Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 439219.pdf: 722099 bytes, checksum: 87b93549e65018c129416830692d4bfc (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / Stenotrophomonas maltophilia is an important opportunistic and emerging pathogen commonly related to nosocomial infections and found in different environmental sources, including hospital settings. This microorganism is recognized for presenting intrinsic resistance to a range of important antimicrobials as well as to acquire resistance by horizontal gene transfer, which reduces the effective options for the treatment of infections caused by this organism. Therefore, the aim of this study was to determine the presence of S. maltophilia in the nosocomial environment and characterize the resistance of the environmental isolates, as well as clinical isolates obtained in the same hospital. Then, environmental samples were collected in the general ICU and the Unified Health System hospitalization unit of the S?o Lucas Hospital, Porto Alegre, Brazil. In addition, 100 clinical isolates were sent by the Clinical Pathology Laboratory of the same hospital. All samples were analyzed using a specific protocol for S. maltophilia detection by PCR developed in this study targeting 23S rRNA gene. Subsequently, the antimicrobial resistance was evaluated against ceftazidime, chloramphenicol, levofloxacin, minociclin and trimethoprim/sulfamethoxazole (TMP/SMX). The presence of integrons was verified in all isolates and those that presented reduced susceptibility to TMP/SMX was evaluated the presence of sul1 and sul2 gene, as well as was determined the plasmid profile. All isolates were submitted to detection of smf-1 gene. Among the 936 samples collected in the nosocomial environment, S. maltophilia was identified in 28. High rates of susceptibility to minocycline, levofloxacin and chloramphenicol were observed, and all of the 19 isolates that presented reduced susceptibility to TMP/SMX carried the sul1 gene, 14 of them presented class 1 integron and nine isolates showed simultaneously sul1 and sul2. All isolates that carried the sul2 gene also presented the 7.3 kb plasmid. The smf-1 gene was detected in 31 S. maltophilia isolates. The presence of S. maltophilia in hospital environment and medical devices indicates the permanence of this microorganism in the nosocomial environment, what can constitute a risk to infection for other hospitalized patients. In addition, the data obtained in this study in relation to TMP/SMX susceptibility can suggest that the resistance to these drugs have the tendency to increase, especially due to resistance determinants to these drugs can be associated to mobile genetic elements, which may facilitate horizontal transfer and the spread of these resistance genes. / Stenotrophomonas maltophilia ? um importante pat?geno oportunista e emergente, comumente relacionado a infec??es nosocomiais e encontrado em diferentes locais, incluindo o ambiente hospitalar. Este microrganismo ? reconhecido por apresentar resist?ncia intr?nseca a uma gama importante de antimicrobianos, bem como por adquirir resist?ncia atrav?s de transfer?ncia g?nica horizontal, o que reduz as op??es efetivas para o tratamento de infec??es ocasionadas por este microrganismo. Desta forma, o objetivo deste estudo foi determinar a presen?a de S. maltophilia no ambiente hospitalar e caracterizar a resist?ncia a drogas antimicrobianas dos isolados ambientais, bem como dos isolados cl?nicos obtidos no mesmo hospital. Para tanto, amostras ambientais foram coletadas na UTI Geral e no andar referente ? interna??o pelo Sistema ?nico de Sa?de (SUS) do Hospital S?o Lucas, Porto Alegre, Brasil. Al?m disso, 100 isolados cl?nicos foram cedidos pelo Laborat?rio de Patologia Cl?nica do mesmo hospital. Todas as amostras foram analisadas utilizando um protocolo de detec??o espec?fica de S. maltophilia atrav?s de PCR desenvolvido neste estudo, tendo o gene RNAr 23S como alvo. Posteriormente, foi avaliada a resist?ncia dos isolados frente ? ceftazidima, cloranfenicol, levofloxacina, minociclina e trimetoprim/sulfametoxazol (TMP/SMX). A presen?a de integrons foi verificada em todos os isolados e naqueles com suscetibilidade reduzida a TMP/SMX foi avaliada a presen?a dos genes sul1 e sul2, bem como foi determinado o perfil plasmidial. Todos os isolados foram submetidos ? detec??o do gene smf-1. De um total de 936 amostras coletadas no ambiente hospitalar, S. maltophilia foi identificada em 28. Foram observadas elevadas taxas de suscetibilidade ? minociclina, levofloxacina e cloranfenicol e todos os 19 isolados que apresentaram suscetibilidade reduzida ? combina??o TMP/SMX carrearam o