Submitted by Pós Imunologia (ppgimicsufba@gmail.com) on 2017-02-07T17:30:21Z No. of bitstreams: 1 Paulo Coelho (1).pdf: 1228067 bytes, checksum: 335f72b50ca0e3a7b22d4b1d10111096 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-02-08T15:49:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Paulo Coelho (1).pdf: 1228067 bytes, checksum: 335f72b50ca0e3a7b22d4b1d10111096 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-08T15:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo Coelho (1).pdf: 1228067 bytes, checksum: 335f72b50ca0e3a7b22d4b1d10111096 (MD5) / CAPES / Gliomas são as neoplasias intracraniais mais comuns e malignas. O entendimento da biologia tumoral dos gliomas é um processo complexo e contraditório. Nossos estudos anteriores demonstram uma capacidade antitumoral e anti-angiogênica de flavonoides, além de potencial morfogênico e imunomodulador de células gliais não transformadas com liberação de TNF e NO. Neste trabalho objetivamos investigar as propriedades antitumorais e imunomodulatórias do flavonoide apigenina, extraído da Croton betulaster mull em culturas de células de glioma da linhagem C6. Inicialmente, investigamos os efeitos inibitórios e morfogênicos do flavonoide nas células de C6. Verificamos pelo teste de MTT e após coloração com azul de tripan, que a apigenina tem a capacidade em diminuir a viabilidade celular e a proporção de células viáveis de forma dose e tempo dependente. Ainda, após 72 h do tratamento das culturas com 100 μM da apigenina, uma significativa proporção de células apresentaram marcação positiva para anexina V (29,6%), caracterizando apoptose, e uma menor proporção marcação positiva para laranja de acridina (6%), caracterizando autofagia. Por outro lado, o flavonoide também induziu um acúmulo das células na fase G0/G1 do ciclo celular, além de inibir a migração celular desde 24 h após o tratamento. Ademais, a capacidade do flavonoide em induzir alterações morfológicas nas células de glioma foi também observada, caracterizada pela emissão de prolongamentos multipolares nas células e aumento da expressão de proteína astrocitária GFAP, em detrimento da proteína nestina, marcador de precursor neural. A ação imunomodulatória da apigenina também foi caracterizada por citometria em fluxo, sendo evidenciado uma diminuição da proporção de células expressando NFkB nenhuma alteração significativa em STAT3 e p-STAT3, ambas proteínas envolvidas na sinalização da resposta imune. Este efeito foi acompanhado de uma alteração no perfil de citocinas pró- e antiinflamatórias evidenciadas por ELISA. Nas culturas em condições controle os níveis de IL-10 (396 pg/ml) foram cerca de duas vezes superior àqueles de TNF (216 pg/ml), porém os níveis de IL-10 diminuíram para 132 pg/ml após exposição à uma dose subtóxica do flavonoide (50 μM); um aumento significativo de NO foi também verificado nestas condições. Os conjuntos destes resultados demonstraram que o flavonoide apigenina possui eficiente efeito sobre a viabilidade, crescimento e proliferação, das células de glioma, além de induzir diferenciação celular, e mudanças no perfil de citocinas envolvidas no processo regulatório da resposta imunológica, colocando esta droga como um possível candidato adjuvante para o tratamento dos tumores cerebrais malignos humanos. / Gliomas are the most common intracranial neoplasms and malignant. The understanding of tumor biology of gliomas is complex and contradictory. Our previous studies have shown an ability antitumor and anti-angiogenic flavonoids, morphogenic and immunomodulatory potential of glial cells not transformed with release of TNF and NO. In this work we aimed to investigate the immunomodulatory and antitumor properties of apigenin flavonoid extracted from Cronton betulaster mull in cell cultures of C6 glioma lineage. Initially, we investigated the inhibitory effects of flavonoid and morphogenesis in cell C6. We verified by MTT assay and after staining with trypan blue, that apigenin has the ability to reduce cell viability and the proportion of viable cells in a dose and time dependent. Even after 72 h of treatment of cultures with 100 mM of apigenin, a significant proportion of cells showed positive staining for Annexin V (29.6%), typical of apoptosis, and a minor proportion stained positive for acridine orange (6%) , featuring autophagy. Moreover, the flavonoid also induced an accumulation of cells in G0/G1 phase of the cell cycle, besides inhibiting cell migration from 24 h after treatment. Furthermore, the capability of the flavonoid in inducing morphological changes in glioma cells was also observed, characterized by the emission of extension multipolar cells and increased expression of GFAP astrocytic protein, rather than protein nestin, a marker of neural precursor. The immunomodulatory action of apigenin was also characterized by flow cytometry, as evidenced increased proportion of cells expressing the active form of phosphorylated STAT-3 (p-STAT), and decreased the proportion of cells expressing NFkB, both proteins involved in signaling immune response. This effect was accompanied by a change in the profile of pro-and anti-inflammatory evidenced by ELISA. In cultures in control conditions levels of IL-10 (396 pg / ml) were approximately twice those of TNF (216 pg / ml), but their levels of IL-10 decreased to 132 pg / ml after exposure to a subtóxica dose of flavonoid (50 mM), a significant increase of NO was also observed under these conditions. The sets of these results demonstrated that the flavonoid apigenin has efficient effect on the viability, growth and proliferation of glioma cells, and inducing cellular differentiation, and changes in the profile of cytokines involved in the regulatory process of immune response, placing this drug as an possible candidate for the adjuvant treatment of malignant human brain tumors.

