Made available in DSpace on 2015-09-25T12:19:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanda Sanderana Macedo Carneiro 1.pdf: 1849714 bytes, checksum: a96b8d758bb8c0159fe76b62f59377d6 (MD5) Previous issue date: 2012-07-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Photodynamic therapy (PDT) uses a photosensitizer and a light source, causing the bacterial unviability. This study evaluated the efficacy of photodynamic therapy mediated by methylene blue (0.01%) and malachite green (0.01%) separately in the healing of wounds contaminated with Staphylococcus aureus. Two circular surgical excisions were made with the aid of a cast template and a scalpel blade at the back of 90 male rats, weighing 250-300g, and then the wounds were inoculated with Staphylococcus aureus strains ATCC 26923. The animals were grouped according to the treatment used: G I PDT methylene blue; G II PDT malachite green; G III methylene blue; G IV malachite green; G V Low level laser therapy (LLLT); G VI Control. As a light source to fotoactivate de dyes, it was used the Thera Lase diode laser (100mW, 660nm, 120 J/cm 2 , 33s, continuous emission) (DMC, São Carlos, SP, Brazil). The animals were sacrified for analysis 01, 03, 07, 14 and 21 days after the surgery. Clinically, it was evaluated red area, witened area, presence and thickness of eschar, purulent exudates and wound perimeter. The specimens were processed for histological analysis and stained with hematoxylin and eosin (HE) for examination of edema, necrosis, inflammatory infiltrate, presence of young fibroblasts, granulation tissue, epithelialization and collagen degree. The descriptive statistics analysis were made and also the Fisher exact test (p<0.05). A day after te excision, the group I showed a moderate formation of granulation tissue and intense inflammatory infiltrate, when compared to other groups. At three days post-surgery, there was a tendency to a faster re-epithelialization of the non-treated group when compared to the groups treated with PDT, whether if it were with methylene blue or malachite green. The collagen degree was also lower in the groups treated with PDT, what also shows a tendency to delay de collagen deposition in wounds submitted to this treatment. PDT also showed a tendency to delay re-epithelialization of woundsafter 07 days, when compared wounds subjected to PDT with malachite green to the control group. This trend is not still observed at 14 days post-surgery, when was just found that the granulation tissue had a greater reduction in the group submitted to TFD methylene blue (p=0,182) compared to the control group. At 21 day after surgery, there was a prevalence of slight inflammatory infiltrate and granulation tissue, with no necrosis areas nor edema on both groups. We conclude that, for wounds potentially contaminated, the PDT, especially that mediated by the methylene blue dye, was able to promote a faster tissue repair through a granulation tissue formation, besides giving a tendency to a faster regression of this granulation tissue when compared to other treatments. There was observed a tendency of a delayed epithelialization in the treatment groups, both those submitted to PDT, LBP or dyes, suggesting that the repair takes longer in the treated groups. / A terapia fotodinâmica (TFD) utiliza um fotosensibilizador e fonte de luz provocando a inviabilidade bacteriana. Esse estudo avaliou a eficácia da terapia fotodinâmica mediada pelos corantes Azul de Metileno (0,01%) e Verde Malaquita (0,01%) separadamente na reparação tecidual em feridas contaminadas com Staphylococcus aureus. Foram confeccionadas, com auxílio de gabarito vazado e lâmina de bisturi, duas excisões cirúrgicas circulares no dorso de 90 ratos machos, com peso 250300g, e em seguida foram inoculados nos ferimentos cepas de Stafilococcus aureus ATCC 26923. Os animais foram agrupados conforme tratamento empregado: G I TFD Azul de metileno; G II TFD Verde malaquita; G III Azul de metileno; G IV Verde malaquita; G V Laser de baixa potência (LBP); G VI Controle. Foi utilizado como fonte de luz para fotossensibilizar os corantes, o Laser diodo Thera Lase (100mW, 660 nm, 120J/cm 2 , 33s, emissão contínua) (DMC equipamentos, São Carlos, SP). Os animais foram sacrificados para análise 01, 03, 07, 14 e 21 dias após a excisão cirúrgica. Foi avaliado clinicamente área avermelhada, esbranquiçada, presença e espessura de escara, pus e o perímetro da ferida. As peças foram processadas para análise histológica e coradas pela técnica da hematoxilina e eosina (HE) para análise do