La découverte du rôle des insectes en tant que vecteurs de pathogènes, établi depuis plus d'un siècle, a été l'élément moteur de la discipline « entomologie médicale et vétérinaire ». Malgré le succès de nombreuses campagnes de prévention et de programmes de lutte, nous assistons depuis une trentaine d'années à l'émergence et à la recrudescence de maladies à transmission vectorielle. Le virus de la fièvre catarrhale ovine (FCO) (Reoviridae : Orbivirus) est un très bon exemple de virus émergent en Europe dont les mécanismes de transmission sont encore peu connus dans cette région. Ce virus est transmis par des moucherons hématophages du genre Culicoides (Diptera : Ceratopogonidae) aux ruminants sauvages et domestiques. En Europe, la FCO a été pendant longtemps considérée comme une maladie exotique. À partir de 1998, plusieurs incursions apparaissent dans l'ouest du bassin méditerranéen en lien avec la remontée vers le nord de populations de Culicoides imicola, le principal vecteur afrotropical. À partir d'août 2006, l'apparition et la transmission du sérotype 8 dans le nord de l'Europe, dans des zones où C. imicola est absent, révèle l'importance des espèces autochtones et la nécessité de comprendre leur rôle vecteur. Ce travail s'intéresse aux mécanismes de transmission du virus de la FCO en Europe non méditerranéenne, en i) présentant un état de l'art de la biologie et l'écologie des Culicoides adultes, ii) en évaluant les conditions possibles d'utilisation de pièges pour estimer le taux de piqûre et iii) en décrivant les comportements trophiques pour les espèces d'intérêt vétérinaire. / The discovery of insects as pathogens vectors was established for over a century and was the driving force behind the discipline “medical and veterinary entomology”. Despite the success of some prevention and control program campaigns, the emergence and spread of vector-borne diseases occurred dramatically during this last thirty years. Bluetongue virus (BTV) (Reoviridae: Orbivirus) is a good example of emerging virus in Europe, with a little understanding of the epidemiology of this disease. This virus is transmitted by blood-sucking midges of the genus Culicoides (Diptera: Ceratopogonidae) to wild and domestic ruminants. In Europe, BT was considered an exotic disease. In 1998, several incursions appeared in the western Mediterranean Basin in line with the northward progression of C. imicola populations, the main afrotropical vector. From August 2006, the emergence and transmission of serotype 8 in northern Europe, in areas where C. imicola is absent, revealed the importance of autochthonous species and the urgent need to understand their role as vector. This work gives new insights into the understanding of BTV transmission in northern Europe: i) presenting a state of the art review of the biology and ecology of Culicoides adults, ii) assessing different methods to study the biting rate and iii) highlighting trends in host-seeking behavior.

Chez les eucaryotes supérieurs, la progression ordonnée du cycle cellulaire est régie par une dizaine de kinases Cdk-cyclines. Les altérations génétiques ou épigénétiques impliquant des oncogènes ou des gènes codant pour des suppresseurs de tumeurs sont souvent associées à l'expression ou l'activation aberrante des Cdks, favorisant ainsi la prolifération cellulaire incontrôlée et notamment le développement de cancers. Malgré la pertinence oncogénique et thérapeutique de ces protéines, leur détection est restée jusqu'à présent limitée à des méthodes indirectes et invasives. Dans ce contexte, mes travaux de thèse ont permis de développer un biosenseur peptidique fluorescent permettant de reconnaître spécifiquement les Cdk-cyclines. Associé à une stratégie de vectorisation non invasive basée sur l'utilisation de peptides vecteurs pénétrants, le biosenseur a été délivré efficacement dans les cellules. La mise au point d'une quantification ratiométrique du signal a par ailleurs permis d'évaluer l'abondance relative des Cdk-cyclines endogènes. Deux variants plus spécifiques de certains complexes ont pu être développés. Enfin, d'autres versions du biosenseur ont quant à elles permis d'évaluer sa biodistribution in vivo et de mettre au point un essai cellulaire en vue d'un criblage de petites molécules ayant un effet sur l'abondance relative des Cdk-cyclines. / Cdk-cyclins represent key regulators of cell cycle progression among superior eukaryotes. Genetic and epigenetic alterations involving oncogenes or tumor suppressor genes are often associated with aberrant expression or activation of Cdks, leading to the sustained proliferation of cells and by the way to the development of cancers. Despite the oncogenic and therapeutic relevance of these proteins, their detection has so far remained limited to indirect and invasive methods. My Ph.D. thesis work aimed in this context at developing peptidic fluorescent biosensors that specifically recognize Cdk-cyclins. Combined to cell-penetrating peptides, the biosensor was efficiently delivered into cells. Following the development of the signal ratiometric quantification, the relative abundance of endogenous Cdk-cyclins was directly evaluated in living cells. Two other variants, that are more specific towards specific Cdk-cyclin complexes, were also designed. Finally, the development of novel versions of the biosensor allowed us to evaluate its biodistribution in vivo and to set up a cell-based assay to screen small molecules having an effect on Cdk-cyclin relative abundance.

