Orientador: Daniela Cardoso Umbelino Cavallini / Coorientador: Carla Raquel Fontana / Banca: Juliana Cabrini Carmello / Banca: Marlus Chorilli / Resumo: Os microrganismos probióticos associados a produtos alimentícios já são amplamente utilizados para a manutenção da saúde e redução do risco de certas doenças. Nesse contexto, diversos estudos mostram que cepas probióticas específicas têm grande potencial de manutenção e melhora da saúde oral, apresentando atividade anticariogênica, redução da halitose e prevenção de infecções oportunistas, como a candidose, frequentemente presente em indivíduos imunocomprometidos. Essas condições patogênicas apresentadas estão relacionadas à formação e estabelecimento de biofilmes na cavidade oral. As infecções provenientes de biofilmes são duradouras, altamente resistentes à farmacoterapia e de difícil eliminação. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi obter filmes orodispersíveis (ODF) contendo cepa probiótica Enterococcus faecium CRL 183, avaliando sua capacidade de inibir a formação e/ou maturação de biofilme de Candida albicans in vitro. Essa cepa foi selecionada devido as suas características de cultivo, informações disponíveis sobre efeito probiótico, segurança e caráter inovador, pois não há na literatura informações sobre a atividade antifúngica dessa cepa na cavidade oral. A segurança da cepa probiótica foi avaliada através do teste susceptibilidade a antimicrobianos. Para testar a capacidade de inibição de biofilmes de C. albicans in vitro foram formados biofilmes polimicrobianos (C. albicans + E. faecium), em diferentes proporções de fungo: probiótico (1:1; 1:10; 1:... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Probiotic microorganisms associated with food are already widely used to maintain health and reduce risk of certain diseases. In this context, several studies show that certain probiotic strains have great potential for maintenance and improvement of oral health, presenting anticariogenic activity, reduction of halitosis and prevention of opportunistic infections, such as candidiasis, often present in immunocompromised individuals. These pathogenic conditions are related to formation and establishment of biofilms in the oral cavity. Infections caused by biofilms are long-lasting, highly resistant to pharmacotherapy and difficult to eliminate. Thus, the objective of the present study is to obtain orodispersible films (ODF) containing Enterococcus faecium CRL 183, evaluating its capacity of inhibiting the formation and / or maturation of Candida albicans biofilms in vitro. This strain was selected due to its cultivation characteristics, available information on probiotic effect and safety and innovative character, as there is no information on the antifungal activity of this strain in the oral cavity. The safety of the probiotic strain was evaluated by antimicrobial susceptibility test. In order to test the ability to inhibit the formation of C. albicans biofilms in vitro, combined polymicrobial biofilms (C. albicans + E. faecium) with different proportions of opportunistic pathogens: probiotic were formed (1: 1, 1:10, 1: 100), during the formation (24 hours) and maturation (48... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Giovanna Rodrigues de Araujo Eleamen.pdf: 10221915 bytes, checksum: 528c62b7bbb4ef515ef8492b7879d457 (MD5) Previous issue date: 2013-04-22 / The 6CN10 is a 2-amino-thiophene derivative obtained from 2-amino-4,5,6,7tetrahydro-4H-benzo[b]thiophene-3-carbonitrile obtained through the reaction of Gewald, followed by condensation with 4-nitrobenzaldehyde. This drug showed good antifungal activity in in vitro tests, especially against Cryptococcus sp. and can be considered as a promising molecule for the development of a new antifungal drug. However, the therapeutic potential of 6CN10 is limited by its low water solubility. The formation of inclusion complexes between drugs poorly soluble in aqueous media and cyclodextrin has been one of the most used techniques to improve the solubility profile of drugs with low solubility in water. The present work aimed at obtaining inclusion complexes between 6CN10 and 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin and the characterization of this system. The inclusion complex of 2-hydroxypropyl-βcyclodextrin (HP-β-CD) and 6CN10 was prepared using the technique of lyophilization and characterized using the phase-solubility diagram, thermal analysis, FT-IR and Raman spectroscopy, X-ray diffraction and scanning electron microscopy. The phase solubility studies revealed a curve-type AL, suggesting the formation of inclusion complexes with 1:1 stoichiometry with a constant of stability of 96M . The water solubility