Orientador: Maria José Hitomi Nagata / Coorientador: Valdir Gouveia Garcia / Coorientador: Edilson Ervolino / Banca: Álvaro Francisco Bosco / Banca: Michel Reis Messora / Banca: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Mário Taba Júnior / Resumo: Este estudo imunoistoquímico avaliou a influência do aspirado de medula óssea (AMO) associado ou não à terapia com laser em baixa intensidade (LLLT) no processo de reparo de defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos. 64 ratos foram aleatoriamente distribuídos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro foi criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito foi preenchido com coágulo sanguíneo somente. No Grupo AMO, o defeito preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito recebeu irradiação com laser (InGaAlP laser), foi preenchido com coágulo sanguíneo ou AMO, respectivamente, e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 15 e 30 dias pós-operatórios. Foram realizadas reações imunoistoquímicas para detecção do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt (Runx2), proteína óssea morfogenética-2 (BMP-2), osteopontina (OPN) e osteocalcina (OCN). Um método semi-quantitativo foi usado para avaliar a imunomarcação para VEGF. As células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas foram quantificadas. Os dados obtidos foram analisados estatisticamente. Aos 15 dias pós-operatórios, o Grupo LLLT apresentou números de células OPN-positivas e OCN-positivas significativamente maiores que o Grupo C; o Grupo AMO apresentou números de células PCNA-positivas, Runx2-positivas, BMP-2-positivas e OPN-positivas significativamente maiores do que os grupos C e LLLT, além de número de células OCN-positivas significativamente maior que o controle; o Grupo AMO/LLLT apresentou imunomarcação para VEGF e números de células Runx2-positivas, OPN-positivas e OCN-positivas... / Abstract: This immunohistochemical study evaluated the influence of bone marrow aspirate (BMA) combined or not with low-level laser therapy (LLLT) on bone healing in surgically created critical-size defects (CSDs) in rat calvaria. 64 rats were randomly divided into 4 groups: C (control), BMA, LLLT and BMA/LLLT. A 5 mm diameter CSD was created in the calvarium of each animal. In Group C, the defect was filled by blood clot only. In Group BMA, the defect was filled with BMA. In groups LLLT and BMA/LLLT, the defect received laser irradiation (InGaAlP laser), was filled with blood clot or BMA respectively, and irradiated again. Animals were euthanized at either 15 or 30 days postoperative. Vascular endothelial growth factor (VEGF), proliferating cell nuclear antigen (PCNA), runt-related transcription factor-2 (Runx2), bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), osteocalcin (OCN) and osteopontin (OPN) immunohistochemical staining were performed. A semi-quantitative method was used to evaluate VEGF immunolabeling. PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells were quantified. Data were statistically analyzed. At 15 days postoperative, Group LLLT presented a significantly higher number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a significantly higher number of PCNA-positive, Runx2-positive, BMP-2-positive and OPN-positive cells than groups C and LLLT, and a significantly higher number of OCN-positive cells than control; Group BMA/LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of Runx2-positive, OPN-positive and OCN-positive cells than Group C. At 30 days postoperative, Group LLLT presented significantly higher VEGF immunolabeling and number of OPN-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA presented a higher number of Runx2-positive, BMP-2-positive and OCN-positive cells than Group C; Group BMA/LLLT presented... / Doutor

Vários estudos têm avaliado os efeitos do ultra-som e da radiação laser de baixa intensidade separadamente no reparo ósseo. No entanto, são escassas as comparações entre estas duas modalidades terapêuticas. Este estudo teve por objetivo avaliar e comparar, através de análise histomorfométrica e ensaio mecânico de flexão em três pontos, as conseqüências que estes agentes físicos podem trazer ao reparo do tecido ósseo em osteotomias transversais experimentais em tíbias de ratos. Foram utilizados 48 ratos com fratura cirúrgica unilateral parcial do terço superior de tíbia. Os animais foram divididos em três grupos de 16 animais. Em um grupo, o membro fraturado foi tratado com ultra-som pulsado de baixa intensidade (freqüência de 1,5 MHz, ciclo de trabalho 1:4, intensidade SATA 30 mW/centímetro quadrado) em sessões de 20 minutos, 5 vezes por semana, em 12 dias de tratamento. Em um segundo grupo, o membro fraturado foi tratado com laser As-Ga-Al (112,5 J/centímetro quadrado, 780 nm, 30 mW) em sessões de 2,5 minutos, 5 vezes por semana, em 12 dias de tratamento. O terceiro grupo serviu de controle, sendo submetido à mesma cirurgia na tíbia direita mas não recebeu qualquer tratamento. No ensaio mecânico, a carga no limite máximo suportada pelo grupo tratado com laser foi significantemente maior (p < 0,05) que os grupos tratado com ultra-som e controle. Na análise histomorfométrica, o grupo tratado com laser apresentou significância estatística quanto ao número e superfície de osteoblastos e volume e superfície de osteóide e o grupo ultra-som obteve significância para as superfícies de reabsorção e de osteoclastos. Pode-se concluir que o ultra-som acelerou o reparo ósseo (em relação ao grupo controle) por viabilizar mais rapidamente a fase de reabsorção, enquanto que a terapia laser foi capaz de acelerar ainda mais este processo por já promover predomínio de formação óssea no décimo nono dia pós-cirúrgico no modelo experimental utilizado neste estudo / Many studies have assessed the effects of ultra-sound and low intensity laser therapy separatedly in bone repair. However, the comparison between these two therapeutic modalities is rare. The objective of this study was to verify and compare, through histomorphometrical analysis and a three-point bending test, the consequences of these physical agents on bone healing in animals. 