[pt] Esta dissertação tem por objetivo o desenvolvimento de um transdutor magnético baseado no efeito da Magnetoimpedância Gigante (GMI – Giant Magnetoimpedance), destinado à medição de campos biomagnéticos. A motivação deste trabalho advém da inexistência de um sistema de baixo custo capaz de medir satisfatoriamente campos biomagnéticos, operando à temperatura ambiente e em plena conformidade com os princípios biometrológicos. Por sua vez, a metodologia experimental empregada iniciou-se pela medição e minuciosa análise das características de módulo e fase de sensores GMI em função do campo magnético, verificando-se suas dependências em relação ao comprimento das amostras e ao nível CC e frequência da corrente de excitação. Também, investigou-se a histerese e a homogeneidade das amostras GMI. Em seguida, foram idealizados circuitos eletrônicos para condicionamento e leitura das amostras GMI, destacando-se a estrutura desenvolvida que possibilita a leitura gradiométrica e algumas configurações inovadoras que permitem tanto a amplificação da sensibilidade de fase dos sensores GMI quanto a homogeneização das características de fase. Os resultados obtidos para o melhor transdutor magnético GMI desenvolvido, o qual é baseado na fase da impedância, apresentou uma elevada sensibilidade (250 mV/nT), indicando ganhos superiores a 1500 vezes quando comparado a protótipos baseados no módulo e, consequentemente, possibilitando alcançar novos patamares de resolução. Como conclusão ressaltase o grande potencial do magnetômetro GMI desenvolvido, caracterizado por seu baixo custo e elevada sensibilidade, quanto a sua aplicabilidade na medição de campos magnéticos ultra-fracos e, em especial, de campos biomagnéticos. Assim, o presente desenvolvimento contribui para a difusão das técnicas diagnósticas baseadas na medição de campos biomagnéticos, no ambiente clínico-hospitalar. / [en] This M.Sc. dissertation aims at developing a magnetic field transducer based on the Giant Magnetoimpedance (GMI) effect to be applied on the measurement of biomagnetic fields. The motivation of this work stems from the lack of a low cost system capable of adequately measuring biomagnetic fields, operating at room temperature and in full conformity with the biometrological principles. On the other hand, the experimental methodology began by measuring and carefully analyzing the impedance magnitude and phase characteristics of GMI sensors as a function of the magnetic field, verifying their dependencies on the length of the samples and on the DC level and frequency of the excitation current. It was also investigated the hysteresis and the homogeneity of GMI samples. In turn, the electronic circuits for conditioning and reading of GMI samples were developed, highlighting the developed structure that enables a gradiometric reading and some innovative configurations that allow both the enhancement of the impedance phase sensitivity of GMI sensors and the homogenization of their impedance phase characteristics. The results obtained for the best GMI magnetic transducer developed, which is based on the impedance phase, showed a high sensitivity (250 mV/nT), indicating gains of more than 1500 times when compared to magnitude-based prototypes and, consequently, reaching much better resolution levels. In conclusion it is emphasized the great potential of the developed GMI magnetometer, characterized by its low cost and high sensitivity, as to its applicability in measuring ultra-weak magnetic fields and in particular biomagnetic fields. Thus, the present development contributes to the spread of diagnostic techniques based on the measurement of biomagnetic fields, in clinical and hospital environments.

[pt] Objetivo: Otimização da produção de lipases por células de Yarrowia lipolytica, através do planejamento experimental e avaliação dos aspectos metrológicos envolvidos no processo. Motivação: Embora existam muitos trabalhos na literatura que relatem a produção de lipases por microrganismos, poucos abordam a otimização do processo através do planejamento experimental e nenhum deles considera o rigor metrológico e a estimativa da incerteza de medição. Contextualização: As enzimas lipases serão objeto de estudo por apresentarem grande versatilidade de aplicações e por serem produzidas por muitos microrganismos. As leveduras, no entanto, apresentam inúmeras vantagens operacionais sobre os demais microrganismos e entre elas foi selecionada uma cultura de Yarrowia lipolytica, isolada no Brasil. A produção de lipases depende de muitas variáveis, como temperatura, pH, concentração da fonte de carbono e nitrogênio, inóculo, entre outras. Nos processos de fermentação, onde há interação entre estas variáveis e a influência de cada uma é importante, é essencial estabelecer um método que considere estas interações, e otimize as condições experimentais para obtenção de melhores resultados. A confiabilidade metrológica do processo é de fundamental importância uma vez que diferenças significativas nos resultados são evidenciadas, principalmente em escala industrial. Metodologia: Dez experimentos foram planejados através do método D-optimal nos quais foram variadas as concentrações da fonte de carbono, da fonte de nitrogênio e de inóculo. A estimativa da incerteza de medição da atividade lipásica foi feita com base nas recomendações do Guia para Expressão da Incerteza de Medição (GUM) e do Guia CG 4 publicado pela EURACHEM. Resultados: A maior atividade lipásica obtida foi de 4815 U/L (80,3 (mi)kat/L) com incerteza expandida de 137 U/L (2,3 (mi)kat/L), nas seguintes condições: 0,5% de óleo de oliva (fonte de carbono), 0,7% de peptona (fonte de nitrogênio) e 10 mg/mL de inóculo. Em termos de produtividade volumétrica, tais condições forneceram o valor de 69,28 U/L h. Conclusões: Com estes resultados, foi possível concluir que a utilização do planejamento D-optimal favoreceu a produção em agitador de frascos, já que foi atingida uma atividade lipásica superior às alcançadas anteriormente por outros autores sem otimização, em frascos agitados (2700 U/L) ou em fermentador (4240 U/L). Sugere-se a produção de lipases por células de Yarrowia lipolytica, nas condições citadas acima, com vistas à obtenção de materiais de referência