MARTINS, Ismael Leite. Determinação do acetato de megestrol em plasma humano por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada ao espectrômetro de massa : aplicação em estudo de bioequivalência. 2004. 197 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2004. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-09T12:36:07Z No. of bitstreams: 1 2004_dis_ilmartins.pdf: 1585244 bytes, checksum: 6039f35b5507966e813abec6e320aa1f (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-09T16:03:51Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2004_dis_ilmartins.pdf: 1585244 bytes, checksum: 6039f35b5507966e813abec6e320aa1f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-09T16:03:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2004_dis_ilmartins.pdf: 1585244 bytes, checksum: 6039f35b5507966e813abec6e320aa1f (MD5) Previous issue date: 2004 / A sensitive and highly selective liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS-MS) method was developed to determine megestrol acetate in human plasma using betamethazone as the internal standard. The analyte and internal standard were extracted from plasma samples by hexane/ethyl acetate (1:1 v/v), and chromatographed on a C18 column. The mobile phase consisted of acetonitrila-water (80:20 v/v) including formic acid 0.1%. Detection was performed on a triple quadropole tandem mass spectrometer by multiple reaction mode via electrospray source. The method has a chromatographic run time of 3 min and a limit of quantification of 2 ng/mL. The linear calibration curves were obtained in the concentration range 2 – 150 ng/mL. The intra-batch precisions were 3.16%, 4.65%, and 2.68%; and the intra-batch accuracy was 6.77%, 6.23%, and 5.73% for 6, 60 and 120 ng/mL, respectively. The inter-batch precision was 7.76%, 6.23%, and 6.37% and the inter-batch accuracy was 0.08%, 1.55%, and 2.11% for the same concentrations. This validated method was successfully applied for the determination of pharmacokinetic profiles of megestrol acetate tablets administered to 30 healthy volunteers. / Através da cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por espectrometria de massa no modo MS/MS, desenvolveu-se um método sensível e altamente seletivo para determinar os níveis de acetato de megestrol no plasma humano, usando a betametasona como padrão interno. O analito e o padrão interno foram extraídos das amostras do plasma através da solução de extração hexano-acetato de etila (1:1 v/v), e cromatografados em uma coluna C18. A fase móvel consistiu de acetonitrila-água (80:20 v/v), contendo 0,1% de ácido fórmico. A detecção foi realizada em um triplo-quadrupolo, através de um espectrômetro de massa no modo de monitoramento de reação múltipla via eletrospray. O método tem um tempo de corrida de 3 minutos e limite de quantificação de 2 ng/mL. As curvas de calibração foram obtidas utilizando uma faixa de concentração de 2 a 150 ng/mL. As precisões intralote foram 3,16%, 4,65% e 2,68%, e a acurácia intralote foi de 6,77%, 6,23% e 5,73% para 6, 60 e 120 ng/mL, respectivamente. As precisões interlote foram 7,76%, 6,23% e 6,37%, e a acurácia interlote foi de 0,08%, 1,55% e 2,11% para as mesmas concentrações. Este método validado foi aplicado com sucesso para a determinação dos parâmetros farmacocinéticos dos comprimidos de acetato de megestrol administrados a 30 voluntários sadios.

Orientador: Wilma De Grava Kempinas / Resumo: A betametasona é o corticosteroide de escolha para o amadurecimento pulmonar fetal diminuindo a incidência de síndrome de angústia respiratória e mortalidade neonatal. Estudos realizados em parceria com o nosso laboratório demonstraram que a exposição pré-natal a este fármaco promoveu alterações nas concentrações de testosterona e parâmetros espermáticos da prole masculina de ratos. Recentemente, efeitos sobre o eixo hipotalâmico-hipofisário-adrenal foram observados por gerações. Assim, o objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos nos parâmetros reprodutivos da prole feminina e masculina de ratos, provocados pela exposição in utero à betametasona. Para tanto, ratas Wistar prenhes foram alocadas em grupo controle (n=11) e tratado (n=13) com 0,1mg/kg de betametasona, via intramuscular, nos dias gestacionais 12, 13, 18 e 19. No experimento 1, foram avaliados: no dia pós-natal (DPN) 1 o peso inicial e a distância ano-genital da prole feminina, a partir do DPN 30, a instalação da puberdade, e a partir do DPN 70, a ciclicidade estral. No DPN 85, procedeu-se a eutanásia de uma fêmea em estro, e foram coletados uma alíquota de sangue para a determinação das concentrações hormonais e os órgãos reprodutores para pesagem. Ovário e útero foram fixados para análise histológica e morfométrica. No DPN 90 foi realizado comportamento sexual seguido de teste de fertilidade e no DPN 95 um segmento uterino de uma fêmea em estro por ninhada foi utilizado para a reatividade farmacológica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Orientador: Gilberto de Nucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-12T13:53:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_LinaSayuriOdoBuenode_M.pdf: 1845448 bytes, checksum: 4fea923152025c316ca4c99487b21970 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Betametasona é um corticosteróide sintético designado para exercer a função de um glicocorticóide ativo. Como um álcool livre, betametasona apresenta uma vasta aplicação clínica com atividade antiinflamatória e imunossupressora. A betametasona foi extraída com 0,5mL de plasma humano por extração líquido-líquido (ELL) utilizando Cloranfenicol como padrão interno. O método utilizou uma corrida cromatográfica de 2,5min, com a coluna analítica C18 (100mm×2.1mm i.d.), a calibração da curva linear de 0,05ng/mL a 50ng/mL (r2 > 0,993). A exatidão inter-corrida dos controles de qualidade foi 92.3% (CQA 0.15ng/mL), 90.7% (CQB 4.0ng/mL) e 97.2% (CQC 40ng/mL). A precisão inter-corrida dos controles de qualidade foi 8.7% (CQA 0.15ng/mL), 9.0% (CQB 4.0ng/mL) e 9.8% (CQC 40ng/mL). O método aqui descrito foi empregado em estudo de biodisponibilidade relativa de duas formulações contendo dexclorfeniramina/betametasona 2mg/0.25mg comprimido. A razão da média geométrica e dos respectivos intervalos de confiança (IC) de Betametasona/Celestamine® foram 107.61% (101.62-113.95%) para AUClast, 106.93% 102.08-112.00% para AUC0-inf e 105.06% (96.56-114.31%) para Cmax. O intervalo deconfiança