Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 462458.pdf: 2477430 bytes, checksum: d919c3c5fbc07113fb3a1d22bb1b9e59 (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Tuberculosis (TB), a disease mainly caused by the bacillus Mycobacterium tuberculosis (MTB), is considered a global public health problem. Infections caused by mycobacteria are generally difficult to treat because of its natural resistance to most antibiotics. This resistance is largely attributed to the formation of the cell wall. The InhA is part of the mycobacterial FAS II system which regulates the elongation of the fatty acid chain, which will compose the cell wall of the bacillus (mycolic acids). As the FAS II system is not present in mammals, this enzyme has been described as an important macromolecular target aiming the development of drugs with selective toxicity. The development of analytical techniques for studying proteins in solution by mass spectrometry combined with cross-linking has permitted access information about the primary, tertiary, and quaternary structure of the proteins. In this work, the technique of cross-linking combined with mass spectrometry was implemented for the characterization of the Mycobacterium tuberculosis enoyl-ACP reductase (InhA) which catalyzes the final essential enzymatic step in fatty acid elongation in the FAS II pathway, converting 2-trans-enoyl-ACP to acyl-ACP via an NADH-dependent reaction. / A tuberculose (TB), doen?a causada principalmente pelo bacilo Mycobacterium tuberculosis (MTB), ? considerada um problema global de sa?de p?blica. As infec??es causadas pela micobact?ria s?o, em geral, dif?ceis de tratar devido principalmente ao surgimento de cepas resistentes ? maioria dos f?rmacos dispon?veis e ? co-infec??o com a s?ndrome da imunodefici?nciaadquirida (SIDA). Nesse contexto, a caracteriza??o de alvos moleculares para a proposi??o de novas estruturas qu?micas candidatas a f?rmacos anti-TB mostra-se de import?ncia sum?ria. A enzima enoil-ACP-redutase (InhA) de MTB faz parte do sistema FAS II damicobact?ria a qual regula o alongamento da cadeia dos ?cidos graxos fornecendo os precursores que ir?o compor a parede celular do bacilo (?cidos mic?licos). Como o sistema FAS II n?o esta presente em mam?feros esse fato torna essa enzima um importante alvo macromolecular para o desenvolvimento de novos f?rmacos com toxicidade seletiva. O desenvolvimento de t?cnicas anal?ticas para estudar prote?nas em solu??o utilizando a espectrometria de massas combinada com agentes de liga??o cruzada vem possibilitandoa caracteriza??o estrutural de prote?nas conduzindo a informa??es sobre suas estruturas prim?rias, terci?rias e quatern?rias. No presente trabalho foi implementado a t?cnica de cross-linking combinada a espectrometria de massas para a caracteriza??o em solu??o da enzima InhA de MTB.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 464249.pdf: 13663409 bytes, checksum: 370383758e5762e6645f52a510e7dfab (MD5) Previous issue date: 2014-12-10 / Lung cancer is the most commonly diagnosed type of cancer and the leading cause of cancer related mortality in the world, causing nearly one million deaths per year. Among all histological types, adenocarcinoma is the most frequent one (75-80%). Gastrin-releasing peptide (GRP) is considered to be a mitogen, capable of inducing cell proliferation, since it is involved in fetal lung development. This neuropeptide had its effect on tumor growth first identified in human cells of small cell lung cancer, acting as an autocrine growth factor for tumor tissues by binding to its receptor GRPR. The receptor has been found in many tumor types such as prostate, breast, stomach, pancreas and colon. Moreover, this peptide acts as a morphogen, in angiogenesis and is related to inflammatory processes and in the regulation of cells of the immune system. Furthermore, asymptomatic smokers have high levels of GRP in bronchoalveolar lavage and urine. However, little is known about its effects in tumorigenesis and metastasis, and which molecular mechanisms and signaling