Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivo: Avaliar a modulação de citocinas pró-inflamatórias (interleucina-6, IL-6; fator de necrose tumoral-, TNF- e interferon-, INF-) e anti-inflamatórias (fator de transformação do crescimento-1, TGF-1) nos processos flogísticos in vivo sob ação do laser de baixa intensidade. Métodos: Cinquenta camundongos isogênicos foram distribuídos aleatoriamente em três grupos: controle (sem procedimento cirúrgico, n = 10); sham (procedimento cirúrgico com três incisões cutâneas padronizadas, seguida de incisão no músculo reto abdominal e posterior sutura, n = 20) e laser (mesmo procedimento seguido de aplicação de laser, n = 20). O grupo sham foi dividido em três subgrupos: sham I (eutanásia e avaliação 36 horas após procedimento cirúrgico); sham II (eutanásia e avaliação 60 horas após cirurgia) e sham III (eutanásia e avaliação 84 horas após procedimento cirúrgico). O grupo laser também foi dividido em três subgrupos: laser I (uma única sessão de laser 12 horas após cirurgia); laser II (duas sessões de laser, 12 e 36 horas após cirurgia) e laser III (três sessões de laser, 12, 36 e 60 horas após cirurgia). Os animais do grupo laser receberam três pontos por sessão de laser infravermelho contínuo (comprimento de onda de 780 nm, potência de 20 mW, fluência de 10 Jcm2, tempo de 20 segundos por ponto e energia de 0,4 J). Após a eutanásia dos animais, as células mononucleares do baço foram isoladas e cultivadas por 48 horas. As concentrações de IL-6, TNF-, IFN- e TGF-1 foram obtidas por Enzyme linked immunosorbent assay method (ELISA). Resultados: Na análise dos grupos sham e laser em relação ao controle, foi encontrada maior concentração de IL-6 e TNF- nas avaliações de 60 e 84 horas pós-operatória (p < 0,05), exceto para o grupo laser II na análise de TNF- (p > 0,05). Na análise de IFN-, foi encontrada maior concentração apenas no grupo sham II quando comparado ao controle (p < 0,05). Desta forma, houve efeito modulador da concentração de TNF- e IFN- pelo grupo laser, principalmente na avaliação de 60 horas pós-operatória. Para as análises de TGF-1 não houve diferença significativa entre os grupos controle, sham e laser (p > 0.05). Conclusão: O laser de baixa intensidade apresentou efeito modulador in vivo de citocinas pró-inflamatórias, principalmente após duas sessões de aplicação pela diminuição da liberação de TNF- e IFN- pelas células mononucleares do baço em camundongos. Entretanto, não houve modulação da liberação de IL-6 e TGF-1. / Purpose: To evaluate the modulation of pro-inflammatory (interleukin-6, IL-6; tumor necrosis factor-, TNF-; and interferon-, IFN-) and anti-inflammatory cytokines (transforming growth factor-1, TGF-1) in the inflammation processes in vivo with lowlevel laser action. Methods: Fifty isogenic mice were randomly distributed in three groups: control (no surgical procedure, n = 10), sham (surgical procedure with three standard cutaneous incisions, followed by an abdominal muscle incision and suture, n = 20) and laser (same procedure followed by laser exposure, n = 20). The sham group was divided into three subgroups: sham I (euthanasia and evaluation, 36 hours after surgical procedure), sham II (euthanasia and evaluation, 60 hours after surgical procedure), and sham III (euthanasia and evaluation, 84 hours after surgical procedure). The laser group was also divided in three subgroups: laser I (a single laser session, 12 hours after surgery), laser II (two laser sessions, 12 and 36 hours after surgery), and laser III (three laser sessions, 12, 36 and 60 hours after surgery). All animals in the laser group received three points per session of continuous infrared laser (wavelength of 780 nm, power of 20 mW, fluency of 10 Jcm2, exposure time of 20 seconds per point, and energy of 0.4 J). After euthanasia, spleen mononuclear cells were isolated and cultured for 48 hours. Concentrations of IL-6, TNF-, IFN- and TGF-1 were obtained by enzyme-linked immunosorbent assay method (ELISA). Results: There was significant difference of the IL-6 and TNF- concentrations in the 60 and 84 hour evaluations when the laser and sham groups were compared to the control group (p < 0.05), except for laser II in the TNF- analysis (p > 0.05). The IFN- concentration analysis showed a significant difference only in sham II when compared to the control group (p < 0.05). Thus, there was a modulatory effect of the TNF- and IFN- in the laser group, particularly in the 60-hour postoperative evaluation. There was no significant difference between the laser, sham, and control groups for TGF-ß1 analysis (p > 0.05). Conclusion: The low-level laser showed a modulatory effect in vivo of pro-inflammatory cytokines, especially after two exposure sessions by decreasing the TNF- and IFN- release of spleen mononuclear cells in mice. However, there was no modulation of the IL-6 and TGF-1 release. / FAPESP: 2007/04479-8 / TEDE

