Submitted by Pós graduação Farmácia (ppgfar@ufba.br) on 2017-05-12T16:19:59Z No. of bitstreams: 1 ANTÍDIO DOS REIS.pdf: 3980549 bytes, checksum: 957292585ecd07fe1b26c22206466c42 (MD5) / Approved for entry into archive by Uillis de Assis Santos (uillis.assis@ufba.br) on 2017-05-15T13:55:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 ANTÍDIO DOS REIS.pdf: 3980549 bytes, checksum: 957292585ecd07fe1b26c22206466c42 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-15T13:55:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ANTÍDIO DOS REIS.pdf: 3980549 bytes, checksum: 957292585ecd07fe1b26c22206466c42 (MD5) / FAPESB e CNPq / A resistência bacteriana aos antibióticos tem aumentado a cada ano em todo o mundo e se tornado um problema de saúde pública. Uma das principais fontes de novos fármacos são as espécies vegetais. O objetivo deste trabalho foi avaliar a ação antibacteriana dos extratos e frações das partes aéreas e subterrâneas da Ertela (Monnieria) trifolia (L.) Kuntze (Rutaceae) e identificar quais são as possíveis moléculas responsáveis por esta atividade. Esta espécie foi selecionada a partir de um estudo etnobotânico realizado em um terreiro de candomblé de Salvador-BA, onde a mesma é utilizada tanto para fins medicinais como para fins ritualísticos. A extração da raiz e caule in natura foi realizada através da maceração a frio com diclorometano e por Soxhlet com metanol. O óleo essencial das folhas foi extraído por hidrodestilação em aparelho de Clevenger modificado e as folhas foram maceradas em metanol. Os testes de atividade antimicrobiana foram realizados através do método de difusão em disco, difusão em poço, concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM), segundo as recomendações do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), adaptados para produtos naturais. As cepas bacterianas utilizadas foram Staphylococcus aureus ATCC 25923 e 33591, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Salmonela enterica ATCC 13076 e três isolados clínicos de S. aureus multirresistentes. O óleo essencial das folhas, os extratos da raiz e o aquoso das folhas não apresentaram atividade antibacteriana frente às bactérias testadas. O extrato diclorometânico do caule apresentou atividade frente S. aureus ATCC 25923, ATCC 33591 e dois isolados clínicos; o extrato acetato de etila e o extrato clorofórmico das folhas foram ativos frente S. aureus ATCC 25923 e dois isolados clínicos. Nenhum extrato apresentou atividade frente às bactérias Gram negativas. Os resultados obtidos demonstram a tendência dos extratos inibirem bactérias Gram positivas. Os dados espectroscópicos em conjunto com o conhecimento da ocorrência de alcalóides derivados do ácido antranílico em Rutaceaes e a comparação com dados da literatura, sugeriram a presença dos alcalóides arborinina, evolitrina, esquimianina e dictamina nos extratos e frações bioativos. Estes alcalóides provavelmente são os responsáveis pela atividade antibacteriana da E. trifólia. / Bacterial resistance to antibiotics has increased each year throughout the world and became a public health problem. Plant species are major source of new drugs. The objective of this study was to evaluate the antibacterial activity of extracts and fractions of overhead and underground parts of Ertela (Monnieria) trifolia (L.) Kuntze (Rutaceae) and identify what are the possible molecules responsible for this activity. This species was selected from an ethnobotanical study conducted in a Candomblé temple in Salvador, Bahia, where it´s used both for medicinal and ritualistic purposes. The extraction from fresh root and stem was performed by cold maceration with dichloromethane and Soxhlet with methanol. The essential leaves oil was extracted by hydrodistillation in a modified Clevenger apparatus and the sheets were soaked in methanol. The antimicrobial activity tests were performed using the disk diffusion method, well diffusion, minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC), according to the recommendations of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), adapted for natural products. The bacterial strains used were Staphylococcus aureus ATCC 25923 and 33591, Escherichia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Salmonella enterica ATCC 13076 and three clinical isolates of S. aureus multidrug-resistant. The essential leaves oil, the root and the leaves aqueous extracts showed no antibacterial activity against any bacteria tested. The dichloromethane extract of the stem show activity against S. aureus ATCC 25923, ATCC 33591 and two clinical isolates; the ethyl acetate and chloroform extracts of the leaves were active against S. aureus ATCC 25923 and two clinical isolates. No extract showed activity against Gram-negative bacteria.. The results shows the trend of the extracts inhibit Grampositive bacteria. Spectroscopic data together with knowledge of the occurrence of alkaloids anthranilic acid derivatives in Rutaceae and comparison with literature data, suggested the presence of alkaloids arborinine, evolitrina, and esquimianina dictamnine in bioactive extracts and fractions. These alkaloids are probably responsible for the antibacterial activity of E. trifolia.