Orientador: Mirela Tinucci Costa / Coorientador: Célio Lopes Silva / Banca: Joice Lara Maia Faria / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Hélio José Montassier / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Resumo: A mastectomia é o procedimento terapêutico mais frequentemente empregado para tratar tumores mamários de cadelas e o sucesso depende do estádio do tumor no momento da intervenção. Estudos em modelos animais mostram que as proteínas de choque térmico (HSP) têm a capacidade de induzir imunidade inata tumor-específica e resulta na regressão do tumor. Sendo assim, este estudo teve como objetivos avaliar a eficácia do imunomodulador DNA-HSP65+proteína-HSP65 no tratamento de cadelas com tumores mamários malignos, seu potencial imunoestimulatório e investigar o aparecimento de efeitos adversos. Fizeram parte do experimento 21 cadelas com tumores mamários malignos. Destas 13 foram tratadas com o imunoterápico e oito submetidas a mastectomia da cadeia mamaria afetada. As cadelas (n= 13) receberam até três aplicações do imunomodulador, via intratumoral, no tumor de maior volume, com intervalo médio de 15 dias. O potencial imunoestimulatório do imunomodulador foi investigado através da citometria de fluxo pela comparação do numero de células natural killer ativadas, células B e T, CD4 e CD8, monócitos, monócitos ativados, macrófagos e células dendríticas; da proliferação espontânea de células mononucleares e da produção de anticorpos anti-HSP65 pelo teste ELISA antes do tratamento e 15 dias após o termino do mesmo. Seis cadelas (46,1%) apresentaram regressão em pelo menos um dos tumores da cadeia mamária, e uma (7,7%) no tumor que recebeu a aplicação do imunoterápico. Quando se consideram todas as mamas acometidas por tumores (n= 40), nove (22,5%) apresentaram regressão tumoral, 19 (47,5%) progressão e 12 (30%) se mantiveram estáveis. Três cadelas vieram a óbito durante o experimento; uma mastectomizada e duas tratadas com o imunoterápico. O imunoterapico não... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Mastectomy is a therapeutic procedure most often used to treat breast tumors in bitches and success depends on the tumor stage at the time of intervention. Studies in animal models show that the heat shock proteins (HSP) have the ability to induce tumorspecific innate immunity and results in tumor regression. Thus, this study aimed to evaluate the efficacy of immunomodulatory DNA-HSP65 + HSP65 protein in the treatment of dogs with malignant mammary tumors, and investigate its potential immunostimulatory the appearance of adverse effects. The experiment consisted of 21 dogs with malignant mammary tumors Of these 13 were treated with immunotherapy undergo mastectomy and eight of the affected mammary chain. Female dogs (n = 13) received three applications of the immunomodulator, intratumoral, in the greater volume tumor, with a mean interval of 15 days between applications. The potential immunostimulatory was investigated by flow cytometry by comparing the number of activated natural killer cells, T and B cells, CD4 and CD8 lymphocytes, monocytes, activated monocytes, macrophages and dendritic cells, the proliferation of mononuclear cells and spontaneous production anti-HSP65 antibody by ELISA before treatment and 15 days after the end. Six dogs (46.1%) had regression at least in one tumor of the mammary chain, and one dog (7.7%) in the tumor that received intratumoral application. When you consider all breast tumors (n = 40), nine (22.5%) had tumor regression, 19 (47.5%) progression and 12 (30%) remained stable. Three dogs died during the experiment, one after mastectomy and two after immunotherapy. The immunotherapy did not cause significant systemic immune stimulation. There was an increase of anti- HSP65 after treatment and the proliferation of leukocytes, although... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: O tumor venéreo transmissível (TVT) caracteriza-se por ser uma neoplasia de origem controversa. Baseado nos resultados obtidos anteriormente por nosso grupo de pesquisa, dos três tipos morfológicos do TVT, os de morfologia plasmocitóide são mais agressivos. De acordo com as características morfológicas do TVT, a resposta à terapia é variável e sabendo-se que a utilização da survivina, bem como da caspase-3, do Bcl-6, do Bcl-2, do Ki-67 e da COX-2 são importantes para auxiliar no prognóstico, no manejo do paciente e na monitoração da doença durante e após a terapia, este projeto visou, além de estudos citogenéticos, observar se há diferenças na expressão dos imunomarcadores acima citados, nos TVTs plasmocitóides e linfocitóides. Para tal, foram utilizados 30 cães atendidos no Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, Campus de Botucatu. Devido baixa incidência de TVT linfocitóide no HV-UNESP-Botucatu, não foi possível fazer correlações entre os tipos plasmocitóide e linfocitóide. A positividade da survivina variou de 96,15 a 100% em 200 células contadas e, em dois casos, a marcação da survivina foi citoplasmática e nuclear, nos outros casos a marcação foi apenas citoplasmática. A marcação pelo anticorpo anti-caspase-3 nos 30 casos de TVT foi baixa, variando de 0 a 6,5% de positividade em 200 células contadas, o que sugere um comportamento agressivo do TVT. Neste estudo, o TVT não expressou Bcl-2 nem Bcl-6 nas tentativas de imunomarcação. Dos 30 casos de TVT que foi realizado marcação pelo Ki-67, em 21 casos foi possível a contagem de células e houve uma média de positividade de 15,57%. Houve expressão de COX-2 em todos os casos e os valores variaram de 90,66 a 100% de positividade em 200 células contadas, exceto por um caso que apresentou 24,50% de positividade. A distribuição... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The characterization of transmissible venereal tumor (TVT) as neoplastic in origin is controversial. Based on results obtained previously by our research group, of the three TVT morphological types, those of plasmocytoid morphology are most aggressive. According to morphological characteristics of TVT, response to therapy is variable; and given that using survivin, caspase-3, Bcl-6, Bcl-2, Ki-67 and COX-2 to aid in prognosis, patient management and the monitoring of this disease during and after therapy, this project aimed, besides cytogenetic studies, to observe whether there are differences in expression of the aforementioned immunomarkers, in plasmocytoid TVTs and lymphocytoids. For this, 30 dogs, treated at the Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP, Campus at Botucatu, were utilized without restriction as to sex, breed or age, with cytological diagnosis of transmissible venereal tumor. There was prevalence of males; age varied from 1 to 14 years, the majority were SRD dogs and localization was preferentially genital. Due to low lymphocytoid TVT incidence (5.91%) at HV-UNESP-Botucatu, it was not possible to make correlations between plasmocytoid and lymphcytoid types. Positivity of survivin varied from 96.15 to 100% in the 200 cells counted and, in two cases, marking for survivin was cytoplasmic and nuclear, while in other cases marking was only cytoplasmic. Survivin is associated with more aggressive behavior and shorter lifespan in the majority of tumors. In men, highly aggressive neoplasias present lower cytoplasmic expression of caspase-3 than low-grade neoplasias. Marking by anti-caspase-3 antibody in 30 TVT cases was low, varying from 0 to 6.5% positiviity in 200 cells counted, which suggests aggressive TVT behavior. In our study, TVT did not express Bcl-2 or Bcl-6... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: Lígia Souza Lima Silveira da Mota / Banca: Júlio Lopes Sequeira / Banca: Claudia Valéria Seullner Brandão / Banca: Louisiane de Carvalho Nunes. / Banca: Maria Aparecida Custódio Domingues / Doutor

Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Mirela Tinucci. Costa / Banca: Sara Maria Carvalho e Suzano / Resumo: O mastocitoma canino (MCT) é uma neoplasia maligna de grande importância na clínica oncológica devido ao seu comportamento biológico agressivo e alta freqüência. A COX-2 e a PGE2 têm sido associadas à promoção e progressão tumoral e seus principais mecanismos envolvem estímulos da angiogênese tumoral e a inibição da morte celular programada. O VEGF é um potente indutor da angiogênese e a caspase-3 tem um importante papel na via efetora da apoptose. Compreender o mecanismo pela qual a COX-2 pode estimular a progressão tumoral no mastocitoma, permite ampliar o conhecimento do comportamento biológico desta neoplasia e direcionar tratamentos mais eficazes. O presente trabalho fez um estudo retrospectivo em 24 casos de mastocitoma canino (MCT). As neoplasias foram classificadas de acordo com Patnaik