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Modelo experimental de paralisia cerebral: implicações da desnutrição perinatal sobre atividade locomotora e metabolismo proteico muscular em ratos

SILVA, Kássia de Oliveira Gomes 27 February 2014 (has links)
Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2015-05-26T12:58:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Kássia de Oliveira (completa).pdf: 1873521 bytes, checksum: 4b3c16aa02cf5e18e149dabb924a0328 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-26T12:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Kássia de Oliveira (completa).pdf: 1873521 bytes, checksum: 4b3c16aa02cf5e18e149dabb924a0328 (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / FACEPE / A Paralisia Cerebral (PC) é uma das maiores causas de disfunção motora crônica na infância e a desnutrição no período de gestação e lactação é caracterizada por apresentar danos aos circuitos neurais, com efeitos no crescimento e comportamento alimentar e deficiências na musculatura esquelética. A PC e a desnutrição podem estar associadas em populações de países subdesenvolvidos, onde a oferta de nutrientes é escassa e a quantidade de crianças com PC é expressiva. O objetivo deste estudo foi verificar, em um modelo de paralisia cerebral experimental, o efeito da desnutrição sobre a atividade locomotora e o metabolismo de proteínas miofibrilares (MuRF-1 e Atrogin-1). Ratas gestantes foram divididas em dois grupos de acordo com a dieta fornecida: Normonutrido (N, n=9) e Desnutrido (D, n=12). Após o nascimento, os filhotes foram subdivididos em quatro grupos experimentais: Normonutrido Controle (NC, n=16), Normonutrido PC (NPC, n=21), Desnutrido Controle (DC, n=20) e Desnutrido PC (DPC, n=18). Os animais dos grupos com Paralisia Cerebral foram submetidos à anóxia perinatal no dia do nascimento (P0) e no dia seguinte (P1) com fluxo de 9l/min de Nitrogênio (N2 99,9%) por um período de 12 minutos cada dia, e à Restrição sensório-motora do 2º ao 28º dia de vida pós-natal (P2 ao P28), utilizando uma órtese de epóxi presa ao quadril do animal, por um período de 16 horas cada dia, de modo a manter suas patas posteriores estendidas. A atividade locomotora dos animais de todos os grupos foi analisada aos 8, 14, 17, 21 e 28 dias de vida pós-natal. Aos 29 dias foram coletados os músculos sóleos dos animais para análise de proteínas miofibrilares MuRF-1 e Atrogin-1. Animais com PC apresentaram redução do peso corporal (p<0,001) e piora de vários parâmetros da atividade locomotora (p<0,05) comparando com seu grupo controle. A desnutrição reduziu o peso corporal (p<0,05), a potência média e o gasto de energia (p<0,05) e a massa muscular do Sóleo (p<0,001). A Expressão de Atrogin-1 não se mostrou alterada em nenhum grupo enquanto a de MuRF-1 esteve aumentada no grupo DPC. A PC promove atrofia muscular e diminuição da locomoção. Quando associada à desnutrição, a atrofia muscular é acompanhada de aumento da degradação proteica muscular.
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Desnutrição neonatal e desenvolvimento neuromuscular: avaliação da maturação da excitabilidade reflexa e da atividade locomotora em ratos

Rogério de Freitas Silva, Sebastião January 2007 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T23:02:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8589_1.pdf: 2547000 bytes, checksum: dfc5849157201cafc7fb3b030f67a0a9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Foram averiguados os efeitos da desnutrição neonatal sobre o desenvolvimento da excitabilidade reflexa (ER) e da atividade locomotora (AL) em ratos. Foram realizados três estudos: 1- Efeitos da desnutrição sobre reflexo Hoffmann (H) e reflexo Tendinoso (T) ao desmame. Observamos que a relação Hmax/Mmax foi menor em desnutridos. A relação Tmax/Mmax foi menor nos tratados com dieta básica regional (DBR) que nos controles. 2- A maturação reflexa é afetada pela desnutrição? Investigamos, entre o desmame e a idade adulta, a maturação da ER. Nos desnutridos houve redução na latência do Reflexo H e no índice de velocidade de condução nervosa, mas não da ER em todas as idades estudadas, exceto do Reflexo T aos 21 dias. 3-Efeitos da suplementação protéica de dieta deficiente sobre evolução da AL. Avaliamos a suplementação de dieta deficiente durante aleitamento. Houve redução de peso nos desnutridos independentemente da suplementação protéica. Na AL, observamos menor velocidade e percurso no 14° dia em desnutridos DBR, mas não nos suplementados. A potência muscular aos 21 dias de idade foi menor nos desnutridos, embora tenha sido maior naqueles suplementados. Concluímos que: A desnutrição afeta a ER avaliada no desmame e parece não alterar de maneira permanente a ER em ratos recuperados após o desmame; A suplementação protéica da DBR minimiza os efeitos negativos desnutrição sobre o desenvolvimento somático e locomotor
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Efeitos do treinamento físico de resistência sobre a atividade locomotora de ratos adultos submetidos à dieta hipoprotéica durante a gestação e lactação

SANTOS, José Antônio dos 11 November 2015 (has links)
Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-06-30T18:16:42Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Jose Antonio dos Santos.pdf: 1576661 bytes, checksum: 5dd6d4ea9a940fe7bd6e6b346f4c8fab (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-30T18:16:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) TESE Jose Antonio dos Santos.pdf: 1576661 bytes, checksum: 5dd6d4ea9a940fe7bd6e6b346f4c8fab (MD5) Previous issue date: 2015-11-11 / CAPES / O objetivo do primeiro estudo foi avaliar os efeitos do treinamento de resistência sobre a morfologia muscular e sobre a expressão gênica de fatores neurotróficos no sistema nervoso central. Foram utilizados 31 ratos machos Wistar (65±5 dias de vida). Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: Não-Treinado (NT, n=13) e treinado (T, n=18). Animais do grupo T foram submetidos a um protocolo de treinamento físico de resistência diário, 5 dias por semana, durante 8 semanas, com 80% da sobrecarga máxima individual acessada semanalmente. O sacrifício foi realizado 48 horas após a última sessão de treinamento e os tecidos removidos e congelados imediatamente. Foi avaliado a histologia dos músculos sóleo e extensor digital longo (EDL), n=6 por grupo) através da técnica da ATPase miofibrilar. Para análise da expressão gênica (n=5 por grupo) de fator neurotrófico derivado do cerebro (BDNF) e fator de crescimento semelhante a insulina-1 (IGF-1) no córtex motor, medula espinal e cerebelo foi utilizada a técnica do PCR em tempo real. No Músculo EDL, Animais T apresentaram um aumento na proporção de fibras tipo IIb e redução de fibras tipo IIa. Expressão de genes para IGF-1 foi reduzida no cerebelo de animais T. O objetivo do segundo estudo foi avaliar os efeitos do treinamento de resistência diário na atividade locomotora (LA) em animais desnutridos no período perinatal. Ratos Wistar machos foram divididos em dois grupos de acordo com a dieta da mãe durante a gestação e lactação: controle (17% de caseína, C) e hipoproteica (8% de caseína, LP). Aos 60 dias, metade de cada grupo foi submetido a um treinamento de resistência (subida em escada, 5 dias/semana, durante 8 semanas, com 80% de sobrecarga máxima avaliada semanalmente, T e LP+T). Para a analise da LA, os ratos foram filmados antes e após 8 semanas de treinamento em campo aberto e as imagens foram analisadas pelo software para análise automática de atividade locomotora. Este software fornece: distância percorrida (metros); distância rotacional (metros); velocidade média (m/s); velocidade máxima (m/s); potência média (mW); tempo imóvel (s); número de paradas; tempo por parada (segundos). Após o treinamento, os filhotes T apresentaram menor potência média (C: 3,6±1,7; T: 1,5±0,5), número de paradas (C: 55,3±7,6; T: 35,7±8,0) e maior tempo por parada (C: 1,7±0,4; T: 3,0±0,8) quando comparado ao controle. Para filhotes LP+T, não houve diferenças em todas as variáveis quando comparados aos filhotes LP, com exceção da distância percorrida, que foi menor (LP: 12,5±2,7; LP+T: 8, 4±2,8). Comparando os valores pós com os pré treinamento, filhotes LP+T, diferentemente do grupo LP, apresentam diminuição da distância percorrida (LP: pré=14,3±3,5; pós= 12,5±2,7; LP+T: pré=14,0±3,1; pós=8,4±2,8). Em conclusão, nossos dados mostram que 8 semanas de treinamento de resistência diário foi suficiente para aumentar a capacidade de carregamento máxima e em aumentar a proporção de fibras musculares tipo IIb. O treinamento de resistência diário também altera a atividade locomotora tanto de animais controle quanto de animais desnutridos. / The objective of the first study was to evaluate the effects of a resistance training on the fiber type morphology and brain neurotrophic factors in young rats. Thirty-one male Wistar rats (65 ± 5 days old) were randomly divided in two groups: non-trained (NT, n=13) and trained (T, n=18). Animals from T group were submitted to a program of daily resistance training (5 days per week during 8 weeks) at 80% of individual maximum overload. This test was weekly performed to adjust the individual load throughout the weeks of training. After 48 hours from the last session of exercise, soleus and extensor digital longus (EDL) muscles were removed for myofibrillar ATPase staining analysis. Spinal cord, motor cortex and cerebellum were removed for real time RT-PCR analysis of BDNF and IGF-1 gene expression. In EDL muscle, T animals showed an increase in the proportion of type IIb fibers and a reduction of type IIa fibers. IGF-1 gene expression was reduced in the cerebellum of T animals (NT: 1.025±0.12; T: 0.57±0.11). The purpose of the second study was to evaluate the effects of daily resistance training on locomotor activity in undernourished animals during perinatal period. Male Wistar rats were divided into two groups according to their mother’s diet during gestation and lactation: control (17% casein, C) and low-protein (8% casein, LP). On postnatal day 60, half of each group was submitted to daily resistance training (climb ladder, 5 days/week, during 8 weeks, with 80% of maximum overload weekly evaluated, T and LP+T) or not. To LA analyses the rats were filmed before and after 8 weeks of training on open field and the images were analyzed by the software for automatic analyze of locomotor activity. This software provides: distance traveled (meters); rotational distance (meters); average speed (m/s); maximum speed (m/s); average potency (mW); time immobile (s); number of stops; time/stop (seconds). After training, T pups showed a reduced average potency (C: 3.6±1.7; T: 1.5±0.5), number of stops (C: 55.3±7.6; T: 35.7±8.0) and high time/stop (C: 1.7±0.4; T: 3.0±0.8) when compared to control. For LP+T pups, there were no differences in all variables when compared to control and LP pups, except for distance traveled that was reduced when compared to LP pups (LP: 12.5±2.7; LP+T: 8.4±2.8). Compared post versus pre period of physical training, LP + T pups, different to LP group, present decreased distance traveled (LP: pre=14.3±3.5; post= 12.5±2.7; LP+T: pre=14.0±3.1; post= 8.4±2.8). In conclusion, our data show that 8 weeks of daily strength training was sufficient to increase the maximum loading capacity and increasing the proportion of muscle fiber type IIb. Daily resistance training also changes the locomotor activity of both control animals as of malnourished animals.
