Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / A intensificaÃÃo das trocas comerciais entre os BRICS pode ser devida tanto a acordos internacionais como a fatores de ordem macroeconÃmica como a taxa de cÃmbio real efetiva, os termos de troca, o investimento externo direto e a renda per capita. O Brasil concentra grande parte de sua produÃÃo para exportaÃÃo em setores com menor intensidade tecnolÃgica, favorecendo assim a produÃÃo de commodities. Diante disso, este estudo tem como objetivo fundamental investigar os determinantes macroeconÃmicos do setor agrÃcola exportador do Brasil para economias selecionadas: RÃssia, Ãndia, China e Ãfrica do Sul (RICS), por meio de variÃveis comumente conhecidas como decisivas para as exportaÃÃes totais, as quais sÃo: taxa de cÃmbio real efetiva, os termos de troca, a renda per capita e o investimento externo direto. Para avaliar estes determinantes, utilizou-se a teoria do comÃrcio internacional, com o uso de sÃries temporais, por meio da metodologia de vetores auto regressivos (VAR). A anÃlise demonstrou que tanto os termos de troca quanto a renda per capita foram significativas para China e Ãfrica do Sul. A RÃssia mostrou que a taxa de cÃmbio real efetiva do Brasil à significante, para Ãndia a taxa de cÃmbio real e os termos de troca foram igualmente significativos.

Submitted by Luiz Felipe Barbosa (luiz.fbabreu2@ufpe.br) on 2015-03-12T13:03:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Péricles Miranda.pdf: 2165606 bytes, checksum: d9dd28b8af21e867949112bcb33578ac (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-13T13:13:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Péricles Miranda.pdf: 2165606 bytes, checksum: d9dd28b8af21e867949112bcb33578ac (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T13:13:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertaçao Péricles Miranda.pdf: 2165606 bytes, checksum: d9dd28b8af21e867949112bcb33578ac (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Vem sendo dada grande atenção às Máquinas de Vetores de Suporte (SVMs) devido à sua fundamentação teórica e seu bom desempenho quando comparadas a outros algoritmos de aprendizado em diferentes aplicações. Porém, seu bom desempenho depende fortemente da escolha adequada de seus parâmetros de controle. Como a abordagem de tentativa e erro se torna impraticável devido às combinações entre os possíveis valores dos parâmetros, a seleção de parâmetros passou a ser tratada como um problema de otimização, de modo que o objetivo é encontrar a combinação de valores dos parâmetros mais adequada para um determinado problema. Embora a utilização de algoritmos de otimização e busca automatizem a seleção de parâmetros de SVM, ela pode se tornar inviável caso o número de parâmetros a serem selecionados aumente consideravelmente. Uma alternativa é o uso de Meta-Aprendizado (MA), que trata a tarefa de seleção de parâmetros como uma tarefa de aprendizado supervisionado. Cada exemplo de treinamento para o MA (meta-exemplo) armazena características de problemas passados e o desempenho obtido pelas configurações de parâmetros candidatas. Este conjunto de meta-exemplos forma a meta-base, sendo esta utilizada para auxiliar no módulo de sugestão ou meta-aprendiz. O meta-aprendiz tem a função de prever as configurações de parâmetros mais adequadas para um problema novo baseado em suas características. Deste modo, MA se torna uma alternativa menos custosa comparada aos algoritmos de otimização, pois faz uso de execuções passadas no processo de sugestão. Neste trabalho, as sugestões do meta-aprendiz são utilizadas como soluções iniciais da técnica de busca, sendo esta responsável pelo refinamento das soluções sugeridas. Neste trabalho, foi criada uma arquitetura híbrida multi-objetivo, que combina MA com algoritmos de otimização, inspirados em enxames de partículas, com múltiplos objetivos aplicado ao problema de seleção de parâmetros de SVMs. Os algoritmos de otimização utilizados no experimento foram: MOPSO, MOPSO-CDR, MOPSO-CDRS, CSS-MOPSO, m-DNPSO e MOPSO-CDLS, e os objetivos levados em consideração foram: maximização da taxa de acerto na classificação e minimização do número de vetores de suporte. De acordo com os resultados alcançados, ficou comprovado o potencial do MA na sugestão de soluções para os algoritmos de otimização. O início da busca em regiões promissoras favoreceu a convergência e geração de soluções ainda melhores, quando comparada a aplicação de algoritmos de busca tradicionais. Os Pareto fronts gerados foram analisado em 4 perspectivas (spacing, max. spread, hypervolume e coverage), sendo os resultados da abordagem híbrida superiores aos das técnicas de otimização tradicionais.