of 6CN10 (2.4µg/mL) increased more than 29 times in the presence of 0.36M of HP-β-CD. Thermogravimetric analysis showed that the thermal stability of 6CN10 in the inclusion complex was improved due to additional interactions between the host and guest molecule. The reduction in the intensity and position of peaks in the spectra of FT-IR and Raman and the change in the crystallinity pattern of the complex 6CN10:HP-β-CD together with the observation of a product with features of a new amorphous single phase by scanning electron microscopy confirmed the formation of the inclusion complex. / O 6CN10 é um novo derivado 2-amino-tiofeno obtido a partir do 2-amino-4,5,6,7tetrahidro-4H-benzo[b]tiofeno-3-carbonitrila condensado com 4-nitrobenzaldeído. Este fármaco apresentou boa atividade antifúngica em testes in vitro, especialmente contra Criptococcus sp. e pode ser considerado como uma molécula promissora para o desenvolvimento de um novo medicamento antifúngico. No entanto, o potencial terapêutico do 6CN10 é limitado por sua baixa solubilidade em água. A formação de complexos de inclusão entre fármacos pouco solúveis em meio aquoso e ciclodextrina tem sido uma das técnicas mais utilizadas para melhorar o perfil de solubilidade de fármacos com baixa solubilidade em meio aquoso. O presente trabalho visou à obtenção de complexos de inclusão entre 6CN10 e 2-hidroxipropilβ-ciclodextrina e a caracterização desse sistema. O complexo de inclusão de 2hidroxipropil-β-ciclodextrina (HP-β-CD) e 6CN10 foi preparado utilizando a técnica de liofilização e caracterizado utilizando o diagrama de solubilidade de fase, análise térmica, espectroscopia de infravermelho e Raman, difratometria de raios-X e microscopia eletrônica de varredura. Os estudos de solubilidade de fases revelaram uma curva do tipo A L , sugerindo a formação de complexos de inclusão com estequiometria 1:1 com uma constante de estabilidade de 96M -1 . Na presença de 0,36M de HP-β-CD a solubilidade do 6CN10 (2,4µg/mL) aumentou mais de 29 vezes. Análise termogravimétrica mostrou que as estabilidade térmica do 6CN10 no complexo de inclusão foi melhorada devido a interação adicional entre o hospedeiro e a molécula hóspede. A redução da intensidade e posição dos picos nos espectros de FT-IR e Raman e a mudança na cristalinidade no difratograma do complexo 6CN10:HP-β-CD em conjunto com a observação de um produto com características amorfas e de fase única por microscopia eletronica de varredura confirmaram a formação do complexo de inclusão.

Orientador: Eduardo Bagagli / Banca: Sandra Maraes Gimenes Bosco / Banca: Virgínia Bodelão Richini Pereira / Resumo: As peritonites são sérias e frequentes complicações em pacientes submetidos à terapia de reposição renal, principalmente na diálise peritoneal ambulatorial contínua (CAPD, "continuous ambulatory peritoneal dialysis"). As infecções fúngicas, embora menos frequentes que as bacterianas, estão associadas a uma maior taxa de morbidade e mortalidade, e normalmente tornam impossíveis a CAPD, devido à necessidade de remoção do cateter. Este trabalho visou caracterizar e identificar as peritonites fúngicas com o uso de métodos morfofisiológicos e moleculares, além de avaliar seus perfis de sensibilidade e produção de biofilme in vitro em pacientes submetidos à CAPD do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. Foram avaliados trinta isolados de leveduras obtidos de episódios distintos de peritonites, que foram identificados por métodos morfofisiológicos (CHROMagar e auxanograma) e moleculares, tais como o sequenciamento de rDNA, perfil de restrição do gene SADH e padrão do intron do grupo I. Foram também realizados o perfil de sensibilidade antifúngica para as drogas anfotericina B, fluconazol, voriconazol e caspofungina pela técnica de microdiluição em caldo, seguindo o protocolo do CLSI M27-A3 e a produção de biofilme utilizando-se discos de silicone em reação com XTT (sal de tetrazol). Dos 30 isolados de leveduras, observou-se que as espécies de Candida parapsilosis foram as predominantes (n=10), seguida de Candida albicans (n=7), Candida tropicalis (n=6), Candida orthopsilosis (n=5), Candida guilliermondii (n=1) e Kodamaea ohmeri (n=1). Dentre os isolados de C. albicans, caracterizados pelo perfil de intron do grupo I, observou-se predomínio de genótipos do grupo A (n=5) e também a ocorrência de genótipos do grupo B (n=2). Todos os isolados foram sensíveis ao voriconazol e caspofungina, amostras de C.orthopsilosis (n=5), K.ohmeri (n=1), C.guilliermondii (n=1) e C. albicans (n=1) ... / Abstract: Not available / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-07-19Bitstream added on 2014-08-13T18:00:53Z : No. of bitstreams: 1 000750764.pdf: 553502 