Cette étude de cas concerne des enfants âgés de 7 à 9 ans et demi, placés face à un instrument de musique informatique qu’ils n’ont jamais utilisé. Il s’agit de vérifier qu’un enfant, devant cet instrument, peut fabriquer une musique, sa musique, et d’étudier les vecteurs dynamiques orientant son activité musicale exploratoire. Nous émettons l’hypothèse qu’elle est bien évidemment musicale, mais surtout indépendante de l’instrument utilisé, et qu’elle s’appuie sur des pivots constitués à partir de l’instrument de musique ou de son utilisation, et non des seuls gestes effectués. L’analyse que nous menons est fonctionnelle. Pour l’effectuer, nous dressons de façon exhaustive le relevé des gestes observables et de la production musicale entendue. Nous décrivons ensuite le déroulement de chacune des séances observées, en tant qu’enchaînement de segments, caractérisés individuellement par un schème procédural particulier. Nous mettons en évidence la progressive évolution de ces schèmes, lesquels ont pour but de réussir, la réussite consistant dans la fabrication d’une musique, leur musique. Après avoir fractionné les séances en séquences, caractérisées par l’assimilation ou l’accommodation, nous confrontons les résultats obtenus pour en dégager la dynamique de l’activité musicale exploratoire et les pivots sur lesquels elle s’appuie, afin de définir la/les direction(s) musicale(s) empruntée(s) par les sujets lors de chaque séance. Nous terminons par une comparaison des résultats obtenus pour chaque enfant, afin d’en relever similitudes et différences. / This case study concerns children of 7;5 to 9;5 years old, without specific musical education, facing a musical computer instrument wich they have never used before. It is the matter of making sure that a child facing that instrument can make music, his music, and studying the dynamic vectors that direct the subjects’ exploratory musical activity. We put forward the hypothesis that these dynamics are of course musical, but, above all, independant of using the instrument. More, that they’re based on pivots made up from the musical instrument or the child’s use of it and not werely perpetrated movements Our analysis is functional. To make it, we draw up exhaustively, the statement of observable movements and heard musical production. We describe each studied session as a chain of segments, individually characterized by a particular procedural scheme. We underline these schemes’ progressive evolution. Their purpose is success; success consisting in this case of making music, the children’s own music. After dividing the sessions up into sequences, characterized by assimilation or accommodation, we look at the obtained results in order to bring out the dynamics of the musical exploratory activity and the pivots on which they are based, so as to specify the musical direction chosen by the subjects in each session. We finish by a comparison of the obtained results by each child, in order to note the similarities and the differences.