48 male Wistar rats were used with tibial bone partial osteotomy, divided into 3 groups of 16. In one group, rats had their fractured limb treated with GaAIAs laser (780 nm, 30 mW, 112,5 J/square contimeter) in 12 five times-a-week sections. In another group, rats were treated with low intensity pulsed ultra-sound (1,5 MHz, 30 mW/square centimeter) in 12 five times-a-week sections too. In a third group, animals were taken as control, being submitted to the same osteotomy but receiving no treatment. After 19 days the tibias were extracted and half of them were submitted to a three-point bending test and the other half to histomorphometric analysis. During the bending test, the maximum load at failure of the tibia in the laser group was significantly higher (p<0.05). Histomorphometry showed statistical significance in osteoblasts number and surface and osteoid volume and surface for the laser group, and eroded and osteoclasts surfaces for the ultra-sound group. Ultra-sound was able to enhance bone healing (compared to control group) by speeding up the reabsorption phase, while low intensity laser therapy could accelerate this process even more by promoting mostly new bone formation 19 days after osteotomy in this experimental model

Vários estudos têm avaliado os efeitos do ultra-som e da radiação laser de baixa intensidade separadamente no reparo ósseo. No entanto, são escassas as comparações entre estas duas modalidades terapêuticas. Este estudo teve por objetivo avaliar e comparar, através de análise histomorfométrica e ensaio mecânico de flexão em três pontos, as conseqüências que estes agentes físicos podem trazer ao reparo do tecido ósseo em osteotomias transversais experimentais em tíbias de ratos. Foram utilizados 48 ratos com fratura cirúrgica unilateral parcial do terço superior de tíbia. Os animais foram divididos em três grupos de 16 animais. Em um grupo, o membro fraturado foi tratado com ultra-som pulsado de baixa intensidade (freqüência de 1,5 MHz, ciclo de trabalho 1:4, intensidade SATA 30 mW/centímetro quadrado) em sessões de 20 minutos, 5 vezes por semana, em 12 dias de tratamento. Em um segundo grupo, o membro fraturado foi tratado com laser As-Ga-Al (112,5 J/centímetro quadrado, 780 nm, 30 mW) em sessões de 2,5 minutos, 5 vezes por semana, em 12 dias de tratamento. O terceiro grupo serviu de controle, sendo submetido à mesma cirurgia na tíbia direita mas não recebeu qualquer tratamento. No ensaio mecânico, a carga no limite máximo suportada pelo grupo tratado com laser foi significantemente maior (p < 0,05) que os grupos tratado com ultra-som e controle. Na análise histomorfométrica, o grupo tratado com laser apresentou significância estatística quanto ao número e superfície de osteoblastos e volume e superfície de osteóide e o grupo ultra-som obteve significância para as superfícies de reabsorção e de osteoclastos. Pode-se concluir que o ultra-som acelerou o reparo ósseo (em relação ao grupo controle) por viabilizar mais rapidamente a fase de reabsorção, enquanto que a terapia laser foi capaz de acelerar ainda mais este processo por já promover predomínio de formação óssea no décimo nono dia pós-cirúrgico no modelo experimental utilizado neste estudo / Many studies have assessed the effects of ultra-sound and low intensity laser therapy separatedly in bone repair. However, the comparison between these two therapeutic modalities is rare. The objective of this study was to verify and compare, through histomorphometrical analysis and a three-point bending test, the consequences of these physical agents on bone healing in animals. 48 male Wistar rats were used with tibial bone partial osteotomy, divided into 3 groups of 16. In one group, rats had their fractured limb treated with GaAIAs laser (780 nm, 30 mW, 112,5 J/square contimeter) in 12 five times-a-week sections. In another group, rats were treated with low intensity pulsed ultra-sound (1,5 MHz, 30 mW/square centimeter) in 12 five times-a-week sections too. In a third group, animals were taken as control, being submitted to the same osteotomy but receiving no treatment. After 19 days the tibias were extracted and half of them were submitted to a three-point bending test and the other half to histomorphometric analysis. During the bending test, the maximum load at failure of the tibia in the laser group was significantly higher (p<0.05). Histomorphometry showed statistical significance in osteoblasts number and surface and osteoid volume and surface for the laser group, and eroded and osteoclasts surfaces for the ultra-sound group. Ultra-sound was able to enhance bone healing (compared to control group) by speeding up the reabsorption phase, while low intensity laser therapy could accelerate this process even more by promoting mostly new bone formation 19 days after osteotomy in this experimental model

