Antecedentes: La evaluación de marcadores inmunohistoquímicos se realiza con fines diagnósticos, terapéuticos e investigadores de forma manual. La utilización del análisis informatizado de imágenes digitales para evaluar estos marcadores aún no es suficientemente eficaz. Objetivos: Diseñar un nuevo procedimiento informatizado para cuantificar marcadores inmunohistoquímicos nucleares y evaluar los efectos de la compresión de imágenes. Métodos: El procedimiento desarrollado consta de diferentes etapas, donde se evalúan diferentes marcadores immunohistoquímicos utilizados en cáncer de mama y en linfoma. Resultados: El análisis estadístico demostró una gran validez del método automatizado. La redondez fue el único parámetro morfológico afectado por la compresión. Unos factores correctores fueron desarrollados para corregir esta afectación y la variabilidad en la cuantificación producida por esta afectación. Conclusiones: Este nuevo procedimiento automatizado es un método objetivo, más rápido y reproducible que tiene un excelente nivel de precisión, incluso con imágenes digitales de elevada complejidad y también en imágenes comprimidas. Background: The evaluation of immunohistochemical markers is carried out manually for diagnostic, therapeutic and research purposes. The use of a computerized digital image analysis to evaluate these markers is not sufficiently effective yet.Objectives: To design a new computerized procedure to quantify nuclear immunohistochemical markers and evaluate the effects of image compression.Methods: The procedure developed consists of several stages which evaluate different immunohistochemical markers used in breast cancer and lymphoma.Results: Statistical analysis demonstrated a high validity of the automated method. The roundness was the only morphological parameter affected by compression. Some correction factors were developed to correct this disorder and the variability in the measurement caused by this disorder.Conclusions: This new automated process is objective, faster and it has also an excellent level of accuracy, even with highly complex digital images and compressed images.

Els hàbits alimentaris d’una població constitueixen un factor determinant del seu estat de salut i uns mals hàbits alimentaris es relacionen amb nombroses malalties d’elevada prevalença i mortalitat. L’objectiu d’aquesta tesi doctoral és avaluar la qualitat de la dieta, hàbits alimentaris i composició corporal d’un grup de jugadors/es de bàsquet amateurs, d’entre 18 i 29 anys, a la ciutat de Barcelona a partir del recordatoris de 24 hores de tres dies no consecutius, els qüestionaris de freqüència de consum i el recull de les mesures antropomètriques. El 16.9% presentava sobrepès i el 1.3% obesitat. El 53.4% tenien una bona adherència a la Dieta mediterrània i la l dieta del 84.8% tenien una bona capacitat antioxidant. El 56.8%, el 23.9% i el 67.2% feien una bona hidratació abans, durant i desprès de l’entrenament, respectivament. / The eating habits of a population are a determinant of health status and a poor dietary habits are related to many diseases of high prevalence and mortality. The objective of this thesis is to evaluate the quality of the diet, eating habits and body composition of a group of players / basketball are amateurs between 18 and 29 years, the city of Barcelona from 24 hours recall of three non-consecutive days, food frequency questionnaires and compilation of anthropometric measures. The 16.9% overweight and 1.3% were obese. The 53.4% had good adherence to the Mediterranean diet and the diet of 84.8% had a good antioxidant capacity. 56.8%, 23.9% and 67.2% were good hydration before, during and after the train, respectively.

Objetivos: Conocer la prevalencia de trastornos mentales en niños inmigrantes latinoamericanos, residentes en Palma de Mallorca comparándolos con niños españoles de similares características socioeconómicas. Método: Estudio en doble fase, utilizando como screening el Child Behavior Checklist (CBCL) y en segunda fase el Diagnostic Interview Schedule (DISC-P IV) validados al español. Resultados: Se evaluaron 334 inmigrantes de primera y segunda generación latinos entre 6 y 12 años de 7 colegios junto a 191 niños españoles. Entre los latinos la prevalencia de trastorno mental fue de 20,7 (IC95%: 16,3-25), y entre la población española estudiada 16,2 (IC95%:11,0-21,5). Los trastornos más frecuentes en inmigrantes fueron los de ansiedad (12,59%), externalizantes (9,58%) y afectivos (1,80%). Conclusiones: No hay diferencias estadísticamente significativas entre niños nativos e inmigrantes, siendo entre estos las variables más asociadas a trastorno mental el deseo de retorno, la percepción de discriminación y la enfermedad mental de los padres.