CAPES / A estabilização econômica dos anos de 1990 e a adoção do tripé econômico, a partir de 1999, marcam o fim de um capítulo delicado da história brasileira; a partir de então, era necessária a existência de certa sintonia de políticas monetária e fiscal para a manutenção do controle dos diversos indicadores econômicos. Contudo, com essa reciprocidade na política econômica, são incitadas discussões sobre a orientação do governo na hora de definir suas prioridades nesse campo: as variáveis fiscais são priorizadas e, por conseguinte, determinadas, forçando as monetárias a se ajustarem – ou o contrário? A resposta para esse questionamento leva à discussão sobre a dominância fiscal. Assim, esse trabalho visa verificar empiricamente, usando das modelagens econométricas VAR e estudo de eventos, se há dominância fiscal ou monetária na economia brasileira e se a eficácia da política monetária mudou na transição do governo Lula para o governo Dilma. O resultado foi inconclusivo para o governo Lula e indicou dominância fiscal no governo Dilma. Ainda verificou-se não haver modificação na eficácia da política monetária. / Economic stabilization, in the 1990s, and utilization of an economic tripod, after 1999, represents the end of a delicate chapter in Brazilian history. Ever since, it was necessary the existence of a certain agreement between monetary and fiscal politic, in order to maintain under control a variety of economic indicators. However, this reciprocity (in economic politic) starts discussions about the real government orientations when it comes to define its priority on this subject: are the fiscal variables priorized, and then, determined, forcing monetary variables to adjust themselves, or the opposite? The answer to these questions emerge from the fiscal dominance discussion. This paper intends to empiric verify, using econometric modeling VAR and event study, if there is fiscal dominance or monetary in Brazilian economy and whether the effectiveness of monetary politic has changed in the transition from Lula's government to the Dilma government. The result was inconclusive for the Lula government and indicated fiscal dominance in the Dilma government. There was still no change in the efficiency of the monetary politic.

Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2018-03-15T13:27:44Z No. of bitstreams: 1 Carlos Filipe de Albuquerque Braga.pdf: 1044473 bytes, checksum: ddf6c0a0f806f0d67104ba6c13e1ff03 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-15T13:27:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carlos Filipe de Albuquerque Braga.pdf: 1044473 bytes, checksum: ddf6c0a0f806f0d67104ba6c13e1ff03 (MD5) Previous issue date: 2017-06-21 / Monetary policy plays an essential and determining role in the world economy, since its changes affect the productions of agriculture, of the industries and the sales of commerce. The understanding of how the economic players react can help in the formulation of economic policies. Thus, this dissertation examines whether a change in monetary policy reveals heterogeneous reactions on the industrial sectors of the state of Pernambuco, using the autoregressive vector model (VAR). The results obtained point to asymmetries in sectoral responses to changes in the conduct of monetary policy, with the most capital-intensive industries slowing the largest reactions. Searching for this evidence, a study of the two main transmission channels of monetary policy was carried out: the interest rate channel and the credit channel. The results of the cross-section model showed that the credit channel has a greater influence on several industrial sectors of the state of Pernambuco. / A política monetária exerce um papel essencial e determinante na economia mundial, já que suas mudanças afetam as produções da agricultura, das indústrias e as vendas do comércio. Fica claro que o entendimento de como reagem os atores presentes na economia, podem auxiliar na formulação de políticas econômicas. Desta forma, esta dissertação examina se uma mudança na política monetária apresenta reações heterogêneas sobre os setores industriais do Estado de Pernambuco, utilizando o modelo de vetores autorregressivos (VAR). Os resultados obtidos apontam para assimetrias nas respostas dos produtos dos setores industriais do Estado a mudanças na condução da política monetária – sendo as indústrias mais intensivas em capital com maiores reações. Em busca desta evidencia, realizou-se um estudo dos dois principais canais de transmissão da política monetária: o canal da taxa de juros e o canal do crédito. Os resultados do modelo cross-section mostraram que o canal de crédito possui uma maior influência sobre os diversos setores industriais do Estado de Pernambuco.