bytes, checksum: d8b9b96b06bbcfe3fb747913ca8ae054 (MD5) / As peritonites são sérias e frequentes complicações em pacientes submetidos à terapia de reposição renal, principalmente na diálise peritoneal ambulatorial contínua (CAPD, “continuous ambulatory peritoneal dialysis”). As infecções fúngicas, embora menos frequentes que as bacterianas, estão associadas a uma maior taxa de morbidade e mortalidade, e normalmente tornam impossíveis a CAPD, devido à necessidade de remoção do cateter. Este trabalho visou caracterizar e identificar as peritonites fúngicas com o uso de métodos morfofisiológicos e moleculares, além de avaliar seus perfis de sensibilidade e produção de biofilme in vitro em pacientes submetidos à CAPD do Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu. Foram avaliados trinta isolados de leveduras obtidos de episódios distintos de peritonites, que foram identificados por métodos morfofisiológicos (CHROMagar e auxanograma) e moleculares, tais como o sequenciamento de rDNA, perfil de restrição do gene SADH e padrão do intron do grupo I. Foram também realizados o perfil de sensibilidade antifúngica para as drogas anfotericina B, fluconazol, voriconazol e caspofungina pela técnica de microdiluição em caldo, seguindo o protocolo do CLSI M27-A3 e a produção de biofilme utilizando-se discos de silicone em reação com XTT (sal de tetrazol). Dos 30 isolados de leveduras, observou-se que as espécies de Candida parapsilosis foram as predominantes (n=10), seguida de Candida albicans (n=7), Candida tropicalis (n=6), Candida orthopsilosis (n=5), Candida guilliermondii (n=1) e Kodamaea ohmeri (n=1). Dentre os isolados de C. albicans, caracterizados pelo perfil de intron do grupo I, observou-se predomínio de genótipos do grupo A (n=5) e também a ocorrência de genótipos do grupo B (n=2). Todos os isolados foram sensíveis ao voriconazol e caspofungina, amostras de C.orthopsilosis (n=5), K.ohmeri (n=1), C.guilliermondii (n=1) e C. albicans (n=1) ...

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Jaqueline Oliveira (jaqueoliveiram@gmail.com) on 2008-11-25T16:49:56Z No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_FernandaMeloESilva.pdf: 2007298 bytes, checksum: 76d60a90eeef8b6d87445af7b2e853c0 (MD5) / Approved for entry into archive by Georgia Fernandes(georgia@bce.unb.br) on 2009-02-09T11:49:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_FernandaMeloESilva.pdf: 2007298 bytes, checksum: 76d60a90eeef8b6d87445af7b2e853c0 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-02-09T11:49:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTACAO_2008_FernandaMeloESilva.pdf: 2007298 bytes, checksum: 76d60a90eeef8b6d87445af7b2e853c0 (MD5) / As limitações terapêuticas, o desenvolvimento de resistência, a toxicidade relacionada a antifúngicos, as significantes interações medicamentosas e a biodisponibilidade insuficiente dos antifúngicos convencionais tornam necessários o desenvolvimento de medicamentos para tratar as novas e emergentes infecções fúngicas. O Cerrado é o segundo maior bioma do Brasil e foi identificado como um dos mais distintos biomas sulamericanos, constituindo uma importante fonte de moléculas vegetais inovadores para diversas condições, incluindo as doenças infecciosas. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar o potencial antifúngico de extratos de plantas do Cerrado utilizadas tradicionalmente para tratar infecções e feridas. Dos 66 extratos testados na concentração de 20 mg/mL, a atividade foi pouco expressiva sobre Candida albicans e 17 foram ativos para Trichophyton rubrum. Os extratos diclorometânicos da madeira do caule e da madeira da raiz de Kielmeyera coriacea, os hexânicos da folha de Renealmia alpinia e Stryphnodendron adstringens e o diclorometânico da madeira do caule de Tabebuia caraiba foram os mais promissores apresentando a média geométrica dos valores da concentração inibitória mínima (CIM) entre 170,39 e 23,23 µg/mL. Esse estudo mostra que extratos de plantas do Cerrado são de particular interesse como fonte de novos agentes para o tratamento de infecções dermatofíticas. Dessa forma, um estudo mais profundo, com isolamento de substâncias e análise sobre outras espécies de dermatófitos, permitiria uma melhor investigação da susceptibilidade desses fungos. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Therapeutic limitations, development of fungal drug resistances, drug-related toxicity, significant drug interactions and insufficient bioavailability of the conventional antifungal drugs make necessary the development of drugs able to treat the new and emerging fungal infections. The Cerrado is the second greater biome of Brazil and it was identified as one of the most distinguished biomes of South America, becoming an important source of innovative vegetal molecules to treat several conditions, including infectious diseases. Thus, the objective of this study is to evaluate the antifungal potential of Cerrado plants used to treat infections and wounds. Of the 66 extracts tested in the concentration of 20 mg/ml, none showed relevant activity against Candida albicans and 17 were active to Trichophyton rubrum. The dicloromethanic extracts of stem wood and root wood of Kielmeyera coriacea, the hexanic extracts of the leaves of Renealmia alpinia and Stryphnodendron adstringens, and the dicloromethanic extracts of stem wood of Tabebuia caraiba were the most promising, presenting geometric means of minimal inhibitory concentration (MIC) values between 170.39 and 23.23 µg/ml. The present study shows that extracts of Cerrado plants are of particular interesting as source of new agents to the treatment of dermatophytics infections. Therefore, a deeper study, with the isolation of substances and the analysis against other dermatophytes, would allow a better investigation of these fungi susceptibility.

Orientador: José Benedito Oliveira Amorim / Coorientadora: Liliana Scorzoni / Banca: Mônica Fernandes Gomes / Banca : Dayane Batista Tada / Resumo: A epidemiologia das infecções causadas por Candida sofreu mudanças nos últimos anos. Embora Candida albicans ainda seja o principal patógeno causador de candidíase, relatos recentes reportam o aumento da incidência de infecções causadas por espécies de Candida não-albicans. A toxicidade dos fármacos antifúngicos utilizados juntamente com o desenvolvimento da resistência tem se tornado um sério problema clínico. Com isso, atualmente existe a urgência na descoberta de novos compostos com atividades antifúngicas. Objetivos: avaliar a atividade antifúngica do fármaco Cloridrato de Verapamil, determinar a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Fungicida Mínima (CFM), frente à Candida albicans ATCC 18804, Candida krusei ATCC 6258, Candida parapsilosis ATCC 90018 e Candida glabrata ATCC 9030. Além de avaliar a citotoxicidade do fármaco em queratinócitos humanos (HaCaT). Metodologia: a determinação da CIM foi realizada pela técnica de microdiluição de acordo com The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST). A CFM foi determinada por plaqueamento em ágar Sabouraud de alíquotas provenientes das diluições do ensaio de microdiluição. A avaliação da citotoxicidade foi realizada pela técnica de redução da resazurina, sendo possível avaliar a atividade mitocondrial das células HaCaT. Resultados: o fármaco Cloridrato de Verapamil demonstrou atividade antifúngica contra as quatro espécies patogênicas de Candida, com o valor de CIM de 1250 µM; ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The epidemiology of Candida infections has changed in recent years. Although Candida albicans is still the main pathogen causing candidiasis, recent reports have reported an increase in the incidence of infections caused by nonalbicans Candida species. The toxicity of the antifungal drugs used together with the development of resistance has become a serious clinical problem. With this, there is now an urgency in the discovery of new compounds with antifungal activities. Objectives: To evaluate the antifungal activity of the drug Verapamil Hydrochloride, to determine the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and the Minimum Fungicidal Concentration (CFM) against Candida albicans ATCC 18804, Candida krusei ATCC 6258, Candida parapsilosis ATCC 90018 and Candida glabrata ATCC 9030 In addition to evaluating the cytotoxicity of the drug in human keratinocytes (HaCaT). Methodology: MIC determination was performed by the microdilution technique according to The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST). The CFM was determined by plating on Sabouraud agar from aliquots from the dilutions of the microdilution assay. The evaluation of cytotoxicity was performed using the resazurin reduction technique, and it was possible to evaluate the mitochondrial activity of HaCaT cells. Results: The drug Verapamil Hydrochloride demonstrated antifungal activity against the four pathogenic species of Candida, with MIC value of 1250 μM; CFM value greater than 1250 ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-05-03T16:29:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 8727950 bytes, checksum: 9b6175ee5adac06db497bf3862a7306a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-03T16:29:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 8727950 bytes, checksum: 9b6175ee5adac06db497bf3862a7306a (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este trabalho descreve a