certificados, desde que estudos posteriores de purificação e estabilidade da lipase obtida sejam feitos. / [en] Objective: Optimization of lipase production by Yarrowia lipolytica cells through experimental design and evaluation of metrological aspects related to process. Motivation: Although several published papers are found describing lipase production by microorganisms, few of them refer to process optimization through experimental design and none of them refer to metrological evaluation and the estimate of the uncertainty in measurement. Context: Microbial lipases are an important group of biotechnologically valuable enzymes that present widely diversified catalytic properties. The interest in production of these versatile enzymes increased significantly, due to the vast amplitude of their industrial applications. There are many microorganisms able to produce lipases, but yeasts present some operational advantages compared to other microorganisms, and for this reason a strain of Yarrowia lipolytica was used in this work. A serie of factors, individually or in association, can affect production of such substances leading to different levels of product concentration and productivity. Empirical studies have been traditionally used to determine the effect of these factors on process parameters. A possible approach is to vary one factor while keeping the other at a constant level, but this approach is time consuming, does not include the interaction effects among variables, and does not necessarily lead to optimized results. Nowadays, different strategies are employed to optimize production parameters. These strategies not only allow process optimization but can also establish the dependent and independent variables. Methodology: Ten experiments were planned with the D-optimal design in which concentrations of inoculum, carbon source and nitrogen source were changed. The estimate of the uncertainty in measurement of the lipase activity was developed based on the Guide to the Expression of Uncertainty in Measurement (GUM) and on the Guide CG 4 published by EURACHEM. Results: The highest lipolytic activity obtained was 4815 U/L (80,3 (mi)kat/L) with an expanded uncertainty of 137 U/L (2,3 (mi)kat/L), under the following conditions: 0.5% of olive oil (carbon source),0.7% of peptone (nitrogen source) and 10 mg/mL of inoculum. In terms of volumetric productivity, these conditions provided 69.28 U/L h. Conclusions: It is possible to conclude that the D-optimal design usage enhanced lipase production in shaken-flasks. Moreover the activity obtained in this work was higher than others previously reported with the same microorganism, without experimental design, in shaken-flasks (2700 U/L) or even in bench-fermenter (4240 U/L). The production of lipases by Yarrowia lipolytica cells aiming the classification as certified reference material can be recommended after further purification and stability studies.

A Biometrologia é uma ciência emergente que estuda os conhecimentos em Biologia e Metrologia para desenvolver aplicações críticas em diversas áreas. Nesta Tese, pretende-se trabalhar especificamente as escolhas teóricas na produção de conhecimento biometrológico, numa perspectiva arqueológica da pesquisa de inspiração foucaultiana. Tendo a produção científica da Biometrologia brasileira como objeto de pesquisa, esta Tese propõe o seguinte problema: pode ser encontrado na produção científica em Biometrologia princípios de inteligibilidade e de análise em termos de vida, de métrica e de logos? A tese aqui defendida é de que sim, de que esta produção científica é um elemento elucidatório das relações de saber/poder estabelecidas segundo distintas séries e disciplinas. O problema proposto exigiu uma pesquisa comprometida com uma ontologia de vida, métrica e logos, fazendo desta tese uma declaração, dentre as muitas possíveis, de como é o objeto de estudo e os procedimentos pelos quais foi possível descrevê-lo. Além da Introdução e da Conclusão, esta tese divide-se em três seções, um anexo e dois apêndices: Biometrologia: o novo discurso científico do biopoder, discutindo o conceito de Biometrologia, sua emergência e função; Procedimentos Arqueológicos na análise do discurso biometrológico, mostrando que existe na arqueologia foucaultiana alguns elementos que permitem um modelo analítico para o objeto de pesquisa; Análise das escolhas teóricas em Biometrologia, analisando a rede de conhecimentos formada no âmbito da Biometrologia brasileira, identificando o agenciamento de enunciações e o pertencimento a certas disciplinas que se encontram na ordem do discurso metrológico contemporâneo; Anexo: Métricas utilizadas no estudo da Vida, definindo as grandezas mensuráveis segundo áreas-chave biometrológicas; Apêndice I: A produção científica em Biometrologia, sumarizando e identificando enunciações e reinscrições, resumindo e propondo séries distintas na visão constitutiva daquela produção científica; Apêndice II: Matriz de disciplinas por seriação, relacionando as disciplinas engajadas pela Biometrologia e as séries propostas nos procedimentos metodológicos da Tese. / Biometrology is an emerging science that studies Biology and Metrology in order to develop critical applications in several areas. In this thesis, we intend to work specifically the theoretical choices in the production of biometrological knowledge, in an archaeological perspective of the Foucaultian-inspired research. Having the scientific production of Brazilian Biometrology as an object of research, this thesis proposes the following problem: can one find in the scientific production in Biometrology principles of intelligibility and analysis in terms of life, metrics and logos? The thesis here defended is that, yes, this scientific production is an elucidatory element of the relations of knowledge / power established according to different series and disciplines. The proposed problem required a research committed to an ontology of life, metrics and logos, making this thesis a statement, among many possible, of how it is the object of study and the procedures by which it was possible to describe it. In addition to the Introduction and Conclusion, this thesis is divided into three sections, an appendix and two