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Uso de Babesia bovis como uma vacina de vetor vivo para o controle do carrapato bovino Rhipicephalus microplus

Oldiges, Daiane Patrícia January 2016 (has links)
O carrapato Rhipicephalus microplus é um ectoparasito hematófago de grande importância para a pecuária por ser responsável por perdas massivas na produção animal, de forma que o seu controle é economicamente relevante. Este carrapato, além dos danos que causa por si só, é também um importante vetor para a transmissão de microorganismos patogênicos, entre eles o hemoprotozoário intraeritrocítico Babesia bovis. O presente trabalho descreve o desenvolvimento de uma linhagem de B. bovis capaz de expressar um antígeno protetor, uma glutationa S-transferase do carrapato Haemaphysalis longicornis (HlGST), e o teste desta linhagem como uma vacina de vetor vivo para o controle do carrapato R. microplus. B. bovis, em cultivo, da linhagem S74-T3B foram eletroporados em presença de plasmídeo contendo o promotor bidirecional de B. bovis Ef-1 aresponsável pela expressão independente de dois genes: o repórter fusionado ao agente para seleção (GFP-BSD) e HlGST fusionada à sequência codificadora do peptídeo sinal de MSA-1 (merozoite surface antigen-1). Após a eletroporação, foi feita a seleção com blasticidina para obtenção da linhagem nomeada HlGST. A linhagem HlGST é composta por parasitos contendo diferentes padrões de inserção dos genes exógenos, tanto dentro quanto fora do locus Ef-1. Uma linhagem clonal denominada HlGST-Cln expressando HlGST e GFP-BSD foi obtida a partir da linhagem HlGST. Dois ensaios, independentes, de imunização de bovinos com os parasitos clonais foram realizados, sendo usado como controle uma linhagem clonal previamente caracterizada denominada GFP-Cln. Todos os animais inoculados desenvolveram uma forma branda de babesiose, indicando que ambas as linhagens clonais são atenuadas, mas apenas os animais imunizados com a linhagem HlGST-Cln foram capazes de produzir anticorpos anti-HlGST. O segundo procedimento de imunização foi seguido por um desafio com larvas de R. microplus. O desenvolvimento dessas larvas no hospedeiro levou a fêmeas adultas de menor peso e fertilidade. Coletivamente, esses dados mostram a possibilidade de uso de linhagens transfectadas de B. bovis como vacinas de vetor vivo. / The tick Rhipicephalus microplus is a notorious blood-feeding ectoparasite of cattle, responsible for massive losses in animal production. It is the main vector of pathogenic microorganisms, including Babesia bovis, an intraerythrocytic apicomplexan protozoan parasite responsible for bovine babesiosis. This study describes the development and testing of a live B. bovis vaccine expressing the protective tick antigen glutathione S-transferase from Haemaphysalis longicornis (HlGST). The B. bovis S74- T3B parasites were electroporated with a plasmid containing the bidirectional Ef-1 promoter of B. bovis controlling expression of two independent genes, the selectable marker GFP-BSD, and HlGST fused to the MSA-1 (merozoite surface antigen-1) signal peptide from B. bovis. Electroporation followed by blasticidin selection resulted in the emergence of a mixed B. bovis transfected line (termed HlGST) in in vitro cultures, containing parasites with distinct patterns of insertion of both exogenous genes, either in or outside the Ef-1 a locus. A B. bovis clonal line termed HlGST-Cln expressing HlGST and GFP-BSD was then derived from the mixed parasite line HlGST. Two independent calf immunization trials were performed via intravenous inoculation of the HlGST-Cln and a control consisting of an irrelevant transfected clonal line of B. bovis designated GFP-Cln. The control GFP-Cln line contains a copy of the GFP-BSD gene inserted into the Ef-1 locus of B. bovis in an identical fashion as the HIGST-Cln parasites. All animals inoculated with the HlGST-Cln and GFP-Cln transfected parasites developed mild babesiosis indicating that both transfected cloned parasite lines are attenuated. All animals immunized with HlGST-Cln produced detectable anti-glutathione-S-transferase antibodies. After immunization with HlGST-Cln, calves were challenged with R. microplus larva. Development of these larva produce fully engorged female tick with reduced weight and fertility. Collectively, these data show that transfected B. bovis parasites can be used as vectors in live vectored vaccines.