de 90% calculado para a razão individual das médias de Cmax, ASC0-72h, ASClast e ASC0-inf para betametasona/celestamine® estavam dentro do intervalo de 80- 125% definido pela Agência Vigilância Sanitária (ANVISA). No presente estudo um método, rápido, sensível e robusto foi desenvolvido para a determinação e quantificação de betametasona em plasma humano através da cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas usando fotoionização à pressão atmosférica em modo negativo. / Abstract: Betamethasone is a synthetic corticosteroid designed to exert a marked glucocorticoid activity. As the free alcohol, betamethasone finds widespread clinical applications related to its anti-inflammatory and immunosuppressant activity. Betamethasone was extracted from 0.5 ml human plasma by liquid-liquid extraction (LLE) using chloramphenicol as internal standard. The method has a chromatographic run of 2.5 min using a C18 analytical column (100mm×2.1mm i.d.) and the linear calibration curve over the range was linear from 0.05 to 50 ng ml-1 (r2 > 0.993). The between-run accuracy, based on the relative standard deviation replicate quality controls was 92.3% (0.15 ng ml-1), 90.7% (4.0 ng ml-1) and 97.2% (40 ng ml-1). The between-run precision for the above-mentioned concentrations was 8.7, 9.0 and 9.8%, respectively. The method herein described was employed in a bioequivalence study of two formulations of dexchlorpheniramine/betamethasone 2 mg/0.25 mg tablets. The geometric mean and respective 90% confidence interval (Cl) of betamethasone/Celestamine® percent ratios were 107.61% (101.62-113.95%) for AUClast, 06.93% 102.08-112.00%for AUC0-inf and 105.06% (96.56-114.31%) for Cmax. In adition, the calculated 90% Cl for mean Cmax, AUClast and AUCinf betamethasone/celestamine® individual ratios were within the 80-125% interval defined by the Agência Vigilância Sanitária - ANVISA. In the present study, a fast, sensitive, robust method was developed for the determination and quantification of betamethasone in human plasma by liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometry, using photospray ionization in negative mode. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Os glicocorticóides são muito utilizados na clínica veterinária por serem potentes inibidores da resposta inflamatória. São encontrados em muitas preparações tópicas, sozinhos ou combinados com outros medicamentos e estão presentes, principalmente, em produtos destinados ao uso otológico. Mesmo quando aplicados topicamente, sabe-se que existe certo grau de absorção. Com a disponibilidade de novos glicocorticóides sintéticos mais potentes, vem sendo sugerido recentemente, a ocorrência de hiperadrenocorticismo iatrogênico em pequenos animais. Com a finalidade de se testar a hipótese que a utilização de preparações otológicas contendo glicocorticóides podem ocorrer em efeitos sistêmicos, o presente estudo avaliou três antiinflamatórios esteroidais comumente utilizados no tratamento de otite em cães e gatos, quais sejam a hidrocortisona, a betametasona e a triancinolona. Para tanto, ratos foram tratados tópicamente, via auricular, a cada 12 horas, durante 7, 14 e 21 dias, com os fármacos descritos acima. Utilizamos o edema de pata induzido pela injeção de carragenina como forma de avaliar a existência de níveis efetivos de antiinflamatórios circulantes. Ainda, foram avaliados vários parâmetros tais como variação de peso corpóreo, peso relativo de baço e adrenais, hemograma completo, índice de proliferação de linfócitos e fagocitose e burst oxidativo realizados por neutrófilos circulantes. Além disso, foi avaliado o nível de corticosterona plasmática nos animais tratados com glicocorticóides tópicos. O tratamento tópico com antiinflamatórios esteroidais levou a redução no volume de edema inflamatório, mais evidente com a triancinolona. De forma geral, houve queda no ganho, ou mesmo perda de peso corpóreo durante o tratamento tópico com os antiinflamatórios esteroidais empregados. Em alguns casos, essa redução de peso corpóreo foi acompanhada de diminuição do peso relativo do baço e adrenais, particularmente com a betametasona. A principal alteração observada no hemograma foi leucopenia, mais evidente com a triancinolona. Houve redução dos níveis plasmáticos de corticosterona, mais duradoura com a betametasona. Os tratamentos tópicos causaram discreta redução na intensidade e percentual de fagocitose realizada por neutrófilos circulantes, bem como na produção de espécies reativas de oxigênio. O estudo aponta que glicocorticóides tópicos comumente empregados na terapêutica veterinária podem ser absorvidos, na dependência da molécula empregada e de seu tempo de utilização, causando alterações sistêmicas relevantes já após 7 dias de tratamento. Sugerimos uma maior cautela e acompanhamento veterinário dos pacientes nos casos que haja necessidade de emprego de tais medicamentos por períodos prolongados. / Glucocorticoids are commonly employed in veterinary practice because they are potent inhibitors of the inflammatory response. They are present in many topical formulations, alone or combined with other active compounds, particularly in otic ointments. Even when applied topically, certain degree of absortion is known to occur. Following the availability of novel, more potent synthetic steroidal anti-inflammatory drugs, cases of iatrogenic hyperadrenocorticism have been suggested. Aiming on testing the hypothesis that glucocorticoid-containing otic ointments may lead to systemic effects, we employed three different synthetic glucocorticoids widely used for the treatment of otitis in small animals (hydrocortisone, betamethasone, and triamcinolone) our study Rats were treated topically on their ears, every 12 hours, for 7, 14, or 21 days with the drugs described above. We first employed carrageenan-induced paw edema in order to evaluate the presence of effective levels of circulating anti-inflammatory drugs. We also evaluated several parameters such as change in body weight, relative weight of spleen and adrenal glands, complete hemogram, proliferation index of lymphocytes, and phagocytosis and oxidative burst performed by circulating neutrophils. Moreover, we assessed the plasmatic levels of corticosterone in rats treated topically with anti-inflammatory steroids. Topical treatment led to a reduction on the volume of the inflammatory edema induced by carrageenan, more evident following