Submitted by Amanda Silva (amanda.osilva2@ufpe.br) on 2015-03-12T11:55:14Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Amália Cristine Medeiros Ferreira.pdf: 1292292 bytes, checksum: cf06788df2c672bca8f740e4286d5815 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-12T11:55:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Amália Cristine Medeiros Ferreira.pdf: 1292292 bytes, checksum: cf06788df2c672bca8f740e4286d5815 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / CNPq / A α-amilase é uma endocarboidrase que atua na hidrólise de ligações glicosídicas α(1→4) presentes em polissacarídeos como o amido e glicogênio, gerando como produtos oligossacarídeos, dextrinas e maltose. Esta enzima corresponde à segunda classe de enzimas mais utilizadas na indústria, apresentando diversas aplicações biotecnológicas, principalmente nas indústrias alimentícia e de detergentes. A α-amilase é encontrada em diversos organismos, e pode ser obtida através de bactérias, fungos e tecidos animais e vegetais. Com o intuito de reduzir o impacto causado pelo avanço da indústria pesqueira, essas e outras classes de enzimas vêm sendo extraídas através do reaproveitamento dos resíduos pesqueiros. Neste trabalho, α-amilases foram obtidas através dos cecos pilóricos e intestinos do tambaqui, Colossoma macropomum, caracterizadas e avaliadas quanto ao seu uso como aditivo de limpeza em detergentes comerciais. Para isso, o extrato bruto obtido foi submetido a fracionamento salino utilizando sulfato de amônio, a fração 30-60% apresentou maior atividade, foi em seguida dialisada e aplicada a uma coluna de cromatografia p-aminobenzamidine-agarose (Sigma®). Após esse processo de purificação, foram realizados zimogramas e eletroforese SDS-PAGE, os resultados obtidos sugerem uma purificação parcial, e presença de isoformas. As α-amilases apresentaram atividade ótima no pH 7.0 e 8.5, respectivamente para AMY-1 (intestinos) e AMY-2 (cecos pilóricos). Foram termoestáveis durante 30 minutos a 40°C, e apresentando temperatura ótima de 40 e 45°C, respectivamente. As α-amilases foram fortemente inibidas pelos íons Hg+3 e Cu+2. Quanto ao seu uso como aditivo de detergentes, as α-amilases extraídas do tambaqui, foram significativamente estáveis durante incubação de 60 minutos com agente oxidante (H2O2 15%), surfactantes coleato de sódio, tween 20, tween 80 e SDS, sendo também compatíveis e estáveis com todas as marcas de sabão utilizadas neste trabalho. Estes resultados sugerem que estas enzimas possuem potencial aplicação na indústria de detergentes, podendo ser utilizadas como aditivo de limpeza. Adicionalmente, pode-se concluir que o reaproveitamento dos resíduos do tambaqui corresponde a uma fonte inovadora de α-amilase com alta atividade e aplicabilidade industrial.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:55:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo9634_1.pdf: 1724275 bytes, checksum: d4312579b65180a327243bc502d0715f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Nos últimos anos, a aquicultura tem apresentado um rápido desenvolvimento, sendo a carcinicultura um dos segmentos mais lucrativos e crescentes. Apesar do progresso dessa atividade econômica, o custo com a alimentação dos animais ainda representa um dos principais problemas para os produtores. Com isso, a substituição da farinha de peixe, ingrediente mais caro da dieta dos camarões, por fontes protéicas alternativas tem sido cada vez mais frequente. Desta forma, objetivou-se avaliar o efeito da substituição da farinha de peixe por concentrado protéico de soja (SPC) nos níveis de 0% (C), 30% (S30), 60% (S60) e 100% (S100) sobre o desempenho das enzimas digestivas do Litopenaeus vannamei. Para tanto, espécimes com 2,02±0,51g foram submetidos às dietas experimentais ao longo de dez semanas. Após esse período, foi realizada a biometria dos animais. Hepatopâncreas de quinze camarões de cada tratamento foram coletados, homogeneizados em tampão Tris-HCl 10mM, pH 8,0 com adição de NaCl 15mM e centrifugados para obtenção dos extratos enzimáticos. Para a análise das enzimas digestivas presentes nos extratos enzimáticos realizou-se ensaios in vitro na presença dos substratos de cadeia longa (azocaseína 1% e amido 2%), p-nitroanilide (BApNA, SApNA e Leu-p-Nan) e &#946;-naphthylamide (alanina, arginina, leucina, tirosina, serina, glicina, isoleucina e histidina). Além disso, foram realizados SDS-PAGE e zimogramas de atividade proteolítica e amilolítica. Dentre os grupos experimentais o S100 apresentou maior ação enzimática quando empregado os substratos azocaseína 1% (1,18±0,01 U.mg-1) e amido 2% (5,04±0,33 U.mg-1) para a determinação da atividade proteolítica e amilolítica total, respectivamente. Maiores atividades de enzimas quimotripsina (13,78±1,61 U.mg-1) e leucino aminopeptidase (0,45±0,03 U.mg-1) utilizando os respectivos