gene sul1, 14 destes apresentaram o integron de classe 1 e nove isolados apresentaram concomitantemente os genes sul1 e sul2. Todos os isolados que carrearam o gene sul2 apresentaram o plasm?deo de 7,3 kb. O gene smf-1 foi detectado em 31 isolados de S. maltophilia. A presen?a de S. maltophilia nos materiais e equipamentos hospitalares indica a perman?ncia destas bact?rias no ambiente hospitalar, podendo constituir risco para infec??o de outros pacientes internados. Al?m disso, os dados obtidos neste estudo em rela??o ? suscetibilidade ? TMP/SMX podem sugerir que a resist?ncia a esta combina??o de drogas possa estar em ascens?o, especialmente porque os determinantes de resist?ncia a estas drogas podem estar associados a elementos gen?ticos m?veis, o que facilitaria a transfer?ncia horizontal e a dissemina??o destes genes de resist?ncia.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 429331.pdf: 3416061 bytes, checksum: b9dd27c021e450278555744beaf366b5 (MD5) Previous issue date: 2011-01-25 / ARTIGO 1 : Introduction: Photodynamic therapy has been proposed to improve to root canal desinfection, but its role on certain bacterial species needs to be further ellucidated. Objective: to compare, in vitro, the action of photodynamic therapy and sodium hypochlorite in root canals infected with Enterococcus faecalis. Methods: The root canals of 45 single-rooted human extracted teeth were enlarged up to a file 60, autoclaved, inoculated with a suspension of Enterococcus faecalis and incubated for 60 days, with renewal of the culture medium every 48 hours. After that, samples were divided into five groups according to the protocol of decontamination: G1 (n = 5) positive control - no procedure; G2 (n = 10) negative control - distilled water; G3 (n = 10) - PAD, G4 (n = 10) NaOCl 2.5%; G5 (n = 10) - NaOCl 2.5% + PAD. Subsequently, samples were fixed on 25% glutaraldehyde, dehydrated, dried, metalized and subjected to scanning electron microscopy (SEM). The assessment was made of images taken at every root third at 5.000x magnification for the canal wall and 10.000x for the exposed tubule area, both in backscattering (BS), noting the effect of proposed treatments to the different thirds of the root canal. The presence of bacteria in the images was scored by position ranks from 1 to 45, where the higher the value, the cleanliness of the sample. Data were subjected to One-way ANOVA followed by post-hoc Tukey test (α = 0.05). Results: Group 5 had the highest mean position ranks for all thirds of the root canal, both in canal wall and in the exposed tubule area. Thus, it was the most effective in eliminating Enterococcus faecalis. Conclusion: the association NaOCl 2,5% + PAD is an efficient protocol for the elimination of Enterococcus faecalis present in the dentinal surface and deep into the dentinal tubules. ARTIGO 2 : Purpose: Evaluate the bovine pulp tissue dissolution ability of photodynamic therapy. Methods: Twenty pieces of bovine pulp tissue were weighed and divided randomly into four groups (n = 5), according to the cleaning protocol: G1 - distilled water (negative control), G2 - sodium hypochlorite 1% (positive control), G3 - photodynamic therapy, G4 - sodium hypochlorite 1% + photodynamic therapy. The observation of the events of dissolution was performed by two observers blinded in relation to the test using 2x loupe magnification, recording time in minutes until complete tissue dissolution. The total observation time was 2 hours. The dissolution rate was calculated dividing the weight of the fragment pulp (mg) by the time of dissolution (mg / min). Results: only group 2 (NaOCl) was able to promote complete dissolution of pulp tissue. In the other groups there was no occurrence of complete dissolution of the samples. The mean dissolution time for samples from group 2 (NaOCl) was 1.26 mg / min. Conclusion: photodynamic therapy was not able to dissolve the fragments of bovine pulp tissue and was not able to accelerate the rate of dissolution. / ARTIGO 1 : O objetivo deste estudo foi comparar, in vitro, a a??o da terapia fotodin?mica com a a??o do hipoclorito de s?dio em canais radiculares infectados com Enterococcus faecalis. Os canais radiculares de 45 dentes humanos unirradiculares foram ampliados at? a lima 60, autoclavados, inoculados com uma suspens?o de Enterococcus faecalis e incubados por 60 dias, com renova??o do meio de cultura de 48 em 48 horas. Ap?s o per?odo de contamina??o, as amostras foram divididas aleatoriamente em cinco grupos, de acordo com o protocolo de descontamina??o: G1 (n=5) controle positivo nenhum procedimento; G2 (n=10) controle negativo ?gua destilada; G3 (n=10) PAD; G4 (n=10) NaOCl 