Orientador: Osmar Malaspina / Resumo: As abelhas Apis mellifera africanizadas são consideradas importantes polinizadores no Brasil, uma vez que muitas culturas de alimentos dependem da polinização promovida por esses insetos. No entanto, com o crescimento da produtividade agrícola houve aumento do uso de agrotóxicos para o controle de pragas, os quais podem atingir também insetos não-alvo. Com a ação dos inseticidas como uma das possíveis causadoras da morte massiva desses polinizadores, pesquisas sobre o impacto dos agrotóxicos em abelhas receberam destaque. Diante do exposto, o presente estudo propôs investigar os efeitos de uma dose subletal de tiametoxam (TMX) (0,0227 ng de ingrediente ativo/μl de alimento), importante inseticida da classe dos neonicotinóides, no cérebro e no intestino de Apis mellifera africanizadas, por meio da avaliação da atividade de biomarcadores enzimáticos de exposição e de estresse oxidativo e pela ocorrência de peroxidação lipídica. O nível de estresse celular também foi investigado pela imunomarcação das proteínas de choque térmico HSP70 e HSP90 em conjunto com a detecção de morte celular pelo ensaio de TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling). Os dados mostraram que, no cérebro, o TMX aumentou a atividade de acetilcolinesterase (AChE) em 1, 3 e 5 dias de exposição, enquanto a carboxilesterase (CaE) diminuiu no primeiro dia e a glutationa s-transferase (GST) aumentou no quinto dia. Por sua vez, as enzimas antioxidantes foram menos atuantes no cérebro, se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Africanized Apis mellifera bees are considered important pollinators in Brazil, since many food crops depend on the pollination by these insects. However, with the growth of agricultural productivity there has been an increase in the use of insecticides for pest control, which also can reach non-target insects. With the action of insecticides as one of the possible causes of the massive death of these pollinators, the studies of the effects of pesticides on bees were highlighted. Given the context, the present study aimed to investigate the effects of a sub lethal dose of thiamethoxam - TMX (0.0227 ng of active ingredient / μl of food), a insecticide of the class of neonicotinoids, in the brain and intestine of Africanized Apis mellifera, through the evaluation of the activity of enzymatic biomarkers of exposure and of oxidative stress and by the occurrence of lipid peroxidation. The level of cell stress was also investigated by the immunostaining of the HSP70 and HSP90 proteins together with the detection of cell death by the TUNEL (Terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling) assay. The data showed that, in the brain, TMX increased acetylcholinesterase activity (AChE) at 1, 3 and 5 days of exposure, while carboxylesterase (CaE) decreased on the first day and glutathione s-transferase (GST) increased in the fifth day. On the other hand, antioxidant enzymes were less active in the brain, and only glutathione peroxidase (GPX) showed increased activity on the f... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Objetivos Avaliar a composição e qualidade de méis de abelha Jandaira através de análises físico-químicas; avaliar se os parâmetros apresentados se encaixam nas legislações nacional e internacional para méis de Apis mellifera; analisar os efeitos de estocagens de méis de Jandaira em três diferentes temperaturas (ambiente, geladeira e freezer) e os efeitos de um ano de armazenamento de méis de Jandaira e Apis mellifera de mesma região botânica e a comparação da alteração de seus parâmetros de qualidade. Metodologia Revisão de literatura relativa aos padrões de identidade e qualidade dos méis de Apis mellifera e de abelhas sem ferrão com ênfase na Melipona subnitida. Realização das análises preconizadas pela legislação brasileira para méis de Apis mellifera nas amostras coletadas de Jandaira e Apis, além das análises qualitativas (Fiehe, Lund e Lugol), condutividade elétrica e análise dos açúcares glicose, frutose e sacarose por CLAE. Resultados As amostras de mel de Apis apresentaram-se monoflorais (pólen dominante de Althernanthera sp.) e com parâmetros dentro do preconizado pela legislação vigente, enquanto os de méis de Jandaira apresentaram-se heteroflorais (pólen de Mimosa verrucosa, Mimosa caeselpiniaefolia e Piptadenia moniliforme) a umidade (24,80%) e atividade diastásica (ausente) fora do estabelecido pela legislação vigente para os méis de Apis mellifera. A condutividade elétrica de Apis (284,00 µS.cm-1) foi superior a obtida no mel de Jandaira (102,77µS.cm-1) e a cor do mel de Apis apresentou-se mais escura (26,67 mmPfund), comparada ao mel de Jandaira (7,00 ± 0,00 mmPfund). Determinou-se maior concentração de glicose, frutose e sacarose nos méis de Apis (23,50%, 38,78% e 5,72% respectivamente) do que nos de Jandaira (21,76%, 29,21% e 4,86% respectivamente). Os parâmetros mais afetados em um ano de estocagem em temperatura ambiente foram: HMF, acidez livre, condutividade elétrica e cor. O método de estocagem que melhor conservou as características do produto foi o freezer. Conclusões Os méis de Apis mellifera e Melipona subnitida apresentam diversas diferenças em seus padrões físico-químicos, mais acentuadamente nos valores de umidade e atividade diastásica. As análises do Tempo 0 dos méis de Apis se encaixaram sem exceção nas legislações nacional e internacional vigentes, enquanto as amostras de Jandaira se encontram fora do preconizado para a umidade e atividade diastásica. Após um ano de estocagem em temperatura ambiente com incidência de luz, o mel de Apis conservou melhor suas características físico-químicas em relação ao mel de Jandaira em todos os parâmetros analisados ainda estando em conformidade com a legislação. Quando estocados em diferentes temperaturas, os méis de Jandaira conservaram melhor seus parâmetros nas condições de freezer e geladeira, enquanto sofreram alterações visíveis em temperatura ambiente. / Objectives Evaluate the quality and composition of Jandaira bee\'s honey through the use of physicochemical analyses; find out if the obtained parameters are in concordance with the Apis mellifera honey Legislations established both nationally and internationally; evaluate the effects of storage conditions for Jandaira Honey in three different temperatures (ambient, fridge and freezer) over one year, as well as the storage of Apis mellifera samples from the same botanical region over one year in ambient temperature and the comparison of both kinds of honeys and the