Submitted by PMBqBM null (pmbqbm@ufba.br) on 2017-05-10T14:45:11Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Fillipe Mendes Araújo_PMBqBM-UFBA.pdf: 2321256 bytes, checksum: 46d5280a62fc550896cc43e27db13fb3 (MD5) / Approved for entry into archive by Delba Rosa (delba@ufba.br) on 2017-07-28T14:38:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Fillipe Mendes Araújo_PMBqBM-UFBA.pdf: 2321256 bytes, checksum: 46d5280a62fc550896cc43e27db13fb3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-28T14:38:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Fillipe Mendes Araújo_PMBqBM-UFBA.pdf: 2321256 bytes, checksum: 46d5280a62fc550896cc43e27db13fb3 (MD5) / FAPESB / A doença de Parkinson é caracterizada principalmente pela perda de neurônios dopaminérgicos que contêm neuromelanina na substância nigra pars compacta. Os mecanismos responsáveis por esta neurodegeneração permanecem desconhecidos, contudo, algumas desordens celulares e moleculares são consideradas envolvidas neste processo, dentre estes, acúmulo de α-sinucleina, estresse oxidativo, dano mitocondrial, disfunção proteossomal, disfunção autofágica e neuroinflamação. Dentre estas, apenas a neuroinflamação ainda não foi associada com os efeitos deletérios induzidos pela neurotoxina endógena, aminocromo. Essa neurotoxina tem origem a partir da oxidação da dopamina em pH citosólico e é um precusor da neuromelanina que em condições especificas pode se acumular em neurônios dopaminérgicos e gerar citotocixidade. Neste sentido, este trabalho tem como principal foco de estudo o potencial neuroinflamatório do aminocromo e seus efeitos regulados pela apigenina, um reconhecido composto flavonoide imunomodulador. Culturas organotípicas de fatias do mesencéfalo de ratos Wistar pós-natais com 8 dias foram cultivadas durante 3 dias com DMEM/F12, incubadas em 5% de CO2 a 37 °C. Depois, as fatias foram tratadas com aminocromo (0,01 a 25 μM) e ou com apigenina (10μM) e analisadas após 24 ou 48 h. A neurotoxicidade foi avaliada por meio de análise morfológica e da expressão de tirosina hidroxilase (TH) por Western Blot. A resposta neuroinflamatória foi avaliada por imuno-histoquímica para Iba1 e por análise de RTq-PCR para citocinas TNF e IL-1β. O efeito modulador de fatores neurotróficos foi também avaliado por RTq-PCR. Nossos resultados demonstraram que o aminocromo induziu danos teciduais em culturas após 48h de exposição, associado à redução da expressão TH, a qual foi inibida pela apigenina. Além disso, a exposição ao aminocromo induziu alteração morfológica em células Iba1+ após 24 h, acompanhado por aumento na expressão do RNAm para TNF e IL-1β, que também foram inibidas pela apigenina. O aminocromo reduziu a expressão do mRNA dos fatores neurotróficos CDNF e NGF e aumentou a expressão do BDNF. A apigenina inibiu os efeitos induzidos pelo aminocromo em relação à expressão do CDNF e NGF e aumentou a expressão destas neurotrofinas. Por outro lado, a apigenina reduziu os níveis de BDNF e GDNF. Estes resultados demonstraram que neuroinflamação e fatores neurotróficos também estão envolvidos na neurodegeneração induzida por aminocromo e que o flavonoide apigenina constitui um bom agente de proteção contra os danos celulares induzidos por esta toxina.

Made available in DSpace on 2016-04-04T12:35:27Z (GMT). No. of bitstreams: 2 fernanda_silva_ioc_mest_2014.pdf: 3910647 bytes, checksum: 4b04c7f0b0d2eaf5ff868421bef619ec (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016-01-13 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A leishmaniose ainda é uma das doenças mais negligenciadas do mundo. Ela está presente nos cinco continentes e é endêmica em 98 países, com 350 milhões de pessoas vivendo em zonas de risco e mais de 12 milhões de pessoas infectadas. Compreende um complexo de doenças causadas por mais de 20 espécies do gênero Leishmania. No Brasil, a Leishmania amazonensis é uma espécie dermotrópica importante. Apesar do progresso na compreensão da bioquímica e biologia deste parasito, este conhecimento ainda não tem refletido na descoberta de novos e eficazes agentes quimioterápicos contra a doença. O tratamento atual é insatisfatório, com altas taxas de toxidez e ineficácia, e não há vacina humana licenciada. A pesquisa de novos medicamentos, a partir de fontes naturais, é amplamente utilizada como uma abordagem bem sucedida na detecção de compostos para o tratamento de doenças parasitárias. Compostos puros obtidos de plantas, como certos flavonoides, exibem atividade antiprotozoária. A apigenina é uma flavona bioativa, abundantemente presente em frutas, ervas e legumes, que mostrou atividade leishmanicida. A apigenina inibiu o crescimento celular de ambas as formas evolutivas de L. amazonensis de maneira dose-dependente. Este efeito inibitório, em promastigotas, foi igual a 74% após 24 h de tratamento com 96 \03BCM de apigenina e, em amastigotas intracelulares, foi igual a 71% após 72 h de tratamento com 12 \03BCM do composto. O IC50/24 h em promastigotas foi 23,68 \03BCM e o IC50/72 h em amastigotas foi 4,33 \03BCM. Observou-se que a apigenina foi capaz de induzir o aumento nos níveis de ERO nos promastigotas e nos macrófagos infectados com L. amazonensis A incubação com os antioxidantes NAC e GSH reduziu a morte induzida pela apigenina