detectada a expressão de mRNA de todos TLRs em tecido pulmonar. Nas amostras no TIF, os níveis de mRNA dos TLRs apresentaram-se com diferentes expressões gênicas. Os níveis de expressão dos TLRs, com exceção para o TLR3, estavam altamente correlacionados entre si no TIF e com os níveis de mRNA de IFN-γ, IL-10 e IL-1β e menos significativamente com os níveis de IL-6 e IL-8. Houve diminuição dos níveis de mRNA na grande maioria dos TLRs após reperfusão, o que foi diferente para a maioria das citocinas e HSP70, que apresentaram tendência a aumentar após transplante. A expressão gênica de TLR4 apresentou-se correlacionada com os níveis de IL-8 e IL-1β antes e após transplante (P<0.05). Pulmões de doadores que foram intubados por períodos acima de 72 horas (n=5) apresentaram níveis mais elevados de TLR2 e TLR10 (P<0.05). Conclusão: Pela primeira vez, foi demonstrado que a expressão dos TLRs altera-se durante o período de isquemia e reperfusão em transplante pulmonar em humanos. O tempo de intubação dos doadores pulmonares pode influenciar a expressão de receptores Toll-símile específicos. A correlação entre TLR4 e IL-8/IL-1β sugere que os TLRs pulmonares podem ter alguma função na resposta precoce do enxerto. / Introduction: Innate immunity is the first line of host defense against invading microorganisms, which is mediated by specific pathogen recognition molecules called Toll-like receptors (TLRs). TLRs can also recognize endogenous ligands, such as contents of necrotic cells and heat shock proteins (HSP), resulting in cytokine production and activation of adaptive immune system. The exact role of the Toll-like receptors and their signalling pathways is still poorly understood in organ transplantation. However, it is suggested that they may be involved in either chronic or acute organ rejection and may play a role in graft response to ischemia reperfusion injury. Objective: To examine the changes in gen expression of TLRs during the early phase of human lung transplantation and their relationship with cytokines potentially involved in ischemia reperfusion injury in organ transplantation. Methods: We analyzed lung biopsies from 14 patients submitted to lung transplantation (LTx). Biopsies were collected at the end of the cold ischemic time (CIT, n=14), end of warm ischemic time (WIT, n=13), and after 1h (n=12) and 2h (n=8) of reperfusion. Total RNA was isolated from lung tissues, and messenger RNA (mRNA) levels of TLRs (TLR 1-10) as well as cytokines (IL-8, IL-6, IL-10, IFN-γ and IL-1β) and heat shock protein 70 (HSP70) were measured by quantitative real-time polymerase chain reaction. Results: We observed mRNA expression of all TLRs in lung tissue. In the CIT samples, TLR mRNAs levels were differentially expressed in donor samples. In the CIT samples, the expression levels of TLRs, except for TLR3, were highly correlated with each other and with mRNA levels of IFN-γ, IL-10 and IL-1β, and less significantly correlated with IL-6 and IL-8. After reperfusion, expression of almost all TLR mRNAs decreased to lower levels what was different for most of the cytokines and HSP70, which trended to increase after LTx. TLR4 gen expression was closely correlated with IL-8 and IL-1β levels prior to and after LTX (P<0.01). Lungs from donors who were intubated longer than 72 h (n=5) expressed higher levels of TLR2 and TLR10 (P<0.05). Conclusion: For the first time, we showed that the expression of TLRs is altered during ischemia-reperfusion period of human lung transplantation. The donor length of intubation may influence the expression of specific TLRs. Correlation between TLR4 and IL-8/IL-1β suggests that pulmonary TLRs may play a role in early graft response.