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Dietas hiperlipídicas materna: repercussões sobre a ontogenia de reflexos e da atividade locomotora da prole de ratos

BURBANO, Erika Vanesa Cadena 24 February 2017 (has links)
Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-05T19:14:48Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Erika Vanesa Cadena Burbano.pdf: 1553443 bytes, checksum: f9478b62df84776430bd6785b421b034 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-05T19:14:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Erika Vanesa Cadena Burbano.pdf: 1553443 bytes, checksum: f9478b62df84776430bd6785b421b034 (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / IECE / O objetivo deste estudo foi avaliar, na prole, as repercussões das dietas hiperlipídicas materna isocalórica ou hipercalórica sobre a ontogenia de reflexos e da atividade locomotora. Foram utilizadas 29 ratas fêmeas da linhagem Wistar. Classificadas de acordo com a dieta recebida durante a gestação e lactação em: Grupo Controle (C, n=11), Grupo Hiperlipídica/Isocalórica (HI, n=9), Grupo Hiperlipídica/Hipercalórica (HH, n=9). Cada ninhada foi formada pela mãe e 8 filhotes. Somente os filhotes machos foram avaliados. Do 1º ao 21º dia pós-natal, a prole foi avaliada quanto a reflexos, características físicas e crescimento somático. Os animais foram filmados no 8º, 14º, 17º, 21º, 30º, 45º e 60º dia pós-natal, em campo aberto durante 5 minutos. Após o desmame a prole recebeu dieta padrão de laboratório e o peso corporal continuou sendo avaliado até o fim do experimento. Durante os períodos de gestação e lactação as mães HH apresentaram menor consumo alimentar em gramas em relação aos grupos C e HI. A taxa de conversão alimentar foi maior nas mães HH em relação aos grupos C e HI na gestação. No mesmo período, foi observada maior eficiência energética em ambos os grupos hiperlipídicos em relação ao grupo C. Contudo, durante a lactação o grupo de mães HH apresentou menor conversão alimentar em relação ao grupo C. Não foram observadas diferenças no consumo energético nem no ganho de peso entre os grupos experimentais. Quanto à prole, o grupo HH teve maior peso corporal, eixo longitudinal, comprimento da cauda, assim como, maior comprimento dos eixos látero-lateral e ântero-posterior do crânio no fim da lactação. Houve antecipação da abertura do pavilhão auditivo e atraso na maturação dos reflexos de preensão palmar e aversão ao precipício nos animais HH. Após o desmame, do 30º ao 45º dia pós-natal, a prole HH teve menor porcentagem de ganho de peso em relação à prole HI. Em relação à atividade locomotora, foi possível observar mudanças no desenvolvimento dos padrões de movimento dos animais HH e HI em alguns dos parâmetros avaliados. Quando comparados entre os grupos, os animais HH apresentaram maior distância percorrida no fim da lactação, assim como, maior potência média, velocidade média e gasto energético no 60º dia, em relação ao grupo HI e/ou C. Desta forma, a prole HH teve melhor desempenho locomotor no fim da lactação e da adolescência. Em resumo, pudemos observar que a prole cujas mães receberam dieta hiperlipídica hipercalórica na gestação e lactação apresentou antecipação na maturação de caraterísticas físicas e atraso na ontogenia de reflexos. Contudo, no fim da lactação, a prole HH apresentou maior crescimento somático, assim como, melhor desempenho locomotor, o mesmo que foi evidenciado também no fim da adolescência. / The aim of this study was to evaluate repercussions of high-fat/isocaloric or high-fat/high-caloric maternal diets on reflexes ontogeny and locomotor activity in offspring. Twenty-nine female Wistar rats were used. Dams were classified according to diet received throughout gestation and lactation periods: Control group (C, n=11); High-fat/Isocaloric group (HI, n=9), High-fat/high-caloric group (HH, n=9). Mother and 8 pups formed each litter. Only male offspring were evaluated. From the 1st to the 21st postnatal day, offspring were evaluated in relation to physical features maturation, somatic growth and reflexes ontogeny. Pups were filmed on the 8th, 14th, 17th, 21th, 30th, 45th and 60th postnatal day, in open field for 5 minutes. After weaning offspring received standard laboratory diet and body weight was evaluated until the end of experiments. During the gestation and lactation periods, HH mothers had lower food intake in grams than the C and HI groups. The feed conversion rate was higher in HH mothers than in the C and HI groups at gestation. In the same period, greater energy efficiency was observed in both high-fat groups in relation to the control group. However, during lactation the group of HH mothers presented lower feed conversion than the C group. There were no differences in energy consumption or weight gain between the experimental groups. As for the offspring, the HH group had a higher body weight and length, tail length, as well as higher laterolateral and anteroposterior axes of the head at the end of lactation. There was ear unfolding anticipation and delayed palmar grasp and cliff avoidance maturation in HH animals. After weaning, from 30th to 45th postnatal day, HH offspring had a lower percentage of weight gain than HI offspring. Regarding locomotor activity, it was possible to observe changes in movement patterns of HH and HI animals in some of the evaluated parameters. When comparing the groups, the HH animals showed higher distance travelled at the end of lactation, as well as higher average speed, average potency and kinetic energy at 60th, in relation to HI and/or C groups. Thus, HH offspring had better locomotor performance at the end of lactation and adolescence. In summary, we could observe that offspring whose mothers received a high-fat/high-caloric diet during pregnancy and lactation presented physical characteristics maturation anticipation and delay in primitive reflexes ontogeny. However, at the end of lactation the HH offspring presented higher somatic growth, as well as better locomotor performance in late adolescence.