Orientador: Prof. Dr. Marcelo Augusto Christoffolete / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Biotecnociência, 2014. / Desde o século XV, animais fazem parte da rotina na área da pesquisa, principalmente para estudos de doenças, e hoje em dia o modelo animal mais utilizado para estes estudos é o camundongo, tendo uma participação em mais de 90% das pesquisas em todo o mundo, sendo considerado como uma primeira via para definir funções de genes em mamíferos. Os camundongos são considerados os principais modelos nas técnicas de transgenia animal, porém estas técnicas ainda estão em desenvolvimento, uma vez que as metodologias hoje utilizadas para a geração de animais transgênicos ainda se encontram com uma taxa de sucesso considerada baixa e são dispendiosas, necessitando de muitas etapas. Uma das dificuldades é o contato com a membrana do óvulo devido a zona pelúcida, que é considerada uma barreira física. Vetores virais estão em evidência nas técnicas de transgenia animal, sendo o lentivírus o mais utilizado. Portanto, o objetivo deste projeto é estabelecer um protocolo para a integração de DNA exógeno em óvulos por infecção lentiviral, anteriormente a fertilização in vitro juntamente com a técnica de dissecção parcial da zona pelúcida. Como vetor foi utilizado um lentivírus com GFP em sua construção. Para ocorrer a fertilização in vitro, foram feitas coletas de óvulos em camundongos fêmeas da linhagem C57BL/6, tratadas com injeções hormonais, e coletas de espermatozoides em machos desta mesma linhagem. Os óvulos obtidos foram divididos em grupos controle e com dissecção parcial da zona pelúcida, e estes foram subdivididos em grupos com e sem infecção lentiviral. Entre os grupos houve variação de 20% a 56,25% de embriões em estágio de duas células, e em alguns grupos foi possível alcançar o estágio de blastocisto eclodido. Porém não foi possível visualizar a emissão de fluorescência para confirmar a infecção lentiviral. Em conclusão as metodologias utilizadas tanto para a fertilização in vitro como para a dissecção parcial da zona pelúcida foram de sucesso. Porém a integração do DNA exógeno mostrou resultados não conclusivos, necessitando de estudos futuros. / Since the XV century, animals are used routinely in research, mainly for diseases studies, and nowadays the most used animal model is the mouse, which one has more than 90% of participation in researches around the world and it is considered the first track to define gene function in mammals. Mouse is the main model in transgenic techniques, however the methods available to generate transgenic animals still have a considerable low rate, and also it is expensive, requiring many degrees. An ordinary issue is the contact with the membrane of oocyte due zona pellucida that is considered a physical barrier. In transgenic animals technique, it is in evidence the utilization of viral vectors, and the most used are the lentiviruses. Therefore, the objective of this project is to establish a protocol for the integration of exogenous DNA by lentiviral infection into oocytes, before the in vitro fertilization, using the technique of partial dissection of the zona pellucida. It was used as a vector a lentivirus with GFP in your construction. For in vitro fertilization, were collected oocytes from C57Bl/6 mice, treated with hormones, and sperm from males of the same strain. The obtained oocytes were divided in control group and partial dissection of the zona pellucida group, and then subdivided in groups with and without lentiviral infection. Between the groups, was achieved 20% to 56,25% of two cells stage embryo, and hatched blastocysts stage were obtained at some groups. Therefore it was not possible to visualize florescence emission to confirm the lentiviral infection. In conclusion we have a practicable protocol for in vitro fertilization and partial dissection of the zona pellucida, reaching blastocysts stages in two groups. However the integration of exogenous DNA results were inconclusive, requiring further studies.