et al. (1984) e a expressão da COX-2, PGE2, VEGF e caspase-3 foram avaliadas usando a técnica de imunoistoquímica. A expressão da COX-2 foi correlacionada à expressão do VEGF, PGE2 e caspase-3 nos diferentes graus histopatológicos. A imunomarcação da caspase-3 foi menor nos tumores indiferenciados comparados com os bem diferenciados. Comparando os dados da expressão da COX-2 com os demais marcadores foi observado a correlação positiva entre COX-2 e PGE2, COX-2 e VEGF nas graduações II e III. A correlação entre COX-2 e caspase-3 foi somente detectada no grau III. / Abstract: The canine mast cell tumor (MCT) is a malignant neoplasia with great importance on the clinical practice due to its aggressive behavior and high frequency. The COX-2 and the PGE2 have been associated to the tumor initiation, promotion and progression, and its main mechanisms involve the stimuli of tumor angiogenesis and the inhibition of apoptosis. The VEGF is a powerful inductor of angiogenesis and the caspase-3 is responsible for most part of the apoptotic effects. The understanding of the mechanism by which the COX-2 stimulates the tumor progression in the mast tumor cells provides an extension through the biological behavior of this neoplasia and leads to a better and effective treatment. The present work was a retrospective study in 24 cases of MCT. The neoplasias were classified according to Patnaik et al. (1984) and the expression of COX-2, PGE2, VEGF and caspase-3 were evaluated using the immunohistochemistry technique. The expression of COX-2 was correlated to the expression of VEGF, PGE2 and caspase-3 in the different histopathologic grades. Caspase-3 immunolabeling was lower in the undifferentiated tumors compared to the more differentiated ones. Comparing the COX-2 expression data to the other markers it was observed a positive correlation between COX-2 and PGE2, COX-2 and VEGF in grade II and III. Correlation between COX-2 and caspase-3 was detected only on grade III. Keywords: COX-2, PGE2, VEGF, caspase-3, mast cell tumor. / Doutor

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Maricy Apparicio Ferreira / Banca: Marcela Marcondes Pinto Rodrigues / Resumo: O estudo dos tumores mamários em cadelas revela-se como um excelente modelo para a investigação das neoplasias mamárias em mulheres e tanto no homem quanto nos animais a resposta imune pode interferir no desenvolvimento de neoplasias. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia e estimulação do sistema imune celular em tumores mamários de fêmeas caninas por meio da expressão de CD4, CD8, CD4+CD25+ (Foxp3), CD28, CD152 e CD56 (NK). A avaliação da expressão desses marcadores foi avaliada por imunoistoquimica, utilizando-se o método estreptoavidina-biotina-peroxidase. Para a realização desse estudo foram coletadas 20 amostras de tumores mamários de fêmeas caninas e essas divididas de acordo com a classificação histopatológica em 2 grupos: 10 carcinomas simples e 10 carcinomas complexos. Em relação aos resultados não se observou diferenças quanto à quantificação das células imunomarcadas quando comparadas segundo o tipo tumoral. No caso dos carcinomas simples evidenciou-se diferença entre a quantificação das células imunomarcadas (P< 0,05) pelo anticorpo CD28 (p=0,03) e Foxp3 (p=0,01) sendo menores que todas as demais marcações. Já para os carcinomas complexos houve diferença entre a quantificação das células imunomarcadas (P= 0,05) pelo anticorpo CD-152 que apresentou valor maior que as demais marcações com exceção do CD8. Os marcadores CD28, CD56 e Foxp3 foram menores que o CD8 (p=0,01) sendo o Foxp3 menor que todos os outros marcadores. No presente estudo observou-se que existe um controle negativo do sistema imune em ambos os casos, porém esse controle negativo foi mais evidente no carcinoma complexo / Abstract: The mammary tumor study in female dogs is revealed as an excellent model for the investigation of breast tumors in humans. On both species, the immune system can interfere on neoplasia progression. The aim of this study was to evaluate the immunolocalization and quantification of CD4, CD8, CD4+CD25+ (Foxp3), CD28, CD152 and NK in tumour lymphocyte infiltration, to evaluate the efficacy of stimulation and immune system defense in canine mammary carcinoma. The expression of these markers using immunohistochemistry was made by streptoavidin-biotin peroxidase