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-12T11:44:55Z No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14058 bytes, checksum: 503c70b34831b52e566bcac5da6d8e71 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-12T11:44:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 resumo.pdf: 14058 bytes, checksum: 503c70b34831b52e566bcac5da6d8e71 (MD5) Previous issue date: 2001-08-13 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A produção de cogumelos por quatro isolados de Lentinula edodes, além da atividade antimicrobiana e a concentração de alguns nutrientes nesses cogumelos foram avaliadas. Os cogumelos foram cultivados em substrato à base de serragem, suplementado com farelos de arroz, de soja, de trigo, ou em combinações desses farelos. Os substratos foram umedecidos com chá mate a 0,1 % ou com água. Os cogumelos também foram produzidos em toras de eucalipto. A produtividade variou conforme o isolado e o substrato de cultivo. Constatou-se que em toras de eucalipto ocorreu uma maior produção de cogumelos do que nos substratos à base de serragem. Os extratos aquosos, correspondentes a 40mg de matéria seca dos cogumelos shiitake, inibiram o crescimento tanto de Bacillus subtilis como de Escherichia coli K-12. Esse efeito foi constatado independentemente do substrato, do estádio em que foram colhidos e do processamento, fresco ou desidratado. A fração do extrato solúvel em acetato de etila, nas concentrações equivalentes a 150μg e a 300μg da matéria seca do cogumelo, não inibiu nem B. subtilis nem E. coli pela técnica de difusão em disco de papel. Os teores de nitrogênio, de potássio, de fósforo, de magnésio e de cálcio variaram conforme o substrato de cultivo e em geral, a concentração desses nutrientes foi maior nos cogumelos cultivados em substratos à base de serragem. Os resultados confirmaram que o shiitake é boa fonte desses nutrientes. O nitrogênio foi o elemento mais abundante, seguido por fósforo, potássio, magnésio e cálcio. Além do isolado fúngico, o substrato de cultivo e a forma de processamento devem ser levados em consideração tanto na avaliação nutricional como na produção de substância(s) antimicrobiana (s) pelos cogumelos. / Mushroom production by four isolates of Lentinula edodes, the presence of substance (s) with antimicrobial activity, and the nutrient concentration in the basidiocarps were evaluated. The mushrooms were cultivated in sawdust enriched with rice, wheat, soybean bran, or a combination of two of these supplements. Additionally, the substrates were humidified with 0.1% tea extract or water. The mushrooms were also produced on eucalypt logs. Productivity varied among isolates and substrates on which the mushrooms were grown, and was highest in the logs. Antimicrobial activity of the water extract, corresponding to 40 mg of mushroom dry matter, inhibited both Bacillus subtilis and Escherichia coli K-12, regardless of the cultivation substrates, growth stage of mushrooms, and processing method (fresh or dried). The ethyl acetate soluble fraction, equivalent to 150 μg and 300 μg of mushroom dry matter, using the paper disk diffusion technique, inhibited neither B. subtilis nor E. coli. Nitrogen, phosphorus, potassium, magnesium and calcium concentrations varied according to the substrate on which the mushrooms were grown. Generally, these nutrients were higher when the mushrooms were cultivated on the sawdust- based substrates than on eucalypt logs. However, these results confirmed that shiitake is rich in these nutrients. Besides fungal isolate, the substrate of mushroom growth, and the processing method have to be considered in the nutritional evaluation of the mushrooms, as well as in the production of antimicrobial substance(s).

LIMA, Rejane Maria Moreira. Ação antimicrobiana e antioxidante in vitro das frações proteicas da microalga Scenedesmus obliquus. 2016. 86 f. Dissertação (Mestrado em Ciência e Tecnologia de Alimentos)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2016. / Submitted by Paulo Alencar (ppgcta@ufc.br) on 2017-06-23T17:39:38Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_rmmlima.pdf: 1690211 bytes, checksum: d0cfc868ddc16088a09ed8e8b65b3ce0 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-06-27T21:55:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_rmmlima.pdf: 1690211 bytes, checksum: d0cfc868ddc16088a09ed8e8b65b3ce0 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-27T21:55:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_rmmlima.pdf: 1690211 bytes, checksum: d0cfc868ddc16088a09ed8e8b65b3ce0 (MD5) Previous issue date: 2016 / The increase in research involving the extraction of biologically active compounds microalgae has recently around the world, thanks to the advancement of studies that demonstrate its potential biotechnology, and medical nutrition. The aim of this study was to evaluate the productivity of chlorophyll a, the rate of cell growth and the soluble protein content of microalgae obliquus Scenedesmus grown in vertical photobioreactor amid toilet cultivation (Water Culture) modified under controlled conditions of temperature and light. In addition, we evaluated the protein fractions subjected to precipitation with ammonium sulfate at different levels of saturation (0-20%, 20-40%, 40-60% and 60-80%), as the antifungal activity, using the disk diffusion method, and the antioxidant activity using the DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl). There was the quantification of the essential amino acid content present in the