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Análise da atividade locomotora de Aedes aegypti e Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) do Parque Municipal do Piqueri São Paulo, SP / Analysis of the locomotor activity of Aedes aegypti and Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) of the Piqueri Municipal Park São Paulo, SP

Pancetti, Filipe Gabriel Menezes 23 August 2017 (has links)
O estudo de mosquitos é extremamente importante, pois muitos são considerados vetores de diversos patógenos transmissíveis ao homem. Aedes aegypti e Aedes albopictus são responsáveis por transmitir arbovírus, como os da dengue, chikungunya, zika e febre amarela urbana, no mundo. Neste trabalho foram empregados Ae. aegypti e Ae. albopictus para: analisar a atividade locomotora de machos, fêmeas virgens e fêmeas inseminadas naturalmente; comparar a atividade locomotora de fêmeas injetadas intratoracicamente com extrato de glândulas acessórias (AG) de machos co e heteroespecíficos; e verificar a taxa de inseminação de fêmeas injetadas com glândulas acessórias de machos co e heteroespecíficos, quando são posteriormente expostas a seus machos coespecíficos. Os mosquitos foram coletados em ovitrampas instaladas no Parque Municipal do Piqueri, Zona Leste da cidade de São Paulo, durante o outono e a primavera de 2015 e outono de 2016. Após a emergência dos adultos, estes foram transferidos para quatro gaiolas matrizes separadas por espécie e sexo, dos quais obtivemos machos e fêmeas virgens de cada espécie. Em outras duas gaiolas foram agrupadas por espécie, 40 fêmeas e 40 machos para cópula por 24 horas para obtermos fêmeas inseminadas naturalmente. Posteriormente, todos os mosquitos foram transferidos para uma incubadora por quatro dias para análise da atividade locomotora. Na comparação de fêmeas injetadas com glândulas acessórias, foram extraídas as glândulas de machos de Ae. aegypti e Ae. albopictus e estas injetadas intratoracicamente em fêmeas co e heteroespecíficas. Todas as fêmeas injetadas foram transferidas para uma incubadora por três dias. Para a análise dos dados foram utilizados os testes estatísticos F e T e ANOVA. Após a atividade locomotora, as fêmeas injetadas foram expostas a seus machos coespecíficos e posteriormente tiveram suas espermatecas dissecadas para verificar a presença de espermatozoides a fim de analisar a taxa de inseminação. Nos machos, fêmeas virgens e fêmeas inseminadas naturalmente de Ae. aegypti e Ae. albopictus, o padrão da atividade locomotora foi diurno e bimodal no outono e na primavera. Em Ae. aegypti machos a atividade foi mais evidente no outono e em Ae. albopictus na primavera. Nas fêmeas de Ae. aegypti virgens a atividade foi mais evidente que nas inseminadas naturalmente em ambas as estações. Nas fêmeas de Ae. albopictus não houve diferença na atividade das virgens e inseminadas. Nas fêmeas de Ae. aegypti injetadas com AG a atividade locomotora foi diurna, com padrão unimodal e menos marcada. Nas fêmeas de Ae. albopictus injetadas com AG não houve diferença. Na taxa de inseminação, somente Ae. albopictus fêmeas injetadas com AG heteroespecíficas apresentaram espermatozoides após cópula coespecífica. Este estudo contribui para compreensão do comportamento de mosquitos vetores como Ae. aegypti e Ae. albopictus / The study of mosquitoes is extremely important, since many are considered vectors of several pathogens transmissible to man. Aedes aegypti and Aedes albopictus are responsible for transmitting arboviruses, such as dengue, chikungunya, zika and urban yellow fever, in the world. This study employed Ae. aegypti and Ae. albopictus to: analyze the locomotor activity of males, virgin females and females naturally inseminated; compare the locomotor activity of females injected intratoracically with extract of accessory glands (AG) of co and heterospecific males; and verify the rate of insemination of females injected with accessory glands of co and heterospecific males when later exposed to their co-specific males. The mosquitoes were collected in ovitraps installed in Piqueri Municipal Park, East of São Paulo city, during the autumn and spring of 2015 and autumn of 2016. After the emergence of adults, they were transferred to four cages, separated by species and sex from which we obtained virgin males and females of each species. In the other two cages, they were grouped by species, 40 females and 40 males for mating during 24 hours to obtain naturally inseminated females. Thereafter, all the mosquitoes were transferred to an incubator for four days to the locomotor activity analysis. In the comparison of females injected with accessory glands, the male glands of Ae. aegypti and Ae. albopictus were extracted and injected intratoracically into co and heterospecific females. All injected females were transferred to an incubator for three days. For the analysis, the statistical tests F and T and ANOVA were used. After the locomotor activity, the injected females were exposed to their co-specific males and later had their spermathecas dissected to verify the presence of spermatozoa in order to analyze the insemination rate. In males, virgin and naturally inseminated females of Ae. aegypti and Ae. albopictus, the pattern of locomotor activity was diurnal and bimodal in autumn and spring. Aedes aegypti males activity was more evident in autumn and in Ae. albopictus in spring. In virgin females of Ae. aegypti the activity was more evident than in the naturally inseminated in both seasons. In females of Ae. albopictus, there was no difference in the activity of virgin and inseminated. In females of Ae. aegypti injected with AG the locomotor activity was diurnal, with a unimodal and less marked pattern. In the females of Ae. albopictus injected with AG there was no difference. In the insemination rate, only Ae. albopictus females injected with heterospecific AGs presented spermatozoa after coespecific mating. This study contributes to the understanding of mosquito vectors behavior such as Ae. aegypti and Ae. albopictus
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Análise da atividade locomotora de Aedes aegypti e Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) do Parque Municipal do Piqueri São Paulo, SP / Analysis of the locomotor activity of Aedes aegypti and Aedes albopictus (Diptera: Culicidae) of the Piqueri Municipal Park São Paulo, SP

Filipe Gabriel Menezes Pancetti 23 August 2017 (has links)
