Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / INTRODUCCIÓN Los Tumores Odontogénicos ( TO ) constituyen un grupo heterogéneo de lesiones, algunas de ellas, con potencial metastásico. Actualmente la clasificación usada para este tipo de lesiones, se basa en la publicada por la OMS el año 2005 que considera su comportamiento biológico, así como, el tipo de tejido odontogénico involucrado. En esta clasificación se realizaron cambios substanciales en relación a la del año 1992, incomporando lesiones, por ejemplo, el Tumor Odontogénico Queratoquístico ( TOQQ ) y aumentando el énfasis clínico-patológico-terapéutico en subdividir al Ameloblastoma en 4 tipos. Para una mayor comprensión del comportamiento clínico de éstas lesiones es necesario entender los mecanismos biológicos y moleculares involucrados en el desarrollo de estas, es por esto que el objetivo de este estudio es describir y comparar la expresión de proteínas, mediante inmunohistoquímica, relacionadas a proliferación celular ( ki-67 ) y apoptosis ( p53 y bax ) MATERIALES Y MÉTODOS Se tomaron 10 muestras de Ameloblastoma Sólido ( AS ) y 10 de TOQQ de entre los años 1998 y 2011, y se sometieron a inmunohistoquímica para ki67, p53 y bax. RESULTADOS Todas las muestras presentaron marcación positiva para los 3 anticuerpos. TOQQ y AS mostraron un índice de marcación de 6,45% y 13,98%, respectivamente. P53 presentó un 6,08% en AS y un 7,0% en TOQQ. Bax mostró un 58% para AS y un 64,65% en el caso de TOQQ. CONCLUSIONES El índice de expresión inmunohistoquímica para el marcador de proliferación celular ki-67, fue más alto para TOQQ que para AS. Pero no se encontraron diferencias estadísticamen significactivas en el caso de p53 y ni bax entre AS y TOQQ.

O RC-3095 é um novo antagonista sintético de receptores do tipo bombesina/fator de liberação da gastrina (BN/GRP), que produz longas remissões tumorais em modelos de tumores murinos e humanos. Nesta dissertação são apresentados os resultados de dois estudos relevantes para o início de seu desenvolvimento clínico. No primeiro deles, é descrito o seu método de análise no plasma humano. No segundo, são apresentados os resultados de um estudo de fase I em pacientes com câncer avançado, em que é avaliada sua segurança, bem como aspectos de sua farmacocinética no plasma e efeitos farmacodinâmicos. Vinte e cinco pacientes com tumores sólidos avançados e em progressão receberam RC-3095 diariamente através da via subcutânea em doses que variaram de 8 a 96 μg/kg. Foram coletadas amostras de plasma para estudo farmacocinético. Para o estudo farmacodinâmico, foram analisados gastrina, EGF, VEGF, IGF e b-FGF plasmáticos, bem como a expressão de EGFR, VEGFR e GRPR em pele normal e amostras tumorais. Houve apenas desconforto no local da injeção em pacientes tratados nos níveis mais altos de dose. Nenhuma outra toxicidade clínica foi observada no estudo. Nenhuma resposta tumoral objetiva foi documentada. Entretanto, uma regressão tumoral transitória foi observada em uma paciente com carcinoma medular da tireóide, cujo tumor apresentava uma alta expressão de receptores de GRP. Dois pacientes com câncer de próstata avançado obtiveram uma diminuição transitória dos níveis plasmáticos do PSA. Embora uma queda transitória de gastrina plasmática tenha sido demonstrada em alguns pacientes, não houve nenhuma correlação inibitória consistente do uso do RC-3095 em relação a gastrina plasmática. O estudo farmacocinético do RC-3095 mostrou uma meia-vida de eliminação de cerca de 8 horas. Uma dose do RC-3095 de 96 μg/kg produziu uma diminuição de 50% nos níveis de gastrina plasmática em um paciente hipergastrinêmico com a Síndrome de Zollinger-Ellison. O desconforto no local da injeção foi a única toxicidade dose limitante (TDL). Considerando o seu mecanismo de ação inovador e a sua baixa toxicidade sistêmica, futuros estudos clínicos com o RC-3095 deverão ser iniciados. / The novel BN/GRP synthetic receptor antagonist, RC-3095, was able to produce long-lasting tumor remissions in various murine and human tumor models. In this paper we present the results of two important studies of the beginning of its clinical development. The first one, it was described a method for quantification of RC-3095 in human plasma. The second paper shows the results of a phase I trial in patients with advanced cancer, with respect of safety profile, as well as pharmacokinetic and pharmacodynamic parameters. Twenty-five patients with advanced and progressive solid tumors received RC-3095 daily by subcutaneous route at doses ranging from 8 to 96 μg/kg according to a phase I methodology. Plasma samples were collected for pharmacokinetic studies. For the study of pharmacodynamic effects on RC-3095, plasma gastrin, EGF, VEGF, IGF and b- FGF levels, as well as EGFR, VEGFR and GRPR expression in normal skin and tumor samples were analyzed. Except for the occurrence of local discomfort at the injection site in patients treated at the highest dose levels, no other clinical toxicity was observed in the study. No objective tumor responses were documented. A minor response was observed in a patient with medullary carcinoma of the thyroid, who showed a high expression of GRPR in the tumor. Two patients with advanced prostatic cancer showed transient decrease in plasma PSA levels. Although a transient inhibitory effect was observed in some patients, there was no consistent inhibitory effect of RC-3095 on plasma gastrin or growth-factor levels in plasma. The plasma pharmacokinetics of RC-3095 showed an elimination half-life of about 8 hours. The dose of RC-3095 was 96 μg/kg was able to produce a decrease in plasma gastrin levels down to 50% of basal levels in a clearly hyper-gastrinemic individual with the Zollinger-Ellison syndrome. The dose-limiting toxicity was local discomfort at the injection site. Local discomfort at the injection site is the only dose –limiting toxicity. Considering its novel mechanism of action and its low systemic toxicity, further trials with RC-3095 are warranted.

