Made available in DSpace on 2016-08-16T18:18:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Andressa Almeida Santana.pdf: 1466363 bytes, checksum: ae0eefc75fb09cd9f96594f4e5656ed5 (MD5) Previous issue date: 2011-07-29 / FUNDAÇÃO DE AMPARO À PESQUISA E AO DESENVOLVIMENTO CIENTIFICO E TECNOLÓGICO DO MARANHÃO / Canine babesiosis and canine visceral leishmaniasis (CVL) are vector borne diseases, where dogs exert a play as reservoir or source for arthropods responsible by the transmission of these protozoosis. Babesia canis vogeli, is transmited by tick Rhipicephalus sanguineus while Leishmania infantum (sin. Leishmania chagasi) is transmited by sand fly (Lutzomyia longipalpis). The results showed that CVL remains endemic in São Luís Municipality. Despite that the coinfection between Leishmania and Babesia was low considering that both diseases are endemic in this tropical area. Beside that was observed that Yorkshire terrier presented higher predisposition to acquire the infection by B. canis vogeli. A remarkable result was the occurrence of ocular lesions associated to L. infantum infection. / A babesiose canina e a leishmaniose visceral canina são doenças transmitidas por vetores, sendo os cães competentes reservatórios e fonte alimentar dos artrópodes envolvidos. Babesia canis vogeli, é um parasita intraeritrocitário transmitido pelo carrapato Rhipicephalus sanguineus. Leishmania infantum (sin. Leishmania chagasi) transmitidos a mamíferos pela picada dos flebotomíneos (Lutzomyia longipalpis), infectando macrófagos do Sistema Fagocítico Mononuclear do hospedeiro. O presente trabalho é divido em capítulos e os resultados encontrados mostraram que a leishmaniose visceral canina ainda é endêmica no município de São Luís, e que apesar disso a taxa de coinfecção com Babesia foi baixa. Também foi observado que a raça Yorkshire terrier, dentre as raças estudadas, apresentou maior predisposição para contrair a infecção por B. canis vogeli. Outro resultado significativo foi a ocorrência de lesões oculares associadas à infecção por L. infantum.

Made available in DSpace on 2016-04-28T20:16:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007- Katia Roberta Fernandes.pdf: 2143619 bytes, checksum: 6ff7127f4642317cf1f53d7aceb93f1f (MD5) Previous issue date: 2007-02-26 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The aim of the present study was to evaluate the natural and experimental infection of B. equi in nymphs and adult Boophilus microplus using optical microscopy and molecular analysis. The experimental infection was observed in nymphs, males and females of B. microplus fed on equines chronically infected with B. equi and in non fed larvae and eggs. For the experiments two equines, of not defined breed, proven to be infected with B. equi were used. The animals were infested with B. microplus larvae of generation F4 obtained from a laboratory maintained population, known to be free of Babesia spp. infection. Daily collections of ticks were realized using as starting point the ecdisys to nymph state. After the collection the hemolymph was examined and the intestine and salivary glands were dissected, smashed on glass slides for microscopy, methanol treated and stained with Giemsa. There were dissected 860 specimens (432 nymphs, 280 females and 148 males). The dissected salivary glands were divided into two parts. The first one was smashed on microscopy glass slides, stained and examined by optical microscopy for morphologic analyses. From the second part was realized DNA extraction and PCR with specific primers for the 18S rRNA. On optical microscopy of nymph hemolymph was possible to be observed the presence of kinetes with claviform aspect characteristic for the genus Babesia. In the salivary glands of B. microplus nymphs the morphology and the sequence of developmental stages of B. equi were observed initiating on day 4 after ecdysis, being possible to see in acinary cells the formation of sporoblasts and ovoid sporozoites measuring 1.5 μm of diameter and elongated sporozoites with 3.8 to 5.2μm of length and 0.8 to 1.5 μm of width. The PCR confirmed the presence of B. equi in DNA samples extracted from salivary glands of nymphs, male and female ticks as well as in larvae and eggs. To evaluate the natural infection were collected nymphs and adult B. microplus from two equines naturally infested by these ticks and naturally infected with B. equi. These horses were originated from Seropedica city in the state of Rio de Janeiro. There were dissected 324 specimens (145 nymphs, 138 females and 41 males). The proceedings with the salivary glands were identical to the previously described for the experimental infection. Of the salivary glands submitted to PCR, 70% showed to be infected with B. equi. Microscopical analysis of the salivary glands revealed the presence of sporoblast stages and the development of elongated sporozoites in acinary glands. The morphologic, morphometric and molecular analysis confirmed the experimental and natural infection of the salivary glands of nymphs and adult B. microplus with B. equi. The results of the present study show the ability of B. equi to develop in this tick species. The detection of B. equi DNA in eggs and larvae also suggests the possibility of transovarian transmission in B. microplus. The results allow to consider the tick B. microplus as a potential biologic vector of B. equi in horses from the studied region. / Este trabalho teve como objetivo avaliar a infec??o natural e experimental de Babesia equi em ninfas e adultos de Boophilus microplus por meio de microscopia ?ptica e an?lise molecular. A infec??o experimental foi observada a partir de ninfas, machos, f?meas, ovos e larvas n?o alimentadas de B. microplus alimentados em equinos com infec??o cr?nica por B. equi. Para a realiza??o do experimento foram utilizados dois eq?inos, mesti?os, com infec??o por B. equi. Os animais foram infestados com larvas de B. microplus de gera??o F4 