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Uso de Babesia bovis como uma vacina de vetor vivo para o controle do carrapato bovino Rhipicephalus microplus

Oldiges, Daiane Patrícia January 2016 (has links)
O carrapato Rhipicephalus microplus é um ectoparasito hematófago de grande importância para a pecuária por ser responsável por perdas massivas na produção animal, de forma que o seu controle é economicamente relevante. Este carrapato, além dos danos que causa por si só, é também um importante vetor para a transmissão de microorganismos patogênicos, entre eles o hemoprotozoário intraeritrocítico Babesia bovis. O presente trabalho descreve o desenvolvimento de uma linhagem de B. bovis capaz de expressar um antígeno protetor, uma glutationa S-transferase do carrapato Haemaphysalis longicornis (HlGST), e o teste desta linhagem como uma vacina de vetor vivo para o controle do carrapato R. microplus. B. bovis, em cultivo, da linhagem S74-T3B foram eletroporados em presença de plasmídeo contendo o promotor bidirecional de B. bovis Ef-1 aresponsável pela expressão independente de dois genes: o repórter fusionado ao agente para seleção (GFP-BSD) e HlGST fusionada à sequência codificadora do peptídeo sinal de MSA-1 (merozoite surface antigen-1). Após a eletroporação, foi feita a seleção com blasticidina para obtenção da linhagem nomeada HlGST. A linhagem HlGST é composta por parasitos contendo diferentes padrões de inserção dos genes exógenos, tanto dentro quanto fora do locus Ef-1. Uma linhagem clonal denominada HlGST-Cln expressando HlGST e GFP-BSD foi obtida a partir da linhagem HlGST. Dois ensaios, independentes, de imunização de bovinos com os parasitos clonais foram realizados, sendo usado como controle uma linhagem clonal previamente caracterizada denominada GFP-Cln. Todos os animais inoculados desenvolveram uma forma branda de babesiose, indicando que ambas as linhagens clonais são atenuadas, mas apenas os animais imunizados com a linhagem HlGST-Cln foram capazes de produzir anticorpos anti-HlGST. O segundo procedimento de imunização foi seguido por um desafio com larvas de R. microplus. O desenvolvimento dessas larvas no hospedeiro levou a fêmeas adultas de menor peso e fertilidade. Coletivamente, esses dados mostram a possibilidade de uso de linhagens transfectadas de B. bovis como vacinas de vetor vivo. / The tick Rhipicephalus microplus is a notorious blood-feeding ectoparasite of cattle, responsible for massive losses in animal production. It is the main vector of pathogenic microorganisms, including Babesia bovis, an intraerythrocytic apicomplexan protozoan parasite responsible for bovine babesiosis. This study describes the development and testing of a live B. bovis vaccine expressing the protective tick antigen glutathione S-transferase from Haemaphysalis longicornis (HlGST). The B. bovis S74- T3B parasites were electroporated with a plasmid containing the bidirectional Ef-1 promoter of B. bovis controlling expression of two independent genes, the selectable marker GFP-BSD, and HlGST fused to the MSA-1 (merozoite surface antigen-1) signal peptide from B. bovis. Electroporation followed by blasticidin selection resulted in the emergence of a mixed B. bovis transfected line (termed HlGST) in in vitro cultures, containing parasites with distinct patterns of insertion of both exogenous genes, either in or outside the Ef-1 a locus. A B. bovis clonal line termed HlGST-Cln expressing HlGST and GFP-BSD was then derived from the mixed parasite line HlGST. Two independent calf immunization trials were performed via intravenous inoculation of the HlGST-Cln and a control consisting of an irrelevant transfected clonal line of B. bovis designated GFP-Cln. The control GFP-Cln line contains a copy of the GFP-BSD gene inserted into the Ef-1 locus of B. bovis in an identical fashion as the HIGST-Cln parasites. All animals inoculated with the HlGST-Cln and GFP-Cln transfected parasites developed mild babesiosis indicating that both transfected cloned parasite lines are attenuated. All animals immunized with HlGST-Cln produced detectable anti-glutathione-S-transferase antibodies. After immunization with HlGST-Cln, calves were challenged with R. microplus larva. Development of these larva produce fully engorged female tick with reduced weight and fertility. Collectively, these data show that transfected B. bovis parasites can be used as vectors in live vectored vaccines.