pathways are responsible for the effects found. Our group demonstrated recently that GRP could act as a chemotactic molecule for neutrophils. Thus, we hypothesized that GRP could be also a chemotactic stimulus to tumor cells expressing the GRPR. In this study, we tested this hypothesis by examining the effect of GRP on proliferation, survival and migration of cells from the adenocarcinoma cell line A549, seeking to identify the mechanisms of action of this peptide. These cells express high levels of GRPR and treatment with GRP leads to activation of kinases such as AKT and ERK1/2 that are involved in the cellular processes mentioned. Our results suggest that GRP is a migratory stimulus to these cells without evidence of significant effect on their proliferation or survival to treatment with the chemotherapy drug cisplatin (CDDP). Nonetheless, they become more sensitive to CDDP when the drug is combined with a GRPR antagonist. Thus, we believe that future studies should consider a possible role for GRP in metastasis of NSCLC. / O c?ncer de pulm?o ? o tipo de c?ncer que mais comumente diagnosticado e o que mais mata no mundo levando a quase 1 milh?o de mortes por ano. Entre todos os tipos histol?gicos, o adenocarcinoma ? o mais frequente (75-80%). O pept?deo liberador de gastrina (GRP) ? considerado um agente mitog?nico, capaz de induzir a prolifera??o celular, uma vez que est? envolvido no desenvolvimento fetal dos pulm?es. Este pept?deo teve sua a??o sobre o crescimento tumoral primeiramente identificada em c?lulas humanas de c?ncer de pulm?o de pequenas c?lulas, atuando como fator aut?crino de crescimento de tecidos e tumores atrav?s da liga??o ao seu receptor GRPR. Este receptor foi encontrado em diversos tipos de tumores como pr?stata, mama, est?mago, p?ncreas e c?lon. Al?m disso, este pept?deo atua como um morf?geno, na angiog?nese e, est? relacionado a processos inflamat?rios e na regula??o de c?lulas do sistema imune. E, fumantes assintom?ticos possuem altos n?veis de GRP no lavado broncoalveolar e na urina. No entanto, pouco se conhece sobre os seus efeitos na tumorig?nese e met?stase e, quais os mecanismos moleculares e as vias de sinaliza??o que s?o respons?veis pelos efeitos encontrados. Nosso grupo demonstrou, recentemente, que o GRP pode atuar como uma mol?cula quimiot?tica para neutr?filos. Desta forma, hipotetizamos que o GRP poderia constituir num estimulo quimiot?tico tamb?m para as c?lulas tumorais que express?o o GRPR. Neste trabalho, testamos essa hip?tese, analisando o efeito do GRP sobre a prolifera??o, sobreviv?ncia e migra??o de c?lulas da linhagem de adenocarcinoma A549, buscando identificar mecanismos de a??o desse pept?deo. Esta linhagem expressa altos n?veis de GRPR. O tratamento com GRP leva a ativa??o de quinases como a AKT e ERK1/2 que est?o envolvidas nestes processos celulares. Nossos resultados sugerem que o GRP ? principalmente um est?mulo migrat?rio para estas c?lulas, sem evid?ncias de efeito significativo sobre a sua prolifera??o ou sobreviv?ncia ao tratamento com a droga quimioter?pica cisplatina, mas tornam-se mais sens?veis quando a droga ? combinada com um antagonista do GRPR. Dessa forma, acreditamos que estudos futuros devam considerar um poss?vel papel para o GRP na met?stase.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 467154.pdf: 7061163 bytes, checksum: 094a6255137e152d52395cd63a9b0ee4 (MD5) Previous issue date: 2015-03-06 / Alzheimer disease (AD) and Parkinson disease (PD) are the two most common neurodegenerative disorders affecting around 35 and 10 million people worldwide, respectively. These disorders are characterized by neuronal protein deposits and progressive loss of function or structure of central nervous system (CNS). Studies have shown that purinergic system is involved in mechanisms associated with neurodegenerative diseases such as AD and PD. The purinergic signaling is meditated by ATP and adenosine through activation of purinoceptors P2 and P1, respectively. The nucleotide and nucleoside levels are modulated by the action of the ectonucleotidase family, especially by ecto-Nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (NTPDases) and ecto-5?