method. The tissues were collected from twenty mammary carcinomas, subdivided in ten simple carcinomas and ten complex carcinomas of twenty female dogs. This study identified no significant differences on quantification of positive cellular staining in simple carcinoma compared with complex carcinoma. The samples of simple carcinoma resulted significant differences on positive staining between the antibodies CD28 (p=0,03) and Foxp3 (p=0,01) and these markers revealed less quantitative staining compared with the others markers (CD4, CD8, CD152 and NK). The samples of complex carcinoma resulted significant differences on cellular staining quantification by the antibody CD152 (p<0,05) compared with the others markers (CD4, Foxp3, CD28, and NK) with exception when compared with CD8. The immune quantification of positive cellular staining about the markers CD28, CD56 and Foxp3 were smaller than CD8 (p=0,01), and the Foxp3 was smallest than those others markers. It was concluded that exist a negative control of immune system to complex and simple mammary carcinoma, but, this negative control was more significant in female dogs with complex mammary carcinoma / Mestre

Orientador: Renée Laufer Amorim / Coorientador: Carlos Roberto Daleck / Banca: Mirela Tinucci Costa / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Banca: Luiz Henrique de Araújo Machado / Banca: Renata Alonso Sobral / Resumo: O mastocitoma (MCT) cutâneo é uma das neoplasias malignas mais comuns em cães, representa 11% dos tumores de pele nesta espécie e apresenta comportamento biológico variável. Este trabalho dá continuidade a pesquisas com biomarcadores prognósticos em MCTs cutâneos em cães. Foi realizado um estudo em busca de critérios complementares ao exame clínico (ultrassonografia pelo método Doppler), que auxiliem na determinação do potencial de recidiva e metástase do tumor, correlacionando-os com a expressão da proteína KIT, densidade microvascular (DMI), tamanho, número de tumores, tempo de evolução, ulceração, tempo de sobrevida e graduação histopatológica. Além disso, foi realizada uma análise dos parâmetros clínicos, incluindo dados epidemiológicos, achados histológicos e moleculares e a correlação destes com o comportamento biológico do MCT. Foram avaliados 20 cães, que totalizaram 28 tumores. A ultrassonografia (US) pelo método Doppler permitiu a identificação de vasos em 54% dos tumores. Não houve correlação entre a presença de vasos e a DMI, a localização da proteína KIT, os graus histológicos, o tempo de evolução, o tamanho, a ocorrência de recidivas e metástases, e o tempo de sobrevida, mas sim com a presença de ulceração tumoral. Observou-se correlação estatística entre o grau histológico, a DMI, a presença de ulceração e o número de tumores e também da expressão de Ki-67 com os padrões de marcação da proteína KIT. O grau histológico no MCT cutâneo canino não deve ser avaliado isoladamente, mas sim em conjunto com a expressão da proteína KIT, DMI, proliferação celular, presença de ulceração, número de tumores e ocorrência de recidivas e metástases. Indicamos que estudos adicionais... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cutaneous mast cell tumor (MCT) is one of the most common malignant neoplasms in dogs, representing 11% of skin tumors in this species and shows a variable biological behavior. This article maintains the search on prognostic biomarkers in cutaneous MCTs in dogs. A study was conducted to find additional criteria to the clinical examination (Doppler ultrasound) to add in determining the potential for recurrence and metastasis of tumors, correlating them with KIT protein expression, intratumoral microvessel density (IMD), size, number of tumors, duration time, ulceration, survival rates and histological classification. In addition, we performed an analysis of clinical parameters, including epidemiological data, histological and molecular ones and correlate them with the biological behavior of MCT. We evaluated 20 dogs, in a total of 28 tumors. The Doppler ultrasound (US) allowed the identification of vessels in 54% of tumors. There was no correlation between the presence of vessels and IMD, KIT protein location, histological grades, duration time, tumor size, recurrence and metastasis, and survival rates, but with ulceration. We have observed statistical correlation between histological grade, IDM, presence of ulceration and number of tumors and also the expression of Ki-67 with patterns of KIT protein. The histological grade in canine cutaneous MCT should not be assessed in isolation but in conjunction with expression of KIT protein, IDM, cell proliferation, presence of ulceration, number of tumors and recurrences and metastases rates. We suggest that additional studies should be done to further evaluate the use of Doppler US as a noninvasive method to chacarterize the vascularization and blood flow in... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Alessi / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Resumo: Tumor de mama é a neoplasia mais freqüente em cadelas, entretanto, há controvérsias sobre os fatores que influenciam o seu desenvolvimento. Em estudos epidemiológicos destaca-se que os fatores ambientais são responsáveis por, pelo menos, 80% da incidência do câncer de mama em humanos. Com o objetivo de estabelecer fatores ambientais que possam contribuir para o desenvolvimento das neoplasias mamárias em cadelas, foram avaliadas as cadelas que se atendidas no Hospital Veterinário Governador Laudo Natel com tumores mamários, durante o período de julho 2008 a julho de 2010. Estas foram submetidas à mastectomia e exame histopatológico. Informações sobre os fatores epidemiológicos, aos quais, os animais se submeteram foram obtidas mediante questionários aplicados aos proprietários e estas foram associadas com o tipo histológico e grau de malignidade da neoplasia. Constatou-se que, estatisticamente, através do Teste Exato de Fisher a 5%, a idade, o porte, o uso de anticoncepcionais, o número de partos, a ocorrência de pseudogestação, a inalação passiva da fumaça de cigarro, o histórico de doenças anteriores, o tipo de alimentação, a conformação corporal e o nível de contato com os proprietários, influenciam no grau de agressividade da neoplasia. De forma contrária, castração anterior, localização das massas e presença de ulceração não demonstram interferência / Abstract: Mammary gland tumor is one of the most common neoplasia in females dogs, however, there is controversy about the factors influencing its development. The cancer research is very important, since they are biological models for early diagnosis, more accurate prognoses and more efficient therapeutic procedures. Epidemiological studies show that environmental factors are responsible for at least 80% of the incidence of breast cancer in humans. Aiming to determinate environmental factors which may contribute to the development of mammary gland tumors, female dogs were evaluated. These females presented the "Governor Laudo Natel" Veterinary Hospital with pre-existing mammary gland tumors, during the period July 2008 to July 2010. They were submitted to mastectomy and to histopathologic exams. Information about epidemiological factors was obtained by questionnaires to the owners, and these were correlated with histologic type and grade of malignancy of the tumor. It was found that, statistically, by Fisher's exact test at 5%, age, size, contraceptive use, number of deliveries, the occurrence of pseudopregnancy, the passive inhalation of cigarette smoke, history of early diseases, the type of food, body shape and level of contact with the owners, influence the degree of aggressiveness of the tumor histological type. In contravention, previous castration, location of the masses and the presence of ulceration did not show interference / Mestre

Resumo: O câncer de ovário apresenta diagnóstico tardio e alta letalidade, devido à falta de biomarcadores sensíveis e específicos e à rápida progressão desse câncer, assintomático em estadios iniciais. As células imunes têm a capacidade de eliminar as células malignas e regular a progressão tumoral. Contudo, as células imunes do microambiente tumoral são disfuncionais e falham no controle da expansão tumoral podendo, inclusive, promover o crescimento da neoplasia. Apesar das inúmeras tentativas de se correlacionar o grau e o tipo de infiltrado celular com o prognóstico ou sobrevida do paciente com câncer de ovário, não há consenso sobre o real significado do infiltrado leucocitário nesses casos. Desse modo, este estudo tem como objetivo a ampliação dos conhecimentos relativos à imunidade inata em mulheres com câncer de ovário, através caracterização dos aspectos fenotípicos celulares da imunidade inata