Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-02. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:12Z : No. of bitstreams: 1 000870506_20170202.pdf: 558799 bytes, checksum: a8949d82d1af332f8d470d4406c88690 (MD5) Bitstreams deleted on 2017-02-03T10:35:37Z: 000870506_20170202.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-02-03T10:36:27Z : No. of bitstreams: 1 000870506.pdf: 1163684 bytes, checksum: 1bf926a3e051e1f07e34630ec6dfbd44 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a zoonosis of great epidemiological relevance. Infected dogs usually present nonspecific clinical and laboratory alterations that hampers the diagnosis of the disease in routine screening, and the use of techniques with higher sensitivity and sensibility, such as the detection of the parasite by polymerase chain reaction (PCR), are often necessary. Among the nonspecific alterations, anemia is one of the most frequently found, but the mechanism underlying its occurrence is still under dispute. Oxidative stress, the imbalance between oxidants and antioxidants, has been recently incriminated as one of the possible triggers of anemia in CVL. Here, we investigated the putative relationships between parasite load and markers of oxidative stress and hematologic, biochemical and clinical alterations in dogs naturally infected with Leishmania spp. Markers of oxidative stress included albumin, uric acid, bilirubin, total antioxidant capacity (TAC), total oxidant capacity (TOC), oxidative stress index (TOC/TAC) and serum and packed red cells Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Additional laboratory analysis included complete blood count (CBC) and biochemical profile. Observation of clinical alterations was scored as present or absent. Quantitative PCR (qPCR) of tissue samples of skin, conjunctiva, whole blood and packed white cells was used to estimate tissue-specific parasite load. In order to represent the total parasite load (i.e., the parasitism across different analyzed tissues), we applied a principal components analysis to the matrix of tissue-specific qPCR results to create a single synthetic variable that captures the information content present in the four different original variables. We found no significant associations between hematologic parameters and parasite load, and previously reported alterations such as sample hemolysis or icteric serum were not observed. However, significant differences

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:40:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-01-19. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:12Z : No. of bitstreams: 1 000870640.pdf: 389778 bytes, checksum: cd212a205ce28a849c1d7bb05719b213 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Periodontal disease (PD) is the most common disease of the oral cavity in dogs with an inflammatory character disease, chronic and infectious. With an excessive production of reactive oxygen species, oxidative stress occurs which is an imbalance between oxidants and antioxidants. Human saliva is considered the first line of defense against oxidative stress in periodontal diseases. Due to lack of studies in dogs on this issue, this study hypotheses were investigated that the similarity to what is described in humans, the DP in dogs cause systemic oxidative stress associated with activation of neutrophils and that saliva can be used to assess this oxidative stress. We selected 20 adult dogs of different breeds and sex, grouped according to the degree of injury (n-6 gingivitis, periodontitis light n-8 and advanced n-6). The control group was made up of the same 20 dogs, 30 days after periodontal treatment, all without any changes on physical examination, serum chemistry profile and complete blood count. To assess oxidative metabolism of circulating neutrophils was measured superoxide production by cytochemical test nitroblue tetrazolium reduction (NBT), and total oxidant concentration (TOC). The concentration of the tiobartbitúrico reactive species (TBARS) in plasma was used to estimate the lipid peroxidation. The local oxidative stress was evaluated by quantifying the TOC and concentration of the main antioxidant in saliva (uric acid, albumin and bilirubin). The systemic oxidative stress in PD has occurred regardless of the degree of injury and is characterized by TOC increase, NBT and TBARS. Changes in oxidative stress biomarkers measured in saliva were not significant and did not show correlation with the values obtained in plasma. Contrary to our hypothesis, the dog saliva analysis does not clearly expressed oxidative stress caused by PD