-nucleotidase (EC-5?-Nt). These enzymes hydrolyze ATP to adenosine, which is subsequently deaminated by the enzyme Adenosine Deaminase (ADA) to inosine. Adenosine is described as an important neuromodulator and neuroprotective of CNS, and its modulation has proven to be a promising alternative for the treatment of neurodegenerative diseases. Thus, this study aims to evaluate behavioral parameters in models of cognitive impairment induced by scopolamine, 6-hydroxydopamine, and paraquat in zebrafish and study the possible effect of these models on the purinergic system. Our results, using a model of pharmacological cognitive impairment induced by scopolamine in adult zebrafish, showed that selective and non-selective inhibitors of adenosine receptors (Caffeine, ZM241385, and DPCPX) prevented the cognitive deficit induced by scopolamine. The same results were found for the adenosine transporter inhibitor (dipyridamole), and ADA inhibitor (EHNA). These data support the hypothesis of adenosinergic signalling can modulate memory mechanisms. We also developed a new experimental model of neurodegeneration by treating adult zebrafish chronically with paraquat herbicide (Pq) that results in symptoms of PD. Treatment consisted of six ip. injections of Pq in doses of 10 or 20 mg/kg and each injection was administered every three days. Locomotor behavior was assessed 24 hours after each injection and showed a decrease in both doses. The turn angle was also evaluated and showed difference between the doses administered compared to control group. Non-motor behaviors such as anxiety and social interaction were not significantly different after chronic treatment with Pq. However, after Pq exposure, the animals showed a deficit in Y-maze task memory. Apart from the behavioral data, our results presented an increase on dopamine levels, whereas DOPAC decreased in the experimental group showing change in dopamine metabolism. The amount of tyrosine hydroxylase demonstrated no significant difference between control and treated fish; however, dopamine transporter expression decreased in the group treated with 10 mg/kg Pq, and there was no change at the highest dose. Our study also evaluated the effect of chronic exposure of Pq and 6-hydroxydopamine (6-OHDA) neurotoxins, commonly used as an animal model of PD, on extracellular nucleotide and nucleoside metabolism. Two doses of 6-OHDA were tested, 25 and 50 mg/kg, and the animals were sacrificed at six days after exposure. Our data showed no changes in ectonucleotidase activities or ATP, ADP and AMP levels after exposure to Pq. However, a decrease of extracellular adenosine and increase in inosine levels were observed when compared to the control group. The 6-OHDA treatment did not affect the activity of NTPDase, EC-5?-Nt, and ATP levels in both tested doses. In contrast to the previous results, ADP levels were different for each dose used, while the AMP levels decreased in both doses. The adenosine and inosine showed an increase in both doses of 6-OHDA tested in zebrafish brains. These data suggest that the purinergic system can be modulated differently in experimental animals with symptoms of Parkinson's disease. In addition, this study also presented a new model of neurodegeneration using the Pq and confirms the involvement of purinergic system on neurodegeneration as well as its pharmacological potential in neurodegenerative diseases. / As doen?as neurodegenerativas mais prevalentes s?o a doen?a de Alzheimer (DA) e a doen?a de Parkinson (DP) afetando cerca de 35 e 10 milh?es de pessoas no mundo, respectivamente. Essas patologias s?o caracterizadas pelo dep?sito de prote?nas em c?lulas neuronais e pela perda progressiva da fun??o ou estrutura no sistema nervoso central (SNC). Estudos t?m mostrado que o sistema purin?rgico est? envolvido nos mecanismos relacionados a DA e DP. A sinaliza??o purin?rgica ? mediada pela a??o do ATP e da adenosina atrav?s da ativa??o dos receptores P2 e P1, respectivamente. Os n?veis de nucleot?deos e de nucleos?deos s?o modulados pela a??o enzim?tica das ectonucleotidases, especialmente pela ecto-nucleos?deo trifosfato difosfoidrolases (NTPDases) e ecto-5'-nucleotidase (EC-5?