Orientador: Marcelo Lopes de Lima / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T03:07:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Cotrim_CristianoAugustoCalderaro_M.pdf: 1654250 bytes, checksum: 1d22b5f31344acd1edcaf4646caac447 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Tratamento laparoscópico da linfocele pós-transplante renal. Introdução: O tratamento cirúrgico da linfocele sintomática pós-transplante renal consiste na criação de uma fenestração entre a cavidade abdominal e a linfocele para permitir a drenagem eficiente da linfa. Objetivo: Avaliar os resultados do tratamento cirúrgico laparoscópico da linfocele pós-transplante renal quanto ao índice de sucesso e recidiva. Pacientes e Métodos: Foram avaliados os dados de 25 pacientes que desenvolveram linfocele sintomática pós-transplante renal. Resultados: Entre 1996 e 2008, 991 pacientes foram transplantados na Universidade Estadual de Campinas, São Paulo, Brasil (523 doadores falecidos, 468 doadores vivos). Em 25 pacientes (2,52%) desenvolveu-se linfocele sintomática e a drenagem laparoscópica foi executada. As indicações para a drenagem cirúrgica incluíram disfunção do enxerto (84%), sintomas locais (16%) ou ambos (32%). A média de tempo de diagnóstico da linfocele após o transplante foi de 14,2±6 semanas. A média de internação foi de 1,5±0,2 dias. Dois pacientes (8%) desenvolveram complicações pós-operatórias (uma lesão ureteral e uma hérnia incisional) requerendo tratamento cirúrgico. Depois de uma média de seguimento de 36,2 meses, um paciente apresentou uma recorrência sintomática. Conclusão: A técnica laparoscópica foi efetiva para o tratamento da linfocele pós-transplante renal e pode ser considerada como método de escolha para o seu tratamento cirúrgico / Abstract: Laparoscopic treatment of lymphoceles after kidney transplantation Introduction: The surgical treatment of symptomatic lymphocele after kidney transplantation consists in the creation of a fenestration between the lymphocele and the abdominal cavity to allow efficient drainage of lymph. Objective: To evaluate the results of laparoscopic surgical treatment of lymphocele after kidney transplantation considering the rate of success and recurrence. Materials and Methods: The records of 25 patients who underwent surgical treatment for a symptomatic lymphocele following kidney transplantation were retrospectively reviewed. Results: Between 1996 and 2008, 991 patients received a kidney transplant at the Campinas State University, São Paulo, Brazil (523 cadaveric, 468 living). In 25 patients (2.52%) a symptomatic lymphocele developed and laparoscopic drainage was completed. The indications for surgical drainage were graft dysfunction (84%), local symptoms (16%) or both (32%). The mean time to surgical therapy was 14.2 weeks. Mean hospital stay was 1.5±0.2 days. The average time of appearance of lymphocele after transplantation was 14.2 ± 6 weeks. Postoperative complications occurred in only two patients (8%) (one ureteral injure and one incisional hernia) and required reoperation. After a mean follow up of 36.2 months, 1 patient had a symptomatic recurrence. Conclusions: Laparoscopic technique is effective and can be considered the method of choice to treat lymphocele following kidney transplantation / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

Orientador: Maria Leticia Cintra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T17:26:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pimentel_VanessaNascimento_M.pdf: 2864833 bytes, checksum: 3ee9e69bb5f58fae7867132642bdf6e6 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O líquen plano oral (LPO) e o acometimento oral da doença do enxerto contra o hospedeiro crônica (DECHc) apresentam características clínicas e histológicas semelhantes, apesar da etiologia distinta. A apoptose, induzida por linfócitos T citotóxicos, tem sido proposta como o tipo de morte dos ceratinocitos, em ambas as doenças. A citotoxidade celular é mediada, dentre outros mecanismos, por grânulos contendo granzima B e perforina. Poucos trabalhos foram desenvolvidos demonstrando o papel destas moléculas no líquen plano; dentre estes, alguns estudaram a interação das células que expressam estas moléculas com os demais componentes do infiltrado. Contudo, há raros estudos sobre este tema na DECHc. Considerando que as características em comum podem refletir similaridades nos mecanismos imunológicos, o objetivo do nosso estudo foi correlacionar os achados morfológicos e imuno-histoquímicos do LPO e da DECHc oral, na tentativa de compreender melhor a patogênese destas doenças. Foram analisadas 29 amostras de LPO e 27 de DECHc oral, coletadas no período de 1994 a 2007, de pacientes atendidos no Hospital das Clínicas e na Unidade de Transplante de Medula Óssea da UNICAMP. Novos cortes foram corados por H&E e pela técnica imuno-histoquímica para CD4, CD8, MAC 387, ICAM-1, granzima B e perforina. O número de células CD4-positivas foi estatisticamente maior no LPO do que na DECHc (p<0,0001), enquanto as médias totais (do epitélio + do tecido conjuntivo) de células positivas para granzima B e perforina foram maiores na DECHc que no LPO (p<0,05). Foi observado também que, quanto maior o número de células perforina+, maior era o número de células