A hemofilia A é uma doença caracterizada pela deficiência do fator VIII (FVIII) de coagulação sanguínea e atinge 1 em 5000 homens. Países desenvolvidos, utilizam como terapia o FVIII recombinante (rFVIII), por apresentar maior segurança e consistir uma fonte ilimitada. Estudos realizados em nosso laboratório, utilizando o vetor retroviral pMFG-FVIII-P140K, originaram as linhagens celulares humanas, HepG2FVIIIdB/P140K (hepática) e Hek293FVIIIdB/P140K (renal), que foram selecionadas pelo mesmo sistema de seleção, o tratamento in vitro com as drogas Benzilguanina e Temozolomide. O presente trabalho teve por objetivo caracterizar e detalhar o padrão de integração do vetor retroviral pMFG-FVIII-P140K nas duas linhagens celulares humanas, e verificar se o perfil de integração está relacionado ao tipo celular específico ou se este sofre influência da estratégia de seleção a qual as células foram submetidas anteriormente. Foi utilizada a técnica de LM-PCR (ligação-mediada por PCR) que permite localizar o sítio de integração do vetor viral, por meio do sequênciamento do produto de PCR obtido após a digestão com enzimas de restrição e ligação de uma sequência adaptadora (LINKER) ao DNA genômico. Após o seqüenciamento as sequências foram submetidas a análises em bancos de dados de genomas (Human BLAT, QuickMap e DAVID/EASE) para caracterização dos respectivos clones. Também foi realizada uma análise da expressão relativa do mRNA relativo ao rFVIII por RT-PCR e da atividade biológica pelo teste de TTPA. Dessa forma foi possível observar que ambas as linhagens modificadas expressam o mRNA relativo ao rFVIII e que as células HepG2 e Hek293 apresentam níveis de secreção da proteína recombinante biologicamente ativa da ordem de 7,9 UI/mL e 2,1 UI/mL, respectivamente. Foram sequenciados um total de 201 clones da HepG2, sendo 123 similares ao genoma humano e dentre estes 73 considerados verdadeiros e 50 ambíguos. Da Hek293 foram sequenciados 221 clones, sendo 179 similares ao genoma humano e dentre estes 64 verdadeiros e 115 ambíguos. Observamos que o vetor retroviral pMFG-FVIII-P140K apresenta um perfil de integração não randômico e diferente entre as células estudadas, uma vez que na linhagem HepG2 houve uma preferência pelos cromossomos 19, 17 e 11, e na Hek293 pelo cromossomo 9. Em relação a regiões genômicas tais como distância de ilhas CpGs e de sítios de ligação de fatores de transcrição não houve diferença no perfil de integração em ambas as linhagens celulares, visto que nas duas células o vetor se inseriu preferencialmente a uma distância de ± 30-60Kb dessas regiões. Observamos também que houve uma integração dentro de genes codificadores de proteínas da ordem de 52% e 44% nas células HepG2 e Hek293, respectivamente, contudo em ambos os casos mais de 90% dessas inserções ocorreram em regiões intrônicas. Houve 20% de integrações em sítios frágeis do genoma na linhagem HepG2 e 17% na Hek293. Em suma este trabalho mostrou a integração do vetor retroviral pMFG-FVIII-P140K específica para as duas linhagens em estudo. Além disso, pudemos observar que em ambas as linhagens celulares, HepG2FVIIIdB/P140K e Hek293FVIIIdB/P140K, existem regiões gênicas dentro dos cromossomos na qual o vetor exibe uma preferência. O perfil de integração caracterizado aqui difere de outros trabalhos da literatura que utilizaram retrovírus derivados de MLV. Isso nos leva a crer que o padrão de inserção descrito pode estar relacionado ao fato de que essas células foram tratadas anteriormente com drogas quimioterapêuticas para seleção de um clone celular com maior nível de produção de rFVIII, levando consequentemente a seleção de um perfil de integração semelhante entre as linhagens celulares, mesmo estas tendo origens teciduais diferentes. / Hemophilia A is a disease characterized by deficiency of blood clotting factor VIII (FVIII) and affects 1 in 5000 men. Developed countries use as therapy for Hemophilia A recombinant FVIII (rFVIII) because rFVIII concentrates have proven efficacy and safety and this therapy consist of an unlimited supply.. Studies in our laboratory using the retroviral vector pMFG-FVIII-P140K, originate the human recombinant cell lines, HepG2FVIIIdB/P140K (liver origen) and Hek293FVIIIdB/P140K (renal origen) which were selected with high doses of Benzyladenine and Temozolomide. This study aimed to characterize the integration pattern of retroviral vector pMFG-FVIII-P140K in these human cell lines, and verify if the profile of integration is related to specific cell type or it was influenced by the selection strategy which