Tumor de bexiga é o tipo de tumor mais comum que ocorre no trato urinário, originado a partir do epitélio estratificado da bexiga. A incidência em homens é maior do que em mulheres, está associado com a industrialização e relacionado com a origem ocupacional do paciente. Mais de 90% dos tumores de bexiga são devidos a alterações neste epitélio, sendo o principal tipo, o tumor nas células transicionais. A linhagem T24 de tumor de bexiga humana tem sido usada como modelo de tumor invasivo de bexiga. Nucleotídeos são uma importante classe de moléculas sinalizadoras, conhecidos por regular muitas funções pato-fisiológicas no espaço extracelular. O ATP extracelular é conhecido por mediar uma variedade de respostas biológicas no sistema nervoso central e periférico, principalmente pela ligação aos receptores acoplados à proteína G, P2Y ou pelos receptores ligados aos canais iônicos, P2X. A sinalização mediada pelos nucleotídeos é controlada por uma eficiente cascata enzimática que inclui os membros das ecto-nucleotidases ENTPDases, E-NPPs e ecto-fosfatases alcalinas as quais de formas diferenciadas podem gerar AMP que pode ser hidrolisado pela ecto-5’-nucleotidase (ecto-5’-NT, CD73) gerando adenosina. Muitos estudos têm indicado que o ATP extracelular exerce um efeito primordial no trato urinário e que suas ações são mediadas por receptores P2. Baseado na ampla distribuição das ecto-nucleotidases em vários tipos de tecidos e considerando a potencial participação destas enzimas na regulação da sinalização purinérgica em tecido de bexiga normal e tumoral, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade das ectoenzimas e a presença dos receptores purinérgicos nas células T24 de tumor de bexiga humano. Muitos estudos vêm demonstrando evidências da relação entre o sistema purinérgico e o crescimento tumoral. Nossos resultados mostraram que as células T24 apresentam uma extrema diminuição da capacidade de hidrólise dos nucleotídeos tri- e difosfatados quando comparada com os nucleotídeos monofosfatados, que apresentam uma alta capacidade de hidrólise. Os resultados obtidos pela hidrólise mostram uma baixa expressão das E-NTPDases, contrastando com uma significante atividade da ecto-5’- nucleotidase, e pelo menos um membro da família das E-NPPs. Muitos papéis fisiológicos para a família das E-NPPs têm sido descritos incluindo reciclagem de nucleotídeos e modulação da sinalização purinérgica. No presente estudo nós analisamos a atividade desta enzima na linhagem celular T24 em pH ótimo para as E-NPPs e em pH fisiológico para cultura de células. Curvas de tempo e substrato mostraram atividade das E-NPPs apenas no pH ótimo da enzima. A análise por RT-PCR mostrou a presença apenas da E-NPP1. Quanto à expressão das ecto-enzimas, nosso estudo mostrou que a linhagem T24 expressa apenas a E-NTPDase 5 (CD39L4) e não expressa as demais E-NTPDases. Nós identificamos todos os receptores P2Y nas células, dando suporte a idéia de que alterações no número de células tumorais pode ser devido a modulação da proliferação celular via receptores P2. Em nosso estudo também investigamos o efeito do ATP extracelular nas células T24, em diferentes concentrações e tempos de tratamento, mostrando que o ATP extracelular diminui significativamente o número de células. Estes dados indicam que as vias de sinalização purinérgica podem ter um importante papel na regulação das funções da bexiga urinária. Outros estudos são necessários para confirmar as funções do sistema purinérgico nos tumores de bexiga e as possíveis terapias antitumorais. / Bladder cancer is the most commonly tumor occurring in urinary tract, originating from normal stratified transitional epithelium of the bladder. The incidence in men is bigger than in women and is associated with industrialization and related to occupational origin. More than 90% of histological cell type of bladder cancer is transitional cell carcinoma. The T24 cell is a lineage of human bladder transitional cell carcinoma, and it has been used as model of invasive bladder cancer. Nucleotides, an important class of signaling molecules, are known to regulate many pathophysiological functions in the extracellular space. Extracellular ATP is recognized as an agonist that mediates a wide variety of biological responses in the central and peripheral nervous systems, largely by binding to either G protein-coupled receptors P2Y or ligand- gated P2X receptors. The nucleotide-mediated signaling is controlled by a highly efficient enzymatic cascade which includes the members of E-NTPDase (ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase) family, E-NPP (ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase) family and ecto-alkaline phosphatases. The AMP formed by the action of these enzymes is hydrolyzed to adenosine by the action of an ecto-5’-nucleotidase (ecto-5’-NT, CD73). Although several lines of evidence have indicated that extracellular ATP plays primordial role in the urinary tract and these actions are mediated by P2 receptors. Based on the wide distribution of ecto-nucleotidases in various tissues and considering the potential participation of these enzymes in the regulation of purinergic signaling in normal and tumoral bladder tissues, the objective of the present study was to examine the activity of ecto-enzymes and the presence of the purinergic receptors in T24 human bladder tumor cell line. Several studies have demonstrated evidence for the relation between the purinergic signaling and tumor growth. Our results show that T24 cell line presents an extremely decreased capacity to hydrolyze all tri- and di-phosphate nucleosides when compared to the