Orientador:Paulo César Ciarlini / Co-orientador:Mario Jefferson Quirino Louzada / Banca:Fabiano Antonio Cadioli / Banca:Aureo Evangelista Santana / Resumo:obesidade é uma doença nutricional cada vez mais comum em animais de companhia, cuja prevalência já atinge proporções epidêmicas. Este distúrbio tem sido associado com diversas enfermidades, afetando a qualidade de vida e reduzindo a longevidade dos animais. Em humanos já se sabe que a obesidade está fortemente associada ao aumento do estresse oxidativo. Foi realizada uma revisão bibliográfica sobre o estresse oxidativo em cães obesos, utilizando-se dois bancos de dados (Portal CAPES e PubMed), tendo sido localizado apenas dois estudo experimentais na espécie canina que não comprovam o estresse oxidativo já descrito em humanos. Neste sentido foi realizado estudo observacional transversal com controle para confirmar a nossa hiopótese de que a obesidade canina causa estresse oxidativo sitêmico. Para tal, um grupo controle constituído de 19 cães saudáveis (escore corporal de 4 a 5) foi comparado com um grupo constituído de 25 cães obesos (escore corporal de 8 e 9). De ambos os grupos foram mensurados os marcadores de estresse oxidativo plasmático (índice de estresse oxidativo (IEO), concentração oxidante total (TOC), capacidade antioxidante total, peroxidação lipídica, ácido úrico, albumina e gamaglutamil transferase). Foi possível comprovar que ocorre aumento do estresse oxidativo sistêmico na obesidade canina, caracterizado pelo aumento da peroxidação lipídica e do IEO associado a maior concentração de TOC / Abstract:Obesity is a nutritional disease becoming more common in small animals, whose prevalence has reached epidemic proportions. This disorder has been associated with various diseases, affecting the quality of life and reducing the longevity of animals. In humans it is known that obesity is strongly associated with increased oxidative stress. A literature review on oxidative stress in obese dogs was conducted using two databases (CAPES Portal and PubMed) and was located just two experimental study in dogs that did not prove oxidative stress been described in humans. In this sense was a cross-sectional observational study with control to confirm our hiopótese that canine obesity causes sitêmico oxidative stress. For such a control group consisting of 19 healthy dogs (body condition score of 4 to 5) was compared to a group consisting of 25 obese dogs (body condition score of 8 and 9). Of both groups were measured the plasma oxidative stress markers (oxidative stress index (OSI), total oxidant concentration (TOC), total antioxidant capacity, lipid peroxidation, uric acid, albumin and gamma glutamyl transferase). t was possible to prove that there is an increase of systemic oxidative stress in canine obesity, characterized by increased lipid peroxidation and IEO associated with a higher concentration of TOC / Mestre

Orientador: Fabio Erminio Mingato / Banca: Daniel Nicodemo / Banca: Cecilio Soares Filho / Resumo: O fígado possui grande importância no organismo animal, pois realiza a biotransformação de substâncias exógenas (xenobióticos) e por esse motivo, o tecido hepático acaba sendo alvo potencial de substâncias tóxicas. A bixina, proveniente das sementes de urucum (Bixa orellana L.) é um antioxidante que pode contribuir para a proteção das células e tecidos contra os efeitos deletérios dos radicais livres e também possui efeitos farmacológicos como antiinflamatório, antibacteriano e antitumoral. No presente trabalho foi avaliado o efeito protetor da bixina sobre os danos hepáticos provocados pelo tetracloreto de carbono (CCl ) em ratos. Os animais foram divididos em quatro 4 grupos de seis animais cada. A dose de CCl4 (0,125 mL/kg de peso corporal) foi injetada por via intraperitoneal (i.p.) e a bixina (5,0 mg/kg de peso corporal) foi administrada por gavagem por 7 dias antes da injeção do CCl . Após a 4 eutanásia, o sangue de cada animal foi colhido e foram analisadas a atividade sérica das enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). O fígado foi removido e após a preparação do homogenato foi analisada a atividade da enzima glutationa redutase (GR), os níveis de glutationa reduzida (GSH) e nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato na forma reduzida (NADPH), além da peroxidação dos lipídios de membrana e alterações histopatológicas. A bixina protegeu os danos hepáticos provocados pelo CCl4 conforme observado pela diminuição da liberação das enzimas ALT e AST. A bixina também protegeu o fígado contra os efeitos oxidantes do CCl , uma vez que impediu a diminuição da