2,5%; G5 (n=10) NaOCl 2,5% + PAD. Posteriormente, as amostras foram fixadas em glutaralde?do 25%, desidratadas, secas, metalizadas e submetidas ? microscopia eletr?nica de varredura (MEV). A avalia??o foi feita em imagens do MEV com o aumento de 5.000x para a luz do canal e de 10.000x para a interface dentin?ria, ambos em backscattering (BS), observando o efeito dos tratamentos propostos nos diferentes ter?os do canal radicular. A presen?a de bact?rias foi classificada por interm?dio de um rankeamento de posi??es de 1 a 45, onde quanto maior o valor, maior o grau de limpeza da amostra. Os dados de n?veis de contamina??o foram submetidos ao teste de ANOVA de uma via, seguido pelo post-hoc de Tukey (α=0,05). Os resultados mostraram que o grupo 5 apresentou os maiores valores na m?dia de rankeamento de posi??es nos tr?s ter?os do canal radicular, tanto na luz do canal quanto na interface dentin?ria. Com isso, foi o mais efetivo na elimina??o de Enterococcus faecalis. Diante do exposto, ? poss?vel concluir que a associa??o NaOCl 2,5% + PAD foi eficiente na elimina??o de Enterococcus faecalis presentes na parede dentin?ria e na profundidade de penetra??o dos t?bulos dentin?rios. ARTIGO 2 : O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade de dissolu??o do tecido pulpar bovino atrav?s da a??o da terapia fotodin?mica. Vinte fragmentos de tecido pulpar bovino foram pesados e divididos aleatoriamente dentro de quatro grupos (n=5), de acordo com o mecanismo de dissolu??o testado: G1 ?gua destilada (controle negativo); G2 hipoclorito de s?dio 1% (controle positivo); G3 terapia fotodin?mica; G4 hipoclorito de s?dio + terapia fotodin?mica. A observa??o dos eventos de dissolu??o foi realizada por dois observadores cegados em rela??o ao teste, com lupa de 2x de aumento, sendo anotado, em minutos, o tempo at? que ocorresse a completa dissolu??o do tecido. O per?odo total de observa??o foi de 2 horas. O tempo necess?rio para dissolu??o foi registrado em minutos (min) e a velocidade de dissolu??o foi calculada dividindo o peso do fragmento pulpar (mg) pelo tempo de dissolu??o (mg/min). Os resultados mostraram que somente o grupo 2 (NaOCl) foi capaz de promover a dissolu??o completa do tecido pulpar. Nos demais grupos n?o houve a ocorr?ncia da dissolu??o completa das amostras. A m?dia do tempo de dissolu??o para as amostras do grupo 2 (NaOCl) foi de 1.26 mg/min. Em conclus?o, somente o hipoclorito de s?dio foi capaz de dissolver os fragmentos de tecido pulpar bovino e a terapia fotodin?mica n?o apresentou capacidade de dissolu??o tecidual.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 431351.pdf: 2942190 bytes, checksum: c6eabd5cdfe51ae9bd263fa784c3b71b (MD5) Previous issue date: 2011-03-30 / O objetivo deste estudo foi testar a influ?ncia da utiliza??o da fibra ?ptica e de diferentes tempos de pr?-irradia??o (PIT) na terapia fotodin?mica com LED, na desinfec??o de canais radiculares de dentes bovinos infectados, in vitro, com Enterococcus faecalis. Cento e vinte dentes bovinos foram inoculados com E. faecalis, permanecendo em cultivo por 60 dias. Os dentes foram divididos em seis grupos (n=20): Grupo 1- ?gua destilada; Grupo 2- 1 minuto PIT/sem fibra ?ptica; Grupo 3- 1 minuto PIT/fibra ?ptica; Grupo 4- 5 minutos PIT/sem fibra ?ptica; Grupo 5 - 5 minutos/com fibra ?ptica; Grupo 6 hipoclorito de s?dio 2%. Foram realizados testes microbiol?gicos e an?lise em SEM. A an?lise microbiol?gica mostrou que o grupo 6 obteve os melhores resultados, com diferen?a estat?stica entre este e os grupos 1, 2, 3, 4 e 5. A an?lise da microscopia eletr?nica de varredura, nos tr?s ter?os da parede do canal mostrou os melhores resultados para o grupo 6 (com diferen?a estatisticamente significativa com os grupos 1, 3, 4 e 5) e o grupo 2, entre os grupos da terapia fotodin?mica. Na ?rea de t?bulos expostos, no ter?o apical os grupos com melhores resultados foram os grupos 1 e 3; no ter?o m?dio grupos 6 e 2; e no ter?o cervical grupos 6 e 3. N?o foi encontrada diferen?a na desinfec??o dos canais radiculares quando a fibra ?ptica foi usada na aplica??o da terapia fotodin?mica. Esta n?o pode ser usada de forma isolada na desinfec??o dos canais radiculares, o seu valor pode estar na complementa??o da desinfec??o obtida por outros protocolos de limpeza.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 429777.pdf: 10807139 bytes, checksum: b05a53115bb6b1ea5696ca873906b4cf (MD5) Previous issue date: 2011-01-26 / Asma ? uma doen?a extremamente prevalente que afeta pessoas de todas as idades, sendo um problema de sa?de p?blica s?rio no mundo inteiro. Quando inadequadamente controlada pode trazer graves limita??es na qualidade de vida do indiv?duo, sendo, algumas vezes, fatal. Evid?ncias recentes v?m demonstrando que asm?ticos t?m suscetibilidade maior ao desenvolvimento de in?meros tipos de infec??es virais e bacterianas, por?m infec??es por micobact?ria n?o tuberculosa (MNT) n?o haviam sido at? ent?o descritas em indiv?duos com asma.