Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas / La Unidad de Práctica Profesional se realizó en el Departamento de Desarrollo Pharma y Departamento de Control de Calidad del Laboratorio Med Cell S.A., en el período comprendido entre Marzo y Septiembre de 2006. Se pudo conocer y participar en las actividades que realiza el Químico Farmacéutico en estas áreas y sus responsabilidades. Así, en el área de desarrollo se fabricaron lotes pilotos para estudios de estabilidad utilizando los equipos disponibles en el el laboratorio para este fin, control de calidad de estos productos, visita a procesos de fabricación en laboratorios maquiladores y manejo de la documentación relacionada; también se revisaron algunos aspectos del área regulatoria. En el área de control de calidad se manejaron los distintos y modernos equipos con los que cuenta el laboratorio y se realizaron diversos análisis a productos farmacéuticos, naturales y cosméticos. También se conoció en profundidad el funcionamiento y manejo del equipo de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detector UV. Paralelamente a estas actividades, se trabajó en un documento que diera las directrices para llevar a cabo la validación de una metodología analítica, debido a que el laboratorio no contaba con ningún procedimiento relacionado con este tema. Como la mayoría de las metodologías utilizadas en el laboratorio se realizan por HPLC, se optó por diseñar uno específico para éstas. Así, se redactó el Protocolo de Validación para Metodologías Analíticas por HPLC. En este informe se describe como se realizó el protocolo, la validación de la metodología de Losartán potásico comprimidos recubiertos y los resultados obtenidos

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El presente trabajo ha sido orientado al estudio y formulación de un protocolo para la determinación de los niveles plasmáticos de ácido micofenólico en pacientes pediátricos trasplantados renales. La cuantificación del ácido micofenólico fue hecha en el Servicio del Laboratorio Clínico del Hospital Luis Calvo Mackenna, a través de la técnica de EMIT (Enzime Multiplied Immunoassay Technique), utilizando como referencia la determinación por HPLC (High Performance Liquid Chromatography) realizada en el Laboratorio de Farmacocinética de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. El criterio adoptado en relación a las condiciones de toma de muestra para el fármaco se basó en la revisión bibliográfica de las características farmacocinéticas y formas de administración del fármaco y se estableció en consenso con todo el equipo de salud, que comprende al cuerpo Médico, Químico Farmacéutico y Enfermeras. Este estudio constituye una herramienta para crear un Servicio de Farmacocinética Clínica, que proporcione ayuda e información a la comunidad del hospital, con el fin de obtener un uso racional de los niveles plasmáticos y mejorar la relación costo/beneficio de las mediciones de las concentraciones plasmáticas de medicamentos. Para que la determinación de niveles de ácido micofenólico en el laboratorio de Bioquímica Central del Hospital tuviera validez, se revisaron las fichas clínicas de los pacientes y se diseñaron fichas adecuadas para un servicio de Farmacocinética clínica que recogerán datos sobre el paciente, cumplimiento y adherencia de la terapia, hora de última toma de dosis, hora de toma de muestra, entre otros

Unidad de Práctica Prolongada para optar al título de Químico Farmacéutico / En el siguiente informe se detalla el proceso de validación prospectivo de una metodología de análisis no farmacopeica de identificación y valoración por medio de la técnica de cromatografía liquida de alta eficiencia (HPLC) de un principio activo en una forma farmacéutica oral, sólida y de liberación inmediata fabricada por Laboratorio Synthon Chile ltda. Con el fin del cumplimiento de las normas GMP y exigencias de las diferentes instituciones sanitarias nacionales e internacionales (ISP, FDA, EMA, OMS), para el proceso de validación se generó un protocolo en el cual se detallaron los diferentes parámetros de desempeño a ser estudiados de acuerdo al propósito de la metodología y siguiendo las recomendaciones y los criterios de aceptación establecidos en diferentes guías (FDA, OMS, ICH). Los resultados obtenidos fueron presentados en un reporte de validación en acuerdo con las exigencias GMP. Estos resultados demostraron el cumplimiento con los criterios de aceptación y por lo tanto demostraron que la metodología empleada cumplió con el propósito para el cual está destinada y por consecuencia se encuentra formalmente validada.