O estudo de mosquitos é extremamente importante, pois muitos são considerados vetores de diversos patógenos transmissíveis ao homem. Aedes aegypti e Aedes albopictus são responsáveis por transmitir arbovírus, como os da dengue, chikungunya, zika e febre amarela urbana, no mundo. Neste trabalho foram empregados Ae. aegypti e Ae. albopictus para: analisar a atividade locomotora de machos, fêmeas virgens e fêmeas inseminadas naturalmente; comparar a atividade locomotora de fêmeas injetadas intratoracicamente com extrato de glândulas acessórias (AG) de machos co e heteroespecíficos; e verificar a taxa de inseminação de fêmeas injetadas com glândulas acessórias de machos co e heteroespecíficos, quando são posteriormente expostas a seus machos coespecíficos. Os mosquitos foram coletados em ovitrampas instaladas no Parque Municipal do Piqueri, Zona Leste da cidade de São Paulo, durante o outono e a primavera de 2015 e outono de 2016. Após a emergência dos adultos, estes foram transferidos para quatro gaiolas matrizes separadas por espécie e sexo, dos quais obtivemos machos e fêmeas virgens de cada espécie. Em outras duas gaiolas foram agrupadas por espécie, 40 fêmeas e 40 machos para cópula por 24 horas para obtermos fêmeas inseminadas naturalmente. Posteriormente, todos os mosquitos foram transferidos para uma incubadora por quatro dias para análise da atividade locomotora. Na comparação de fêmeas injetadas com glândulas acessórias, foram extraídas as glândulas de machos de Ae. aegypti e Ae. albopictus e estas injetadas intratoracicamente em fêmeas co e heteroespecíficas. Todas as fêmeas injetadas foram transferidas para uma incubadora por três dias. Para a análise dos dados foram utilizados os testes estatísticos F e T e ANOVA. Após a atividade locomotora, as fêmeas injetadas foram expostas a seus machos coespecíficos e posteriormente tiveram suas espermatecas dissecadas para verificar a presença de espermatozoides a fim de analisar a taxa de inseminação. Nos machos, fêmeas virgens e fêmeas inseminadas naturalmente de Ae. aegypti e Ae. albopictus, o padrão da atividade locomotora foi diurno e bimodal no outono e na primavera. Em Ae. aegypti machos a atividade foi mais evidente no outono e em Ae. albopictus na primavera. Nas fêmeas de Ae. aegypti virgens a atividade foi mais evidente que nas inseminadas naturalmente em ambas as estações. Nas fêmeas de Ae. albopictus não houve diferença na atividade das virgens e inseminadas. Nas fêmeas de Ae. aegypti injetadas com AG a atividade locomotora foi diurna, com padrão unimodal e menos marcada. Nas fêmeas de Ae. albopictus injetadas com AG não houve diferença. Na taxa de inseminação, somente Ae. albopictus fêmeas injetadas com AG heteroespecíficas apresentaram espermatozoides após cópula coespecífica. Este estudo contribui para compreensão do comportamento de mosquitos vetores como Ae. aegypti e Ae. albopictus / The study of mosquitoes is extremely important, since many are considered vectors of several pathogens transmissible to man. Aedes aegypti and Aedes albopictus are responsible for transmitting arboviruses, such as dengue, chikungunya, zika and urban yellow fever, in the world. This study employed Ae. aegypti and Ae. albopictus to: analyze the locomotor activity of males, virgin females and females naturally inseminated; compare the locomotor activity of females injected intratoracically with extract of accessory glands (AG) of co and heterospecific males; and verify the rate of insemination of females injected with accessory glands of co and heterospecific males when later exposed to their co-specific males. The mosquitoes were collected in ovitraps installed in Piqueri Municipal Park, East of São Paulo city, during the autumn and spring of 2015 and autumn of 2016. After the emergence of adults, they were transferred to four cages, separated by species and sex from which we obtained virgin males and females of each species. In the other two cages, they were grouped by species, 40 females and 40 males for mating during 24 hours to obtain naturally inseminated females. Thereafter, all the mosquitoes were transferred to an incubator for four days to the locomotor activity analysis. In the comparison of females injected with accessory glands, the male glands of Ae. aegypti and Ae. albopictus were extracted and injected intratoracically into co and heterospecific females. All injected females were transferred to an incubator for three days. For the analysis, the statistical tests F and T and ANOVA were used. After the locomotor activity, the injected females were exposed to their co-specific males and later had their spermathecas dissected to verify the presence of spermatozoa in order to analyze the insemination rate. In males, virgin and naturally inseminated females of Ae. aegypti and Ae. albopictus, the pattern of locomotor activity was diurnal and bimodal in autumn and spring. Aedes aegypti males activity was more evident in autumn and in Ae. albopictus in spring. In virgin females of Ae. aegypti the activity was more evident than in the naturally inseminated in both seasons. In females of Ae. albopictus, there was no difference in the activity of virgin and inseminated. In females of Ae. aegypti injected with AG the locomotor activity was diurnal, with a unimodal and less marked pattern. In the females of Ae. albopictus injected with AG there was no difference. In the insemination rate, only Ae. albopictus females injected with heterospecific AGs presented spermatozoa after coespecific mating. This study contributes to the understanding of mosquito vectors behavior such as Ae. aegypti and Ae. albopictus
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Efeitos da exposição combinada de cafeína e etanol durante o desenvolvimento na atividade locomotora de camundongos adolescentes / Effects of combined exposure of caffeine and ethanol during development in locomotor activity of adolescent mice

Ana Cristina Chagas Carvalho da Silva 26 February 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O Transtorno do Déficit de Atenção e Hiperatividade (TDAH) é uma desordem neurocomportamental caracterizada por graus variados de desatenção, atividade motora excessiva e impulsividade. Sua etiologia não é completamente conhecida, porém, um grande número de evidências sugere que, além de fatores de risco genéticos, a exposição gestacional ao etanol e a altas doses de cafeína contribuem para a manifestação deste transtorno. O etanol, presente na composição de bebidas alcoólicas, e a cafeína, presente na composição de diversas bebidas (refrigerantes, chás, café, e energéticos), alimentos derivados do cacau e medicamentos estão entre as substâncias neuroativas mais consumidas no mundo. Apesar das evidências epidemiológicas do uso combinado de cafeína e etanol por gestantes, as interações entre estas substâncias têm recebido pouca atenção em estudos experimentais. Este fato é particularmente importante visto que alguns estudos apontam que cafeína é capaz de ampliar alguns aspectos importantes da ação de outras substâncias com potencial neurotóxico. Nesse estudo avaliamos os efeitos da co-exposição à cafeína e ao etanol durante o desenvolvimento na atividade locomotora em camundongos adolescentes. Para tanto, camundongos Suíços foram expostos do primeiro dia gestacional até o vigésimo primeiro dia pós-natal (PN21), a solução de cafeína 0,1g/L (Grupo CAF1, 10 ninhadas), a solução de cafeína 0,3g/L (Grupo CAF3, 10 ninhadas) ou tiveram acesso à água potável (Grupo CAF0, 10 ninhadas). Em dias alternados de PN2 a PN8, os animais de cada ninhada receberam uma injeção intraperitoneal de 0,25 l/g de etanol (grupo