sérica. Trata-se de estudo transversal onde foram avaliadas 36 mulheres submetidas a exame clínico, ginecológico, ultrassonografia transvaginal e tratamento com laparotomia nos casos indicados de massa pélvica. De acordo com o resultado desses exames, as mulheres selecionadas foram agrupadas nos grupos: controle- ausência de neoplasia, com neoplasia ovariana benigna e neoplasia ovariana maligna. Realizou-se dosagem sérica de moléculas de expressão de superfície de células da resposta imune inata com análise através da citometria de fluxo. As diferenças entre os grupos foram avaliadas pelo teste de Mann-Whitney (dois grupos) ou Kruskal-Walis (três grupos) conforme indicados. As diferenças com valor de p<0,05 foram consideradas significativas. Foram selecionadas 36 pacientes: 10 mulheres no grupo controle, 9 no grupo de neoplasia ovariana benigna e 17 no grupo de neoplasia maligna. Mais de 70% das pacientes com câncer de ovário apresentavam-se com doença... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Ovarian cancer presents late diagnosis and high mortality due to lack of sensitive and specific biomarkers and the rapid progression of this cancer, asymptomatic in early stages. Immune cells have the ability to eliminate malignant cells and regulate tumor progression. However, the immune cells of the tumor microenvironment are dysfunctional and fail to control the tumor growth and may even promote the growth of cancer. Despite numerous attempts to correlate the degree and type of cellular infiltrate and the prognosis or survival of patients with ovarian cancer, there is no consensus about the real meaning of the leukocyte infiltrate in these cases. Thus, this study aims to increase knowledge about the innate immunity in women with ovarian cancer through characterization of phenotypic cellular aspects of innate immunity levels. Methods: This is a Cross-sectional study evaluated 36 women who underwent clinical examination, gynecological examination, transvaginal ultrasound and treatment with laparotomy as indicated pelvic mass. According to the results of these tests, the women selected were grouped into two groups: control, absence of malignancy, with benign ovarian neoplasm and malignant ovarian neoplasm. The serum levels of serum molecules surface expression of cells of the innate immune response with analysis by flow cytometry. Differences between groups were evaluated by the Mann-Whitney (two groups) or Kruskal-Wallis (three groups) as indicated. Differences with p <0.05 were considered significant. Results: We selected 36 patients: 10 women in the control group, 9 in the group of benign ovarian neoplasm and 17 in the group of malignancy. More than 70% of patients with ovarian cancer presented with advanced disease and values of CA125 much changed. For the analysis found, there was a change between the groups for molecules expression in neutrophils... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Agnaldo Lopes da Silva Filho / Coorientador: Andréa Teixeira de Carvalho / Banca: Paulo Traiman / Banca: Luciana Maria da Silva / Mestre

Orientador: Renée Laufer Amorim / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Antonio Carlos Alessi / Resumo: Os mastócitos são células provenientes do precursor CD34 da medula óssea, o mastocitoma (MCT) pertence ao grupo das neoplasias de células redondas e possui etiologia desconhecida, é a neoplasia cutânea mais comum em cães, sem predileção por raça, sexo ou idade. Seu comportamento biológico é bastante agressivo e de alta frequência. A graduação histopatológia proposta Patnaik et al., (1984), é o critério mais utilizado para a graduação histopatológica da neoplasia sendo o grau 1 uma neoplasia bem diferenciada, o grau 2 moderadamente diferenciada e o grau 3 pouco diferenciada ou anaplásica. O presente trabalho teve como objetivos a avaliação do ínidice proliferativo e apoptotico dos MCT em lâmina de Microarranjo de tecido (TMA) utilizando a técnica de imunoistoquiímica e TUNEL. Para tal utilizou-se 166 casos de MCT compondo um arranjo em matriz de amostra tecidual, ou tissue microarray (TMA) com 190 amostras, sendo avaliado o padrão de marcação da proteína Kit, a proliferação celular com o anticorpo primário Ki67 e apoptose com o anticorpo primário caspase-3 clivada e pela técnica da Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Mediated dUTP Nick end Labeling Assey (TUNEL). Quando os casos foram avaliados quanto à imunoexpressão de c-KIT, os tumores (únicos e múltiplos) com expressão citoplasmática da proteína KIT tiveram uma taxa proliferativa maior e uma menor taxa apoptótica quando comparados aos com expressão membranosa. Os MCTs grau 3 tiveram um maior índice proliferativo (imunoexpressão de Ki67) quando comparados aos tumores de graus 1 e 2. Não foi observada correlação entre a imunomarcação do anticorpo primário caspase-3 clivada e a técnica de TUNEL, sendo que a técnica de TUNEL se mostrou mais eficaz na avaliação da apoptose que a imunomarcação para caspase-3 clivada / Abstract: Mast cells are from precursor CD34 cells bone marrow, the mast cell tumor (MCT) belongs to the group of round cell malignancies and has unknown etiology, is the most common skin cancer in dogs without distinction of race, sex or age. Its biological behavior is very aggressive and high frequency. The histopathological grading proposal from Patnaik et al., (1984), is the most commonly used criterion for the histopathological grade of the tumor is a tumor grade 1 are well-differentiated, grade 2 are moderately differentiated and grade 3 are poorly differentiated or anaplastic. This study aimed to evaluate the proliferative and apoptotic index of MCT in blade tissue microarray (TMA) using the TUNEL technique and immunohistochemistry. To this end we used 166 cases of MCT composing an tissue microarray (TMA) with 190 samples, and evaluated the pattern of protein labeling kit, cell proliferation, with the primary antibody Ki67 and apoptosis with primary antibody and cleaved caspase-3 by the technique of terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP Nick End Labeling Mediated Assey (TUNEL). When the cases were evaluated for immunoexpression of c-KIT, tumors (single and multiple) with cytoplasmic KIT protein expression had a higher proliferative rate and a lower apoptotic rate when compared to those with membranous expression. Grade 3 MCTs had a greater proliferative index (Ki67 immunostaining) when compared with tumor grades 1 and 2. No correlation was observed between the immunostaining of primary antibody caspase-3 cleavage and TUNEL technique, and TUNEL technique was more effective in assessing apoptosis that immunostaining for cleaved caspase-3 / Mestre

Orientadora: Mirela Tinucci Costa / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Renée laufer Amorim / Resumo: O carcinoma de células escamosas é uma neoplasia maligna que emerge dos queratinócitos e corresponde a aproximadamente 5% dos tumores cutâneos dos cães. Os tumores de células basais são compostos quase exclusivamente por células basais e apresentam uma incidência de 4 a 12% entre as neoplasias cutâneas caninas. O carcinoma de células escamosas e o tumor de células basais são neoplasias comumente registradas na clínica de pequenos animais. As caderinas compreendem uma classe de moléculas de adesão celular expressas na superfície de todas as camadas epidérmicas. A E-caderina é a principal caderina envolvida na adesão celular epitelial. A redução de sua expressão está envolvida com a progressão de alguns tipos de câncer, principalmente os carcinomas, seu poder metastático, e ainda na definição do prognóstico. Não há muitos estudos na veterinária com relação à expressão dessas moléculas em tumores. O fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) é um potente mitógeno para células endoteliais e sua expressão tem sido relacionada com o aumento da angiogênese tumoral. O VEGF além de estimular a angiogênese, produz colagenase e outras enzimas degradativas que facilitam a saída das células neoplásicas para a circulação, além de estimularem o crescimento das células tumorais. O objetivo desse estudo foi avaliar a expressão da E-caderina e do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) em tecidos caninos histologicamente classificados como carcinoma de células escamosas e tumor de células basais, buscando-se uma correlação com o grau histológico desses tumores. A expressão normal e reduzida da Ecaderina apresentou diferenças significativas comparando-se o tumor de células basais com o carcinoma de células escamosas quando avaliada pelo teste de Fisher...