edema, necrose, infiltrado inflamatório, presença de fibroblastos jovens, tecido de granulação, reepitelização e grau de colagenização. Foi feita a análise estatística descritiva e o teste exato de Fisher (p<0,05). Um dia após a excisão, o Grupo I apresentou formação moderada de tecido de granulação e intenso infiltrado inflamatório, quando comparado aos demais grupos. Aos três dias pós-cirúrgicos, verificou-se uma tendência de reepitelização mais rápida do grupo não tratado do que nos grupos tratados com TFD, quer seja ela com Azul de metileno ou com Verde malaquita, sendo o grau de colagenização também inferior nos grupos tratados com TFD, o que mostra tendência a retardo também na deposição de fibras colágenas nos ferimentos tratados com TFD. Houve também tendência ao retardo da reepitelização durante o reparo aos 07 dias, quando comparou-se o grupo TFD verde malaquita aos ferimentos não tratados, porém esta não continuou a ser observada aos 14 dias pós-cirúrgicos, havendo apenas maior redução de tecido de granulação quando comparou-se o uso de TFD Azul de metileno (p=0,182) ao grupo controle. Após 21 dias, houve predomínio do infiltrado inflamatório e tecido de granulação discretos e ausência de edema e necrose em todos os grupos. Conclui-se que, para os ferimentos potencialmente contaminados, a TFD, em especial aquela mediada pelo corante Azul de metileno, foi capaz de promover um início de reparo tecidual mais rápido através de precoce formação de tecido de granulação, além de propiciar uma tendência de regressão mais rápida desse tecido de granulação quando comparado aos outros tratamentos. Observou-se a tendência ao retardo da reepitelização nos grupos de tratamento, tanto naqueles submetidos a TFD como naqueles tratados apenas com LBP ou corantes, sugerindo um reparo mais demorado nos grupos tratados.

Um dos principais problemas em Periodontia refere-se à redução microbiana subgengival e tornar a superfície radicular biocompatível, a qual pode ser realizada por raspagem e alisamento radicular, tratamentos químicos, laser em alta intensidade ou terapia fotodinâmica. O objetivo dessa pesquisa foi de comparar os efeitos de raízes humanas tratadas por diferentes técnicas como terapia fotodinâmica, Er:YAG, Nd:YAG, raspagem e alisamento radicular e ácido cítrico + tetraciclina, na proliferação de fibroblastos gengivais (FGH) e células de granulação óssea (GO) humanos. Para tal, foram preparados 45 fragmentos radiculares de 25 dentes extraídos por razões periodontais e que foram divididos em 6 grupos: controle com células (CC), controle com fragmento raspado (CD), laser de Er:YAG (ER - 60mJ, 10pps, varredura, distância focal 12mm, 10Hz, 10s, 2940nm), laser de Nd:YAG (ND - 0,5W, contato, 15Hz, 10s, 1640nm), terapia fotodinâmica (PDT - laser de InGaAIP - 30mW, distância focal &#x2264;1mm, 45J/cm2, 30s, 660nm + azul de toluidina O), e ácido cítrico com tetraciclina (AC). As células foram cultivadas em meio DMEM com 10% de soro fetal bovino, 1% de solução antibiótica e 0,5% de anfotericina B. Foram plaqueadas 2 x 103 células, na sexta passagem, em placas de 96 poços. Após 24h o meio foi substituído por meio condicionado pelos fragmentos tratados, com exceção do grupo controle de células (CC), que recebeu meio convencional. A viabilidade celular foi medida através do teste do MTT nos períodos de 24, 48, 72 e 96h. Os dados em forma de densidade óptica e porcentagem de crescimento foram analisados estatisticamente pelo teste ANOVA a três critérios complementado pelo teste de Tukey a um nível de significância de 5% (p<0,05). Não houve diferenças entre os grupos controle CC e CD (p>0,05). Para as células FGH em relação ao controle, houve maior estímulo após 48 e 72h no grupo PDT, após 72h no grupo ND, e após72 e 96h no grupo AC (p<0,05). Para as células GO, em relação ao controle, houve maior crescimento apenas no período de 72h para o grupo ND (p<0,05). Ao comparar os grupos experimentais e ambos os tipos celulares, após transformação em porcentagem de crescimento, houve diferença estatisticamente significante para o grupo ER nos períodos de 72 e 96h para as células FGH (p<0,05). Concluiu-se que todos os tratamentos, com exceção da raspagem e alisamento radicular, estimularam a proliferação de fibroblastos gengivais humanos e somente o tratamento com Nd:YAG estimulou a proliferação de células de granulação óssea humana. / One of the main problems in Periodontics is how to eliminate the subgingival bacteria and to convert the root surface in a biocompatible environment. These results can be achieved by scaling and root