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El perfil farmacocinético de los adultos mayores sufre una serie de alteraciones debido a que experimentan cambios fisiológicos asociados al envejecimiento capaces de modificar la estructura y funcionamiento de los diferentes sistemas de su organismo. Dichos cambios, sumados a las co-morbilidades que pueden presentar estos pacientes al ser hospitalizados en unidades no críticas, condicionan la respuesta y éxito de las terapias farmacológicas con antimicrobianos, dado que pueden afectar el logro de un índice PK/PD óptimo. El objetivo de este estudio fue desarrollar y optimizar una metodología analítica mediante HPLC acoplado a un detector UV/Vis para cuantificar ertapenem en plasma humano, para posteriormente ser aplicado en la caracterización del perfil farmacocinético de este antibiótico en adultos mayores hospitalizados en unidades no críticas, a los que, además, se les debió determinar su composición corporal. Para llevar a cabo lo anterior se reclutó a pacientes hospitalizados en la Unidad Geriátrica de Agudos del Hospital Clínico de la Universidad de Chile, a los que se les realizaron mediciones antropométricas y se les extrajeron muestras de sangre que fueron almacenadas para su posterior análisis. Paralelamente se trabajó evaluando diferentes condiciones experimentales que influyeran en el desarrollo de la metodología analítica y que permitieran validarla según parámetros internacionales. La metodología analítica desarrollada utilizó una columna Waters Spherisorb® y una fase móvil ajustada a pH 2,4 compuesta por el 70% de buffer fosfato 10 mM y 30% de acetonitrilo. Además, la velocidad de flujo fue de 0,9 ml/min y la longitud de onda utilizada fue de 310 nm. A la metodología se le realizaron diferentes ensayos para validarla, pero no cumplió con el parámetro de exactitud y precisión inter-día, por lo que se descartó. Por otro lado, de los 3 pacientes reclutados, 2 correspondieron a hombres y la edad promedio de la muestra fue de 82,3 ± 8,0 años. El peso real se pudo determinar en solo 2 pacientes y dio un promedio de 59,2 ± 15,4 kg. A su vez, el peso y la estatura se estimaron con diferentes métodos, arrojando valores de 54,5 ± 8,1 kg y 49,8 ± 3,8 kg y de 1,65 ± 0,1 m y 1,52 ± 0,1 m, respectivamente. El IMC clasificó a la muestra como normal o con déficit de peso, dependiendo de los datos utilizados. En relación a la composición corporal y estado nutricional de cada paciente, se pudo determinar que ID#1 estaba en riesgo de desnutrición/desnutrición, ID#2 se hallaba normal e ID#3 se encontraba en desnutrición/normal / The pharmacokinetic profile of older adults suffers a series of alterations because they experience physiological changes associated with aging, capable of modifying the structure and functioning of the different systems of their organism. These changes, added to the co-morbidities that these patients can present when hospitalized in non-critical units, condition the response and success of pharmacological therapies with antimicrobials, since they can affect the achievement of an optimal PK/PD index. The objective of this study was to develop and optimize an analytical methodology using HPLC coupled to a UV/Vis detector to quantify ertapenem in human plasma, to be subsequently applied in the characterization of the pharmacokinetic profile of this antibiotic in older adults hospitalized in non-critical units, to which, in addition, their body composition should have been determined. To carry out the above, hospitalized patients were recruited in the Geriatric Acute Unit of the Hospital Clínico de la Universidad de Chile, who underwent anthropometric measurements and blood samples were taken and stored for later analysis. At the same time, we worked evaluating different experimental conditions that influenced the development of the analytical methodology and that allowed to validate it according to international parameters. The developed analytical methodology used a Waters Spherisorb® column and a mobile phase adjusted to pH 2.4 composed of 70% of 10 mM phosphate buffer