nucleoside monophosphates, which have a higher capacity to hydrolyze. The results obtained show a low expression of E- NTPDases, contrasting to a significant activity of ecto-5’-nucleotidase, and at least one of the enzymes family of E-NPPs. Multiple physiological roles for E-NPPs have been related, including nucleotide recycling and modulation of purinergic receptor signaling. In the present study, we describe an enzyme activity in T24 cell line in the optimum pH for ENPP and in physiological pH to the culture cells. Time and substrate curve have shown an E-NPP activity only in the enzyme optimal pH. The RT-PCR analysis showed the presence of only the E-NPP1. Regarding the expression of the ecto-enzymes, our study has showed that the T24 cell line expresses only the E-NTPDase 5 (CD39L4) and does not express the other E-NTPDases. We have identified all P2Y receptors in the cell line studied supporting the idea that the alteration of cancer cell number might be due to modulation of cell proliferation via P2 receptors. In this study we also investigated the effects of extracellular ATP in T24 cell line in different concentrations and times of treatment. As shown, the extracellular ATP decreases significantly the cell number. These data could indicate that the purinergic signaling pathways may play an important role in regulating urinary bladder function. Further studies to provide functions for the purinergic system in bladder tumor will be necessary to improve the possibilities of antitumor therapies.

Orientadores: Aloisio Jose Bedone; Liliana Ap. L. De Angelo Andrade / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T12:21:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa-Gurgel_MariaSalete_D.pdf: 3922825 bytes, checksum: d82da418a6bc6d616462fcc183a7fc54 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A conceituação do carcinoma microinvasivo do colo uterino tem sido muito polêmica, ocasionando controvérsias também quanto à sua melhor conduta terapêutica. Através de análise retrospectiva das 186 mulheres portadoras desta neoplasia, tratadas no Setor de Oncologia Ginecológica do Departamento de Tocoginecologia da FCM/UNICAMP no período de julho de 1967 a julho de 1994, buscamos estabelecer os fatores epidemiológicos e histológicos associados a um maior risco de recidiva e óbito pela doença, bem como avaliar a proposição terapêutica utilizada no Serviço ao longo do tempo. Os casos foram submetidos à revisão anatomopatológica e reestadiados segundo a nova classificação da FIGO, proposta em 1994, no Congresso Mundial do Canadá. Não foi observada influência da idade ao início da atividade sexual, tempo de atividade sexual, número de parceiros sexuais e número de partos na freqüência de recidivas e na sobrevida livre de doença. As mulheres éujo diagnóstico de microinvasão ocorreu com 50 anos ou mais de idade tiveram uma sobrevida livre de doença significativamente menor que o grupo com idade ao diagnóstico inferior a 50 anos. Em relação aos aspectos histológicos, não foi encontrada influência do estadiamento, das medidas da profundidade e da extensão horizontal da microinvasão, de seu aspecto focal ou extenso, da presença ou não de invasão vascular do estroma e de sinais de infecção pelo HPV e, também, do comprometimento das margens cirúrgicas da conização na ocorrência de recidivas e na sobrevi da livre de doença. Porém, as pacientes que apresentaram tumor residual na cirurgia complementar pós-conização tiveram uma sobrevi da livre de doença significativamente menor em comparação com o grupo cuja neoplasia foi totalmente retirada na conização. Finalmente, ao se avaliar a adequação do tratamento realizado em comparação com a proposta terapêutica atual, não observou-se alteração significativa na sobrevida livre de doença quando os casos foram considerados tratados de forma correta, excessiva ou incompleta / Abstract: The concept of microinvasive carcinoma of the uterine cervix still remains a major debate, leading to discussions about the best therapeutic management. A hundred and eighty-six women with this diagnostic were treated at the Oncology Clinic of the Gynecology and Obstetrics Department of FCM/UNICAMP, from July 1967 to July 1994. Through a retrospective analysis, we tried to establish the epidemiological and histological factors associated to a high risk of recurrence and death, and also to evaluate the therapeutic proposition used at the Service during that period. The cases were submeted to histological revision and staged according to the new FIGO's classification, proposed in 1994, at the World Congress of Canada. There was no influence of age at first intercourse, interval between age at diagnosis and age at first intercourse, number of sexual partners and number of deliveries on the frequency of recidiv.es and disease free survival. Disease free survival was significantly lower when microinvasion diagnosis was made in women at or over 50 years than in those diagnosed earlier. Regarding the histological factors, there was no influenC;e of staging, depth and lenght of the microinvasion, focal or extensive pattern, the presence or not of vascular space invasion, signs of HPV infection and the state of conization surgical borders on the occurrence of recidives and disease free survival. However, patients presenting residual tumor at the complementary surgery had a disease free survival significantly lower compared to the group which lesion was totally removed at conization. There was no significant change in the disease free survival when cases were considered as being tre.ated in a correct, excessive or incomplete way, if we compare with the current therapeutic proposal / Doutorado / Doutor em Tocoginecologia