alterations of their quality parameters. Metodology Review of the literature asserting the quality and identity parameters of Apis mellifera honey and stingless bees, with emphasis on Melipona subnitida honey. Procedure of the analyses contained in the Brazillian Legislation (2000) for Apis mellifera honey in the collected samples of Apis mellifera and Melipona subnitida honeys, as well as the qualitative analyses (Fiehe, Lund and Lugol), electric conductivity, and quantification of the glucose, fructose and sucrose sugars via HPLC. Results The Apis honey samples were classified as monofloral (Althernantera sp. as dominant pollen) and demonstrated parameters in accord with the current Legislation, while the Jandaira honey samples were classified as heterofloral (nearly even amounts of Mimosa verrucosa, Mimora caeselpinaefolia and Piptadenia moniliforme pollen) displaying moisture (24,80%) and diastase activity (null) in discordance with the established by the current legislation for Apis mellifera honeys. The Apis honey samples presented higher values of electric conductivity (284,00 µS.cm-1) than the obtained in the Jandaira honey samples (102,77µS.cm-1) as well as a darker color (26,67mmPfund) when compared to Jandaira honey (7,00mmPfund). The concentration of the glucose, fructose and sucrose sugars was higher in the Apis honeys (23,50%, 38,78% and 5,72% respectively) than in the Jandaira honey samples (21,76%, 29,21% and 4,86% respectively). The most affected parameters throughout one year of storage were HMF, free acidity, electric conductivity and color. The temperature that conserved better the original characteristics of the product was the freezer. Conclusions The Apis mellifera and Melipona subnitida honey samples displayed several differences in their physicochemical parameters, namely in moisture and diastase activity. At first (Time 0) the Apis honey samples were without exception in accord with the national and international legislations, whereas the Jandaira samples had moisture and diastase activity stray from the protocol, however, after one year of storage in ambient temperature, the Apis honey samples still was in concordance with the legislations in every analyzed parameter and had it\'s physicochemical characteristics better conserved then the Jandaira honey samples. Jandaira also had it\'s own characteristics better conserved in the fridge and freezer, when compared to the notable alterations in the ambient temperature storage.

Este trabalho avaliou as relações de parentesco entre as abelhas corbiculadas (Apini) utilizando a evidência total disponível: dados morfométricos tradicionais, dados de morfometria geométrica, dados morfológicos, dados comportamentais e dados moleculares. Fontes que historicamente se mostraram incongruentes. Os problemas metodológicos que cada fonte de caracteres oferece foram investigados e corrigidos na análise filogenética de evidencia total. Todos os dados foram analisados com métodos de parcimônia. Vinte e quatro espécies de Apini e quatro espécies dos grupos externos foram analisadas. As análises filogenéticas de onze medidas corporais tradicionais sugeriram grande interferência do tamanho corporal das espécies nos resultados. Ao corrigir esse efeito do tamanho, os dados morfométricos puderam ser utilizados como caracteres filogenéticos confiáveis. O caráter obtido a partir da morfometria geométrica foi altamente convergente na análise filogenética, apesar da relação entre a forma da asa e do tamanho do corpo das espécies aparentemente terem uma restrição filogenética. As análises dos dados moleculares sugeriram a interferência da escolha dos grupos externos nos resultados, diferentes hipóteses filogenéticas surgiram quando se incluiram duas especies mais distantes de Apini nos grupos externos. Com os grupos externos mais distantes, o suporte dos clados se mostrou constante e maior para os clados mais abrangentes. Porém, os dados moleculares se mantiveram incongruentes com os caracteres morfológicos, morfométricos tradicionais e comportamentais analisados. Em contraste, os dados morfológicos e comportamentais não foram afetados pela escolha dos grupos externos, Euglossina se manteve como um grupo parafiletico segundo esses caracteres. Finalmente, a hipótese filogenética proposta nesse trabalho para o grupo das abelhas corbiculadas apoia a monofilia da tribo Apini, assim como das subtribos Euglossina, Apina, Bombina e Meliponina. A hipótese (Euglossina + (Bombina + (Apina + Meliponina))) é revalidada. Em consequência, a origem única da eussocialidade dentro de Apini é sustentada. / This work evaluated the relationship between corbiculate Apidae using the total evidence available: traditional morphometric data, geometric morphometric data, morphological data, behavioral data and molecular data. These characters historically were incongruent. Methodological problems of each source of character were investigated and corrected in the phylogenetic analysis of the total evidence. The methodological problems were searched for each source of characters. All data are analyzed with parsimony methods. Twenty- four species of Apini and four outgroup species were analyzed. Phylogenetic analysis of eleven traditional body measurements suggested significant interference with body size of the species in the results, to correct this size effect morphometric data can be used as reliable phylogenetic characters. The character obtained from geometric morphometric was highly convergent in the phylogenetic analysis, despite the apparent phylogenetic constraint observed on relationship between the wing shape and body size of the species. Analyses of molecular data suggested the interference of the choice of outgroup in the results, different phylogenetic hypotheses emerged when include two species more distant of Apini in the outgroup. With the most distant outgroup, the support of the clades showed constant and higher for most comprehensive clades. However, the molecular data remained incongruent with traditional morphological and behavioral, morphometric characters analyzed. In contrast, morphological and behavioral data were not affected by the choice of outgroup, Euglossina remained as a paraphyletic group according to these characters. Finally, the phylogenetic hypothesis proposed for the corbiculate Apidae supports the monophyly of the tribe Apini, Euglossina Apina, Bombina and Meliponina. The hypothesis (Euglossina + (Bombina + (Apina + Meliponina))) is revalidated. Consequently, a single origin of eussocialidade within Apini is sustained.