planning, chemical treatment, high energy lasers or photodynamic therapy. The aim of this study was to compare the effects of human root fragments treated by different techniques as photodynamic therapy, Er:YAG, Nd:YAG, scaling and root planning and citric acid plus tetracycline on proliferation of human gingival fibroblasts (HGF) and human osseous granulation cells (OG). Forty-five root fragments from 25 human teeth extracted by periodontal indication were divided in six groups: control with cells (CC), scaled fragment control (SC), Er:YAG laser (ER - 60mJ, 10pps, scanning, focal distance 12mm, 10Hz, 10s, 2940nm), Nd:YAG laser (ND 0.5W, contact, 15Hz, 10s, 1640nm), fhotodynamic therapy (PDT InGaAIP, 30mW, 45J/cm2,30s, 660nm, toluidine blue O), citric acid plus tetracycline (CA). The cells were grown in DMEM medium with 10% of bovine fetal serum, 1% of antibiotic solution and 0.5% amphotericin B. In 96-weIl plates 2 x 103 cells in the sixth passage were plated. After 24h the medium was replaced by medium conditioned by the treated fragments with exception of cell control group (CC) which received regular medium. Cell viability was measured by MTT test at 24, 48, 72 and 96h. Data was described in optic density and percentage of growth and was analyzed by ANOVA test complemented by Tukeys test at a significance level of 5% (p<0.05). There was no statistical differences between control groups CC and SC (p>0.05). For HGF cells in relation to control, there was a higher growth after 48h and 72h at PDT group, after 72h at ND group, after 72h and 96h at CA group (p<0.05). For OG cells in relation to control, there was a higher growth only at 72h-period at ND group (p<0.05). After transformation in percentage of growth and comparison among experimental groups and both cell types, there was a statistical significant difference at ER group at 72h and 96h-period (p<0.05). It was concluded that all treatments but scaling and root planning stimulated the proliferation of human gingival fibroblasts and only the Nd:YAG treatment stimulated the proliferation of human osseous granulation cells.

Avaliar os efeitos da terapia fotodinâmica sobre as funções motoras do sistema nervoso e a dura-máter utilizando os fotossensibilizadores ftalocianina de cloro-alumínio e azul de metileno. Materiais e Métodos: Foram utilizados 56 ratos machos da raça Wistar, divididos em dois grupos. Um grupo foi submetido ao tratamento com terapia fotodinâmica (PDT) e o outro como grupo controle, nos quais foram utilizados os fotosensibilizadores sem a sua foto ativação. Os fotossensibilizadores foram aplicados sobre a dura-máter, após a realização de laminectomia, ao nível da T10. Os métodos de avaliação empregados foram a escala de avaliação funcional de Basso, Beattie e Bresnahan (BBB) e o estudo da dura-máter por meio da microscopia de luz. Resultados: Não foram observadas alterações nas atividades motoras dos animais submetidos à PDT, em relação ao grupo controle. As avaliações histológica e histopatológica não mostraram diferenças entre o grupo dos fotosensibilizadores ativados e o grupo controle, com relação ao processo inflamatório e à necrose tecidual. Conclusão: A PDT em conjunto com os fármacos fotossensibilizantes, ftalocianina de cloro-alumínio e azul de metileno não induziu efeitos neurotóxicos clínicos e/ou alterações histológicas sobre a dura-máter dos animais estudados. / To determine the effects of photodynamic therapy on motor functional activity and the dura mater using the photosensitizers aluminum chloride phthalocyanine and methylene blue. Material and Methods: Fifty-six male Wistar rats were divided into two groups, one submitted to photodynamic therapy (PDT) and the other submitted to the photosensitizers without their photoactivation (control). The photosensitizers were applied to the dura mater after laminectomy at the T10 level. The methods used for assessment were the Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) functional evaluation scale and study of the dura mater by light microscopy. Results: No changes in motor activity were observed in the animals submitted to PDT compared to control. Histological and pathological evaluation did not show differences between the group exposed to activated photosensitizers and the control group regarding the inflammatory process and tissue necrosis. Conclusion: The joint use of PDT with the photosensitizing pharmaceuticals aluminum chloride phthalocyanin and methylene blue did not induce any clinical neurotoxic effects or histological changes in the dura mater of the animals studied.