nesses parasitos. A apigenina também foi capaz de causar a diminuição no potencial de membrana mitocondrial, a parada do ciclo celular, a diminuição do potencial proliferativo e alterações ultraestruturais mitocondriais e golgienses nos promastigotas tratados, também de maneira dose-dependente. Além disso, os macrófagos infectados mostraram que o tratamento com apigenina induziu um aumento no número de autofagossomos próximo das amastigotas, sugerindo também a contribuição da autofagia no mecanismo de ação do composto. Na avaliação in silico, a apigenina exibiu propriedades ADMET favoráveis e preencheu a "Regra dos 5\201D de Lipinski, mostrando ser bem absorvida, permeável e oralmente viável. O tratamento oral com apigenina (1 e 2 mg/Kg/dia) em camundongos BALB/c infectados com L. amazonensis mostrou controlar o desenvolvimento da lesão na orelha destes animais e reduzir a carga parasitária de maneira dose-dependente. Os resultados in vitro contribuíram para elucidar a atividade leishmanicida da apigenina e, juntamente como os resultados in vivo, entusiasmam em propor essa flavona como um composto suplementar no tratamento da leishmaniose / Leishmaniasis is still one of the most neglected diseases in the world. It is present on five continents and is endemic in 98 countries, with 350 million people living in areas at risk and more than 12 million people infected. Comprises a complex of diseases caused by over 20 species of the genus Leishmania . In Brazil, Leishmania amazonensis is an important dermotropic specie. Despite progress in understanding the biochemistry and biology of this parasite, this knowledge has not been refle cted in the discovery of new and effective chemotherapeutic agents against the disease. The current treatment is unsatisfactory, with high toxicity and ineffectiveness, and there is no licensed human vaccine. The research of new drugs from natural sources is widely used as a successful approach in detecting compounds for the treatment of parasitic diseases. Pure compounds obtained from plants, such as certain flavonoids, exhibit antiprotozoal activity. Apigenin is a bioactive flavone, abundantly present in fruits, herbs and vegetables, which showed leishmanicidal activity. Apigenin inhibited cell growth of both forms of L. amazonensis in dose - dependent manner. This inhibitory effect on promastigotes was equal to 74% after 24 h of treatment with 96 μM apigenin and on intracellular amastigotes was equal to 71% after 72 h of treatment with 1 2 μM of the compound. The IC 50 / 24 h) in promastigotes was 23.68 μM and the IC 50 /72 h in amastigotes was 4.33 μM. It was observed that apigenin was able to induce increased lev els of ROS in treated promastigotes and L. amazonensis - infected macrophages. Pre - incubation with antioxidants, such as NAC and GSH, reduced apigenin - induced death in these parasites. Apigenin was also able to cause a decrease in mitochondrial membrane pote ntial, the cell cycle arrest, the decrease of proliferative potential, and mitochondrial and golgiense’s ultrastructural changes in treated promastigotes, also in dose - dependent manner. In addition, macrophages have shown that apigenin treatment induced an increase in the number of autophagosomes close to the amastigotes, suggesting the involvement of autophagy in the mechanism of action of the compound. When evaluated in silico , apigenin exhibited favorable ADMET properties and filled the Lipinski ’s "R ule of 5" , showing to be well absorbed, permeable and orally viable . In murine cutaneous leishmaniasis model, the oral t reatment with apigenin (1 and 2 mg/K g/day) in BALB/c infected mice showed to control the lesion development on ear of these animals and to r educe the parasite burden in dose - dependent manner. In vitro studies have contributed to elucidate the leishmanicidal activity of apigenin and, together with the in vivo results, enthusiastic in proposing this flavone as an additional compound in the treat ment of leishmaniasis

Os extratos vegetais, em função de sua rica composição e propriedades medicinais têm tido grande interesse na área cosmética. Contudo, muitas vezes, o grande número de componentes químicos pode causar instabilidade às formulações, assim, a indústria cosmética também utiliza seus principais componentes isolados. Dentre esses extratos podemos destacar o de camomila, o qual vem sendo comumente utilizado em cosméticos. Este possui uma rica composição de flavonóides, terpenos, polissacarídeos, dentre outros, o que lhe confere propriedades anti-inflamatória, antioxidante e emoliente, as quais foram bastante estudadas quanto às suas aplicações farmacológicas em geral, porém pouco estudadas quanto a sua aplicação tópica. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de formulações cosméticas estáveis contendo extrato glicólico de camomila (Matricaria chamomilla L.), ou os seus componentes isolados, alfa-bisabolol e apigenina, bem como a avaliação da eficácia clínica destas formulações na hidratação e proteção da pele. Visando avaliar potencial antioxidante in vitro do extrato de camomila e do seu componente isolado, apigenina, foram realizados estudos de quimioluminescência. Foram desenvolvidas cinco formulações à base de blend autoemulsificante, de copolímero de ácido sulfônico acriloildimetiltaurato e vinilpirrolidona (ASAV), blend autoemulsificante de polímero de celulose, copolímero de ASAV e polímero de poliacrilamida. Estas formulações foram acrescidas ou não (veículo) de 0,5% de alfa-bisabolol e de 5% de extrato de camomila. Realizou-se estudos preliminares de estabilidade e estudos de estabilidade física por determinação do comportamento reológico, bem como uma análise sensorial. A formulação composta copolímero ASAV apresentou melhor estabilidade e melhor sensorial e, assim, foi utilizada como veículo na avaliação da eficácia clínica a curto (efeitos imediatos) e longo prazo. Para a avaliação dos efeitos imediatos, analisou-se a hidratação, a perda transepidérmica de água, as propriedades viscoelásticas e o microrelevo da pele da região interna dos antebraços e da face, antes e após 2 horas da aplicação das formulações: veículo (F1), veículo + alfa-bisabolol (F2), veículo + extrato de camomila (F3) e veículo + apigenina (F4). Para analisar os efeitos a longo prazo, as voluntárias aplicaram as formulações duas vezes ao dia nos antebraços e na face sendo que, após 15 e 30 dias de aplicação, foram realizadas medidas dos parâmetros acima mencionados e das propriedades mecânicas da pele por determinação de suas características anisotrópicas. Os resultados mostraram que o extrato de camomila possui potencial antioxidante e que as formulações estudadas apresentaram efeitos hidratantes no estudo a curto prazo, porém somente as que continham extrato de camomila proporciono tal efeitos no estudo a longo prazo. Finalizando, de acordo com os resultados obtidos, pôde-se concluir que a formulação contendo extrato de camomila foi estável e apresentou propriedade hidratante, efeito esse evidenciado na avaliação da percepção da eficácia da referida formulação. Assim, o extrato de camomila pode ser sugerido para a aplicação em produtos cosméticos, visando a obtenção de efeitos hidratantes pronunciado e manutenção do equilíbrio fisiológico da pele. / Botanical extracts due to its rich composition and medicinal properties have attracted great interest in the cosmetic area. However, the large amount of chemicals compounds present in those extracts could cause instability to the formulations; thus, the cosmetic industry also uses its isolated major compounds. Among these extracts we can mention the Matricaria chamomilla L. extract, which has been commonly used in cosmetics. This extract has a rich composition in flavonoids, terpenes, polysaccharides, among others, which confers anti-inflammatory, antioxidant and emollient properties. M. chamomilla L. extract has had its use recognized and, in general, in terms of pharmacological applications, it has being well studied on its therapeutic properties. Although, there are only a few studies about its topical application. The aim of this study was to development of stable cosmetic formulations containing glycolic extract, or its isolated compounds, alpha-bisabolol and apigenin, as well as to evaluate the clinical efficacy of those formulations on skin hydration and skin protection. In order, to evaluate the in vitro antioxidant activity of the M. chamomilla L. and apigenin was applied the chemiluminescence assay. Five formulations were developed based on sclerotium gum, ammonium acryloyldimethyltaurate/ vinylpyrrolidone copolymer (A/VPC), hydroxietylcelulose, acrylate polymer and C13-14 Laureth-7 acrylamide polymer. Those formulations were supplemented or not (vehicle) with 0.5% of alpha-bisabolol and 5% of M. chamomilla L. extract. Afterwards, further studies were carried out to determine the formulations physical stability by analyzing the rheological behavior and also a sensorial analysis. The formulation containing A/VPC copolymer demonstrated the best physical stability and the best sensorial characteristics and thus it was used as the vehicle to evaluate the clinical efficacy in the immediate and long term effects. In order to evaluate the immediate effects, it was analyzed the skin hydration, transepidermal water loss, the viscoelastic properties and the skin microrelief on the region of the volunteers forearms and face, before and after 2 hours of the following formulations application: vehicle (F1), vehicle + alpha-bisabolol (F2), vehicle + M. chamomilla L. extract (F3) and vehicle + apigenin (F4). For the long-term study, the volunteers applied the formulations twice a day in the forearms and face; after 15 and 30 day-period of application, the parameters above mentioned were measured and the skin mechanical properties was also evaluated, by determining skin anisotropic characteristics. The results showed that M. chamomilla L.extract has antioxidant activity and the formulations studied demonstrated immediate moisturizing effects, but only the formulation containing M. chamomilla L. extract provides such effects in long-term study. Finally, according to the obtained results, it can be concluded that the formulation containing M. chamomilla L. extract was stable and showed moisturizing properties, it also was demonstrated by the efficacy perception assessment. Thus, M. chamomilla L. extract can be suggested for application in cosmetic product, in order to obtain pronounced hydration effect and keeping physiological balance of the skin.