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:35:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 437323.pdf: 4287591 bytes, checksum: a4736ecf5ed6c11a9d86f23c3c30d3b3 (MD5) Previous issue date: 2012-01-18 / Tuberculosis re-emerged in the mid 80s and currently about two million people die each year due to this disease. The resurgence of tuberculosis has become a threat to public health. The high susceptibility of HIV-infected patients and the proliferation of multi-drug resistant strains have created the need to develop new therapies. However, no new class of drugs against tuberculosis was developed in the last 45 years. Thus, it becomes imminent need to develop new antituberculosis agents. As purine metabolism could be implicated in mycobacterial latency the purine nucleoside phosphorylase (EC 2.4.2.1) has been proposed as target for development of antibacterial drugs. PNP catalyzes the reversible cleavage in the presence of inorganic phosphate of N-ribosidic bonds of the purine nucleosides and deoxynucleosides, except adenosine. This reaction generates the purine base and ribose (deoxyribose)-1-phosphate. PNP is specific for purine nucleosides in the β-configuration and cleaves the glycosidic bond with inversion of configuration to produce α-ribose-1-phosphate. In this work PNP was crystallized in association with inosine, hypoxanthine and acyclovir, substrate, product and inhibitor, respectively, and data were collected using synchrotron radiation. In addition, molecular dynamics simulations and isothermal titration calorimetry experiments were used to provide detailed information on the dynamic properties and to investigate the profile and thermodynamic affinities of MtPNP associated with these molecules. With obtained results we hope to contribute to the search of new selective inhibitors for MtPNP, since differences between the mycobacterial and human enzyme binding sites have been also identified, making structure-based drug design feasible. / A tuberculose ressurgiu na metade dos anos 80 e, atualmente aproximadamente dois milh?es de pessoas morrem por ano devido a esta doen?a. O ressurgimento da tuberculose tornou-se uma amea?a ? sa?de p?blica. A alta susceptibilidade dos pacientes infectados com HIV e a prolifera??o de cepas resistentes a m?ltiplas drogas t?m criado a necessidade de se desenvolver novas terapias. No entanto, nenhuma nova classe de drogas contra a tuberculose foi desenvolvida nos ?ltimos 45 anos. Deste modo, torna-se iminente a necessidade de se desenvolver novos agentes antituberculose. Como o metabolismo de purinas pode estar implicado na lat?ncia da micobact?ria, a purina nucleos?deo fosforilase de Mycobacterium tuberculosis (MtPNP) (EC 2.4.2.1) foi proposta como alvo para o desenvolvimento de drogas antibacterianas. A PNP catalisa a clivagem revers?vel, na presen?a de fosfato inorg?nico, de liga??es N-ribos?dicas de nucleos?deos e desoxinucleos?deos de purina, com exce??o da adenosina. Esta rea??o produz base p?rica livre e ribose (desoxiribose)-1-fosfato. A rea??o se processa com invers?o de configura??o, de β-nucleos?deos para α-ribose-1-fosfato. Neste trabalho a PNP foi cristalizada em associa??o com inosina, hipoxantina e aciclovir, substrato, produto e inibidor, respectivamente, e os dados foram coletados utilizando radia??o s?ncrotron. Al?m disso, a simula??o por din?mica molecular e experimentos de calorimetria por titula??o isot?rmica foram utilizadas para fornecer informa??es detalhadas acerca das propriedades din?micas, e investigar o perfil termodin?mico e afinidades da MtPNP associada com estas mol?culas. Com os resultados obtidos n?s esperamos contribuir para a busca de novos inibidores seletivos de MtPNP, j? que as diferen?as entre os s?tios de liga??o da enzima humana e de micobact?ria foram identificadas , tornando vi?veis projetos de desenho de drogas baseados na estrutura.