ETOH25), 0,5 l/g de etanol (grupo ETOH50) ou de solução salina (grupo ETOH0). Em PN30, a atividade locomotora foi avaliada por 15 minutos no teste de Campo Aberto. A análise dos níveis de etanol sérico, realizada em uma amostra independente de animais em PN8, indicou que, para as duas doses de etanol, a alcoolemia dos animais do grupo CAF3 foi significativamente maior do que as dos grupos CAF0 e CAF1, que não diferiram entre si. No teste de campo aberto, apenas os animais expostos ao etanol apresentaram aumento da atividade locomotora. Tanto o grupo ETOH25 quanto o grupo ETOH50 tiveram a atividade maior que o grupo ETOH0. A exposição à cafeína, por si só, não afetou a atividade locomotora dos animais nem potencializou os efeitos do etanol. No grupo CAF3, a atividade locomotora não foi afetada pela exposição ao etanol. Nossos dados confirmam o papel da exposição precoce ao etanol na manifestação da hiperatividade locomotora. Além disso, a exposição à cafeína durante o desenvolvimento pode exercer um papel protetor para a manifestação da hiperatividade locomotora induzida pela exposição precoce ao etanol. / The attention deficit hyperactivity disorder (ADHD) is a neurobehavioral disorder characterized by varying degrees of inattention, excessive motor activity and impulsivity. This etiology is not fully known, but considerable evidence suggests that, in addition to genetic factors, exposure to ethanol and high doses of caffeine contribute to the manifestation of the disorder. Ethanol, which is present in all alcoholic beverages, and caffeine, which is present in many beverages (sodas, teas, coffee and energetic drinks), food derived from cacao and medications, are two of the most consumed neuroactive drugs in the world. In spite of the epidemiological evidence of the combined use of caffeine and ethanol by pregnant women, the interactions between these two drugs have received little attention in experimental studies. This fact is particularly important since some studies have shown that caffeine is capable of amplifying important aspects of the action of other substances that have neurotoxic potential. In the current study we analyzed the effects of co-exposure to caffeine and ethanol during development on the locomotor activity of pre-pubertal mice. In this sense, Swiss mice were exposed from the first gestational day to the 21st postnatal (PN21) day to one of three solutions: 1) a solution containing caffeine 0.1 g/L (group CAF1, 10 litters); 2) a solution containing caffeine 0.3g/L (group CAF3, 10 litters); 3) filtered tap water (group CAF0, 10 litters). Every other day, from PN2 to PN8, animals in each litter were i.p injected with one of the following solutions: 1) 0.25 l/g ethanol (group ETOH25); 2) 0.5 l/g ethanol (group ETOH50); 3) saline solution (group ETOH0). On PN30, locomotor activity was analyzed for 15 min in the open field. The analysis of the ethanol serum levels, which was carried out in an independent sample of animals at PN8, indicated that levels were significantly higher in the CAF3 group when compared to the other two groups, which did not differ between them. In the open field, the ethanol exposure caused a dose-dependent increase in the locomotor activity. The locomotor activity of the group ETOH0 was lower than that presented by the ETOH25 and the ETOH50 groups. The caffeine exposure was not capable of affecting the locomotor activity. In the group CAF3, the locomotor activity was not affected by the ethanol exposure. Our data corroborate previous studies in that it shows that precocious ethanol exposure results in locomotor hyperactivity. Furthermore, it is possible that caffeine exposure during development have a protective effect on deleterious effects of ethanol.
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Irish Coffee: efeitos de ?lcool e cafe?na no comportamento e aprendizagem do peixe paulistinha

Santos, Luana Carla dos 04 March 2016 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-07-25T21:08:32Z No. of bitstreams: 1 LuanaCarlaDosSantos_DISSERT.pdf: 4082362 bytes, checksum: fb42a7940026e83a2823d9eca4790a35 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-08-02T22:42:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 LuanaCarlaDosSantos_DISSERT.pdf: 4082362 bytes, checksum: fb42a7940026e83a2823d9eca4790a35 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T22:42:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 LuanaCarlaDosSantos_DISSERT.pdf: 4082362 bytes, checksum: fb42a7940026e83a2823d9eca4790a35 (MD5) Previous issue date: 2016-03-04 / Subst?ncias psicoestimulantes v?m sendo utilizadas de forma indiscriminada h? muitos anos, e pouco se sabe os efeitos que elas causam a curto e longo prazo no comportamento geral, na aprendizagem e na mem?ria. Essas subst?ncias s?o bastante usadas por jovens e adultos e elas possuem efeitos diferentes. Essas subst?ncias s?o dose dependente, caso consumidas em baixa quantidade agem como estimulante, aumentando a atividade locomotora, caso consumidas em alta quantidade, causam efeito depressor, diminuindo a atividade locomotora e/ou causando ansiedade. Poucos estudos v?m investigando os efeitos dessas subst?ncias na atividade locomotora, aprendizagem e mem?ria e grande parte desses estudos s?o realizados em roedores. Peixe paulistinha ? um modelo animal promissor para estudos comportamentais, cognitivos, ontogen?ticos, dentre outros. Nossos objetivos foram determinar os efeitos do ?lcool, cafe?na e de seu uso combinado com ?lcool, na atividade locomotora desses animais, usando para isso doses cr?nicas durante 27 dias e doses agudas durante um dia. Visto que pouco se sabe sobre os efeitos dessa exposi??o prolongada. Tamb?m investigamos os efeitos das subst?ncias em teste de reconhecimento de objetos, que se baseia na mem?ria de ?nico evento. Essas mem?rias s?o mais vulner?veis que mem?rias baseadas em v?rias repeti??es de eventos. Sendo assim, um teste adequado para utilizar com uso de subst?ncias psicoativas. Observamos que o uso cr?nico de cafe?na provoca altera??o na atividade locomotora dos animais, do mesmo modo, abstin?ncia de ?lcool combinada com cafe?na em dose aguda (dose m?dia) provoca aumento de atividade locomotora. Quando submetidos a testes de mem?ria, os animais exposto a doses altas agudas de ?lcool e em abstin?ncia dessa droga t?m preju?zo na forma??o e/ou resgate da mem?ria. No entanto, tratamento com cafe?na n?o prejudica a forma??o de mem?ria. Animais expostos a tratamento com dose cr?nica moderada de ?lcool e dose aguda moderada de cafe?na tem melhor desempenho na tarefa, indicando que dose aguda moderada de cafe?na pode evitar os efeitos delet?rios ocasionados pela abstin?ncia do ?lcool. Em termos do comportamento geral, doses agudas de cafe?na aumentam a locomo??o, enquanto doses elevadas e a abstin?ncia de cafe?na induzem a comportamentos tipo-ansioso. A combina??o ?lcool cr?nico e cafe?na aguda induzem a alto comportamento tipo-ansiedade, enquanto a combina??o cafe?na cr?nica e ?lcool agudo diminuem tanto a locomo??o quanto a ansiedade.