La quantité d'images disponible sur Internet ne fait que croître, engendrant un besoin d'algorithmes permettant de fouiller ces images et retrouver de l'information. Les systèmes de recherche d'images par le contenu ont été développées dans ce but. Mais les bases de données grandissant, de nouveaux défis sont apparus. Dans cette thèse, la classification à grain fin est étudiée en particulier. Elle consiste à séparer des images qui sont relativement semblables visuellement mais représentent différents concepts, et à regrouper des images qui sont différentes visuellement mais représentent le même concept. Il est montré dans un premier temps que les techniques classiques de recherche d'images par le contenu rencontrent des difficultés à effectuer cette tâche. Même les techniques utilisant les machines à vecteur de support (SVM), qui sont très performants pour la classification, n'y parviennent pas complètement. Ces techniques n'explorent souvent pas assez l'espace de recherche pour résoudre ce problème. D'autres méthodes, comme les algorithmes évolutionnaires sont également étudiées pour leur capacité à identifier des zones intéressantes de l'espace de recherche en un temps raisonnable. Toutefois, leurs performances restent encore limitées. Par conséquent, l'apport de la thèse consiste à proposer un système hybride combinant un algorithme évolutionnaire et un SVM a finalement été développé. L'algorithme évolutionnaire est utilisé pour construire itérativement un ensemble d'apprentissage pour le SVM. Ce système est évalué avec succès sur la base de données Caltech-256 contenant envieront 30000 images réparties en 256 catégories / Given the ever growing amount of visual content available on the Internet, the need for systems able to search through this content has grown. Content based image retrieval systems have been developed to address this need. But with the growing size of the databases, new challenges arise. In this thesis, the fine grained classification problem is studied in particular. It is first shown that existing techniques, and in particular the support vector machines which are one of the best image classification technique, have some difficulties in solving this problem. They often lack of exploration in their process. Then, evolutionary algorithms are considered to solve the problem, for their balance between exploration and exploitation. But their performances are not good enough either. Finally, an hybrid system combining an evolutionary algorithm and a support vector machine is proposed. This system uses the evolutionary algorithm to iteratively feed the support vector machine with training samples. The experiments conducted on Caltech-256, a state of the art database containing around 30000 images, show very encouraging results

Cette thèse s’intéresse à l’optimisation multiobjectif sans contrainte lorsque les objectifs sont exprimés comme des espérances de fonctions aléatoires. L’aléa est modélisé par l’intermédiaire de variables aléatoires et on considère qu’il n’impacte pas les variables d’optimisation du problème. La thèse consiste à proposer un algorithme de descente qui permet l’obtention des solutions de Pareto du problème d’optimisation ainsi écrit. En utilisant des résultats d’analyse convexe, il est possible de construire un vecteur de descente commun à l’ensemble des objectifs du problème d’optimisation pour un tirage des variables aléatoires donné. Une suite itérative consistant à descendre dans la direction du vecteur de descente commun calculé au point courant et pour un tirage aléatoire unique et indépendant des variables aléatoires est alors construite. De cette manière, l’estimation coûteuse des espérances à chaque étape du processus d’optimisation n’est pas nécessaire. Il est possible de prouver les convergences en norme et presque sûre de cette suite vers les solutions de Pareto du problème d’optimisation en espérance et d’obtenir un résultat de vitesse de convergence lorsque la suite de pas de descente est bien choisie. Après avoir proposé diverses méthodes numériques d’amélioration de l’algorithme, un ensemble d’essais numériques est mené et les résultats de l’algorithme proposé sont comparés à ceux obtenus par deux autres algorithmes classiques de la littérature. Les résultats obtenus sont comparés par l’intermédiaire de mesures adaptées à l’optimisation multiobjectif et sont analysés par le biais de profils de performance. Des méthodes sont alors proposées pour prendre en compte deux types de contrainte et sont illustrées sur des problèmes d’optimisation de structures mécaniques. Une première