substratos SApNA e Leu-p-Nan foram observadas para o grupo controle (C). Enquanto que a mais elevada atividade tríptica (13,13±0,53 U.mg-1), usando BApNA como substrato, foi constatada para o tratamento S30. Entre os substratos &#946;-naphthylamide analisados, verificou-se valores mais altos de atividade aminopeptídica para arginina e alanina em todos os tratamentos, principalmente no S30 que também obteve maior atividade na presença da glicina (1,05±0,08 U.mg-1). Notou-se que para a serina, a atividade das aminopeptidases sofreu uma redução gradativa à medida que aumentou o nível de SPC na dieta dos camarões. O tratamento S60 apresentou maior atividade aminopeptídica para isoleucina (0,69±0,02 U.mg-1) e histidina (0,85±0,04 U.mg-1). Em relação à leucina e tirosina, a atuação das aminopeptidases mostrou-se indiferente estatisticamente às variações dietárias. De acordo com o perfil eletroforético dos extratos enzimáticos através de SDS-PAGE, foram observadas vinte e seis bandas protéicas, compreendidas entre 6,9 e 198,8 KDa, para todos os tratamentos. O zimograma de protease exibiu dois perfis semelhantes, um com dezoito (C e S30) e outro com doze bandas proteolíticas (S60 e S100). Enquanto que o zimograma de amilase revelou cinco bandas com atividade amilolítica para todos os tratamentos. A análise do ganho de peso corporal médio dos camarões cultivados mostrou valor mais elevado com o uso da dieta S30 (8,48±1,03 g), entretanto não foram evidenciadas diferenças significativas (P<0,05) entre os tratamentos. Os resultados expostos concluíram que a substituição da farinha de peixe por SPC em 30, 60 e 100% nas dietas dos camarões cultivados proporcionou um efeito positivo na performance dos animais. Esses resultados fornecem informações importantes quanto ao potencial do camarão-branco (L. vannamei) em utilizar formulações de alimentos alternativos com baixos níveis de fontes de proteína animal

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-20T15:18:41Z No. of bitstreams: 2 Dissertação_Michel N. . L. Chamy.pdf: 2430038 bytes, checksum: bc50e942903b21244ca7ac171c9bdf42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-20T15:18:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação_Michel N. . L. Chamy.pdf: 2430038 bytes, checksum: bc50e942903b21244ca7ac171c9bdf42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-20T15:18:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação_Michel N. . L. Chamy.pdf: 2430038 bytes, checksum: bc50e942903b21244ca7ac171c9bdf42 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / The mutualist relationship between the attines and microorganisms, although much studied, has not yet been fully elucidated. What is known is that the ants of the Attini tribe contain at least four associated microorganisms and several other parasites. Considering that microbial enzymes are currently the most used in industrial and biotechnological processes, the present work has the objective of identifying fungi associated with cutter ants Atta sexdens producing enzymes of biotechnological interest, aiming to evaluate the extracellular production of these biomolecules with catalytic activity. Cutting ants were collected in CAPMEDSOL / Coari-AM. Twenty - nine fungi were isolated and, after enzymatic screening, the most promising fungi submitted to morphological and molecular analyzes. The most expressive fungi were: Aspergillus zonatus - I = 4,4 (amylase), Aspergillus aculeatus - I = 4,8 (lipase), Rhizomucor variabilis - I = 5,33 (cellulase) and Penicillium citrinum - I = 5 , 46 (protease). After sorting, the best protease producer was subjected to quantification and enzymatic characterization using azocasein as the substrate. The crude enzymatic extract of the fungus Penicillium citrinum presented better enzymatic activity at neutral pH (7.0) with a temperature of 40 ° C, with catalytic activity equivalent to 326 U / mL. The microbial growth curve showed that the ideal fermentation time was 72 h. / A relação mutualista entre as attines e micro-organismos apesar de muito estudada ainda não está completamente elucidada. O que se sabe é que as formigas da tribo Attini contêm pelo menos quatro micro-organismos associados e vários outros parasitas. Tendo em vista que, atualmente as enzimas de origem microbiana são as mais utilizadas em processos industriais e biotecnológicos, o presente trabalho tem por objetivo identificar fungos associados as formigas cortadeiras Atta sexdens produtores de enzimas de interesse biotecnológico, visando avaliar a produção extracelular dessas biomoléculas com atividade catalítica. As formigas cortadeiras foram coletadas no CAPMEDSOL/Coari-AM. Foram isolados 29 fungos e após triagem enzimática, os fungos mais promissores submetidos a analises morfologias e moleculares. Os fungos com resultados mais expressivos foram: Aspergillus zonatus – I=4,4 (amilase), Aspergillus aculeatus – I=4,8 (lipase), Rhizomucor variabilis – I=5,33 (celulase) e Penicillium citrinum – I=5,46 (protease). Após a triagem, o melhor produtor de proteases foi submetido a quantificação e caracterização enzimática usando como substrato a azocaseína. O extrato enzimático bruto do fungo Penicillium citrinum apresentou melhor atividade enzimática em pH neutro (7,0) com temperatura de 40°C, com atividade catalítica equivalente a 326 U/mL. A curva de crescimento microbiana mostrou que o tempo ideal de fermentação foi 72 h.