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-05-19T12:54:32Z No. of bitstreams: 1 DIS_ROBERTA_MONTEIRO_KATZAP_COMPLETO.pdf: 1440611 bytes, checksum: 60581bcd966d13bb2ed8592af3528373 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-19T12:54:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_ROBERTA_MONTEIRO_KATZAP_COMPLETO.pdf: 1440611 bytes, checksum: 60581bcd966d13bb2ed8592af3528373 (MD5) Previous issue date: 2016-03-02 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / Chronic kidney disease patients on peritoneal dialysis therapy are susceptible to infections, with peritonitis being the primary cause of technique failure. Peritoneal fluid culture is one of the essential elements for proper diagnosis and treatment of peritonitis. The aim of this study was to compare the time required to obtain a positive culture using different laboratory methods. An in vitro cross-sectional study comparing different laboratory techniques for preparation and culture of bacteria in peritoneal fluid. The research was conducted with 21 sterile dialysis fluid bags with 1.5% glucose concentration, and 21 peritoneal dialysis bags containing peritoneal fluid drained from patients without peritonitis, assisted at the Nephrology Unit from HSL-PUCRS. Fluids from the 42 peritoneal dialysis bags were contaminated by injecting a coagulase-negative Staphylococcus suspension and then prepared for culture using four distinct techniques - A (direct culture), B (post-centrifugation culture), C (direct culture after 4h sedimentation), and D (culture after 4h sedimentation and centrifugation) ? followed by seeding. In the 21 contaminated sterile bags, the mean times to obtain a positive culture with techniques D (19.6 h ?2.6) and C (19.1 h ?2.3) were longer in comparison to A (15.8 h ?3.0; p<0.01), but not statistically different from group B mean (19.0 h ?3.2). The same occurred in the 21 bags drained from patients, with mean times for techniques D (14.0 h ?1.9) and C (14.5 h ?1.7) being longer than technique A (12.22 h ?1.94; p<0.05), however not statistically different from technique B (13.2 h ?1.3). The sedimentation and centrifugation steps were unnecessary and may delay antibiotics sensitivity test result by approximately 8 hours. / Pacientes com doen?a renal cr?nica que realizam terapia de di?lise peritoneal est?o suscet?veis a infec??es, sendo peritonite a principal causa de fal?ncia do m?todo. A cultura do l?quido peritoneal ? um dos elementos essenciais para o manejo cl?nico e tratamento adequados da peritonite. O objetivo deste estudo foi comparar o tempo necess?rio para obter uma cultura positiva, com diferentes m?todos laboratoriais. Estudo transversal, in vitro, comparando diferentes t?cnicas laboratoriais de preparo e cultura para bact?rias em l?quido peritoneal. O estudo foi feito com 21 bolsas de l?quido de di?lise peritoneal est?reis, com concentra??o de 1,5% de glicose, e em 21 bolsas contendo l?quido peritoneal drenado de pacientes sem peritonite, atendidos pelo Servi?o de Nefrologia do HSL-PUCRS. O dialisado das 42 bolsas de di?lise peritoneal foi contaminado, injetando-se suspens?o de Staphylococcus coagulase negativa e, em seguida, submetido a quatro t?cnicas distintas ? A (cultura direta); B (cultura p?s-centrifuga??o); C (cultura ap?s sedimenta??o de 4 h); e D (cultura ap?s sedimenta??o de 4 h e centrifuga??o) ? de preparo e semeadura. Nas 21 bolsas est?reis contaminadas se verificou que as m?dias de tempo para positivar a cultura nas t?cnicas D (19,6 h ?2,6) e C (19,1 h ?2,3) foram maiores, comparadas ? A (15,8 h ?3,0; p<0,01), mas estatisticamente n?o diferentes da m?dia do grupo B (19,0 h ?3,2). O mesmo aconteceu nas 21 bolsas drenadas dos pacientes, com tempos m?dios para as t?cnicas D (14,0 h ?1,9) e C (14,5 h ?1,7) superiores ao tempo da t?cnica A (12,22 h ?1,94; p<0,05), por?m n?o estatisticamente diferente da t?cnica B (13,2 h ?1,3). As etapas de sedimenta??o e centrifuga??o foram desnecess?rias, podendo postergar em quase oito horas o resultado final da cultura, comparativamente ? cultura direta, atrasando o resultado do teste de sensibilidade aos antibi?ticos.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2006-Marcelo Carvalho Gomes.pdf: 324564 bytes, checksum: 3942a2feee43fca4762eb4590c899bfc (MD5) Previous issue date: 2006-03-31 / The present work was carried out in three different goat raisings and 27 females and 2 males were selected for identifying the present microbiota in the preputial and vaginal cavity of goats under three estrous cycle phases: In Februrary, 2005 in the pro-estrum, in May, 2005 in the post-copula and in October, 2005 in the post-partum. The samples were collected by swabs as well as vaginal and preputial washings for studying microbiota and by gynecological brushes for the females esfoliative cytological study. The two greatest bacteria genera prevalence were: Micrococcus spp (89,65 %) following by Bacillus spp. (29,90 %). Filamentous fungi as Cladosporium spp. (26,39 %) and Aspergillus spp. (11,46 %) were the most isolated. On the bacteria cytological test about 76 % of the investigations have been in accordance with the microscopic finding and bacteria