and 30% of acetonitrile. In addition, the flow rate was 0.9 ml/min and the wavelength used was 310 nm. The methodology was subjected to different tests to validate it, but it did not comply with the parameter of accuracy and precision inter-day, so it was discarded. On the other hand, of the 3 patients recruited, 2 corresponded to men and the average age of the sample was 82.3 ± 8.0 years. Actual weight could be determined in only 2 patients and averaged 59.2 ± 15.4 kg. In turn, weight and height were estimated using different methods, yielding values of 54.5 ± 8.1 kg and 49.8 ± 3.8 kg and of 1.65 ± 0.1 m and 1.52 ± 0.1 m, respectively. The body mass index classified the sample as normal or with a weight deficit, depending on the data used. In relation to the body composition and nutritional status of each patient, it was determined that ID#1 was at risk of malnutrition/malnutrition, ID#2 was normal and ID#3 was malnutrition/normal

Tesis para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo y al Grado de Magíster en Ciencias Agropecuarias Mención Enología y Vitivinicultura / El uso de agentes estabilizantes del color es de alta relevancia en la producción de vinos. En el caso de la industria de los jugos, el color representa un importante parámetro sensorial. Sin embargo, limitada información existe acerca del efecto de estos productos comerciales sobre el color en jugos. En este estudio, se evaluó el efecto del uso de taninos enológicos y goma arábiga sobre las características químicas, físicas y polifenólicas de jugos concentrados de uva provenientes de dos fechas de cosecha. Los jugos fueron evaluados durante 5 meses, mediante técnicas espectrofotométricas y de Cromatografía Líquida de Alta Eficacia HPLC. En el caso de los jugos obtenidos con uvas cosechas a 15º Brix, la aplicación de taninos enológicos aumentó los valores de fenoles totales, antocianos totales e intensidad colorante, mientras que aquellos jugos tratados con goma arábiga presentaron mayores concentraciones de taninos totales. Por su parte, los jugos obtenidos con uvas cosechas a 18º Brix, mostraron mayores valores de compuestos fenólicos, intensidad colorante y capacidad antioxidante, independiente del agente estabilizante utilizado. Asimismo, el uso de tanino enológico y/o goma arábiga generó un aumento de la capacidad antioxidante de los jugos independiente de la fecha de cosecha.

En el ámbito del control de doping es importante poder detectar y cuantificar con un nivel de confianza adecuado los compuestos incluidos en la lista de sustancias prohibidas de la Agencia Mundial Antidopaje (WADA) que tienen definida una concentración de corte. Para la efedrina se ha establecido que una concentración superior a 10 µg/ml en orina se considera con resultado analítico adverso, por lo que es necesario tener una metodología analítica validada para su detección y cuantificación. La efedrina es una amina simpaticomimética, con acción estimulante sobre el sistema nervioso central, el sistema cardiovascular y el sistema respiratorio. Se excreta principalmente en forma inalterada en la orina dentro de las 24 horas siguientes a su administración. Las plantas de la especie Ephedra son la principal fuente natural de efedrina, de éstas la más conocida es el Ma Huang (Ephedra Sinica). A partir de extractos de Ephedra se elaboran suplementos alimenticios que son comercializados principalmente como supresores del apetito y como estimulantes para mejorar el desempeño de los deportistas. En este trabajo se presentan los resultados de la validación de una metodología para la detección y cuantificación de efedrina en la matriz biológica orina por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC). La metodología analítica desarrollada comprende la utilización de un detector de longitud de onda variable, una columna de fase reversa y como fase móvil una mezcla de tampón fosfato y metanol. Previo al análisis, las muestras son sometidas a una extracción líquido-líquido con solvente orgánico, para obtener un extracto lo suficientemente limpio que pueda ser analizado sin interferencias de la matriz orina. Para la validación de la metodología se realizaron pruebas de especificidad, linealidad, precisión, recuperación de la extracción, límite de detección, límite de cuantificación, estabilidad y la determinación de la incertidumbre de la medición.