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-08-30Bitstream added on 2014-06-13T20:41:03Z : No. of bitstreams: 1 sanine_ms_dr_botib.pdf: 533764 bytes, checksum: 2237b6aa848d3e17a41a6984c2761484 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Para o estabelecimento de espécies nativas da caatinga, independente de sua finalidade, sendo econômica ou ecológica, é necessário o conhecimento prévio de suas características fisiológicas e suas exigências ambientais. Diante disso, o presente trabalho teve como objetivos: a) levantar as principais utilizações populares de mororó (Bauhinia cheilantha) e trabalhos relacionados à fisiologia e armazenamento de suas sementes; b) obter informações sobre o efeito da superação de dormência e da temperatura na porcentagem e velocidade de germinação de mororó, neste experimento as sementes foram submetidas a escarificação pela imersão em ácido sulfúrico p.a durante diferentes períodos (0, 5, 10, 15, 30 e 45 minutos) e temperaturas de germinação (20, 25, 30 e 35ºC); c) verificar a influência das condições e períodos ideais de armazenamento de sementes de mororó, estas foram submetidas a duas condições de ambiente e câmara fria durante diferentes períodos (0, 3, 6, 9 e 12 meses) e ao tratamento pela imersão em acido sulfúrico p.a., tendo como testemunha sementes intactas. Foram determinadas curvas de absorção de água, o número de sementes germinadas, IVG, além dos teores de açúcares solúveis totais e a atividade da amilase em ambas condições, nos cinco períodos de armazenamento. O levantamento bibliográfico evidenciou que o mororó (B. cheilantha) é muito utilizado como forrageira na época de seca e de grande importância para os produtores na caatinga, porém não existem informações sobre a germinação e armazenamento de suas sementes. Foi determinado que o armazenamento das sementes em ambiente é o mais adequado para manutenção do potencial germinativo. A escarificação química e a temperatura de 25ºC são condições adequadas para se obter sucesso na germinação desta espécie. / In order to establish caatinga native species, with economical or ecological purpose, it s necessary the previous knowledge of their physiological characteristics and environmental requirements. In face of this, the present research aimed at: a) to search the main popular uses of mororó (Bauhinia cheilantha) and researches related to physiology and storage of their seeds; b) to get information about the effect of dormancy break and temperature in the mororó germination s percentage and speed. In this experiment, seeds were submitted to scarification through immersion in p.a. sulphuric acid at several germination periods (0, 5, 10, 15, 30 and 45 minutes) and temperatures (20, 25, 30 and 35ºC); c) to verify the influence of ideal conditions and periods of mororó seed storage, which were submitted to two conditions of environment and cold chamber at several periods (0, 3, 6, 9 and 12 months) and treatment by immersion in p.a. sulphuric acid, with intact seeds as control. It were determined water uptake curves, number of germinated seeds, GSI, besides total soluble sugar levels and amylase activity in both conditions, at five storage periods. The bibliographic research made evident that mororó (B. cheilantha) has been too used as forage in the dry grow season and it is very important for producers in caatinga. However, there isn t information about germination and storage of their seeds. It was determined that seed storage in environment is the most suitable for germinative potential maintenance. Chemical scarification and temperature at 25°C are suitable conditions for getting success in the germination of this species.