fraction with the highest activity. The results showed a production of 8.5 mg chlorophyll a / L Cell density Maximum (DCM) was 130 x 105 cells / ml and the protein concentration measured in protein fractions ranged from 0.485 to 1.042 mg / ml. The electrophoretic pattern of protein fractions delineated by a wide range of molecular weight ranging from 116 kDa and 14.4 kDa, predominantly greater concentration of proteins in the range between 21.5 and 45 kDa. The protein fractions tested (FrP0-20% FrP20-40% FrP40-60% and FrP60-80%) had antimicrobial effect against C. kefyr fungus, A. niger and A. fumigatus, but only a fraction FrP40-60 % and the control treatment showed inhibition zone for C. albicans. No treatment had inhibitory effect of growth of bacteria S. epidermidis, E. coli and P. aeruginosa. Only FrP fractions 40-60% and FrP60-80% showed growth inhibition of S. aureus. The FrP40-60% fraction showed superior results in all analyzes with a maximum of 85% antioxidant effect at a concentration of 0.8 mg / mL. Quantitative analysis of essential amino acids revealed the presence of Cys, Lys, Leu, Phe, Thr, Tyr, Val, Met, Ile and Trp. The results showed that Scenedesmus obliquus is a promising source of biocompounds that can be used in the manufacture of food supplements for humans and animals, cosmetics and medicines preparation. / O aumento de pesquisas envolvendo a extração de compostos biologicamente ativos de microalgas se deu recentemente em todo o mundo, graças ao avanço de estudos que comprovam o seu potencial biotecnológico, nutricional e medicinal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a produtividade de clorofila a, a taxa de crescimento celular e o teor de proteínas solúveis da microalga Scenedesmus obliquus cultivada em fotobiorreator plano vertical em meio de cultivo W.C. (Water Culture) modificado sob condições controladas de temperatura e luminosidade. Além disso, avaliou-se as frações proteicas submetidas à precipitação com sulfato de amônio em diferentes níveis de saturação (0-20%, 20-40%, 40-60% e 60-80%), quanto a atividade antifúngica, empregando o método de disco difusão, e a atividade antioxidante, utilizando o método DPPH (1,1-difenil-2-picrilhidrazil). Fez-se a quantificação do teor de aminoácidos essenciais presentes na fração que apresentou maior atividade. Os resultados demonstraram uma produção de clorofila a de 8,5 mg/ L, a Densidade Celular Máxima (DCM) foi de 130 x 105 cel/ mL e a concentração de proteínas nas frações proteicas avaliadas variou entre 0,485 a 1,042 mg/ mL. O perfil eletroforético das frações proteicas delineou-se por uma ampla faixa de peso molecular que variou entre 14,4 kDa e 116 kDa, predominando uma maior concentração de proteínas na faixa entre 21,5 e 45 kDa. As frações proteicas testadas (FrP0-20%, FrP20-40%, FrP40-60% e FrP60-80%) apresentaram efeito antimicrobiano contra os fungos C. kefyr, A. niger e A. fumigatus, porém somente a fração FrP40-60% e o tratamento controle apresentaram halo de inibição para C. albicans. Nenhum tratamento teve efeito inibidor do crescimento das bactérias S. epidermidis, E. coli e P. aeruginosa. Apenas as frações FrP 40-60% e FrP60-80% apresentaram inibição do crescimento da bactéria S. aureus. A fração FrP40-60% apresentou resultados superiores em todas as análises com um efeito antioxidante máximo de 85% na concentração de 0,8 mg/ mL. A análise quantitativa de aminoácidos essenciais revelou a presença de Cis, Lis, Leu, Fen, Tre, Tir, Val, Met, Ile e Trp. Os resultados evidenciaram que Scenedesmus obliquus é uma fonte promissora de biocompostos que podem ser utilizados na fabricação de suplementos alimentares para humanos e animais, elaboração cosméticos e de medicamentos.

OLIVEIRA FILHO, Rosueti Diógenes de. Incorporação de óleo essencial de manjericão em filmes biodegradáveis à base de galactomanana e óleo de canola. 2015. 77 f. Dissertação (mestrado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015 / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-03-22T18:12:30Z No. of bitstreams: 1 2016_rdoliveirafilho.pdf: 1493866 bytes, checksum: bece9362961e66588fbfbaff693bdd5d (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-05-18T18:27:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_rdoliveirafilho.pdf: 1493866 bytes, checksum: bece9362961e66588fbfbaff693bdd5d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-18T18:27:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_rdoliveirafilho.pdf: 1493866 bytes, checksum: bece9362961e66588fbfbaff693bdd5d (MD5) Previous issue date: 2015 / Biodegradable Packaging are used in foods as films or coatings formed by plant macromolecules such as animal, ensuring barrier properties and can serve as a carrier for antimicrobial compounds. The cell wall polysaccharides reservation, especially hemicelluloses as galactomannans, have been used widely as biodegradable polymer matrices films. The objective of this study was to evaluate the Basil essential oil (BEO) (Ocimum basilicum) incorporation in biodegradable films based on endospermic galactomannan Delonix regia seeds and canola oil (CO) (Brassica napus L.). The galactomannan (Gal) was isolated by aqueous extraction, followed by ethanol precipitation. The yield was 12.0% with high purity presented by low nitrogen content expressed protein (0.67%). The Gal showed an average intrinsic viscosity