granzima B+, tanto no epitélio como no tecido conjuntivo, nos dois grupos de doenças (p<0,05). No LPO, o número de corpos apoptóticos isolados mostrou uma correlação positiva com a granzima B e negativa com a perforina do tecido conjuntivo (p<0,01). Inversamente, nas lesões orais da DECHc, o número de corpos apoptóticos agrupados apresentou uma correlação positiva com a perforina do tecido conjuntivo. Não houve diferença entre o LPO e a DECHc oral com relação ao número de corpos apoptóticos (isolados ou agrupados), nem quanto à extensão da degeneração hidrópica da camada basal, e nem mesmo com relação ao número de células imunomarcadas para CD8, ICAM-1 e MAC 387. Estes achados indicam que a apoptose, no LPO, parece correlacionar-se com a ação da granzima B, enquanto que, na DECHc oral, a perforina parece ser mais atuante. Embora o LPO e a DECHc oral apresentem similaridades clínicas e histológicas, parece haver diferenças na patogênese destas doenças. Os resultados encontrados podem ser úteis para aprimorar a compreensão dos mecanismos imunológicos, bem como podem embasar o desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas para o controle da apoptose e redução da morbidade associada a estas doenças. / Abstract: Oral lesions in lichen planus (OLP) and chronic graft-versus-host disease (cGVHD) have similar clinical and histological features, but distinct etiology. Apoptosis induced by cytotoxic T lymphocyte has been proposed as the form of keratinocytes death. The cell cytotoxicity is mediated, among other mechanisms, by granules containing granzyme B and perforin. Few studies have been published showing the role of those molecules in lichen planus, as well as their relationship with other inflammatory infiltrate components. However, rare works were reported about this theme in cGVHD. Since common features can reflect similarities in immunological mechanisms, the purpose of our study was to correlate the morphological and immunohistochemical findings of OLP and cGVHD to better understand the pathogenesis of these diseases. We analyzed 29 samples of OLP and 27 of oral cGVHD collected in the period between 1994 and 2007, from patients treated at the University Hospital and Bone Marrow Transplant Unit of UNICAMP. Additional sections were obtained and stained for H&E and immunohistochemical technique targeting CD4, CD8, MAC 387, ICAM-1, perforin and granzyme B. The number of CD4-positive cells number was significantly higher in OLP than in cGVHD (p<0,0001), while the total means (epithelium plus connective tissue number) of the granzyme B- and perforin-positive cells were significantly higher in cGVHD (p<0,05). Also, it was found that the higher the number of perforin+ cells, the higher the number of granzyme-B + cells in the epithelium and in the connective tissue for both groups (p<0.05). In OLP, the number of single apoptotic bodies had a positive correlation with connective tissue granzyme B immunostaining and a negative correlation with perforin (p<0.01). On the contrary, in oral cGVHD, the number of apoptotic body clusters presented a positive correlation with connective tissue perforin (p<0.01). Our findings indicate that apoptosis in OLP seems to be correlated with granzyme B release, while in oral cGVHD, perforin seems to be more important. There were no significant differences between OLP and cGVHD oral regarding the following features: the amount of apoptotic bodies (isolated o clusters), the extension of hydropic basal cell degeneration, and the number of positive cells for CD8, ICAM-1 and MAC-387. These results indicate that apoptosis, in OLP, seems to correlate with granzyme B release while, in oral cGVHD, perforin is preponderant. Although OLP and oral cGVHD present clinical and histological similarities, differences seem to exist in the athogenesis of these diseases. Our results might help to better understand the immunological mechanisms of these two conditions, as well as supporting the development of new therapeutic strategies for controlling apoptosis and reducing morbidity associated with them. / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador:Ilka de Fatima Santana Ferreira Boin / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T16:40:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_GlauceRejanedos_M.pdf: 926499 bytes, checksum: 98d684dac0b6d5609362eba3ed34a90a (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A ansiedade pode ser considerada um estado emocional que não se apresenta na mesma intensidade em todos os pacientes, sendo classificada em: mínimo, leve, moderada e grave. Em casos específicos de hepatopatias, esse transtorno pode ser ainda maior, devido à necessidade do transplante na maioria dos casos. O paciente ao entrar na fila de espera para o transplante é acompanhado de reflexões sobre a decisão tomada, deixando-o constantemente ansioso com a possível idéia de morte. Este trabalho teve como objetivo avaliar o nível de ansiedade observado nos pacientes candidatos a transplante hepático e verificar se houve correlação entre a ansiedade e o diagnóstico etiológico apresentado. Duzentos e quinze pacientes adultos, com indicação para transplante de fígado e inseridos em lista de espera pela Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo, foram