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Uso de Babesia bovis como uma vacina de vetor vivo para o controle do carrapato bovino Rhipicephalus microplus

Oldiges, Daiane Patrícia January 2016 (has links)
O carrapato Rhipicephalus microplus é um ectoparasito hematófago de grande importância para a pecuária por ser responsável por perdas massivas na produção animal, de forma que o seu controle é economicamente relevante. Este carrapato, além dos danos que causa por si só, é também um importante vetor para a transmissão de microorganismos patogênicos, entre eles o hemoprotozoário intraeritrocítico Babesia bovis. O presente trabalho descreve o desenvolvimento de uma linhagem de B. bovis capaz de expressar um antígeno protetor, uma glutationa S-transferase do carrapato Haemaphysalis longicornis (HlGST), e o teste desta linhagem como uma vacina de vetor vivo para o controle do carrapato R. microplus. B. bovis, em cultivo, da linhagem S74-T3B foram eletroporados em presença de plasmídeo contendo o promotor bidirecional de B. bovis Ef-1 aresponsável pela expressão independente de dois genes: o repórter fusionado ao agente para seleção (GFP-BSD) e HlGST fusionada à sequência codificadora do peptídeo sinal de MSA-1 (merozoite surface antigen-1). Após a eletroporação, foi feita a seleção com blasticidina para obtenção da linhagem nomeada HlGST. A linhagem HlGST é composta por parasitos contendo diferentes padrões de inserção dos genes exógenos, tanto dentro quanto fora do locus Ef-1. Uma linhagem clonal denominada HlGST-Cln expressando HlGST e GFP-BSD foi obtida a partir da linhagem HlGST. Dois ensaios, independentes, de imunização de bovinos com os parasitos clonais foram realizados, sendo usado como controle uma linhagem clonal previamente caracterizada denominada GFP-Cln. Todos os animais inoculados desenvolveram uma forma branda de babesiose, indicando que ambas as linhagens clonais são atenuadas, mas apenas os animais imunizados com a linhagem HlGST-Cln foram capazes de produzir anticorpos anti-HlGST. O segundo procedimento de imunização foi seguido por um desafio com larvas de R. microplus. O desenvolvimento dessas larvas no hospedeiro levou a fêmeas adultas de menor peso e fertilidade. Coletivamente, esses dados mostram a possibilidade de uso de linhagens transfectadas de B. bovis como vacinas de vetor vivo. / The tick Rhipicephalus microplus is a notorious blood-feeding ectoparasite of cattle, responsible for massive losses in animal production. It is the main vector of pathogenic microorganisms, including Babesia bovis, an intraerythrocytic apicomplexan protozoan parasite responsible for bovine babesiosis. This study describes the development and testing of a live B. bovis vaccine expressing the protective tick antigen glutathione S-transferase from Haemaphysalis longicornis (HlGST). The B. bovis S74- T3B parasites were electroporated with a plasmid containing the bidirectional Ef-1 promoter of B. bovis controlling expression of two independent genes, the selectable marker GFP-BSD, and HlGST fused to the MSA-1 (merozoite surface antigen-1) signal peptide from B. bovis. Electroporation followed by blasticidin selection resulted in the emergence of a mixed B. bovis transfected line (termed HlGST) in in vitro cultures, containing parasites with distinct patterns of insertion of both exogenous genes, either in or outside the Ef-1 a locus. A B. bovis clonal line termed HlGST-Cln expressing HlGST and GFP-BSD was then derived from the mixed parasite line HlGST. Two independent calf immunization trials were performed via intravenous inoculation of the HlGST-Cln and a control consisting of an irrelevant transfected clonal line of B. bovis designated GFP-Cln. The control GFP-Cln line contains a copy of the GFP-BSD gene inserted into the Ef-1 locus of B. bovis in an identical fashion as the HIGST-Cln parasites. All animals inoculated with the HlGST-Cln and GFP-Cln transfected parasites developed mild babesiosis indicating that both transfected cloned parasite lines are attenuated. All animals immunized with HlGST-Cln produced detectable anti-glutathione-S-transferase antibodies. After immunization with HlGST-Cln, calves were challenged with R. microplus larva. Development of these larva produce fully engorged female tick with reduced weight and fertility. Collectively, these data show that transfected B. bovis parasites can be used as vectors in live vectored vaccines.