As propriedades dos extratos vegetais vêm sendo cada vez mais investigadas, suscitando o interesse em aliar o potencial destes para minimizar efeitos do fotoenvelhecimento da pele decorrentes da ação dos radicais livres à fotoproteção proporcionada pelos filtros solares. Apesar do uso difundido de vários extratos vegetais, alguns deles, como a Matricaria chamomilla, ainda carecem de estudos acerca de suas propriedades e efeitos biológicos na pele, especialmente quando este é veiculado em formulações dermocosméticas. Assim, esse trabalho teve por objetivo a avaliação da estabilidade e da eficácia pré-clínica de formulações fotoprotetoras contendo o extrato de Matricaria chamomilla ou dos componentes isolados do vegetal, a-bisabolol e apigenina, na proteção de danos causados pela radiação ultravioleta (UV). Para tal, verificou-se a estabilidade dos ativos veiculados em formulação com FPS previamente determinado, bem como outras formulações de protetor solar foram desenvolvidas e a estas adicionadas extrato de camomila ou alfa-bisabolol, sendo testados por centrifugação, pH e análise visual. A estabilidade física das formulações mais estáveis foi analisada por estudos reológicos. A estabilidade química de formulações contendo extrato de camomila, apigenina e bisabolol foi determinada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC). Estas formulações acrescidas de apigenina, extrato de camomila, ou alfa-bisabolol finalmente foram avaliadas no que tange à eficácia pré-clínica. Neste estudo, camundongos foram submetidos à radiação UV e o efeito protetor das formulações foi avaliado através de técnicas de biofísica nãoinvasiva e análise de imagem, que forneceram medidas de eritema, o teor de água do estrato córneo, a perda de água transepidérmica, ecogenicidade e espessura da derme. Os resultados permitiram selecionar as formulações fisicamente estáveisl para ambas as combinações de filtros UV associados contendo as substâncias ativas em estudo. No estudo de estabilidade química, a apigenina foi mais estável quando comparada às outras substâncias ativas em estudo e o bisabolol mostrou estabilidade química baixa. Todas as formulações foram eficazes na redução da perda de água transepidérmica. Os efeitos destas formulações na pele foram muito positivos, pois todas elas levaram a aumentos ecogenicidade e valores menores de espessura quando comparada às regiões irradiadas. Esses resultados mostraram efeitos significativos na melhoria do processo inflamatório causado pela radiação. Finalmente, as formulações desenvolvidas foram estáveis e eficazes na proteção da pele. Além disso, quando o extrato de camomila ou apigenina esteve presente na formulação fotoprotetora os efeitos foram mais pronunciados. / Particular plant extracts are being increasingly studied for their properties, in order to combine their potential to minimize skin photoaging effects from the action of free radicals with photoprotection provided by sunscreens. Despite of the widespread use of various plant extracts, some of them as it is the case of Matricaria chamomilla still need mored detailed studies especially on their properties and biological effects on skin, especially in dermocosmetic formulations. The aim of the present study was to assess the stability and the preclinical efficacy of sunscreen formulations containing M. chamomilla extract or its isolated components, alpha-bisabolol and apigenin, in the protection from damage caused by ultraviolet radiation. For this purpose, the physical stability in a pre-determined SPF formulation added of the active substances under study was determinated. Other sunscreen formulations were developed and supplemented with chamomile extract or alpha-bisabolol, and these were tested for centrifugation stability, pH and visual analysis. Physical stability of the most stable formulations was estimated by rheological measurements. The chemical stability of the formulations containing chamomile extract, apigenin, and bisabolol was determinated by High Efficiency Liquid Chromatography (HPLC). These formulations with chamomile extract, apigenin or alpha-bisabolol were finally evaluated in terms of preclinical efficacy. In this study, hairless mice were submitted to UV radiation and the protective effect of the formulations was evaluated using noninvasive biophysics techniques and image analysis, in which we obtained measures of erythema, the water content of stratum corneum, transepidermal water loss, the echogenicity and the thickness of the dermis. The results allowed selecting physicallystable formulations for both the combinations of UV-filters associated containing the actives substances under study. In the chemical stability study, the apigenin present in the extract was more stable when compared to the other active substances under study and the bisabolol showed a low chemical stabilitity. All the formulations were effective in the transepidermic water-loss reduction. The effects of these formulations on skin were very positive since all of them led to ecogenicity increases and lower thickness values when compared to irradiated regions. These results showed significant effects in the improvement of the inflammatory process caused by radiation. Finally, the formulations developed were stable and effective in the skin protection. In addition, when the chamomile extract or apigenin was present in the formulation the photoprotective effects were more pronounced.

As propriedades dos extratos vegetais vêm sendo cada vez mais investigadas, suscitando o interesse em aliar o potencial destes para minimizar efeitos do fotoenvelhecimento da pele decorrentes da ação dos radicais livres à fotoproteção proporcionada pelos filtros solares. Apesar do uso difundido de vários extratos vegetais, alguns deles, como a Matricaria chamomilla, ainda carecem de estudos acerca de suas propriedades e efeitos biológicos na pele, especialmente quando este é veiculado em formulações dermocosméticas. Assim, esse trabalho teve por objetivo a avaliação da estabilidade e da eficácia pré-clínica de formulações fotoprotetoras contendo o extrato de Matricaria chamomilla ou dos componentes isolados do vegetal, a-bisabolol e apigenina, na proteção de danos causados pela radiação ultravioleta (UV). Para tal, verificou-se a estabilidade dos ativos veiculados em formulação com FPS previamente determinado, bem como outras formulações de protetor solar foram desenvolvidas e a estas adicionadas extrato de camomila ou alfa-bisabolol, sendo testados por centrifugação, pH e análise visual. A estabilidade física das formulações mais estáveis foi analisada por estudos reológicos. A estabilidade química de formulações contendo extrato de camomila, apigenina e bisabolol foi determinada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC). Estas formulações acrescidas de apigenina, extrato de camomila, ou alfa-bisabolol finalmente foram avaliadas no que tange à eficácia pré-clínica. Neste estudo, camundongos foram submetidos à radiação UV e o