Submitted by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-04-20T13:22:20Z No. of bitstreams: 1 CarolinedeAndradeBezerraTese2013.pdf: 3627255 bytes, checksum: 986d1d31944191fff8eaee68ee8ef653 (MD5) / Approved for entry into archive by Sara Ribeiro (sara.ribeiro@ucb.br) on 2017-04-20T13:22:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 CarolinedeAndradeBezerraTese2013.pdf: 3627255 bytes, checksum: 986d1d31944191fff8eaee68ee8ef653 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-20T13:22:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CarolinedeAndradeBezerraTese2013.pdf: 3627255 bytes, checksum: 986d1d31944191fff8eaee68ee8ef653 (MD5) Previous issue date: 2013-12-18 / Coffee is in international and Brazilian economical scenery as the second most important natural commodity. Despite that, coffee crops suffer great damage due to the coleopteran coffee borer (Hypothenemus hampei) attack leading to around US$ 500 million loss. In order to control the coffee borer, one strategy is the inhibition of the insect digestive enzyme ??-amylase by Phaseolus vulgaris amylase inhibitor 1 (??AI1). In this context, the research group of Plant-pest Molecular Interaction Laboratory developed GM coffee (Coffea arabica) plants expressing the P. vulgaris ??AI1 gene. This is a promising event to be used in coffee borer control by inhibiting starch insect digestion. However, releasing a GM crop for commercialization and human consumption is possible only after assessing food and environmental safety status, based on international and national procedures. This work is divided in two chapters. In the first chapter is presented the isolation of an amylase cDNA from H. hampei, designated AmyHha. The highest transcript levels of this amylase coincide with the feeding stages of insect, the second instar and adult stage. The Southern blot analysis showed the presence of only one copy of the AmyHha in the H. hampei genome. Finally, was carried out the construction of a structural model based on the AmyHha predicted protein sequence. In the second chapter, food safety of GM coffee crops expressing P. vulgaris ???-AI1 was evaluated. First, the evaluation of allergenic potential of GM coffee grains expressing ???-AI1 and the study of hemolytic effect and thermostability using coffee grains suggest absence of feeding risks concerning cytotoxic effects and inhibition of ???-AI1 after heat treatment. Otherwise, in vitro resistance to digestibility and in silico analysis suggest an allergenic risk of GM coffee grains due to ???-AI1 expression. Thus more investigation must be carried out in order to clarify allergenicity risks and in vivo consequences of this GM coffee grain consumption. / O caf?? destaca-se no cen??rio econ??mico nacional e internacional como a segunda maior ???commodity??? natural. No entanto, a cultura cafeeira apresenta grandes perdas monet??rias em torno de US$ 500 milh??es por ano devido ao ataque da broca-do-caf?? (Hypothenemus hampei). Uma estrat??gia para o controle do H. hampei ?? a inibi????o da enzima digestiva ???-amilase deste inseto pelo inibidor de ???-amilase 1 (???-AI1) de Phaseolus vulgaris. Assim, o grupo de pesquisa do Laborat??rio de Intera????o Molecular Planta-Praga desenvolveu plantas de caf?? Coffea arabica geneticamente modificadas (GM) expressando o gene para o ???-AI1 de P. vulgaris. Entretanto, a libera????o de plantas GM para comercializa????o e consumo humano s?? ?? poss??vel ap??s avalia????es de seguran??a alimentar e ambiental. Esta tese ?? dividida em dois cap??tulos. No primeiro cap??tulo ?? apresentado o isolamento de um cDNA de uma amilase de H. hampei ??? AmyHha. Os maiores n??veis de transcritos desta amilase coincide com as fases de alimenta????o do inseto, o segundo instar larval e a fase adulta. A an??lise por Southern blot demonstrou a presen??a de apenas uma c??pia de AmyHha no genoma do inseto, por fim realizou-se uma constru????o do modelo estrutural com base na sequencia proteica predita de AmyHha. No segundo cap??tulo que trata da avalia????o de seguran??a alimentar de plantas C. arabica GM expressando o inibidor de ???-AI1 de P. vulgaris, o estudo de efeito hemol??tico e termoestabilidade com os gr??os de caf?? GM sugerem a aus??ncia de risco alimentar quanto aos efeitos citot??xicos e inibi????o pelo ???-AI1 ap??s tratamento t??rmico. J?? a resist??ncia ?? digestibilidade in vitro e as an??lises in silico sugerem um potencial risco alerg??nico dos gr??os de caf?? GM devido ?? express??o do ???-AI1. Entretanto, mais investiga????es devem ser realizadas para maiores esclarecimentos quanto ao risco de alergenicidade dos gr??os de caf?? GM expressando ???-AI1 e as consequ??ncias de seu consumo in vivo.