appendices: Biometrology: the new scientific discourse of biopower, discussing the concept of Biometrology, its emergence and function; Archaeological procedures in the analysis of the biometrological discourse, showing that there is in Foucaultian archeology some elements that allow an analytical model for the research object; Analysis of the theoretical choices in Biometrology, analyzing the knowledge network formed in the scope of Brazilian Biometrology, identifying the agency of enunciations and belonging to certain disciplines that are in the order of the contemporary metrological discourse; Annex: Metrics used in the study of Life, defining measurable quantities according to key biometrological areas; Appendix I: The scientific production in Biometrology, summarizing and identifying enunciations and reinscriptions, summarizing and proposing different series in the constitutive vision of that scientific production; Appendix II: Matrix of disciplines by seriation, relating the disciplines engaged by Biometrology and the series proposed in the methodological procedures of the Thesis.

Currently cellular therapies, such as hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), are produced at a small scale on a case-by-case basis, usually in a clinical or near-clinical setting. Meeting the demand for future cellular therapies will require a robust and scalable manufacturing process that is either designed around or controls the variation associated with biological starting materials. Understanding variation requires both a measure of the allowable variation (that does not negatively affect patient outcome) and the achievable variation (with current technology). The prevalence of HSCT makes it an ideal case study to prepare for more complex biological manufacturing with more challenging regulatory classifications.

A Biometrologia é uma ciência emergente que estuda os conhecimentos em Biologia e Metrologia para desenvolver aplicações críticas em diversas áreas. Nesta Tese, pretende-se trabalhar especificamente as escolhas teóricas na produção de conhecimento biometrológico, numa perspectiva arqueológica da pesquisa de inspiração foucaultiana. Tendo a produção científica da Biometrologia brasileira como objeto de pesquisa, esta Tese propõe o seguinte problema: pode ser encontrado na produção científica em Biometrologia princípios de inteligibilidade e de análise em termos de vida, de métrica e de logos? A tese aqui defendida é de que sim, de que esta produção científica é um elemento elucidatório das relações de saber/poder estabelecidas segundo distintas séries e disciplinas. O problema proposto exigiu uma pesquisa comprometida com uma ontologia de vida, métrica e logos, fazendo desta tese uma declaração, dentre as muitas possíveis, de como é o objeto de estudo e os procedimentos pelos quais foi possível descrevê-lo. Além da Introdução e da Conclusão, esta tese divide-se em três seções, um anexo e dois apêndices: Biometrologia: o novo discurso científico do biopoder, discutindo o conceito de Biometrologia, sua emergência e função; Procedimentos Arqueológicos na análise do discurso biometrológico, mostrando que existe na arqueologia foucaultiana alguns elementos que permitem um modelo analítico para o objeto de pesquisa; Análise das escolhas teóricas em Biometrologia, analisando a rede de conhecimentos formada no âmbito da Biometrologia brasileira, identificando o agenciamento de enunciações e o pertencimento a certas disciplinas que se encontram na ordem do discurso metrológico contemporâneo; Anexo: Métricas utilizadas no estudo da Vida, definindo as grandezas mensuráveis segundo áreas-chave biometrológicas; Apêndice I: A produção científica em Biometrologia, sumarizando e identificando enunciações e reinscrições, resumindo e propondo séries distintas na visão constitutiva daquela produção científica; Apêndice II: Matriz de disciplinas por seriação, relacionando as disciplinas engajadas pela Biometrologia e as séries propostas nos procedimentos metodológicos da Tese. / Biometrology is an emerging science that studies Biology and Metrology in order to develop critical applications in several areas. In this thesis, we intend to work specifically the theoretical choices in the production of biometrological knowledge, in an archaeological perspective of the Foucaultian-inspired research. Having the scientific production of Brazilian Biometrology as an object of research, this thesis proposes the following problem: can one find in the scientific production in Biometrology principles of intelligibility and analysis in terms of life, metrics and logos? The thesis here defended is that, yes, this scientific production is an elucidatory element of the relations of knowledge / power established according to different series and disciplines. The proposed problem required a research committed to an ontology of life, metrics and logos, making this thesis a statement, among many possible, of how it is the object of study and the procedures by which it was possible to describe it. In addition to the Introduction and Conclusion, this thesis is divided into three sections, an appendix and two appendices: Biometrology: the new scientific discourse of biopower, discussing the concept of Biometrology, its emergence and function; Archaeological procedures in the analysis of the biometrological discourse, showing that there is in Foucaultian archeology some elements that allow an analytical model for the research object; Analysis of the theoretical choices in Biometrology, analyzing the knowledge network formed in the scope of Brazilian Biometrology, identifying the agency of enunciations and belonging to certain disciplines that are in the order of the contemporary metrological discourse; Annex: Metrics used in the study of Life, defining measurable quantities according to key biometrological areas; Appendix I: The scientific production in Biometrology, summarizing and identifying enunciations and reinscriptions, summarizing and proposing different series in the constitutive vision of that scientific production; Appendix II: Matrix of disciplines by seriation, relating the disciplines engaged by Biometrology and the series proposed in the methodological procedures of the Thesis.