OBJETIVOS Esta tesis pretende desarrollar una herramienta de fácil aplicación, fiable, consistente y no invasiva que sea capaz de evaluar el estatus del sistema circadiano. Para conseguir este objetivo, se plantearon los siguientes objetivos específicos: 1. Crear un algoritmo para la evaluación ambulatoria y no invasiva del sistema circadiano mediante la integración de los ritmos de temperatura periférica, actividad motora y posición corporal en la variable compuesta TAP. 2. Validar la variable integrada TAP para la detección de sueño y vigilia en comparación con el gold standard para este propósito, la polisomnografía. Además, se pretende comprobar si TAP mejora la detección de sueño con respecto a las estimaciones obtenidas mediante la actigrafía convencional. 3. Transferir la utilidad de TAP, implementada en un dispositivo de registro ambulatorio en una patente internacional. 4. Evaluar la validez de la variable TAP para la detección de alteraciones circadianas en condiciones patológicas: 4.1. Revisar los conocimientos previos sobre cáncer y ritmos circadianos, prestando especial atención a los tratamientos que tienen en cuenta el sistema circadiano. 4.2. Estudiar las diferencias interindividuales del ritmo de actividad-reposo que podrían potencialmente afectar el resultado del tratamiento en pacientes de cáncer. 4.3. Evaluar cómo los tratamientos cronomodulados afectan la sincronización interna de diferentes ritmos circadianos en pacientes de cáncer. 4.4. Evaluar las perturbaciones circadianas de sujetos con deterioro cognitivo leve con el fin de establecer la utilidad de la variable TAP para evaluar objetivamente la progresión de la enfermedad. METODOLOGÍA En esta tesis, se evaluaron tres ritmos y procesaron con el fin de obtener la variable TAP que después se aplicó en varias condiciones de salud y enfermedad. Ritmo de temperatura Este ritmo se evaluó mediante un sensor de temperatura (Thermochron iButton DS1921H, Dallas, Maxim) cosido a una muñequera de modo que la superficie del sensor quedara en contacto con la arteria radial de la muñeca de la mano no dominante. Ritmo de actividad motora y posición corporal Estos ritmos se evaluaron gracias a un actímetro (Hobo Pendant G Acceleration Data Logger, Massachusetts, USA) colocado en el brazo no dominante mediante un brazalete deportivo. De la información proporcionada por el actímetro, se definieron 2 variables: actividad motora, expresada como grados de cambio de posición y posición corporal, definida como el ángulo entre el eje X y el plano horizontal. Procesamiento de los datos Cada variable se normalizó entre 0 y 1 después de haber eliminado los artefactos mediante inspección visual de los datos. Además, los datos de temperatura se invirtieron de modo que los valores máximos de todas las variables coincidieran en el mismo momento. Después, calculamos la media de las variables normalizadas para cada sujeto obteniendo la variable TAP cuyos valores varían entre 0 (para periodos de reposo) y 1 (para periodos activos). CONCLUSIÓN GENERAL La monitorización circadiana ambulatoria, no invasiva y fiable del estado funcional del sistema circadiano humano es un procedimiento muy útil para la prognosis de ciertas enfermedades como cáncer, deterioro cognitivo leve y perturbaciones del sueño. La monitorización conjunta y la integración de varias salidas del reloj biológico mejora la consistencia de los resultados y facilita la evaluación de la desincronización interna entre diferentes variables rítmicas. De este modo, la variable TAP, basada en la integración de los ritmos de Temperatura periférica, Actividad motora y Posición corporal, ha superado las premisas de alta fiabilidad, aceptación y versatilidad para el estudio ambulatorio y prolongado del estado del sistema circadiano humano en muy distintas situaciones de salud y enfermedad. Además, ha sido posible implementar este algoritmo en un dispositivo bajo patente internacional. / OBJECTIVES This thesis aims to develop a reliable, consistent, non-invasive and easily applied tool based on multivariable recordings, able to depict circadian system status and circadian rhythmic synchrony in humans. In order to pursue this final goal, the following specific objectives were determined: 1. To create a multivariable tool able to reliably and non-invasively ambulatory assess the circadian system status by integrating wrist temperature, motor activity and body position rhythms into the composite TAP variable. 2. To validate this integrated variable for sleep and wake detection against the gold standard for this purpose, the polysomnography and test if TAP improves the detection from that obtained with actigraphy alone. 3. To test the validity of TAP variable in specific pathological conditions with known circadian impairments: 3.1. To review, the previous knowledge on cancer and circadian rhythms, as well as circadian-based treatments for this disease. 3.2. To study the inter-individual differences in rest-activity rhythm, that could potentially affect treatment outcome, in colorectal cancer patients. 3.3. To assess how chronomodulated treatment affects internal synchronization on cancer patients by multivariable recordings. 3.4. To evaluate circadian disturbances in mild cognitively impaired subjects, a previous condition to Alzheimer’s Disease, in order to establish its potential usefulness to objectively assess the disease progression. 