Os objetivos deste estudo foram: avaliar a fauna de polinizadores potenciais do morangueiro em campos de produçaõ comercial; verificar a contribuição de diversos agentes de polinização na produtividade do morangueiro, conhecendo a biologia floral e reprodutiva dos cultivares mais utilizados para o plantio; testar, em cultivo fechado (estufa), diversas espécies de Meliponini (abelhas sem ferrão)como polinizador do morangueiro, avaliando a sua adaptação ao cultivo e sua efetividade nesta cultura. Os resultados obtidos revelaram que as flores do dos cultivares "Sweet Charlie" e "Oso Grande" necessitam de um polinizador para a produção de frutos sem deformação pois a morfologia de suas flores e o amadurecimento de suas estruturas reprodutivas não favorecem a ocorrência da autopolinização, nem a distribuição homogênea do pólen pelos estigmas da flor, resultando em frutos deformados que não alcançam o seu potencial máximo de desenvolvimento. A abelha jataí (Tetragonisca angustula) adaptou-se bem ás condições do cultivo fechado (estufa) e mostrou-se efetiva na polinização do morangueiro, resultando em frutos mais pesados e em uma porcentagem mais elevada de frutos bem formados. / The aims of this study were: to investigate potencial pollinators of strawberry crops in commercial fields; to verify the contribution of several pollination agents on strawberry productivity, studying the floral and reproductive biology of some commercial cultivars; to evaluate the possibility of the rational use of stingless bees in strawberry pollination inside greenhouses. The results showed that the floral morphology of "Sweet Charlie" and Oso Grande" cultivars and the maturation pattern of their stamens and pistils nor favour the occurrence of self pollination neither the regular pollen distribuction among stigmata, yielding deformed fruits that don´t complete their development. Therefore these cultivars need pollinators to commercial production. Tetragonisca angustula (Apinae, Meliponini)was remarkable for its relatively quick adaptation inside greenhouses and for its effectivity as strawberry pollinator, resulting in heavier berries and high percentage of marketable fruits.

Em abelhas eussociais o controle das condições internas do ninho é importante para a sobrevivência da colônia e um dos principais mecanismos para controle da temperatura colonial é a escolha do local de nidificação, como ocos de troncos de árvores, tal qual ocorre nas abelhas sem ferrão Melipona quadrifasciata, sistema biológico deste estudo. Além de mecanismos comportamentais, em Hymenoptera são também conhecidos mecanismos fisiológicos de termorregulação (termogênese) como a ocorrência de ciclos fúteis (descritos para mamangavas Bombus) e o tremor muscular. A termogênese em abelhas ocorre principalmente durante incubação da cria, atividades sociais e aquecimento pré-vôo. As aminas biogênicas desempenham um amplo espectro de funções em abelhas, e é sugerido que o sistema noradrenérgico/adrenérico de vertebrados é funcional e estruturalmente equivalente ao sistema octopaminérgico/tiraminérgico de insetos. O emprego de bloqueador beta-adrenérgico em abelhas pode levar a hipotermia, emergindo a hipótese de que haveria envolvimento de uma via octopaminérgica na energética e termogênese de abelhas. Os três principais aspectos da termorregulação focados neste trabalho são a termorregulação colonial, a energética individual e mecanismos de termogênese. Com relação à termorregulação colonial, o objetivo principal foi descrevê-la em duas regiões do ninho (discos de cria e potes de alimento), por meio de registro de séries temporais de temperatura e umidade relativa, e estudo da atividade externa de vôo. Foi detectada ritmicidade nas séries temporais de colônias abertas, com influência das periodicidades da temperatura ambiente, umidade relativa e luminosidade, sobre as séries temporais registradas dentro da colônia. As séries temporais de atividade de vôo apresentavam periodicidades similares às ambientais, mas também eram relacionadas às da cria. Em colônias fechadas, as séries temporais dos discos de cria apresentavam periodicidades próximas a 24h e 12h, sugerindo aspecto endógeno da regulação de temperatura e umidade próximo à cria. Também, objetivou-se caracterizar o efeito do tipo de iluminação e de diferentes temperaturas. Foram estudados, por meio de respirometria intermitente, os efeitos do ciclo claro/escuro a 28°C (fotoperíodo normal, fotoperíodo invertido, claro e escuro constante) sobre a taxa metabólica (TM), e os efeitos de diferentes temperaturas ambientais (10 a 40°C) sobre a TM e quociente respiratório (QR). Os diferentes ciclos de claro/escuro afetaram a TM, sendo observados, em fotoperíodo normal e claro constante valores de TM baixos entre 19h e 5h. Em fotoperíodo invertido, valores diminuídos foram registrados entre 6h e 18h, sugerindo um ritmo exógeno em resposta a mudanças fotoperiódicas. Entre 7h e 17h59, no claro, ressalta-se que não há diferenças estatisticamente significativas na TM. A temperatura tem um efeito significativo, com valores diminuídos a 35 e 40°C e mais ainda a 10°C. Entre 15 e 30°C não há diferenças significativas. Na terceira parte do trabalho objetivou-se verificar o efeito tempo-dependente de bloqueadores beta-adrenérgicos e octopaminérgicos (Alprenolol e Mianserina) sobre a TM e temperatura torácica de forrageadoras e verificar se a octopamina e methoprene (análogo de hormônio juvenil) compensam os efeitos dos bloqueadores. Também foi analisado se há alterações dos substratos energéticos catabolizados, considerando o QR e a atividade enzimática (Vmax de hexoquinase, trealase, HOAD e glicogênio fosforilase). Com o emprego dos bloqueadores, foram detectadas alterações no QR e na atividade das quatro enzimas. A diminuição da temperatura torácica obtida em forrageadoras tratadas com Alprenolol sugere o envolvimento de vias octopaminérgicas na