Orientadores: Sophie Françoise Mauricette Derchain, Kazue Panetta, Venancio Avancini Ferreira Alves / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T01:25:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Martins_CeciliaMariaRoteli_M.pdf: 3183591 bytes, checksum: 579334ce540fe96c88e403f90c7612a2 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Os objetivos deste estudo foram avaliar a prevalência de NIC 2 e 3 em mulheres sexualmente ativas, com alterações compatíveis com infecção por HPV na colpocitologia e na colposcopia, verificando a distribuição das mulheres segundo o diagnóstico histopatológico de cervicite, NIC 1 e NIC 2 e 3, com relação a cor, escolaridade, estado conjugal, número de parceiros, idade ao início da atividade sexual, uso de anticoncepcional hormonal, paridade e idade. Investigou-se, também, a associação entre o hábito de fumar, as infecções vaginais, o pH vaginal, o tipo DNA viral diagnosticado pela captura de híbridos e os resultados da colpocitologia, com as lesões cervicais determinadas pela biópsia. É um estudo observacional de corte transversal, realizado com 100 mulheres de 20 a 35 anos de idade, atendidas no Serviço de Patologia Cervical do Hospital Maternidade "Leonor Mendes de Barros" e do "Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher". Para análise bivariada e múltipla utilizaram-se os métodos de Qui-quadrado, o teste exato de Fisher e a regressão logística, com limite de confiança de 95%. A prevalência de NIC 2 e 3 foi de 23%. Os grupos de cervicite, NIC 1 e NIC 2 e 3 foram semelhantes em relação a cor, escolaridade, estado conjugal, número de parceiros, idade ao início da atividade sexual, uso de anticoncepcional hormonal e paridade. O aumento da idade e o hábito de fumar estiveram significativamente associados com a gravidade da lesão cery ica I. A prevalência de Gardnerella vaginalis foi significativamente maior nas pacientes com NIC 2 e 3. O Mobiluncus sp, Trichomonas vaginalis e a Chlamydia trachomatis apresentaram uma distribuição semelhantes nos três grupos. Entretanto, a Candida sp apresentou uma tendência a ser mais freqüente nas pacientes com cervicite e NIC 1. Houve uma associação significativa entre NIC 2 e 3 e a detecção de DNA-HPV de alto risco oncológico. Concluímos que, nesta amostra de mulheres com alterações compatíveis com infecção por HPV na colpocitologia e colposcopia, a idade acima de 25 anos, o I hábito de fumar, a presença de Gardnerella vaginalis e a presença de HPV de alto risco oncológico, estiveram altamente associados com NIC 2 e 3 / Abstract: The target of this study was to evaluate the NIC 2 and 3 prevalence in sexually active women, with colpocitology and colposcopy showing changes compatible with HPV infection. It was verified the distribution of women according toe histopathologic diagnostic of cervicite, NIC 1 and NIC 2 and 3, with respect to color, schooling, marital status, number of sexual partners, age of first sexual intercourse, oral contraceptive use, parity and age. Also, It was investigated the relationship between smoking habit, vaginal infections, vaginal pH, viral DNA type diagnostic by hybrid capture.. and the colpocitology results, with the cervical lesions showed by biopsy. This is a cross sectional observation study carried out on 100 women, between 20 and 35 years of age, attended in the cervical pathology department of "Hospital Leonor Mendes de Barrosl" and "Centro qe Atenção Jntegral à Saúde da Mulher - CAISM." The data analysis was done with Chi-Square, Fisher test and logistical regression, with 95% confidence interval. he NIC 2 and 3 prevalence was 23%. The cervicite, NIC 1, NIC 2 and 3 groups' were similar in respect to color, schooling, marital status, number of sexual partners, age of first sexual intercourse, oral contraceptive use and parity. However, the increase in age and the smoking habit was significantly associated with the severity of cervical lesion. The Gardnerella vaginalis prevalence was significantly higher in patients with NIC 2 and 3. The Mobiluncus sp, Trichomonas vaginalis and Chllamydia trachomatis showed similar distribution in the three groups. However, the Candida sp showed a tendency to be more frequent in patients with cervicite and NIC 1. The association between NIC 2 and 3 and the detection of high risk DNA-HPV was significant. We concluded that, in this group of 100 women with changes in colpocitology I and colposcopy compatible with HPV infection, the age above 25, the smoking I habit, the presence of Gardnerella vaginalis and the presence of HPV of high oncological risk, was strongly associated with NIC 2 and 3 / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Medicina

Orientador: Christine Hackel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T23:45:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcolan_CleberFontoura_M.pdf: 3154802 bytes, checksum: d168e706cbc62d8d92fa0091bd7eaf18 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Do ponto de vista citogenético, as associações entre alterações cromossômicas específicas e diferentes tipos de neoplasias hematológicas estão bem estabelecidas. Porém, as associações teloméricas (tas), que são associações que envolvem as regiões terminais dos cromossomos, conhecidas como telômeros, são observadas esporadicamente em processos neoplásicos, questionando-se seu potencial como indicador biológico de exposição ocupacional à agentes genotóxicos do meio ambiente. Tais associações podem ser derivadas da redução do comprimento do telômero e da inibição da telomerase, refletindo-se em instabilidade