Tesis para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo y al grado de Magíster en Enología y Vitivinicultura / La unión de distintos factores y propiedades de un alimento determinan la calidad y aceptabilidad del mismo frente al consumidor, siendo el color uno de los factores organolépticos más importantes a la hora de seleccionar y evaluar un alimento. El motivo por el cual el color es un índice de evaluación importante es porque éste sufre procesos de degradaciones después de un tiempo prolongado de almacenamiento y le sigue a menudo un deterioro desagradable del alimento que puede reducir la aceptación del consumidor (Araya,2006).

La pequeña y mediana empresa en Chile presentan diversas falencias, entre las cuales la falta de financiamiento es una de las principales, esto debido entre muchos factores, a la falta de información con la que cuentan las instituciones sobre estas empresas más pequeñas lo que los lleva a ofrecer tasas demasiado altas para el financiamiento. Es por lo anterior que existe una necesidad urgente de crear mecanismos para proveer capital a estas empresas de manera de generar oportunidades de crecimiento para ellas y por ende para el país. Las razones de estos beneficios se pueden encontrar en la presente investigación. Por lo tanto es un objetivo principal presentar una nueva forma de financiamiento para estas empresas, estos son los Bonos de Alto Rendimiento, los cuales han tenido resultados muy beneficiosos para economías extranjeras como Estados Unidos. La investigación se realiza a través del estudio de las condiciones de estos instrumentos en Estados Unidos, de la situación de las Pymes en Chile y de sus formas actuales de financiamiento y de las experiencias que han existido en el país en lo que se refiere a inversiones riesgosas. Como resultado de la investigación se puede encontrar que el desarrollo de este mercado de alto rendimiento puede ser viable siempre que este acompañado de las condiciones necesarias para su buen funcionamiento.

Tesis para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo y al Grado de Magister en Enología y Vitivinicultura / Las aflatoxinas son metabolitos secundarios de origen fúngico que poseen una alta toxicidad. Estas micotoxinas se han asociado con la presencia de hepatocarcinomas en humanos y se han catalogado como agentes inmunosupresores, genotóxicos, teratogénicos y hepato-tóxicos. Es por ello, que diversos organismos internacionales han fijado límites regulatorios en determinados alimentos. Así, la OIV definió una concentración máxima de AFLAs en el vino de 4 µg/kg. A pesar de lo anterior, existe limitada información acerca de la presencia de estos compuestos en vinos y de una metodología precisa, confiable y fácil de reproducir para su identificación y cuantificación en la matriz vínica. El objetivo de este estudio fue optimizar un método para la determinación y cuantificación de AFLAs G1, B1, G2 y B2 mediante la utilización de la técnica de HPLC-FL mediante el uso de columnas de inmunoafinidad en vinos blancos y tintos. Se observó que la metodología propuesta fue lineal en el rango de concentraciones de 1,5 a 24 ng/mL en vinos blancos y tintos fortificados, obteniendo valores de coeficiente de determinación entre 0.990 y 0.999. Además, parámetros de validación como porcentaje de recuperación (entre 91,6 y 103,7%) y estabilidad (% CV ente 2,41 y 4,36%) cumplieron con los requerimientos internacionales y nacionales señalados por la FDA y el ISP respectivamente. Asimismo, los límites de detección (LD) y límites de cuantificación (LC) obtenidos, permiten detectar AFLAs por debajo del límite regulatorio establecido por la OIV. Finalmente, en las 48 muestras de vinos analizadas no se detectó ninguna de las AFLAs. / Aflatoxins are considered one of the most important toxins worldwide, due to its wellknown and documented toxicity. AFB1 is classified as a human carcinogen (liver), also they are catalogued as mutagenic, immunosuppressive, teratogenic and might cause liver diseases. Many international organizations have set legal limits to the acceptable levels of AFLAs in human food. The office of vine and