termogênese em M. quadrifasciata; todavia, não se sabe se tais efeitos são decorrentes de interferências na produção de calor e/ou um subproduto da diminuição da TM. No nível colonial, ninhos tratados com os mesmos bloqueadores parecem apresentar periodicidades de séries temporais mais similares à da umidade relativa do ambiente e menos à da temperatura ambiente, sugerindo menor resposta às variações de temperatura. Os resultados não provam que há mecanismos de termogênese sem tremor muscular em abelhas, envolvendo octopamina e hormônio juvenil, mas indicam um possível envolvimento destas substâncias na taxa metabólica e oxidação de diferentes substratos energéticos. Sob uma visão comparativa, pode-se apontar semelhanças entre efeitos de modificações em vias octopaminérgicas/tiraminérgicas de insetos e noradrenérgicas/tiraminérgicas de vertebrados, quando à energética e termogênese. Os resultados não provam tal afirmação, mas apontam evidências do papel da via octopaminérgica na taxa metabólica e temperatura torácica de forrageadoras. / In eusocial insects, such as stingless bees, the control of nest conditions and maintenance of the colonial microclimate are important to brood incubation, development of eggs, larvae and pupae, and survival of the colony. One of the main thermoregulatory mechanisms to control nest temperature is the microhabitat selection to build the nest, such as tree holes, characteristic of the stingless bee Melipona quadrifasciata, the biological system chosen for this study. In addition to the behavioral mechanisms involved in thermoregulation, physiological mechanisms underlying thermogenesis are also found in Hymenoptera, such as futile cycles (in bumblebees) and shivering thermogenesis. Thermogenesis in bees is detected mainly during brood incubation, social interactions and pre-flight warming; additional possible physiological mechanisms have not yet been investigated with enough detail. Biogenic amines, especially octopamine, play important physiological roles in bees. Although octopamine and norepinephrine are chemically not identical, it appears that octopaminergic systems of invertebrates and noradrenergic systems of vertebrates are homologous. Oral treatment with beta-blockers can cause hypothermia, leading to the hypothesis that an octopaminergic pathway involved in bee energetics and thermogenesis might exist. The main aspects investigated in the present study are the colonial thermoregulation, the energetics of individual bees, and the mechanisms associated with thermogenesis in M. quadrifasciata. With regards to the colonial thermoregulation, temperature and humidity, time series were recorded inside and outside the nest, in two colonial compartments, i.e., brood and pots. In addition, flight activity was also recorded. Flight activity time series presented similar periodicities in both ambient and brood series. In closed colonies, maintained under constant conditions, the brood time series presented periodicities close to 24h and 12h, suggesting endogenous aspects and rhythm. Another goal of this study was to characterizing the effects of the light-dark cycles and ambient temperatures. This was achieved using intermittent respirometry, and the effects of the light-dark cycles at 28°C (normal photoperiod, inverted photoperiod, constant light and constant dark) on metabolic rate (MR), and the effects of different temperatures (10 40°C) on MR and respiratory quotient (RQ) were measured. The different light-dark cycles affected the MR under normal photoperiod and constant light. Two \"platforms,\" with low MR values were detected between 19h and 5h. When the photoperiod was inverted, lower values were recorded in the dark phase, between 6h and 18h, resulting in an inverted pattern of MR, thus suggesting an exogenous response to photoperiodic changes. Between 7h and 17h59, in the light phase, metabolic rate did not change significantly. The temperature has a significant effect on MR and RQ of the foragers, and reduced values at 10, 35 and 40°C were detected. Between 15 and 30°C no significant differences were detected. In the third part of this work the aim was to verify the time-dependent effects of beta-blockers (Alprenolol and Mianserina) on MR and thoracic temperature of foragers, and to verify whether octopamine and methoprene (analogous to juvenile hormone) compensate the effects of beta-blockers. Alterations of substrates oxidation, considering the RQ and the activity (Vmax) of specific enzymes, such as hexokinase, trehalase, HOAD and glycogen phosphorylase, were also investigated. Treatments with blockers caused alterations in the RQ and in the enzyme activities of hexokinase, HOAD and glycogen phosphorylase. The reduced values of thoracic temperature in foragers treated with Alprenolol suggests the involvement of octopaminergic pathways in thermogenesis; however, it is not yet known if such effects are due to interferences in the heat production and/or represent a by-product of a reduced metabolic rate. At the colonial level, nests treated with blockers presented colonial time series periodicities more similar to the ambient humidity series than to the ambient temperature series, suggesting therefore that the responses to ambient temperature are reduced. These results do not prove that mechanisms of nonshivering thermogenesis are present in bees, involving both octopamin and juvenile hormone, but they can indicate possible involvements of these substances in metabolic rate, energetics and fuel utilization. Under a comparative approach, one can suggest similarities between the effects caused by modifications in the noradrenergic and octopaminergic pathways on the energetics and thermogenesis of M. quadrifasciata. The results, however, do not prove such hypothesis, but they suggest an octopaminergic influence on both metabolic rate and thoracic temperature of M. quadrifasciata foragers.