méthode consiste à pénaliser les objectifs par l’intermédiaire de fonctions de pénalisation exacte lorsque la contrainte est décrite par une fonction déterministe. Pour les contraintes probabilistes, on propose de remplacer les contraintes par des objectifs supplémentaires, ces contraintes probabilistes étant alors reformulées comme des espérances de fonctions indicatrices, le problème étant résolu à l’aide de l’algorithme proposé dans la thèse sans avoir à estimer les probabilités des contraintes à chaque itération. / This thesis deals with unconstrained multiobjective optimization when the objectives are written as expectations of random functions. The randomness is modelled through random variables and we consider that this does not impact the problem optimization variables. A descent algorithm is proposed which gives the Pareto solutions without having to estimate the expectancies. Using convex analysis results, it is possible to construct a common descent vector that is a descent vector for all the objectives simultaneously, for a given draw of the random variables. An iterative sequence is then built and consists in descending following this common descent vector calculated at the current point and for a single independent draw of the random variables. This construction avoids the costly estimation of the expectancies at each step of the algorithm. It is then possible to prove the mean square and almost sure convergence of the sequence towards Pareto solutions of the problem and at the same time, it is possible to obtain a speed rate result when the step size sequence is well chosen. After having proposed some numerical enhancements of the algorithm, it is tested on multiple test cases against two classical algorithms of the literature. The results for the three algorithms are then compared using two measures that have been devised for multiobjective optimization and analysed through performance profiles. Methods are then proposed to handle two types of constraint and are illustrated on mechanical structure optimization problems. The first method consists in penalising the objective functions using exact penalty functions when the constraint is deterministic. When the constraint is expressed as a probability, the constraint is replaced by an additional objective. The probability is then reformulated as an expectation of an indicator function and this new problem is solved using the algorithm proposed in the thesis without having to estimate the probability during the optimization process.

La démarche générale du mémoire consiste à utiliser des outils mathématiques permettant d'élaborer un formalisme vectoriel applicable aux systèmes électriques au sens large. Ce formalisme bénéficie à la fois des propriétés graphiques et géométriques de la théorie des vecteurs d'espace qu'il généralise et de la puissance du calcul matriciel. Aussi, est-il tout particulièrement adapté à l'étude des systèmes polyphasés.<br />Tout d'abord, on caractérise les modulateurs d'énergie indépendamment de leurs charges. Pour cela des espaces vectoriels leur sont associés ainsi que des familles de vecteurs qui les caractérisent. Il est possible alors de définir quel type de charge le modulateur est capable de contrôler. Les degrés de liberté de la commande trouvent également une formulation mathématique. Les exemples traités sont les onduleurs de tension monophasé et triphasé deux niveaux. L'approche conduit, dans le cas d'une commande aux valeurs moyennes, à un calcul original des durées de conduction des interrupteurs en utilisant la notion de barycentre. Les algorithmes obtenus, généralisables aux onduleurs à n bras, comportent un nombre réduit d'opérations logiques et arithmétiques.<br />Le formalisme est ensuite appliqué à la machine asynchrone triphasée avec q barres au rotor ; ceci nous permet d'expliciter la notion de rotor diphasé équivalent. La machine asynchrone pentaphasée est également modélisée et l'approche développée met en évidence les conditions que doit remplir l'onduleur à 5 bras pour l'alimenter correctement.<br />Dans la dernière partie, un onduleur de courant à Modulation de Largeur d'Impulsions est étudié à l'aide du formalisme. Les non-linéarités de la commande sont prises en compte vectoriellement, notamment, de façon originale, celle concernant la durée minimale de conduction des interrupteurs. On décrit enfin l'implantation matérielle de cette commande sur microcontrôleur 16 bits et présente les résultats expérimentaux dans le cas d'une charge constituée d'une machine asynchrone triphasée en parallèle avec des condensateurs.