wine (OIV) has set a maximum level of 4 µg/Kg in wine Despite what is been said, there is not enough information regarding the presence of AFLAs in wine, also there is not a method that is accurate and easily reproducible to its determination and quantification on the wine matrix. The main objective of this research was to improve a method capable of determination and quantification of AFLAs G1, B1, G2, and B2 in white and red wine. The proposed method is based on the use on immunoaffinity columns and HPLC with fluorescence detector. Determinations performed using this method produced a high correlation coefficients (all above 0.995), showing linearity on the range of 1,5 to 24 ng/mL on whites and red spiked wines. Parameters as recovery rate (91,6-103,7%) and stability (%CV 2,41-4,36%) were within the ranges allowed by the FDA and ISP. The Limit of detection (LOD) and the limit of quantification (LOQ) obtained were under the maximum level set it by the OIV. 48 wines samples were analyzed; none of the AFLAs was detected.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero Agrónomo. / En el presente estudio, se utilizaron plantas de la variedad Cabernet franc sobre cinco portainjertos (420A, P1103, R110, SO4 y 3309) y un control como Pie Franco para determinar los efectos que puedan ejercer éstos sobre las características químicas, ya sean fenoles, antocianos y taninos totales, además del perfil antociánico por HPLC-DAD en vinos, así como fenoles totales, antocianos y taninos en hollejos, y fenoles totales y taninos en semillas; y sobre otras características químicas, como pH y acidez volátil en vinos, y sólidos solubles, pH y acidez total en la pulpa de las bayas. Este estudio se realizó con uvas y vinos de la viña Caliboro, ubicada en el Valle del Maule, Chile, durante la temporada 2013. Se pudo observar que en cada uno de los tratamientos hubo un efecto provocado por los portainjertos, pero no relacionados directamente en los resultados de uvas y vinos, ya que en algunos casos el portainjerto 420A presentó los mayores valores en los parámetros químicos como fenoles, taninos y antocianos totales en los vinos, a diferencia de lo que ocurre con los hollejos, donde fueron los menores, exceptuando los valores de taninos totales. Los análisis realizados permitieron observar que cada portainjerto tuvo influencia de forma diferenciada sobre los parámetros tanto físicos como químicos de hollejos, semillas, pulpa y vinos, provocados por posibles efectos sobre la maduración de la baya, asociado a la integridad de la membrana celular o pared celular proveniente de cada uno de los tratamientos, lo que generó mayores o menores extracciones de compuestos durante la vinificación. / In the present study, Cabernet Franc vines grafted on five rootstocks (420A, P1103, R110, SO4 and 3309) and a control as ungrafted vines were used in order to know and compare their effects on chemical parameters such as total phenols, anthocyanins and tannins, anthocyanins profile by HPLC-DAD in wines, total phenols, anthocyanins and tannins in grape skins, and total phenols and tannins in seeds. Besides, chemical characteristics such as pH and volatile acidity in wine, and soluble solids, pH and total acidity in the pulp of the berries were studied. This study was conducted with grapes and wines from Caliboro vineyard, located in the Maule Valley, Chile, during the 2013 season. It could be seen that in each of the observed treatment was an induced rootstocks effect, but not directly related results between grapes and wines were observed. In some cases the rootstock 420A has the highest values in the chemical parameters (phenols, tannins and total anthocyanins) in wines, in contrary happens with the skins, which were lower, except the values of total tannins. The analyzes revealed that, each rootstock was differentially influence on both physical and chemical skins, seeds, pulp and wine parameters, caused by possible effects on berry´s ripening, associated with the integrity of the cell membrane or wall cell from each of the treatments, which generated higher or lower extractions of compounds during vinification.