A perda de polinizadores no mundo todo, especialmente abelhas, tem sido atribuída, entre outros fatores, à intensificação do uso de inseticidas em agro ecossistemas. A nova classe química de inseticidas, os neonicotinóides, tem sido o principal alvo de investigações, sobretudo em decorrência de sua ação sistêmica que transloca a substância ativa pela planta e atinge o pólen e néctar como resíduos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo verificar os efeitos do neonicotinóide tiametoxam em abelhas sociais e avaliar a possibilidade da espécie Scaptotrigona aff. depilis ser utilizada como bioindicadora de contaminação ambiental por inseticidas. Para tanto, (i) operárias forrageiras de Bombus terrestris audax, Apis mellifera e Scaptotrigona bipunctata foram submetidas à exposição contínua de alimento contaminado; (ii) operárias de Scaptotrigona aff. depilis foram expostas ao inseticida, durante o estágio larval, através do alimento e; (iii) operárias forrageiras de Scaptotrigona aff. depilis foram coletadas no meliponário da Universidade de São Paulo e arredores, e submetidas a análises químicas, para a checagem de contaminação pelos neonicotinóides tiametoxam e/ ou imidacloprido. (i) Dentre as três espécies de abelhas sociais adultas, B. terrestris audax mostrou ser a mais sensível à ação de tiametoxam, seguida de S. bipunctata e A. mellifera, verificados através do decréscimo no consumo de alimento e da longevidade. Nesse sentido, os efeitos subletais não foram influenciados pelo tamanho do corpo dos indivíduos. (ii) As operárias de Scaptotrigona aff. depilis, quando expostas a doses do inseticida em fase larval, apresentaram desenvolvimento tardio e originaram indivíduos menores e assimétricos. Tanto em abelhas adultas como em imaturas, os efeitos subletais foram evidenciados nos indivíduos expostos às maiores doses de tiametoxam nos experimentos (39.37 e 98.43µg de substância ativa/kg de xarope em adultos, ou 0.044 e 4.375ng de substância ativa/larva). (iii) A detecção de tiametoxam e imidacloprido em operárias forrageiras de Scaptotrigona aff. depilis permitiu considerar essa espécie como bioindicadora de contaminação. Nesse estudo, a mortalidade não foi parâmetro conclusivo quanto aos potenciais efeitos adversos de tiametoxam para as abelhas. O potencial de Scaptotrigona aff. depilis como espécie bioindicadora é uma importante etapa para avaliar a contaminação ambiental por neonicotinóides em abelhas sem ferrão, podendo ser utilizada em políticas públicas. / Pollinator losses all over the world, especially bees disappearing, have been attributed, among others, to the intensification of insecticide use on crops. The new chemical class of insecticides, the neonicotinoids, has been the main target of investigation, mainly due to its systemic action, which translocates the active substance for the plant and to reach the pollen and nectar as residues. Thus, this study evaluated the effects of thiamethoxam neonicotinoid on bees and the possibility of the use of Scaptotrigona aff. depilis species as bioindicator of environmental contamination by insecticides. For this, (i) Bombus terrestris audax, Apis mellifera and Scaptotrigona bipunctata forager workers were induced to continue exposure of contaminated food; (ii) Scaptotrigona aff. depilis workers were exposed to the insecticide, during its larval phase, through the larval food and; (iii) Scaptotrigona aff. depilis forager workers were collected from University of São Paulo meliponary and surroundings and analyzed, in order to check for contamination by thiamethoxam and/ or imidacloprid neonicotinoids. (i) Among the three social bee species, B. terrestris audax showed to be more sensible to the thiamethoxam action, followed by S. bipunctata and A. mellifera, verified through decreasing food consumption and longevity. Thus, the sub lethal effects were not influenced by individual body size. (ii) Scaptotrigona aff. depilis workers, when exposed to insecticide doses on larval food, caused individuals with developmental delay and were smaller and asymmetric. Both adult bees and in immature, the sub lethal effects of thiamethoxam were evidenced on individuals exposed to the highest doses in the experiments. (iii) The detection of thiamethoxam and imidacloprid in Scaptotrigona aff. depilis forager workers allowed to consider this species as bioindicator of environmental contamination. In this study, the mortality was not a conclusive parameter as to the potential adverse effects of thiamethoxam for the bees. The potential of Scaptotrigona aff. depilis species as bioindicator is an important step to assess environmental contamination by neonicotinoids on stingless bees, may be used for public policy.