cells have been previously submitted. We used the technique of LM-PCR (ligation-mediated PCR) that allows to locate the site of viral vector integration by the sequencing of PCR products. The sequences were obtained after genomic DNA digestion with restriction enzymes and subsequent connection of an adapter (LINKER) to 5or 3 of the DNA fragment. The sequences were analyzed in genomic databases (Human BLAT, and Quickmap DAVID / EASE) for characterization of the respective clones. It was also performed an analysis of relative expression of rFVIII mRNA by RT-PCR and the biological activity was measured by APTT test. Thus it was observed that both cell lines express the mRNA relative to rFVIII and HepG2 and HEK293 cells have levels biologically active recombinant protein approximately 7.9 IU / mL and 2.1 IU / mL, respectively . We sequenced a total of 201 clones of HepG2FVIIIdB/P140K, 123 of these sequences match to the human genome and, among those 73 were considered true and 50 were ambiguous. In Hek293FVIIIdB/P140K 221 clones were sequenced, these total, 179 were similar to the human genome. 64 were true and 115 were ambiguous. We note that the retroviral vector pMFG-FVIII-P140K presents a profile of integration different and non-random between the studied cells lines, in HepG2FVIIIdB/P140K was observed a preference of integration for chromosomes 19, 17 and 11, and in Hek293FVIIIdB/P140K for the chromosome 9. In genomic regions such as CpG islands and transcription factors binding sites (TFBS), there was no difference in the profile of integration in both cell lines. In the two cell lines the vector is inserted preferably at a distance of ± 30 - 60Kb of these regions. We also observed that there was 52% of integration within genes encoding proteins (RefSeq genes) in HepG2FVIIIdB/P140K and 44% in Hek293FVIIIdB/P140K cells. In both cases more than 90% of the insertions occurred in intronic regions. There were 20% of integrations at fragile sites in the genome of HepG2 cell line and 17% in Hek293. In summary this study showed the integration profile of retroviral vector pMFG -FVIII-P140K in two different cell lines that produces FVIIIr protein are very similar. Furthermore, we observed that in both cell lines, HepG2FVIIIdB/P140K and Hek293FVIIIdB/P140K, there are genetic regions within the chromosomes in which the vector displays a preference. The integration profile featured described here differs in CpGs island and TFBS from other studies in the literature that used retroviruses derived from MLV. This leads us to believe that the integration pattern described here may be related to the fact that these cells were previously treated with chemotherapeutic drugs for selecting a cell clone with the highest level of production of rFVIII, consequently leading to selection of a similar profile integration between cell lines, even those having different tissue origins.

Submitted by Lúcia Brandão (lucia.elaine@live.com) on 2015-12-11T19:58:19Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcio Costa de Araújo Filho.pdf: 681472 bytes, checksum: 53be06d6f9ff8f6a8093db4ff7812115 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T15:34:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcio Costa de Araújo Filho.pdf: 681472 bytes, checksum: 53be06d6f9ff8f6a8093db4ff7812115 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-01-19T17:52:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcio Costa de Araújo Filho.pdf: 681472 bytes, checksum: 53be06d6f9ff8f6a8093db4ff7812115 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-01-19T17:52:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcio Costa de Araújo Filho.pdf: 681472 bytes, checksum: 53be06d6f9ff8f6a8093db4ff7812115 (MD5) Previous issue date: 2014-06-20 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / It is said that a variety Riemannian M2 is a surface with curvature vector average standard parallel if its mean curvature vector is nonzero and the unit vector given this direction is parallel to the normal fi cry . This dissertation demonstrated that In all analytical surface with high curvature normalized vector parallel to or be em E4 or a hypersphere give as a minimum area . Besides that, proof that if a sphere of Riemann in In Vector has average normalized curvature and parallel , then it is in or E3 or a hypersphere of In as a surface minimum. / Diz-se que uma variedade Riemanniana M2 é uma superfície com vetor curvatura média normalizado paralelo se o seu vetor curvatura média é não-nulo e se o vetor unitário dado por esta direção é paralelo no fibrado normal. Nesta dissertação é demonstrado que toda superfície analítica em Em com vetor curvatura médio normalizado paralelo deve ou estar em E4 ou em uma hiperesfera de Em como uma superfície mínima. Além disso, prova-se que se uma esfera de Riemann em Em tem vetor curvatura médio normalizado e paralelo, então ou ela está em E3 ou em uma hiperesfera de Em como uma superfície mínima.