atividade da enzima 4 GR e dos níveis de GSH e NADPH. A peroxidação dos lipídios de membrana também foi inibida pela bixina. Além disso, o dano histopatológico do fígado foi significativamente reduzido pelo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract:The liver has a great importance in the animal body since it is responsible to the biotransformation of exogenous chemicals (xenobiotics), making the liver tissue a potential target for toxic substances. The carotenoid bixin from annatto seeds (Bixa orellana L.) is an antioxidant that can contribute to protecting cells and tissues against the deleterious effects of free radicals and also has pharmacological effects such as anti-inflammatory, antibacterial and antitumoral activities. In the present study we evaluated the protective effect of the bixin on liver damage caused by carbon tetrachloride (CCl ) in rats. 4 The animals were divided in four groups of six rats in each. The dose of CCl4 (0.125 mL kg-1 body wt.) was injected i.p. and bixin (5.0 mg kg-1 body wt.) was given by gavage 7 days before the CCl4 injection. After euthanasia, the blood of each animal was collected and the serum activities of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) were analyzed. The livers were removed and after preparation of the homogenate the activity of the enzyme glutathione reductase (GR), the levels of reduced glutathione (GSH) and NADPH, as well as the peroxidation of membrane lipids and histopathological changes were determined. Bixin reduced the liver damage caused by CCl4 as noted by the significant decrease of the release of the enzymes ALT and AST. Bixin also protected the liver against the oxidizing effects of CCl , since it 4 prevented the decrease in GR activity and levels of GSH and NADPH. The peroxidation of membrane lipids was also inhibited by bixin. Moreover, the histopathological damage of liver was also significantly reduced by bixin treatment. Therefore, we can conclude that the protective effect of bixin against... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo:A leishmaniose visceral (LV) canina é uma zoonose de grande importância epidemiológica. Seu amplo espectro de sinais clínicos dificultam o diagnóstico na rotina clínica e laboratorial, sendo necessário a utilização de técnicas mais específicas, como o qPCR, o qual possui grande sensibilidade e especificidade. A anemia é um sinal clínico muito comum nesta doença, sendo que sua causa ainda é muito discutida. O estresse oxidativo é caracterizado por desequilíbrio entre oxidantes e antioxidantes,sendo que esta alteração pode ser um dos fatores da presença de anemia em cães com LV. Considerando-se que a anemia seja causada pelo estresse oxidativo, propusemos investigar a hipótese de que alterações hematológicas, bioquímicas e sinais clínicos de cães com LV variam com a carga parasitária (CP). Para tal, foram avaliados marcadores de estresse oxidativo plasmático (albumina, ácido úrico, bilirrubina, capacidade antioxidante total-TAC, capacidade oxidante total-TOC, índice de estresse oxidativo TOC/TAC e espécies reativas ao ácido tiobarbitúrico-TBARS) e eritrocitário (TBARS em papa de hemácias). Para avaliação geral dos animais foram analisados perfil bioquímico e hemograma completo e os animais foram classificados com presença e ausência de sinais clínicos. A CP foi obtida através de coleta de pele, conjuntivas, sangue e papa de leucócito, a partir da quantificação dos tecidos foi calculada a CP total, através de análise de componentes principais. Os parâmetros hematológicos não se alteram conforme ocorre aumento da carga parasitária e não foi observado qualquer tipo de hemólise ou icterícia nas amostras coletadas. Ao contrário do perfil hematológico, os sinais clínicos e laboratoriais se alteram conforme ocorre aumento da carga parasitária. Conclui-ser que a anemia independe da CP e que a sua causa não está associada ao metabolismo oxidativo, peroxidação lipídica ou mecanismos hemolíticos. / Abstract:Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a zoonosis of great epidemiological relevance. Infected dogs usually present nonspecific clinical and laboratory alterations that hampers the diagnosis of the disease in routine screening, and the use of techniques with higher sensitivity and sensibility, such as the detection of the parasite by polymerase chain reaction (PCR), are often necessary. Among the nonspecific alterations, anemia is one of the most frequently found, but the mechanism underlying its occurrence is still under dispute. Oxidative stress, the imbalance between oxidants and antioxidants, has been recently incriminated