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2008. / Submitted by Jaqueline Oliveira (jaqueoliveiram@gmail.com) on 2008-11-20T18:39:27Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_ EvertonMacedoSilva.pdf: 1736502 bytes, checksum: 0be5a2d852e64d2c266dca5f1edb4431 (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-02-05T17:17:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_ EvertonMacedoSilva.pdf: 1736502 bytes, checksum: 0be5a2d852e64d2c266dca5f1edb4431 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-02-05T17:17:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_ EvertonMacedoSilva.pdf: 1736502 bytes, checksum: 0be5a2d852e64d2c266dca5f1edb4431 (MD5) / As α-amilases são enzimas digestivas amplamente distribuídas em microrganimos, plantas e animais, que catalisam a hidrólise de ligações glicosídicas α-1,4 e atuam no metabolismo de carboidratos. A inibição de α-amilases pode ser aplicada no controle de insetos-praga dependentes de dieta rica em amido para obtenção de energia, reduzindo a quantidade de nutrientes para evitar seu desenvolvimento. Essa ação permite o uso desses inibidores como bioinseticidas. A inibição da captação de carboidratos na saúde humana pode ser uma alternativa terapêutica no controle glicêmico, reduzindo picos de glicose pós-prandial no tratamento de doenças crônicas, tais como diabetes, obesidade e hiperlipidemia. Este projeto propõe a prospecção de moléculas ativas sobre as α- amilases. Nesse contexto, as plantas são fontes ricas em compostos que possam ser estudados. Assim, o potencial biológico do Banco de Extratos de Plantas do Bioma Cerrado, do Laboratório de Farmacognosia da Universidade de Brasília, foi avaliado sobre α-amilases de Acanthoscelides obtectus, Zabrotes subfasciatus e α-amilase salivar humana. Foram testados cento e oitenta e cinco extratos vegetais hexânicos, diclorometânicos, etanólicos e hidroetanólicos pertencentes a vinte e quatro espécies de dez famílias. O extrato hidroetanólico da casca do caule de Kielmeyera coriacea foi selecionado para estudo químico-biológico devido ao seu forte perfil inibitório, com IC50 110,00 µg.mL-1 e 272,12 µg.mL-1 sobre α-amilases de Z. subfasciatus e de A. obtectus, respectivamente. O extrato apresentou 97,09% de inibição sobre a isoforma humana a 125 µg.mL-1. A parttição líquido-líquido forneceu duas fazses com alto potencial inibitório, a fase 1, precipitado metanol/hexano, que inibiu 96,35%, e a fase 5, metanol/água, que apresentou 99,35% de inibição a 125 µg.mL-1. O fracionamento químico da fase 1 em coluna cromatográfica aberta de sephadex LH-20 permitiu a obtenção de 11 grupos. Dentre esses, os mais ativos sobre α-amilase humana foram o grupo 10 (95,24%) e o grupo 11 (99,00%). O conteúdo de fenóis totais e taninos foi analisado para o extrato bruto, fases e grupos ativos. A fase 1 demonstrou um forte teor de compostos fenólicos, com 1 mg.mL-1, sendo 53,56% de taninos e a fase 5 apresentou 0,95 mg.mL-1 de polifenóis, dos quais 35,96% são taninos. O grupo 11 mostrou 81,03% de constituintes taninos e inibiu 82% da α-amilase salivar humana a apenas 50 µg.mL-1. A avaliação de extratos e taninos sobre α-amilases demonstraram atividade promissora na inibição de captação de carboidratos, representando uma alternativa para o controle do diabetes e obesidade, assim como um potencial bem interessante na inibição de α- amilases de insetos. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / α-amylases are digestive enzymes widely distributed in microrganims, plants and animals, that catalyze hidrolysis of α-1,4 glicosidic bonds and act in carbohydrate metabolism. The inhibition of α-amylases can be applied on control of insect pests that depends on starch-rich diet to energy production, reducing the amount of nutrients to avoid its development. This action allow the use of these inhibitors like bio-insecticides. The inhibition of carbohydrate uptake in human health could be an alternative therapeutic on glicemic control, reducing post-prandial glucose peaks in chronic diseases treatment, such as diabetes, obesity an hyperlipidaemia. This project purposes the prospection of active molecules. In this context, plants are rich sources of compounds that could be studied. Then, the biologic potential of Cerrado Biome Plant Extract Bank, of University of Brasilia Pharmacognosy Laboratory, was evaluated on Acanthoscelides obtectus α-amylases, Zabrotes subfasciatus α-amylases and human saliva α-amylase. One hundred eighty-five hexanic, dichlorometanic, ethanolic and hidro-ethanolic extracts belonging to twenty-four species from ten families. The hidroethanolic bark stem extract of Kielmeyera coriacea was selected to chemical-biological study because of its strong inhibitory profile, with IC50 110,00 µg.mL-1 and 272,12 µg.mL-1 towards Z. subfasciatus and A. obtectus α-amylases, respectively. The extract presented 97,09% of inhibition of human isoform at 125 µg.mL-1. The liquid-liquid partition yielded two phases with a great inhibitory potential, phase 1, methanol/hexan precipitated, that inhibited 96,35%, and phase 5, methanol/water, that presented 99,35% of inhibition at 125 µg.mL-1. The chemical frationation of fase 1 in open chromatographic sephadex LH-20 column alowed the separation of 11 groups. Among them, the most active on human α-amylase were group 10 (95,24%) and group 11 (99,00%). The content of total phenols and tannins was analysed to crude extract, phases and active groups. Phase 1 demonstrated a high teor of phenolic compounds, with 1 mg.mL-1, including 53,56% of tannins and phase 5 showed 0,95 mg.mL-1 of polyphenols content, in wich 35,96% are tannins. Group 11 showed 81,03% of tannins content which inhibited 82% of human saliva α-amylase at only 50 µg.mL-1. The evaluation of extracts and tannins on α-amylases demonstrated a promising activity in carbohydrate uptake inhibition, representing a alternative to control diabetes and obesity, as well as a really interesting potential to insects α-amylases inhibition.</p>