síntese, caracterização e avaliação da atividade antifúngica de dezoito alilsulfonamidas, seis sulfonamidas primárias e dois intermediários sintéticos. A primeira etapa de síntese ocorreu via reação de Morita-Baylis-Hillman mediante o acoplamento entre benzaldeído e acrilato de metila sob catálise com trimetilamina, utilizando metanol como solvente. O aduto resultante, 2-[hidroxi(fenil)metil]acrilato de metila (2) foi desidratado e convertido no (Z)-2-(bromometil)-3-(fenil)acrilato de metila (3) através de reação com brometo de lítio e ácido sulfúrico em acetonitrila. Nove alilsulfonamidas com dupla ligação C=C interna foram sintetizadas a partir do brometo 3 em reação com nove diferentes sulfonamidas primárias e carbonato de potássio, utilizando acetona como solvente, sob aquecimento. Uma alilsulfonamida com dupla ligação C=C interna (6e) foi sintetizada pela reação entre o aduto 2 e a 4-nitrobenzenossulfonamida em 1,2-dicloroetano, catalisada por ácido sulfúrico, sob aquecimento. Oito alilsulfonamidas com dupla ligação C=C externa à cadeia foram sintetizadas reagindo-se primeiramente o brometo 3 com DABCO em acetonitrila e, em seguida, pela adição de carbonato de potássio e da sulfonamida primária apropriada. As dezoito alilsulfonamidas obtidas são inéditas. Quatro sulfonamidas primárias utilizadas na rota sintética estão disponíveis comercialmente. As demais foram preparadas a partir de seus cloretos de sulfonila, em reação com amônia, sob aquecimento. O aduto 2, o brometo 3, e as sulfonamidas primárias sintetizadas foram caracterizados por temperaturas de fusão e espectroscopia vibracional no infravermelho, em comparação com dados da literatura. As alilsulfonamidas inéditas com fórmulas gerais PhCH=C(COOMe)G (onde G = -NHSO2Me, -NHSO2Et, -NHSO2Bu, - NHSO2Oct, -NHSO2Ph, -NHSO2PhF, -NHSO2PhCl, -NHSO2PhBr, -NHSO2PhI, -NHSO2PhNO2) e PhCH(G)C(COOMe)=CH2 (onde G =-NHSO2Et, -NHSO2Bu,- NHSO2Oct, -NHSO2PhF, -NHSO2PhCl, NHSO2PhBr,-NHSO2PhI,- NHSO2PhNO2) foram caracterizadas pelas técnicas já mencionadas, além de espectrometria de massas de alta resolução (HR-ESI-MS) e ressonância magnética nuclear (RMN) de 1H e 13 C. Os espectros vibracionais permitiram a identificação de algumas ligações químicas e grupos funcionais dos compostos inéditos. Os espectros de RMN de 1H e 13 C apresentaram o número de sinais, multiplicidades e deslocamentos químicos compatíveis com as estruturas propostas. As fórmulas moleculares sugeridas para cada composto foram confirmadas pelos espectros de HR-ESI-MS. Todos os compostos sintetizados tiveram sua atividade antifúngica avaliada frente a Colletotrichum acutatum. As alilsulfonamidas mais ativas, (E)-2-(butilsulfonamidometil)-3-fenilacrilato de metila e 2-[(4-clorofenil-sulfonamido)(fenil)metil]acrilato de metila, inibiram o crescimento de C. acutatum em 54 e 51%, respectivamente, na concentração de 1,5 mmol.L-1. As alilsulfonamidas foram, na maioria dos casos, mais ativas que as respectivas sulfonamidas primárias precursoras, sendo algumas destas inativas. Tais resultados sugerem que o caráter lipofílico associado ao valor de logP para cada composto é importante para a atividade antifúngica, visto que para todas as alilsulfonamidas os valores de logP foram superiores aos das sulfonamidas precursoras. Foi possível determinar o parâmetro IC 50 para o aduto 2 e para o brometo 3, correspondendo a 2,24 e 0,34 mmol.L -1, respectivamente. O composto 3 apresentou a atividade antifúngica mais promissora de todos os compostos testados, inibindo 100% do crescimento micelial de C. acutatum na concentração de 0,45 mmol.L -1, com uma atividade comparável à do fungicida comercial Mancozeb (valores de IC50 próximos), em ensaios biológicos in vitro. / This work describes the synthesis, characterization, and evaluation of the antifungal activity of eighteen allyl-sulfonamides, six primary sulfonamides, and two synthetic intermediates. The first step of the synthesis occurred via Morita- Baylis-Hillman reaction with the coupling between benzaldehyde and methyl acrylate, under trimethylamine catalysis, using methanol as solvent. The resulting adduct, methyl 2-[hydroxy(phenyl)methyl]acrylate (2), was dehydrated and converted into methyl (Z)-2-(bromomethyl)-3-(phenyl)acrylate (3) by the reaction with lithium bromide and sulfuric acid in acetonitrile. Nine allyl- sulfonamides with internal C=C double bond were synthesized from the bromide 3 in reaction with nine different primary sulfonamides and potassium carbonate using acetone as a solvent, under heating. One allyl-sulfonamide with internal C=C double bond C = C (6e) was synthesized by the reaction between the adduct 2 and 4-nitrobenzenesulfonamide in 1,2-dichloroethane, catalysed by sulfuric acid, under