submetidos à avaliação psicológica, através do Inventário de Ansiedade de Beck. A presença de ansiedade foi definida como: sim (presença de ansiedade), se houve variação de oito a 63 pontos, como não (ausência de ansiedade), se houve variação de zero a sete. Alem disso, adicionou-se quatro pontos ao total da soma de escores obtidos quando o sujeito era mulher. O escore total foi o resultado da soma das pontuações dos itens individuais. Os níveis de ansiedade observados foram mínimos: de zero a sete; leve: de oito a 15; moderado: de 16 a 25; grave: de 26 a 63. O grupo estudado foi caracterizado por 165 pacientes do sexo masculino e 50 feminino, com uma idade média de 49,49 anos ±10,89 de idade e o valor médio do escore MELD (Model for End-stage Liver Disease) foi de 16,78 ±4,28. Dos pacientes estudados, 50,7% tinham ensino fundamental; 30,7% ensino médio e 18,6% ensino superior. Em relação ao nível de ansiedade, 54% dos pacientes eram mínimo, 27% leve, 12% moderado e 7% grave. Dentre as etiologias encontradas neste grupo, 37% dos pacientes tinham cirrose hepática por hepatite C, 7% hepatite B, 26% de origem alcoólica, 9% câncer no fígado, 7% hepatite auto-imune, e 14% tinham outras doenças do fígado. Na correlação entre nível de ansiedade e o diagnóstico etiológico observou-se que, 71% dos pacientes com cirrose alcoólica e 60% daqueles com câncer no fígado, apresentaram nível mínimo de ansiedade e 27% dos pacientes com hepatite autoimune apresentaram nível grave ansiedade. Observou-se que em pacientes com hepatite auto-imune houve tendência à ansiedade. Acreditamos que a ausência de sintomas físicos, o fato de serem relativamente jovens e a maior incidência do sexo feminino, foram fatores importantes na observação do nível de ansiedade nesta doença / Abstract: Anxiety can be considered an emotional state that does not occur at the same intensity in all patients and is classified as: minimal, mild, moderate and severe. In specific cases of liver disease, this disorder may be even higher due to the need for transplantation in most cases. Upon being included on the waiting list for transplantation, the patient reflects on the decision, leaving him constantly anxious about death ideation. The aim of this study was to evaluate the level of anxiety observed in candidate patient for liver transplantation and whether there was any correlation between anxiety and the etiologic diagnosis. Two-hundred and fifteen adult candidates for liver transplantation were studied. All of them were on the Sao Paulo State Health Secretary waiting list. They underwent psychological evaluation by Beck Anxiety Inventory. There was presence of anxiety in the range of eight to 63 points, and no presence of anxiety, in the range of zero to seven. In addition, four points to the total sum of scores obtained were added when the subject was a woman. Anxiety levels were observed, minimum: from zero to seven, mild: eight to 15, moderate from 16 to 25, severe: from 26 to 63. The study group was characterized by 165 males and 50 females with a mean age 49.49 years of age with the value of the MELD score (Model for End-stage Liver Disease) of 16.78. Of the patients studied, 50.7% had primary education, 30.7% high school and 18.6% college. Regarding the level of anxiety, 54% of patients were minimal, 27% mild, 12% moderate and 7% severe. Among etiologies of the group, 37% of patients had liver cirrhosis with hepatitis C, hepatitis B 7%, 26% alcohol by origin, 9% for liver cancer, 7% for autoimmune hepatitis, and 14% had other liver diseases. In the correlation between level of anxiety and etiologic diagnosis, 71% of patients with alcoholic cirrhosis and 60% of those with liver cancer showed minimal level of anxiety and 27% of patients with autoimmune hepatitis had severe anxiety. It was observed that in patients with autoimmune hepatitis, there was a tendency to anxiety. We believe that the absence of physical symptoms, a relatively young age and a higher incidence of females, were important factors when reviewing the level of anxiety in this disease / Mestrado / Pesquisa Experimental / Mestre em Cirurgia

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O objetivo do transplante de fÃgado à aumentar a sobrevida de pacientes portadores de doenÃas hepÃticas irreversÃveis agudas e crÃnicas, alÃm de proporcionar melhor qualidade de vida. O interesse em prestar uma atenÃÃo em saÃde mais qualificada ao paciente em espera pelo transplante de fÃgado nos instigaram a nos aproximar mais da realidade vivenciada por ele, considerando que a compreensÃo da situaÃÃo vivida favorece uma assistÃncia mais humanizada e individualizada, contribuindo, ainda, para a construÃÃo do conhecimento em enfermagem e para a transformaÃÃo da prÃtica do enfermeiro. Objetivamos apreender o significado do transplante de fÃgado para o paciente em prÃ-transplante, atravÃs da caracterizaÃÃo dos pesquisados nos aspectos sÃcio-demogrÃficos e padrÃes clÃnicos; da identificaÃÃo dos sentimentos, crenÃas, valores e atitudes vivenciadas; e da identificaÃÃo de estratÃgias de enfrentamento para condiÃÃo vivenciada. Pesquisa de abordagem qualitativa, tendo como referencial teÃrico-metodolÃgico a Teoria HumanÃstica de Paterson e Zderad. Participaram do estudo dezoito pacientes inscritos no programa