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3225.pdf: 1637039 bytes, checksum: 969ba87438287b6ff0e25502e04da8b1 (MD5) Previous issue date: 2010-06-22 / Universidade Federal de Minas Gerais / Fractures of delayed consolidation and fractures with non-union are commonly found in medical practice and are associated with high morbidity and mortality. Within this context, biochemical and biophysical resource have been studied in an attempt enhance bone healing. Among these may be highlighted the use of low level laser therapy (LLLT) and low intensity pulsed ultrasound (LIPUS). Several studies suggest that both resources are able to stimulate osteogenesis at the fracture site, promoting a greater deposition of bone mass and accelerating the process of bone healing. However, despite a series of biomechanical and radiographic evidence of the effectiveness of LLLT and LIPUS in the bone repair, the celullar and molecular mechanisms that regulate and modulate the acceleration of the fracture consolidation are unknown. So the main purpouse of the present work was to measure the effects of LLLT and LIPUS in the expression of osteogenic genes during the process of bone healing and to extend prior histological description after a bone created defect on of the tibiae in rats. For the study 90 male Wistar rats were underwent surgery for creation of bone defects in both tibias. The animals were randomly distributed into three groups: control group ( bone defect without treatment), bone defect treated with LLLT and bone defect treated with LIPUS. Each group were divided into 3 different subgroups (n=10) that received 3,6 and 12 sessions of treatment, and after 24 hours of each session was the euthanasia of animals on days 7, 13 and 25 days after surgery, respectively at each treatment session. Both tibias were removed and subjected to protocols for histological analysis and gene expression analysis by real time real time PCR. Was observed in the qualitative histological analysis that the animals treated with LLLT showed a greater area of new bone formation within 7, 13, 25 days. Furthermore, morphometric analysis demonstrated increased bone tissue only in animals treated with LLLT in 13 and 25 days. It was verified an increase in mRNA levels of BMP4 in the 13 days of the LLLT group and the ALP, Runx2 and BMP4 in 25 days after the application of LLLT and LIPUS, and the mRNA of ALP was more expressed in the LLLT group . We conclude that LLLT stimulates bone formation by increasing the mRNA expression of BMP4 in the 13 days and the ALP in the 25 days. / Fraturas de difícil consolidação e fraturas com não-união óssea são comumente encontradas na prática médica e estão associadas a altos índices de morbidade e mortalidade. Dentro deste contexto, recursos biofísicos e bioquímicos têm sido estudados na tentativa de minimizar o tempo de consolidação óssea. Dentre estes, podem ser destacados o uso do laser terapêutico de baixa intensidade (LLLT) e do ultrassom pulsado de baixa intensidade (LIPUS). Vários estudos sugerem que ambos os recursos são capazes de estimular a osteogênese no local da fratura, promovendo uma maior deposição de massa óssea e acelerando o processo de consolidação. No entanto, apesar de existir uma série de evidências radiográficas e biomecânicas da efetividade do LLLT e do LIPUS no processo de reparo ósseo, os mecanismos celulares e moleculares envolvidos nestes eventos são desconhecidos. Com isso, este projeto tem o objetivo de analisar os efeitos do LLLT e do LIPUS na expressão de genes relacionadas à formação óssea durante o processo de reparo ósseo e avaliar o calo ósseo através de análise histológica, em defeitos ósseos induzidos em tíbias de ratos. Foram utilizados ratos Wistar submetidos à cirurgia para a confecção de defeitos ósseos em ambas as tíbias. Os animais foram divididos em grupo controle (defeito ósseo sem tratamento), defeito ósseo tratado com LLLT e defeito ósseo tratado com LIPUS. Esses foram divididos em 3 subgrupos (n=10), que receberam 3, 6 e 12 sessões de tratamento e nos dias 7, 13, e 25, respectivamente, ocorreu a eutásia dos animais, sendo realizada 24 horas após a última sessão de tratamento. Ambas tíbias foram retiradas e submetidas aos protocolos de análise histológica e análise da expressão gênica por meio de PCR em tempo real. Foi observado na análise histológica qualitativa que os animais tratados com LLLT apresentaram uma maior área de tecido ósseo neoformado no período de 7, 13, 25 dias. Além disso, a análise morfométrica demonstrou aumento de tecido ósseo somente nos animais tratados com LLLT nos períodos de 13 e 25 dias. Foi verificado um aumento dos níveis de mRNA da BMP4 no período intermediário do grupo LLLT e da ALP, BMP4 e RUNX2 no período de 25 dias após a aplicação do LLLT e LIPUS, sendo que o mRNA da ALP mostrou-se mais expresso no grupo LLLT. Concluímos que o LLLT estimula a formação óssea pelo aumento da expressão do mRNA da BMP4 no período intermediário e da ALP no período tardio.