triamcinolone. Altogether, rats treated with these molecules ceased to gain, or lost weight on the course of the experiment. In some cases, such reduction was accompanied by a decrease on the relative weight of the spleen and adrenal glands, particularly after betamethasone. The most commonly observed change in the hemogram was leucopenia, evident following triamcinolone. We found reduced levels of circulating corticosterone, more persistent after betamethasone. Topically applied glucocorticoids caused a discrete reduction in the intensity and percentage of phagocytosis by circulating neutrophils, and a reduction on the oxidative burst performed by these cells. This study shows that topical steroidal anti-inflammatory drugs, so commonly employed in veterinary practice, can be absorbed, depending on the molecule and duration of treatment, leading to systemic effects, which are already relevant after 7 days. Based on our findings, we suggest caution and a close follow-up by a qualified veterinarian whenever a long-term therapy based on these molecules and route of administration is required.

Os glicocorticóides são muito utilizados na clínica veterinária por serem potentes inibidores da resposta inflamatória. São encontrados em muitas preparações tópicas, sozinhos ou combinados com outros medicamentos e estão presentes, principalmente, em produtos destinados ao uso otológico. Mesmo quando aplicados topicamente, sabe-se que existe certo grau de absorção. Com a disponibilidade de novos glicocorticóides sintéticos mais potentes, vem sendo sugerido recentemente, a ocorrência de hiperadrenocorticismo iatrogênico em pequenos animais. Com a finalidade de se testar a hipótese que a utilização de preparações otológicas contendo glicocorticóides podem ocorrer em efeitos sistêmicos, o presente estudo avaliou três antiinflamatórios esteroidais comumente utilizados no tratamento de otite em cães e gatos, quais sejam a hidrocortisona, a betametasona e a triancinolona. Para tanto, ratos foram tratados tópicamente, via auricular, a cada 12 horas, durante 7, 14 e 21 dias, com os fármacos descritos acima. Utilizamos o edema de pata induzido pela injeção de carragenina como forma de avaliar a existência de níveis efetivos de antiinflamatórios circulantes. Ainda, foram avaliados vários parâmetros tais como variação de peso corpóreo, peso relativo de baço e adrenais, hemograma completo, índice de proliferação de linfócitos e fagocitose e burst oxidativo realizados por neutrófilos circulantes. Além disso, foi avaliado o nível de corticosterona plasmática nos animais tratados com glicocorticóides tópicos. O tratamento tópico com antiinflamatórios esteroidais levou a redução no volume de edema inflamatório, mais evidente com a triancinolona. De forma geral, houve queda no ganho, ou mesmo perda de peso corpóreo durante o tratamento tópico com os antiinflamatórios esteroidais empregados. Em alguns casos, essa redução de peso corpóreo foi acompanhada de diminuição do peso relativo do baço e adrenais, particularmente com a betametasona. A principal alteração observada no hemograma foi leucopenia, mais evidente com a triancinolona. Houve redução dos níveis plasmáticos de corticosterona, mais duradoura com a betametasona. Os tratamentos tópicos causaram discreta redução na intensidade e percentual de fagocitose realizada por neutrófilos circulantes, bem como na produção de espécies reativas de oxigênio. O estudo aponta que glicocorticóides tópicos comumente empregados na terapêutica veterinária podem ser absorvidos, na dependência da molécula empregada e de seu tempo de utilização, causando alterações sistêmicas relevantes já após 7 dias de tratamento. Sugerimos uma maior cautela e acompanhamento veterinário dos pacientes nos casos que haja necessidade de emprego de tais medicamentos por períodos prolongados. / Glucocorticoids are commonly employed in veterinary practice because they are potent inhibitors of the inflammatory response. They are present in many topical formulations, alone or combined with other active compounds, particularly in otic ointments. Even when applied topically, certain degree of absortion is known to occur. Following the availability of novel, more potent synthetic steroidal anti-inflammatory drugs, cases of iatrogenic hyperadrenocorticism have been suggested. Aiming on testing the hypothesis that glucocorticoid-containing otic ointments may lead to systemic effects, we employed three different synthetic glucocorticoids widely used for the treatment of otitis in small animals (hydrocortisone, betamethasone, and triamcinolone) our study Rats were treated topically on their ears, every 12 hours, for 7, 14, or 21 days with the drugs described above. We first employed carrageenan-induced paw edema in order to evaluate the presence of effective levels of circulating anti-inflammatory drugs. We also evaluated several parameters such as change in body weight, relative weight of spleen and adrenal glands, complete hemogram, proliferation index of lymphocytes, and phagocytosis and oxidative burst performed by circulating neutrophils. Moreover, we assessed the plasmatic levels of corticosterone in rats treated topically with anti-inflammatory steroids. Topical treatment led to a reduction on the volume of the inflammatory edema induced by carrageenan, more evident following triamcinolone. Altogether, rats treated with these molecules ceased to gain, or lost weight on the course of the experiment. In some cases, such reduction was accompanied by a decrease on the relative weight of the spleen and adrenal glands, particularly after betamethasone. The most commonly observed change in the hemogram was leucopenia, evident following triamcinolone. We found reduced levels of circulating corticosterone, more persistent after betamethasone. Topically applied glucocorticoids caused a discrete reduction in the intensity and percentage of phagocytosis by circulating neutrophils, and a reduction on the oxidative burst performed by these cells. This study shows that topical steroidal anti-inflammatory drugs, so commonly employed in veterinary practice, can be absorbed, depending on the molecule and duration of treatment, leading to systemic effects, which are already relevant after 7 days. Based on our findings, we suggest caution and a close follow-up by a qualified veterinarian whenever a long-term therapy based on these molecules and route of administration is required.