of 3.79 dL/g and molecular weight estimated in 1,04x106 g/mol. Infrared spectra by Fourier transform (FTIR) and nuclear magnetic resonance (NMR) 1H and 13C were similar to those found in the literature for other galactomannans. The fatty acid composition of CO by gas chromatography (GC-FID) showed oleic acid (62.07%), linoleic (18.91%) and heneicosanóico (6.61%) content. The major components of BEO determined by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS) were camphor (14.85%) and 1.8-cineole (3.48%). The films were formulated with galactomannan 1% (w/v), glycerol 0.5% (w/v) and CO at different concentrations, 0.25, 0.5 and 0.75% (w/v). The films were obtained by the solvent evaporation method (casting) and characterized as the moisture content, thickness, water vapor permeability (WVP), color and opacity. The CO promoted increase of WPV and reduced moisture content when compared to the film based only in galactomannan but no significant difference between concentrations. BEO was tested against the bacterial strains of Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Salmonella choleraesuis, Staphylococcus aureus and Candida albicans yeast by broth microdilution and showed minimum inhibitory concentration (MIC) ranging between 2.5 and 5.0 mg/ml and minimum bactericidal concentration (MBC) between 5.0 and 20.0 mg/ml. BEO was incorporated into film formulation with CO 0.5% (w/v) in different concentrations (2.5, 5.0 and 7.5 mg/ml). The antimicrobial films were obtained by casting and disks of 1 cm in diameter were excised and tested by the agar diffusion method and a contact zone and inhibition halos analyzed. S. aureus, E. coli and P. aeruginosa were sensitive to film containing BEO 5.0 mg/ml showed halos of 14, 15 and 16.3 mm, respectively. K. pneumoniae was inhibited only in the contact zone of the film, while S. choleraesuis and C. albicans were resistant to all formulations. However, the OC promoted changes in physical and barrier properties of the films of with galactomannan. BEO when incorporated into the film showed a moderate antimicrobial activity for potential application as bioactive packaging. / Embalagens biodegradáveis são coberturas utilizadas em alimentos na forma de filmes ou revestimentos, formadas por macromoléculas tanto de origem vegetal como de origem animal, que garantem propriedades de barreira e podem servir como veículo para compostos antimicrobianos. Os polissacarídeos de reserva de parede celular, principalmente as hemiceluloses como as galactomananas, vêm sendo extensamente usadas como matrizes poliméricas de filmes biodegradáveis. O objetivo deste trabalho foi avaliar a incorporação de óleo essencial de manjericão (OEM) (Ocimum basilicum) em filmes biodegradáveis à base de galactomanana endospérmica de sementes de flamboyant (Delonix regia) e óleo canola (OC) (Brassica napus L.). A Galactomanana (Gal) foi isolada por extração aquosa, seguida por precipitação em etanol. O rendimento determinado foi de 12,0%, com alto grau de pureza apresentado pelo baixo teor de nitrogênio expresso em proteína (0,67%). A Gal apresentou viscosidade intrínseca média de 3,79 dL/g e massa molar estimada de 1,04x106 g/mol. Os espectros de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR) e ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13C foram similares aos encontrados na literatura para outras galactomananas. A composição em ácidos graxos do OC por cromatografia a gás (GC-FID) apresentou teores de ácido oleico (62,07%), linoleico (18,91%) e heneicosanóico (6,61%). Os componentes majoritários do OEM determinados por cromatografia a gás acoplado à espectrometria de massas (GC-MS) foram cânfora (14,85%) e 1,8-cineol (3,48%). Os filmes foram formulados com Gal 1% (m/v), glicerol 0,5% (m/v) e OC em diferentes concentrações, 0,25, 0,5 e 0,75% (m/v). Os filmes foram obtidos pelo método de evaporação de solvente (casting) e caracterizados quanto ao teor de umidade, espessura, permeabilidade ao vapor de água (PVA), cor e opacidade. O OC promoveu aumento de PVA e diminuição do teor de umidade quando comparado ao filme apenas de galactomanana, mas sem diferença significativa entre as concentrações. O OEM foi testado frente às cepas bacterianas de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae, Salmonella choleraesuis, Staphylococcus aureus e levedura Candida albicans por microdiluição em caldo e apresentou concentração inibitória mínima (CIM) variando entre 2,5 e 5,0 mg/mL e concentração bactericida mínima (CBM) entre 5,0 e 20,0 mg/mL. A partir do filme com formulação de 0,5 % (m/v) de OC incorporou-se OEM em diferentes concentrações (2,5, 5,0 e 7,5 mg/mL). Os filmes antimicrobianos foram obtidos por casting e discos de 1 cm de diâmetro foram excisados e testados por método de difusão em ágar e a zona de contato e os halos de inibição analisados. S. aureus, E. coli e P. aeruginosa foram sensíveis ao filme contendo 5,0 mg/mL de OEM apresentando halos de 14, 15 e 16,3 mm, respectivamente. K. pneumoniae foi inibida apenas na zona de contato do filme, enquanto que S. choleraesuis e C. albicans foram resistentes à todas as formulações. Contudo, O OC promoveu alterações nas propriedades físicas e de barreira dos filmes de galactomanana e OEM quando incorporado ao filme apresentou uma atividade antimicrobiana moderada para potencial aplicação como embalagens bioativas.