4. To transfer the usefulness of TAP implemented in an ambulatory monitoring device for its clinical application and its potential commercialization by an international patent. METHODOLOGY In these PhD, three rhythms were recorded and processed as to obtain an integrated variable TAP in several conditions of health and disease. Temperature rhythm The wrist temperature rhythm was assessed using a temperature sensor (Thermochron iButton DS1921H, Dallas, Maxim) attached to a double-sided cotton sport wrist band, and the sensor surface was placed over the inside of the wrist on the radial artery of the non-dominant hand. Body position and rest-activity rhythm The body position and rest-activity rhythm was assessed using an actimeter (Hobo Pendant G Acceleration Data Logger, Massachusetts, USA) placed on the non-dominant arm by means of a sports band, with its X-axis parallel to the humerus bone. From the information provided by the actimeter, we defined 2 variables: motor activity (A) and body position (P). Motor activity was expressed as degrees of change in position. Body position was calculated as the angle between the X-axis of the actimeter and a horizontal plane. Thus, P oscillated between 0º for maximum horizontality and 90º for maximum verticality. Data processing Each variable was normalized between 0 and 1, after removing artifacts identified by visual inspection of the data. In addition, wrist temperature data were inverted in such a way that maximum values for all variables occurred at the same time. We then calculated the mean of the normalized variables for each subject, obtaining TAP values which range between 0 (for rest periods) and 1 (for active periods). GENERAL CONCLUSION The reliable ambulatory monitoring of circadian system in humans has proven very relevant for disease prognosis in such conditions as cancer, mild cognitive impairments and sleep disturbances. The joint recording and following integration of several clock outputs increase results’ consistency as isolated variable artifacts are minimized by the integration of several variables and enables the calculation of internal desynchronization among different rhythmic variables. TAP, integration of wrist Temperature, motor Activity and body Position rhythms, has supported the premises of high reliability, acceptance and versatility for the long-period ambulatory study of human circadian system status under several conditions of health and disease. Thus, these positive results have facilitated the implementation of TAP’s algorithm in a new device for ambulatory monitoring and registered in an international patent, already in exploitation.

L'obesitat incrementa les possibilitats de patir altres malalties com la diabetis mellitus tipus 2 (DM2), la dislipèmia, la hipertensió, entre d'altres. Per tal de poder avançar en noves dianes terapèutiques que millorin aquestes malalties és necessari conèixer millor la biologia del teixit adipós i els seus components. El teixit adipós blanc, a més a més d'emmagatzemar la major part de les reserves energètiques, és capaç de tenir activitat metabòlica i endocrina. Cal tenir en compte que un adequat metabolisme lipídic en l'adipòcit és clau també per aconseguir un equilibri en l'homeòstasi del metabolisme glucídic en l'ésser humà. En aquest treball hem analitzat el paper de dues proteïnes implicades en la lipòlisi del teixit adipós, d'una banda el canal de glicerol aquaporina 7 (AQP7) i per altra l'adipoquina glicoproteïna Zinc-α 2 (ZAG), en el context de l'obesitat, la síndrome metabòlica i la DM2.Així, en aquesta tesi doctoral, hem pogut arribar a les següents conclusions:1. L'expressió del canal de glicerol AQP7, en teixit adipós, es troba disminuïda en pacients afectes d'obesitat mòrbida.2. La DM2 no sembla afectar l'expressió d'aquesta aquagliceroporina en el teixit adipós.3. Ambdues aquagliceroporines, AQP7 (al teixit adipós) i AQP9 (al teixit hepàtic) mantenen un estreta relació en pacients obesos mòrbids.4. La glicoproteïna Zinc-α 2 (ZAG) sembla tenir un paper rellevant en l'homeòstasi del teixit adipós amb un fort lligam amb altres adipoquines, especialment l'adiponectina. / Obesity increases the chances to suffer from other diseases such as type 2 diabetes mellitus (T2DM), hyperlipidemia, hypertension, and others. In order to get into new therapeutic targets to improve these conditions, a best knowledge of the biology of adipose tissue and its components is needed. In addition to storing the most of energy reserves, white adipose tissue is able to have metabolic and endocrine activity. It is necessary to consider that an appropriate lipid metabolism in the adipocyte is also essential to achieve a balance in the homeostasis of glucose metabolism in humans. In this study we have examined the role of two proteins involved in adipose tissue lipolysis, first glycerol channel aquaporin 7 (AQP7) and on the other hand adipokine Zinc-α 2 glycoprotein (ZAG), in the context of obesity, metabolic syndrome and T2DM. Thus, in this thesis, we have reached the following conclusions: 1. The glycerol's channel AQP7 expression, in adipose tissue, is decreased in patients with morbid obesity. 2. The DM2 does not appear to affect the expression of this aquaglyceroporin in adipose tissue. 3. Both aquaglyceroporins, AQP7 (in adipose tissue) and AQP9 (in liver tissue) have a close relationship in morbidly obese patients. 4. The Zinc-α 2 glycoprotein (ZAG) seems to play an important role in the homeostasis of adipose tissue with a strong bond with other adipokines, particularly adiponectin.