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Clonagem da superóxido dismutase de Chromobacterium violaceum e expressão heteróloga

Dutra, Daniel Lúcio Rodrigues 11 July 2006 (has links)
Submitted by Dominick Jesus (dominickdejesus@hotmail.com) on 2016-02-11T17:48:37Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Daniel Lúcio Rodrigues Dutra.pdf: 623819 bytes, checksum: e27c559cf8e657f3868f5417b83e9c4d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-11T17:48:37Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Daniel Lúcio Rodrigues Dutra.pdf: 623819 bytes, checksum: e27c559cf8e657f3868f5417b83e9c4d (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2006-07-11 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas - FAPEAM / The main objective of this work was to isolate the ORFs CV0867 (sodB2) e CV2504 (sodB1) of C. violaceum and induce their expression in Escherichia coli cells harboring sod genes, to evaluate the increase in SOD activity in the recombinant cells exposed to oxidative stress conditions. The sodB1 gene was isolated by PCR, using specific primers, and cloned into pGEM ® -T Easy vector. The amplification reaction could not be optimized for the second set of primers, specific for sodB2 gene. In an attempt to obtain a vector suitable for the regulated heterologous expression of SOD, some strategies were proposed for the construction of vectors with expression under the control of a sterically repressed promoter – srp. The sodB1 gene was then subcloned into vectors pCR4-SRP and pUC-SRP, derived from pCR ® 4-TOPO ® e pUC72, respectively, both developed during this project. However, the obtaining of recombinant clones was not possible. Despite the fact that SOD is not a toxic protein for the cell, we tested the hypothesis of the lethality of recombinant clones caused by the overexpression of SOD. Thus, amy and pfu genes were cloned into pUC-SRP, although the clones harboring the gene of interest could not be obtained. We concluded that the expression mechanisms of pUC-SRP and pCR4-SRP vectors may have caused deletery effects to the host cells, and that modifications in their structure should be made for the minimizing of heterologous expression levels, reducing the risk of toxicity for the clones. / O principal objetivo do trabalho foi isolar as regiões estruturais dos genes sod correspondentes às ORFs CV0867 (sodB2) e CV2504 (sodB1) de C. violaceum e expressá- las em células de Escherichia coli portando os genes sod, para avaliar o incremento da atividade de SOD nas células recombinantes submetidas a condições de estresse oxidativo. O gene sodB1 foi isolado via PCR, utilizando iniciadores específicos, e clonado em vetor pGEM ® -T Easy. Para sodB2, não conseguiu-se otimizar a reação de amplificação. Com o intuito de obter um vetor para expressão heteróloga regulada de SOD foram traçadas estratégias para a construção de vetores com expressão controlada por um promotor estericamente regulado - srp. O gene sodB1 foi então subclonado nos vetores pCR4-SRP e pUC-SRP, derivados de pCR ® 4-TOPO ® e pUC72, respectivamente, ambos desenvolvidos a partir deste trabalho. No entanto, não foi possível a obtenção de clones recombinantes. Apesar de SOD não ser uma proteína tóxica para a célula, testou-se a hipótese de que a superexpressão desta proteína seria a causa da letalidade dos clones recombinantes. Assim, foram clonados os genes amy e pfu em pUC-SRP. Porém, mais uma vez não foram obtidos clones portando os genes de interesse. Conclui-se então que os mecanismos de expressão do vetor pUC-SRP, bem como de pCR4-SRP, devem ter ocasionado efeitos deletérios às células hospedeiras, e que alterações na sua estrutura devem ser feitas no sentido de minimizar os níveis de expressão heteróloga, reduzindo assim o risco de produção de toxicidade para os clones.
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Análise dos determinantes das exportações agrícolas brasileiras para os rics entre os anos de 1982 a 2012

Barros, Fabiano Luiz Alves January 2015 (has links)
BARROS, Fabiano Luiz Alves. Análise dos determinantes das exportações agrícolas brasileiras para os rics entre os anos de 1982 a 2012. 2015. 99 f.: Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Departamento de Pós-Graduação em Economia Rural, Fortaleza-CE, 2015 / Submitted by Francisco Helder Macêdo Rangel (fhelder@ufc.br) on 2016-03-03T18:20:23Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_flabarros.pdf: 1972401 bytes, checksum: ed4a83179b79c04c8083665333e77cca (MD5) / Approved for entry into archive by Margareth Mesquita(margaret@ufc.br) on 2016-03-04T19:58:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_flabarros.pdf: 1972401 bytes, checksum: ed4a83179b79c04c8083665333e77cca (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-04T19:58:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_flabarros.pdf: 1972401 bytes, checksum: ed4a83179b79c04c8083665333e77cca (MD5) Previous issue date: 2015 / The intensification of trade between the BRICS may be due both to international agreements such as macroeconomic policy factors such as the real effective exchange rate, the terms of trade, foreign direct investment and per capita income. The Brazil concentrates much of its production for export in sectors with lower technological intensity, favoring the production of commodities. Thus, this study is to investigate the fundamental macroeconomic determinants of exporting agricultural sector in Brazil for selected economies: Russia, India , China and South Africa (RICS), through commonly known variables as decisive for total exports, which are: real effective exchange rate, the terms of trade, income per capita and foreign direct investment. To assess these determinants, we used the theory of international trade, with the use of time series, through self regressive vectors methodology (VAR). The analysis showed that both the terms of trade as per capita income were significant for China and South Africa. Russia showed that the real effective exchange rate in Brazil is significant for India the real exchange rate and the terms of trade were equally significant. / A intensificação das trocas comerciais entre os BRICS pode ser devida tanto a acordos internacionais como a fatores de ordem macroeconômica como a taxa de câmbio real efetiva, os termos de troca, o investimento externo direto e a renda per capita. O Brasil concentra grande parte de sua produção para exportação em setores com menor intensidade tecnológica, favorecendo assim a produção de commodities. Diante disso, este estudo tem como objetivo fundamental investigar os determinantes macroeconômicos do setor agrícola exportador do Brasil para economias selecionadas: Rússia, Índia, China e África do Sul (RICS), por meio de variáveis comumente conhecidas como decisivas para as exportações totais, as quais são: taxa de câmbio real efetiva, os termos de troca, a renda per capita e o investimento externo direto. Para avaliar estes determinantes, utilizou-se a teoria do comércio internacional, com o uso de séries temporais, por meio da metodologia de vetores auto regressivos (VAR). A análise demonstrou que tanto os termos de troca quanto a renda per capita foram significativas para China e África do Sul. A Rússia mostrou que a taxa de câmbio real efetiva do Brasil é significante, para Índia a taxa de câmbio real e os termos de troca foram igualmente significativos.