Made available in DSpace on 2018-03-22T16:00:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_11488_Disserta__o de Mestrado Fl_via Lamanna 19-12-2017.pdf: 942851 bytes, checksum: 87408a19ebee4e4b909da91403b69fd5 (MD5) Previous issue date: 2017-10-27 / O objetivo desta pesquisa é avaliar a eficácia do Laser de Baixa Potência (LBP) de Arsenieto de Gálio e Alumínio (AsGaAl) na redução da dor e no restabelecimento da abertura de boca quando utilizado no pós-operatório de pacientes submetidos à remoção cirúrgica de terceiros molares inferiores. A amostra foi constituída por 22 pacientes entre 18 e 35 anos que fizeram parte tanto do grupo laser (G1) como do grupo controle (G2). Os indivíduos foram submetidos à cirurgia de exodontia dos elementos 38 e 48 em dias distintos e a aplicação do LBP e do placebo seguiu-se de acordo com o protocolo pré-estabelecido de aplicação imediata, 24 e 48 h após o procedimento cirúrgico no G1 e no G2, respectivamente. Os pacientes receberam, enquanto grupo laser, 4 J / cm² de densidade de energia do LBP de AsGaAl, comprimento de onda 808 nm, por períodos de 30 e 40 s intra e extraoral, respectivamente. A dor pós-operatória foi mensurada por meio de uma escala visual analógica (EVA) preenchida ao término da cirurgia (ao final do efeito da anestesia), 24 e 48 h após a cirurgia. A abertura bucal foi medida com paquímetro digital itutoyo®), previamente à cirurgia e 24 e 48 h após o procedimento cirúrgico. Para a análise estatística, utilizaram-se os testes não paramétricos de Friedman e de Wilcoxon na percepção da dor e os testes paramétricos ANOVA e t de Student na avaliação da abertura de boca. Os resultados obtidos identificaram diferença estatística significativa na percepção da dor, sendo esta menor em todos os períodos de tempo no grupo laser em relação ao grupo placebo, enquanto não foi verificada diferença estatística associada ao restabelecimento da abertura de boca. Portanto, concluímos que com a metodologia utilizada o laser AsGaAl, no protocolo terapêutico proposto, foi eficaz na redução da dor.

A presente pesquisa tem como finalidade o estudo comparativo da indução de ossificação em falhas ósseas obtidas experimentalmente, ultra-som de baixa intensidade. Para tal fim foram utilizados 12 coelhos adultos, da linhagem Nova Zelândia, separados em dois grupos experimentais iguais e escolhidos aleatoriamente. Todos os animais foram submetidos a uma osteotomia bilateral do terço distal do rádio, com preservação do periósteo, a fim de se produzir uma falha óssea de aproximadamente 8 mm. Os animais de um dos grupos experimentais tiveram as falhas ósseas preenchidas com hidroxiapatita. Em ambos os grupos a falha óssea direita recebeu estímulo ultra-sônico pulsado (intensidade de 18 mW com frequência de 1,5 MHz) por 20 minutos, durante 15 dias consecutivos, de forma estacionária. A falha óssea esquerda permaneceu como controle. O controle radiológico foi realizado 24 horas, 3, 6 e 9 semanas após a cirurgia, sendo que ao final de cada um desses períodos dois animais eram sacrificados. A análise nos revelou um aumento de calo ósseo e uma maior espessura de cortical em todas as diafises estimuladas. A análise microscópica demonstrou que as falhas preenchidas com hidroxiapatita e estimulados com ultra-som, apresentaram-se em fase de ossificação mais avançadas do que o controle porém, quando comparadas com as osteotomias vazias, estas apresentavam processo de reparação mais evidente, independente da estimulação. Nossos resultados sugerem que a energia ultra-sônica pulsada de baixa intensidade mostrou-se ser um recurso eficaz na aceleração do processo de ossificação e que a hidroxiapatia, utilizada no experimento, apresenta uma baixa taxa de osteoindução. / This research\'s purpose is the comparative study of ossification\'s induction in bone defect experimentally obtained, filled in or not with Hydroxyapatite (HA - 40) and stimulated by low-intensity pulsed ultrasound. The experiment included the utilization of 12 adults rabbits, from New Zeland lineage, sorted out in two equal experimental groups, and aleatory selected. An animals were submited to bilateral osteotomy of the ratio\'s distal third, preserving the periosteum, for the production of a 8 mm bone defect. The animals of one experimental group had the bone defect filled in with hydroxiapatite. In both group the right bone defect received pulsed ultrasonic stimulus (18 mW intensity with 1,5 MHz frequency) for 20 minutes, during 15 consecutive days, in a stationary way. The left bone defect remained as a control. Radiologic control was made 24 hours, 3, 6 and 9 weeks after the surgery, and at the end of each period two animals were sacrificed. The radiologic analysis showed us an increase of the bone callus and a bigger cortical thickness in all stimulated diaphyses. The macroscopical analysis demonstrated that the defects wich were filled in with hudroxyapatite and stimulated with ultrasound, appeared to be in a more advance ossification phase than the empty osteotomy; these appeared to be in a more evident healing process, independent on stimulation. Our results suggest that the low-intensity pulsed ultrasound appeared and effective resort in the ossification process\'s acceleration, and showed that the hydroxiapatite, which was used in the experiment, presents a low percentage of osteoinduction.