Orientadores : Reginaldo Bruno Gonçalves, Jaime Aparecido Cury / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:46:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zanin_IrianaCarlaJunqueira_D.pdf: 991186 bytes, checksum: d3d9066c7be1fddfbe7eb583080d8369 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A terapia fotodinâmica (TFD) é um tratamento antibacteriano alternativo para as doenças causadas por biofilmes como a cárie dental. Esta tese, apresentada na forma de 3 artigos, teve por objetivos: (1) revisar a literatura enfocando o efeito da TFD em bactérias cariogênicas, (2) validar um modelo de formação de biofilme de mono-espécies de estreptococos e avaliar o efeito da associação do azul de orto-toluidina (AOT) e um diodo emissor de luz (LED) vermelho sobre biofilmes formados pela associação dessas bactérias e, (3) avaliar o efeito da TFD utilizando um laser de HeNe ou uma luz LED vermelha sobre biofilmes de S. mutans crescidos em fermentador de espessura e fluxo contínuos (FEFC). No artigo 2, biofilmes de Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus e Streptococcus sanguinis foram formados in vitro sobre blocos de esmalte dental bovino. Nos biofilmes avaliou-se a contagem microbiológica e a concentração de polissacarídeo extracelular insolúvel, sendo que no esmalte foi determinada a perda de mineral. O potencial antimicrobiano da associação AOT a 100 mg/ml e um LED com densidade de energia de 85,7 J/cm2 sobre estes biofilmes foi avaliado através de contagem das bactérias viáveis. No artigo 3, foi testado o efeito antimicrobiano da TFD utilizando densidades de energia de um laser de HeNe ou uma luz LED vermelha variando entre 49 e 294 Jcm-2, sobre biofilmes de S. mutans crescidos em um FEFC. O efeito da TFD foi avaliado através da análise da viabilidade bacteriana e microscopia confocal a laser. A revisão da literatura demonstrou a relevância e a escassez de estudos utilizando a TFD sobre biofilmes cariogênicos. Os resultados do artigo 2 demonstraram que o modelo de formação de biofilme in vitro testado foi efetivo para simular situações de alto desafio cariogênico promovendo a desmineralização do esmalte, sendo que a aplicação da TFD foi eficaz para reduzir significantemente a viabilidade bacteriana nos biofilmes (p < 0,05). No terceiro estudo, reduções significativas (p < 0,05) da viabilidade S. mutans foram observadas após a TFD tanto com utilização do laser de HeNe como pela luz LED, porém este efeito se limitou as camadas externas dos biofilmes. No conjunto, os resultados desses estudos indicam que tanto o laser HeNe quanto a luz LED na presença de AOT apresentam efeito antimicrobiano sobre biofilmes de estreptococos / Abstract: Photodynamic therapy (PDT) is an alternative antibacterial therapeutic to biofilm-related diseases such as dental caries. This thesis, comprised by 3 manuscripts was designed (1) to review the literature about the use of PDT on cariogenic bacteria, (2) to validate a streptococci biofilm model and to evaluate the effect of toluidine blue O (TBO) and a red Light Emission Diode (LED) association on viability of biofilmes formed with these bacteria and, (3) to evaluate the effect of PDT using either a HeNe laser or a red LED light on the viability of S. mutans biofilms grown in a constant depth film fermentor (CDFF). In the second manuscript, Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus and Streptococcus sanguinis biofilms were grown on bovine enamel blocks. In the biofilms the microbiological counting and water-insoluble polysaccharide concentrations were analyzed; while mineral loss analysis were performed on enamel blocks. Also, the antimicrobial potential of TBO at 100 mg/ml associated with a LED at 85.7 Jcm-2 on single-species biofilms were evaluated by microbiological counting. In the manuscript 3, the antimicrobial effect of PDT on S. mutans biofilmes growth on CDFF were verified either using a HeNe laser or a red LED with energy density ranging from 49 to 294 Jcm-2. The effect of TFD was verified by analyzing bacterial viability and confocal scanner laser microscopy. The review of literature demonstrated the importance and shortage of studies about PDT on cariogenic biofilms. The results of manuscript 2 showed that the tested biofilm was effective to simulate high cariogenic challenger promoting enamel demineralization. Also, significant reductions (p = 0.05) in bacteria viability were founded after PDT. At the third study, significant reductions in S. mutans biofilms counting was observed after PDT using either a HeNe laser or a LED light the both light (p = 0.05), however, the effect was restricted to external biofilm layers. In conclusion, the results of these studies showed that either a HeNe laser or a LED light in the presence of TBO showed antimicrobial effect on streptococci biofilms / Doutorado / Cariologia / Doutor em Odontologia