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The squamous cell carcinoma (SCC) is a malignant epithelial neoplasm of keratinocytes and accounts for about 5% of the canine skin neoplasms The basal cells tumors (BCT) are made up almost entirely of basal cells and accounts for 4 to 12% of the canine skin neoplasms. Squamous cell carcinoma and basal cell tumor are neoplasms commonly seen in the Small Animal Practice. The cadherins are a group of cellular adhesion molecules that are expressed on the surface of all epidermic layer. The Ecadherin is the main cadherin involved in epithelial cellular adhesion; the decrease in its expression is related to the progression of some types of cancer, specially carcinomas, to its metastatic characteristics, and to the prognosis. There are few studies in Veterinary Medicine researching the expression of this molecule in canine tumors. The vascular endothelial growth factor (VEGF) is a potent mitogen to endothelial cells and its expression has been correlated with increased tumoral angiogenesis. Besides stimulating angiogenesis, VEGF produces colagenase and other enzymes thus helping neoplastic cells scape into the vascular system and stimulating tumoral cell growth. The goal of this study was to evaluate E-cadherin's and vascular endothelial growth factor expression in canine tissues that were classified as squamous cell carcinoma or basal cell tumor, and to find a correlation with the histological grade of the tumors. Both normal and decreased expression of E-cadherin had significant differences when comparing squamous cell carcinoma to basal cell tumor using the Fisher test (P=0,0039). Also, in some samples the more differentiated neoplastic cells had a higher intensity of color than the less differentiated...(Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Orientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Gisele Fabrino Machado / Banca: Gervásio Henrique Bechara / Resumo: O tumor ósseo de células gigantes apresenta 3 diferentes tipos celulares, sendo duas estromais: fibroblastos neoplásicos e células mononucleares; e o terceiro tipo, células gigantes. Propôs-se que este tumor é de linhagem monócito-macrofágica e acredita-se que as células gigantes se formam por fusão de células mononucleares. Aparentemente os fibroblastos neoplásicos que expressam o fator transformador de crescimento TGF"beta"1 estão envolvidos no recrutamento das células gigantes para o tumor. Com o intuito de compreender melhor a histogênese, o envolvimento do estrógeno e a expressão de receptores TGF"beta"1, foi realizado este estudo em casos deste tumor em gatos domésticos. Para tanto foi utilizado o método imuno-enzimático Streptoavidina-biotina utilizando-se o anticorpo primário anti-vimentina, clone 3B4 (Dako A/s, Denmark); o anticorpo marcador de macrófago, MAC387 (Dako A/s, Denmark); o anticorpo para receptores de estrógeno, clone 15D (Dako A/s, Denmark) e o anticorpo marcador para TGF"Beta"1 (Santa Cruz Biotechnology). Os resultados foram analisados pela porcentagem e desvio padrão de células marcadas para cada anticorpo e permitiram concluir que: o TOCG de gatos domésticos, assim como em humanos, tem origem mesenquimal e expressa receptores de estrógeno e de TGF 1 e as células gigantes do tumor não reagem com o clone 387, marcador de células de linhagem mielomonocítica. / Abstract: Giant cell tumor of bone are composed of 3 different cell types: round mononuclear stromal cells, spindle-shaped mononuclear stromal cells, and giant cells. Some authors assert giant cell could arise by fusion of mononuclear cell mielomonocytic. Aparently neoplasic fibroblast that expression TGF is involved in the recruitment of giant cells from tumor. For better understand of histogenesis, the involved of receptors estrogen and of expression of TGF receptors, achieved this study in this cases tumor in domestics cats. By using the immune-enzymatic Streptoavidin- biotin using the primary antibody anti-vimentin, clone VIM 3B4 (Dako A/s, Denmark); antibody myeloid/histocyte clone MAC 387 (Dako A/s, Denmark); antibody estrogen receptor clone 1D5 (Dako A/s, Denmark) and the antibody TGFb1 (Santa Cruz Biotechnology). The results analyzed for percent and standara deviation of marks cells for each antibody and permissive to come to a conclusion: the GCT of bone in domestic cats, like humans, has mesenchymal origin and has expression of estrogen receptors and of TGF"beta", and giants cells this tumor not react with the clone 387, mark the cells myeloidmonocyte lineage. / Mestre