Introdução: Entre as queixas mais comuns dentro dos consultórios de otorrinolaringologia e fonoaudiologia, o zumbido destaca-se como uma das que geram mais incômodo ao indivíduo. Existem várias modalidades para o tratamento do zumbido, com destaque para a terapia farmacêutica, fisioterapia, psicoterapia, cirurgia, e dentre as possibilidades de intervenção, vem crescendo o interesse no uso do laser de baixa intensidade. No entanto, apesar de existir na literatura internacional artigos sobre este assunto, há inúmeras divergências quanto ao protocolo de aplicação e a eficácia desse tratamento. Proposição: Verificar o efeito da fotobiomodulação em indivíduos com sintoma de zumbido crônico sem perda auditiva. Casuística e Métodos: O estudo foi desenvolvido no Centro Auditivo Ouvir Bauru, com a aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa e aquiescência do paciente confirmada mediante a assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Os pacientes que se enquadravam nos critérios de inclusão foram divididos aleatoriamente em Grupo 1: uso do laser de baixa intensidade e Grupo 2: uso do placebo. Foi realizado anamnese com os indivíduos antes da realização da bateria de testes e os dados coletados foram anotados no prontuário do mesmo. Após entrevista, iniciou-se a bateria de exames audiológicos que incluiu: audiometria tonal, audiometria de altas frequências, imitanciometria e acufenometria para descarte de perda auditiva, questionário Tinnitus Handicap Inventory para mensurar o nível de incomodo com o zumbido pré e pós tratamento e escala visual analógica para mensurar o nível de incômodo pré e pós aplicação do laser. O protocolo de fotobiomodulação incluiu 12 sessões de laser de baixa intensidade para o Grupo 1 e placebo para o Grupo 2, utilizando 4J na veia lingual no comprimento de onda vermelho, 4J na membrana timpânica direita e esquerda, no comprimento de onda vermelho e 9J na mastoide direita e esquerda, no comprimento de onda infra-vermelho. Resultados: a amostra foi composta por 20 pacientes, sendo oito do sexo feminino e 12 do sexo masculino com média de idade de 54 anos. Não houve diferença estatística em função do grupo de intervenção e do momento de avaliação para os desfechos audiometria de altas frequências e acufenometria. A desvantagem dos indivíduos com zumbido crônico reduziu significativamente após a intervenção, independentemente da intervenção. Pode-se averiguar que a insatisfação dos indivíduos com zumbido crônico diminuiu significativamente com diferença entre as sessões iniciais e finais, independentemente do grupo de intervenção, porém, o Grupo 1 apresentou redução significativamente maior que o Grupo 2, independentemente do momento de avaliação e do número da sessão. Conclusão: Conclui-se que indivíduos com zumbido crônico reduziram a desvantagem independentemente do grupo de intervenção, e o nível de insatisfação com o zumbido nas sessões iniciais em relação as finais independentemente do momento de avaliação e do grupo de intervenção. O grupo que recebeu a fotobiomodulação melhorou mais o nível de insatisfação com o zumbido, independentemente do momento de avaliação e do número da sessão. / Introduction: Among the most common complaints within otorhinolaryngology and audiology clinics, tinnitus stands out as one of the most uncomfortable for the subject. There are several modalities for the treatment of tinnitus, with emphasis on pharmaceutical therapy, physiotherapy, psychotherapy, surgery, and among the possibilities of intervention, there is growing significance in the use of low level laser. Nevertheless, despite many articles in the international literature about this theme, there are several disagreements regarding the protocol of application and the efficacy of this treatment. Proposition: To verify the effect of laser therapy in individuals with chronic tinnitus symptom without hearing loss. Methods: The study was developed at the Centro Auditivo Ouvir - Bauru, with the acceptance of the Research Ethics Committee and patient acquiescence confirmed by signing the Informed Consent Term. Patients who suited the inclusion criteria were randomly set to Group 1: treated with low level laser and Group 2: treated with placebo laser. Anamnesis was applied with the individuals before the battery of tests and the data collected were registered in the individuals folder. after the interview, the audiological exams started, which included: tonal audiometry, high frequency audiometry, immittanciometry and acufenometry for hearing loss disposal, Tinnitus Handicap Inventory to measure the level of discomfort with tinnitus pre and post treatment and visual analogue scale to measure the level of discomfort with tinnitus pre and post laser application. The Laser Therapy protocol included 12 laser therapy sessions for Group 1 and placebo laser for Group 2, using 4J in the lingual vein in the red wavelength, 4J in the right and left tympanic membrane, in the red wavelength, and 9J in the right and left mastoid, at the infra-red wavelength. Results: the sample consisted of 20 patients, eight females and 12 males with the average of 54 years-old. There was no statistical difference in function of the intervention group and the moment of evaluation for the high frequency audiometry and acuphenometry outcomes. The disadvantage of individuals with chronic tinnitus reduced significantly after the intervention, regardless of the intervention. It can be verified that the annoyance of individuals with chronic tinnitus decreased significantly with difference between the initial and final sessions, independently of the intervention group, but Group 1 presented a greater reduction than Group 2, independently of the moment of evaluation and the number of the session. Conclusion: It was concluded that individuals with chronic tinnitus reduced the disadvantage independently of the intervention group, and the level of discontentment with tinnitus in the initial sessions according to the final ones independently of the moment of evaluation and the intervention group. The group receiving laser therapy further improved the level of tinnitus dissatisfaction, regardless of timing and session number.