Fundação de Amparo a Pesquisa no Estado do Rio Grande do Sul / The aim of this study was to evaluate a formulation of methylene blue (MB) with ethanol to antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), used as an adjunct to mechanical treatment of experimental periodontitis induced in rats. Forty rats were randomized into five groups: without periodontitis (CN); and periodontitis without treatment (CP); periodontitis underwent three types of treatment: scaling and root planing and irrigation with saline (RAR); scaling and root planing and aPDT with MB diluted in water to 0.01% (aPDT/water); scaling and root planing and aPDT with MB diluted in 20% ethanol (aPDT/ethanol). Periodontitis was induced by placing ligature on the lower right first molar for seven days. Then, the ligatures were removed and the treatments applied. The animals were euthanized seven days after the treatment. The primary outcome was bone loss in the furcation region of the first molar evaluated histometrically. The secondary outcome was the number of osteoclasts immunohistochemically marked for tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP). Differences between groups were assessed by One Way ANOVA and post hoc Bonferroni. Thirty-seven rats were subjected to analysis. All three treatment groups showed statistically lower bone loss and smaller number of TRAP positive osteoclasts compared to the untreated group (CP) (P <0.05). No difference was observed for the outcomes between treatment groups (P> 0.05), and between treatments and the negative control (P> 0.05). Bone loss and osteoclastic activity were not changed by aPDT regardless of the inclusion of ethanol in methylene blue formulation when compared to RAR. Therefore, the aPDT did not result in additional benefit when used as adjunctive method to scaling and root planning, considering the parameters evaluated in this study. / O objetivo do presente estudo foi avaliar uma formulação de azul de metileno (AM) com etanol para terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDa), utilizada como coadjuvante ao tratamento mecânico da periodontite experimental induzida em ratos. Quarenta ratos foram randomizados em cinco grupos: sem periodontite (CN); com periodontite e sem tratamento (CP); com periodontite submetidos a três tipos de tratamento: raspagem e alisamento radicular e irrigação com solução salina (RAR); raspagem e alisamento radicular e TFDa com AM diluído em água a 0,01% (TFD/água); raspagem e alisamento radicular e TFDa com AM diluído em etanol 20% (TFDa/etanol). A periodontite foi induzida pela colocação de ligadura no primeiro molar inferior direito por sete dias. A seguir, as ligaduras foram removidas e os tratamentos aplicados. Os animais foram eutanasiados sete dias após o tratamento. O desfecho primário foi a perda óssea na região de furca do primeiro molar avaliada histometricamente. O desfecho secundário foi o número de osteoclastos imuno-histoquímicamente marcados para fosfatase ácida tartaratoresistente (TRAP). Diferenças entre grupos foram avaliadas por One Way Anova e post hoc Bonferroni. Trinta e sete ratos foram submetidos às análises. Os três grupos de tratamento demonstraram estatisticamente menor perda óssea e menor número de osteoclastos TRAP-positivos, quando comparados ao grupo sem tratamento (CP) (P<0.05). Nenhuma diferença foi verificada para os desfechos entre os grupos de tratamento (P>0,05) e entre os tratamentos e o controle negativo (P>0,05). A perda óssea e atividade osteoclástica não foram alteradas pela TFDa independentemente da inclusão do etanol na formulação do azul de metileno quando comparada a RAR. Portanto, a TFDa não resultou em benefício adicional quando utlizada como método coadjuvante à raspagem e alisamento radicular, considerando os parâmetros avaliados neste estudo.