A utilização do corticosteróide antenatal objetivando induzir artificialmente a maturação fetal e garantir a sobrevivência de neonatos críticos é bem estabelecido e rotineiramente utilizado em Medicina. Por outro lado, a utilização pós-natal de corticóide, como garantia de melhores condições clínicas do neonato, ainda figura como expressivo desafio tanto em neonatologia humana quanto veterinária. Deste modo, este estudo tem como objetivo avaliar a eficácia da corticoterapia pré ou pós-natal em cordeiros prematuros extremos na melhora da condição clínica, pulmonar, metabólica e hemodinâmica; necessidade de assistência ventilatória e na garantia de sobrevivência neonatal. Para tal, cordeiros prematuros, nascidos aos 135 dias de gestação, foram aleatoriamente alocados nos grupos: corticoterapia materna pré-natal (CORT PRÉ; n=8), corticoterapia pós-natal (CORT PÓS; n=9) e controle (CONT; n=5). A corticoterapia foi realizada com betametasona em dose única de 0,5 mg/Kg, por via de aplicação intra muscular, aos 133 dias de gestação ou aos 10 minutos após o nascimento para os grupos CORT PRÉ e CORT PÓS, respectivamente. O parto foi induzido utilizando-se o fármaco aglepristona às 49 horas prévias à data estimada para o parto. Os neonatos foram avaliados quanto ao escore Apgar, condição clínica geral (freqüência cardíaca, freqüência respiratória, tônus muscular e irritabilidade reflexa), temperatura corpórea, hemogasometria arterial, glicemia, lactatemia, concentrações séricas das enzimas antioxidantes (superoxido dismutase SOD e glutationa peroxidase GPx) e marcador do estresse oxidativo (TBARS) em 10 momentos pontuais durante os 3 dias subsequentes ao parto. Para os cordeiros destinados ao suporte ventilatório, avaliamos o tempo (em minutos) necessário para o início do protocolo ventilatório a partir do nascimento e o tempo de permanência na ventilação. Os dados foram analisados por meio de testes paramétricos e não-paramétricos, com nível de significância de 95%. As variáveis também foram submetidas ao teste de correlação de Spearman. Como resultados, observamos melhor condição de vitalidade e tônus muscular nos neonatos tratados em relação ao grupo controle. Quanto à avaliação cardiogênica, a betametasona pré-natal apresentou efeito bradicárdico, enquanto a administração pós-natal resultou em efeito taquicárdico. Tanto os resultados de frequência respiratória como temperatura corpórea foram estatisticamente superiores nos neonatos tratados em relação ao controle. Todos os cordeiros nasceram bradicárdicos e bradipneicos, com valores normais atingidos a partir de 10 minutos. Observamos hiperglicemia nos grupos tratados, com valor estatisticamente superior no grupo CORT PÓS. O valor de lactato foi estatisticamente superior no grupo CORT PÓS em relação ao controle. Quanto aos componentes do equilíbrio ácido-básico, os neonatos do grupo CORT PRÉ tiveram valores significativamente maiores de bicarbonato, enquanto menores pressões de CO2 foram observadas a partir de 60 minutos, embora sem diferença quanto ao pH e BE. Os tratamentos não determinaram alterações nos valores de PO2 e SO2. Entretanto, os diferentes protocolos corticoterápicos influenciaram no perfil hematológico neonatal, com valores significativamente maiores de hematócrito no grupo CORT PÓS, seguido pelo grupo CORT PRÉ. Observamos também atuação do tratamento pós-natal nos valores de SOD e correlação positiva com os valores de hematócrito e hemoglobina. Comparando-se o percentual de cordeiros submetidos à assistência ventilatória, verificou-se maior necessidade no grupo controle. Os neonatos do grupo CORT PRÉ permaneceram por tempo menor sob assistência ventilatória, em relação ao grupo controle Com base nos resultados obtidos, concluímos que a corticoterapia pós-natal ou pré-natal favorece a condição clínica neonatal (vitalidade, tônus muscular e funções vitais), a função pulmonar (trocas gasosas e compensação aos desequilíbrios ácido-básicos) e a atividade metabólica (controle glicêmico). O tratamento pós-natal aumentou a atividade da enzima SOD, reduzindo os riscos de danos pulmonares. Ainda, o tratamento com betametasona pós-natal ou materna pré-natal diminui a necessidade de assistência ventilatória em cordeiros prematuros extremos / The use of corticosteroid aiming artificially fetal lung maturation and survival of critical neonates is used as a routine in medicine. On the other hand, the postnatal steroid therapy used to improve clinical conditions of the newborn, It\'s still a therapeutic challenge both in human as veterinary neonatology. Thus, the aims this study is to assess the effectiveness of corticosteroid, used in the pre or postnatal period, in extremely preterm lambs to improve clinical, pulmonary, metabolic and hemodynamic condition; the need for ventilatory support and neonatal survival rate. For it, preterm lambs, born with 135 days of gestation, were randomly allocated into three groups: prenatal maternal corticosteroid therapy (CORT PRE; n = 8), postnatal corticosteroid therapy (CORT POST; n = 9) and control (CONT; n = 5). The steroid therapy was performed with betamethasone in a single dose of 0.5 mg/ kg, by intramuscular route of administration, at 133 days of pregnancy our after 10 minutes from the birth in the groups CORT PRÉ and CORT PÓS, respectively. The labor was induced with aglepristone administrated 49 hours prior to the estimated date of birth. Newborns were assessed by Apgar score, general medical condition (heart rate, respiratory rate, muscle tone and reflex irritability), body