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Efeitos da exposição combinada de cafeína e etanol durante o desenvolvimento na atividade locomotora de camundongos adolescentes / Effects of combined exposure of caffeine and ethanol during development in locomotor activity of adolescent mice

Ana Cristina Chagas Carvalho da Silva 26 February 2014 (has links)
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O Transtorno do Déficit de Atenção e Hiperatividade (TDAH) é uma desordem neurocomportamental caracterizada por graus variados de desatenção, atividade motora excessiva e impulsividade. Sua etiologia não é completamente conhecida, porém, um grande número de evidências sugere que, além de fatores de risco genéticos, a exposição gestacional ao etanol e a altas doses de cafeína contribuem para a manifestação deste transtorno. O etanol, presente na composição de bebidas alcoólicas, e a cafeína, presente na composição de diversas bebidas (refrigerantes, chás, café, e energéticos), alimentos derivados do cacau e medicamentos estão entre as substâncias neuroativas mais consumidas no mundo. Apesar das evidências epidemiológicas do uso combinado de cafeína e etanol por gestantes, as interações entre estas substâncias têm recebido pouca atenção em estudos experimentais. Este fato é particularmente importante visto que alguns estudos apontam que cafeína é capaz de ampliar alguns aspectos importantes da ação de outras substâncias com potencial neurotóxico. Nesse estudo avaliamos os efeitos da co-exposição à cafeína e ao etanol durante o desenvolvimento na atividade locomotora em camundongos adolescentes. Para tanto, camundongos Suíços foram expostos do primeiro dia gestacional até o vigésimo primeiro dia pós-natal (PN21), a solução de cafeína 0,1g/L (Grupo CAF1, 10 ninhadas), a solução de cafeína 0,3g/L (Grupo CAF3, 10 ninhadas) ou tiveram acesso à água potável (Grupo CAF0, 10 ninhadas). Em dias alternados de PN2 a PN8, os animais de cada ninhada receberam uma injeção intraperitoneal de 0,25 l/g de etanol (grupo ETOH25), 0,5 l/g de etanol (grupo ETOH50) ou de solução salina (grupo ETOH0). Em PN30, a atividade locomotora foi avaliada por 15 minutos no teste de Campo Aberto. A análise dos níveis de etanol sérico, realizada em uma amostra independente de animais em PN8, indicou que, para as duas doses de etanol, a alcoolemia dos animais do grupo CAF3 foi significativamente maior do que as dos grupos CAF0 e CAF1, que não diferiram entre si. No teste de campo aberto, apenas os animais expostos ao etanol apresentaram aumento da atividade locomotora. Tanto o grupo ETOH25 quanto o grupo ETOH50 tiveram a atividade maior que o grupo ETOH0. A exposição à cafeína, por si só, não afetou a atividade locomotora dos animais nem potencializou os efeitos do etanol. No grupo CAF3, a atividade locomotora não foi afetada pela exposição ao etanol. Nossos dados confirmam o papel da exposição precoce ao etanol na manifestação da hiperatividade locomotora. Além disso, a exposição à cafeína durante o desenvolvimento pode exercer um papel protetor para a manifestação da hiperatividade locomotora induzida pela exposição precoce ao etanol. / The attention deficit hyperactivity disorder (ADHD) is a neurobehavioral disorder characterized by varying degrees of inattention, excessive motor activity and impulsivity. This etiology is not fully known, but considerable evidence suggests that, in addition to genetic factors, exposure to ethanol and high doses of caffeine contribute to the manifestation of the disorder. Ethanol, which is present in all alcoholic beverages, and caffeine, which is present in many beverages (sodas, teas, coffee and energetic drinks), food derived from cacao and medications, are two of the most consumed neuroactive drugs in the world. In spite of the epidemiological evidence of the combined use of caffeine and ethanol by pregnant women, the interactions between these two drugs have received little attention in experimental studies. This fact is particularly important since some studies have shown that caffeine is capable of amplifying important aspects of the action of other substances that have neurotoxic potential. In the current study we analyzed the effects of co-exposure to caffeine and ethanol during development on the locomotor activity of pre-pubertal mice. In this sense, Swiss mice were exposed from the first gestational day to the 21st postnatal (PN21) day to one of three solutions: 1) a solution containing caffeine 0.1 g/L (group CAF1, 10 litters); 2) a solution containing caffeine 0.3g/L (group CAF3, 10 litters); 3) filtered tap water (group CAF0, 10 litters). Every other day, from PN2 to PN8, animals in each litter were i.p injected with one of the following solutions: 1) 0.25 l/g ethanol (group ETOH25); 2) 0.5 l/g ethanol (group ETOH50); 3) saline solution (group ETOH0). On PN30, locomotor activity was analyzed for 15 min in the open field. The analysis of the ethanol serum levels, which was carried out in an independent sample of animals at PN8, indicated that levels were significantly higher in the CAF3 group when compared to the other two groups, which did not differ between them. In the open field, the ethanol exposure caused a dose-dependent increase in the locomotor activity. The locomotor activity of the group ETOH0 was lower than that presented by the ETOH25 and the ETOH50 groups. The caffeine exposure was not capable of affecting the locomotor activity. In the group CAF3, the locomotor activity was not affected by the ethanol exposure. Our data corroborate previous studies in that it shows that precocious ethanol exposure results in locomotor hyperactivity. Furthermore, it is possible that caffeine exposure during development have a protective effect on deleterious effects of ethanol.