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:57:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Renato_F_Souza (1).pdf: 262810 bytes, checksum: c5dfb41da2929b401486de76e9d31f24 (MD5) Previous issue date: 2010-11-30 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Health Geography has been contributing a lot in the studies on the health-disease process. This approach allows to understand the dynamics that occurs in the geographical space regarding a certain worsen or disease. The behavior of the space distribution of the dengue is a good example to comprehend this dynamic. Thus this research tried to associate the larval density using LIRAa, but carrying in environmental and social factors consideration that are associates in the health-disease process. Having as base data infestation predial and the kinds of the places mosquito obtained by LIRAa in the period from 2008 to 2009, they were used the averages of the first semester identifying that 47,2% of the stratums found introduce infestation high risk and the most vulnerable areas to the vector are the north, east, center-south and south zones. However, using the averages for the second semester, it identifies a reduction of the stratums found with infestation high risk, representing 15% located in the north and east zones. The combat of dengue vector is a commitment of all society and requires attention not only of sectors linked to the greets, but of sectors that are directly associated to the incidence of dengue vector, such as public cleansing services and sanitation. Manaus for it geographical location and climate finishes being a propitious area for a dengue epidemic. Understanding the factors human and environmental for draw the dengue in Manaus is a perspective that should be adopted, mostly as instrument that can assist the control actions of the vector / A Geografia da Saúde tem contribuído bastante nos estudos sobre o processo saúde-doença. Essa abordagem permite compreender a dinâmica que ocorre no espaço geográfico em relação a um determinado agravo ou doença. O comportamento da distribuição espacial do dengue é um bom exemplo para compreender essa dinâmica. Dessa forma, essa pesquisa procurou associar a densidade larval na cidade de Manaus através do Levantamento de Índice Rápido do Aedes aegypti (LIRAa), mas levando em consideração fatores ambientais e sociais que estão associados no processo saúde-doença. Tendo como base os dados de infestação predial e os tipos de criadouros do mosquito obtidos pelo LIRAa no período de 2008 a 2009, foram utilizadas as médias dos dados do primeiro semestre, identificando que 47,2% dos estratos mapeados apresentam alto risco de infestação, sendo que as áreas mais vulneráveis ao vetor são as zonas norte, leste, centro-sul e sul. No entanto, utilizando as médias para o segundo semestre, identifica-se uma redução dos estratos mapeados com alto risco de infestação, representado 15%, localizados nas zonas norte e leste. O combate ao vetor da dengue é um compromisso de toda a sociedade e requer atenção não apenas de setores ligados à área da saúde, mas de outros setores que também estão associados ao controle do vetor, como por exemplo, limpeza pública e saneamento. Manaus por sua localização geográfica e seu clima acaba sendo o espaço propício para uma possível epidemia de dengue. Portanto, compreender os fatores socioambientais para mapear o dengue é uma perspectiva que deve ser adotada, principalmente com a ajuda de instrumentos que possam auxiliar as ações de controle vetorial, como é o caso do LIRAa.