de transplante de fÃgado e acompanhados no Centro de Transplantes de FÃgado do Cearà â CTFC. Os dados foram coletados atravÃs de prontuÃrios, observaÃÃo nÃo-participante e entrevista. A anÃlise dos dados teve por base os preceitos do processo da Enfermagem FenomenolÃgica, utilizando quatro fases: a preparaÃÃo para vir-a-conhecer os pacientes que aguardam um transplante de fÃgado, conhecendo intuitivamente os pacientes, conhecendo cientificamente os pacientes e sÃntese complementar das realidades conhecidas. Desse processo, emergiram as unidades temÃticas com as categorias histÃria da doenÃa, sentimentos, enfrentando a condiÃÃo vivenciada, significado, expectativas e percepÃÃo do futuro. Identificamos o termo ânova vidaâ como a unidade de sentido de maior significÃncia para os informantes, designando um perÃodo diferente do que estÃo vivenciando atualmente e a necessidade de retornar suas atividades cotidianas e hÃbitos de vida relacionados à alimentaÃÃo, educaÃÃo, trabalho e lazer, resgatando assim sua autonomia e dignidade. O significado atribuÃdo ao transplante foi desvelado nÃo apenas como uma possibilidade de cura, mas a melhoria da qualidade de vida. Os pacientes revelaram o desejo de retribuir todo apoio recebido pela famÃlia durante esta fase crÃtica que vivenciam com a evoluÃÃo da doenÃa hepÃtica. A insuficiÃncia hepÃtica irreversÃvel à uma condiÃÃo patolÃgica de grande impacto na vida das pessoas, levando a necessidade de transplante de fÃgado como Ãnica possibilidade de reversÃo do quadro terminal, trazendo conseqÃÃncias diretas na qualidade de vida, com repercussÃes a nÃvel biolÃgico, psicolÃgico e social. As transformaÃÃes e limitaÃÃes impostas pela condiÃÃo crÃnica e pela necessidade de listagem para o transplante trazem a necessidade de adaptaÃÃo a uma nova realidade, tendo que se ajustarem as mudanÃas nos vÃrios campos da sua vida. Buscar o sentido e o significado que os pacientes atribuem à experiÃncia vivida no perÃodo prÃ-transplante à de suma importÃncia para o processo do cuidar, bem como conhecer suas histÃrias e experiÃncias vividas transcorridas em seu mundo, promovendo um ambiente assistencial mais humano.

Vinte e nove coelhos machos (Oryctolagus cuniculus) tiveram fragmentos ósseos corticais de 8mm de diâmetro removidos com trefina da metáfise proximal tibial que foram transplantados para uma área adjacente após a realização de um dos seguintes tratamentos: G-EDTA (desmineralização com EDTA pH neutro a 24% na forma de gel por 3 minutos das superfícies ósseas de contato); G-EDTA-P (o mesmo tratamento de G-EDTA e perfuração do leito receptor); G-P (perfuração do leito receptor) e G-C (nenhum tratamento adicional ao transplante). Noventa dias após as cirurgias, os animais foram eutanasiados para obtenção de blocos ósseos contendo os enxertos e preparo de corpos de prova para ensaio mecânico de determinação da resistência à tração e módulo de elasticidade. Os valores encontrados para resistência à tração foram: G-C = 2.0861.200 MPa; G-EDTA = 2.0330.976 MPa; G-EDTA-P = 1.9770.795 MPa e G-P = 1.8260.800 MPa. Entretanto, não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos (p=0.819). Os valores médios do módulo de elasticidade foram: G-C = 38.8022.72 MPa; G-EDTA-P = 26.2414.17 MPa; G-EDTA = 25.119.89 MPa e G-P = 17.517.94 MPa, sendo identificada diferença estatística apenas entre o G-C e os demais. Concluiu-se que a desmineralização por EDTA das superfícies ósseas de contato em enxertos autógenos em bloco do tipo onlay não interfere na resistência à tração da interface independentemente da perfuração do leito receptor e que tanto a desmineralização como a perfuração aumentam a deformação dos corpos de prova sugerindo um melhor comportamento elástico nesses grupos. / Cortical bone fragments of 8mm of diameter were removed with trephine burr from the proximal tibial metaphysis of twenty nine male rabbits (Oryctolagus cuniculus) and transplanted to an adjacent area after one of the following treatments: G-EDTA (demineralization of the contacting bone surfaces with EDTA pH 24% during 3 minutes); G-EDTA-P (the same treatment of G-EDTA and perforation of the receiving host bed); G-P (perforation of the receiving host bed) and G-C (no additional treatment to the transplant). Ninety days post-operatively, the animals were euthanized in order to attain bone blocks with the grafts. The specimens were prepared to mechanical assay for tensile strength and Young modulus. The values found for tensile strenght were: G-C = 2.086±1.200 MPa; G-EDTA = 2.033±0.976 MPa; G-EDTA-P = 1.977±0.795 MPa and G-P = 1.826±0.800 MPa. These differences, therefore, were not statically significant (p=0.819). The Young modulus average values for the specimens were: G-C = 38.80±22.72 MPa; G-EDTA-P = 26.24±14.17 MPa; G-EDTA = 25.11±9.89 MPa and G-P = 17.51±7.94 MPa. There were statistically significant differences only between the G-C and the other groups. The results showed that EDTA demineralization of the contacting bone surfaces in onlay autogenous bone grafts does not interfere in the tensile strenght at the interface independently of the perforation of the host bed. On the other hand, demineralization as well as perforation increased the deformation of the specimens suggesting a better elastic behavior for these groups.