isolation. In 89% appraised animal some yeasts presence on sheets was observed in spite of there was isolation just in 7,4 % of the animals. There was similarity between hifas observation and filamentous fungi isolation, in regarding to 53 % of hifas presence investigations. The bacterial and fungical microbiota found on this survey showed the goats vaginal and preputial microbiota diversity and pointed out to the fact that it might be carried during copulation. The number of isolated bacteria species in the post-copulation phase was upper, as well as for yeasts. The vaginal cytology performed significative association in relation to the bacterial isolation, observed by cocos and bacilli presence on the sheets with positive growth. Bacteria potentially pathogenic as Pseudomonas alcalinigenes, P. aeruginosa, and Corynebacterium spp. as well as opportunist fungi as Aspergillus flavus in healthy goats vaginal cavity were found. / O presente trabalho foi desenvolvido em tr?s criat?rios caprinos distintos, de onde tomamos 27 f?meas e 2 machos a fim de identificar a microbiota presente no prep?cio de bodes e na cavidade vaginal de cabras em tr?s fases do ciclo estral: fevereiro de 2005 no proestro, maio de 2005 ap?s a c?pula e outubro de 2005 ap?s o parto. As amostras foram coletadas atrav?s de swab, lavado vaginal e prepucial para o estudo da microbiota e com escovas ginecol?gicas para o estudo colpocitol?gico das f?meas. Os dois g?neros de bact?rias de maior preval?ncia foram os seguintes: Micrococcus spp. (89,65 %) e Bacillus spp. (29,90 %). Os dois g?neros de fungos de maior preval?ncia foram Cladosporium spp. (26,39 %) e Aspergillus spp. (11,46 %). No estudo colpocitol?gico para bact?rias, em 76 % das investiga??es houve concord?ncia entre os achados microsc?picos e isolamento bacteriano. Em 89 % dos animais avaliados foi observada a presen?a de leveduras nas l?minas, mas houve isolamento em apenas 7,4 % dos animais. Em 53 % das investiga??es da presen?a de hifas houve concord?ncia entre a observa??o de hifas e o isolamento de fungos filamentosos. A microbiota f?ngica e bacteriana encontrada no presente trabalho evidenciou a diversidade da microbiota vaginal e prepucial de caprinos e aponta para o fato de que podem ser carreados durante a c?pula. Observou-se que o n?mero de esp?cies isoladas de bact?rias ? superior na fase de p?s-c?pula enquanto que em fungos observamos este aumento no p?s-parto; O resultado da citologia vaginal teve correla??o com o isolamento bacteriano, observada pela presen?a de cocos e bacilos nas l?minas com crescimento bacteriano positivo; Bact?rias potencialmente patog?nicas como Pseudomonas alcaligenes, P. aeruginosa e Corynebacterium spp. foram encontrados na cavidade vaginal de cabras h?gidas, assim como fungos oportunistas como Aspergillus flavus.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:17:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008 - Marcelo Santos de Oliva.pdf: 3554572 bytes, checksum: 0fae31785d5eaf0f107b4791b1e03628 (MD5) Previous issue date: 2008-11-13 / Mussels are bivalve mollusks that developed a filtrating system enabling them to uptake nutrients from water. This is a not selective mechanism, so mussels microbiological analysis shows up the aquatic environment quality. Therefore, the present work aimed to isolate and identify bacterial microbiota from bivalve mollusks incrustated into the rocky coast of Arquip?lago de Santana, Maca?, RJ. The antimicrobial resistance pattern of prevalent microorganisms isolated was also analyzed. The surrounding water microbiological quality was also evaluated in order to detect contamination source from fishing and subaquatic activities in the studied region. From the bacteriological analysis it was obtained a total of 51 isolates of Vibrio spp., being V. damsela (n=15) the prevalent specie, followed by V. harveyi (n=13) and V. alginolyticus (n=07). It was also obtained a total of 20 isolates of Enterobacteriaceae species, being Escherichia coli (n=06) the prevalent one, followed by Proteus vulgaris (n=04). Vibrio spp. isolates presented 100% of sensitivity to tested antimicrobials, except for ampicillin with no detected sensitivity corroborating to literature. For enterobacteria, it was detected a high percentile of sensitivity to all testes antimicrobials. In the six samples of ocean water analyzed it was not possible to detect total or fecal coliforms. The low percentile of isolated microorganisms from mussels at Arquip?lago de Santana can be justified for its location at the open sea, far away from the coast and influenced by sea currents, in a environment not yet altered by human action. / Os mexilh?es s?o moluscos bivalves filtradores que se alimentam de microrganismos captados pela corrente de ?gua e n?o apresentam capacidade seletiva de filtra??o do seu alimento, consequentemente, a an?lise dos mexilh?es reflete a qualidade microbiol?gica do habitat aqu?tico. Desse modo, o presente trabalho objetivou executar o isolamento e identifica??o da microbiota bacteriana a partir de moluscos bivalves incrustados em cost?es rochosos no Arquip?lago de Santana, Maca?