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A endemia da malária em Porto Velho (RO): um estudo baseado na análise estatítica espacial de dados multivariados

Simão, Flávio Batista [UNESP] 28 November 2006 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:18Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-11-28Bitstream added on 2014-06-13T19:21:51Z : No. of bitstreams: 1 simao_fb_dr_rcla.pdf: 1851483 bytes, checksum: 4f667b0db3f8c30e9f84faf0b4bb1ca0 (MD5) / Unir/Riomar / O município de Porto Velho teve sua ocupação marcada por um sério desordenamento urbano, que resultou, entre outros, em aglomerados populacionais de baixa renda, originados de migrações externas e internas que se assentaram em locais impróprios para a urbanização. Isso deu origem a conflitos sócio-ambientais e de saúde pública, ou seja, contribuiu para uma crescente insuficiência dos serviços de saneamento e para o incremento da pobreza. A deterioração das condições de vida no município criou ambientes favoráveis à proliferação de vetores transmissores de doenças parasitárias, contribuindo para a intensificação da transmissão no meio urbano e para o agravamento do problema de saúde pública, em especial pela malária. A maioria da população portovelhense habita áreas com elevado risco de transmissão, pois vive em locais com ambientes propícios à formação de criadouros dos mosquitos que transmitem a malária, tais como: nascentes, drenagens, áreas alagadas e florestas remanescentes. Há também, em algumas áreas, evidência de vegetação equatorial úmida, de maneira a tornar a cidade vulnerável à proliferação de mosquitos anofelinos, vetores de malária, especialmente em áreas com freqüência de migrantes. O município, hoje, detém pouco mais de 25% dos casos de malária do Estado de Rondônia, isso porque o crescimento populacional acelerado cria uma série de problemas urbanos de infra-estrututa em todos os aspectos. O modelo de políticas públicas atuais não é eficiente na erradicação da doença na área urbana. Em razão dos problemas expostos, esse estudo teve por objetivo mapear as possíveis áreas de maior prevalência do vetor transmissor da doença, associando-as aos problemas sócio-ambientais para que essas informações possam orientar o poder público e a sociedade, com o fim de interferir no controle da endemia eficientemente. / Porto Velho municipal district had its occupation characterized by a serious disordering process, which has resulted in agglomerations of low income people, originated from external and internal migration which had been settled in improper areas, therefore this occupation originated social-environmental and public health conflicts, contributing to an increasing sewage inadequacy and poverty. The degradation process of life standards in the municipal district led to favorable conditions for the proliferation of vector transmitter parasitic diseases, contributing to the disease spreading in urban areas and the aggravation of public health problems, particularly malaria. The majority of Porto Velho's population inhabits areas where there are several transmission risks, due the high incidence of malaria transmitter mosquitoes that live in water nascent, drainage, flooded and forest remained areas. There is also, in some areas, equatorial humid vegetation, turning the place vulnerable to the proliferation of malaria mosquito transmitters, particularly in areas with high frequency of migrants. The municipal district has nowadays more than 25% of malaria cases in Rondonia, mainly because of disordered population increasing, which creates urban problems in all aspects. The public politics used nowadays aren't efficient on eradicating the disease in urban areas. Due to the exposed problems, this study aims to map the potential malaria prevalence areas, associating to the socio-environment problems in order to orientate government and society to control, properly, the endemic malaria. In order to accomplish this task, there was used specific statistical techniques of multiple correspondence analysis, applied to physical environment and adapted to the social area.