O propósito deste estudo foi avaliar, histologicamente, o efeito do laser de baixa intensidade na cicatrização óssea de defeitos de tamanho crítico (DTC- 5mm) criados cirurgicamente em calvárias de ratos, quando associado ou não ao osso bovino inorgânico (Bio-Oss®). 60 ratos machos (Rattusnorvegicus, albinus, Wistar) foram divididos em 6 grupos: C (controle), L (Laser de Baixa Intensidade - GaAlAs, 730nm, 100mW, 6J, 210J/cm2), AO (Osso Autógeno) OAL (Osso Autógeno + Laser de Baixa Intensidade), BO (Osso Bovino Inorgânico), BOL (Osso Bovino Inorgânico + Laser de Baixa Intensidade) . Os animais foram submetidos à eutanásia após 30 dias. A quantidade de osso neoformado e a área de partícula remanescente dos materiais implantados foram calculadas como porcentagem da área do defeito original. Os dados foram submetidos à análise estatística (Teste de Kruskal - Wallis, Teste de Dunn; p<0,05). Os grupos irradiados com laser de baixa intensidade, L (47,67% ± 8,66%), OAL (39,15% ± 16,72%) e BOL (48,57% ± 28,22%) apresentaram maior área de neoformação óssea que os grupos C (9,96% ± 4,50%), OA (30,98% ± 16,59%) e BO (11,36% ± 7,89%) que não foram irradiados. Além disso, foram significativamente melhores que o Grupo C. Dentro dos limites deste estudo, conclui-se que o laser acelerou o processo de neoformação óssea e de reabsorção das partículas dos materiais de enxertia, podendo ser considerado uma modalidade terapêutica interessante a ser associada com biomateriais em cirurgias ósseas reconstrutivas. / This study histologically evaluated the effect of low level laser on the bone healing of critical size defects (CSD- 5mm) surgically created in rat calvaria, associated or not with inorganic bovine bone (Bio-Oss®). Sixty male rats (Rattus norvegicus, albinus, Wistar) were divided in 6 groups: C (control), L (low level laser - GaAlAs, 730nm, 100mW, 6J, 210J/cm2), AO (autogenous bone) OAL (autogenous bone + low level laser), BO (inorganic bovine bone), BOL (inorganic bovine bone + low level laser). The animals were killed after 30 days. The quantity of newly formed bone and area of remaining particles of the implanted materials were calculated as percentages of the original defect area. Data were statistically analyzed (Kruskal Wallis test, Dunn test; p<0.05). The groups irradiated with low level laser, L (47.67% ± 8.66%), OAL (39.15% ± 16.72%) and BOL (48.57% ± 28.22%) presented greater area of new bone formation than the groups C (9.96% ± 4.50%), OA (30.98% ± 16.59%) and BO (11.36% ± 7.89%), which were not irradiated. Also, they were significantly better than group C. within the limits of this study, it was concluded that the laser accelerated the new bone formation and resorption of particles of graft materials, thus it may be considered an interesting therapeutic option for association with biomaterials in reconstructive bone surgeries.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do laser em baixa intensidade na cicatrização de defeitos ósseos preenchidos com vidro bioativo (VB), em animais. Foi criado um defeito ósseo de tamanho crítico (DTC) com 5 mm de diâmetro na calvária de 60 ratos machos adultos (Rattus novergicus, albinos, Winstar), pesando entre 250g e 300g. Os animais foram divididos aleatoriamente em 6 grupos (n=10), sendo: 1) Grupo C (controle), 2) Grupo L (laser), 3) Grupo OA (osso autógeno), 4) Grupo OAL (osso autógeno + laser), 5) Grupo VB (vidro bioativo), 6) Grupo VBL (vidro bioativo + laser). Os animais foram submetidos a eutanásia após 30 dias. As áreas de osso neoformado (AON) e as áreas de partículas remanescentes de vidro bioativo (APR) foram calculados em relação à área total (AT), em porcentagem. Para análise estatística dos dados utilizou-se o teste paramétrico ANOVA, seguido pelo teste Tukey (p>0,05). A maior média de AON foi encontrada no grupo L (47,67 +8,66), seguido pelos grupos OAL (30,98 +16,59)e VBL (31,13 + 16,98). Houve diferença estatisticamente significante em relação ao AON entre o grupo C e os demais grupos com exceção da comparação com o grupo VB (Teste Tukey, p>0,05); entre os grupos L e VB quanto aos valores de AON (Teste Tukey, p>0,05). Não houve diferença estatisticamente significante dos valores de AON entre o grupo OA e os demais grupos estudados (Teste Tukey, p>0,05), entre o grupo OAL e os grupos VB e VBL quanto aos valores de AON (Teste Tukey, p>0,05) e entre os grupos VB e VBL (Teste Tuckey, p>0,05). A maior média de APR foi encontrada no grupo VB (25,15 + 4,82), seguido pelo grupo VBL (17,06 +9,01). Não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos (teste t, p>0,05). O laser em baixa intensidade, com o protocolo de aplicação utilizado, não contribuiu para o aumento da área de neoformação óssea dos sítios preenchidos com vidro bioativo, no período avaliado. / The objective of this study was to evaluate the effect of low-level lasers on the healing of bone defects grafted with bioactive glass (VB) in animals. A bone defect of critical size with 5mm in diameter was made in the skullcap of 60 male adult rats (Rattus novergicus, albinos, Winstar), weighing