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandarego@gmail.com) on 2017-10-25T14:07:55Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Pamera da Silva Santos.pdf: 1687170 bytes, checksum: 2f932e7e6cb080840bc890e5f6cb51aa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-25T14:07:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_ICS_ Pamera da Silva Santos.pdf: 1687170 bytes, checksum: 2f932e7e6cb080840bc890e5f6cb51aa (MD5) / CNPQ;FAPESB / A utilização de resíduos agroindustriais para obtenção de bioprodutos tornou-se uma prática cada vez mais valorizada, uma vez que além de agregar valor a uma matéria–prima subutilizada, também colabora com a prevenção de problemas ambientais associados à disposição dos mesmos no meio ambiente. A manipueira, resíduo líquido extraído da mandioca quando ela é prensada no processo de fabricação da farinha e altamente tóxico por conter alta concentração de ácido cianídrico em sua composição, pode ser aproveitada como matéria-prima amilácea para a obtenção de etanol de 2ª geração. Na produção de etanol a partir de manipueira é necessário o processo de hidrólise e sacarificação do amido presente, pois este carboidrato não é diretamente fermentável pela levedura necessitando de uma hidrólise prévia de suas cadeias, sendo fundamental o papel de algumas enzimas neste processo, como as amilases. O processo de sacarificação simultânea à fermentação (SSF) se constitui como uma possibilidade para a obtenção de etanol a partir de amiláceos, uma vez que apresenta uma série de vantagens em relação aos processos realizados separadamente, como: menor complexidade e custo do processo, além de minimização dos riscos de contaminação e maiores rendimentos de hidrólise. Desta forma, este trabalho objetiva a seleção de bactérias amilolíticas que sejam capazes de crescer em condições de microaerofilia para que sejam testadas em processo de sacarificação e fermentação concomitantes da manipueira para produção de etanol. Dezoito morfotipos bacterianos foram isolados usando meio mínimo amido 1% ( MMA 1%) como substrato, dos quais quatro morfotipos mostraram-se eficientes na produção de amilases em meio sólido, uma vez que apresentaram Índice Enzimático (IE) maior que 2. Entretanto, apenas um morfotipo apresentou eficiência na degradação de amido em meio líquido, sendo esta cepa identificada como pertencente ao gênero Arthrobacter, a qual foi testada na produção de etanol por sacarificação e fermentação concomitantes da manipueira, mostrando-se como uma cepa promissora no processo de sacarificação do amido presente na mandioca.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-05T19:57:26Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 501026 bytes, checksum: bb27e58370f178ed0491cf79c539f207 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-05T19:57:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 501026 bytes, checksum: bb27e58370f178ed0491cf79c539f207 (MD5) Previous issue date: 2001-07-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Com o objetivo de se avaliar a atividade enzimática da tripsina, amilase e lipase no conteúdo intestinal da rã-touro (Rana catesbeiana Shaw, 1802), 320 animais com peso médio de 3,6 gramas foram distribuídos em baias-teste com temperatura e fotoperíodo controlados. As rãs selecionadas na fase pós- metamórfica receberam ração comercial extrusada ad libitum. Durante 87 dias de experimento, foram efetuadas 29 coletas em intervalos variando de 1 a 8 dias. As coletas do conteúdo intestinal foram feitas mediante a insensibilização das rãs em gelo e água e posterior isolamento do intestino delgado das mesmas. Após cada coleta, todo material foi congelado em nitrogênio líquido e armazenado em freezer, para ser liofilizado posteriormente. A determinação da atividade da tripsina foi realizada utilizando-se Benzoil-D, L-Arginina p-nitroanilida (D, L- BApNA) como substrato. Para os testes de atividade da amilase e lipase, foram utilizados KIT's enzimáticos comerciais, correspondentes a cada enzima. A atividade da tripsina foi registrada no primeiro dia de experimento, enquanto para amilase e lipase isto aconteceu a partir do terceiro dia. A fase inicial é marcada pelo aumento da atividade da tripsina e amilase até alcançar estabilidade, quando os animais ainda estavam na fase de imago. Neste mesmo período, a rã-touro ainda possui baixa capacidade de hidrólise para lipase. No