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Ana Lúcia de Carvalho Rosa Pascoli / Banca: Annelise Carla Camplesi dos Santos / Banca: Roberta Carvalho Basile / Resumo: A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente nas quais existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com a presença de um tecido de granulação saudável. Objetivou-se com este trabalho foi comparar diferentes ondas do laser de baixa intensidade e do óleo de girassol ozonizado como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação em coelhos. Para isso, foram elaborados dois experimentos onde o primeiro comparou a laser de baixa intensidade (LBI) de onda contínua com a LBI pulsada (Capítulo 2), no qual 31 coelhos foram distribuídos em três grupos, grupo controle (GC), grupo laser onda contínua (GLC) e grupo laser onda pulsada (GLP). O segundo experimento comparou a LBI de onda contínua com a aplicação tópica de óleo de girassol ozonizado (OGO) (Capítulo 3) e 32 coelhos também foram distribuídos em três grupos, sendo grupo controle (GC), grupo laser (GL) e grupo ozônio (GO3). No primeiro experimento, os grupos GLC e GLP apresentaram evolução semelhante, com processo cicatricial satisfatório do enxerto em ambos, ao contrário do grupo GC. Tais resultados se mantiveram na avaliação microscópica, pois o GC apresentou correlação significativa com critérios ligadas à falha do enxerto. Já no segundo experimento, novamente ficou compro... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Cutaneous grafting is a simple and useful surgical technique for the repair of wounds, especially in which there is a difficulty in applying the primary closure, or other reconstructive technique. However, for graft survival, it is necessary a healthy granulation tissue in the wound bed. The aim of this study was to compare differents waves of low level laser therapy (LLLT) and ozonated sunflower oil as potential healing stimulators in grafts applied rabbits in fresh wounds. Two trials were carried out in which the first one compared LLLT continuous wave with LLLT pulsed (Chapter 2) in 31 rabbits divided into three groups: control group (CG), continuous wave laser group (GLC) and pulsed wave laser group (GLP). The second trial compared LLLT continuous with ozonized sunflower oil (OGO) (Chapter 3), and 32 rabbits were also divided into three groups, being control group (GC), laser group (GL) and ozone group (GO3). In the first trial, the GLC and GLP groups showed similar evolution, with a satisfactory healing process in both, unlike the CG group. These results were maintained in the microscopic evaluation since the GC showed a significant correlation with criteria related to graft failure. In the second trial, the ineffectiveness of the donor bed without granulation tissue to provide an ideal environment for healing of the grafts was again demonstrated. The GL and GO3 groups presented superior evolution compared to the CG, although maceration occurred in the grafts of the anim... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Estudo dos efeitos da irradiação ultra-sônica pulsada de baixa intensidade sobre o desenvolvimento de segmentos da coluna vertebral implantados em camundongos isogênicos / The aim of the present research was evaluate the action of low-intensity pulsed ultrasonic irradiation on development and ossification of vertebral column blastemas, through mice new born tail segments implants in adult receptor isogenic mice lineages C57BL/6 and Balb/C. New born tail segments were implanted in subcutaneous tissues of adults isogenics mice C57BL/6 and intramuscularly in adults isogenics mice Balb/C. After 24 hours the implant, the animals in both groups, were stimulated with the low-intensity pulsed ultrasound (LIPUS), 10 minutes per day. After 5 days of stimulus, the receptors animals were death and had the implanted tails removed for histopathology, trhrough Periodic Acid Schiff plus Alcian Blue (PAS/AB), Masson's tricomico and hem lumen-eosin (HE). The group of animals stimulated which received subcutaneous implant presented the implant with accelerated in inter-vertebral diks, faces to chondrocytes organization and chondroblastes findings in cartilaginous matrix, showing maturity in fiber cartilages arrangements. It was observed too, a collagen fibers enlargement in the disks fibro cartilage which show more dense next the pulposo nucleus in the segments implanted and stimulated, compared with the controls segments. The areas of the segments were available by Fisher's test and Student's t. It didn't watch significant differences in the vertebral bodies' areas sizes in the animals which implant was subcutaneous (p'< OU = '0.05). In the intramuscular implants animals group, it was observed a major velocity in the hialuronic acid matrix formation in the intervertebral disks after LIPUS stimulus. Moreover, the fibrous ring fiber cartilages' were better organized with large number of cells inside the cartilaginous matrix compared with the controls segments. With regard to the vertebral bodies in the intramuscular implants, it's not verifies significant increases in the areas (p'< OU =' 0,05). The findings allow conclude that LIPUS should promote the ontogenetic differentation of the structural components of the mice vertebral column more quickly, trhough vertebras endochondral ossification microscopic evaluation and the inter-vertebral disks components differentiation, follow the methodology employed.