heating. Eight allyl-sulfonamides with internal C=C double bond were synthesized by the reaction of the compound 3 with DABCO in acetonitrile, followed by the addition of potassium carbonate and the appropriate sulfonamide to the reaction mixture. Four primary sulfonamides employed in the synthesis are commercially available. The remaining six sulfonamides were prepared from their respective sulfonyl chlorides in reaction with concentrated ammonia solution, under reflux. The adduct 2, the bromide 3 and the primary sulfonamides synthesized were characterized by their melting points and by infrared spectroscopy, in comparison with published data. The new allyl-sulfonamides with general formulae PhCH=C(COOMe)G (where G = - NHSO2Me, -NHSO2Et, -NHSO2Bu, NHSO2PhCl, -NHSO2PhBr, -NHSO2Oct, -NHSO2Ph, -NHSO2PhF, - -NHSO2PhI, -NHSO2PhNO2) and PhCH(G)C(COOMe)=CH2 (where G = -NHSO2Et, -NHSO2Bu, -NHSO2Oct, - NHSO2PhF, -NHSO2PhCl, -NHSO2PhBr, -NHSO2PhI, -NHSO2PhNO2) were characterized by the previously mentioned techniques, and by high-resolution electrospray ionization mass spectrometry (HR-ESI-MS) and nuclear magnetic resonance (NMR) of 1H and 13 C. The infrared spectra allowed the identification of some chemical bonds and functional groups of the unpublished compounds. The NMR spectra of 1H and 13 C showed the number of signals, multiplicities and chemical shifts compatible with the proposed structures. The molecular formulae suggested for each compound were confirmed by the HR-ESI-MS spectra. All the synthesized compounds had their antifungal activity evaluated against Colletotrichum acutatum. The most active allyl-sulfonamides, methyl(E)- 2-(butylsulfonamidomethyl)-3-phenylacrilateand methyl 2-[(4- chlorophenylsulfonamido)(phenyl)methyl]acrilate, inhibited the growth of C. acutatum in 54 and 51%, respectively, at the concentration of 1,5 mmol.L -1. Almost allallyl-sulfonamides were more active than the parent primary sulfonamides, some of which were inactive. As the allyl-sulfonamides presented higher logP values than their respective precursors, these results suggested that the greater lipophilic character of the allyl-sulfonamides is important for their antifungal activity. It was possible to determine the IC 50 values for the adduct 2 and the bromide 3, which corresponded to 2,24 and 0,34 mmol.L-1, respectively. The compound 3 exhibited the most promising antifungal activity of all tested compounds, showing 100% of inhibition of the mycelial growth of C. acutatum at 0,45 mmol.L-1, with an in vitro IC50 value close to the value for the commercial fungicide Mancozeb.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:54Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:03Z : No. of bitstreams: 1 000844265_20160216.pdf: 1037286 bytes, checksum: 2d34cb446cc67885f158101473477c9d (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-18T10:00:23Z: 000844265_20160216.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-18T10:01:05Z : No. of bitstreams: 1 000844265.pdf: 1992846 bytes, checksum: e982fa28a44e80071f8508bc440c112d (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O presente trabalho descreve a síntese, caracterização e estudo das propriedades antimicrobianas de derivados anfifílicos de quitosana contra o fungo Aspergillus flavus. A quitosana utilizada nas sínteses foi obtida a partir da reação de desacetilação heterogênea de quitosana comercial. O grau médio de desacetilação foi determinado por Ressonância Magnética Nuclear de Hidrogênio, cujo resultado foi de 97,3%. As massas moleculares das quitosanas comercial e desacetilada foram determinadas por cromatografia de permeação em gel e os resultados obtidos foram 338,46 kDa e 137,12 kDa, respectivamente. Os derivados anfifílicos foram sintetizados em um processo de duas etapas: inicialmente realizou-se a alquilação da quitosana desacetilada pela inserção de uma proporção fixa de grupos dodecila (4%) na cadeia polimérica com posterior redução da base de Schiff empregando-se borocianohidreto de sódio. Em seguida foram inseridas proporções crescentes do grupo quaternário pentiltrimetilamônio. Os graus de substituição com grupos dodecila (GSDD) e grupos pentiltrimetilamônio (GDPE) foram determinados por RMN de 1H. O GSDD obtido foi de 4,0%, enquanto que os GDPE foram de 4,8; 12,7 e 46,3%. Todos os derivados sintetizados foram testados in vitro contra o fungo Aspergillus flavus em concentrações crescentes. Os ensaios microbiológicos mostraram que os derivados modificados com grupos dodecila e pentiltrimetilamônio são mais eficientes em inibir o crescimento do fungo Aspergillus flavus quando comparado à quitosana desacetilada e que a presença de grupos hidrofóbicos na cadeia do polímero proporciona