período subseqüente até o final do experimento, a manutenção da estabilidade da atividade e atividade específica da tripsina e amilase foi contrastada pelo contínuo aumento destes parâmetros em relação à lipase. Pode-se concluir que a rã-touro apresenta capacidade para digestão de alimentos de origens protéica, amilásica e lipídica, sendo que, na fase inicial, recomenda-se a utilização de ração rica em proteína e, na fase seguinte, uso de maior quantidade de ingredientes contendo amido e lipídio. / With the objective of evaluating the enzymatic activity of the trypsin, amylase and lipase in the intestinal content of the bullfrog (Rana catesbeiana Shaw, 1802), 320 animals with medium weight of 3.6 grams were distributed in stall-test with temperature and photoperiod controlled. The frogs, selected in the post-metamorphic phase they received commercial extruded diet ad libitum. For 87 days of experiment, 29 collections were made in intervals varying from one to eight days. The collections of the intestinal content were performed by the desensitization of the frogs in ice and water and subsequent isolation of the small intestine of the same ones. After each collection, all material it was frozen in liquid nitrogen and stored in freezer to be later liofilizated. The determination of the activity of the trypsin was accomplished being used benzoil-D, L-arginine p- nitroanilide (D, L-BApNA) as substrate. For the tests of activity of the amylase and lipase commercial enzymatic KIT's were used, corresponding to each enzyme. The activity of the trypsin was registered in the first day of experiment, while for amylase and lipase this happened starting from the third day. The initial ixphase is marked by the increase of the activity of the trypsin and amylase to reach a stability when the animals were still in the imago phase. In this same period, the bullfrog still possesses low hydrolysis capacity for lipase. In the subsequent period until the end of the experiment, the maintenance of the stability of the activity and specific activity of the trypsin and amylase was contrasted by the continuous increase of these parameters in relation to lipase. With these results it can be concluded that to bullfrog presents capacity for digestion of ingredients of protein, starch and lipid origin, and in the initial phase the use of rich diet is recommended in protein and in the following phase it can be opted for the use of larger amount of ingredients containing starch and lipid.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-11-13. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:40Z : No. of bitstreams: 1 000846543_20161013.pdf: 94059 bytes, checksum: 52d1e440ba36450ea75a541fdabf2bad (MD5) Bitstreams deleted on 2016-10-17T11:54:13Z: 000846543_20161013.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-10-17T11:54:52Z : No. of bitstreams: 1 000846543.pdf: 539999 bytes, checksum: 353a91a394b4f6fa217af06030109771 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Amido resistente (AR) é definido como a fração de amido que não sofre a ação das enzimas digestivas do trato gastrointestinal apresentando comportamento semelhante ao da fibra alimentar. AR tipo 3 é o amido retrogradado composto principalmente por amilose ou amido desramificado devido a sua maior tendência à reassociação. O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito da β-amilase e da α- amilase fúngica na formação de AR3 a partir de amidos de batata e araruta. Suspensões de amido (6,5% m/v) foram gelatinizadas e submetidas à hidrólise com β-amilase (400U/g) ou α-amilase fúngica (5U/g para batata e 10U/g para araruta), por 6 h. Alíquotas do sobrenadante foram coletadas e o grau de hidrólise determinado pela quantificação de açúcares totais (método fenol-sulfúrico). Os hidrolisados foram desramificados com pululanase (40U/g), por 10 h, refrigerados a 4°C por 16 h para potencializar a retrogradação, precipitados com etanol e secos. Amostras controle foram produzidas a partir da gelatinização e desramificação dos amidos sem a utilização das amilases. Os amidos retrogradados foram caracterizados quanto ao tamanho molecular dos componentes do amido (GPC), distribuição do comprimento das cadeias ramificadas da amilopectina (HPAEC-PAD), padrão cristalino e cristalinidade relativa (difracção de raios-X), propriedades térmicas (DSC) e teor de AR. A amilólise dos amidos de batata e araruta resultou em grau de hidrólise semelhante (~25%), independente das enzimas utilizadas. O amido nativo de batata apresentou padrão cristalino tipo B, 20,7% de amilose e alta proporção de cadeias laterais longas da amilopectina (DP ≥ 37), enquanto o amido de araruta mostrou padrão cristalino tipo A, 19,5% de amilose, e alta proporção de cadeias laterais curtas (DP 6-12). A ação da β-amilase provocou, em ambos os amidos aumento expressivo na