O Paracoccidioides brasiliensis (Pb) é o agente etiológico causador da Paracoccidioidomicose (PCM), uma micose sistêmica endêmica de maior prevalência na America Latina e no Brasil. Através do estudo de modelo experimental, foi possível estabelecer uma comparação e classificar diversas linhagens de camundongos isogênicos infectados com Pb como resistentes e susceptíveis e o entendimento dos mecanismos de resposta imune envolvidos na doença. Uma vez infectado, o sistema imune do hospedeiro se dispõe de diversos mecanismos, tanto da imunidade inata quanto da adaptativa para conter a infecção. Os fagócitos, como macrófagos e polimorfonucleares neutrófilos (PMN), desempenham um papel central na resposta imune contra o fungo. Além de ser o elo entre imunidade inata e adquirida, os PMN são eficazes na defesa do hospedeiro contra o Pb, pois estas células ficam restritas ao local da lesão causada pelo fungo. Nesta perspectiva, a terapia utilizando laser terapia de baixa potência (LLLT) com raios infravermelhos surge como um método capaz de estimular a atividade desempenhada pelas células imunes, como PMN, sem alterar sua função, por ser descrito como um método modulador de células imunológicas. A LLLT foi aplicada com uma potência de 50mW e comprimento de onde de 780nm em dois pontos de cada pata traseira de camundongos infectados com Pb18 ou inoculados com Zymosan pelo método de bolsa de ar subcutâneo. No grupo de animais irradiados e não irradiados, foram avaliados o efeito da LLLT in vivo na produção de proteínas totais, capacidade de produção de espécies reativas de oxigênio (ERO) e capacidade fungicida de PMN recém-isolados do local de infecção. Os resultados demonstraram que a LLLT ativa os PMNs, pois nos grupos de camundongos irradiados independentemente do estímulo para a inflamação, houve aumento na produção de proteínas totais, na capacidade fungicida e produção de ERO, em comparação com o grupo controle. Apesar do laser ter diminuído o número total de PMN colhidos de camundongos infectados com Pb18, a viabilidade destas células de todos os grupos experimentais permaneceram altamente viáveis. Os resultados demonstraram que a LLLT ativa os PMNs, o que resultou numa maior capacidade fungicida, sugerindo que o laser possa ser utilizado como terapia adicional no tratamento da PCM. / Paracoccidioides brasiliensis (Pb) is the etiologic agent of Paracoccidioidomycosis (PCM), an endemic systemic mycosis most prevalent in Latin America and Brazil. Through the study of experimental model, it was possible to make a comparison and classify different strains of inbred mice infected with Pb as resistant or susceptible and the understanding the mechanisms of immune response involved in the disease. Once infected, the host immune system has several mechanisms both the innate to adaptive immunity to contain the infection. Phagocytes, such as macrophages and polymorphonuclear neutrophils (PMN) play a central role in the immune response against the fungus. Besides being the link between innate and acquired immunity, the PMN are effective in host defense against Pb because are restricted to the site of injury caused by fungus. In this perspective, therapy using Low Level Light Therapy (LLLT) with infrared laser in vivo emerges as a method to stimulate the activity stimulated by immune cells such as PMN, without changing its function, to be described as a method of modulating immune cells. LLLt was applied ate two points of paw hind mouse, a power of 50 mW and a wavelength of 780nm, mice infected with Pb18 or inoculated with Zymosan by method air pouch. On irradiated and non-irradiated animals, we assessed the effect of LLLT in vivo production of total protein production capacity of reactive oxygen species (ERO) and freshly isolated PMN fungicidal capacity of the site of infection. The results showed that the active LLLT PMNs, for groups of irradiated mice regardless of the stimulus for inflammation, there was an increase in the production of total proteins, the ability fungicide and ROS production compared with the control group. Although the laser has decreased the total number of PMNs collected from mice infected with Pb18, the viability of the cells in all experimental groups remained highly viable. The results showed that the active LLLT PMNs, resulting in a greater capacity fungicide, suggesting that the laser can be used as adjunctive therapy in the treatment of PCM. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A imunidade inata mostra-se importante na defesa do hospedeiro contra a infecção por fungos, e dentro desse contexto macrófagos e neutrófilos (PMN) desempenham papel central na paracoccidioidomicose. O tratamento desta doença inclui o uso de antifúngicos que, além do prolongado tempo de administração, podem ter diversos efeitos colaterais. A laserterapia de baixa potência (LLLT- low level laser therapy) vem sendo utlizada como tratamento adjuvante para muitas enfermidades, e já foi demonstrado seu efeito ativador em neutrófilos, se fazendo necessário compreender melhor os mecanismos imunológicos envolvidos nesse processo. Neste trabalho avaliamos os efeitos da LLLT aplicada in vivo nas patas traseiras de camundongos, infectados pela via ―air pouch‖ subcutânea com a cepa virulenta do P. brasiliensis Pb18 ou a cepa de baixa virulência Pb265, visando atingir células em formação na medula. Grupos de animais não irradiados foram utilizados como controle. Após 8 dias de infecção as células da ―air pouch‖ foram coletadas e analisadas quanto ao número, concentração proteica, liberação de espécies reativas de oxigênio (ERO), atividade mitocondrial de PMN e perfil de migração e secreção das citocinas (GM-CSF, IFN- γ, IL-12, IL-4, IL-10 e IL-17) pelo exsudato celular. O tratamento de animais com LLLT aumentou a atividade mitocondrial, o conteúdo de proteínas e a liberação de ERO por parte dos PMN e diminuiu a secreção da IL-10 pelas células do exsudato na infecção com a cepa virulenta Pb18. Por sua vez, a infecção com a cepa de baixa virulência Pb265 também levou a um aumento na atividade mitocondrial, mas houve diminuição no conteúdo de proteínas e a liberação de ERO foi semelhante ao controle não irradiado. Não foi observada diferença na secreção das citocinas GM-CSF, IFN-γ, IL-12, IL-4 e IL-17 pelas células do exsudato estimuladas por ambas às cepas. Quanto à migração celular, os PMN constituem o principal tipo celular encontrado no local do inóculo, seguido pelos linfócitos e monócitos. O número de PMN foi diminuído no tratamento com LLLT quando o estímulo foi o Pb18 e aumentado quando foi o Pb265. Para os linfócitos ocorreu o inverso, no grupo estimulado com Pb18 o laser atuou aumentando esse tipo celular, e diminuindo quando o estímulo foi o Pb265. Já para os monócitos não houve alteração quando o estimulo foi o Pb18 e houve uma diminuição quando o estímulo foi o Pb265 no grupo tratado com LLLT. Os resultados sugerem que o tratamento com LLLT confere um potencial fungicida aos neutrófilos e uma maior resolução da infecção causada pela cepa virulenta Pb18. / Innate immunity is an important component of host defense against fungi, and in this context machophages and neutrophils (PMN) play a central role in paracoccidioidomycosis. The treatment of this disease includes the use of antifungals, which in addition to the prolonged administration time needed may cause many side effects. Low level laser therapy (LLLT) has been used as an adjuvant treatment for many ailments and its modulating effect on neutrophils has already been demonstrated; however it is necessary to better understand the mechanisms involved in this process. In this work, we evaluated the effects of LLLT applied ―in vivo‖ at the hind paws in mice, aiming the bone marrow. These mice were infected in the subcutaneous air pouch with Pb18 or Pb265 P. brasiliensis isolates. Unirradiated animals were used as controls. After 8 days of infection the cells of air pouch were collected and analyzed for the number, protein concentration and release of ROS, mitochondrial activity of PMN and migration profile and secretion of cytokines (GM-CSF, IFN-γ, IL-12, IL- 4, IL-10 and IL-17) by the cells present in the exudate. LLLT-treated animals showed increased mitochondrial activity, protein content and release of ROS by PMN and in the number of cells and decreased the secretion of IL-10 exudate cells obtained after inoculation with the virulent strain Pb18. In turn, the infection with the low virulence strain Pb265 also led to an increase in mitochondrial activity, but there was a decrease in protein concentration and the release of ROS was similar to that of the unirradiated controls.. No differences were observed in the secretion of the GM-CSF, IFN-γ, IL-12, IL-4 and IL-17 cytokines by exudate cells stimulated by any of the strains. Regarding cell migration, PMN are the main cell type found at the inoculum site, followed by lymphocytes and monocytes. The number of PMN was decreased in the treatment with LLLT when the stimulus was Pb18 and increased when it was Pb265. For the lymphocytes the reverse occurred, in the group stimulated with Pb18 the laser acted increasing this cellular type, and decreasing when the stimulus was the Pb265. For monocytes, there was no change when the stimulus was Pb18 and there was a decrease when the stimulus was Pb265 in the group treated with LLLT. The results suggest that treatment with LLLT elicits a fungicidal activity to the PMN and higher resolution of the infection caused by the virulent Pb18 strain. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Co-orientador: Fernanda Gonçalves Basso / Banca: Gelson Luis Adabo / Banca: Carla Raquel Fontana Mendonça / Resumo:A idadedo indivíduo e a presença de inflamação podem influenciar o metabolismo celular, retardando o processo de reparo tecidual. Diferentes tratamentos, como a laserterapia de baixa potência (LBP) e a aplicação de fatores de crescimento são capazes promover bioestimulação celular através do aumento de sua proliferação e metabolismo. O objetivo deste estudo foi avaliar as atividades de fibroblastos obtidos da gengiva de indivíduos jovens e idosos (Estudo 1), a capacidade de resposta destas células expostas ao fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) (Estudo 2), bem como o efeito da LBP ou do fator de crescimento epidérmico (EGF) sobre a viabilidade e metabolismo destas células em cultura (Estudo 3). Culturas primárias de fibroblastos de gengiva de 6 pacientes (3 jovens - J; e 3 idosos - I) foram obtidas e semeadas em meio de cultura completo (DMEM), de acordo com cada protocolo proposto. No Estudo 1, fibroblastos em DMEM completo foram cultivados em placas de 24 compartimentos pelos períodos de 24, 48 ou 72 horas e submetidos a análise da viabilidade celular (MTT, n=36), produção de proteína total (PT, n=36) e síntese de colágeno Sirius Red (SR, n=36). No Estudo 2, após 24 horas do cultivo celular em placas de 96 compartimentos, o meio de cultura completo foi substituído por DMEM sem soro fetal bovino (SFB) acrescido ou não de TNF-α (100 ng/mL) e mantido em contato com as células por 24 horas adicionais. Então, as células foram analisadas quanto a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs, n=36), produção de óxido nítrico (NO, n=36) e síntese de quimiocina CCL5 (ELISA, n=36). No Estudo 3, fibroblastos cultivados em placas de 24 compartimentos foram tratados com EGF (100 μM) ou irradiados com laser de baixa potência (LASERTable, InGaAsP - 780 ± 3nm; 25mW). A viabilidade celular (Alamar Blue®, n=12), migração celular (Wound Healing, n=12)...(Resumo completo clicar acesso eletrônico) / Abstract: The age as well as the presence of inflammation can influence the cellular metabolism, slowing the tissue healing process. Different therapies, such as the application of growth factors and low level laser therapy (LLLT) are capable of biostimulating cells by increasing their proliferation and metabolism. The aim of this study was to evaluate: the functions of gingival fibroblasts obtained from young and elderly individuals (Study 1); the response of these cells exposed to tumor necrosis factor alpha - TNF-α (Study 2); and the effect of LLLT or epidermal growth factor - EGF on the viability and metabolism of these connective cell type (Study 3). Primary culture of gingival fibroblasts of 6 patients (3 young - Y and 3 elderly - E) were collected and cultured in complete culture medium (DMEM). In the Study 1 fibroblasts were seeded in 96-well plates in complete DMEM containing 10% of fetal bovine serum (FBS) for 24, 48 or 72 hours and subjected to evaluation of cell viability (MTT, n=36), total protein production (TP, n=36) and collagen synthesis (SR, n=36). In the Study 2, after 24-hour cell seeding, the complete DMEM was replaced by DMEM without FBS supplemented or not with TNF-α (100 ng/mL) which was kept in contact with cells for additional 24 hours. Then, the production of reactive oxygen TNF-α species (ROS, n=36), nitric oxide (NO, n=36) and synthesis of CCL5 chemokine (ELISA, n=36) were assessed. In the Study 3 fibroblasts were seeded in 24-well plates for 24 hours, and then exposed to EGF (100 μM) or submitted to low power laser irradiation (LASERTable device, InGaAsP - 780 ± 3nm; 25mW). Cell viability (Alamar Blue®, n=12), cell migration (Wound Healing, n=12), collagen synthesis (SR, n=12), and synthesis of vascular endothelial growth factor - VEGF (ELISA, n=12) were assessed 72 hours after the treatments. The data were statistical...