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Estudo da atividade larvicida da Agave sisalana contra Aedes Aegypti

Nunes, Fabíola da Cruz 30 August 2013 (has links)
Submitted by FABIANA DA SILVA FRANÇA (fabiana21franca@gmail.com) on 2017-11-09T15:38:24Z No. of bitstreams: 2 arquivototal.pdf: 3033279 bytes, checksum: f2b56b36fa23f100495d8d218c7e3669 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-09T15:38:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivototal.pdf: 3033279 bytes, checksum: f2b56b36fa23f100495d8d218c7e3669 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / Dengue is a viral systemic disease caused by an arboviral of Flaviviridae family, affecting about a 100 million cases per year in Brazil. It is endemic in tropical regions such as Southeast Asia, South Pacific, East Africa, Caribbean and Latin America. The disease is transmitted by Aedes aegypti (Linnaeus, 1762), a mosquito that is the main target for the disease control through strategies ranging from the larval to the adult combat. The larvicides commonly used to combat the vector, besides being toxic, present drop in larvicide efficacy since the A. aegypti larvae has developed resistance to these products. Thus, the search for new active principles that are effective in combating the mosquito is required. In this sense, Agave sisalana is a plant that is produced in several states in the Brazilian northeast region, which is used in the sisal industry. Only 5% of the plant is recovered, and its residual liquid completely wasted. In this way, the aim of this research project was to investigate the larvicidal action of the juice of Agave sisalana against larvae of A. aegypti. In larvicidal activity assays, fourth stage A. aegypti larvae were used, exposed to different concentrations of A. sisalana liquid waste during 24 hours. After the larvicidal activity assays, it was possible to determine the LC50 that was 5.9 mg / mL. Next we explored the cytotoxic activity of A. sisalana in hemocytes of A. aegypti larvae through the flow cytometry. The experiments showed an increase of cellular necrosis after 12 hours of exposure of the larvae to submaximal concentrations of sisal liquid waste (7.4% in control group vs. 28.5% in the experimental group after 12 hours; 6.2% in the control group vs. 22.7% in the experimental group after 24 hours). The histological alterations were confirmed by histopathological analysis, which showed lyses of the mesentery epithelial cells of larvae as well as peritrophic membrane destruction. Furthermore, nitric oxide (NO) production by hemocytes, an important defense strategy of mosquitoes, was checked after 3, 6 and 24 hours of larvae exposure to the A. sisalana liquid waste. There was a reduction in NO levels of approximately 76.6% after 3 hours, 83% after 6 hours and 83.8% after 24 hours of exposure. In this way, the A. sisalana liquid waste constitutes an effective alternative and economically feasible for the dengue vector combat. The outcomes of our research resulted in the patent application for an insecticide against A. aegypti larvae. / A dengue é uma doença viral sistêmica, causada por um arbovírus da família Flaviviridae, acometendo cerca de 700 mil casos por ano no Brasil. É endêmica de regiões tropicais como o sudeste asiático, sul do Pacífico, África Oriental, Caribe e América Latina. A dengue é transmitida pelo mosquito Aedes aegypti (Linnaeus, 1762), que é o principal alvo de combate para controle da doença, por meio de estratégias que vão desde o combate às formas larvares até o mosquito adulto. Os larvicidas comumente utilizados no combate do vetor, além de serem tóxicos, vêm apresentando queda na capacidade larvicida já que as larvas do A. aegypti tem desenvolvido resistência a esses produtos. Sendo assim, a busca por novos princípios ativos que sejam eficientes no combate do mosquito se faz necessária. Nesse sentido, a Agave sisalana é uma planta que é produzida em vários estados do nordeste brasileiro, a qual é utilizada na indústria sisaleira. Apenas 5% da planta é aproveitada, sendo o seu resíduo líquido completamente desperdiçado. Dessa forma, este projeto de pesquisa teve como objetivo investigar a ação larvicida do suco de Agave sisalana contra larvas de A. aegypti. Nos ensaios de atividade larvicida, utilizou-se larvas de quarto estágio de A. aegypti, testando-se diferentes concentrações de suco de A. sisalana durante 24 horas. Após os ensaios de atividade larvicida foi possível determinar a CL50, que foi de 5,9 mg/mL. A pesquisa também explorou a atividade citotóxica da A. sisalana em hemócitos de larvas de A. aegypti, através da citometria de fluxo. Verificou-se um aumento no percentual de necrose celular a partir de 12 horas de exposição das larvas a concentrações submáximas de suco de sisal (7,4% no grupo controle vs. 28,5% no grupo experimental após 12 horas; 6,2% no grupo controle vs.22,7% no grupo experimental após 24 horas). As alterações histológicas foram confirmadas em exames histopatológicos, que mostraram lise celular de células epiteliais do mesentério das larvas e destruição da membrana peritrófica. A produção de óxido nítrico (NO) pelos hemócitos, uma importante estratégia de defesa dos mosquitos, foi verificada após 3,6 e 24 horas de exposição das larvas ao suco de A. sisalana. Observou-se uma diminuição dos níveis de NO da ordem de 76,6% após 3 horas de exposição, 83 % após 6 horas de exposição, e 83,8 % após 24 horas de exposição. Sendo assim, o suco de A. sisalana pode se constituir numa alternativa efetiva e economicamente viável para o combate ao vetor da Dengue. Essa pesquisa resultou no pedido de patente de um inseticida formulação a base de A. sisalana para combate às larvas de A. aegypti.