M.Sc. / Established therapies currently in use for the treatment of breast cancer are high risk, since their employment harbors multiple undesirable and detrimental side effects. In many cases these are associated with poor therapeutic outcome managing only to briefly extend patient lifespan. As a result, many newly designed treatments have surfaced that aim to effectively remove cancerous tissue and improve survival rates while minimizing the aggressive onsets to the patient. Photodynamic Therapy (PDT) has, for a long time, been targeted as a combatant for cancer. Its therapeutic mechanism is based on the tumor-specific intracellular localization of a photosynthetic compound, i.e: photosensitizer, prior to its irradiation-mediated excitation thereby generating high levels of reactive oxygen species (ROS). At the molecular level, this causes irreversible photodamage to vital intracellular targets resulting in cell death. The plasma membrane-, mitochondrial-, lysosomal-, and endoplasmic reticulum systems are all prime targets of PDT and vary in susceptibility depending on both the type of cancer being treated and the photosensitizer administered. Newly designed photosensitizers are governed by their enhanced structural properties to localize and therefore target certain areas of a cell. Since each cancer type has a unique set of susceptible and resistant characteristics, knowledge of each new photosensitizers’ range, efficiency, and mechanism of cell death is required. This enables pairing of these drugs to appropriate cancer types for maximal PDT effect. Here, two newly designed metallo-phthalocyanine photosensitizers, AlPcSmix and GePcSmix, were analyzed for their photodynamic effect on the estrogen-positive, breast cancer cell line, MCF-7. Being one of the most reliable cell lines, it is a prominent research model because it mimics the problems encountered with tumor resistance to therapy induced cell death via pathway restrictions. Photosensitizer administration and excitation by light irradiation to this cell culture system was therefore referred to as in vitro Photodynamic Treatment (in vitro PDT) and not Therapy. ii Initial dosage and time responsive studies confirmed that 35 μM AlPcSmix and 115 μM GePcSmix both excited using 15 J/cm2 at 680 nm proved most effective in reducing viability, whilst individually contributing little adverse influence to cellular homeostasis. Using these dosages, in vitro PDT analysis on several cellular parameters indicated a complex mode of cell death was induced. Morphology revealed typical markers consistent with apoptotic, autophagic and necrotic cell death while variations in proliferation and cytotoxicity levels were inconsistent with stress responses observed. This correlated with the detection for four common apoptotic markers which also revealed discrepancies within the death pathway as possible mutational deficiencies may have rendered MCF-7 cellular systems incomplete. Taken together, the wide range of cellular parameters studied suggests cells undergo a mixture of death modes interchanging via a complex system of molecular switches over time that concludes in secondary necrosis. This was attributed to the assortment of sulphonated phthalocyanine species enabling a broad intracellular distribution range coupled with the non-specific targeting action typical of the ROS generated, in addition to the absence of a phagocytic conclusion to the death process. In vitro PDT with AlPcSmix was shown to harbor a greater toxicity to GePcSmix as cells completed the death response within a shorter time period however, both promoted MCF-7 population cell death sufficient enough to warrant further study for their use as potential agents in the PDT of breast cancer.

Orientador: Antonio Wilson Sallum / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-26T23:46:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santana_AnaLiviaFileto_M.pdf: 1784469 bytes, checksum: 2e0765eeda22d929d35779199871496b (MD5) Previous issue date: 2015 / Resumo: O aumento do biofilme e a ocorrência de gengivite é um achado comum durante o tratamento ortodôntico. O objetivo do presente estudo foi avaliar se o uso de terapia fotodinâmica (TFD), como coadjuvante ao controle mecânico do biofilme supragengival, tem eficácia no tratamento de pacientes com aparelhos ortodônticos fixos apresentando gengivite, em relação aos parâmetros clínicos e marcadores inflamatórios. Um estudo clínico cego, paralelo, randomizado e controlado foi realizado em pacientes ortodônticos com diagnóstico de gengivite, apresentando sangramento à sondagem em pelo menos um par de incisivos contralaterais e um par de molares ou pré-molares contralaterais (com bráquetes colados). Os pacientes selecionados foram alocados em dois grupos distintos para receber (1) TFD + profilaxia (pTFD; n=12) ou (2) profilaxia (PA; n=12). Nos sítios tratados com pTFD, o sistema incluiu um diodo emissor de luz (LED) com comprimento de onda igual a 450nm, 310mW de potência e 122,04mW/cm2 poder de densidade, associado a curcumina 10% como fotossensibilizador. No baseline, 1 e 3 meses após, parâmetros clínicos tais como nível de inserção clínica (NIC), profundidade de sondagem (PS), índice gengival (IG), índice de placa (IP), sangramento à sondagem (SS) foram mensurados e o padrão de citocinas [interferon (IFN)-y. interleucina (IL)-10, IL-17, IL-1?, IL-4, IL-6, IL-8 e fator de necrose tumoral (TNF)-?] no fluído gengival crevicular (FGC) foi determinado. Os parâmetros clínicos relacionados a inflamação, como IP e SS reduziram para ambos os grupos (p<0,05), porém sem diferenças estatísticas entre eles (p>0,05). Em relação as citocinas, aos 3 meses, menores concentrações de pró-inflamatórias como IFN-y, IL-1? e IL-8 foram encontradas na região anterior das arcadas do grupo pTFD quando comparadas com o grupo que só recebeu profilaxia (p<0,05). Adicionalmente, houve uma redução em IL-8 no grupo teste ao longo do tempo nesta mesma região (p<0,05) e um aumento