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Participa??o da neurotransmiss?o dopaminergica no efeito hiperlocomotor do neuropeptideo S

Costa, Manara Bezerra Barbosa 25 April 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T15:37:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ManaraBBCD_DISSERT.pdf: 1554643 bytes, checksum: e4b820c02db19b42acca3889a1b08851 (MD5) Previous issue date: 2014-04-25 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Neuropeptide S (NPS) is an endogenous 20-aminoacid peptide which binds a G protein-coupled receptor named NPSR. This peptidergic system is involved in the modulation of several biological functions, such as locomotion, anxiety, nociception, food intake and motivational behaviors. Studies have shown the participation of NPSR receptors in mediating the hyperlocomotor effects of NPS. A growing body of evidence suggests the participation of adenosinergic, dopaminergic and CRF systems on the hyperlocomotor effects of NPS. Considering that little is known about the role of dopaminergic system in mediating NPS-induced hyperlocomotion, the present study aims to investigate the locomotor actions of intracerebroventricular (icv) NPS in mice pretreated with &#945;-metil-p-tirosine (AMPT, inhibitor of dopamine synthesis), reserpine (inhibitor of dopamine vesicle storage) or sulpiride (D2 receptor antagonist) in the open field test. A distinct group of animals received the same pretreatments described above (AMPT, reserpine or sulpiride) and the hyperlocomotor effects of methylphenidate (dopamine reuptake inhibitor) were investigated in the open field. NPS and methylphenidate increased the mouse locomotor activity. AMPT per se did not change the locomotion of the animals, but it partially reduced the hyperlocomotion of methylphenidate. The pretreatment with AMPT did not affect the psychostimulant effects of NPS. Both reserpine and sulpiride inhibited the stimulatory actions of NPS and methylphenidate. These findings show that the hyperlocomotor effects of methylphenidate, but not NPS, were affected by the pretreatment with AMPT. Furthermore, methylphenidate- and NPS-induced hyperlocomotion was impaired by reserpine and sulpiride pretreatments. Together, data suggests that NPS can increase locomotion even when the synthesis of catecholamines was impaired. Additionally, the hyperlocomotor effects of NPS and methylphenidate depend on monoamines vesicular storaged, mainly dopamine, and on the activation of D2 receptors. The psychostimulant effects of NPS via activation of dopaminergic system display clinical significance on the treatment of diseases which involves dopaminergic pathways, such as Parkinson s disease and drug addiction / Neuropept?deo S (NPS) ? um pept?deo end?geno formado por 20 amino?cidos e ? o ligante de um receptor acoplado ? prote?na G chamado NPSR, o qual est? envolvido na modula??o de v?rias fun??es biol?gicas centrais como locomo??o, ansiedade, nocicep??o, ingest?o de alimento e comportamentos motivacionais. J? ? conhecido que o efeito hiperlocomotor do NPS ? mediado pelos receptores NPSR e parece depender da ativa??o do sistema adenosin?rgico, dopamin?rgico e do sistema peptid?rgico do CRF. Considerando o pouco conhecimento acerca do envolvimento do sistema dopamin?rgico na media??o do aumento da atividade locomotora induzido pelo NPS, o presente estudo objetiva investigar as a??es motoras da administra??o intracerebroventricular (icv) de NPS em camundongos pr?-tratados com &#945;-metil-p-tirosina (AMPT, inibidor da enzima de s?ntese de dopamina), reserpina (inibidor do armazenamento da dopamina em ves?culas) ou sulpiride (inibidor de receptores D2 de dopamina), em animais submetidos ao teste de atividade locomotora no campo aberto. Camundongos Swiss machos (30-35 g) foram submetidos ? cirurgia estereot?xica para a implanta??o de uma c?nula-guia no ventr?culo lateral. No 3? dia ap?s a cirurgia, os animais foram pr?-tratados com AMPT (250 mg/kg, ip, 24 h antes do teste), reserpina (2 mg/kg, SC, 24h) ou sulpiride (25 mg/kg, ip, 45 min) e depois foram tratados com NPS (1 nmol, 2 &#956;l; icv, 5 min) e submetidos ao teste do campo aberto. Para fins de compara??o, um grupo distinto de animais recebeu os mesmos pr?-tratamentos acima descritos (AMPT, reserpina ou sulpiride) e o efeito hiperlocomotor do metilfenidato (5 mg/kg, sc, 15 min; inibidor da recapta??o de dopamina) foi investigado no campo aberto. O teste do campo aberto avalia a locomo??o espont?nea dos animais atrav?s da dist?ncia percorrida (m) e do tempo de imobilidade (m) durante 60 min. O NPS aumentou a atividade locomotora dos animais na dose de 1 nmol. O AMPT per se n?o causou altera??o na locomo??o dos animais. Por outro lado, o AMPT reduziu parcialmente o efeito hiperlocomotor do metilfenidato, mas n?o foi capaz de afetar a a??o hiperlocomotora do NPS. Tanto o pr?-tratamento com reserpina como o com sulpiride foram capazes de inibir o efeito estimulat?rio do NPS, assim como o do metilfenidato. Estes achados mostram que o efeito hiperlocomotor do metilfenidato, mas n?o do NPS, foi afetado pela administra??o de AMPT. Al?m disso, tanto o efeito do metilfenidato quanto o do NPS foram prejudicados pelos pr?-tratamentos com reserpina e sulpiride. Em conjunto, sugere-se que o NPS pode promover est?mulo excitat?rio mesmo quando a s?ntese de catecolaminas foi prejudicada. Ainda conclui-se que o efeito hiperlocomotor do NPS e do metilfenidato depende dos estoques vesiculares de monoaminas, em particular dopamina, e da ativa??o do receptor dopamin?rgico D2. O efeito psicoestimulante do NPS por meio da ativa??o do sistema dopamin?rgico pode apresentar import?ncia cl?nica no tratamento de doen?as que envolvem a via dopamin?rgica, como o Mal de Parkinson e a depend?ncia qu?mica

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