between 250g and 300g. The rats were divided randomly into 6 groups (n=10). Those being: 1) Group C (control); 2) Group L (laser); 3) Group OA (autogenous bone); 4) Group OAL (autogenous bone + Laser); 5) Group VB (bioactive glass); 6) Group VBL (bioactive glass + laser). The rats were euthanized after 30 days. The areas of new bone formation (AON) and the areas of remaining particles of bioactive glass (APR) were calculated in relation to the total area by percentage. For statistical analysis of the data, the parametric ANOVA rest followed by the Tukey test (p>0,05) was used. The highest average AON was found in group L (47,67 + 8,66), followed by groups OAL (30,98 + 16,59) and VBL (31,13 + 16,98). There was a statistically significant difference regarding in AON between Group C and the other groups with the exception of comparison with Group VB (Tukey Test, p>0,05). There was also a statistically significant difference between the L and VB groups regarding the AON value (Tukey Test, p>0,05). There was no statistically significant difference of AON values between group OA and the other groups studied (Tukey Test, p>0,05); between group OAL and the groups VB and VBL regarding the AON value (Tukey Test, p>0,05); and between the VB and VBL groups (Tukey Test, p>0,05). The highest average of APR was found in group VB (25,15 + 4,82), followed by group VBL (17,06 + 9,01).There was no statistically significant difference between groups (teste t, p>0,05). The low-level laser, with the application protocol used, did not contribute to an increase in the new bone formation area of the sites grafted with bioactive glass in the assessed period of time.

O transplante de órgãos é hoje uma opção de tratamento de várias doenças terminais. Apesar de todos os progressos no campo do transplante, o principal problema enfrentado ainda é a rejeição. As principais moléculas responsáveis pela resposta alogeneica e subsequente rejeição ao enxerto, são os antígenos leucocitários humanos (HLA, do inglês Human Leucocyte Antigens). Porém, existem evidências que anticorpos dirigidos a antígenos não-HLA estão associados com rejeição de transplantes. Neste estudo, foi investigada a presença de anticorpos anti-célula endotelial (AACE) em 11 pacientes que perderam seus rins transplantados devido à rejeição humoral irreversível e em 2 com perda por trombose de veia renal. A ausência de anticorpos anti-HLA contra o doador foi verificada antes do transplante, da rejeição e antes e depois da transplantectomia, através da realização de provas cruzadas usando as técnicas mais sensíveis. Anticorpos não-HLA presentes em nove eluatos reagiram com EAHy.926. Eluatos positivos e negativos contra linhagem EAHy.926 foram testados contra cortes histológicos de 6 rins sadios para detecção de quais estruturas renais são reconhecidas por esses anticorpos. A reação foi avaliada pelo método de imunofluorescência indireta. Dos 13 eluatos testados, 4 (isotipo IgG) e 5 (isotipo IgM) reagiram com forte fluorescência nos glomérulos e endotélio arterial, mas não foi verificada reação na cápsula de Bowman e no epitélio tubular. Não foi observado polimorfismo na reatividade dos eluatos. Em onclusão, verificamos que os anticorpos não-HLA têm um importante papel na rejeição humoral. Estes estão reconhecendo antígenos de um sistema provavelmente não-polimórfico nas células de endoteliais presentes, principalmente, nos capilares glomerulares. / The transplant of organs is today an option of treatment to several terminal diseases. In spite of all the progress in the field of the transplants, the rejection remains a problem to be solved. The main target molecules for the allogenic response and subsequent allograft rejection are the human leukocyte antigens (HLA). However, there are growing evidences that non-HLA antibodies are associated with transplant rejection. In this study it was investigated the presence of anti-endothelial cell antibodies (AECA) in 11 patients who had early lost their transplanted kidney by irreversible humoral rejection and in 2 ones from renal venal thrombosis. The absence of anti-HLA antibodies against the donor was verified by the negativity of crossmatches performed using the most sensitive assays, at the transplant, at the rejection, and before and after the transplantectomy Antibodies from 9 eluates bound to EAHy.926. Positive and negatives eluates were tested against frozen sections from 6 normal kidneys in order to define the structures to which they were reactive. The reactivity was identified by indirect immunofluorescence method. From 13 eluates evaluated, 4 (isotipe IgG) and 5 (isotipe IgM) reacted to the glomerulus and renal arterial endothelium with intense fluorescence but they did not react to the Bowmans capsule and tubular epithelium. No polymorphism was observed in eluates reactivity. In conclusion, we have shown that non-HLA antibodies may represent a cause of the humoral rejection. These antibodies are probably recognizing antigens of a nonpolymorphic system in endothelial cells present, mainly, in the glomerular capillaries.