Resumo O laser operando em baixa intensidade tem sido utilizado em tratamentos odontológicos visando melhorar a regeneração e cicatrização de tecidos. Com o objetivo de analisar o efeito desse laser na proliferação de fibroblastos gengivais “in vitro", desenvolvemos uma linhagem primária a partir de fragmentos de gengiva. Trabalhamos em um modelo de estudo “in vitro" no qual cultivamos os fibroblastos em condição de déficit nutricional parcial (meio de cultivo DME com 5% de soro fetal bovino), simulando uma situação de estresse celular. Foram feitos 3 experimentos distintos, para todos utilizamos um diodo-laser de 664 nm. Para o experimento 1, células LMF foram plaqueadas em placas de Petri e após 24 horas as placas foram divididas em 4 grupos, irradiados com potência fixa de 56 mW, mas variando a fluência: 2 J/cm2, 5 J/cm2, 10 J/cm2 e 15 J/cm2. Para o experimento 2, células LMF foram plaqueadas em placas de Petri e após 24 horas as placas foram divididas em 2 grupos, irradiados com fluência fixa de 2 J/cm2, mas variando a potência: 28 mW e 56 mW. Para o experimento 3, células LMF foram plaqueadas em placas de Petri e após 24 horas as placas foram divididas em 5 grupos, irradiados com potência fixa de 56 mW, fluência fixa de 2 J/cm2, mas variando o tipo de emissão: contínua, ou intermitente com freqüências de: 10 Hz, 60 Hz, 120 Hz e 180 Hz. Foram feitas 4 irradiações, a cada 12 horas. Células que estavam em concentração de 5% de SFB e irradiadas mostraram crescimento mais acelerado em todos os grupos estudados. No experimento 1 obtivemos: células irradiadas com diferentes doses apresentaram proliferação semelhante; sendo melhores resultados para os grupos irradiados com fluência de 2 J/cm2. No experimento 2: células irradiadas com irradiância diferentes apresentaram melhores resultados para potências maiores. No experimento 3: células irradiadas com emissão contínua apresentaram maior proliferação que aquelas irradiadas com laser intermitente, sendo que quanto maior a freqüência, maior a proliferação celular. Menores doses de laser aumentaram mais a proliferação de fibroblastos; menor tempo de exposição resultou em mais alta proliferação celular; o laser emitido no modo contínuo apresentou melhores resultados em termos de proliferação que o laser intermitente, sendo que para o laser pulsado, quanto maior a freqüência, melhores resultados que freqüências menores. / Abstract The low level laser therapy (LLLT) has been used to improve wound healing. In order to verify the effect of LLLT on the in vitro proliferation of gingival fibroblasts we worked with primary culture of human gingival fibroblasts. The cell line used was LMF which grown in Dulbecco’s Modified Eagle’s medium (DME) with 5% (nutritional deficit) of fetal bovine serum (fbs) in order to simulate a cellular stress condition. Laser irradiation was carried out with diode laser with wavelength at 664 nm in three conditions. At first, we kept the output power stable at 56 mW, and set the total energy applied at 2, 5, 10 and 15 Joules. Then, the energy was set at 2 Joules and we worked with power output at 56 mW and 28 mW. At last, with the energy set at 2 Joules and the power output at 56 mW, we worked with the laser emitting in CW and pulsed modes (setting the frequencies at 10, 60, 120 and 180 Hz). We found that in the first part of the experiment (stable output power and different energy applied), the best results were achieved for the total deposited energy of 2 Joules. The conclusion for the second part (energy set at 2 Joules and different output power) was that the best results were achieved when using the highest output power. The conclusion for the last part (energy set at 2 Joules, output power set at 56mW and CW or Pulsed modes at different frequencies) was that CW mode presented the best results, and for the Pulsed mode, the highest frequency presented the best results. A lower energy rate improves in vitro fibroblasts proliferation, a lower laser exposure time results in higher proliferation and laser emitting on CW mode present best results in terms of proliferation than pulsed laser, and when pulsed lasers are being used high frequencies are better than low frequencies.