(Complete abstract electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-12-06T22:54:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009 / Introdução: O tratamento das lesões de tendão calcâneo requer longos períodos de reabilitação. O ultra-som (US) e o laser são os recursos mais utilizados e estudados para tratar estas lesões; porém, é escasso o estudo da utilização desses agentes de forma combinada. Objetivo: Avaliar o ultrasom e o laser de baixa intensidade, no reparo de lesão parcial do tendão calcâneo em ratos. Métodos: Os 50 ratos machos Wistar tiveram seus tendões calcâneos parcialmente lesionados por um trauma direto e foram distribuidos aleatoriamente em 5 grupos: Grupo 1-Controle, 2-US, 3-laser, 4-US+ laser e 5- laser +US. Foram tratados por 5 dias consecutivos e no 6° dia pós lesão os tendões foram removidos e avaliados quanto ao alinhamento das fibras (birrefringência) e quantidade de colágeno tipo I e III (picrosirius). Resultados: o grupo US apresentou melhor alinhamento das fibras de colágenos que o grupo controle (p=0,03). Os grupos US, laser e laser +US apresentaram maior quantidade de colágeno tipo I que o controle (p<0,01, p=0,01 e p<0,01 respectivamente). Não houve diferença entre os grupos tratamento entre si para nenhuma das avaliações. A avaliação para colágenos tipo III não apresentou diferença para nenhum dos grupos. Conclusão: O ultra-som terapêutico e a terapia laser de baixa intensidade foram eficazes no processo de reparo de lesão parcial do tendão calcâneo em ratos. O ultra-som promoveu maior alinhamento das fibras de colágeno. O ultra-som, o laser, e a combinação laser+ultra-som aumentaram a quantidade de colágeno tipo I na região da lesão. / Background: The treatment of calcaneous tendons ruptures demands long-term rehabilitation. The ultrasound (US) and the low level laser therapy (LLLT) are the most applied and studied physical agents to treat this kind of injuries; however, only a few studies examined the combination of both physical agents. Objective: Evaluat the effects of the US and LLLT in the tendon healing in rats. Methods: Fifty male Wistar rats underwent lesion caused by direct trauma on their calcâneus tendon were randomly assigned into 5 groups: group 1 (control), group 2 (US), group 3 (LLLT), group 4 (US+LLLT) and group 5 (LLLT+US). Animals were treated for 5 consecutive days. On the 6th day after lesion, tendons were removed and assessed under polarized light microscopy. The organization of collagen fibers was detected and measured through birefringence. The collagen type predominance in the calcaneous tendons was assessed through the picrosirius analysis. Results: The group 2 (US) when compared with controls showed an increase in collagen organization (p=0.03). Groups 2 (US), 3 (LLLT) and 5 (LASER+US) revealed increase of the type I collagen synthesis when compared to control (p<0.01, p=0.01 and p<0.01, respectively). No differences were found among the treatment groups. The type III collagen did not show differences in any of the groups. Conclusion: The US and the LLLT are effective on tendon healing in rasts. The US increase collagen organization. The US, the LLLT and the combination of LLLT+US increase type I collagen synthesis. / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Submitted by Hiolanda Rêgo (hiolandar@gmail.com) on 2013-11-25T20:53:18Z No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Fabíola Bastos de Carvalho.pdf: 2651347 bytes, checksum: 380f5a3bef49aa07e2f8f877b68e9e3f (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Meirelles (rodrigomei@ufba.br) on 2013-11-26T14:55:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Fabíola Bastos de Carvalho.pdf: 2651347 bytes, checksum: 380f5a3bef49aa07e2f8f877b68e9e3f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-11-26T14:55:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_ODONTO_Fabíola Bastos de Carvalho.pdf: 2651347 bytes, checksum: 380f5a3bef49aa07e2f8f877b68e9e3f (MD5) / Capes / O reimplante dentário é o tratamento de escolha nos casos de traumatismos com avulsão. Entretanto, seu sucesso é limitado, pois grande parte dos dentes é perdida devido à reabsorção radicular progressiva. O prognóstico depende dos procedimentos realizados antes e após o reimplante. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi avaliar por meio de análise histológica em microscopia de luz, o efeito da fotobiomodulação laser, antes e após reimplante dentário, no reparo tecidual em incisivos de ratos. Para tanto foram utilizados 60 ratos Wistar albinus, que tiveram o incisivo superior direito extraído, e em seguida divididos em 4 grupos (G1 – extração, permanência do dente em meio seco por 40 minutos e reimplante, G2 – extração, conservação do dente em leite por 40 minutos e reimplante, G3 - extração, conservação do dente em leite por 40 minutos, irradiação laser AsGaAl na superfície dentária e na entrada do alvéolo (λ= 780nm; P= 70mW; CW; 21J/cm2 por tratamento) seguida de reimplante, G4 - extração, conservação do dente em leite por 40 minutos, irradiação laser AsGaAl na superfície dentária e na entrada do alvéolo nos mesmos parâmetros do G3, seguido de reimplante. No G4 após reimplante a mucosa vestibular e palatina correspondente a raiz do dente reimplantado recebeu irradiação laser (λ= 780nm; P= 70mW; CW; 8,4J/cm2 por sessão a cada 48 horas por 15 dias). A morte dos animais ocorreu após 15, 30 e 60 dias do reimplante. A hemimaxila direita foi removida, fixada em solução de formalina a 10% e processada histologicamente. Foram obtidos cortes longitudinais de 5m, os quais foram corados pela técnica da Hematoxilina e Eosina e avaliados quanto a presença de reabsorções radiculares externas, anquilose, osteoclastos e inflamação. Aos 15 dias o G4 demonstrou inflamação crônica mais intensa, com presença de células clásticas e reabsorção radicular inflamatória moderada, com diferenças estatísticas (p=0,04) quando comparado ao G3, no qual foi observada a ausência desses parâmetros. Aos 30 dias nos Grupos 1, 2 e 4 foi observada inflamação crônica discreta a moderada e reabsorção radicular severa. O G3 permaneceu com ausência de inflamação e reabsorção radicular inflamatória nos períodos de 30 e 60 dias. Concluiu-se que a fotobiomodulação laser na superfície dentária e na entrada do alvéolo antes do reimplante, favoreceu o processo de reparo de reimplante dentário em ratos, quando comparado aos demais grupos.

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:44:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006 / Introdução: O tendão calcâneo é um dos tendões mais comumente lesados e sua cicatrização pode levar de semanas a meses para completar-se. Na busca de acelerar o reparo tendíneo, a laserterapia de baixa intensidade tem mostrado efeito benéfico. Objetivo: Avaliar o efeito da laserterapia de baixa intensidade na reparação do tendão calcâneo submetido à lesão parcial, em ratos. Métodos: Foram utilizados 60 ratos machos, distribuídos aleatoriamente em 5 grupos com 12 animais cada, sendo que 42 foram submetidos à lesão com queda de um peso de 186 gramas de uma altura de 20cm. No Grupo 1 (controle padrão) os animais não sofreram lesão tendínea e nem foram submetidos ao tratamento com o laser, no Grupo 2 (controle) os animais sofreram a lesão e não foram submetidos ao tratamento com laser, nos Grupos 3, 4 e 5 os animais sofreram lesão e foram submetidos ao tratamento com laser (830nm, P=40mW, F= 4J/cm 2 ) durante 3, 5 e 7 dias, respectivamente. Os animais dos grupos 2, 3, 4 e 5 foram submetidos a eutanásia no 8º dia após a lesão e avaliados por microscopia de polarização para analisar o grau de organização das fibras de colágeno. Resultados: Os grupos experimentais e o grupo controle padrão mostraram valores significativamente maiores em relação ao alinhamento das fibras de colágeno, comparados ao grupo controle, e não houve diferença significante quando comparados os Grupos 1 e 4, o mesmo acontecendo entre os Grupos 3 e 5. Conclusão: A terapia a laser de baixa intensidade é efetiva na melhora da organização das fibras colágenas do tendão calcâneo submetido à lesão parcial. / Introduction: Calcaneous tendon is one of the most frequently damaged tendons, and its healing may last from weeks to months to be completed. In the search after speeding tendon repair, low intensity laser therapy has showed favorable effect. Objective: To assess the effect of low intensity laser therapy on the process of tissue repair of calcaneous tendon, which underwent a partial lesion, in rats. Methods: Sixty male rats were used, randomly assigned to 5 groups containing 12 animals each one; 42 of 60 underwent lesion caused by dropping a 186 g weight from a 20 cm height. In Group 1 (standard control) animals did not suffer the lesion nor underwent laser therapy; in Group 2 (control) animals suffered the lesion but did not undergo laser therapy; in Groups 3, 4, and 5 animals suffered lesion and underwent laser therapy for 3, 5, and 7 days, respectively. Animals which suffered lesion were sacrificed on the 8 th day after the lesion and assessed by polarization microscopy to analyze the degree of collagen fibers organization. Results: Both experimental and standard control Groups presented significant values when compared with the control Groups, and there was not significant difference when Groups 1 and 4 were compared, and the same occurred between Groups 3 and 5. Conclusion: Low intensity laser therapy was effective for improving collagen fibers organization of the calcaneous tendon, after it underwent a partial lesion. / BV UNIFESP: Teses e dissertações