cromossômica. Com o objetivo de analisar o cariótipo e verificar a ocorrência das tas em SMD e leucemias mielóides, foram analisadas metáfases de células de aspirado de medula óssea de 30 pacientes (10 SMD, 10 LMA e 10 LMC), em sua maioria, provenientes da zona rural. A comparação dos dados relativos a freqüência de tas nos diferentes grupos de neoplasias hematológicas foi realizada pelo teste não paramétrico de Kruskal Wallis, adotado o nível de significância de 5%. Na análise do cariótipo das SMD, as alterações clonais encontradas foram a monossomia do cromossomo 7, associada à monossomia dos cromossomos 13 e 20, a trissomia dos cromossomos 21, 15 e 19 e a tetrassomia do cromossomo 22. Também foram observados novos rearranjos estruturais envolvendo as regiões 2q37, 4q35, 7p22, 9p11, 12p13, e 12q24. Dentre as alterações cromossômicas de natureza clonal encontradas em LMA, destacaram-se a trissomia do cromossomo 14 e as monossomias dos cromossomos 1, 7 e 22, a deleção do braço longo do cromossomo 7 e a presença do cromossomo Philadelphia. Nas LMC, os resultados da análise do cariótipo revelaram a presença do cromossomo Philadelphia (Ph), como principal alteração de natureza clonal, sendo observado também, um segundo cromossomo Ph e a nulissomia do Y como alterações cromossômicas secundárias em alguns pacientes. Outras alterações de natureza não-clonal foram observadas ocasionalmente, como poliploidias, hipo e hiperdiploidias, cromossomos marcadores, quebras cromatídicas e separação precoce de centrômero. Em relação às tas, nossos resultados mostraram a presença desse fenômeno em todos os pacientes com SMD e LMA e em 8 dos 10 pacientes com LMC. A freqüência de tas foi mais elevada nas SMO; as LMA apresentaram freqüência intermediária e as LMC apresentaram freqüência mais baixa. A comparação das freqüências de metáfases com associações teloméricas entre os três grupos de neoplasias hematológicas apresentou diferença significativa entre SMO e LMC (p <0.01), enquanto não foram observadas diferenças significativas das LMA em relação às SMO (p > 0.05) e das LMA em relação às LMC (p > 0.05). Tendo em vista os resultados obtidos, é possível que os agroquímicos possam ser inibidores da atividade de telomerase, atingindo preferencialmente as células tronco da medula óssea, desencadeando assim uma perda de repetições teloméricas, cuja expressão citogenética inicial seria representada pelas tas. Desse modo, as tas poderiam ser consideradas indicadores de instabilidade cromossômica relacionada à exposição aos genotóxicos do meio ambiente. No entanto, nossos dados são apenas indicativos, pois na casuística por nós examinada há um predomínio de indivíduos do meio rural, não sendo possível comparar os dados com indivíduos não-expostos ocupacionalmente a esses produtos, sendo necessário posteriores estudos citogenéticos e moleculares para a investigação do encurtamento dos telômeros e da atividade da telomerase nas tas, em indivíduos expostos e não expostos a agroquímicos / Abstract: The associations between specific chromosomal abnormalities and different types of hematological neoplasias are well established. However, telomeric associations (tas), which are associations between termini regions of chromosomes (telomeres), are sporadicly observed in neoplasias, leading to the question about their role as a biological indicator of occupational exposure to environmental genotoxic agents. These associations can arise in consequence of shortening telomere length and the inhibition of telomerase activity, reflecting in chromosomal instabiblity The objective of this work was to determine the karyotype and to verify the occurrence of tas in MOS and acute or chronic myeloid leukemias (AML and CML). Metaphases of bone marrow cells of 30 patients (10 with MOS, 10 with AML and 10 with CML) were analyzed. The comparison of tas frequency data in these different hematological neoplasias was realized by the Kruskal Wallis test with significance levei of 5%. In the MOS patients, the clonal cytogenetic abnormalities findings were: monosomy of chromosome 7 in association with monosomy of chromosomes 13 and 20, trisomy of chromosomes 15, 19, 21, and tetrasomy of chromosome 22. New structural rearrangements were observed involving the 2q37, 4q35, 9p11, 12p13, 7p21 and 12q24 regions. Non-clonal chromosomal abnormalities were observed in AML,such as the trisomy of chromosome 14 and monosomy of chromosomes 1, 7 and 22, deletion of short arm of chromosome 7 and the presence of Philadelphia (Ph) chromosome. In CML, the results showed the presence of Ph chromosome as the principal clonal abnormality, as expected. An extra Ph chromosome and monosomy of chromosome Y, which are secondary chromosomal abnormalities, were also observed in some patients. Other non-clonal abnormalities such as poliploidy, hipodiploidy, hiperdiploidy, marker chromosome, chromatid break and precoce centromere division were occasionally observed. Wrth regard to tas, our results showed the presence this phenomenon in ali patients with MOS, AML and in eight among ten patients with CML. The frequency of metaphases with tas was higher in MOS; AML showed intermediate frequency and CML lower frequency. The comparison of these data showed significative difference between MOS and CML (p<O.O1), whereas no significative levels between AML regard to MOS (p>O.O5) and CML (p>O.O5) were detected. Considering our results, it's possible to suppose that agrochemicals can be inhibitors of telomerase activity, preferentially attaining the stem cells of bone marrow, leading to the loss of telomeric sequences and to the cytogenetic expression of tas. Thus, tas can be considered an indicator of chromosomal instability, related to environmental exposure to pesticides. However, our data are only indicative, because in the present study, there was a predominancy of individuais from rural zone, not allowing us to compare these data with occupational non-exposed individuais. Additional cytogenetics and molecular studies should be performed to investigate the relationship between telomerase activity and shortening telomere length with tas, in patients with hematological disease, exposed or non-exposed to environmental genotoxic agents such as pesticides / Mestrado / Biologia Celular / Biologia Celular e Estrutural