efeito protetor das formulações foi avaliado através de técnicas de biofísica nãoinvasiva e análise de imagem, que forneceram medidas de eritema, o teor de água do estrato córneo, a perda de água transepidérmica, ecogenicidade e espessura da derme. Os resultados permitiram selecionar as formulações fisicamente estáveisl para ambas as combinações de filtros UV associados contendo as substâncias ativas em estudo. No estudo de estabilidade química, a apigenina foi mais estável quando comparada às outras substâncias ativas em estudo e o bisabolol mostrou estabilidade química baixa. Todas as formulações foram eficazes na redução da perda de água transepidérmica. Os efeitos destas formulações na pele foram muito positivos, pois todas elas levaram a aumentos ecogenicidade e valores menores de espessura quando comparada às regiões irradiadas. Esses resultados mostraram efeitos significativos na melhoria do processo inflamatório causado pela radiação. Finalmente, as formulações desenvolvidas foram estáveis e eficazes na proteção da pele. Além disso, quando o extrato de camomila ou apigenina esteve presente na formulação fotoprotetora os efeitos foram mais pronunciados. / Particular plant extracts are being increasingly studied for their properties, in order to combine their potential to minimize skin photoaging effects from the action of free radicals with photoprotection provided by sunscreens. Despite of the widespread use of various plant extracts, some of them as it is the case of Matricaria chamomilla still need mored detailed studies especially on their properties and biological effects on skin, especially in dermocosmetic formulations. The aim of the present study was to assess the stability and the preclinical efficacy of sunscreen formulations containing M. chamomilla extract or its isolated components, alpha-bisabolol and apigenin, in the protection from damage caused by ultraviolet radiation. For this purpose, the physical stability in a pre-determined SPF formulation added of the active substances under study was determinated. Other sunscreen formulations were developed and supplemented with chamomile extract or alpha-bisabolol, and these were tested for centrifugation stability, pH and visual analysis. Physical stability of the most stable formulations was estimated by rheological measurements. The chemical stability of the formulations containing chamomile extract, apigenin, and bisabolol was determinated by High Efficiency Liquid Chromatography (HPLC). These formulations with chamomile extract, apigenin or alpha-bisabolol were finally evaluated in terms of preclinical efficacy. In this study, hairless mice were submitted to UV radiation and the protective effect of the formulations was evaluated using noninvasive biophysics techniques and image analysis, in which we obtained measures of erythema, the water content of stratum corneum, transepidermal water loss, the echogenicity and the thickness of the dermis. The results allowed selecting physicallystable formulations for both the combinations of UV-filters associated containing the actives substances under study. In the chemical stability study, the apigenin present in the extract was more stable when compared to the other active substances under study and the bisabolol showed a low chemical stabilitity. All the formulations were effective in the transepidermic water-loss reduction. The effects of these formulations on skin were very positive since all of them led to ecogenicity increases and lower thickness values when compared to irradiated regions. These results showed significant effects in the improvement of the inflammatory process caused by radiation. Finally, the formulations developed were stable and effective in the skin protection. In addition, when the chamomile extract or apigenin was present in the formulation the photoprotective effects were more pronounced.

Os extratos vegetais, em função de sua rica composição e propriedades medicinais têm tido grande interesse na área cosmética. Contudo, muitas vezes, o grande número de componentes químicos pode causar instabilidade às formulações, assim, a indústria cosmética também utiliza seus principais componentes isolados. Dentre esses extratos podemos destacar o de camomila, o qual vem sendo comumente utilizado em cosméticos. Este possui uma rica composição de flavonóides, terpenos, polissacarídeos, dentre outros, o que lhe confere propriedades anti-inflamatória, antioxidante e emoliente, as quais foram bastante estudadas quanto às suas aplicações farmacológicas em geral, porém pouco estudadas quanto a sua aplicação tópica. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de formulações cosméticas estáveis contendo extrato glicólico de camomila (Matricaria chamomilla L.), ou os seus componentes isolados, alfa-bisabolol e apigenina, bem como a avaliação da eficácia clínica destas formulações na hidratação e proteção da pele. Visando avaliar potencial antioxidante in vitro do extrato de camomila e do seu componente isolado, apigenina, foram realizados estudos de quimioluminescência. Foram desenvolvidas cinco formulações à base de blend autoemulsificante, de copolímero de ácido sulfônico acriloildimetiltaurato e vinilpirrolidona (ASAV), blend autoemulsificante de polímero de celulose, copolímero de ASAV e polímero de poliacrilamida. Estas formulações foram acrescidas ou não (veículo) de 0,5% de alfa-bisabolol e de 5% de extrato de camomila. Realizou-se estudos preliminares de estabilidade e estudos de estabilidade física por determinação do comportamento reológico, bem como uma análise sensorial. A formulação composta copolímero ASAV apresentou melhor estabilidade e melhor sensorial e, assim, foi utilizada como veículo na avaliação da eficácia clínica a curto (efeitos imediatos) e longo prazo. Para a avaliação dos efeitos imediatos, analisou-se a hidratação, a perda transepidérmica de água, as propriedades viscoelásticas e o microrelevo da pele da região interna dos antebraços e da face, antes e após 2 horas da aplicação das formulações: veículo (F1), veículo + alfa-bisabolol (F2), veículo + extrato de camomila (F3) e veículo + apigenina (F4). Para analisar os efeitos a longo prazo, as voluntárias aplicaram as formulações duas vezes ao dia nos antebraços e na face sendo que, após 15 e 30 dias de aplicação, foram realizadas medidas dos parâmetros acima mencionados e das propriedades mecânicas da pele por determinação de suas características anisotrópicas. Os resultados mostraram que o extrato de camomila possui potencial antioxidante e que as formulações estudadas apresentaram efeitos hidratantes no estudo a curto prazo, porém somente as que continham extrato de camomila proporciono tal efeitos no estudo a longo prazo. Finalizando, de acordo com os resultados obtidos, pôde-se concluir que a formulação contendo extrato de camomila foi estável e apresentou propriedade hidratante, efeito esse evidenciado na avaliação da percepção da eficácia da referida formulação. Assim, o extrato de camomila