em IL-1? na região posterior ao longo do tempo no grupo controle (p<0,05). A TFD como coadjuvante a remoção mecânica do biofilme demonstrou benefícios imunológicos adicionais em pacientes com gengivite e talvez seja uma importante alternativa durante o tratamento ortodôntico / Abstract: The increase in the biofilm and gingivitis occurrence are common findings during orthodontic treatment. The aim of the present study was to evaluate the use of photodynamic therapy (PDT), as an adjunct to mechanical control of supragingival biofilm, is effective in treating patients with fixed orthodontic appliances presenting gingivitis in terms of clinical parameters and inflammatory markers. A blind, parallel, randomized, controlled clinical trial was performed in orthodontic patients with gingivitis diagnosis presenting bleeding on probing in at least one pair of contralateral incisors and one more pair of contralateral molars or pre molars (with glued bráquetes). The selected patients were assigned to receive (1) PDT + prophylaxis (pPDT; n=12) or (2) prophylaxis alone (PA; n=12). In sites treated by pPDT, the laser system included an emitted blue light (LED) of wavelength 450nm, 310mW power and power density 122.04mW/cm2, with 10% curcumin as photosensitizer. At baseline, 1 and 3 months after, changes in clinical attachment level (CAL), in probing pocket depth (PPD), gingival index (GI), plaque index (PI), bleeding on probing (BoP) was performed and cytokine levels [interferon (IFN)-y. interleukin (IL)-10, IL-17, IL-1?, IL-4, IL-6, IL-8 and tumor necrosis factor (TNF)-?] in gingival crevicular fluid (GCF) were determined. The clinical parameters related to inflammation, such as PI and BoP reduced for both groups (p<0.05), but no statistical differences between them (p>0.05). Regarding cytokines, at 3-months, lower concentrations of pro-inflammatory IFN-y, IL-1? and IL-8 were found in anterior segment of pPDT group compared with PA group (p<0.05). Additionally, there was a reduction in IL-8 for the test group over time in the same part (p<0.05), and an increase in IL-1? in the posterior segment over time for the control group (p<0.05). PDT as an adjunctive to mechanical biofilm removal demonstrated additional immunological benefits in gingivitis patients and maybe be an alternative therapeutic strategy during orthodontic treatment / Mestrado / Periodontia / Mestra em Clínica Odontológica

Objetivo: Avaliar, in vitro, a efetividade da terapia fotodinâmica, com e sem o uso da fibra óptica intracanal diante de diferentes períodos de irradiação, na redução de Enterococcus faecalis em canais radiculares. Método: Foram utilizados sessenta dentes unirradiculares humanos, preparados e divididos em seis grupos (n=10), de acordo com o tratamento a ser realizado: G1, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação com laser de diodo por meio de fibra óptica intracanal (P=90mW), por um minuto e trinta segundos; G2, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação do mesmo modo que o G1, por três minutos; G3, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação sem fibra óptica intracanal (P=100mW), por um minuto e trinta segundos; G4, azul de metileno 0,01% (t=5min) e irradiação do mesmo modo que o G3 por três minutos; G5, hipoclorito de sódio 1% (t=15min); e G6, sem tratamento. Todas as amostras foram coletadas por meio de cones de papel esterilizados, antes e após os respectivos tratamentos e submetidas à cultura em placas de Petri contendo ágar BHI, em duplicata. Após 24 horas de incubação, promoveu-se a contagem das unidades formadoras de colônia (UFC/mL). Resultados: A aplicação de todos os tratamentos resultou em significativa redução dos microrganismos, apresentando-se em ordem decrescente de redução G5>G2>G4>G1>G3. Observou-se diferença estatisticamente significante entre os grupos G1 X G5 e G3 X G5. Conclusões: Os parâmetros utilizados nos diferentes grupos proporcionaram reduções intracanais significativas e semelhantes de E. faecalis; a utilização de potências máximas permitiu a redução do tempo de irradiação sem interferir a ação antimicrobiana; e o emprego da fibra óptica intracanal não influenciou de forma significativa nos resultados quando comparado ao uso da peça de mão. / Objective: To evaluate in vitro the effectiveness of photodynamic therapy on the reduction of Enterococcus faecalis in root canals, with and without use of the optical fiber into the canal in front of different period of time irradiation. Method: Sixty human single-root teeth were prepared and divided into six groups, in accordance with the treatment: G1, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation by diode laser with intracanal optic fiber (P=90mW) for one minute and thirty seconds; G2, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation the same way that G1, for three minutes; G3, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation without optic fiber (P=100mW) for one minute and thirty seconds; G4, methylene blue 0,01% (t=5min) and irradiation the same way that G3 for three minutes; G5, 1% sodium hypochlorite (t=15min); and G6, without treatment. All the samples were collected by sterilized paper points, before and after respective treatments, and submitted to microbiological culture plated on BHI ágar duplicated. After 24 hours of incubation, it was performed the evaluation of colony-forming units (CFU/mL). Results: The application of all treatments resulted in significant reduction of microorganismsviability, showing in reductions decreasing order: G5>G2>G4>G1>G3. Significant statistical differences were observed among the groups G1 X G5 and G3 X G5. Conclusions: All the parameters used in the groups afforded significant and similar numerical reduction of E. faecalis; the use the maxim powers allowed a reduction of the irradiation time without compromise the antimicrobial effect; and the use of the intracanal optic fiber didnt influence the results when compared with the use of hand peace.