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Segmentação de texto em imagens de mapas e plantas baixas antigos

MACHADO, Saulo Cadete Santos 28 August 2014 (has links)
Submitted by Luiz Felipe Barbosa (luiz.fbabreu2@ufpe.br) on 2015-03-10T18:54:13Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO SAulo Cadete Santos Machado.pdf: 5366333 bytes, checksum: 2167718436186519ad8d2ab04a7f8b66 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-10T19:42:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO SAulo Cadete Santos Machado.pdf: 5366333 bytes, checksum: 2167718436186519ad8d2ab04a7f8b66 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T19:42:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO SAulo Cadete Santos Machado.pdf: 5366333 bytes, checksum: 2167718436186519ad8d2ab04a7f8b66 (MD5) Previous issue date: 2014-08-28 / Documentos antigos podem conter informações importantes para o desenvolvimento de trabalhos atuais. Mapas e plantas baixas históricos podem representar a cultura artística e tecnológica do momento em que foram criados. A qualidade e quantidade de suas informações justificam esforços para mantê-los e garantir a disponibilidade desses documentos. O primeiro passo para alcançar isso é a digitalização. Mas é necessário um processamento automático para que o documento seja pesquisável sem a custosa indexação manual. Ferramentas comuns de reconhecimento automático de caracteres têm dificuldade em reconhecer o texto de imagens de mapas e plantas baixas. Além do desgaste do papel provocado pelo tempo e manuseio, esses documentos possuem muitos elementos gráficos, como desenhos de rios e paredes, que ocupam a maior parte da imagem e podem até colidir com componentes textuais. Esse texto pode ser de diferentes estilos, tamanhos e orientações. Para facilitar a o reconhecimento de texto pelas ferramentas de reconhecimento automático, é importante remover os componentes gráficos da imagem antes de submetê-la ao processo de reconhecimento. Trabalhos recentes sobre segmentação de texto em imagens de mapas e plantas baixas usam regras definidas especialmente para as características das imagens que esperam. Esta dissertação apresenta uma nova abordagem para segmentar texto em imagens de mapas e plantas baixas. O método é divido em três etapas. A primeira é o pré-processamento em que o plano de fundo e alguns componentes gráficos são removidos. A segunda etapa é a de classificação em que são utilizados classificadores baseados em Máquinas de Vetores de Suporte treinados para identificar caracteres e sequências de caracteres. Por fim, é realizado um pós-processamento para evitar erros de classificação e recuperar componentes a partir de sua similaridade com os que foram classificados como texto. Os resultados comprovaram a eficácia do método proposto que alcançou taxas de erro inferiores a 10% para a segmentação de texto em imagens de mapas e plantas baixas.
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Financiamento de longo prazo e o crescimento econômico da região nordeste do Brasil: uma análise através de vetores autorregressivos

BARBOSA FILHO, David Gerôncio 31 January 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T17:22:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo7652_1.pdf: 1370140 bytes, checksum: f288647e9b2dffc0fcaa3653f81cf3d1 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / O presente estudo investiga a relação entre o sistema financeiro, mais especificamente, o desenvolvimento do mercado de crédito, representado pelo financiamento de longo prazo do BNDES, e o crescimento econômico da região Nordeste do Brasil, cuja proxy é o comportamento do PIB da região. A análise utilizou dados anuais dos desembolsos do BNDES para os setores da Agropecuária, Indústria Extrativa, Indústria de Transformação e para o setor de Comércio e Serviços, no período de 1994 a 2010. Inicialmente foi apresentada a teoria econômica correspondente aos temas crescimento econômico, sistema financeiro e a relação entre eles, bem como pesquisas empíricas relacionadas aos temas. Questionamentos têm sido levantados, se o desenvolvimento dos mercados de ativos ou bancário precede ou segue o crescimento econômico ou se há complementaridade entre as variáveis. Para investigar a hipótese de causalidade, utilizou-se o modelo de vetores autorregressivos VAR, bem como o teste de causalidade de Granger. Os resultados empíricos demonstraram que os coeficientes das variáveis não são estatisticamente significantes, não permitindo validar o pressuposto de precedência temporal. Por outro lado, confirmam a necessidade da adoção de políticas públicas direcionadas ao sistema financeiro, no sentido de torná-lo mais eficiente, sob ponto de vista macroeconômico, a fim de financiar o desenvolvimento econômico da região Nordeste do Brasil
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Produção de proinsulina recombinante em Pichia pastoris utilizando o promotor do gene PGK