O tratamento das lesões ósseas cavitárias com autoenxerto ainda é considerado o padrão-ouro. Seu uso, entretanto, é limitado, devido principalmente à baixa disponibilidade e à morbidade do sítio doador. Os enxertos ósseos sintéticos são estudados com o objetivo de superar as limitações decorrentes da retirada de autoenxerto ou da disponibilidade de bancos de tecidos. O vidro bioativo é um material sintético osteoindutor, osteocondutor e antibacteriano, à base de sílica e cria um arcabouço para o crescimento ósseo. Objetivo: comparar o vidro bioativo com o autoenxerto, com relação às características histomorfométricas. Métodos: foi realizado um estudo experimental prospectivo caso-controle em animais, para comparar o vidro bioativo com o autoenxerto com relação às características histomorfométricas. Oito coelhos foram submetidos a uma cirurgia em que um defeito cavitário foi criado em ambos os fêmures proximais; de um lado, o defeito ósseo criado foi preenchido com os grânulos de vidro bioativo; do outro, o defeito ósseo foi preenchido com o autoenxerto retirado do lado contralateral. Os lados foram randomizados. Catorze dias após a cirurgia os animais foram sacrificados. Resultados: a análise histológica revelou que a neoformação óssea entre os dois grupos foi equivalente, e que a contagem de osteoblastos foi superior nos fêmures tratados com vidro bioativo. A contagem de osteócitos, por outro lado, foi menor. A semelhança na intensidade de neoformação óssea coincide com o encontrado na literatura. As diferenças de contagem celular são concordantes com o mecanismo de ação do vidro bioativo: aumento do turnover ósseo, estímulo dos osteoblastos e retardo na sua diferenciação para osteócitos. Conclusão: o vidro bioativo promove neoformação óssea semelhante ao autoenxerto neste modelo animal de defeito ósseo cavitário. Nível de evidência III, estudo caso-controle / Autograft is still considered the gold standard in the treatment of cavitary bone lesions. The low availability and donor site morbidity, however, limits its use. Synthetic bone grafts have been studied in order to overcome the limitations of autograft or allograft. Bioactive glass is an osteoinductive, osteoconductive and antibacterial silica-based synthetic material. It promotes the creation of a scaffold for bone growth. Objectives: to compare bioactive glass and autograft regarding their histomorphometric characteristics. Methods: the author conducted a prospective case-control experimental study on animals, to compare the histomorphometric characteristics of bioactive glass versus autograft. Eight rabbits underwent surgery in which a cavitary defect was created in both proximal femurs. On one side, the bone defect was filled with bioactive glass granules and on the other, the defect was filled with autograft grafted from the contralateral side. The sides were randomized. Fourteen days after surgery, the animals were euthanized. Results: histologic analysis revealed that bone neoformation was equivalent among the two groups and the osteoblasts cell-count was higher in the femurs treated with bioactive glass. The osteocytes cell-count, however, was lower. The similarity in bone formation between both groups was also found in the literature. The differences in cell-count of osteocytes and osteoblasts are in accordance with the mechanism of action of the bioactive glass: increase in bone turnover, stimulation of osteoblasts and inhibition of their differentiation into osteocytes. Conclusion: bioactive glass is similar to autograft regarding bone neoformation, in this animal model of cavitary bone defects. Level of evidence III, case-control study