Ctenocephalides felis est une espèce de puce cosmopolite parasitant majoritairement les carnivores domestiques. Elle est vectrice de nombreux agents pathogènes zoonotiques dont les bactéries du genre Bartonella, bactéries intracellulaires facultatives. La compétence vectorielle de cette puce a été investiguée pour B. henselae, B. quintana, B. clarridgeiae, B. tribocorum et B. birtlesii. Dans ces conditions expérimentales, utilisant un système de gorgement sur membrane, ces espèces ont persisté pendant les trois jours d'une première étude, et pour B. henselae durant les 13 jours de survie des puces, dans une seconde étude. Les cinq espèces de bartonelles ont été retouvées dans les fèces. Pour ces cinq espèces, nos résultats montrent une absence de transmission verticale transovarienne chez la puce et suggèrent une possibilité de contamination horizontale. Nous proposons enfin un protocole original d'évaluation de l'efficacité d'un traitement antiparasitaire chez le chat, pour prévenir sa contamination par Bartonella spp. / Ctenocephalides felis is a cosmopolitan flea species mainly parasitizing pets, transmitting several pathogens of veterinary and zoonotic importance including the facultative intracellular bacteria of the genus Bartonella. The vector competence of this flea was investigated for B. henselae, B. quintana, B. clarridgeiae, B. tribocorum and B. birtlesii, using an artificial feeding system. In these experimental conditions, these bartonellae proved to persist for three days, in a first study, while B. henselae persisted for the 13 days of its life span, in a second study. All five bartonellae were excreted in the flea's faeces. On the whole, these five species were not transmitted transovarially in the fleas, though horizontal transmission was suggested. Furthermore, we propose an original protocol allowing the evaluation of the efficacy of ectoparasiticidal products against Bartonella spp. infection in cats.

L’hyperoxalurie primitive de type 1 (ou HP1) est une maladie héréditaire du métabolisme liée à un déficit en enzyme hépatocytaire AGT (alanine:glyoxylate aminotransférase), codée par le gène AGXT. Ce déficit entraîne, chez les patients atteints d’HP1, une excrétion hépatique accrue d’oxalate ; celui-ci est ensuite éliminé dans les urines où il se complexe avec le calcium pour former des néphrolithiases oxalo-calciques massives, pouvant conduire à une insuffisance rénale chronique. Le seul traitement curatif disponible pour cette pathologie est la greffe allogénique combinée hépatorénale, actuellement limitée par la disponibilité des donneurs de greffons, une morbi-mortalité significative et la nécessité d’un traitement immunosuppresseur au long cours. L’objectif du projet de recherche est de développer une thérapie génique de l’HP1 par greffe de cellules hépatiques autologues génétiquement corrigées. La faible disponibilité et la difficulté d’amplification in vitro des hépatocytes adultes nous a conduit à explorer la piste des cellules souches pluripotentes induites (iPSCs) pour produire des cellules hépatiques humaines utilisables en médecine régénérative. Nous avons dérivé et caractérisé des lignées de cellules iPSCs à partir de fibroblastes de patients atteints d’HP1, après expression transitoire des facteurs de reprogrammation par des vecteurs Sendai. Nous avons développé deux stratégies de thérapie génique additive par insertion d’un minigène codant une séquence optimisée de l’ADNc AGXT au moyen (1) d’un vecteur lentiviral à expression hépato-spécifique et (2) d’un processus de recombinaison homologue au locus AAVS1 facilité par le système de clivage ciblé de l’ADN « CRISPR/Cas9 ». Enfin, nous avons mis en évidence l’expression de la cassette thérapeutique après différenciation hépatocytaire des iPSCs génétiquement corrigées. Ces résultats ouvrent de nouvelles perspectives de médecine régénérative pour l’HP1 par transplantation de cellules hépatocytaires autologues génétiquement corrigées dérivées d’iPSCs de patients. / Primary hyperoxaluria type 1 (or PH1) is an inherited metabolic disorder related to the deficiency of the hepatic AGT enzyme (alanine:glyoxylate aminotransferase), which is encoded by the AGXT gene. In PH1 patients, this deficiency leads to oxalate overexcretion by liver, followed by