uma interação mais forte com a membrana celular. Os resultados dos estudos utilizando modelos de membranas corroboraram com os dos ensaios microbiológicos, evidenciando que a presença de grupos dodecila na cadeia da quitosana aumenta a interação com as vesículas, resultando em... / In this work is described the synthesis, characterization and study of antimicrobial properties of amphiphilic derivatives of chitosan against Aspergillus flavus. Deacetylated chitosan was obtained from the heterogeneous deacetylation of the commercial chitosan. The degree of deacetylation was determined by Hydrogen Nuclear Magnetic Resonance and the result was 97.3%. Molecular weights of commercial and deacetylated chitosans were determined by gel permeation chromatography and the obtained values were 338.46 kDa and 137.12 kDa, respectively. The hydrophobic derivatives were synthesized by a reductive amination reaction with dodecylaldehyde followed by reduction with sodium cyanoborohydride. Next increasing proportions of the quaternary group pentyltrimethylammonium was inserted on hydrophobic derivative. The degrees of substitution by dodecyl (4.0%) and pentyltrimethylammonium groups (4.8, 12.7 and 46.3%) were determined by Hydrogen Nuclear Magnetic Resonance. All synthesized derivatives were tested in vitro against Aspergillus flavus at increasing concentrations. The results showed that the modified derivatives with pentyltrimethylamonnium and dodecyl groups are more effective in inhibiting the growth of the fungus Aspergillus flavus when compared to deacetylated chitosan and the presence of hydrophobic groups in the polymer chain provides a stronger interaction with the cell membrane. The results of studies with model membranes agreed with the results of microbiological tests, showing that the presence of hydrophobic groups in chitosan backbone increases the interaction with lipid vesicles resulting in an increase in vesicles diameter and zeta potential. At first, it can be postulated that the mechanism of chitosan action against fungi is favored by hydrophobic interactions between chitosan derivatives and membrane lipids and may involve the adsorption on the cell wall and cell membrane disruption...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-14Bitstream added on 2014-06-13T19:14:38Z : No. of bitstreams: 1 scorzoni_l_me_arafcf.pdf: 1618197 bytes, checksum: eb9318b4559acb7fd55cac086d26db34 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As novas descobertas tecnológicas e o avanço da medicina têm proporcionado a sobrevida de muitos pacientes. No entanto, estes passam a ser mais suscetíveis a infecções, principalmente por fungos. O aumento dessas infecções tem gerado problemas no tocante ao diagnóstico, bem como na terapêutica empregada. A disponibilidade de antifúngicos na prática médica é relativamente pequena, algumas vezes ineficiente e com toxicidade elevada. Recentemente, houve um agravante do quadro devido ao surgimento de resistência a determinadas drogas, o que reforçou a demanda por novas alternativas terapêuticas. Nosso país é privilegiado pela grande biodiversidade. A busca por novos alvos, o entendimento dos mecanismos de virulência, bem como os de resistência microbiana são fundamentais diante do quadro atual. O objetivo deste estudo foi pesquisar extratos e substâncias de plantas com atividade antifúngica para Candida albicans e C. krusei, selecionar os de maior atividade e verificar o perfil de proteínas de ambas as leveduras, antes e após o contato com a substância de origem vegetal, realizando sua caracterização. Os extratos acetato de etila (AcOEt) e etanólico (EtOH) de Kielmeyera rubriflora foram os que apresentaram maior atividade antifúngica. Os componentes protéicos de C. albicans sem tratamento e tratados com 1400 mg/mL de fluconazol e 1000 mg/mL dos extratos AcOEt e EtOH foram analisados por SDS-PAGE e eletroforese bidimensional. O tratamento com fluconazol revelou modificações na expressão de nove proteínas, que variaram seus pIs de 5,64 a 6,67 e massa molecular de 59,1 a 17,4 kDa, enquanto que os extratos de plantas influenciaram na expressão de 10 e 11 proteínas, respectivamente. O extrato AcOEt influenciou na expressão de proteínas na faixa de pIs de 5,7 a 5,2, massa molecular de 90,5 a 18,8 kDa, enquanto que o... / The new discoveries and technological advances in medicine have provided the survival of many patients. However, they become more susceptible to infections, mainly by fungi. The increase in these infections has created problems regarding the diagnosis and the therapy employed. The availability of antifungals in medical practice is relatively small, inefficient and sometimes with high toxicity. Recently, there was