El Grup d'investigació en Salut Mental en Atenció Primària de Tarragona va emprendre en 2007 un projecte que ha consistit en el disseny d'una intervenció collaborative care per a la millora de l'atenció a la depressió en atenció primària (el model INDI - Research on Interventions for Depression Improvement-). S'ha avaluat la seva eficàcia mitjançant un assaig clínic controlat aleatoritzat per conglomerats (centres d'atenció primària). Van participar en l'estudi 338 pacients, 149 en el grup de control i 189 en el grup d'intervenció. En l'avaluació basal constatem que els pacients de tots dos grups d'estudi eren comparables en les seves característiques sociodemogràfiques i clíniques. Vuit de cada deu eren dones i l'edat mitjana se situava al voltant dels 47 anys. El 60% eren treballadors en actiu. Des del punt de vista clínic la gravetat de la depressió a nivell basal se situava en l'estrat de depressió moderada i la meitat d'aquests pacients tenia història prèvia de depressió. L'avaluació econòmica s'ha basat en els 292 (86,4%) pacients dels quals disposàvem de dades completes de resultats clínics i de costos (166 pacients en el grup intervenció i 126 controls). El cost incremental mitjana del programa en comparació de l'atenció habitual va ser de 182,53 € (p <0,001) i l'efectivitat incremental va ser de 0,045 AVAC (p = 0,017) i 40,09 DFD (p = 0,011). Des de la perspectiva del sistema sanitari, les ràtios de cost efectivitat incrementals –ICER- van resultar en 4056 €/AVAC i 4,55 €/DFD. Des de la perspectiva de la societat el cost incremental va ser de 157,44 € (p=0,311) les ICER resultants van ser de 3499 €/AVAC (perspectiva del sistema sanitari), i de 3,93 €/DLD incloent els costos per pèrdua de productivitat laboral (perspectiva de la societat). / El Grupo de investigación en Salud Mental en Atención Primaria de Tarragona emprendió en 2007 un proyecto que consistió en el diseño de una intervención collaborative care para la mejora de la atención a la depresión en atención primaria el modelo INDI - Interventions for Depression Improvement-. Se ha evaluado su eficacia mediante un ensayo clínico controlado aleatorizado. En la evaluación basal constatamos que los pacientes de ambos grupos de estudio eran comparables en sus características sociodemográficas y clínicas. Ocho de cada diez eran mujeres y la edad media se situaba alrededor de los 47 años. El 60% de los pacientes eran trabajadores en activo. Desde el punto de vista clínico la gravedad de la depresión a nivel basal se situaba en el estrato de depresión moderada y la mitad de estos pacientes tenía historia previa de depresión. La evaluación económica se ha basado en los 292 (86,4%) pacientes de los que disponíamos de datos completos de resultados clínicos y de costes (166 pacientes en el grupo intervención y 126 controles). A lo largo de los 12 meses de seguimiento, los resultados de salud del modelo INDI fueron significativamente superiores que los del tratamiento habitual. El coste incremental promedio del programa en comparación con la atención habitual fue de 182,53 € (p <0,001) y la efectividad incremental fue de 0,045 AVAC (p = 0,017) y 40,09 DFD (p = 0,011). Desde la perspectiva del sistema sanitario, las ratios de coste efectividad incrementales –ICER- resultaron en 4056 €/AVAC y 4,55 €/DFD. Desde la perspectiva de la sociedad el coste incremental fue de 157,44 € (p=0,311) las ICER resultantes fueron de 3499 €/AVAC (perspectiva del sistema sanitario), y de 3,93 €/DLD incluyendo los costes per pérdida de productividad laboral (perspectiva de la sociedad). / The Research Group Mental Health in Primary Tarragona undertook in 2007 a project was to design a collaborative care intervention to improve care for depression in primary care (the INDI model - Research on Interventions for Depression Improvement -. Their effectiveness has been evaluated by a randomized controlled clinical trial clusters (primary care). Results are available regarding the clinical efficacy INDI model are favourable , presenting significant and clinically relevant improvements in depressive symptoms at 3, 6 and 12 months. Given the high prevalence of depressive illness and chronic disability rate for an increase in health and social costs, has been designed, based on clinical data obtained in the previous study, a study of economic evaluation INDI model in terms of cost-effectiveness analysis and cost-utility . 338 adult patients with major depression were assessed at baseline. Only patients with complete data were included in the analysis (166 in the intervention group and 126 in the control group). Throughout the 12 months of follow-health outcomes INDI model were significantly higher than those in the usual treatment. The average incremental cost of the program compared with usual care was €182, 53 (p <0.001) and the incremental effectiveness was 0,045 QALY (p = 0,017) and 40,09 DFD (p = 0,011). From the perspective of the health system, the incremental cost effectiveness ratios -ICER- resulted in € 4056 / QALY and 4, 55 € / DFD. From the societal perspective the incremental cost was € 157, 44 (p = 0.311) resulting ICER was 3499 € / QALY (healthcare system perspective) and 3, 93 € / DLD including loss costs per labour productivity (societal perspective).