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-10-15T13:44:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Marcos Roberto Gomes (mrobertosg@gmail.com) on 2018-10-15T14:28:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-10-15T14:36:01Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-15T14:36:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2018-06-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The Amazon region has an immense Biodiversity of aquatic ecosystems of the planet and several biochemical pathways in these aquatic ecosystems, acting in the recycling of the organic carbon, such as the alpha amylase. For this, the objective of this work was to isolate amylolytic bacteria from Amazonian aquatic ecosystems, selection of a good alpha amylase producer, cloning and expression of the alpha amylase gene (Amy). In order to isolate the colony forming units (CFUs) and to identify the qualitative and quantitative amylolytic enzyme activity, besides cloning the AMYKOR gene of the alpha amylase and expressing it in E. coli. The water samples were collected in the Negro, Solimões and Mamori rivers, and later, clones with the ability to hydrolyze starch were identified. It was then extracted from the total DNA of the amylolytic bacteria for amplification of the Ribosomal 16 S RNA and alpha-amylase genes for molecular taxonomic identification. Sequence analysis showed that Bacillus koreensis was the best producer of alpha-amylase. Subsequently, sequences of the alpha amylase gene were sent to the chemical synthesis, which was subsequently cloned and expressed in E. coli. B. koreensis and the recombinant alpha-amylase producing E. coli clone were cultured in 50 ml LB medium with shaking at 30 °C and 37 °C respectively. Cells were removed by slow speed centrifugation and the enzymes from supernatants precipitated with 50% ethanol, recovering a total of 106 units of alpha amylase (recombinant) and 120 units of wild alpha amylase from Bacillus koreensis). The results of the biochemical characterization showed that both the natural and the recombinant enzyme presented optimum pH equal to 6 and optimum temperature of 60 °C, for both enzymes studied. We verified the parameters of apparent enzyme kinetics of Km of 4.8 mg / mL and the apparent maximum rate of 2.6 mg-1. mL-1. minute-1 of the recombinant alpha amylase, as well as apparent enzyme kinetics parameters of apparent Km of 4.0 mg / ml and the apparent maximum rate of 2.3 mg-1. mL-1. minute-1 of the wild-type alpha amylase from Bacillus koreensis. It can be seen that both natural and recombinant alpha amylase exhibited optimum temperatures, optimum pHs and similar kinetic parameters. These parameters indicate that the enzyme has potential for industrial use. / A região amazônica possui uma imensa Biodiversidade de ecossistemas aquáticos do planeta e várias vias bioquímicas nestes ecossistemas aquáticos, atuando na reciclagem do carbono orgânico, tal como, a alfa amilase. Para isto, o objetivo deste trabalho foi isolar bactérias amilolíticas dos ecossistemas aquáticos da Amazônia, seleção de um bom produtor de alfa amilase, clonagem e expressão do gene da alfa amilase (Amy). Com o propósito de isolar as unidades formadoras de colônias (UFC’s) e identificar a atividade enzimática amilolítica qualitativa e quantitativa, além de, clonar o gene AMYKOR da alfa amilase e expressar em E. coli. A mostras de água foram coletadas nos rios Negro, Solimões e o Mamori, e posteriormente, foram identificados clones com a capacidade de hidrolisar amido. A seguir, foi extraído do DNA total das bactérias amilolíticas para amplificação dos genes de RNA Ribossomal 16 S e do gene de alfa-amilase para identificação taxonômica molecular. As análises das sequências mostraram ser Bacillus koreensis o isolado melhor produtor de alfaamilase. Subsequentemente, foi enviado para a síntese química a sequências do gene alfa amilase, que posteriormente, foi clonado e expresso em E. coli. O B. koreensis e o clone recombinante de E. coli produtores de alfa-amilase foram cultivados em 50 mL meio LB com agitação a 30ºC e 37ºC respectivamente. A células foram retiradas por centrifugação a baixa velocidade e as enzimas dos sobrenadantes precipitadas com etanol 50%, recuperandose um total de 106 unidades de alfa amilase (recombinante) e 120 unidades de alfa amilase selvagem de Bacillus koreensis). Os resultados da caracterização bioquímica mostraram que tanto a enzima natural como a recombinante apresentaram pH ótimo igual a 6 e temperatura ótima de 60 °C, para ambas as enzimas estudadas. Verificamos os parâmetros da cinética enzimática aparente de Km de 4,8 mg/mL e a velocidade máxima aparente de 2,6 mg-1 . mL- 1 . minuto-1 da alfa amilase recombinante, bem como, os parâmetros da cinética enzimática aparentes de Km aparente de 4,0 mg/mL e a velocidade máxima aparente de 2,3 mg-1 . mL-1 . minuto-1 da alfa amilase selvagem do Bacillus koreensis. Pode-se verificar que tanto a alfa amilase natural como a recombinante apresentaram temperaturas ótimas, pHs ótimos e parâmetros cinéticos similares. Esses parâmetros indicam que a enzima tem potencial para uso industrial.