- RJ, bem como analisar o perfil de resist?ncia dos microrganismos prevalentes. Tamb?m se buscou avaliar a qualidade da ?gua de modo a detectar poss?veis contamina??es decorrentes das atividades pesqueiras e subaqu?ticas nesta regi?o. A partir das an?lises bacteriol?gicas foi obtido um total de 51 col?nias de Vibrio spp. com preval?ncia da esp?cie V. damsela (n=15), seguida de V. harveyi (n=13) e V. alginolyticus (n=07) e um total de 20 col?nias de enterobact?rias com preval?ncia de Escherichia coli (n=06) seguida de Proteus vulgaris (n=04). Os isolados de Vibrio spp. apresentaram 100% de sensibilidade aos antimicrobianos testados, com exce??o da ampicilina, para a qual n?o foi detectada qualquer sensibilidade a semelhan?a de outros relatos na literatura. Nos isolados de enterobact?rias avaliados, foram detectados elevados percentuais de sensibilidade aos antimicrobianos testados. No total de seis amostras de ?gua do mar analisadas, n?o foi detectada a presen?a de coliformes totais e termotolerantes. O baixo percentual de microrganismos isolados de mexilh?es no Arquip?lago de Santana pode ser justificado por ser um local de mar aberto, afastado da costa e sobre a influ?ncia de correntes mar?timas, e ainda pouco impactado pela a??o humana.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449081.pdf: 619736 bytes, checksum: f49f3ff20314e610e563f984cfead299 (MD5) Previous issue date: 2013-04-30 / Salmonella Enteritidis is the most prevalent serotype isolated in Brazil, mainly associated with poultry products, which have been primarily involved in foodborne disease outbreaks. The high prevalence of reduced susceptibility to antimicrobial agents in various Salmonella serotypes isolated from samples related to livestock animal, animal foods and human has been reported worldwide. Therefore, has increased the interest in investigating the genetic mechanisms involved in resistance to antimicrobial agents, especially genetic elements capable of carrying resistance genes cassettes, which could be the origin of multi-resistant strains. Besides the genetically determined antimicrobial resistance, bacteria can also exhibit resistance by the ability to form biofilm, which protects bacteria from environmental stresses, favoring the colonization and persistence of these microorganisms in the environment. Thus, the aim of this study was to determine the antimicrobial susceptibility of S. Enteritidis strains and investigate the genes involved in the main resistance determined, as well as evaluate the ability of these strains in to produce biofilm. Forty-seven S. Enteritidis strains isolated from human, poultry, swine, and food were analyzed. Sixteen isolates (34%) were phenotypically resistant to at least one antibiotic tested. Of these, four isolates harbored class 1 integron. All strains resistant to sulfonamide had concomitantly genes sul1 and sul2. The genes strA, strB, aadA and aadB were identified in the majority of the aminoglycosides resistant isolates, whereas 92.9% showed strA, 71.4% strB, 7.1% aadA and 50% aadB. The tetB gene was detected in two of the three strains resistant to tetracycline, and tetC in one. In the three strains resistant to ampicillin the blaTEM gene was detected. Overall, among the 47 S. Enteritidis tested, 89.4% strains were able to form biofilm on polystyrene plates. Among these, 42.4% were considered weak biofilm producers, 14.9% moderate producers and 34% strong producers. It has been demonstrated that the majority of the S. Enteritidis strains that showed resistance to at least one antimicrobial agent were able to form biofilm, which increases concerns about food contamination, especially by the possibility of persistence of bacteria resistant to antibiotics on the environment and the subsequently dissemination of these strains to human. / A Salmonella Enteritidis tem sido o sorotipo mais prevalente no Brasil, principalmente associado a produtos de origem av?cola, que t?m sido prioritariamente envolvidos em surtos de doen?as transmitidas por alimentos. A alta preval?ncia de suscetibilidade reduzida a antimicrobianos em diversos sorotipos de Salmonella isolados de amostras relacionadas a animais de produ??o, a humanos e a alimentos de origem