A Terapia com Laser de Baixa Intensidade (TLBI) pode ser utilizada para tratar dores agudas e crônicas. Entender as vias da dor e as interações de fótons com tecidos neurais possibilitará compreender melhor essas terapias. A nocicepção pode ser autocontrolada por analgésicos endógenos, opióides naturais que bloqueiam a liberação de neurotransmissores excitatórios e, portanto, fazem uma inibição sensorial total e inespecífica. Sabe-se que a TLBI pode estimular a liberação desses analgésicos endógenos e inibir temporariamente o transporte axonal em fibras de pequeno diâmetro. Conhecer a fluência luminosa no interior do tecido neural é essencial para avaliar as hipóteses descritas, no entanto, devido à complexidade dos tecidos biológicos, calcular (ou simular) as interações da luz com os tecidos é impraticável. Para superar esse problema, desenvolvemos experimentos para estimar a fluência de luz em aplicação transcraniana de laser e mapeamos as propriedades ópticas do encéfalo de rato. Foi possível diferenciar tecidos encefálicos por suas características de atenuação da intensidade luminosa e estimar a profundidade da penetração da luz que pode ser de mais de 20 mm. Encontramos redução da dor evocada por pressão, calor, frio ou inflamação após TLBI transcraniana em camundongos. Para esse estudo comportamental, desenvolvemos um equipamento para avaliar o limiar de dor por aplicação de pressão nos animais, que opera com melhor precisão que os instrumentos comerciais. Os mecanismos de fotoneuromodulação foram investigados por quantificação de Trifosfato de Adenosina (ATP), imunofluorescência e marcação com hematoxilina-eosina de tecidos encefálicos que foram visualizados por microscópio confocal. A iluminação transcraniana aumentou a produção de ATP e de Fosfatase ácida prostática (um analgésico endógeno) e reduziu a quantidade do neurotransmissor glutamato, responsável pela condução da informação nociceptiva. Por outro lado, não observamos alteração na concentração de tubulina, um dos constituintes do citoesqueleto, e a marcação com hematoxilina-eosina revelou que não houve dano ao tecido decorrente da iluminação. Os achados apresentados nesse estudo atestam a relevância e eficácia da fotoneuromodulação proveniente de iluminação transcraniana com laser de 808 nm para suprimir a nocicepção em camundongos. Esse estudo é pioneiro na elucidação dos mecanismos de ação da fotoneuromodulação da dor in vivo. / Low-level Light therapy (LLLT) can treat acute and chronic pain. Getting knowledge about the pain pathways and the photon-neuron interactions may contribute to a better understanding of this therapy. The nociception may be self-controlled by endogenous analgesics, natural opioids that block the release of excitatory neurotransmitters, and thus make a total and nonspecific sensory inhibition. It is known that LLLT can stimulate the release of these endogenous analgesics, so it temporarily inhibits axonal transport in small diameter fibers. The knowledge of light fluence through neural tissue is essential to test the discussed assumptions. However, due to the complexity of biological tissues, the calculation (or simulation) of light-tissue interactions is impractical. In order to overcome this problem, we developed an experimental setup to estimate the light fluence in a transcranial LLLT and to map the optical properties of rat brains. It was possible to differentiate cerebral tissues and to estimate the depth of light penetration, which is more than 20 mm. We found a decrease in pain evoked either by pressure, heat, cold or inflammation after transcranial LLLT in mice. For this animal behavioral study, we developed an equipment to assess the pain threshold with pressure stimulus, which operates with better precision than commercial instruments. The LLLT mechanisms were investigated by Adenosine triphosphate ATP quantification, immunofluorescence and haematoxylin and eosin staining of brain tissues which were imaged by confocal microscopy. The transcranial irradiation increased ATP and prostatic acid phosphatase (an endogenous analgesic) production and reduced the amount of glutamate, the neurotransmitter responsible for conducting nociceptive information. There was no change in the concentration of tubulin, a constituent of the cytoskeleton, and the haematoxylin and eosin staining revealed no tissue damage due to the irradiation. This study is pioneer in elucidating the mechanisms of in vivo photoneuromodulation of pain.

As qualidades biofísicas do U.S.P. levaram-nos a estimar o efeito do mesmo sobre a regeneração de um nervo periférico. Este estudo foi levado a efeito sobre a axotomia experimental do nervo ciático de ratos. Para tal finalidade estimulamos por 12 dias consecutivos, durante 20 minutos o coto proximal dos nervos axotomizados. A morfologia foi avaliada comparativamente entre cortes semifinos corados pelo azul de toluidina e cortes ultra finos à microscopia eletrônica, dos cotos proximais de nervos estimulados e não estimulados. A avaliação morfométrica das estruturas, baseou-se na contagem diferencial das fibras; da espessura da bainha de mielina e da área dos axônios das fibras tipo A, mediante o emprego de um software especializado ( Image Tool). Os achados morfológicos e a análise estatística dos dados morfométricos são altamente sugestivos de que o U.S.P. estimula a regeneração de nervos periféricos. / The biophysical qualities of pulsed ultrasound led us to appraise it¢s effect on the regeneration of a peripheral nerve. In this study our intention was to evaluate the effects of pulsed ultrasound on the axotomy of the ciatic nerve in rats. The proximal stump of the nerve was stimulated on 12 consecutive days with pulsed ultrasound and the effects of the sonication were evaluated through morphologic and morphometric techniques. Our findings suggest that sonication leads to a rapid regeneration of the nerve after axotomization. These affirmations are based on the counting of different types of fibre components in mixed nerves and the morphologic recovery of the same in comparasion with nerves of animals submitted to sham operation.