Orientadores : Sophie Françoise Mauricette Derchain, Liliana Ap. Lucci de Angelo Andrade / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T20:25:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kusamura_Shigeki_M.pdf: 1370354 bytes, checksum: 947a904cf0349b72bf5c76419ada061d (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Objetivo: investigar em tumores de células da granulosa do ovário (TCGO) a credibilidade de seu diagnóstico com coloração H&E e a expressão do p53 mutante, do c-erbB-2, Ki-67, PCNA e a atividade angiogênica (CD34), bem como as correlações destes marcadores com características clínicas e histológicas. Sujeitos e método: Três patologistas (A,B e C) reavaliaram os 22 casos de TCGO tratados no CAISM/UNICAMP nos últimos 12 anos, sendo os marcadores detectados através de imuno-histoquímicas em cortes histológicos preparados a partir de blocos de parafina. Foram calculados os coeficientes kappa para avaliação da concordância interobservador entre os patologistas. A análise de associação entre as variáveis categóricas foi realizada com o teste exato de Fisher e entre variáveis categóricas e contínuas, com teste de Mann- Whitney. Resultados: Vinte e um casos foram confirmados como TCGO. Quatro casos foram diagnosticados como TCGO, mesmo sem unanimidade entre os patologistas devido à imunorreatividade para a inibina. Os coeficientes kappa foram de 0,42 (IC95%: -0,05; 0,88); 0,50 (IC95%: 0,13; 0,86); 0,24 (IC95%: -0,14 a 0,61), respectivamente para as duplas de patologistas A/B, A/C e B/C. A IHQ para os marcadores foi realizada em 18 pacientes. Nove (50%) pacientes apresentaram tumores <10cm. Treze (72%) pacientes apresentaram algum componente sólido difuso/sarcomatóide. Em 12 (66%) casos a atipia celular era ausente/leve e em 6 (33%) casos, moderada/intensa. A contagem mitótica foi < 2/10 CMA em 14 (78%) casos. Seis (33%) pacientes apresentaram extensão extra-ovariana da doença (estádios III/IV). O seguimento médio foi de 45,3 meses (0,7 a 128,8). Uma, zero e 11 pacientes apresentaram expressão para o p53 mutante, c-erbB-2 e Ki-67 (focal), respectivamente. Quatorze (78%) casos foram classificados como de alto índice de proliferação, quando avaliados pelo PCNA. A densidade microvascular média foi de 29,0/mm2 (CI95%: 21,8 a 36,1). Apenas o Ki-67, PCNA e o CD34 foram expressos em níveis adequados para uma adequada correlação com outras variáveis. Não houve associação estatisticamente significante entre o índice de proliferação dos tumores (avaliada pelo PCNA), ou Ki-67 ou densidade microvascular com o tamanho do tumor, extensão extra-ovariana da doença, atividade mitótica, atipia celular e padrão histológico. Conclusão: Em nossa casuística, o estudo dos TCGO através da IHQ revelou neoplasias cujo mecanismo de desenvolvimento aparentemente não envolve mutações do p53 e nem expressão aumentada do c-erbB-2; apresentaram resultados conflitantes no que diz respeito ao índice de proliferação celular conforme foram avaliados pelo Ki-67 ou PCNA e, finalmente, são pouco angiogênicos quando avaliados pelo CD34 / Abstract: The purpose of this study was to investigate the credibility of diagnosis of granulosa cell tumor of ovary (GCTO) through the morphological evaluation employing only H&E staining. We also evaluated the expression of mutant p53, c-erbB-2, Ki-67, PCNA as well as angiogenic activity (CD34) and the correlation of these variables with clinical and histological characteristics. Three well trained pathologists (A, B, and C) reevaluated the slides of 22 GCTO patients that had been treated and followed at the CAISM/UNICAMP in the last 12 years. The interobserver agreement was studied calculating kappa coefficient. We employed the Fisher Exact test to assess the correlation between categorical variables and the Mann-Whitney test for the correlation between categorical and continuous variables. Twenty one cases were deemed GCTO after evaluation. Four cases received the diagnosis of GCTO due to positive reaction to inhibin, despite the divergent opinion of one the pathologist. The kappa coefficients were 0.42 (IC95%: -0.05; 0.88); 0.50 (IC95%: 0.13; 0.86); and 0.24 (IC95%: -0.14 a 0.61), for pairs A/B, A/C and B/C observers, respectively. We performed immunohistochemistry for the biological markers in 18 cases. Concerning the clinical and histological variables: 9 (50%) patients presented tumor size <10cm; 13 (72%) patients presented some solid diffuse/sarcomatoid pattern; 12 (66%) cases presented no/slight atypia and 6 (33%) cases presented moderate/strong atypia; 14 cases presented < 2 mitoses/10 HPF; 6 (33%) patients presented extraovarian extension of the disease (stage III/IV). The mean follow-up was 45.3 months (range: 0.7 to 128.8). One, 0 and 11 cases presented positive expression for mutant p53, c-erbB-2 e Ki-67 (focal), respectively. Fourteen (78%) cases were classified as high proliferating index when evaluated by PCNA. The mean microvascular density was 29,0/mm2(IC95%: 21,8 to 