El diagnòstic de la síndrome d’Apnea-Hipopnea Obstructiva del Son (SAHOS) s’efectua amb la demostració objectiva de l’alteració respiratòria que provoca l’obstrucció de les vies respiratòries superiors durant el son i dels despertars relacionats amb els esforços respiratoris. La valoració clínica i exploració física exhaustives no prediuen adequadament ni la presencia o absència d’apnees o hipopnees nocturnes, ni la severitat, si existeix, del SAHOS. D’altra banda, la subjectivitat de l’avaluació i la variabilitat en la nomenclatura de les troballes clíniques dificulten la comparació. La Videofibrosomnoscòpia proporciona informació sobre la dinàmica de la via aèria superior en els pacients amb Trastorns Respiratoris del Son, millorant les indicacions terapèutiques. Malgrat això, encara no s’ha pogut demostrar que millori l’èxit terapèutic. L’objectiu principal d’aquesta tesi ha estat comprovar si aquesta tècnica diagnòstica millora els resultats terapèutics en pacients amb la síndrome d’Apnea-Hipopnea Obstructiva del Son. Els nostres resultats indiquen que hi ha diferències en les indicacions terapèutiques dels pacients avaluats amb i sense videofibrosomnoscòpia. Malgrat això, no podem afirmar que aquest mètode d’exploració millori els resultats terapèutics en pacients amb la síndrome d’Apnea-Hipopnea Obstructiva del Son, encara que la trobem útil en alguns casos seleccionats. / El diagnóstico de síndrome de Apnea-Hipopnea Obstructiva del Sueño (SAHOS) se efectúa mediante la demostración objetiva de la alteración respiratoria que provoca la obstrucción de las vías respiratorias superiores durante el sueño y los despertares relacionados con los esfuerzos respiratorios. La valoración clínica y exploración física exhaustivas no predicen adecuadamente ni la presencia o ausencia de apneas o hipopneas nocturnas, ni la severidad, si existe, del SAHOS. Por otra parte, la subjetividad de la evaluación y la variabilidad de la nomenclatura de los hallazgos clínicos dificultan su comparación. La Videofibrosomnoscopia proporciona información sobre la dinámica de la vía aérea superior en los pacientes con Trastornos Respiratorios del Sueño, mejorando las indicaciones terapéuticas. Sin embargo, aún no ha podido demostrarse que mejore el éxito terapéutico. El objetivo principal de esta tesis ha sido comprobar si esta técnica diagnóstica mejora los resultados terapéuticos en pacientes con síndrome de Apnea-Hipopnea Obstructiva del sueño. Nuestros resultados indican que hay diferencias en las indicaciones terapéuticas de los pacientes evaluados con y sin videofibrosomnoscopia. A pesar de ello, no podemos afirmar que este método exploratorio mejore los resultados terapéuticos en pacientes con síndrome de Apnea-Hipopnea Obstructiva del sueño, aunque lo consideramos útil en algunos casos seleccionados. / The diagnosis of Obstructive Sleep Apnea-hypopnea syndrome (OSAS) is effected by the objective demonstration of a respiratory disorder that causes obstruction of the upper airway during sleep and the awakenings (cessations of sleep)related to respiratory effort. Using clinical and physical assessment it is not easy to predict the presence or absence of apneas or nocturnal hypopneas, nor the severity of OSAS. Moreover, the subjectivity of the evaluation and the variability of the nomenclature of clinical findings make it difficult to make comparisons. The DISE (drug induced sleep endoscopy) provides information on the dynamics of the upper airway in patients with sleep-disordered breathing, improving the therapeutic indications. However, it has not been demonstrated that it improves therapeutic success. The main objective of this thesis was to determine whether this diagnostic technique improves treatment outcomes in patients with obstructive apnea-hypopnea sleep syndrome. Our results indicate that there are differences in the therapeutic indications of patients evaluated with and without DISE. However, we cannot claim that this screening method improves treatment outcomes in patients with obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome, although we consider it useful in selected cases.