RESUMO O trabalho foi desenvolvido em uma área de cerrado de 1 ha., localizada na Estação Ecológica de Jataí, no município de Luiz Antônio - SP. A fauna de abelhas e suas fontes de alimento foram amostradas quinzenalmente, durante dois anos de coletas (setembro de 1991 a agosto de 1993), foi estudada a sua composição, riqueza, abundância relativa, fenologia e visita às flores através de levantamentos padronizados. Foram coletados 3659 indivíduos, pertencentes a 142 espécies e a 57 gêneros de 6 famílias de Apoidea, sendo que Apidae foi a melhor representada em número de indivíduos e Anthophoridae em número de espécies. Com relação à fenologia, as espécies foram mais abundantes no período de menor precipitação (maio a novembro de 1992). As abelhas visitaram 72 espécies de plantas para a coleta de néctar, pólen e óleo. As famílias Asteraceae, Leguminosae e Bignoniaceae foram as melhores representadas em número de espécies. Didymopanax vinosum (Araliaceae) e Pyrostegia venusta (Bignoniaceae) foram as espéceis vegetais mais visitadas. Quanto à fenologia do florescimento, a maior diversidade de espécies de plantas floridas foi verificada no verão e outono; já no inverno, houve uma queda acentuada de espécies floridas. Estabeleceu-se como espécies dominantes de abelhas, aquelas que estiveram melhor representadas em número de indivíduos (Apis mellifera, Trigona hyalinata) e as espécies dominantes de plantas, aquelas que atraíram um número significativo de espécies de abelhas (Didymopanax vinosum, Pyrostegia venusta). Esses dados serviram para determinar os grupos de abelhas mais relacionados quanto às flores visitadas e os grupos de plantas mais semelhantes quanto aos visitantes. De um modo geral, os Apoidea mostraram-se generalistas na utilização de recursos, tendo sido encontrados em várias espécies de plantas. No entanto, algumas espécies de abelhas coletoras de óleo da família Anthophoridae (Centridini), mostraram preferência por flores de Byrsonima intermedia e Heteropterys byrsonimifolia (Malpighiaceae). / ABSTRACT The research was undertaken in a cerrado area (1 hectare) located at Estação Ecológica de Jataí, Luiz Antônio Municipality, São Paulo State, SE Brazil. Bees foranging for food on flowers were standardizedly sampled at every 15 days, for two years (September, 1991 to August, 1993). Host plants were sampled also. The study aims at an approach towards: faunal-floral composition, species richness, relative abundance, flower visiting habits, etc. Concerning bees, (Apoidea), 3659 individuals were collected which represent 142 species, 57 genera and 6 families. Among the collected families, Apidae representatives were the most abundant in number of individuals, while the Anthophoridae were top-ranked in number of collected species. Relatively to phenology, higher species-abundance peaks were connected to periods of less pluviosity, that is, from May to November, 1992. In their foraging for nectar, pollen and oil, sampled bees visited 72 plant species, among which Asteraceae, Leguminosae and Bignoniaceae were the best represent at specific level. Didymopanax vinosum (Araliaceae) and Pyrostegia venusta (Bignoniaceae) were the plants preferably visited. Concerning flowering phenology, flowers were most abundant during summer and autumm; conversely, winter-periods presented the lowest levels of flowering. Dominant bee species were considered as those best represented relatively to collected number of individuals (e.g., Apis mellifera, Trigona hyalinata). On the vegetation side, dominant plant species referes to those taxa which attracted the most significant number of bees (e.g., Didymopanax vinosum, Pyrostegia venusta). Such definitios were important to determine the connexions between bee groups-visited flowers; and, the relationships between plant groupsvisitors, as well. Since most species were found visiting several plant species, the sampled bees can be regarded as generalists, primarily. However, in their oil-collecting activity some Anthophoridae species (Centridini) showed remarkakle preferences relatively to Malpighiaceae flowers: Byrsonima intermedia and Heteropterys byrsonimifolia.

Os meliponíneos (Apidae, Meliponini) são insetos com organização altamente eussocial, formando colônias com população que varia de centenas a milhares de indivíduos. Em suas colônias, as operárias distribuem suas atividades conforme a faixa etária. As mais jovens são responsáveis pelos cuidados da cria, trabalhos com a cera e cerume, construção e aprovisionamento de células. As mais velhas ocupam as posições de receptoras e desidratadoras de néctar, guardas e forrageiras. As colônias de meliponíneos são perenes. Para isso, as operárias forrageiam continuamente em busca dos recursos florais e estocam grande quantidade de pólen e néctar em potes de alimento. A atividade de voo das campeiras está relacionada aos fatores meteorológicos como: temperatura, intensidade luminosa, umidade relativa, precipitação pluviométrica e vento. Neste estudo investigamos a influência dos fatores meteorológicos (temperatura e umidade relativa), bem como da disponibilidade de recursos florais na coleta de pólen e néctar das operárias de Melipona quadrifasciata Lep. Além disso, analisamos os tipos polínicos encontrados nas corbículas das abelhas forrageiras e nos potes de mel. Cinco colônias foram instaladas em um meliponário no Parque das Neblinas, em Mogi das Cruzes (23º4452S/46º0946W). Observações e amostragem nestas colônias foram realizadas mensalmente durante um ano, entre outubro de 2009 e setembro de 2010. As entradas das abelhas foram monitoradas durante dois dias consecutivos, durante 5 minutos por hora, entre 05:30 e 16:30h, totalizando 1430 observações. Foram extraídas 133 amostras de pólen das corbículas e 29 dos potes de mel. O pólen foi analisado a fresco. Os picos de coleta de pólen e néctar ocorrem após as 08:00h. Os resultados mostram que temperaturas amenas são ideais para o forrageamento de M. quadrifasciata. Nos potes de mel foram encontrados 25 tipos polínicos, sendo os mais frequentes Eucalyptus, Melastomataceae, Myrcia e Solanaceae. Nas corbículas foram encontrados 8 tipos polínicos, sendo os mais frequentes os mesmos encontrados no mel. Apesar do caráter generalista de M. quadrifasciata, foi verificado que esta espécie possui preferências por determinadas fontes de plantas melíferas. O conhecimento sobre aspectos de atividades de voo e utilização de recursos florais por diferentes espécies de abelhas são importantes para a manutenção e preservação das mesmas, além de atender a programas de manejo de polinizadores, reflorestamento e restauração ambiental. / The stingless bees (Apidae, Meliponini) are insects with high eusocial organization, composing colonies of hundred or thousands individuals. The tasks inside the nest are divided according to the age of the workers. The younger are responsible to the care of the brood, work with wax, construction and supply of the cells. The older receive and dehydrate the nectar, act as guards