Assunção, Enedina Nogueira de 26 September 2015 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-10-03T12:39:39Z No. of bitstreams: 1 Tese - Enedina Nogueira de Assunção.pdf: 3908952 bytes, checksum: 3e60d5d0a0af7d037587c69426e344bb (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-10-03T12:39:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Enedina Nogueira de Assunção.pdf: 3908952 bytes, checksum: 3e60d5d0a0af7d037587c69426e344bb (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-10-03T12:40:16Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Enedina Nogueira de Assunção.pdf: 3908952 bytes, checksum: 3e60d5d0a0af7d037587c69426e344bb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-03T12:40:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Enedina Nogueira de Assunção.pdf: 3908952 bytes, checksum: 3e60d5d0a0af7d037587c69426e344bb (MD5) Previous issue date: 2015-09-26 / According to the World Health Organization (WHO), diabetes mellitus is expected to reach 333 million by 2025 and around 2030 is going to be the second cause of death in Latin America. Therefore, an insulin production increasing becomes a need to meet future market demands. The heterologous expression system in Pichia pastoris have been increasingly used and has proven to be an attractive alternative for over expressing human genes for biotechnological purposes. Thus, this work has as main objective to produce human proinsulin by P. pastoris using a PGK gene promoter. A1 gene codes for the insulin precursor and was chemically synthesized with optimized codons for P. pastoris. This gene was cloned into expression vector / secretion under control of PGK P. pastoris promoter and integrated into the genome of P. pastoris GS115. Transformant clones were selected for increased zeocin production and from dot-blotting. The production of recombinant proinsulin was performed in YPD liquid in shake flasks at 30 ° C, 180 rpm. The supernatant was clarified by centrifugation, and detection of recombinant proteins by ELISA, electrophoresis in denaturing polyacrylamide gel, Western-blotting and finally chromatography for size exclusion. Best conditions for expression / secretion of proinsulin were established through statistical experimental design detecting the expression level by ELISA. The amount of pre-proinsulin mRNA was determined from two samples of two contrasting conditions of A140 clone with the highest and lowest production of proinsulin using Real-Time PCR (qPCR). As results, the recombinant clones that had higher resistance to Zeocin also showed more intense positive signs in the dot-blotting. Proinsulin coding sequence (A1) was efficiently expressed in P. pastoris and secreted into the cell culture supernatant, with molecular weight of approximately 7.5 kDa. The A140 clone showed significant productivity in production level within 48 to 72 hours after the improvement of the YPD culture medium showed level of 0.83 g/L of insulin expression at 72 hours, for total biomass of about 50g / L. High levels of proinsulin expression with PGK promoter using P. pastoris as host make this heterologous expression attractive for human proinsulin production as well as other industrial proteins. / De acordo com os indicadores da Organização Mundial de Saúde (OMS) o diabetes mellitus deve alcançar 333 milhões de pessoas em 2025 no mundo e em 2030 na América Latina será a segunda causa de morte, por isso o aumento da produção de insulina torna-se uma necessidade para suprir as futuras demandas de mercado. Os sistemas de expressão em leveduras tipo Pichia pastoris tem sido cada vez mais utilizados e tem-se mostrado como atraentes alternativas para a expressão de proteínas para fins industriais. Dessa forma, este trabalho tem como objetivo principal a produção de proinsulina humana por Pichia pastoris utilizando o promotor do gene PGK. O gene A1 que codifica o precursor da insulina foi sintetizado quimicamente com codóns otimizados para a expressão em P. pastoris. Esse gene foi clonado em vetor de expressão/secreção sob controle do promotor PGK de P. pastoris e integrado no genoma de P. pastoris GS115. A produção de proinsulina recombinante foi realizada em meio líquido YPD em frascos agitados a 30°C, a 180 rpm. A análise da proinsulina expressa em P. pastoris foi realizada por eletroforese em gel desnaturante de poliacrilamida e Western-blotting e mostrou massa molecular de aproximadamente 7,5 kDa. O clone recombinante A140 que apresentou maior resistência a zeocina e sinal positivo mais intenso no imunodot-blotting foi utilizado para estabelecer condições melhores de expressão/secreção de proinsulina em planejamento fatorial estatístico experimental. As condições de cultivo que se mostraram melhores para a produção da proinsulina foram: composição do meio de cultivo (dextrose 7,5%, extrato de levedura 1% e peptona 0,15%), temperatura de 25°C e pH do meio igual a 7,0. O clone A140 nas melhores condições de cultivo atingiu biomassa total de 50g/L e nível de expressão de insulina de 0,83g/L em 72 horas de cultivo. A expressão de proinsulina em altos níveis utilizando o promotor PGK em P. pastoris faz esse sistema de expressão atrativo para produção da proinsulina humana e outras proteínas de interesse industrial.

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