temperature, blood gas analysis, blood glucose, blood lactate concentration, serum concentrations of antioxidant enzymes (superoxide dismutase - SOD and glutathione peroxidase - GPx) and marker of oxidative stress (TBARS). The assessments were performed in 10 moments during the three days from delivery. For ventilated newborns, we assessed the needed time (in minutes) between birth and the beginning of ventilatory protocol, as well as length of stay on ventilatory support. Data were analyzed using parametric and nonparametric tests, with 95% of significance level. The variables were assessed from Spearman correlation test. As results, we noted better condition of vitality and muscle tone in newborns treated when compared with control group. Regarding cardiogenic values, antenatal betamethasone resulted in bradycardic effect, while its postnatal administration was related with tachycardia. Both results of respiratory and body temperature rates were significantly higher in newborns treated compared to the control. All lambs born whith bradycardia and bradypnea, reached normal values from 10 minutes of life. Hyperglycemia was observed in the treated groups, with statistically higher values in CORT PÓS group. The lactate value was statistically higher in CORT PÓST group compared to the control. Concerning the components of the acid-base balance, the CORT PRÉ showed significantly higher values of bicarbonate, while lower pressures of CO2 were observed from 60 minutes, although there were no differences in pH and BE values. The treatments did not determine changes in PO2 and SO2 values. However, the different protocols of steroid therapy influenced on neonatal blood profile, with significantly higher hematocrit values in CORT POST group, followed by CORT PRÉ. We also observed influence of postnatal treatment in SOD values as well as positive correlation between SOD and the hematocrit and hemoglobin values. Comparing the percentage of lambs submitted to mechanical ventilation, there were most ventilated neonates in the control group. Lower ventilation time was observed in the CORT PRÉ group. Then we conclude that, the postnatal or antenatal steroids improve neonatal clinical condition (vitality, muscle tone and vital functions), lung function (gas exchange and compensation to acid-base imbalances) and metabolic activity (glycemic control). The postnatal treatment increased the activity of SOD by reducing the risks of pulmonary damage. Moreover, treatment with postnatal betamethasone or prenatal maternal reduces the need for mechanical ventilation in extremely preterm lambs

Orientador: Daniela Leal Zandim Barcelos / Resumo: O propósito deste estudo foi determinar a influência do tabagismo nos níveis de beta-defensina 3 (hBD 3) no fluido crevicular gengival (FCG) de indivíduos com periodontite crônica e avaliar sua relação com saúde e doença periodontal. Além disso, foi investigada a correlação deste peptídeo antimicrobiano com metaloproteinase da matriz (MMP-8) e citocinas pró (IL-10) e anti-inflamatórias (IL-1β, IFN-γ e TNF-α). Um total de 40 indivíduos com periodontite crônica, sendo 20 fumantes (PF) e 20 não fumantes (PNF), e 20 indivíduos sem doença periodontal (S) foram incluídos no estudo. Amostras de FCG de sítios sadios e doentes dos indivíduos com periodontite, e apenas de sítios sadios dos indivíduos periodontalmente saudáveis, foram coletadas com tiras de papel absorvente. A quantificação da hBD 3 foi feita pela técnica ELISA sanduíche e dos marcadores biológicos por ensaio Multiplex. Níveis significativamente menores de hBD 3 foram identificados nos sítios doentes de PF em comparação aos sítios doentes de PNF (p=0,02). Por outro lado, os níveis de hBD 3 nos sítios sadios de PF foram significativamente maiores que nos sítios sadios de PNF e S (p=0,006). Na comparação dos sítios dentro do grupo PF, foi verificado que os sítios doentes apresentavam níveis reduzidos de hBD 3 em comparação com sítios sadios (p=0,04). Já no grupo PNF, os níveis de hBD 3 foram mais elevados nos sítios doentes que nos sítios sadios (p=0,02). Uma correlação negativa foi observada entre os níveis de hBD 3 e MM... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this study was to determine the influence of smoking on gingival crevicular fluid (GCF) levels of beta-defensin 3 (hBD 3) in individuals with chronic periodontitis and to evaluate its relationship with health and periodontal disease. In addition, the correlation of this antimicrobial peptide with matrix metalloproteinase (MMP-8) and pro (IL-10) and anti-inflammatory cytokines (IL-1β, IFN-γ and TNF-α) was investigated. A total of 40 individuals with chronic periodontitis, including 20 smokers (PS) and 20 non-smokers (PNS), and 20 subjects without periodontal disease (H) were included in the study. GCF samples from healthy and diseased sites of individuals with periodontitis, and only from healthy sites of periodontally healthy individuals, were collected with absorbent paper strips. Quantification of hBD 3 was performed by a sandwich ELISA assay and the biological markers levels were analyzed by a multiplex assay. Significantly lower levels of hBD 3 were identified in diseased sites of PS compared to diseased sites of PNS (p = 0.02). On the other hand, the levels of hBD 3 in healthy sites of PS were significantly higher than in healthy sites of PNS and H (p = 0.006). The comparison between the sites within the groups with periodontitis showed reduced levels of hBD 3 in diseased sites of PS compared to healthy sites (p = 0.04), while higher levels of this peptide was detected in diseased sites of PNS compared to healthy sites (p = 0.02). A negative correlation wa... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Corticosteroide por via espinal é uma das alternativas no processo de tratamento da dor radicular quando o tratamento conservador falhou. Sua administração por via epidural vem sendo reavaliada devido ao risco de sequelas, provenientes da obstrução de vasos sanguíneos, associadas a outros efeitos adversos próprios dos corticosteroides. O presente estudo visou avaliar o efeito analgésico da administração de diferentes corticosteroides, exemplificados pela dexametasona e pela betametasona, administrados por via epidural. Vinte e seis pacientes portadores de dor neuropática secundária à hérnia de disco participaram do estudo. A punção sacral foi realizada com combinação de 40 mg de lidocaína, 30 µg de clonidina e 10 mg de dexametasona ou 10 mg de betametasona, diluídos para volume final 10 ml, com solução fisiológica a 0,9%, após comprovação com contraste não-iodado do perfeito posicionamento da agulha no espaço epidural. Este procedimento foi repetido uma vez por semana por 2 semanas seguidas, e após um intervalo de 3 semanas foi realizado mais duas vezes, uma vez por semana, sendo o total de 4 procedimentos por paciente. Treze pacientes iniciaram com dexametasona epidural durante as primeiras duas semanas, e prosseguiram com betametasona após período de descanso de três semanas, sendo que cada paciente atuou como seu próprio controle. Os pacientes foram avaliados em relação à analgesia, incidência de efeitos adversos e alteração das concentrações plasmáticas de íons, cortisol, adrenocorticotrofina e glicemia. Vinte e três pacientes completaram o estudo. Cada paciente foi o seu próprio controle e, no mesmo paciente, o efeito analgésico da dexametasona foi superior ao da betametasona. (p<0,05). Cortisol e adrenocorticotrofina plasmáticos reduziram no sétimo dia após realização do bloqueio (p<0,05), As demais medidas de concentrações plasmáticas de íons Na+, K+, Ca++, glicemia inicial, pós-prandial e hemoglobina glicada foram semelhantes entre os grupos, e sem alteração quando comparados com valores iniciais (p>0,05). Ambos grupos relataram insônia relativa nos primeiros dias pós-bloqueio (p<0,05). Não houve alteração de peso corporal e da pressão arterial durante o tratamento entre os fármacos avaliados (p>0,05). Entretanto, 3 pacientes que receberam dexametasona e 2 que receberam betametasona inicialmente, apresentam medida de pressão ocular aumentada (p<0,05). Como conclusões, a analgesia da dexametasona foi superior quando comparada à da betametasona, (p<0,05). Entretanto ambos grupos apresentaram aumento da pressão ocular e prejuízo do sono noturno, não relevante este último. Finalmente, uma vez que a dexametasona foi superior à betametasona em relação à analgesia e demonstrada ser mais segura em relação à formação de agregados, sugere-se a dexametasona como escolha. / Although the primarily indication of epidural corticosteroids as part of the treatment of acute neuropathic pain when the conservative treatment have failed, recently there have been concerns related to which corticosteroid would be the best indication, as there is the risk of particulate aggregation and serious adverse effects secondary to their own pharmacological properties or intra vessel aggregation and obliteration, as well their efficacy as analgesics. This actual study was designed to evaluate two different corticosteroids, i.e., dexamethasone and betamethasone, as coajuvants in epidural management of acute radicular pain. Twenty-six patients with history of neuropathic pain secondary to disc herniation acted as their own control related to the epidural administration of dexamethasone and betamethasone. Sacral puncture was performed with a combination of 40 mg of lidocaine, 30 µg of clonidine and 10 mg of dexamethasone or 10 mg of betamethasone, diluted to final volume 10 ml with 0.9% physiological solution after non-iodinated contrast of the perfect positioning of the needle in the epidural space.Thirteen patients have started with dexamethasone during the first two weekly procedures, and after 3 weeks of wash-out were submitted to two weekly sequence of sacral betamethasone. The other patients have started with epidural betamethasone, followed by dexamethasone after 3-week rest. Each patient acted as its own control. Patients were evaluated related to analgesia, blood pressure, weight gain, adverse effects and plasmatic measurements of ions, glicemia, ACTH and cortisol. Twenty-three patients completed the study. The analgesic effect was higher when dexamethasone was used in the same patient (p <0.05) Plasma cortisol and ACTH reduced on the 7th day after the block (p<0.05). The plasmatic concentrations of the ions Na+, K+, Ca++, control and post-prandial glicemia, blood pressure, weight were similar between groups and did no differ from initial control values (p>0.05). Both groups reported relative insomnia in the first post-blockade days (P <0.05). However, 3 patients that received dexamethasone and 2 that received betamethasone had ocular pressure increase (p<0.05). As conclusions, both drugs resulted in still unaware increase in ocular pressure and sleep disturbance. Because dexamethasone analgesia was superior and there were no differences regarding adverse effects between either epidural betamethasone or dexamethasone, based on the literature, it would be more appropriate the utilization of dexamethasone.