pode ser sugerido para a aplicação em produtos cosméticos, visando a obtenção de efeitos hidratantes pronunciado e manutenção do equilíbrio fisiológico da pele. / Botanical extracts due to its rich composition and medicinal properties have attracted great interest in the cosmetic area. However, the large amount of chemicals compounds present in those extracts could cause instability to the formulations; thus, the cosmetic industry also uses its isolated major compounds. Among these extracts we can mention the Matricaria chamomilla L. extract, which has been commonly used in cosmetics. This extract has a rich composition in flavonoids, terpenes, polysaccharides, among others, which confers anti-inflammatory, antioxidant and emollient properties. M. chamomilla L. extract has had its use recognized and, in general, in terms of pharmacological applications, it has being well studied on its therapeutic properties. Although, there are only a few studies about its topical application. The aim of this study was to development of stable cosmetic formulations containing glycolic extract, or its isolated compounds, alpha-bisabolol and apigenin, as well as to evaluate the clinical efficacy of those formulations on skin hydration and skin protection. In order, to evaluate the in vitro antioxidant activity of the M. chamomilla L. and apigenin was applied the chemiluminescence assay. Five formulations were developed based on sclerotium gum, ammonium acryloyldimethyltaurate/ vinylpyrrolidone copolymer (A/VPC), hydroxietylcelulose, acrylate polymer and C13-14 Laureth-7 acrylamide polymer. Those formulations were supplemented or not (vehicle) with 0.5% of alpha-bisabolol and 5% of M. chamomilla L. extract. Afterwards, further studies were carried out to determine the formulations physical stability by analyzing the rheological behavior and also a sensorial analysis. The formulation containing A/VPC copolymer demonstrated the best physical stability and the best sensorial characteristics and thus it was used as the vehicle to evaluate the clinical efficacy in the immediate and long term effects. In order to evaluate the immediate effects, it was analyzed the skin hydration, transepidermal water loss, the viscoelastic properties and the skin microrelief on the region of the volunteers forearms and face, before and after 2 hours of the following formulations application: vehicle (F1), vehicle + alpha-bisabolol (F2), vehicle + M. chamomilla L. extract (F3) and vehicle + apigenin (F4). For the long-term study, the volunteers applied the formulations twice a day in the forearms and face; after 15 and 30 day-period of application, the parameters above mentioned were measured and the skin mechanical properties was also evaluated, by determining skin anisotropic characteristics. The results showed that M. chamomilla L.extract has antioxidant activity and the formulations studied demonstrated immediate moisturizing effects, but only the formulation containing M. chamomilla L. extract provides such effects in long-term study. Finally, according to the obtained results, it can be concluded that the formulation containing M. chamomilla L. extract was stable and showed moisturizing properties, it also was demonstrated by the efficacy perception assessment. Thus, M. chamomilla L. extract can be suggested for application in cosmetic product, in order to obtain pronounced hydration effect and keeping physiological balance of the skin.

Made available in DSpace on 2017-07-10T19:24:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Francielly_ Torres dos Santos.pdf: 2692597 bytes, checksum: db1b8713e9d8a55de139153f5a86a29e (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / Parsley has been widely traded as a flavoring in Brazil and worldwide. The quality to produce salsa depends on its cropping management. This, this study aimed to evaluate the effect of alternative organic substrates in productivity and nutritional quality of Petroselium crispum. The treatments consisted of five organic compounds obtained by agro-industrial waste composting process of broiler production chain in which they varied the main source of carbon, i.e, waste cotton carding, pruning of ground urban trees, sawdust, bagasse of milled cane and ground napier grass. In order to obtain the organic substrates, it was added 0, 15, 30, 45 and 60% biochar to each of the five organic compounds, a charcoal obtained from burning wood in boilers. The experimental design was completely randomized in a 5x5 factorial design, with four replications. The nutritional quality of salsa was determined by N, P, K evaluation, and antioxidant activity and productivity. Concerning substrates, functional groups and determination of humification degree were evaluated, correlated with parsley dry weight. It was concluded that the use of substrate from Napier grass ground does not favor Petroselium crispum production. Adding biochar associated with organic compost from urban tree pruning whose main source is carbon favors flavonoid content of Diosmetin-apiosilglucoside-isomer and apigenin-malonyl-glucoside in Petroselium crispum. The electrical conductivity of the organic substrate is the main factor that contains Petroselium crispum production while addition of biochar can minimize this effect / A salsa é amplamente comercializada como especiaria no Brasil e no mundo. A produção de salsa com qualidade depende da forma de cultivo. Assim, neste trabalho, objetivou-se avaliar o efeito de substratos orgânicos alternativos na produtividade e qualidade nutricional de salsa graúda portuguesa. Os tratamentos consistiram de cinco compostos orgânicos, obtidos pelo processo de compostagem de resíduos agroindustriais da cadeia produtiva do frango de corte em que se variou a principal fonte de carbono, a saber: resíduos de desfibrilação de algodão, resíduos de poda de árvores urbanas trituradas, serragem, bagaço de cana moído e capim-napier triturado. Para obtenção dos substratos orgânicos, a cada um dos cinco compostos orgânicos, acrescentaram-se 0, 15, 30, 45 e 60% de biochar, um carvão obtido da queima da madeira em caldeiras. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 5x5, com quatro repetições. A qualidade nutricional da salsa foi determinada pela avaliação de N, P, K, atividade antioxidante e produtividade. Nos substratos, foram avaliados os grupos funcionais e a determinação do grau de humificação, correlacionados com a matéria seca da salsa. Concluiu-se que o uso de substrato originado de capim-napier triturado não favorece à produção de salsa graúda portuguesa. A adição de biochar associado ao composto orgânico, proveniente de poda de árvores urbanas como principal fonte de carbono, favorece o teor de flavonoides de diosmetin-apiosilglucosídeo isômero e apigenina-malonil-glucosídeo na salsa graúda portuguesa. A condutividade elétrica do substrato orgânico é o fator que mais limita a produção de matéria de salsa graúda portuguesa e a adição de biochar pode minimizar tal efeito.