as one of the possible triggers of anemia in CVL. Here, we investigated the putative relationships between parasite load and markers of oxidative stress and hematologic, biochemical and clinical alterations in dogs naturally infected with Leishmania spp. Markers of oxidative stress included albumin, uric acid, bilirubin, total antioxidant capacity (TAC), total oxidant capacity (TOC), oxidative stress index (TOC/TAC) and serum and packed red cells Thiobarbituric acid reactive substances (TBARS). Additional laboratory analysis included complete blood count (CBC) and biochemical profile. Observation of clinical alterations was scored as present or absent. Quantitative PCR (qPCR) of tissue samples of skin, conjunctiva, whole blood and packed white cells was used to estimate tissue-specific parasite load. In order to represent the total parasite load (i.e., the parasitism across different analyzed tissues), we applied a principal components analysis to the matrix of tissue-specific qPCR results to create a single synthetic variable that captures the information content present in the four different original variables. We found no significant associations between hematologic parameters and parasite load, and previously reported alterations such as sample hemolysis or icteric serum were not observed. However, significant differences / Orientador:Paulo César Ciarlini / Banca:Mirela Tinucci Costa / Banca:Caris Maroni Nunes / Mestre

Resumo:doença periodontal (DP) é a patologia mais comum da cavidade oral em cães. É uma enfermidade de caráter inflamátorio, crônico e infeccioso. Quando há um excesso de produção de espécies reativas de oxigênio, ocorre o estresse oxidativo que é um desequilíbrio entre oxidantes e antioxidantes. Em humanos a saliva é considerada a primeira linha de defesa contra o estresse oxidativo nas doenças periodontais. Devido a carência de estudos em cães nesse assunto, neste trabalho foram investigadas as hipóteses de que a semelhança ao que é descrito em humanos, a DP em cães causa estresse oxidativo sistêmico associado à ativação dos neutrófilos e que a saliva pode ser utilizada para avaliar este estresse oxidativo. Foram selecionados 20 cães adultos de diferentes raças e sexo, agrupados conforme o grau de lesão (gengivite n-6, periodontites leve n-8 e avançada n-6). O grupo controle foi constituído pelos mesmos 20 cães, 30 dias após o tratamento periodontal, todos sem alterações no exame físico, perfil bioquímico plasmático e hemograma. Para avaliar o metabolismo oxidativo dos neutrófilos circulantes foi quantificada a produção de superóxido pelo teste citoquímico de redução do tetrazólio nitroazul (NBT) e concentração de oxidante total (TOC). A concentração de espécies reativas ao tiobartbitúrico (TBARS) no plasma foi utilizada para estimar a peroxidação lipídica. O estresse oxidativo local foi avaliado quantificando-se a TOC e a concentração dos principais antioxidantes da saliva (ácido úrico, albumina e bilirrubina). O estresse oxidativo sistêmico na DP ocorreu independentemente do grau de lesão e foi caracterizado pelo aumento de TOC, NBT e TBARS. As alterações dos biomarcadores de estresse oxidativo mensurados na saliva não foram significantes e não apresentaram correlação com os valores obtidos no plasma. Contrariando nossa hipótese, a análise...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico / Abstract:Periodontal disease (PD) is the most common disease of the oral cavity in dogs with an inflammatory character disease, chronic and infectious. With an excessive production of reactive oxygen species, oxidative stress occurs which is an imbalance between oxidants and antioxidants. Human saliva is considered the first line of defense against oxidative stress in periodontal diseases. Due to lack of studies in dogs on this issue, this study hypotheses were investigated that the similarity to what is described in humans, the DP in dogs cause systemic oxidative stress associated with activation of neutrophils and that saliva can be used to assess this oxidative stress. We selected 20 adult dogs of different breeds and sex, grouped according to the degree of injury (n-6 gingivitis, periodontitis light n-8 and advanced n-6). The control group was made up of the same 20 dogs, 30 days after periodontal treatment, all without any changes on physical examination, serum chemistry profile and complete blood count. To assess oxidative metabolism of circulating neutrophils was measured superoxide production by cytochemical test nitroblue tetrazolium reduction (NBT), and total oxidant concentration (TOC). The concentration of the tiobartbitúrico