A bacteriocina P34 é produzida por um Bacillus sp. e apresenta atividade antimicrobiana para diversas espécies de Listeria sp. e para L. monocytogenes ATCC 7644. Neste trabalho, foi pesquisada a presença de bactérias lácticas em lingüiça frescal de frango. Os resultados demonstraram o isolamento de seis culturas em placas de ágar MRS a 30ºC por 48 h. Cinco das seis linhagens isoladas inibiram o crescimento da L. monocytogenes após incubação a 30o C por 24 h. Os sobrenadantes brutos destas bactérias lácticas demonstraram efeito sinérgico quando adicionados em conjunto com a bacteriocina P34 frente ao microrganismo indicador, L .monocytogenes, pelo método de difusão em ágar com discos. Foi inoculada L. mononocytogenes ATCC 7644 em suspensão com 103 UFC/g em lingüiça frescal de frango no dia zero e recuperada em meio MOX nos dias zero, três, sete e dez da inoculação. Os resultados permitiram concluir que a bacteriocina P34 parcialmente purificada na concentração de 256 UA/g inibiu L. monocytogenes em todos os tempos. A bacteriocina P34 parcialmente purificada foi testada em envoltórios naturais de bovinos (tripas semi-secas salgadas) frente ao mesmo microrganismo indicador, L. monocytogenes ATCC 7644, demonstrando sua inibição in vitro. / The bacteriocin P34, produced by Bacillus sp., showed antimicrobial activity for many species of Listeria sp and L. monocytogenes ATCC 7644 . In this work, it was investigated the presence of lactic bacteria in fresh chicken sausage. The results demonstrated the isolation of six cultures in MRS agar plates at 30o C for 48h. Five of the six isolated strains inhibited the growing of the L. monocytogenes after incubation at 30ºC for 24h. The crude supernatants of these lactic bacteria demonstrated the synergic effect when it were added together with the bacteriocin P34 against indicator microorganism, L. monocytogenes ATCC 7644, using the method of diffusion in agar with paper discs. L. monocytogenes ATCC 7644 was inoculated in a suspension with 103 UFC/g in chilled chicken sausage and recovered in MOX counting from zero, three, seven and ten days from the inoculationt. The results allowed concluding that the P34 bacteriocin partially purified, in a 256 UA/g concentration, inhibited the indicator microorganism in all periods of time. At the same time, the partially purified P34 bacteriocin were tested in natural bovine wrapping ( salty semi-dried tripe ) using the same indicator micro-organism, L. monocytogenes ATCC 7644, demonstrating its inhibition in vitro.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós Graduação em Nutrição Humana, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-23T19:28:59Z No. of bitstreams: 1 2017_IzabelLucenaGadioli.pdf: 2079465 bytes, checksum: e0fecca414f0d711c10963616666e820 (MD5) / Rejected by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br), reason: Boa tarde, Por favor, adicione o campo Orientador. Atenciosamente. on 2018-03-26T19:19:35Z (GMT) / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2018-03-26T20:31:17Z No. of bitstreams: 1 2017_IzabelLucenaGadioli.pdf: 2079465 bytes, checksum: e0fecca414f0d711c10963616666e820 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-04-19T16:38:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_IzabelLucenaGadioli.pdf: 2079465 bytes, checksum: e0fecca414f0d711c10963616666e820 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-19T16:38:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_IzabelLucenaGadioli.pdf: 2079465 bytes, checksum: e0fecca414f0d711c10963616666e820 (MD5) Previous issue date: 2018-04-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES). / Introdução: as passifloras são plantas estratégicas no contexto dos alimentos funcionais e fitoterapia. O objetivo do presente estudo foi caracterizar extratos de folhas, polpas e sementes de Passiflora alata e P. setacea, nativas do Cerrado, quanto à sua composição química e propriedades biológicas, para formulação de nanoemulsões. Métodos: frutos maduros e folhas de passifloras silvestres, nativas do Cerrado, foram colhidos. As folhas foram secas a 50°C por cinco dias e depois pulverizadas. A partir dos frutos, obtiveram-se as polpas e as sementes, com o auxílio de uma despolpadeira. O preparo dos extratos de folhas foi realizado por infusão. Os extratos de polpas e sementes foram preparados com etanol e acetona 70%, a 80°C, por 30 minutos. Os extratos foram submetidos à liofilização. As nanoemulsões foram formuladas pelo processo de inversão de fase por temperatura (PIT). No experimento 1, os extratos de polpas, folhas e sementes de passifloras silvestres foram caracterizados quanto à sua composição em compostos fenólicos, aminas bioativas e aminoácidos, bem como avaliadas as atividades antioxidante e antimicrobiana. Os extratos com melhores resultados seguiram para o experimento 2, que visou a formular nanoemulsões de extratos de polpas e sementes de passifloras. Para isso, foram realizados testes de caracterização, estabilidade, além de avaliação das atividades antioxidante e antimicrobianas. Resultados: As sementes de P. setacea apresentaram maiores quantidade de compostos fenólicos (4.754,6 mg AGE/100 g MF), taninos (645,3 mg PB2E/100 g FW) e atividade antioxidante. Foi realizada a tentativa de identificação de 15 compostos fenólicos, compreendidos em 10 flavonoides e cinco ácidos fenólicos. A dosagem e identificação dos aminoácidos resultou num total de 16, dos quais 9 eram essenciais. A poliamina espermina só foi quantificada na polpa de P. alata, que também apresentou a maior quantidade de espermidina (1,6 mg/100 g FW). A concentração inibitória mínima das polpas e sementes variou de 0,5 