[pt] O presente trabalho visa desenvolver um sistema de avaliação metrológica de autoclaves, que atenda às normas técnicas vigentes, de baixo custo e acessível a todos Estabelecimentos Assistenciais de Saúde (EAS), visando à validação do processo de esterilização por vapor saturado e a melhoria no controle de infecção hospitalar associada a problemas decorrentes do processo de esterilização. Por meio de uma abordagem matemática, o sistema deverá ser capaz de validar o processo de esterilização, garantindo assim o nível de esterilidade necessário e com isso reduzir as barreiras tecnológicas e financeiras que hoje impedem a garantia da qualidade da esterilização de materiais, sobretudo, em EAS, tanto público como privado. Apesar de instituições como a Organização Internacional de Metrologia Legal (OIML) externarem sua preocupação no que diz respeito à necessidade do acompanhamento da qualidade das medições realizadas por Equipamentos Eletromédicos (EEM) na fase pós-comercialização, a maioria dos países, entre eles o Brasil, apesar de já terem incorporado algumas recomendações publicadas pela OIML, têm concentrado suas exigências da fase de fabricação ao registro do produto. As iniciativas de calibração e ensaios de EEM dependem da cultura metrológica dos interessados ou na busca de algum tipo de acreditação, para a qual o controle metrológico dos equipamentos vem a ser exigência obrigatória. Aliado à falta de cultura metrológica depara-se com a existência de poucas instituições capacitadas para a realização desta tarefa e com a falta de recursos disponíveis. A exemplo dos EEM, no caso dos esterilizadores por vapor saturado ou autoclaves, existe apenas um único laboratório acreditado junto à Rede Brasileira de Laboratórios de Ensaio (RBLE), acreditado em janeiro de 2008. Utilizando-se dos estudos da esterilização, em particular das autoclaves e da Norma NBR ISO 11134/2001. Foi desenvolvido um sistema destinado à validação metrológica de autoclaves. Este sistema é composto de um Hardware (sensores, sistema de aquisição e computador portátil) e de um software desenvolvido em LabView. Neste sistema os sensores são posicionados no interior da câmara de esterilização, coletando a temperatura ao longo de todo o ciclo de esterilização. Com as temperaturas coletadas, tanto nos estudos de distribuição de temperatura como nos estudos de penetração de calor, foi possível calcular as taxas de letalidade do processo e apresentar os dados estatísticos, que confirmarão a efetividade do processo ou não. Após a realização de testes visando à comprovação do funcionamento do sistema, foi realizado o teste em um equipamento utilizado em um hospital público do Rio de Janeiro. Os testes compreenderam a realização de quatro estudos sendo, dois de distribuição de temperatura e dois de penetração de calor. Foram encontradas algumas limitações decorrentes da necessidade de desenvolvimento de alguns acessórios como, por exemplo, um flange para a utilização do sistema em autoclaves com acesso à câmara através de orifícios laterais, e a necessidade da construção de uma armação articulada para a perfeita disposição dos sensores no interior da câmara. O sistema desenvolvido no presente trabalho contribui para a disseminação da realização da validação do processo de esterilização por vapor saturado, avaliação fundamental para o controle da infecção hospitalar. / [en] The present work aims at developing a system for metrological evaluation of autoclaves in accordance with the standards, having a low cost and being accessible to all the healthcare system, aiming at the validation of the process of sterilization and the improvement of the control of hospital infection. By means of a mathematical approach, the system has to be capable to validate the sterilization process, thus guaranteeing the level of sterility necessary and reducing the technological and financial barriers that today hinder the guarantee of the quality of the sterilization of materials, in public and private health system. Although organizations as the International Organization of Legal Metrology (OIML) recommend the follow-up of the quality of the measurements carried through Medical Electrical Equipment (MEE) in the after-sales phase, the majority of the countries, including Brazil, even though already having incorporated some recommendations published by OIML, have concentrated its requirements on the phase of manufacture and register of the product. The initiatives of calibration and essays of MEE depend on the metrological culture of the interested parties or in the search of some type of accreditation process, for which the metrological control of the equipment is a requirement. Ally to the lack of metrological culture comes across itself with the existence of few institutions enabled to the accomplishment of this task and with the lack of available resources. In the case of the autoclaves, in Brazil, there was only one laboratory accredited in last January. A system destined to the metrological Evaluation of autoclaves was developed. This system is composed by hardware (sensors, system of acquisition and computer) and software, developed in LabView. In this system the sensors are arranged inside of the sterilization chamber, collecting the temperature throughout the sterilization cycle. With the collected temperatures, as much in the studies of distribution of temperature as in the studies of penetration of