Made available in DSpace on 2016-08-19T17:37:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_KATIANE DOS SANTOS LOBO.pdf: 1666125 bytes, checksum: 84649083f9b691e20b45fac3ff5390e4 (MD5) Previous issue date: 2015-04-30 / FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO / Currently dengue is a serious global public health problem, in Brazil there is increase in the number of cases every year and the circulation of several serotypes. The development of new strategies for the control of Aedes aegypti is of utmost importance to minimize or eliminate the cases of the disease. An alternative for the control of this vector is the use of biological control agents such as Bacillus thuringiensis, which is toxic to this insect order of epidemiological importance. In this study, we sought to investigate the biological control of A. aegypti, with the use of B. thuringiensis isolated from Cerrado Maranhense. Selective bioassays were conducted to determine the entomopathogenic activity against the larvae of A. aegypti, quantitative bioassays in order to determine the toxicity of isolates, by means of the estimation of Median Lethal Concentration (LC50) and PCR tests (Polymerase Chain Reaction) to verify the presence of mosquitocidal genes (cry and cyt). From 45 soil samples collected in 17 counties in the State, it was obtained 1225 bacterial colonies, with 383 (31.26%) identified as B. thuringiensis. Of the 383 isolates tested, 12 (3.13%) showed larvicidal activity greater than 50% (BtMA 25, BtMA 64, BtMA 104, BtMA 131, BtMA 194, BtMA 251, BtMA 401, BtMA 410, BtMA 413, BtMA 450, BtMA 451 and BtMA 560), which were selected for subsequent realization of the quantitative bioassay and molecular characterization. The quantitative bioassays allowed to observe that the lower LC50 values were obtained with the isolate 401 (4.0 x 104 spore-crystals/mL) and with the standard bacteria Bti (0.32 x 107 spore-crystals/mL). The others tested isolates showed low larvicidal activity. The PCR analysis showed that from eight tested genes: cry4Aa, cry4Ba, cry10Aa, cry11Aa, cry11Ba, cyt1Aa, cyt1Ab and cyt2Aa, five of them: cry11Aa, cry11Ba, cyt1Aa, cyt1Ab and cyt2Aa were detected in ten isolates, being absent in only two of 12 isolates tested. These data demonstrate that the isolates of B. thuringiensis from Cerrado Maranhense showed high pathogenicity and potential for biological control of A. aegypti. / Atualmente a dengue é um grave problema de saúde pública mundial, no Brasil verifica-se aumento do número de casos a cada ano e a circulação de vários sorotipos virais. O desenvolvimento de novas estratégias para o controle do Aedes aegypti é de extrema importância, para minimizar ou erradicar os casos da doença. Uma alternativa para o controle deste vetor é a utilização de agentes de controle biológico, como Bacillus thuringiensis, que apresenta toxicidade a essa ordem de inseto de importância epidemiológica. Neste estudo, buscou-se investigar o controle biológico de A. aegypti, com o uso de B. thuringiensis isolados do Cerrado Maranhense. Foram realizados bioensaios seletivos para determinar a atividade entomopatogênica contra as larvas de A. aegypti, bioensaios quantitativos com a finalidade de determinar a toxicidade dos isolados, por meio da estimativa da Concentração Letal Mediana (CL50) e testes de PCR (Reação em Cadeia da Polimerase) para verificar a presença de genes mosquitocida (cry e cyt). A partir de 45 amostras de solo coletadas em 17 municípios do estado, obteve-se 1225 colônias bacterianas, sendo 383 (31,26%) identificadas como B. thuringiensis. Dos 383 isolados testados, 12 (3,13%) mostraram atividade larvicida superior a 50% (BtMA 25, BtMA 64, BtMA 104, BtMA 131, BtMA 194, BtMA 251, BtMA 401, BtMA 410, BtMA 413, BtMA 450, BtMA 451 e BtMA 560), aos quais foram selecionados para posterior realização do bioensaio quantitativo e caracterização molecular. Os bioensaios quantitativos permitiram observar que os menores valores de CL50 foram obtidos com o isolado 401 (4,0 x 104 esporos-cristais/mL) e com a bactéria padrão Bti (0,32 x 107 esporos-cristais/mL). Os demais isolados testados mostraram baixa atividade larvicida. Os testes de PCR mostraram que dos oito genes testados: cry4Aa, cry4Ba, cry10Aa, cry11Aa, cry11Ba, cyt1Aa, cyt1Ab e cyt2Aa, cinco destes: cry11Aa, cry11Ba, cyt1Aa, cyt1Ab e cyt2Aa foram detectados em dez isolados, estando ausentes em apenas dois dos 12 isolados testados. Esses dados demonstram que os isolados de B. thuringiensis do Cerrado Maranhense apresentaram alta patogenicidade e potencial para o controle biológico de A. aegypti.