an aggravating problem due to the emergence of resistance to certain drugs, which increased the demand for new alternative therapies. Our country is privileged in biodiversity. The search for new targets, the understanding of the mechanisms of virulence, as well as, the microbial resistance is essential before the current framework. This study aimed to find extracts of plants and substances with antifungal activity to Candida albicans and C. krusei, select the extracts with the best activity and verify the profile of proteins of both yeasts, before and after contact with the ethyl acetate (AcOEt) and ethanol (EtOH) extracts from Kielmeyera rubriflora, performing its characterization. The AcOEt and EtOH extracts from K. rubriflora had the greater antifungal activity. The C. albicans and C. krusei cells proteins untreated and treated with 1400 mg / mL of fluconazole and 1000 mg / mL of AcOEt and EtOH extracts were analyzed by SDS-PAGE and two-dimensional electrophoresis. Treatment with fluconazole revealed changes in the expression of nine proteins, which varied its pIs of 6.67 to 5.64 and molecular weight of 59.1 to 17.4 kDa, while the plants extracts influenced the expression of 10 and 11 proteins, respectively. The AcOEt extract influenced the expression of proteins in the range from pIs of 5.7 to 5.2, molecular weight of 90.5 to 18.8 kDa, while the EtOH in pIs of 5.8 to 7.4, and mass molecular of 89.2 to 16.3 kDa. The plants extracts ...(Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-23Bitstream added on 2014-06-13T20:16:29Z : No. of bitstreams: 1 soares_la_me_arafcf.pdf: 482117 bytes, checksum: 977f1b9fe29b6c45730789f06700afaa (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / São evidentes a necessidade de novas substâncias antifúngicas e a grande importância dos produtos naturais no desenvolvimento de novas ferramentas terapêuticas. Assim, neste estudo avaliou-se a atividade antifúngica dos derivados sintéticos esterificados do ácido protocatecuico. Todos os isolados apresentaram bons resultados ao teste de suscetibilidade aos derivados sintéticos do ácido protocatecuico demonstrando que 62,5% foram ativos em relação para dois isolados de T. rubrum (Tr1 e Tr2), T. rubrum MYA 3108 (Tr3) e isolado clínico T. interdigitale (Tm1) e 68,7%, para isolado clínico T. interdigitale (Tm2) e T. interdigitale ATCC 40131 (Tm3) dos 16 compostos testados. Como referência para avaliação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) foram considerados todos os resultados com valores ≤ 62,5 ug\mL. A combinação fluconazol mais protocatecuatos de pentila, hexila, heptila, octila e nonila foi aditivo para isolados clínicos Tr1, Tm1 e Tm3, exceto a combinação com fluconazol mais protocatecuato de heptila, que revelou um efeito sinérgico contra Tm3. A griseofulvina em combinação com protocatecuato de nonila mostrou atividade sinérgica em duas linhagens de dermatófitos, atividade aditiva para quatro linhagens. Oito derivados do ácido protocatecuico foram associados quimicamente com o miconazol sendo encontradas interações sinérgicas e aditivas. Foi testada a associação entre protocatecuatos e o antifúngico nistatina, resultando interações antagônicas, demonstrando assim que o polieno... / There is a clear need for new antifungal compounds, and the importance of natural products in the development of novel therapeutic tools. In this study, it was evaluated the antifungal activity of protocatechuic acid esters. All of the fungus isolated showed good results when testing susceptibility to synthetic derivatives of protocatechuic acid, showing that 62.5% were active against two strains of T. rubrum (Tr1 e Tr2), T. rubrum MYA 3108 (Tr3) and clinical isolate T.interdigitale (Tm1) and 68.7% for clinical isolate of T. interdigitale (Tm2) and T. interdigitale ATCC 40131 (Tm3) of the 16 compounds tested. Reference values of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) were considered ≤ 62.5 ug/ mL. The combination of fluconazole plus pentyl, hexyl, heptyl, octyl and nonyl protocatechuates was additive to clinical isolates Tr1, Tm1 and Tm3, except the combination fluconazole plus heptyl protocatechuate, which showed a synergistic effect on Tm3. Griseofulvin in combination with nonyl protocatechuate exhibited synergistic activity two towards dermatophyte strains, additive interaction for four strains. When eight protocatechuic acid derivatives were chemically associated with miconazole, were observed synergistic and additive effects. We tested the association between protocatechuates and nystatin, resulting in antagonistic interactions. Thus it demonstrated that have not a polyene antifungal best when... (Complete abstract click electronic access below)