animal vem sendo relatada no mundo inteiro. Com isto, tem aumentado o interesse em investigar os mecanismos gen?ticos envolvidos na resist?ncia a antimicrobianos, especialmente elementos gen?ticos capazes de carrear cassetes de genes de resist?ncia, o que pode constituir a origem de cepas multi-resistentes. Al?m da resist?ncia a antimicrobianos determinada geneticamente, as bact?rias tamb?m podem apresentar resist?ncia pela habilidade de formar biofilme, protegendo-as de estresses ambientais, favorecendo a coloniza??o e persist?ncia desses microrganismos no ambiente. Deste modo, o objetivo deste estudo foi determinar a suscetibilidade a antimicrobianos de cepas de S. Enteritidis e investigar os genes envolvidos nas principais resist?ncias determinadas, bem como avaliar a capacidade de forma??o de biofilme destas cepas. Para tanto, foram analisadas 47 cepas de S. Enteritidis isoladas de humanos, aves, su?nos e alimentos. Dezesseis isolados (34%) se mostraram fenotipicamente resistentes a pelo menos um antimicrobiano testado. Destes, quatro apresentaram integron de classe 1. Todas as cepas resistentes ? sulfonamida apresentaram concomitantemente os genes sul1 e sul2. Os genes strA, strB, aadA e aadB foram identificados na maioria dos isolados que apresentaram resist?ncia a aminoglicos?deos, sendo que 92,9% apresentaram o gene strA, 71,4% strB, 7,1% aadA e 50% aadB. O gene tetB foi detectado em duas das tr?s cepas resistentes ? tetraciclina e o tetC em uma. J? as tr?s cepas resistentes ? ampicilina apresentaram o gene blaTEM. No total, dentre as 47 cepas de S. Enteritidis testadas, 89,4% foram capazes de formar biofilme em placas de poliestireno. Dentre estas, 42,4% foram consideradas fracas produtoras de biofilme, 14,9% produtoras moderadas e 34% fortes produtoras. Foi demonstrado que a maioria das cepas que mostraram resist?ncia a pelo menos um antimicrobiano foram capazes de formar biofilme, o que aumenta a preocupa??o a respeito da contamina??o de alimentos, especialmente pela possibilidade de persist?ncia de microrganismos resistentes a antimicrobianos no ambiente e a subsequente dissemina??o destas cepas para humanos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 393359.pdf: 3706184 bytes, checksum: 69c5551b27d8ba08aadf9a5c582b8491 (MD5) Previous issue date: 2007-07-05 / A resist?ncia natural das plantas a doen?as ? baseada tanto em mecanismos pr?-formados quanto em mecanismos induzidos. Esse estudo pretendeu analisar os n?veis de compostos fen?licos, incluindo o grupo dos flavon?ides e as atividades das enzimas polifenoloxidases (PPOs) e peroxidases (POX) em Solanum tuberosum cv. ?gata, em resposta ?s inocula??es com as bact?rias fitopatog?nicas incompat?veis Xanthomonas axonopodis, Ralstonia solanacearum, e compat?veis Erwinia carotovora. A compatibilidade das bact?rias foi avaliada atrav?s da inocula??o de tub?rculos. Tub?rculos infiltrados com E. carotovora exibiram sinais de doen?a e com R. solanacearum e X. axonopodis n?o desenvolveram doen?a. As inocula??es nas folhas foram realizadas dependendo do n?mero e das localiza??es das folhas nos ramos. As inocula??es m?ltiplas foram realizadas nas folhas basais, intermedi?rias e apicais e as inocula??es simples ocorreram nas folhas intermedi?rias. As folhas inoculadas com as suspens?es de X. axonopodis e R. solanacearum exibiram a resposta de hipersensibilidade (HR) dentro de 24 hpi, enquanto que as folhas inoculadas com E. carotovora evidenciaram sintomas de doen?a. Portanto, o isolado de R. solanacearum utilizado nos experimentos n?o mostrou virul?ncia a esta cultivar de batata. Independentemente do tratamento bacteriano, as folhas basais apresentaram nas inocula??es m?ltiplas, as mais altas atividades das PPOs e das POX e os n?veis mais baixos de compostos fen?licos totais e de flavon?ides, quando comparadas com as folhas apicais. As folhas basais e as intermedi?rias inoculadas com R. solanacearum e com X. axonopodis mostraram um aumento nos n?veis de compostos fen?licos totais e de flavon?ides. Esses aumentos foram similares ou maiores que os n?veis observados nas folhas apicais n?o inoculadas. De um modo geral, as inocula??es m?ltiplas exibiram os maiores n?veis de compostos fen?licos totais e de flavon?ides, enquanto que as inocula??es simples apresentaram os maiores aumentos nas atividades das PPOs. Contudo, as atividades das POX n?o apresentaram diferen?as significativas entre as inocula??es m?ltiplas e simples. No presente estudo, o metabolismo de defesa nesta cultivar de batata foi estimulado pelas bact?rias incompat?veis, indicando a sua posterior utiliza??o como indutoras da defesa da planta contra o ataque subseq?ente de pat?genos compat?veis.