heat, it is possible to calculate the taxes of lethality of the process and to present the statistical data, that will confirm or not the effectiveness of the process. After the tests aiming at evidencing the correct operation of the system, it has been carried out the test in an equipment used in a public hospital of Rio de Janeiro. The tests consisted of 4 (four) studies, 2 (two) of distribution of temperature and 2 (two) of penetration of heat. Some limitations due to the necessity of development of some accessories have been found, for example, a flange for the use of the system in sterilizers with access to the chamber through lateral orifices, and the necessity of the construction of a articulated scaffolding for the perfect placement of the sensors in the interior of the chamber. The system developed in the present work contributes for the dissemination of the accomplishment of the validation of the process of sterilization for saturated vapor, basic evaluation for the control of the hospital infection.

A Biometrologia é uma ciência emergente que estuda os conhecimentos em Biologia e Metrologia para desenvolver aplicações críticas em diversas áreas. Nesta Tese, pretende-se trabalhar especificamente as escolhas teóricas na produção de conhecimento biometrológico, numa perspectiva arqueológica da pesquisa de inspiração foucaultiana. Tendo a produção científica da Biometrologia brasileira como objeto de pesquisa, esta Tese propõe o seguinte problema: pode ser encontrado na produção científica em Biometrologia princípios de inteligibilidade e de análise em termos de vida, de métrica e de logos? A tese aqui defendida é de que sim, de que esta produção científica é um elemento elucidatório das relações de saber/poder estabelecidas segundo distintas séries e disciplinas. O problema proposto exigiu uma pesquisa comprometida com uma ontologia de vida, métrica e logos, fazendo desta tese uma declaração, dentre as muitas possíveis, de como é o objeto de estudo e os procedimentos pelos quais foi possível descrevê-lo. Além da Introdução e da Conclusão, esta tese divide-se em três seções, um anexo e dois apêndices: Biometrologia: o novo discurso científico do biopoder, discutindo o conceito de Biometrologia, sua emergência e função; Procedimentos Arqueológicos na análise do discurso biometrológico, mostrando que existe na arqueologia foucaultiana alguns elementos que permitem um modelo analítico para o objeto de pesquisa; Análise das escolhas teóricas em Biometrologia, analisando a rede de conhecimentos formada no âmbito da Biometrologia brasileira, identificando o agenciamento de enunciações e o pertencimento a certas disciplinas que se encontram na ordem do discurso metrológico contemporâneo; Anexo: Métricas utilizadas no estudo da Vida, definindo as grandezas mensuráveis segundo áreas-chave biometrológicas; Apêndice I: A produção científica em Biometrologia, sumarizando e identificando enunciações e reinscrições, resumindo e propondo séries distintas na visão constitutiva daquela produção científica; Apêndice II: Matriz de disciplinas por seriação, relacionando as disciplinas engajadas pela Biometrologia e as séries propostas nos procedimentos metodológicos da Tese. / Biometrology is an emerging science that studies Biology and Metrology in order to develop critical applications in several areas. In this thesis, we intend to work specifically the theoretical choices in the production of biometrological knowledge, in an archaeological perspective of the Foucaultian-inspired research. Having the scientific production of Brazilian Biometrology as an object of research, this thesis proposes the following problem: can one find in the scientific production in Biometrology principles of intelligibility and analysis in terms of life, metrics and logos? The thesis here defended is that, yes, this scientific production is an elucidatory element of the relations of knowledge / power established according to different series and disciplines. The proposed problem required a research committed to an ontology of life, metrics and logos, making this thesis a statement, among many possible, of how it is the object of study and the procedures by which it was possible to describe it. In addition to the Introduction and Conclusion, this thesis is divided into three sections, an appendix and two appendices: Biometrology: the new scientific discourse of biopower, discussing the concept of Biometrology, its emergence and function; Archaeological procedures in the analysis of the biometrological discourse, showing that there is in Foucaultian archeology some elements that allow an analytical model for the research object; Analysis of the theoretical choices in Biometrology, analyzing the knowledge network formed in the scope of Brazilian Biometrology, identifying the agency of enunciations and belonging to certain disciplines that are in the order of the contemporary metrological discourse; Annex: Metrics used in the study of Life, defining measurable quantities according to key biometrological areas; Appendix I: The scientific production in Biometrology, summarizing and identifying enunciations and reinscriptions, summarizing and proposing different series in the constitutive vision of that scientific production; Appendix II: Matrix of disciplines by seriation, relating the disciplines engaged by Biometrology and the series proposed in the methodological procedures of the Thesis.