Esta tesis trata de las interacciones establecidas entre el enfermo familia y profesionales en el entorno de cuidados paliativos que están en función de los contextos de conciencia establecidos por los actores, de la influencia que ejerce la institución en el proceso de enfermedad/atención/muerte, y de las incógnitas que permiten sondear las representaciones y prácticas sociales de dicho proceso. El marco teórico utilizado incluye los cuidados paliativos tomando como referencia el modelo y filosofía de los hospices; el modelo médico hegemónico (MMH) que permite interpretar y analizar los distintos saberes y prácticas médicas; y los modelos explicativos (EM) para ver la interacción entre los modelos explicativos de los pacientes, familiares y profesionales que actúan como componente esencial del cuidado de la salud.La metodología aplicada fue principalmente cualitativa utilizando las técnicas metodológicas de observación participante y entrevistas en profundidad. La investigación aporta una visión de la muerte desde la construcción sociocultural del proceso de morir y la percepción particular de los enfermos, familiares y profesionales que interaccionan estableciendo diferentes grados de conciencia sobre terminalidad y muerte en una unidad de cuidados paliativos de un hospital oncológico de Barcelona, España. / This thesis work focus the interaction between the patient and family practitioners in the palliative care based on awareness contexts, the influence of the institution in the process of disease / care / death and the unknown questions that allow probing the representations and social practices of the process. The theoretical framework used, includes palliative care taking as reference the model and philosophy of the Hospices; the Hegemonic Medical Model (MMH) to interpret and analyze the knowledge and medical practices; and the Explanatory Models (EMs) to see the interaction between the explanatory models of patients, families and professionals as an essential component of health care. Qualitative research was mainly applied through methodological techniques of participant observation and in-depth interviews. This study provides a vision of death from a sociocultural construction of the process of dying and the perception of patients, families and professionals who interact establishing different degrees of awareness of death in a terminal and palliative care unit of a hospital oncology in Barcelona, Spain.

INTRODUCCIÓN: Ser portador del alelo 4 de la apolipoproteína E (ApoE) es el factor genético de riesgo para sufrir Enfermedad de Alzheimer (EA) más reconocido sin que se conozcan los mecanismos que provocan dicha predisposición. OBJETIVOS: conocer cómo influye el alelo 4 de la ApoE en sujetos jóvenes a nivel cognitivo, patológico, analítico, estrés oxidativo y supervivencia celular, biomarcadores inflamatorios y expresión de enzimas antioxidantes y relacionadas con tau. MATERIALES Y MÉTODOS: reclutamos 54 sujetos (edad 25-55 años), 33 hijos de pacientes con EA y genotipo ApoE 4/4 y 21 controles sin antecedentes familiares de EA. Se realiza una visita médica, pasamos el test de Stroop y de memoria de Rey para valorar cognición. Se realiza una analítica completa, glutatión basal y tras incubación con beta-amiloide (Aß) por HPLC, apoptosis y caspasas en linfocitos tras incubación con Aß por microscopía confocal, genotipo ApoE, expresión de enzimas antioxidantes (superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa, catalasa y enzimas de síntesis de glutatión) y relacionadas con tau (RCAN1, calcineurina, PKR, GSK3ß) mediante PCR en linfocitos, cuantificación de enzimas relacionadas con tau (calcineurina, RCAN1.4, GSK3ß) por electroforesis y western blotting, citocromo C, TNFα y colesterol oxidado mediante Elisa. Reclutamos también 11 sujetos con EA y ApoE4 y 9 controles para PCR de enzimas antioxidantes y relacionados con tau. Estudio estadístico mediante el paquete SPSS. RESULTADOS: nuestros grupos fueron homogéneos en edad, sexo y nivel educacional. A nivel cognitivo encontramos peores puntuaciones en los sujetos ApoE4 en test de Stroop. En el subgrupo de universitarios también hallamos peores puntuaciones en nuestros casos en aprendizaje y memoria. Existe un mayor