Orientador: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Coorientadora: Marcia Carneiro Valera Garakis / Banca: Cláudio Antonio Talge Carvalho / Banca: Flaviana Bombarda de Andrade / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar, in vitro, a capacidade antimicrobiana da N-Acetilcisteína (NAC) e da terapia fotodinâmica (PDT) utilizando LASER diodo (LD) de baixa intensidade, sobre o Enterococcus faecalis, comparados ao uso do hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] como medicação intracanal. Oitenta dentes humanos extraídos tiveram o diâmetro dos canais radiculares padronizados por meio do preparo com lima K#30. As raízes foram contaminadas com E. faecalis por 21 dias e divididas em cinco grupos de acordo com a medicação intracanal e/ou tratamento antimicrobiano a ser utilizada: 1) PDT+NAC; 2) NAC; 3) PDT; 4) Ca(OH)2 e 5) Solução salina. Sendo que 50 dentes foram avaliados por cultura microbiológica (UFC/mL), 10 por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e 20 por microscopia confocal de varredura a LASER (CLSM). Para UFC/mL foram feitas 3 coletas do conteúdo o canal radicular: a) após 21 dias de contaminação (coleta de confirmação - Sc); b) após PBM (S1); c) após 14 dias com as medicações intracanais (S2). UFC/mL não mostrou diferença estatística entre os grupos de PDT+NAC, NAC e Ca(OH)2, porém foram significantemente diferentes dos grupos da PDT, e solução salina. A análise ilustrativa por MEV mostrou resultados semelhantes à análise microbiológica (UFC/mL). No CLSM, todos os grupos avaliados foram efetivos contra E. faecalis, com a diferençando significantemente do grupo controle. Concluímos que NAC pode eliminar E. faecalis com ou sem PDT, sendo considerado como medicaçã... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this study was to evaluate in vitro the antimicrobial capacity of N-Acetylcysteine (NAC) and photodynamic therapy (PDT) using low intensity LASER diode (LD) on Enterococcus faecalis, compared to the use of calcium hydroxide Ca(OH)2, as intracanal medication. Eighty extracted human teeth had their root canal diameters steardized by preparation with K 30 file. The roots were contaminated with E. faecalis for 21 days and divided into five groups according to the intracanal medication and/or antimicrobial treatment to be used. 1) PDT + NAC; 2) NAC; 3) PDT; 4) Ca(OH)2; 5) Saline solution. Fifty teeth were evaluated by microbiological culture (CFU/mL), 10 by scanning electron microscopy (SEM), and 20 by confocal LASER scanning microscopy (CLSM). The root canal was collected 3 times a) after 21 days of contamination (confirmation collection) (Sc); b) after biomechanical preparation S1; c) after 14 days with intracanal medications. CFU/mL showed no statistical difference between the PDT+NAC, NAC e Ca(OH)2 groups, but were significantly different from the PDT groups, and saline. The illustrative SEM analysis showed similar results to the analysis (CFU / mL). In CLSM, all evaluated groups were effective against E. faecalis, with a significant difference with the control group. We conclude that NAC can eliminate E. faecalis with or without PDT, being considered as a complementary medication in clinical practice / Mestre

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