La couleur de la peau chez un individu, appelée teint ou complexion, évolue au cours du temps et dépend de facteurs extrinsèques et intrinsèques. Une perte de son homogénéité est liée à l'apparition de lésions cutanées hyperpigmentées. Elles sont notamment provoquées par une exposition chronique au soleil et apparaissent avec l'âge, comme dans le cas du lentigo actinique. Si cette lésion hyperpigmentée bénigne est bien caractérisée à l'échelle macroscopique, peu d'études explorent ses fonctions cutanées grâce à des outils non invasifs. À l'échelle cellulaire et moléculaire, cette lésion hyperpigmentée bénigne résulte d'une altération du processus de pigmentation lors de la régulation du phénomène de photo-protection cutané. Si le modèle actuel d'une perte de cette régulation prend en compte l'altération du dialogue fonctionnel entre les couches épidermique et dermique, aucune étude ne décrit les caractéristiques fonctionnelles des cellules primaires extraites du lentigo actinique. Le premier objectif de mon projet a consisté en une exploration fonctionnelle du lentigo actinique par l'utilisation de divers paramètres biométrologiques. L'étude a été réalisée sur une cohorte de 80 femmes dont certaines présentent peu (grade 1) et, d'autres plusieurs, lentigosactiniques (grade 2) sur le visage. Après illustration du grade par une mesure photographique, différentes approches biométrologiques ont quantifié les taux de sébum, de mélanine, d'hémoglobine, d'hydratation, de réflexion de la lumière et de couleur (L *, a*, b* et lT A). Les résultats des analyses statistiques montrent que 1) la quantité de sébum discrimine les territoires cutanés de la joue et du front, 2) les taux de mélanine, d'hémoglobine, de réflexion de la lumière et de couleur sont différentiels entre les zones lésées (lentigo actinique) et non lésées, adjacentes au sein du territoire de la joue chez un volontaire, 3)que la diminution des taux de réflexion de la lumière et d'hémoglobine, ainsi que l'augmentation du taux d'hydratation, est observée au sein de la zone lésée entre les grades I et 2. L'ensemble de ces données ont mis en évidence certains paramètres biométrologiques comme indicateurs du territoire cutané, de la zone lésée vs non lésée et de l'évolution (grade 2 vs I) du lentigo actinique.Le second objectif a porté sur une analyse morphologique et fonctionnelle des fibroblastes primaires du lentigo actinique. L'étude a été réalisée sur une cohorte de 10 volontaires sur lesquels deux biopsies contenant les zones lésées et non lésées, adjacentes ont été prélevées. À partir de ces biopsies, les fibroblastes primaires humains ont été mis en culture. Une approche d'immunotluorescence révèle que les fibroblastes de lentigo actinique (FL) et ceux de la zone saine adjacente (FS) n'ont pas les mêmes caractéristiques morphologiques avec une organisation différentielle de leur cytosquelette d'actine. Une approche fonctionnelle montre que les FL ont une diminution de leur activité métabolique, de leur taux de prolifération et de leur capacité migratoire. À l'inverse, les FL sont dotés d'une augmentation de leur capacité sécrétoire en terme de facteurs solubles. Notre modèle in vitro de fibroblastes primaires (couples FL/FS), qui présentent des similitudes avec les caractéristiques décrites in vivo, représenterait un modèle cellulaire adéquat pour tester des principes actifs dont l'efficacité permettrait de réduire l'hétérogénéité du teint chez les femmes à peaux matures. Ces deux objectifs, qui ont été réalisés par des approches en recherche clinique et translationnelle, ont permis de mettre en évidence des indicateurs et des biomarqueurs du lentigoactinique qui permettront de mieux comprendre l'impact des facteurs intrinsèques et extrinsèques dans la perte d'homogénéité du teint liée au lentigo actinique. / Based on extrinsic and intrinsic factors, skin complexion of an individual evolves in time. The Joss of its homogeneity is linked to the appearance of hyperpigmented les ions. The latters are induced by chronic sun exposure and appear with the age, as in the solar lentigo disorder. Despite its well-known characterization at the macroscopic levels, only few studies explore the skin fonctions of the solar lentigo with non-invasive tools. At the cellular and molecular levels, this lesion results from an altered process of pigmentation that is involved in the regulation of the cutaneous photo-protection. Despite the changes of the functional dialogue between the epiderrnic and derrnic layers, no study describes the functional characteristics of primary ce lis isolated from the solar lentigo. The first aim of my project consisted on a functional exploration of the solar lentigo by the use of diverse biometrological parameters. The study was carried out on a cohort of 80 women, some of them had few (grade l) and others many solar lentiges (grade 2) on their faces. Thanks to photographie measurements to determine the grade, various biometrological approaches had quantified the rates of sebum, melanin, hemoglobin, moisturizing, light reflection and the colour (L *, a*, b* and 