porcentaje de quejas de memoria y síndrome depresivo entre los casos junto con mayor tendencia a dislipemia y menor HDL-colesterol en mujeres ApoE4, menor producción de TNFα tras estimulación antigénica en sujetos ApoE 4/4. Hallamos menor glutatión oxidado en sangre basal en casos, menor oxidación de glutatión y menor apoptosis en linfocitos tras incubación 24h. Encontramos mayor expresión de enzimas de síntesis de glutatión y glutatión peroxidasa, calcineurina, RCAN1.4, GSK3ß y PKR en nuestros casos. En los sujetos con ApoE4 y EA encontramos menor expresión de enzimas de síntesis de glutatión que en controles y sobreexpresión de RCAN1.4 y calcineurina. No encontramos toxicidad debida al péptido Aß en nuestras muestras. CONCLUSIONES: Nuestros datos corroboran la existencia de un fenotipo cognitivo asociado a ApoE4, así como predisposición a la depresión y dislipemia. Los sujetos ApoE 4 presentan mayores niveles de glutatión reducido en situación basal, menor oxidación de glutatión en sangre y menor apoptosis en linfocitos aislados tras agresiones apoptogénicas. Existe una sobrecompensación de sistemas antioxidantes en sujetos jóvenes ApoE4, con sobreexpresión de enzimas de síntesis de glutatión, calcineurina, PKR, GSK3ß y RCAN1.4. Existe un agotamiento de los mecanismos antioxidantes compensatorios en los sujetos con EA y ApoE 4, reflejado en menor expresión de enzimas de síntesis de glutatión. A nivel de enzimas relacionadas con tau, encontramos un patrón similar de sobreexpresión en los sujetos con EA y los sujetos jóvenes ApoE 4, con sobreexpresión de RCAN1.4 y calcineurina. Ser portador del alelo 4 de la ApoE es un factor de riesgo para desarrollar EA, probablemente debido a una disminución de la función antioxidante de la ApoE, lo cual conlleva a la sobreexpresión de otros sistemas antioxidantes que finalmente terminan por agotarse (como los enzimas de síntesis de glutatión) o produciendo alteraciones celulares secundarias a su activación crónica (como calcineurina, PKR, RCAN 1.4 y GSK3ß) como son la apoptosis y hiperfosforilación de tau. / BACKGROUND: Apolipoprotein E (ApoE) 4 allele is a risk factor for Alzheimer’s disease (AD) and the mechanism is unknown. It was demonstrated that apoE4 presents less antioxidant capacity than types 2 and 3. Our experiments aim to study oxidative stress factors in young adults with different ApoE genotype. METHODS: we selected 54 young adults, 33 of them with familial history of AD and presented ApoE 3/4 or 4/4, 21 of them, our controls, presented ApoE 3/3. We made a clinical interview, used Stroop and Rey test for cognitive evaluation, complete blood test, we determined apoE genotype, antioxidant enzymes expression using PCR technique. We determined expression of GSK3β, RCAN 1.4, calcineurin and PKR enzymes by PCR and Western blotting techniques. Also we determined glutathione levels by HPLC, and cell death and apoptosis by confocal microscopy in lymphocytes of peripheral blood. We selected 11 AD patients and 9 controls to study enzyme expression by PCR. RESULTS: Our cases presented worse punctuation in cognitive test, more depression and dislipemia. Basal level of oxidized glutathione and glutathione ratio (GSSG/GSHx100) was increased in our controls and after aggression they showed more cell death by apoptosis. Controls had lower expression of enzymes of glutathione synthesis and glutathione peroxidase than cases. Our cases presented higher expression of GSK3β, RCAN 1.4, calcineurin and PKR enzymes. AD patients showed over expression of enzymes of glutathione synthesis and upper expression of calcineurin and RCAN 1.4. CONCLUSIONS: We found a greater antioxidant capacity and resistance to aggression in cells from the subjects with apoE4. That is in contrast with the general idea of ApoE 4 genotype as a cause for less antioxidant capacity. The up regulated expression of antioxidant enzymes found in young subjects with apoE4 could represent a compensatory effect for their antioxidant deficit. The increased glutathione synthesis is one of the suggested mechanisms for this adaptation. Chronic up regulated expression of calcineurina, GSK3β and RCAN 1.4 could produce deleterious effects like tau hiperphosphorylation and mitochondrial damage.