urine filtration and complexation with calcium to form massive calcium-oxalate nephrolithiasis potentially leading to chronic renal failure. The only available curative treatment is combined hepatorenal allogeneic engraftment, which is currently limited by the availability of transplant donors, significant morbidity and mortality, and the need for long-term immunosuppressive treatment. The aim of our research project is to develop gene therapy for PH1, consisting in engraftment of genetically corrected autologous liver cells. Considering that adult hepatocytes are hardly available and expandable in vitro, we chose to explore the use of induced pluripotent stem cells (iPSCs) to produce human liver cells for application in regenerative medicine. We derived and characterized iPSC lines from PH1 patient fibroblasts after transient expression of reprogramming factors delivered by Sendai virus vectors. We developed two additive gene therapy strategies by inserting a minigene encoding an optimized AGXT cDNA sequence using (1) a lentiviral vector designed for liver-specific expression and (2) homologous recombination process at the AAVS1 locus favoured by the targeted DNA cutting system “CRISPR/Cas9”. Finally, we highlighted therapeutic cassette expression after hepatic differentiation of genetically corrected iPSCs. These results pave the way for regenerative medicine for PH1 by transplantation of genetically modified autologous hepatocyte-like cells derived from patient-specific iPSCs.

Ce travail porte sur l’étude de mésophases lamellaires lyotropes qui contiennent des polymères hydrosolubles confinés dans les lamelles d’eau de l’empilement. L’effet du polymère confiné sur la stabilité de la structure lamellaire est en particulier étudié grâce à une mesure directe des interactions entre les membranes de tensioactif grâce la technique du Surface Force Apparatus (SFA). Les systèmes étudiés sont des fluides complexes et très visqueux ce qui a donné lieu au développement d’une nouvelle méthode pour analyser les données collectées. En l’absence de polymère dissous dans l’empilement lamellaire, la valeur du module de compressibilité élastique mesurée est remarquablement interprétée avec la théorie électrostatique corrigée des corrélations des contre-ions. En présence de polymère, au fur et à mesure que les macromolécules remplacent le contenu en eau, le module élastique de compressibilité de l’empilement lamellaire chute,signature d’une interaction attractive due à la présence des macromolécules. Néanmoins, les développements théoriques proposés ne parviennent pas à interpréter quantitativement cette décroissance. De plus, des comportements très intéressants et inattendus ont été mis en évidence lors de l’approche d’un point critique : la présence de dislocations de très grands vecteurs de Burgers à grande séparation ainsi que des phénomènes d’avalanches. En particulier, des énergies de nucléation de dislocation ont pu être extraites. / This work deals with lyotropic lamellar mesophases which contain confined hydrosoluble polymers in the water layers of the stack. In particular the effect of confined polymers on the stability of the lamellar structure is investigated through a direct measurement of the interactions between the surfactant membranes thanks to the Surface Force Apparatus (SFA) technique. The investigated systems are complex fluids and samples are extremely viscous, this is why a new procedure for analyzing the collected data has been developed. In the absence of dissolved polymer in the lamellar stack, the measured value of the elastic compressibility modulus is remarkably interpreted with the electrostatic interaction corrected from the counterions correlations. In the presence of polymer, as long as the macromolecules replace the water content the elastic compressibilitymodulus of the lamellar stack decreases, evidencing an attractive interaction due to the macromolecules. Nevertheless, the proposed theoretical developments fail to quantitatively interpret this drop. Moreover, very interesting and unexpected phenomena have been evidenced on the approach of one critical point: dislocations of large Burgers vectors at large separations and avalanche phenomena. In particular dislocation nucleation energies have been extracted.