Made available in DSpace on 2017-05-12T14:47:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Francielly_ Torres dos Santos.pdf: 2692597 bytes, checksum: db1b8713e9d8a55de139153f5a86a29e (MD5) Previous issue date: 2016-02-16 / Parsley has been widely traded as a flavoring in Brazil and worldwide. The quality to produce salsa depends on its cropping management. This, this study aimed to evaluate the effect of alternative organic substrates in productivity and nutritional quality of Petroselium crispum. The treatments consisted of five organic compounds obtained by agro-industrial waste composting process of broiler production chain in which they varied the main source of carbon, i.e, waste cotton carding, pruning of ground urban trees, sawdust, bagasse of milled cane and ground napier grass. In order to obtain the organic substrates, it was added 0, 15, 30, 45 and 60% biochar to each of the five organic compounds, a charcoal obtained from burning wood in boilers. The experimental design was completely randomized in a 5x5 factorial design, with four replications. The nutritional quality of salsa was determined by N, P, K evaluation, and antioxidant activity and productivity. Concerning substrates, functional groups and determination of humification degree were evaluated, correlated with parsley dry weight. It was concluded that the use of substrate from Napier grass ground does not favor Petroselium crispum production. Adding biochar associated with organic compost from urban tree pruning whose main source is carbon favors flavonoid content of Diosmetin-apiosilglucoside-isomer and apigenin-malonyl-glucoside in Petroselium crispum. The electrical conductivity of the organic substrate is the main factor that contains Petroselium crispum production while addition of biochar can minimize this effect / A salsa é amplamente comercializada como especiaria no Brasil e no mundo. A produção de salsa com qualidade depende da forma de cultivo. Assim, neste trabalho, objetivou-se avaliar o efeito de substratos orgânicos alternativos na produtividade e qualidade nutricional de salsa graúda portuguesa. Os tratamentos consistiram de cinco compostos orgânicos, obtidos pelo processo de compostagem de resíduos agroindustriais da cadeia produtiva do frango de corte em que se variou a principal fonte de carbono, a saber: resíduos de desfibrilação de algodão, resíduos de poda de árvores urbanas trituradas, serragem, bagaço de cana moído e capim-napier triturado. Para obtenção dos substratos orgânicos, a cada um dos cinco compostos orgânicos, acrescentaram-se 0, 15, 30, 45 e 60% de biochar, um carvão obtido da queima da madeira em caldeiras. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 5x5, com quatro repetições. A qualidade nutricional da salsa foi determinada pela avaliação de N, P, K, atividade antioxidante e produtividade. Nos substratos, foram avaliados os grupos funcionais e a determinação do grau de humificação, correlacionados com a matéria seca da salsa. Concluiu-se que o uso de substrato originado de capim-napier triturado não favorece à produção de salsa graúda portuguesa. A adição de biochar associado ao composto orgânico, proveniente de poda de árvores urbanas como principal fonte de carbono, favorece o teor de flavonoides de diosmetin-apiosilglucosídeo isômero e apigenina-malonil-glucosídeo na salsa graúda portuguesa. A condutividade elétrica do substrato orgânico é o fator que mais limita a produção de matéria de salsa graúda portuguesa e a adição de biochar pode minimizar tal efeito.

La apigenina (4', 5, 7 trihidroxiflavona), flavonoide presente en distintos vegetales, tiene numerosas características saludables por las cuales elegimos un derivado hidrosoluble, la apigenina potásica, para el presente estudio.Hemos estudiado su actividad frente a la inflamación aguda, al cáncer de próstata y a los daños causados por las radiaciones, tanto ionizantes como no ionizantes (radiación UV), utilizando diversas técnicas, tanto in vitro como en modelos in vivo. Este flavonoide demostró actividad antiinflamatoria, reduciendo la inflamación hasta un 78%. Asimismo, la apigenina potásica mostró actividad quimiopreventiva frente al cáncer de próstata, al reducir la viabilidad y la migración e inducir apoptosis in vitro, y aumentar la supervivencia de animales con tumores. Además, la apigenina potásica presentó efecto geno- y citoprotector frente a la radiación ionizante (radiación γ y X), con un factor de protección de un 27-35 % en linfocitos humanos, y de un 50-86 % en dos líneas celulares de próstata. Por último, el flavonoide ha demostrado proteger frente al fotoenvejecimiento causado por la radiación UV, reduciendo la displasia epitelial y la elastosis dérmica, dos marcadores de cáncer cutáneo; además, ha sido posible detectar la apigenina en diversos tejidos, entre ellos el cerebro. / Apigenin (4', 5, 7 trihidroxyflavone), a flavonoid present in different plants, shows some healthy characteristics for which a water soluble derivated, potassium apigenin, was chosen for this study.It has been studied the activity of potassium apigenin against acute inflammation, prostate cancer and the effect of ionising and non-ionising (UV) radiations, using different techniques, both in vitro and in vivo models.This flavonoid showed anti-inflammatory effects, inhibiting the inflammation by up to 78%. It also demonstrated chemopreventive activity against prostate cancer, by reducing the cell viability and migration, inducing apoptosis and increasing the animal survival. Moreover, potassium apigenin showed genoprotector and citoprotector effects against ionising radiation (radiation γ and X), with a protection factor of 27-35% in human lymphocytes and of 50-86% in two prostate cell lines. Finally, the flavonoid protected from the photoaging induced by UV radiation, diminishing epithelial dysplasia and dermal elastosis, two markers of skin cancer; furthermore, potassium apigenin was detected in some tissues, brain among them.