reactive species (TBARS) in plasma was used to estimate the lipid peroxidation. The local oxidative stress was evaluated by quantifying the TOC and concentration of the main antioxidant in saliva (uric acid, albumin and bilirubin). The systemic oxidative stress in PD has occurred regardless of the degree of injury and is characterized by TOC increase, NBT and TBARS. Changes in oxidative stress biomarkers measured in saliva were not significant and did not show correlation with the values obtained in plasma. Contrary to our hypothesis, the dog saliva analysis does not clearly expressed oxidative stress caused by PD / Orientador:Paulo César Ciarlini / Banca:Suely Regina Mogami Bomfim / Banca:Ana Cláudia de Melo Stevanato Nakamune / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-11-12Bitstream added on 2014-06-13T19:39:55Z : No. of bitstreams: 1 moreira_pr_me_araca.pdf: 315047 bytes, checksum: 1a5a979a465e9cd8dca5be26006d8106 (MD5) / O fígado possui grande importância no organismo animal, pois realiza a biotransformação de substâncias exógenas (xenobióticos) e por esse motivo, o tecido hepático acaba sendo alvo potencial de substâncias tóxicas. A bixina, proveniente das sementes de urucum (Bixa orellana L.) é um antioxidante que pode contribuir para a proteção das células e tecidos contra os efeitos deletérios dos radicais livres e também possui efeitos farmacológicos como antiinflamatório, antibacteriano e antitumoral. No presente trabalho foi avaliado o efeito protetor da bixina sobre os danos hepáticos provocados pelo tetracloreto de carbono (CCl ) em ratos. Os animais foram divididos em quatro 4 grupos de seis animais cada. A dose de CCl4 (0,125 mL/kg de peso corporal) foi injetada por via intraperitoneal (i.p.) e a bixina (5,0 mg/kg de peso corporal) foi administrada por gavagem por 7 dias antes da injeção do CCl . Após a 4 eutanásia, o sangue de cada animal foi colhido e foram analisadas a atividade sérica das enzimas alanina aminotransferase (ALT) e aspartato aminotransferase (AST). O fígado foi removido e após a preparação do homogenato foi analisada a atividade da enzima glutationa redutase (GR), os níveis de glutationa reduzida (GSH) e nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato na forma reduzida (NADPH), além da peroxidação dos lipídios de membrana e alterações histopatológicas. A bixina protegeu os danos hepáticos provocados pelo CCl4 conforme observado pela diminuição da liberação das enzimas ALT e AST. A bixina também protegeu o fígado contra os efeitos oxidantes do CCl , uma vez que impediu a diminuição da atividade da enzima 4 GR e dos níveis de GSH e NADPH. A peroxidação dos lipídios de membrana também foi inibida pela bixina. Além disso, o dano histopatológico do fígado foi significativamente reduzido pelo... / The liver has a great importance in the animal body since it is responsible to the biotransformation of exogenous chemicals (xenobiotics), making the liver tissue a potential target for toxic substances. The carotenoid bixin from annatto seeds (Bixa orellana L.) is an antioxidant that can contribute to protecting cells and tissues against the deleterious effects of free radicals and also has pharmacological effects such as anti-inflammatory, antibacterial and antitumoral activities. In the present study we evaluated the protective effect of the bixin on liver damage caused by carbon tetrachloride (CCl ) in rats. 4 The animals were divided in four groups of six rats in each. The dose of CCl4 (0.125 mL kg-1 body wt.) was injected i.p. and bixin (5.0 mg kg-1 body wt.) was given by gavage 7 days before the CCl4 injection. After euthanasia, the blood of each animal was collected and the serum activities of alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) were analyzed. The livers were removed and after preparation of the homogenate the activity of the enzyme glutathione reductase (GR), the levels of reduced glutathione (GSH) and NADPH, as well as the peroxidation of membrane lipids and histopathological changes were determined. Bixin reduced the liver damage caused by CCl4 as noted by the significant decrease of the release of the enzymes ALT and AST. Bixin also protected the liver against the oxidizing effects of CCl , since it 4 prevented the decrease in GR activity and levels of GSH and NADPH. The peroxidation of membrane lipids was also inhibited by bixin. Moreover, the histopathological damage of liver was also significantly reduced by bixin treatment. Therefore, we can conclude that the protective effect of bixin against... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-09-20T14:04:18Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1414947 bytes, checksum: 6a4be3b6e22a467df00e66e4e680c4ed (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-20T14:04:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1414947 bytes, checksum: 6a4be3b6e22a467df00e66e4e680c4ed (MD5) Previous issue date: 2018-02-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Estudos anatômicos, fisiológicos e bioquímicos durante a germinação de sementes de Melanoxylon. brauna sob estresse térmico são fundamentais diante da possibilidade do aumento da temperatura global, da importância econômica da espécie e do pouco conhecimento referente àquelas áreas específicas.Nesse sentido, o presente trabalho tem por objetivos:caracterizar alterações bioquímicas e fisiológicas durante a germinação sob estresse térmico. Também foram avaliadas as alterações anatômicas, reação de Fenton. Avaliou-se a germinação nas temperaturas constantes de 25, 35 e 45°C e em sementes embebidas por 24, 48 e 72 h em 35 e 45°C e posteriormente transferidas para 25°C. A CE, produção de EROs e atividade enzimática foram avaliadas em sementes embebidas por 0, 24, 48 e 72 h em 25, 35 e 45°C. A resistência micropilar foi avaliada em sementes secas e embebidas por 24 h em água e solução de H 2 O 2 nas concentração de 20 e 40 μ m.Os experimentos foram conduzidos no delineamento inteiramente casualizado (DIC).Para a germinação e CE foram utilizadas 5 repetições com 20 sementes cada. Para a produção de EROs e atividade enzimática foram utilizadas cinco repetições de 50 mg de eixos embrionários ou 100 mg de micrópilas. A força de rompimento região micropilar também foi avaliada em 3 repetições com 10micrópilas cada.A embebição das sementes em 35°C com posterior transferência para 25°C favorece a germinação. Em 45°C ocorre maiores danosao sistema de membranas, maior acúmulo de H2O2 , comprometimento do sistema antioxidante e posterior morte das sementes. Após 16 h de embebição, foram observadas as primeiras alterações anatômicas na região micropilar e endosperma lateral. A presença de H2O2 e redução da força de ruptura da região micropilar indicam provável ocorrência da reação de Fenton. A temperatura influenciou a atividade das enzimas, -galactosidase, poligalacturonase (PG), pectina - -1,4 glicosidase e o estresse térmico não comprometeu esse sistema enzimático, porém comprometeu a germinação em 45°C. / Anatomical, physiological and biochemical studies during the germination of Melanoxylon brauna seeds under thermal stress are fundamental to the possibility of global temperature increase, the economic importance of the species and the lack of knowledge related to those specific areas. In this sense, the present work has as objectives: to quantify germination, electrical conductivity (EC), production of reactive oxygen species (ROS) and enzymatic activity during germination under thermal stress. The anatomical alterations, Fenton reaction (H2O2 levels and Fe and Cu ion contents) and resistance of the micropillary region of the seeds during imbibition were also evaluated. The germination was evaluated at constant temperatures of 25, 35 and 45°C and in seeds soaked for 24, 48 and 72 h at 35 and 45°C and subsequently transferred to 25°C. EC, ERO production and enzymatic activity were evaluated in seeds soaked in 0, 24, 48 and 72 h at 25, 35 and 45°C. The micropylar resistance was evaluated in dry seeds and soaked for 24 h in water and H2O2 solution at the concentration of 20 and 40 m. The experiments were conducted in a completely randomized design (DIC). For germination and CE, 5 replicates with 20 seeds each were used. For the production of EROs and enzymatic activity, five replicates of 50 mg of embryonic axes or 100 mg of micropiles were used. The force breaking micropillary region was also evaluated in 3 replicates with 10 micropiles each. The imbibition of the seeds at 35°C with subsequent transfer to 25°C favors the germination. At 45°C, there is greater damage to the membrane system, higher accumulation of H2O2 , impaired antioxidant system and subsequent seed death. After 16 h of imbibition, the first anatomical changes were observed in the micropillary region and lateral endosperm. The presence of H2O2 , Fe and Cu and reduction of the rupture force of the micropylar region indicate a probable occurrence of the Fenton reaction. The temperature influenced the activity of the enzymes, -galactosidase, polygalacturonase (PG), pectin methyl esterases (PME), pectin lyase (PL), total cellulases, -1,3 glycosidase and -1,4 glycosidase. Thermal stress did not compromise the enzymatic system, but compromised the germination in 45°C.