1T A). Results of the statistical analyses revealed that the quantity of sebumdiscriminates the skin territories of the cheek and forehead, 2) the rates of melanin, hemoglobin, light reflection and the colour were differential between affected (solar lentigo) and not affected zones, within the volunteers' cheek territory, and 3) decreased rates of light reflection and hemoglobin, as well as, increased rate moisturizing, were observed within the lesional zone between both grades. Altogether, our data highlighted some of the biometrological parameters, as indicators of the skin territory, the lesional vs non lesional areas and the progression (grade 2 vs 1) of solar lentigo The second aim covered morphological and functional analyses of the solar lentigo's primary fibroblasts. This study was carried out on a cohort of 10 volunteers and two biopsies, containing the peri-lesional and lesional areas, were taken from each person. From these biopsies, human primary fibroblasts were isolated and grown. An immunofluorescence approach revealed that the fibroblasts of solar lentigo (FL) and those from adjacent healthy areas (FS) did not depict similar morphological characteristics with a differential organization of their actin cytoskeleton. Functional approaches demonstrated that FL displayed decrease of their metabolic activity, theirproliferation rates and their migration capacity, compared to FS. On the contrary, FL showed increased secretion capacity in terms of soluble factors. Our in vitro mode! of primary fibroblasts(FL/FS), which showed similarities with in vivo fibroblast's characteristics, might be considered as an appropriate cellular mode! to test active principles targeting skin complexion heterogeneity in women with mature skin. Using clinicat and translational research approaches, both objectives highlighted indicators and biomarkers of the solar lentigo. This work contributed to better understand the impact of the intrinsic and extrinsic factors in the Joss of complexion homogeneitv.

[pt] Observa-se um crescente interesse na determinação da incerteza de medição para a avaliação de conformidade e garantia da qualidade, principalmente nos setores de meio- ambiente, segurança, saúde e indústria, nos quais o resultado da medição é considerado crítico por lidar diretamente com seres humanos. Na medição da pressão arterial, conforme estudos realizados em países como a Austrália, Inglaterra, Turquia e Brasil, observa-se uma grande preocupação com a confiabilidade dos resultados obtidos por esfigmomanômetros mecânicos não invasivos. Nestes estudos, erros de até 4,4 kPa (33 mmHg) foram encontrados nos instrumentos avaliados, contra o valor de erro máximo de 0,53 kPa (4 mmHg) definido na OIML R 16-1:2002. Atualmente, a avaliação da confiabilidade dos esfigmomanômetros mecânicos é obtida considerando apenas o erro de medição, sem considerar a incerteza de medição. Com a motivação de contribuir para a garantia da confiabilidade metrológica dos esfigmomanômetros mecânicos não invasivos, usados mundialmente em hospitais e residências, o presente trabalho tem por objetivo associar a incerteza de medição na avaliação da confiabilidade metrológica destes instrumentos. Para a realização das medições foi montado um aparato envolvendo instrumentos de monitoração ambiental conforme recomendações internacionais (OIML R-16-1:2002) e nacionais (ABNT NBR-14105:1998 e NIEDIMEL- 006). Os dados do presente trabalho foram obtidos por meio de medições diretas em esfigmomanômetros novos e usados utilizando um padrão de pressão. Foram avaliados: o erro de medição, a histerese, o erro fiducial e a incerteza de medição. Os resultados obtidos com o presente trabalho mostram que, em função da incerteza de medição, o erro máximo permissível de 0,53 kPa (4 mmHg) pode não fornecer a confiabilidade adequada. Se for considerado apenas o erro de medição do manômetro conforme a OIML R 16- 1:2002, 60 % dos esfigmomanômetros avaliados foram aprovados. Se for considerado o erro e a incerteza de medição do manômetro, conforme proposto, apenas 12 % dos esfigmomanômetros foram aprovados. Com base nos resultados obtidos no presente trabalho, propõe-se reduzir o erro máximo admissível para estes instrumentos, incorporando a incerteza de medição, sem a necessidade de realizar na prática o seu cálculo. Com base nos resultados do presente trabalho recomenda-se uma revisão na faixa de erro máximo permissível na avaliação da OIML, em conjunto com a proposta de uma nova especificação do manômetro usado nos esfigmomanômetros, com redução do erro intrínseco e melhora de sua resolução. / [en] It is observed an increasing interest on the estimation of measurement uncertainty to deciding on conformity and quality assurance, mainly in the fields of environment, safety, health and industry, in which the measurement results are critical once they directly deal with human beings. According to studies performed in Australia, England, Turkey and Brazil, a great concern is observed with the reliability of the results obtained for blood pressure measurements by noninvasive mechanical