a 8,0 mg/mL. Foi observada atividade bactericida nas sementes, contra E. coli (4,0-8,0 mg/mL). As nanoemulsões apresentaram diâmetro hidrodinâmico pequeno, menor que 30 nm, e índice de polidispersão baixo, menor que 0,2. O potencial zeta foi levemente negativo e variou de -0,6 a -0,8 mV para as polpas e -1,5 a -1,9 mV para as sementes. As nanoemulsões se mantiveram estáveis na maior parte do tempo do teste de estabilidade. A avaliação da atividade antioxidante das nanoemulsões demonstrou que os extratos potencializam sua atividade quando na escala manométrica, exceto o extrato de semente de P. setacea, que manteve a mesma atividade antioxidante. Os resultados de MIC das nanoemulsões não foram satisfatórios. Conclusão: as passifloras apresentaram boa qualidade em compostos fenólicos, aminas bioativas e aminoácidos, principalmente as sementes de P. setacea, com elevadas atividades antioxidante e atividade antimicrobiana. A nanoemulsificação dos extratos das passifloras foi um processo viável e contribuiu para manter a estabilidade dos compostos bioativos e melhorar a atividade antioxidante dos extratos. / Introduction: the present study aimed to characterize chemical composition and biological properties of extracts of leaves, pulps and seeds of Passiflora alata and P. setacea from the Brazilian savanna for nanoemulsions formulation. Methods: ripe fruits and leaves of wild passifloras from the Brazilian savanna were harvested. The leaves were dried at 50°C for five days. From the fruits, pulps and seeds were obtained with a depulper. Levaes extracts were prepared by infusion. The pulp and seed extracts were prepared with 70% ethanol and acetone at 80°C for 30 minutes. The extracts were lyophilized. Nanoemulsions were formulated by the phase inversion by temperature (PIT) process. In the experiment 1, extracts of pulps, leaves and seeds of wild passifloras were characterized for their composition in phenolic compounds, bioactive amines and amino acids, as well as the antioxidant and antimicrobial activities. The extracts with better results followed for experiment 2, which formulated nanoemulsions of pulps and seeds extracts of passifloras. For this, tests of characterization, stability, and evaluation of antioxidant and antimicrobial activities were performed. Results: P. setacea seeds showed higher total phenolic compounds (4,754.6 mg GAE/100 g FW), tannins (645.3 mg PB2E/100 g FW) and antioxidant activity. Fifteen phenolic compounds were tentatively identified, comprising 10 flavonoids and 5 phenolic acids. Amino acids identification and quantification resulted in a total of 16, of which 9 were essential. The polyamine spermine was only quantified in P. alata pulp, which also had the highest amount of spermidine (1.6 mg / 100 g FW). The minimum inhibitory concentration (MIC) of pulps and seeds ranged from 0.5 to 8.0 mg/mL. Only bactericidal effects were observed for the seeds against E. coli (4.0-8.0 mg/mL). The nanoemulsions presented small hydrodynamic diameter, >30 nm, and low polydispersity index, >0.2. The zeta potential was slightly negative and ranged from -0.6 to -0.8 mV for pulps and -1.5 to -1.9 mV for seeds. Nanoemulsions remained stable most of the time in the stability test. The evaluation of the antioxidant activity of the nanoemulsions demonstrated that the extracts potentiate their activity when in the manometric scale, except for P setacea seeds, which maintained the same antioxidant activity. The MIC results of the nanoemulsions were not satisfactory. Conclusion: the results showed that wild passifloras from Brazilian savanna presented good quality in phenolic compounds, bioactive amines and amino acids, especially the seeds of P. setacea, with high antioxidant activity and antimicrobial activity. Nanoemulsification of passifloras extracts was a viable process and contributed to maintain the the bioactive compounds stability and to improve the antioxidant activity of the extracts.

Flavonóides são compostos fenólicos de ampla ocorrência na natureza exercendo diversas funções fisiológicas nos vegetais. Na família Leguminosae estes metabólitos secundários exercem o papel de antimicrobianos (fitoalexina e/ou fitoanticipinas) e como moléculas sinalizadoras, na simbiose com bactérias do solo no processo de fixação biológica do Nitrogênio. O gênero Lupinus, pertencente a esta família, é encontrado em todas as regiões fisiográficas do estado do Rio Grande do Sul. Entretanto, não existem relatos de estudos químicos ou microbiológicos. Neste trabalho, foi analisado o perfil químico de folhas, flores, raízes, nódulos e legumes da espécie Lupinus lanatus. Foram isolados oito compostos fenólicos, dois deles não foram identificados devido ao baixo rendimento, um derivado do ácido cafeico isolado a partir das raízes teve sua estrutura parcialmente identificada. Quatro flavonóides tiveram suas estruturas elucidadas por métodos espectroscópicos e espectrométricos; três flavonas-C-glicosiladas: citisosídeo a partir das flores e folhas, ramnosil-O-vitexina e ramnosil-O-citisosídeo, a partir das folhas; e a isoflavona angustona A, a partir dos nódulos. Foi analisada a atividade antimicrobiana das flavonas pelo método da bioautografia frente a Bradyrhizobium sp. e Agrobacterium sp., microrganismos simbionte e patógeno, respectivamente, sendo que nenhum metabólito obteve resultado positivo, entretanto quando analisados pelo mesmo método frente a Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae e Escherichia coli o resultado foi positivo para ramnosil-O-vitexina. Foi avaliada a atividade antioxidante pelo método da DPPH para as flavonas, onde citisosídeo obteve resultado positivo.