Orientador: Anibal Eugenio Vercesi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T17:46:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Inada_NataliaMayumi_D.pdf: 2015643 bytes, checksum: 46616bc6e9a94ab575e17060c6ed0645 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A ação das meso-porfirinas catiônica Fe(III)TMPyP e aniônica Fe(III)TPPS4 sobre a função mitocondrial e viabilidade de células de tumor de próstata LNCaP foi investigada. O tratamento das suspensões mitocondriais com 1 µM de Fe(III)TMPyP por 2 minutos e 45 segundos no escuro diminuiu o controle respiratório mitocondrial (C.R.) em 3%. A irradiação potencializou este efeito, induzindo uma queda no C.R. em 28%. A porfirina aniônica Fe(III)TPPS4, nas mesmas condições experimentais, não provocou efeito significativo algum. Ambas porfirinas aumentaram a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) na presença de Ca2+; o efeito de Fe(III)TMPyP foi significativamente maior. Esta porfirina catiônica, porém não a aniônica, promoveu o fenômeno de transição de permeabilidade mitocondrial (TPM), sensível à ciclosporina A (CsA). Além disso, Fe(III)TMPyP apresentou uma constante de associação (Kb) com mitocôndrias 11 vezes maior que Fe(III)TPPS4, provavelmente devido às interações eletroestáticas entre a porfirina catiônica e a membrana mitocondrial interna, carregada negativamente. Observou-se também que ambas porfirinas diminuíram a viabilidade de células tumorais de maneira dose-dependente, apresentando um IC50 de aproximadamente 15 µM, após 48 h de incubação no escuro. Tratando as células com a dose de 10 µM para cada porfirina e um tempo menor de exposição no escuro (1 h), observou-se efeito significativo após a irradiação das amostras. Nas condições experimentais testadas, a morte celular predominante foi a necrose (26% das células tratadas com a porfirina aniônica e 29%, com a catiônica). A apoptose ocorreu após irradiação, sendo o efeito da Fe(III)TMPyP duas vezes maior (14%) que o efeito da Fe(III)TPPS4 (7%). Ambas porfirinas aumentaram de maneira significativa a concentração intracelular do íon Ca2+ ([Ca2+]cit) após a irradiação. Tanto a necrose, como a apoptose foram mediadas pelo aumento da [Ca2+]cit, uma vez que ambas foram inibidas pelo quelante de Ca2+ citosólico BAPTA/AM. A CsA preveniu as mortes necrótica e apoptótica das células LNCaP tratadas e irradiadas na presença de ambos compostos / Abstract: The action of irradiated cationic Fe(III)TMPyP and anionic Fe(III)TPPS4 forms of mesoporphyrins on mitochondrial functions was investigated using experimental conditions that caused minimal effects on mitochondria in the dark. Treatment of mitochondria with 1 µM Fe(III)TMPyP for 2 min decreased the respiratory control by 3% in the dark and 28% after irradiation. Fe(III)TPPS4 (1 µM) had no significant effect on respiratory control under any of the above conditions. Both porphyrins increased mitochondrial production of reactive oxygen species in the presence of Ca2+; however, the effect of Fe(III)TMPyP was significantly stronger. Fe(III)TMPyP but not Fe(III)TPPS4 promoted cyclosporin A-sensitive mitochondrial permeability transition. It was also observed that the association constant of Fe(III)TMPyP with mitochondria was 11 times higher than Fe(III)TPPS4. In conclusion, the damage to isolated mitochondria induced by Fe(III)TMPyP under illumination was larger than by Fe(III)TPPS4, probably because its cationic charge favors association with the mitochondrial membrane. The citotoxic effect of both porphyrins, prior the irradiation and upon the cell viability were dose-dependent and the IC50 were approximatly 15 µM, after 48 hours of incubation. No significantly cytotoxic effect was observed when the tumor cells were treated with 10 µM for each porphyrin, in a time of