sphygmomanometers. In these studies, errors of up to 4,4 kPa (33 mmHg) were obtained in the evaluated instruments, against the value of maximum error of 0,53 kPa (4 mmHg) required by OIML R 16-1:2002. Nowadays, the evaluation of the reliability of these measurement instruments for medical diagnosis is obtained considering only the measurement error (according to OIML R 16-1:2002), without taking into account the measurement uncertainty. Motivated to contribute for the metrological reliability of non- invasive mechanical sphygmomanometers, globally used in hospitals and residences, the present work aims at developing a model to associate the measurement uncertainty on the metrological reliability evaluation of these instruments. In order to perform the measurements with the sphygmomanometers, a set-up were prepared with environmental monitoring according to international recommendation (OIML R-16:2002) and national standards (ABNT NBR-14105:1998 and NIE-DMEL-006). The data of the present work were obtained by means of direct measurements in new and in use sphygmomanometers, utilizing a pressure pattern. Calculation of the following parameters was performed: measurement error, hysteresis, fiducial error and measurement uncertainty. The obtained results show that, as a function of the measurement uncertainty, the maximum permissible error of 0.53 kPa (4 mmHg) can be overcome. Considering the manometer measurement error, according to OIML R 16-1:2002, 60 % of the non- invasive mechanical sphygmomanometers evaluated were approved. When considering not only the measurement error, but also measurement uncertainty of the manometer, only 12% of the non-invasive mechanical sphygmomanometers were approved. Based on the present results, a reduction of the maximum permissible error for these instruments, incorporating the measurement uncertainty, without the need to calculate it in the verification procedure, is proposed. This work recommends not only a review of OIML maximum permissible error for sphygmomanometers, but also proposes a new configuration of the instrument, with reduction of intrinsic error and improvement of resolution.

[pt] Com a motivação de contribuir para a garantia da confiabilidade metrológica de eletrocardiógrafos, o presente trabalho tem por objetivo desenvolver um sistema para avaliação da conformidade de ECGs com base na norma IEC 60601-2-51 e na Recomendação R90 (1990) da OIML. Desde 1995, as normas da série IEC 60601 vêm sendo utilizadas como base para regulamentar a avaliação de equipamentos eletromédicos no País. Em 2003, a IEC publicou a norma IEC 60601-2-51 (avaliação de desempenho de eletrocardiógrafos - ECGs) sendo adotada pela ABNT em 2005, com a denominação ABNT NBR IEC 60601-2-51. O sistema desenvolvido foi estruturado em dois subsistemas: subsistema de avaliação de segurança elétrica e subsistema de avaliação de desempenho. O sistema permite avaliar eletrocardiógrafos analógicos e eletrocardiógrafos digitais sem automatização da medição, de acordo com a norma IEC 60601-2-51. Para avaliar o sistema desenvolvido foram utilizados dois ECGs digitais em uso em hospital público do Rio de Janeiro. A sua calibração, com rastreabilidade ao SI, foi realizada no Laboratório de Metrologia do Parque de Material de Eletrônica da Aeronáutica do Rio de Janeiro (PAME-RJ). Os ensaios realizados mostraram que o sistema atende aos requisitos da norma ABNT NBR IEC 60601-2-51, com limitações caracterizadas no trabalho e passíveis de solução (rejeição de modo comum, deriva com a temperatura e reticulado de tempo e amplitude). / [en] Motivated to contribute with the guarantee of metrological reliability of electrocardiographs, the present work aims at developing a system for conformity assessment of ECGs, based on the IEC 60601-2-51 standard and on the Metrological Recomendation R-90 (1990) of OIML. Since 1995, the standard series IEC 60601 have been used as base to regulate the evaluation of electromedical equipments in Brazil. The IEC 60601-2-51 standard (performance evaluation of electrocardiographs - ECGs) has been published by IEC in 2003 and incorporated by ABNT in 2005, with the denomination ABNT NBR IEC 60601-2-51. To allow the conformity analysis to the applicable standards, the proposed system was structured in two subsystems: subsystem for electric safety evaluation and subsystem for performance evaluation. The system allows to evaluate analogical and digital electrocardiographs without automated measurements, in agreement with the IEC 60601-2- 51 standard. In order to evaluate the system, it was applied on two digital ECGs in use at a public hospital of Rio de Janeiro. Its calibration, with traceability to SI, has been performed at the Metrology Laboratory of the Electronics Material Depot of the Air Force at Rio de Janeiro (PAME-RJ). The tests performed have shown that the system complies with the requirements of the IEC 60601-2-51 standard. The detected limitations, which were characterized in this work, have simple solutions, concerning the common-mode rejection ratio, temperature drift and reticulate of time and amplitude.