36,1). Only Ki-67, PCNA and CD34 were expressed at adequate levels for further correlation with other variables. There was no statistically significant link between either the PCNA proliferating index or the Ki-67 expression or microvascular density with tumor size, extraovarian extension of disease, mitotic activity, cellular atypia and histological pattern. We concluded that the diagnosis of GCTO is difficult in some cases, suggesting the evaluation be complemented with a panel of markers such as inhibin. We also verified that GCTO is a neoplasm that apparently did not involve mutations of p53 nor overexpression/amplification of c-erbB-2; presented conflictings results concerning the proliferating activity when evaluated by PCNA and Ki-67; and finally presented a low angiogenic activity when evaluated by CD34 / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Orientador : Carmen Silvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-31T14:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Grillo_LauraBrunellidasNeves_M.pdf: 8891094 bytes, checksum: 1191266bfaa92c5a96cfc6ec7178211e (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A Sfndrome de Down, ou Trissomia do 21 é uma aberração cromossômica numérica, sendo a causa genética mais freqüente de retardamento mental moderado. Em 95% dos casos de Síndrome de DOWIlocorre um processo de não-disjunção na meiose materna. Estudos recentes associam o fenômeno de não-disjunção à hipometilação do DNA. A MTHFR atua no metabolismo do ácido fólico e tem como produto intermediário a formação do SAM que é o doador de grupos metil para o DNA. Assim, os indivíduos deficientes em MTHFR deveriam ter uma menor disponibilidade de grupamentos metil e assim estariam sujeitos a erros na divisão celular. Em nosso estudo analisamos as duas mutações mais freqüentes no gene da MTHFR em 36 mães de portadores de Síndrome de Down e em 200 indivíduos controle. Os resultados demostraram um acúmulo de mães heterozigotas compostas para as duas mutações, fenótipo que causa uma redução enzimática importante, sugerindo que a deficiência da MTHFR deve ser um fator de risco importante para a Síndrome de DOWIl / Abstract: The Syndrome of Down, or Trissomia the 21 it is an aberration numenc cromossômica, being the more ftequent genetic cause of moderate mental retardation. In 95% of the cases of Syndrome of Down it happens a process of no-disjunção in the maternal meiose. Recent studies associate the phenomenon of no-disjunção to the hipometilação of the DNA. MTHFR acts in the metabolism of the acid fólico and she has as intermediary product the formation of SAM that is the donor of groups methyl for the DNA. Thus, the faulty individuaIs in MTHFR should have a smaller readiness of grupamentos methyl and they would be like this subject to mistakes in the cellular division. In our study we analyzed the two more ftequent mutations in the gene ofMTHFR in 36 mothers of carriers of Syndrome of Down and in 200 individuaIs control. The results demostraram an accumulation of mothers heterozigotas composed for the two mutations, phenotype that it causes an important enzymatic reduction, suggesting that the deficiency of MTHFR should be a factor of important risk for to Syndrome ofDown. Keywords: Down Syndrome, meiosis, abnormal segregation chromosomal, MTHFR / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Jose Vassallo, Luciano de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-01T20:24:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barreto_AnaSilviaCarvalhodeMenezes_M.pdf: 10019834 bytes, checksum: 2ccd29563921665a5025ecca500b7ce1 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: INTRODUÇÃO: os tumores do plexo coróide (TPC) são raros. A literatura mostra grande variação na reatividade imunoistoquímica de diversos marcadores. Os resultados são controversos, mesmo em relação ao perfil imunoistoquímico do plexo coróide. OBJETIVOS: estudar o padrão imunoistoquímico dos TPC para obter dados úteis no diagnóstico diferencial de tumores anaplásicos; comparar os achados com o perfil imunoistoquímico de plexos coróides fetais normais (pCFN) e avaliar se durante o processo de transformação neoplásica as células readquiram características fetais. MATERIAL E MÉTODOS: 13 TPC foram diagnosticados entre 1966 e 1999 em pacientes até 25 anos: 5 papilomas (PP), 2 carcinomas bem diferenciados (BCA), 6 carcinomas pouco diferenciados (PCA) e 5 plexos coróides fetais normais (pCFN). Estes foram submetidos a estudo imunoistoquímico em cortes parafinados, utilizando-se um painel incluindo marcadores epiteliais, neuronais e mesenquimais. RESULTADOS / CONCLUSÕES: a pancitoqueratina AE1/AE3 foi fortemente positiva em todos 13 casos, inclusive nas áreas pouco diferenciadas dos PCA, onde a reatividade foi focal em 3 e difusa em 3 casos. Em contraste com a literatura, citoqueratina de baixo peso molecular (35'beta'H11) não foi expressa em nenhum dos 8 casos de carcinoma, mas esteve presente nos 5 PP. Em 4/6 PCA houve imuno-reatividade para actina de músculo liso (1A4) em 10 a 30% das células. Isto foi verdadeiro também para um caso onde não havia células do tipo rabdóide. Em contraste com a literatura, a lamininanão foi de ajuda no diagnóstico dos PCA, pois não foi detectada nos 6 casos. Em todos os PCFN houve positividade para OFAP e negatividade para 35'beta'H11. A reação imunohistoquímica para 35'beta'H11 nos casos de PCFN assemelhou-se aos resultados dos 8 casos de carcinoma e diferiu dos 5 PP. Este fato pode indicar que durante a transformação maligna as células neoplásicas readquirem alguns marcadores imunoistoquímicos presentes nas células fetais / Abstract: Background: Choroid plexus tumors (CPT) are rare. Literature shows great variation in immunohistochemicalreactivity of several markers. Results are controversial even regarding the immunohistochemicalprofile of normal choroid plexus. Objectives: To study the immunohistochemical pattem of CPT, in order to obtain helpful data for differential diagnosis of anaplastic tumors. To compare the findings with the immunoprofileof normal fetal choroid plexus (NFCP) to evaluate whether during neoplastic transformation the cells regain fetal features. Material & Methods: 13 CPT were diagnosed in our service between 1966 and 1999 in patients up to 25 years old: 5 papillomas (PP), 2 well differentiated carcinomas (WCA), 6 poorly differentiated carcinomas (PCA) and 5 NFCP were submitted to immunohistochemical study on paraffin sections using a panel including epithelial, neuronal and stromal markers. Results/Conclusions: Pancytokeratin AE1/AE3 was strongly positive in all 13 cases, even in the undifferentiated component of PCA, where reactivity was focal in 3 and diffuse in 3 cases. In contrast with the literature, low molecular weight cytokeratin (35'beta'H11) was not expressed in any of the 8 cases of carcinoma, but was present in all 5 PP. In 4/6 PCA there was reactivity for smooth muscle actin (1A4) in 10 to 30% of the cells. This was true also for one case lacking rhabdoid cells. In contrast with the literature laminin was not a helpful tool in the diagnosis of PCA, as it was undetectable in all 6 cases. All 5 NFCP expressed GFAP, in contrast with previous reports. Lack of expression of 35'beta'H11among NFCP (0/5 cases) was similar to what was observed in carcinomas, and differed from expression in ali of PP. This may indicate that upon malignant transformation neoplastic cells regain some immunohistochemical features of fetal cells / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Fernando Cendes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:35:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Faria_AndreiaVasconcellos_D.pdf: 7173375 bytes, checksum: b7fd2619bd07968cace6aaf75c61751e (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: A espectroscopia de hidrogênio por ressonância magnética (ERM 1H) clinica in vivo, é um método não invasivo e uma eficiente ferramenta diagnóstica. A ERM 1H in vitro, realizada em altos campos magnéticos, pode ser usada no estudo de cadeias metabólicas alteradas que caracterizam diferentes patologias do sistema nervoso central, como os tumores, fornecendo, em alguns casos, indícios sobre o tipo histológico específico. Analisamos amostras de tecido tumoral de pacientes portadores de neoplasias do sistema nervoso central através de ERM 1H clínica (Bo = 2 T) e em alto campo (Bo = 11,7 T). A análise discriminatória parcial da ERM 1H in vitro revelou que glicina e mio-inositol são os principais metabólitos responsáveis pela diferenciação de tumores neurogliais de acordo com seu grau de agressividade e que as metástases têm taxas muito baixas de mio-mositol. Na ERM 1H in vivo outros compostos como creatina, N-acetil aspartato, colina e lactato diferenciaram os tumores dos controles normais em todos os pacientes, em concordância com os resultados in vitro. A classificaçãodo tipo histológico pela análise in vivo da ERM 1H ocorreu em 82% das vezes, variando de 50% de acerto (nos glioblastomas) até 100% (nos meduloblastomas). Estes resultados contribuem para a meJhor compreensão da biologia dos tumores cerebrais, refletindo destruição e substituição do tecido normal e anormalidades metabólicas que podem estar relacionadas ao rápido "turnover", indiferenciação, habilidade em sobreviver em meios adversos (hipóxia e estresse osmótico e hiper-osmolar) e resistência a apoptose da célula tumoral. A meJhor caracterização pela ERM 1H in vitro de substâncias específicas presentes nos diversos subtipos histológicos pode ser relevante para otimização dos protocolos de ERM 1H in vivo / Abstract: Proton magnetic resonance spectroscopy (1HMRS) in vivo is a noninvasive method and represents a powerful tool in tumor diagnosis. High field 1H MRS in vitro can be used to study metabolic changes and pathways that tcharacterize distinct pathologies, including brain tumors. We analyzed brain tissue samples from patients with different types of brain tumors by clinical (Bo = 2T) and high field (Bo = 11,7T) 1H MRS. Partial Least Square Discriminant Analysis at high field 1H MRS revealed glycine and mio-inositol as the main metabolites toot allowed differentiation according to degree of aggressiveness in neuroglial tumors and metastasis showed very low signal intensities of mio-inositol. Other compounds, including creatine, N-acetyl aspartate, choline and lactate, differentiated tumor from normal tissue in all patients in vivo, in agreement with in vitro results. In vivo 1H MRS allowed the classification of tumor according to the hystological type in 82% of the patients. The positive correlation varied from 50% (in glioblastomas) to 100% (in medulloblastomas). These results contribute to the better understanding of the biology of brain tumors. Our findings retlect the destruction of normal tissue and metabolic abnormalities in tumor cells that can be related with their high turnover, dedifferentiation, ability to survive in adverse environments (hypoxia, osmotic and metabolic stress) and resistance for apoptosis. Further characterization of individual metabolites by 1H-MRS in vitro related to specific histological subtypes of brain tumors might be relevant for optimizine;in vivo 1H-MRS protocols / Doutorado / Neurociencias / Doutor em Fisiopatologia Medica