and foragers. The stingless bees colonies are perennial. For this, the workers forage continuously in search of floral resources and store large amount of pollen and nectar on the food pots. Flight activity of foragers is correlated with climatic factors as temperature, light intensity, relative humidity, rainfall and wind. In this study we investigated the influence of climate conditions (temperature and relative humidity), as well as the available floral resources on the pattern of pollen and nectar collection by workers of Melipona quadrifasciata Lep. in natural conditions. Furthermore, we analyzed the pollen types found on the corbiculae of the forager bees and honey pots. Five colonies were displayed in an meliponario at the Parque das Neblinas, in Mogi das Cruzes (23º4452S/46º0946W). The flight activity of the bees was observed monthly between October 2009 and September 2010. The entries of the bees into the nest were recorded along two consecutive days, during 5 minutes per hour, between 5:30am to 4:30pm, which corresponded to 1430 observations. A total of 133 samples were extracted from corbiculae and 29 of honey pots. The pollen were prepared fresh. The peaks of pollen and nectar collection occurred after 8am. The results show that mild temperatures is ideal for foraging of M. quadrifasciata. In the honey pots 25 pollen types were found, being the most frequent Eucalyptus, Melastomataceae, Solanaceae and Myrcia. In the corbiculae eight pollen types were found, being the most frequent the same as found in the honey. Despite been considered generalist, M. quadrifasciata shows preferences for certain sources of melittophilous plants. The knowledge about the flight activity and use of floral resources by the different bee species are important to the maintenance of them, since we can understand their needs and manage them as pollinators or in environmental restoration program.

Mourella caerulea, popularmente conhecida como mirim-de-chão ou bieira, e Plebeia nigriceps, comumente chamada mirim nigriceps, são meliponíneos ocorrentes no sul do Brasil, polinizadores de plantas nativas e cultivadas. M. caerulea está principalmente relacionada ao bioma Pampa e seu hábito de nidificação é subterrâneo. P. nigriceps nidifica em frestas de rochas e muros, sendo encontrada tanto no Pampa como em Mata Atlântica. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a variabilidade populacional destas duas espécies, através de três metodologias: a morfometria geométrica de asa, perfil de hidrocarbonetos cuticulares e sequenciamento de fragmentos de genes mitocondriais. Foram coletadas operárias de 24 colônias de M. caerulea em cinco localidades de sua distribuição natural e 53 colônias de P. nigriceps em oito localidades no estado do Rio Grande do Sul. Para análise do padrão de venação da asa, foram marcados 13 marcos anatômicos na asa anterior direita de cinco a 20 operárias por colônia. A análise genética foi realizada avaliando um fragmento do gene Citocromo Oxidase I em M. caerulea, e Citocromo B em P. nigriceps. A análise morfométrica demonstrou estruturação dos grupos com separação estatisticamente significativa (<0,0001) entre as localidades de M. caerulea. As distâncias morfométricas estão correlacionadas com a distância geográfica, e coerentes com regiões fisiográficas do bioma Pampa. A análise dos perfis de hidrocarbonetos distinguiu colônias de diferentes localidades, mas suas distâncias não apresentaram correlação com as distâncias geográficas. Foram encontrados seis haplótipos, todos exclusivos, com diversidade nucleotídica de 0,01631e uma diversidade haplotípica (Hd) de 0,74. Para P. nigriceps, as análises morfométricas apresentaram diferenças significativas entre localidades e correlação com as distâncias geográficas e biomas. A análise dos perfis de hidrocarbonetos distinguiu colônias de diferentes localidades, mas suas distâncias não apresentaram correlação com as distâncias geográficas. Foram encontrados 17 haplótipos, todos exclusivos, com diversidade nucleotídica de 0,0147 e diversidade haplotípica (Hd) de 0,94. A presença de diversos haplótipos exclusivos, perfis morfométricos e de hidrocarbonetos cuticulares em populações pertencentes a diferentes biomas indicam a necessidade de uma atenção especial para estas populações no momento da definição de estratégias de conservação das espécies. Uma especial atenção às abelhas da espécie Mourella caerulea, que além de ser uma espécie representante única de um gênero monoespecífico, apresenta grandes distâncias populacionais entre os indivíduos de todas as localidades amostradas. / Mourella caerulea and Plebeia nigriceps are two stingless bees with occurrence in the South region of Brazil. The first is commonly known as mirim-de-chão or bieira and the second is known as mirim nigriceps. Both species are important pollinators of native flora and crops. M. caerulea is related to Pampa biome and place nests on the ground. P. nigriceps occurs in both Pampa biome and Atlantic Rain Forest. This thesis had the objective of to evaluate the population variability of these species through three techniques: geometric morphometrics of wing, cuticular hydrocarbons (CHC) profiles and sequencing of fragments from mitochondrial DNA genes. We collected workers from 24 colonies for M. caerulea from five localities, and 53 colonies of P. nigriceps from eight localities in Rio Grande do Sul State. For the geometric morphometrics analysis, we used 13 landmarks plotted in the right forewing of five to 20 workers per nest. The fragments of mtDNA genes used for the molecular approach were from Cytochrome Oxidase I for M. caerulea and Cytochrome B for P. nigriceps. The morphometric approach discriminated the populations of M. caerulea from different localities (<0,0001). The morphometric distances are correlated to geographic distances and go along with the physiographic regions of Pampa biome. CHC profiles differentiated the colonies of M. caerulea from different localities, but chemical distances are not in agreement with geographic distances. We found six haplotypes (all exclusives) with a nucleotide diversity of 0.01631 and a haplotype diversity (Hd) of 0.74. For P. nigriceps, morphometric analysis was significant separating localities and in accordance with the geographic distances and biomes. CHC distinguished the colonies, but there was no significant correlation between this result and the geographic distances or biomes. mtDNA revealed 17 haplotypes (all exclusives) with a nucleotide diversity of 0.0147 and a haplotype diversity (Hd) of 0.94. The discovery of different exclusives haplotypes, the morphometric and CHC profiles when comparing population belonging to different biomes indicate that we need to give a particular attention for these species at the moment of create conservation strategies for both biomes from Rio Grande do Sul. M. caerulea deserves a special concern once it is the only species of the monospecific genera, and its populations are distant between themselves.