FundaÃÃo de Amparo à Pesquisa do Estado do Cearà / Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / AtravÃs da cromatografia lÃquida de alta eficiÃncia com detecÃÃo por espectrometria de massa no modo MS/MS, desenvolveu-se um mÃtodo sensÃvel e altamente seletivo para determinar os nÃveis de acetato de megestrol no plasma humano, usando a betametasona como padrÃo interno. O analito e o padrÃo interno foram extraÃdos das amostras do plasma atravÃs da soluÃÃo de extraÃÃo hexano-acetato de etila (1:1 v/v), e cromatografados em uma coluna C18. A fase mÃvel consistiu de acetonitrila-Ãgua (80:20 v/v), contendo 0,1% de Ãcido fÃrmico. A detecÃÃo foi realizada em um triplo-quadrupolo, atravÃs de um espectrÃmetro de massa no modo de monitoramento de reaÃÃo mÃltipla via eletrospray. O mÃtodo tem um tempo de corrida de 3 minutos e limite de quantificaÃÃo de 2 ng/mL. As curvas de calibraÃÃo foram obtidas utilizando uma faixa de concentraÃÃo de 2 a 150 ng/mL. As precisÃes intralote foram 3,16%, 4,65% e 2,68%, e a acurÃcia intralote foi de 6,77%, 6,23% e 5,73% para 6, 60 e 120 ng/mL, respectivamente. As precisÃes interlote foram 7,76%, 6,23% e 6,37%, e a acurÃcia interlote foi de 0,08%, 1,55% e 2,11% para as mesmas concentraÃÃes. Este mÃtodo validado foi aplicado com sucesso para a determinaÃÃo dos parÃmetros farmacocinÃticos dos comprimidos de acetato de megestrol administrados a 30 voluntÃrios sadios. / A sensitive and highly selective liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS-MS) method was developed to determine megestrol acetate in human plasma using betamethazone as the internal standard. The analyte and internal standard were extracted from plasma samples by hexane/ethyl acetate (1:1 v/v), and chromatographed on a C18 column. The mobile phase consisted of acetonitrila-water (80:20 v/v) including formic acid 0.1%. Detection was performed on a triple quadropole tandem mass spectrometer by multiple reaction mode via electrospray source. The method has a chromatographic run time of 3 min and a limit of quantification of 2 ng/mL. The linear calibration curves were obtained in the concentration range 2 â 150 ng/mL. The intra-batch precisions were 3.16%, 4.65%, and 2.68%; and the intra-batch accuracy was 6.77%, 6.23%, and 5.73% for 6, 60 and 120 ng/mL, respectively. The inter-batch precision was 7.76%, 6.23%, and 6.37% and the inter-batch accuracy was 0.08%, 1.55%, and 2.11% for the same concentrations. This validated method was successfully applied for the determination of pharmacokinetic profiles of megestrol acetate tablets administered to 30 healthy volunteers.

A utilização do corticosteróide antenatal objetivando induzir artificialmente a maturação fetal e garantir a sobrevivência de neonatos críticos é bem estabelecido e rotineiramente utilizado em Medicina. Por outro lado, a utilização pós-natal de corticóide, como garantia de melhores condições clínicas do neonato, ainda figura como expressivo desafio tanto em neonatologia humana quanto veterinária. Deste modo, este estudo tem como objetivo avaliar a eficácia da corticoterapia pré ou pós-natal em cordeiros prematuros extremos na melhora da condição clínica, pulmonar, metabólica e hemodinâmica; necessidade de assistência ventilatória e na garantia de sobrevivência neonatal. Para tal, cordeiros prematuros, nascidos aos 135 dias de gestação, foram aleatoriamente alocados nos grupos: corticoterapia materna pré-natal (CORT PRÉ; n=8), corticoterapia pós-natal (CORT PÓS; n=9) e controle (CONT; n=5). A corticoterapia foi realizada com betametasona em dose única de 0,5 mg/Kg, por via de aplicação intra muscular, aos 133 dias de gestação ou aos 10 minutos após o nascimento para os grupos CORT PRÉ e CORT PÓS, respectivamente. O parto foi induzido utilizando-se o fármaco aglepristona às 49 horas prévias à data estimada para o parto. Os neonatos foram avaliados quanto ao escore Apgar, condição clínica geral (freqüência cardíaca, freqüência respiratória, tônus muscular e irritabilidade reflexa), temperatura corpórea, hemogasometria arterial, glicemia, lactatemia, concentrações séricas das enzimas antioxidantes (superoxido dismutase SOD e glutationa peroxidase GPx) e marcador do estresse oxidativo (TBARS) em 10 momentos pontuais durante os 3 dias subsequentes ao parto. Para os cordeiros destinados ao suporte ventilatório, avaliamos o tempo (em minutos) necessário para o início do protocolo ventilatório a partir do nascimento e o tempo de permanência na ventilação. Os dados foram analisados por meio de testes paramétricos e não-paramétricos, com nível de significância de 95%. As variáveis também foram submetidas ao teste de correlação de Spearman. Como resultados, observamos melhor condição de vitalidade e tônus muscular nos neonatos tratados em relação ao grupo controle. Quanto à avaliação cardiogênica, a betametasona pré-natal apresentou efeito bradicárdico, enquanto a administração pós-natal resultou em efeito taquicárdico. Tanto os resultados de frequência respiratória como temperatura corpórea foram estatisticamente superiores nos neonatos tratados em relação ao controle. Todos os cordeiros nasceram bradicárdicos e bradipneicos, com valores normais atingidos a partir de 10 minutos. Observamos hiperglicemia nos grupos tratados, com valor estatisticamente superior no grupo CORT PÓS. O valor de lactato foi estatisticamente superior no grupo CORT PÓS