As bactérias do gênero Paenibacillus são isolados de uma grande variedade de ambientes e tem como característica a produção e secreção de enzimas extracelulares, antimicrobianos e compostos antifúngicos inibidores de vários patógenos animais e vegetais. Os 55 isolados de 15 espécies de Paenibacillus foram testados frente a diversos substratos a fim de verificar a produção de enzimas extracelulares. Foram também testados frente a uma variedade de bactérias e fungos fitopatógenos, humanos e animais para a produção de antibióticos. Nessa triagem, P. validus, P. chibensis, P. koreensis e P. peoriae se destacaram inibindo a maioria das bactérias indicadoras. As espécies P. validus, P. chibensis e P. peoriae foram bons produtores de substancias que inibiram o crescimento de fungos, demonstrando que o gênero possui um amplo espectro de atuação. O tradicional procedimento de triagem para obterem-se novos microrganismos produtores de enzimas para fins biotecnológicos foi executado neste trabalho. As 55 linhagens foram avaliadas na sua capacidade de produzir amilase, proteases (caseinase), celulase, xantanase, xilanase, pectinase, quitinase e lipase. Os isolados se mostraram bons produtores de enzimas hidrolíticas, já que 26 apresentaram atividade xilanolítica, 17 atividade pectinolítica, 49 atividade proteolítica, 43 atividade xantanolítica, 40 atividade celulolítica, 17 atividade lipolítica, 39 atividade amilolítica em condições neutras (pH 7) e 26 atividade amilolítica em condições alcalinas (pH 10), e apenas 4 apresentaram atividade quitinolítica. Sendo assim, esses isolados são candidatos a serem utilizados como agentes biocontroladores ou podem ser explorados como produtores de antimicrobianos e de enzimas hidrolíticas de interesse.

As enterocinas são compostos de natureza protéica que apresentam atividade antimicrobiana contra bactérias patogênicas e deteriorantes de alimentos. Por esta razão, nos últimos anos, o interesse por estas substâncias tem aumentado devido ao seu uso potencial como biopreservante de alimentos. Realizando uma triagem com 352 cepas de Enterococcus spp para detectar atividade antimicrobiana, foram encontradas 18 cepas (5%) produtoras de enterocinas, pertencentes às espécies E. faecalis, E. faecium e E. mundtii todas provenientes de amostras de fezes de humanos. Destas cepas foram produzidos sobrenadantes livres de células e realizados testes para caracterização das enterocinas produzidas. As enterocinas produzidas pelas 18 cepas apresentaram o mesmo espectro de atividade antimicrobiana, inibindo 4 espécies do gênero Listeria, Lactobacillus plantarum e Salmonella Enteritidis. Todas foram parcialmente estáveis ao aquecimento (121ºC por 10 minutos), a variações de pH de 2 a 10 e a estocagem por 60 dias a 4ºC e a -20ºC. A sensibilidade a proteases confirmou a natureza protéica destas substâncias antimicrobianas. Com cinco sobrenadantes livres de células foram realizadas curvas de produção de enterocinas e todas iniciaram a produção na fase logarítmica de crescimento, indicando cinética de metabólito primário. Com estes sobrenadantes foi determinado o peso molecular aproximado de 3 KDa, utilizando a técnica de SDS-PAGE. As cepas com atividade antimicrobiana no sobrenadante livre de células não apresentaram os genes para produção das enterocinas A e B, mas 14 cepas de E. faecium apresentaram o gene para enterocina A e 9 para enterocina B, sendo que apenas uma cepa apresentou ambos os genes. Nenhuma das 18 cepas produtoras de enterocinas apresentou atividade hemolítica e presença de adesinas, todas apresentaram cápsula. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que estas enterocinas demonstram um potencial aplicabilidade em novos estudos relacionados aos biopreservantes.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas, 2018. / Submitted by Fabiana Santos (fabianacamargo@bce.unb.br) on 2018-08-31T18:25:44Z No. of bitstreams: 1 2018_LeandradeAlmeidaRibeiroOliveira_PARCIAL.pdf: 1234480 bytes, checksum: 0957d97570306cd3ce2f542f06f701e7 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-09-10T19:35:37Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_LeandradeAlmeidaRibeiroOliveira_PARCIAL.pdf: 1234480 bytes, checksum: 0957d97570306cd3ce2f542f06f701e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-10T19:35:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_LeandradeAlmeidaRibeiroOliveira_PARCIAL.pdf: 1234480 bytes, checksum: 0957d97570306cd3ce2f542f06f701e7 (MD5) Previous issue date: 2018-08-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) e Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPQ). / O objetivo desta pesquisa foi avaliar as atividades antimicrobiana e anti-inflamatória de vouacapanos de Pterodon emarginatus Vogel (Fabaceae). Foram utilizados frutos coletados nos municípios de Campestre e Bela Vista de Goiás (Estado de Goiás, Brasil). Somente na oleorresina dos frutos de Bela Vista de Goiás foram detectados diterpenos vouacapânicos e por isso essa amostra foi fracionada por partição. A fração diclorometano:hexano da oleorresina foi submetida a cromatografia em coluna aberta. Foi utilizada como fase estacionária Diaion HP-20 e como fase móvel acetonitrila:água, com força de eluição crescente. Foi desenvolvido um método analítico por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) para monitorar o fracionamento