Introdução: O sobrepeso e a obesidade representam um grave problema de Saúde Pública, tendo seu desenvolvimento associado à adolescência, impacto negativo na fase adulta, sobretudo, devido suas complicações metabólicas. Considerando que o caráter crônico e inflamatório de baixa intensidade presente na obesidade estimula a geração de radicais livres, torna-se relevante avaliar a relação entre as adipocitocinas e a oxidação das lipoproteínas. Objetivos: Avaliar a possível influência da obesidade sobre a LDL(-) e adipocitocinas. Material e Métodos: Foram recrutados 156 adolescentes de ambos os sexos, com faixa etária de 10 a 19 anos e regularmente matriculados em escolas públicas da cidade de São Paulo. Os adolescentes foram distribuídos em três grupos: Eutrófico, Sobrepeso e Obeso, segundo COLE et al. (2000). Após jejum (12-15h) foi coletada uma amostra de sangue e a partir do plasma realizamos as seguintes análises: perfil lipídico, glicose e insulina (kits comerciais), LDL(-) e seus auto-anticorpos (ELISA), leptina, resistina e adiponectina (ELISA). O perfil sócio-econômico e clínico dos adolescentes foi investigado por meio de questionários estruturados. Foram coletadas informações antropométricas (peso, altura, circunferência da cintura, porcentagem de gordura) e dados de consumo alimentar (3 x R24h). O consumo alimentar foi estimado por meio do programa NutWin®. As diferenças entre as variáveis qualitativas foram determinadas pelo teste c2. As variáveis quantitativas foram ajustadas pela idade por meio do General Linear Model, sendo as diferenças entre os grupos estabelecidas pelo teste post-hoc de Bonferroni (SPSS®, versão 15.0). Resultados: Dos 156 adolescentes incluídos no estudo, 76 (48,7 por cento ) foram meninos e 80 (51,3 por cento ) meninas, com idade média de 14,5 ± 2,3 anos. Os adolescentes foram distribuídos em três grupos: Eutrófico (n = 52 adolescentes; 33,3 por cento ), Sobrepeso (n = 53 adolescentes; 34,0 por cento ) e Obeso (n = 51 adolescentes; 32,7 por cento ). Estes grupos foram pareados quanto ao sexo, escolaridade da mãe, renda, maturação sexual e antecedentes familiares de doenças. Como previsto pelo critério de estratificação dos grupos, os valores médios de IMC foram diferentes entre os grupos, sendo confirmados pela CC e porcentagem de gordura. Em relação ao hábito alimentar, a análise dos dados brutos e ajustados pela energia e variabilidade intrapessoal não apresentou diferença entre 4 os grupos. As análises da glicemia de jejum, colesterol total, triacilgliceróis e LDL-C não apresentaram diferenças entre os grupos. A insulina plasmática no grupo Obeso apresentou valores superiores aos grupos Eutrófico (p< 0,001) e Sobrepeso (p< 0,001), e o índice HOMA-IR no grupo Obeso apresentou valores superiores aos grupos Eutrófico (p< 0,001) e Sobrepeso (p< 0,001), enquanto o HDL-C apresentou valores maiores no grupo Eutrófico, quando comparado ao Obeso (p=0,012). A LDL(-) e seus autoanticorpos apresentaram diferentes concentrações entre os grupos (p= 0,040; p= 0,026, respectivamente). A leptina no grupo Eutrófico apresentou valores menores que os grupos Sobrepeso (p< 0,001) e Obeso (p< 0,001), assim como o grupo Sobrepeso apresentou valores inferiores ao grupo Obeso (p< 0,001). Perfil inverso foi observado em relação à concentração de adiponectina, A resistina apresentou valores maiores no grupo Obeso (p= 0,006), que no grupo Eutrófico. A leptina apresentou correlações positivas com percentual de gordura (r= 0,540; p= 0,001), circunferência da cintura (r= 0,679; p= 0,003) e IMC (r= 0,670; p< 0,001). Em relação ao metabolismo de carboidratos, a leptina se correlacionou positivamente com a insulina (r= 0,578; p< 0,001) e o HOMA-IR (r= 0,570; p= 0,001), enquanto a adiponectina se correlacionou negativamente com insulina (r= -0,255; p= 0,001) e o HOMA-IR (r= -0,246; p=0,002). Em relação ao perfil lipídico, a leptina correlacionou-se com colesterol total (r= 0,496; p= 0,003), triacilgliceróis (r= 0,409; p= 0,016) e LDL-C (r= 0,416; p= 0,014), assim como a adiponectina correlacionou-se com LDL(-) (r= -0,428; p= 0,012) e a resistina com HDL-C (r= -0,337; p= 0,050). Portanto, os resultados obtidos demonstram que adolescentes com excesso de peso, mesmo ainda considerados clinicamente saudáveis, apresentam diversos parâmetros antropométricos e bioquímicos alterados, que sugerem a presença de um elevado número de fatores de risco cardiometabólico nessa população / Introduction: Overweight and obesity represent a serious Public Health issue. Their development associated with adolescence, generate a negative impact in adulthood, mainly because of metabolic complications. As the low and chronic inflammatory state present in obesity stimulates the generation of free radicals, it becomes relevant to assess the relationship between adipocytokines and the oxidation of lipoproteins. Objective: Evaluate the possible influence of overweight and obesity on the electronegative LDL and adipocytokines (leptin, adiponectin and resistin). Materials and Methods: Adolescents of both genders, aged 10 to 19 years old and regularly registered in public schools at the city of São Paulo were recruited for this research. They were divided into three groups: Healthy weight, Overweight and Obese, according to Cole et al. (2000), by gender and age. After fasting (12-15h) a blood sample was collected and the following tests were performed on each samples plasma: total lipid profile, glucose and insulin (commercial kits), leptin, resistin, adiponectin (ELISA), LDL(-) (ELISA) and its autoantibodies (ELISA). The socio-economic and health profiles of the adolescents were determined by structured questionnaires. Anthropometric (weight, height, waist circumference - WC, percentage of body fat) and food consumption data (3 x 24-hour recall) were collected. The 24-hour recall data was analyzed by the NutWin® software. Differences between qualitative variables were determined by c2 test. Quantitative variables were adjusted for age by means of General Linear Model, being the differences between the groups established by post-hoc Bonferroni test (SPSS ®, version 15.0). Results: Of the 156 eligible individuals, 76 (48.7 per cent ) were boys and 80 (51.3 per cent ) girls, with the average age being of 14.5 ± 2.3 years. The adolescents were divided into three groups: Healthy weight, n = 52 adolescents (33.3 per cent ), Overweight, n = 53 adolescents (34.0 per cent ) and Obese, n = 51 adolescents (32.7 per cent ). These groups were matched up by gender, mother\'s education, income, sexual maturation, and current medical history. As expected by the group inclusion criteria, there were statistical differences in BMI and this profile was confirmed by WC and body fat. Opposite profile was showed for lean body mass. In relation to food consumption, the analysis of crude data adjusted for energy and intrapersonal variability did 6 not differ between the groups. Analyses of fasting glucose, total cholesterol, triglycerides and LDL-C did not differ between the groups. There were higher levels of plasma insulin and HOMA-IR in the obese group than in the healthy weight (p <0.001; p <0.001) and the overweight (p <0.001; p < 0.001) groups. HDL-C in the healthy weight group showed increased values in comparison to Obese one (p = 0.012). The LDL (-) in plasma and its autoantibodies indicated different concentrations between the groups (p = 0.040, p= 0.026, respectively). There were lower values of leptin both in the healthy weight group in comparison with the overweight (p <0.001) and the obese (p <0.001) groups, as well as in the Overweight group in comparison with the Obese group (p <0.001). Opposite profile was observed for adiponectin levels, between the healthy weight group and the overweight (p = 0.019) and obese (p = 0.000) groups. Resistin showed higher values in the obese group (p = 0.006) than in the healthy weight group. Leptin showed positive correlations with body fat percentage (r= 0.540 and p= 0.001), waist circumference (r= 0.679 and p= 0.003) and BMI (r= 0.670 and p <0.001). In relation to carbohydrate metabolism, leptin correlated positively with insulin (r= 0.578 and p <0.001) and HOMA-IR (r= 0.570 and p= 0.001), and opposite profile was showed for adiponectin (Insulin: r= -0.255, p= 0.001; HOMA-IR: r= -0.246, p= 0.002, respectively). Regarding the lipid profile, leptin correlated with total cholesterol (r= 0.496 and p= 0.003), triglycerides (r= 0.409 and p= 0.016) and LDL-C (r= 0.416 and p= 0.014); adiponectin correlated with LDL (-) (r= -0.428, p= 0.012); and resistin with HDL-C (r= -0.337, p= 0.050). Therefore, the results show that overweight and obese adolescents, even those who are still considered clinically healthy, showed several anthropometric and biochemical changes, which suggest increased number of cardiometabolic risk factors in this population