Los hallazgos histopatológicos fundamentales en la psoriasis sonuna hiperplasia epidérmica y un infiltrado linfomononuclear dérmico, conexocitosis hacia la epidermis. También se observan cambios vasculares,probablemente secundarios factores angiogénicos producidos por célulasdel infiltrado o por los queratinocitos y un infiltrado por polimorfonucleares.La mayoría de autores aceptan que es una enfermedad hereditaria, sobrela que actuarían como desencadenantes fenómenos inmunológicos, traumatismos,la ingesta de determinados fármacos, o el estrés.No se conoce bien si la alteración genética se localiza a nivel delcontrol de la proliferación del queratinocito (teoría clásica) -en cuyo caso loscambios dérmicos (infiltrado y vascularización) serían secundarios a laliberación de mediadores por el queratinocito, la exocitosis a factores quimiotácticosy moléculas de adhesión derivadas de los mismos y los tratamientosactuarían frenando la actividad mitótica de las células epidérmicas;o bien si el defecto básico reside en el sistema inmune (teoría inmune) -según la cual la hiperplasia epidérmica sería secundaria a la liberación decitocinas hiperproliferativas por parte de las propias células CD4+ o porotros inmunocitos y los tratamientos actuarían como inmunomoduladores-.Esta última teoría ha cobrado un gran interés en los últimos años, especialmentepor el papel de la ciclosporina A en el tratamiento de la psoriasis.Con el fin de determinar si es más precoz la activación/proliferacióndel queratinocito o la activación/proliferación de las células del infiltrado sehan estudiado lesiones incipientes y el borde de lesiones en actividadhabiéndose obtenido resultados contradictorios.Desde hace años se sabe que la hiperplasia epidérmica en la pso-riasis es secundaría a la hiperproliferación del queraíinocito, la cual se ca-racteriza por un aumento del número de células germinativas en fase deproliferación (100% vs 60% según una técnica de timidina tritiada) y de lafracción de crecimiento de la epidermis (56.1±18,6% vs 5.2±1%). También seha detectado un aumento del índice de captación de la ^H-timidina, delnúmero de mitosis y del número de células en fase cíclica. La piel sana delos pacientes con psoriasis también presenta características hiperproliferati-vas.La hiperproliferación epidérmica en la psoriasis se debe a la entradade células que estaban en fase latente (GQ) a fase cíclica, las cuales puedenponerse de manifiesto mediante la tinción con Ki-67, Ac monoclonal quereacciona con un Ag nuclear expresado por las células en fase Gj tardía, S,My Q>2 Tiene la ventaja, respecto a la timidina tritiada, de que es un métodono radioactivo y más rápido para cuantificar la proliferación epidérmica.Este Ac monoclonal se ha utilizado principalmente en la valoración de laproliferación en tumores. Existen 2 estudios previos de la proliferación epi-dérmica en la psoriasis con Ki-67.Por otra parte, varios autores habían afirmado que en la psoriasis loslinfocitos T dérmicos estaban en fase GQ o de descanso (eran K¡67-) y queúnicamente eran + los que infiltraban la epidermis. Esto significaría que loslinfocitos T proliferarían en los ganglios linfáticos, pasarían posteriormente ala circulación general y finalmente llegarían a la epidermis donde se activarían.El infiltrado dérmico de una lesión de psoriasis está compuesto porlinfocitos T (75% de tipo CD4+) activados, que expresan en superficie HLA-DRy rlL-2, dendrocitos dérmicos/macrófagos y células de Langerhans. Se había afirmado que cuando las lesiones de psoriasis involucionaban predomminaban los linfociíos T CD8+, mientras que las lesiones crónicas se caracterizabanpor una reducción en los mismos. En el infiltrado se han detec-tado las atocinas proinflamatorias IL-2 e IFN-y, mientras que están ausenteslas atocinas antiinflamatorias IL-4 e IL-10. Este patrón corresponde al secre-| tado por los linfocitos Thl, por lo que se cree que son los que predominan. en el infiltrado de la psoriasis. También se ha detectado una elevada pro-porción de dendrocitos/macrófagos, con elevada capacidad de presentarAg y de secretar citocinas como el TNF-a, implicadas en la psoriasis. Supapel se ha reforzado con la teoría de los superantígenos en la patogénesis| de la misma.Por otra parte, una de las características del queratinocito psoriásicoes la expresión en superficie de ICAM-1 y HLA-DR. Ambas se expresan enrespuesta al estímulo del IF-y y, mientras la primera sirve como molécula deadhesión para la unión de la LFA-1 linfocitaria, la segunda se ha visto quepuede servir para presentar superantígenos que mantengan al linfocito activado.