proporção de cadeias com GP 25-36 e expressiva redução... / Resistant starch (RS) is defined as the fraction of starch that does not suffer from the action of digestive enzymes from the gastrointestinal tract showing a similar behavior to that of dietary fiber. Retrograded starch, defined as RS3, is composed mainly of amylose and debranched starch due to its greater tendency to reassociation. In this work the effect of β-amylase and fungalα-amylase on the formation and physicochemical properties of RS3 from potato and arrowroot starches were investigated. Starch suspensions (6,5%w/v) werefirst gelatinized and then hydrolyzed by β-amylase (400U/g) or fungal α-amylase (5U/g potato starch, 10U/g arrowroot starch) for 6h. Aliquots of the supernatant were collected and hydrolysis degree was determined by measuring total carbohydrate content (phenol−sulfuric method).The hydrolysates were debranched by pullulanase (40U/g), for 10h, cooled to 4°C for 16h to enhance the retrogradation, precipitated using ethanol, and dried. Control samples were produced from the gelatinization and debranching of the starch without the use of amylase. The retrograded starches were characterized for molecular weight distribution of starch components (GPC), amylopectin branched-chain length distribution (HPAEC-PAD), crystalline pattern (X-ray diffraction), thermal properties (DSC) and RS content. The amylolysis of potato and arrowroot starches resulted in a similar hydrolysis degree (~25%) independent of used enzymes. Native potato starch displayed type B crystalline pattern, 10,7% of amylose,and a high proportion of long branch chains of amylopectin (DP≥37) while arrowroot starch displayed type A crystalline pattern, 19,5% of amylose, and a high proportion of short branch chains (DP 6-12). The action of β-amylase resulted in both starches significant increase in the proportion of chains with DP 25-36 and significant reduction in chains with DP 13-24, while the fungal α-amylase...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-07-29Bitstream added on 2014-06-13T20:56:15Z : No. of bitstreams: 1 ferreira_oe_me_jabo.pdf: 412993 bytes, checksum: aae1d57cd30b58d78f8d841727177cc0 (MD5) / A utilização de fermentação em estado sólido a partir de subprodutos agroindustriais possibilita a obtenção de várias biomoléculas de interesse industrial. As amilases são enzimas com grande aplicação nas indústrias têxtil, farmacêuticas, alimentícias e sucroalcooleira, representando aproximadamente 25% do mercado mundial. Neste trabalho foram isoladas três linhagens fúngicas (Rhizopus oryzae, Malbranchea pulchella e Chrysosporium zonatum), que apresentaram potencial amilolítico, quando cultivadas em três resíduos agroindustriais (quirera de arroz e de milho e farelo de trigo). Para a cepa que apresentou maior atividade enzimática, avaliou-se melhor substrato, tempo de cultivo, teores de umidade, fontes suplementares de nitrogênio, pH e temperatura de incubação, objetivando otimizar as condições de cultivo. Observou-se que a maior atividade enzimática foi obtida com a cepa de R. oryzae em 24 horas de fermentação, em meio de cultura contendo farelo de trigo como substrato, em temperatura de 35°C, utilizando solução de sais composta de NH4NO3 a 0,1% e MgSO4.7H2O a 0,1% como fonte de nitrogênio. Alterações de pH entre 4,0 e 6,0 não afetaram significativamente a síntese da enzima. A condições ótimas de atuação foram temperatura de 75°C e pH de 4,5. As enzima manteve-se estável a 75°C na ausência de substrato por 25 minutos / The use of fermentation in a solid state from agroindustrial byproducts permits the obtaining of several biomolecules of interest the industry, like the enzymes. The amylases are enzymes with great application on the textile, pharmaceutical and food industries, representing around 25% of the worldwide market. In this work three ungal strains (Rhizopus oryzae, Malbranchea pulchella and Chrysosporium zonatum) were isolated. They presented amylolytic potential when cultivated in three agroindustrial by products (brewers rice, corn grits and wheat bran). To the strain that presented the greatest enzyme activity, it was evaluated the best substrate, cultivation time, moisture content, additional sources of nitrogen, pH and incubation temperature, aiming the optimization of cultivation conditions. I was observed that the greatest enzyme’s activity was obtained with 24 hours of fermentation, in R. orizae in a culture medium that contained wheat bran as the substrate, at 35°C, using salt solution made with NH4NO3 0.1%, MgSO4.7h2O 0.1% and (NH4)2SO4 0.1% as nitrogen source. pH alterations between 4.0 and 6.0 didn’t change significantly the enzyme’s activity. The optimum conditions of performance of the enzyme were temperature of 75°C and pH 4.5. The enzyme kept stable in the lack of substrate for 25 minutes in 75°C