obtidas de col?nia mantida em laborat?rio e livres de infec??o por Babesia spp. A partir da ecdise para ninfa foram realizadas coletas di?rias. Ap?s a coleta foram realizados os exames de hemolinfa e extra??o do intestino e das gl?ndulas salivares os quais foram macerados em l?minas de vidro para microscopia, fixados em metanol e corados com Giemsa. As gl?ndulas salivares dissecadas foram divididas em duas partes. A primeira parte foi macerada em l?minas de vidro para microscopia, corada com corante Giemsa e observada em microsc?pio ?tico para an?lise morfol?gica. A segunda parte foi realizada a extra??o de DNA, sendo submetida a PCR com primers especif?cos para o gene 18S rRNA para B. equi. Foram dissecados 860 esp?cimes (ninfas= 432; f?meas= 280 e machos= 148). Na microscopia ?ptica foi poss?vel observar nas hemolinfas das ninfas a presen?a de cinetos com aspecto claviforme t?picos do g?nero Babesia. Nas gl?ndulas salivares, a morfologia e a seq??ncia dos est?gios de desenvolvimento de B. equi das ninfa s de B. microplus, foram observadas a partir do 4? dia ap?s ecdise, sendo poss?vel observar nos ?cinos celulares a forma??o de esporoblastos e de esporozo?tas ov?ides medindo 1,5 μm de di?metro e alongados medindo 3,8 a 5,2μm de comprimento e 0,8 a 1,5μm de largura. A rea??o em cadeia de polimerase (PCR) confirmou a presen?a de B. equi em DNA de gl?ndulas salivares extra?das de ninfas, machos, f?meas, assim como dos ovos e larva. A infec??o natural foi observada a partir de ninfas e adultos de B. microplus coletados de dois eq?inos naturalmente infestados e comprovadamente infectados por B. equi, procedentes do munic?pio de Serop?dica, Rio de Janeiro. Foram dissecados 324 esp?cimes (ninfas= 145, f?meas= 138 e machos= 41). O processamento das gl?ndulas salivares dissecadas foi semelhante ao descrito para infec??o experimental. Das gl?ndulas salivares submetidas a PCR, 70% apresentaram resultados positivos para B. equi. As an?lises por microscopia ?ptica das gl?ndulas salivares das ninfas e dos adultos revelaram a presen?a nos ?cinos celulares os est?gios de esporoblastos e o desenvolvimento de esporozo?tas alongados. As an?lises morfol?gicas, morfom?tricas e moleculares confirmaram a infec??o experimental e natural das gl?ndulas salivares de ninfas e adultos de B. microplus por B. equi. Os resultados deste estudo demonstram a capacidade de multiplica??o de B. equi em gl?ndulas salivares de ninfas e adultos de B. microplus. A detec??o de DNA de B. equi em ovos e larvas de B. microplus tamb?m sugere a possibilidade da transmiss?o transovariana nesta esp?cie de carrapato. Estes resultados sugerem que o carrapato B. microplus ? vetor biol?gico de B. equi na regi?o estudada.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-05-15T11:44:50Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PrevalenciaSorologicaMolecular.pdf: 861713 bytes, checksum: ffddee7491410356b82fbbbef16f58ea (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-05-17T12:36:50Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PrevalenciaSorologicaMolecular.pdf: 861713 bytes, checksum: ffddee7491410356b82fbbbef16f58ea (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-17T12:36:50Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_PrevalenciaSorologicaMolecular.pdf: 861713 bytes, checksum: ffddee7491410356b82fbbbef16f58ea (MD5) Previous issue date: 2014-06-26 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo do presente estudo foi verificar a prevalência sorológica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em búfalos da Ilha de Marajó, estado do Pará, Brasil. Foi utilizado o Ensaio de Imunoadsorção Enzimático indireto (ELISAi) com antígeno total contendo proteínas de superfície externa e a Reação em Cadeia da Polimerase quantitativa (PCRq), envolvendo o uso de SYBR Green com base na amplificação de um pequeno fragmento de gene do citocromo b. A prevalência de animais positivos no ELISAi para B. bovis, B. bigemina e para infecção mista foi de 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) e 18.75% (150/800), respectivamente. Na PCRq foi detectado a presença de B. bovis em 15% (18/199) e de B. bigemina em 16% (19/199) dos animais, sendo que destes, 58% (11/19) apresentavam-se co-infectados pelos dois agentes. Os resultados mostram uma baixa prevalência de anticorpos anti-B. bovis e anti-B. bigemina em búfalos da Ilha do Marajó. Porém, observou-se que os agentes da babesiose bovina circulam em búfalos, podendo atuar como reservatório. / The aim of the study was to estimate the prevalence of Babesia bovis and Babesia bigemina in water buffaloes of the Marajó Island, State of Pará, Brazil. We used an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA), with total antigen containing proteins outer surface, and polymerase chain reaction (qPCR), involving the use of SYBR Green based on amplification of a small fragment of the cytochrome b gene. The prevalence of positive animals in iELISA to B. bovis B. bigemina and mixed infection was 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) and 18.75% (150/800), respectively. Using the PCR, the presence of B. bovis was detected in 15% (18/199) and B. bigemina in 16% (19/199) of animals, and of these, 58% (11/19) presented co-infected by the two agents. The results show a low prevalence of an- tibodies anti-B. bovis and anti-B. bigemina in water buffaloes from Marajó Island. However, it was observed that the agents of bovine babesiosis circulate in buffaloes, and these may act as reservoirs.

Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the South region of Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic B. bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established. / A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasita pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de B. bovis intraeritrocitária. Para este estudo, foram analisadas, retrospectivamente, amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.