em relação ao controle. Quanto aos componentes do equilíbrio ácido-básico, os neonatos do grupo CORT PRÉ tiveram valores significativamente maiores de bicarbonato, enquanto menores pressões de CO2 foram observadas a partir de 60 minutos, embora sem diferença quanto ao pH e BE. Os tratamentos não determinaram alterações nos valores de PO2 e SO2. Entretanto, os diferentes protocolos corticoterápicos influenciaram no perfil hematológico neonatal, com valores significativamente maiores de hematócrito no grupo CORT PÓS, seguido pelo grupo CORT PRÉ. Observamos também atuação do tratamento pós-natal nos valores de SOD e correlação positiva com os valores de hematócrito e hemoglobina. Comparando-se o percentual de cordeiros submetidos à assistência ventilatória, verificou-se maior necessidade no grupo controle. Os neonatos do grupo CORT PRÉ permaneceram por tempo menor sob assistência ventilatória, em relação ao grupo controle Com base nos resultados obtidos, concluímos que a corticoterapia pós-natal ou pré-natal favorece a condição clínica neonatal (vitalidade, tônus muscular e funções vitais), a função pulmonar (trocas gasosas e compensação aos desequilíbrios ácido-básicos) e a atividade metabólica (controle glicêmico). O tratamento pós-natal aumentou a atividade da enzima SOD, reduzindo os riscos de danos pulmonares. Ainda, o tratamento com betametasona pós-natal ou materna pré-natal diminui a necessidade de assistência ventilatória em cordeiros prematuros extremos / The use of corticosteroid aiming artificially fetal lung maturation and survival of critical neonates is used as a routine in medicine. On the other hand, the postnatal steroid therapy used to improve clinical conditions of the newborn, It\'s still a therapeutic challenge both in human as veterinary neonatology. Thus, the aims this study is to assess the effectiveness of corticosteroid, used in the pre or postnatal period, in extremely preterm lambs to improve clinical, pulmonary, metabolic and hemodynamic condition; the need for ventilatory support and neonatal survival rate. For it, preterm lambs, born with 135 days of gestation, were randomly allocated into three groups: prenatal maternal corticosteroid therapy (CORT PRE; n = 8), postnatal corticosteroid therapy (CORT POST; n = 9) and control (CONT; n = 5). The steroid therapy was performed with betamethasone in a single dose of 0.5 mg/ kg, by intramuscular route of administration, at 133 days of pregnancy our after 10 minutes from the birth in the groups CORT PRÉ and CORT PÓS, respectively. The labor was induced with aglepristone administrated 49 hours prior to the estimated date of birth. Newborns were assessed by Apgar score, general medical condition (heart rate, respiratory rate, muscle tone and reflex irritability), body temperature, blood gas analysis, blood glucose, blood lactate concentration, serum concentrations of antioxidant enzymes (superoxide dismutase - SOD and glutathione peroxidase - GPx) and marker of oxidative stress (TBARS). The assessments were performed in 10 moments during the three days from delivery. For ventilated newborns, we assessed the needed time (in minutes) between birth and the beginning of ventilatory protocol, as well as length of stay on ventilatory support. Data were analyzed using parametric and nonparametric tests, with 95% of significance level. The variables were assessed from Spearman correlation test. As results, we noted better condition of vitality and muscle tone in newborns treated when compared with control group. Regarding cardiogenic values, antenatal betamethasone resulted in bradycardic effect, while its postnatal administration was related with tachycardia. Both results of respiratory and body temperature rates were significantly higher in newborns treated compared to the control. All lambs born whith bradycardia and bradypnea, reached normal values from 10 minutes of life. Hyperglycemia was observed in the treated groups, with statistically higher values in CORT PÓS group. The lactate value was statistically higher in CORT PÓST group compared to the control. Concerning the components of the acid-base balance, the CORT PRÉ showed significantly higher values of bicarbonate, while lower pressures of CO2 were observed from 60 minutes, although there were no differences in pH and BE values. The treatments did not determine changes in PO2 and SO2 values. However, the different protocols of steroid therapy influenced on neonatal blood profile, with significantly higher hematocrit values in CORT POST group, followed by CORT PRÉ. We also observed influence of postnatal treatment in SOD values as well as positive correlation between SOD and the hematocrit and hemoglobin values. Comparing the percentage of lambs submitted to mechanical ventilation, there were most ventilated neonates in the control group. Lower ventilation time was observed in the CORT PRÉ group. Then we conclude that, the postnatal or antenatal steroids improve neonatal clinical condition (vitality, muscle tone and vital functions), lung function (gas exchange and compensation to acid-base imbalances) and metabolic activity (glycemic control). The postnatal treatment increased the activity of SOD by reducing the risks of pulmonary damage. Moreover, treatment with postnatal betamethasone or prenatal maternal reduces the need for mechanical ventilation in extremely preterm lambs