Le tissu adipeux, longtemps considéré comme réservoir énergétique et tissu de soutien mécanique a été promu au rang d'organe endocrine car sécréteur d'hormones. Il est utilisé depuis une trentaine d'année en chirurgie plastique cosmétique et réparatrice comme agent de comblement dans le cadre de lipoatrophie, de reconstruction mammaire ou de liftings. Ses effets régénérateurs observés sont attribués à la présence de cellules souches mésenchymateuses (CSM), les ASC (adipose-derived stem/stromal cells) assimilables aux CSM de la moelle osseuse. Leur auto renouvèlement et multipotentialité sont exploités en médecine régénérative. Nous nous sommes intéressés à la cicatrisation des plaies difficiles. Le premier article porte sur la sélection de différents dispositifs de prélèvement et d'extraction des ASC humaines à partir de lipoaspirat. Par rapport à la méthode de référence et quel que soit le dispositif, les cellules extraites ne montrent pas de résultats significativement différents en terme de rendement d'extraction et viabilité cellulaire, de capacité proliférative (clonogénicité, doublement de population et temps de doublement), de phénotype (marqueurs CD90, CD73, HLA-ABC CD45, CD14 et HLA-DR par cytométrie en flux), de stabilité génétique (caryotype et expression du gène codant pour hTERT) et de multipotentialité (différenciation adipo-, ostéo- et chondrogénique). Dans nos mains, le dispositif GID-SVF1 s'est montré le plus pratique tant au niveau du prélèvement que de son utilisation. Le second article démontre biocompatibilité et la biodisponibilité du produit fini (ASC dans acide hyaluronique) in vitro et sa tolérance chez la souris nude. Le troisième article confirme sa tolérance et établit son efficacité chez la souris nude sur de large plaie excisionnelle utilisant le modèle de Galiano. En effet, la cicatrisation complète est plus rapide pour les souris traitées avec les ASC (14 jours contre 21 jours pour les souris non traitées, p<0.001) avec une meilleure vascularisation du tissu cicatriciel (immunomarquage CD31, iontophorèse couplée au laser Doppler). Ce travail complète les prérequis aux essais cliniques en validant le prélèvement grâce à des dispositifs permettant la digestion des lipoaspirats et l'obtention de la SVF. L'amélioration significative de la cicatrisation dans notre modèle de plaie valide non seulement l'efficacité des ASC mais aussi leur véhicule / Adipose tissue, for a while considered as an energy reservoir and a mechanical support tissue, is nowadays recognized as an endocrine organ. It is used for more than thirty years in cosmetic and reconstructive plastic surgery as filler for lipodystrophy, breast reconstruction or lifting. Its regenerative potential is attributed to mesenchymal stem cells (MSC), the so-called ASC (Adipose-derived stem/stromal cells) similar to MSC from bone marrow. Their self-renewing capacity and their multupotency are exploited in regenerative medicine. We are interested in chronic wound healing. The first article deals with several devices for the harvesting of fat and the isolation of human ASC from lipoaspirates. When compared to the reference method and whatever the device, the extracted cells do not show any statistical differences in terms of cell yield and viability, proliferative capacity (clonogenicity, population doubling and doubling time), phenotype (CD90, CD73, HLA-ABC CD45, CD14 et HLA-DR using flow cytometry), genetic stability (karyotype and hTERT gene expression) and multipotentiality (adipo-, osteo- et chondrogenic differentiation). In our hands, GID SVF-1TM device was the most easy to handle for the harvest and also for its use. The second article demonstrates the biocompatibility and bioavailability of our final product (ASC in hyaluronic acid) in vitro and its tolerance in nude mice. The third article reinforces its tolerance and establishes its effectiveness in nude mice on large excisional wounds using Galiano model. Indeed, complete wound healing is more rapid in ASC-treated mice (14 days versus 21 days in untreated mice, p<0.001) with a better healed tissue vascularization (CD31 immunostaining, Dopplercoupled iontophoresis). This work fulfills the requirements for clinical trials in validating the harvest of lipoaspirate using devices that allow fat digestion and SVF extraction. The significant improvement of wound healing in our model validates not only ASC effectiveness but also their vehicle