incubation in the dark of one hour. This was significant only after the photoactivation of the samples. In these conditions, the irradiation of the tumor cells induced cell death both via necrose and apoptose. Cell death via necrose was higher for both porphyrins. Irradiation of both porphyrins significantly increased the cytosolic Ca2+ concentration ([Ca2+]cit) of the LNCaP cells, which mediated cell death, once BAPTA/AM (an intracellular Ca2+ chelator) protected against cell death. Mitochondrial permeability transition (MPT) was probably participating in these mechanisms since cyclosporin A prevented cell death / Doutorado / Biologia Estrutural, Celular, Molecular e do Desenvolvimento / Doutor em Fisiopatologia Medica

Orientador: Rogério Lopes Vieites / Banca: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: Marta Helena Fillet Spoto / Banca: Eliane Maria Ravasi S. Simionato / Banca: André José de Campos / Resumo: O cultivo da amora-preta (Rubus sp) vem despertando interesse dos fruticultores paulistas nos últimos anos devido ao seu alto potencial produtivo, sendo uma alternativa viável como fonte de renda. Os frutos possuem características nutricionais muito apreciadas nos dias de hoje além de se mostrarem muito versáteis do ponto de vista tecnológico. O presente trabalho foi dividido em 3 partes para maior compreensão e aprofundamento dos aspectos avaliados e objetivou caracterizar bromatologicamente e quanto ao conteúdo mineral os frutos de amora-preta colhidos em 3 diferentes estádios de maturação, bem como seu produto processado, a geleia; caracterizar a qualidade pós-colheita dos frutos em diferentes tempos de armazenamento sob refrigeração e das geleias; determinar os compostos com potencial antioxidante e sua estabilidade durante a elaboração e armazenamento das geleias e frutos, respectivamente. As avaliações foram realizadas na ocasião da colheita para o experimento 1 e também aos dias 3, 6, 9, 12 e 15 após a colheita para os demais experimentos a fim de avaliar a possível degradação dos nutrientes a antioxidantes. Ao final dos experimentos pode-se verificar que a amora-preta apresenta alto potencial para industrialização já que para a maioria dos compostos biotivos avaliados não houveram grandes alterações decorrentes do processamento. Esta característica faz com que os frutos de amoreira preta sejam ótima alternativa para o processamento / Abstract: The cultivation of blackberry (Rubus sp) has attracted the interest of fruit growers in São Paulo in recent years due to its high yield potential as a viable alternative source of income. The fruit has nutritional characteristics greatly appreciated these days and presents great versatility from a technological point of view. This study was divided into 3 parts for greater understanding of the aspects evaluated and aimed to characterize the bromatological composition and mineral content of the fruits harvested at 3 different stages of maturation and its processed product, the jelly; it also aimed to characterize the quality of post-harvest fruit at different times of storage under refrigeration and the qualities of the jellies as well; and it also aimed to determine the potential antioxidant compounds stability during preparation and storage of jelly and fruit, respectively. Evaluations were performed at the time of harvest for Experiment 1 and also on days 3, 6, 9, 12 and 15 after harvest for the other experiments in order to evaluate the possible degradation of the antioxidant nutrients. At the end of the experiments it was possible to conclude that the fruit has a high potential for industrialization since for most bioactive compounds evaluated there were no major changes resulting from the processing. This feature places the black mulberry fruit as a great alternative for processing. / Doutor