A perda de polinizadores no mundo todo, especialmente abelhas, tem sido atribuída, entre outros fatores, à intensificação do uso de inseticidas em agro ecossistemas. A nova classe química de inseticidas, os neonicotinóides, tem sido o principal alvo de investigações, sobretudo em decorrência de sua ação sistêmica que transloca a substância ativa pela planta e atinge o pólen e néctar como resíduos. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo verificar os efeitos do neonicotinóide tiametoxam em abelhas sociais e avaliar a possibilidade da espécie Scaptotrigona aff. depilis ser utilizada como bioindicadora de contaminação ambiental por inseticidas. Para tanto, (i) operárias forrageiras de Bombus terrestris audax, Apis mellifera e Scaptotrigona bipunctata foram submetidas à exposição contínua de alimento contaminado; (ii) operárias de Scaptotrigona aff. depilis foram expostas ao inseticida, durante o estágio larval, através do alimento e; (iii) operárias forrageiras de Scaptotrigona aff. depilis foram coletadas no meliponário da Universidade de São Paulo e arredores, e submetidas a análises químicas, para a checagem de contaminação pelos neonicotinóides tiametoxam e/ ou imidacloprido. (i) Dentre as três espécies de abelhas sociais adultas, B. terrestris audax mostrou ser a mais sensível à ação de tiametoxam, seguida de S. bipunctata e A. mellifera, verificados através do decréscimo no consumo de alimento e da longevidade. Nesse sentido, os efeitos subletais não foram influenciados pelo tamanho do corpo dos indivíduos. (ii) As operárias de Scaptotrigona aff. depilis, quando expostas a doses do inseticida em fase larval, apresentaram desenvolvimento tardio e originaram indivíduos menores e assimétricos. Tanto em abelhas adultas como em imaturas, os efeitos subletais foram evidenciados nos indivíduos expostos às maiores doses de tiametoxam nos experimentos (39.37 e 98.43µg de substância ativa/kg de xarope em adultos, ou 0.044 e 4.375ng de substância ativa/larva). (iii) A detecção de tiametoxam e imidacloprido em operárias forrageiras de Scaptotrigona aff. depilis permitiu considerar essa espécie como bioindicadora de contaminação. Nesse estudo, a mortalidade não foi parâmetro conclusivo quanto aos potenciais efeitos adversos de tiametoxam para as abelhas. O potencial de Scaptotrigona aff. depilis como espécie bioindicadora é uma importante etapa para avaliar a contaminação ambiental por neonicotinóides em abelhas sem ferrão, podendo ser utilizada em políticas públicas. / Pollinator losses all over the world, especially bees disappearing, have been attributed, among others, to the intensification of insecticide use on crops. The new chemical class of insecticides, the neonicotinoids, has been the main target of investigation, mainly due to its systemic action, which translocates the active substance for the plant and to reach the pollen and nectar as residues. Thus, this study evaluated the effects of thiamethoxam neonicotinoid on bees and the possibility of the use of Scaptotrigona aff. depilis species as bioindicator of environmental contamination by insecticides. For this, (i) Bombus terrestris audax, Apis mellifera and Scaptotrigona bipunctata forager workers were induced to continue exposure of contaminated food; (ii) Scaptotrigona aff. depilis workers were exposed to the insecticide, during its larval phase, through the larval food and; (iii) Scaptotrigona aff. depilis forager workers were collected from University of São Paulo meliponary and surroundings and analyzed, in order to check for contamination by thiamethoxam and/ or imidacloprid neonicotinoids. (i) Among the three social bee species, B. terrestris audax showed to be more sensible to the thiamethoxam action, followed by S. bipunctata and A. mellifera, verified through decreasing food consumption and longevity. Thus, the sub lethal effects were not influenced by individual body size. (ii) Scaptotrigona aff. depilis workers, when exposed to insecticide doses on larval food, caused individuals with developmental delay and were smaller and asymmetric. Both adult bees and in immature, the sub lethal effects of thiamethoxam were evidenced on individuals exposed to the highest doses in the experiments. (iii) The detection of thiamethoxam and imidacloprid in Scaptotrigona aff. depilis forager workers allowed to consider this species as bioindicator of environmental contamination. In this study, the mortality was not a conclusive parameter as to the potential adverse effects of thiamethoxam for the bees. The potential of Scaptotrigona aff. depilis species as bioindicator is an important step to assess environmental contamination by neonicotinoids on stingless bees, may be used for public policy.