cromatográfico. As subfrações 7-12 (Grupo 1) foram reunidas e submetidas à separação por CLAE semi-preparativa em fase reversa. A atividade antimicrobiana dos vouacapanos e da oleorresina de Pterodon foi determinada frente a 8 cepas Gram-positivas, 11 cepas Gram-negativas e 4 espécies de Candida por meio do ensaio de microdiluição em placa. A citotoxicidade foi avaliada em células HaCaT pelo método colorimétrico do MTT - brometo de [3-(4,5-dimetiltiazol-2-ila)-2,5-difeniltetrazólio)]. O potencial anti-inflamatório foi determinado pelas seguintes avaliações: atividade inibitória frente à fosfolipase A2 por método fluorimétrico, expressão de COX-2 e NRF2, e quantificação das citocinas inflamatórias IL-6 e IL-8 por citometria de fluxo. As amostras foram testadas nas concentrações que mantiveram a viabilidade de 90% (CV90) das células HaCaT, para evitar o uso de concentrações citotóxicas nos ensaios anti-inflamatórios. Três compostos foram identificados via RMN: 6α,19β-diacetoxi-7β,14β-diidroxivouacapano (V1), 6α-acetoxi-7β,14β-diidroxivouacapano (V2) e 6α-acetoxi-7β-hidroxivouacapan-17β-oato de metila (V3). Os três vouacapanos e a oleorresina foram mais ativos frente às cepas Gram-positivas. Com relação às cepas Gram-negativas, as amostras testadas se mostraram ativas apenas frente à Pseudomonas aeruginosa. O vouacapano V2 foi o que exibiu melhor atividade antibacteriana, apresentando-se ativo frente a 7 das 8 bactérias Gram-positivas avaliadas, com valores de concentração inibitória mínima entre 62,5 e 125 μg/mL. As amostras testadas não apresentaram atividade inibitória frente às cepas C. glabrata, C. kruzei, C. parapsilosis e C. albicans. A oleorresina e os vouacapanos V1, V2 e V3 apresentaram CV90 de 7,5 μg/mL, 19,0 μg/mL, 13,8 μg/mL e 4,00 μg/mL, respectivamente, frente às células HaCaT. A oleorresina de Pterodon e os vouacapanos V2 e o V3 inibiram a atividade da fosfolipase A2 em 30,78%, 24,96% e 77,64%, respectivamente. Foi observado que os vouacapanos V2 e V3 nas CV90 inibiram a expressão de COX-2 em 28,3% e 33,17%, respectivamente. A oleorresina de sucupira foi capaz de inibir a produção de IL-6 em 35,47%. A expressão de NRF2 e a produção de IL-8 não foram alteradas pelas substâncias testadas, em relação ao controle. Os resultados dão sustentação ao uso popular dos frutos de sucupira como antibacteriano e anti-inflamatório e mostram que estas atividades podem estar associadas à presença de vouacapanos. / This research aimed to evaluate the antimicrobial and anti-inflammatory activities of Pterodon emarginatus Vogel (Fabaceae). The fruits were collected in the municipalities of Campestre and Bela Vista de Goiás (State of Goiás, Brazil). Diterpene vouacapanes were detected only in the oleoresin of the fruits of Bela Vista de Goiás, and so this sample was fractionated by partition. The dichloromethane: hexane fraction of this oleoresin was subjected to open column chromatography. Diaion HP-20 was the stationary phase and the mobile phase was acetonitrile: water with increasing elution force. An HPLC method was developed in order to monitor chromatographic fractionation. Subfractions 7-12 (Group 1) were pooled and subjected to reverse-phase semi-preparative HPLC separation. The antimicrobial activity of voucapans and Pterodon oleoresin was determined against 8 Gram-positive strains, 11 Gram-negative strains and 4 Candida species by plaque microdilution assay. Cytotoxicity was evaluated in HaCaT cells by the colorimetric method of MTT - [3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide]]. The anti-inflammatory potential was determined by the following evaluations: phospholipase A2 inhibitory activity by fluorimetric method, expression of COX-2 and NRF2 and quantification of inflammatory cytokines IL-6 and IL-8 by flow cytometry. Samples were tested at concentrations which maintained 90% viability (CV90) of HaCaT cells, in order to avoid the use of cytotoxic concentrations in anti-inflammatory assays. Three compounds were identified via NMR: 6α, 19β-diacetoxy-7β, 14β-dihydroxyivouacapane (V1), 6α-acetoxy-7β, 14β-dihydroxyivouacapane (V2) and methyl α-acetoxy-7β-hydroxyivacapan-17β-oate (V3). All three vouacapans and oleoresin were more active against Gram-positive strains. Regarding Gram-negative strains, the samples were only active against Pseudomonas aeruginosa. Vouacapane V2 showed the best antibacterial activity, proving to be active against 7 of the 8 Gram-positive bacteria evaluated, presenting values of minimum inhibitory concentration between 62.5 and 125 μg/mL. Samples had no inhibitory activity against the strains C. glabrata, C. kruzei, C. parapsilosis and C. albicans. The olororesin and V1, V2 and V3 had CV90 of 7.5 μg/mL, 19.0 μg/mL, 13.8 μg/mL and 4.00 μg/mL, respectively, against HaCaT cells. The Pterodon oleoresin and the V2 and V3 vouacapans inhibited phospholipase A2 activity by 30.78%, 24.96% and 77.64%, respectively. V2 and V3 vouacapans at CV90 inhibited COX-2 expression in 28.3% and 33.17%, respectively. Sucupira oleoresin was able to inhibit IL-6 production by 35.47%. The expression of NRF2 and the production of IL-8 were not altered by the substances tested, in comparison to the control. Results support the popular use of sucupira fruits as antibacterial and anti-inflammatory and show that these activities may be associated with the presence of vouacapans.