-Nt). Estas enzimas hidrolisam ATP em adenosina, que ? subsequentemente desaminado pela enzima adenosina deaminase (ADA) a inosina. A adenosina ? descrita como importante neuromodulador e neuroprotetor do SNC e sua modula??o tem se mostrado uma alternativa promissora para o tratamento de doen?as neurodegenerativas. Com isso, este estudo visa avaliar par?metros comportamentais em modelos de d?ficit cognitivo induzidos por escopolamina, por 6-hidroxidopamina e por paraquat em peixe-zebra, e estudar o poss?vel efeito desses modelos sobre o sistema purin?rgico. Nossos resultados, utilizando o modelo farmacol?gico de d?ficit cognitivo induzido por escopolamina em peixe-zebra adulto, mostraram que os inibidores seletivos e n?o seletivos dos receptores de adenosina (Cafe?na, ZM241385 e DPCPX) preveniram o d?ficit causado pela escopolamina. Os mesmos resultados foram encontrados para o inibidor do transportador de adenosina (dipiridamol) e inibidor da ADA (EHNA). Esses dados suportam a hip?tese de que a sinaliza??o adenosin?rgica pode modular o processamento da mem?ria. Nosso estudo tamb?m caracterizou um novo modelo experimental de neurodegenera??o, tratando peixes-zebra adultos cronicamente com paraquat (Pq), herbicida associado aos sintomas da DP. O tratamento consistiu de seis inje??es intraperitoniais nas doses de 10 ou 20 mg/kg a cada tr?s dias. O comportamento locomotor foi avaliado 24 horas ap?s cada inje??o e mostrou uma diminui??o em ambas as doses. O ?ngulo de giro tamb?m foi avaliado 24 horas ap?s cada inje??o e demonstrou diferen?a entre as doses administradas. Comportamentos n?o motores como ansiedade e intera??o social n?o apresentaram diferen?a significativa ap?s o tratamento cr?nico com Pq. No entanto, os animais tratados com Pq demonstraram d?ficit de mem?ria em tarefa de labirinto em Y comparados com o grupo controle. Al?m dos dados comportamentais, nossos resultados mostraram um aumento nos n?veis de dopamina, enquanto os de DOPAC diminu?ram nos animais tratados com Pq, mostrando mudan?a no metabolismo. J? a tirosina hidroxilase n?o apresentou diferen?a significativa entre animais do grupo controle e tratados, por?m a express?o do transportador de dopamina diminuiu no grupo tratado com 10 mg/Kg de Pq, n?o havendo altera??o na maior dose. Nosso estudo tamb?m investigou os efeitos da exposi??o cr?nica do Pq e da neurotoxina 6-hidroxidopamina (6-OHDA), comumente usada como modelo animal de DP, sobre o metabolismo extracelular de nucleos?deos e nucleot?deos. Duas doses de 6-OHDA foram testadas, 25 e 50 mg/kg, e os animais foram eutanasiados seis dias ap?s a exposi??o. Nossos dados mostraram que o Pq n?o alterou a atividade das NTPDases e EC-5?-Nt ou os n?veis extracelulares de ATP, ADP e AMP. No entanto, o tratamento cr?nico com Pq diminui os n?veis extracelulares de adenosina e aumentou os n?veis de inosina. Os peixes tratados com 6-OHDA n?o apresentaram altera??es na atividade das NTPDases e EC-5?-Nt, bem como nos n?veis de ATP extracelular nas duas doses testadas. Por?m, houve mudan?as nos n?veis de ADP e uma diminui??o, em ambas as doses, nos n?veis de AMP. J? os n?veis extracelulares de adenosina e inosina apresentaram um aumento. Estes dados sugerem que o sistema purin?rgico pode ser modulado de forma diferente em animais experimentais com sintomas de Parkinson. Al?m disso, este trabalho tamb?m apresentou um novo modelo de neurodegenera??o utilizando o Pq al?m de refor?ar o envolvimento do sistema purin?rgico e o seu potencial farmacol?gico sobre doen?as neurodegenerativas.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 391140.pdf: 3891847 bytes, checksum: a692cff7af22978c19d6e2954a337d26 (MD5) Previous issue date: 2007-05-16 / A depress?o ? a manifesta??o mais comum dos dist?rbios afetivos. ? uma das doen?as mais debilitadoras e causa problemas tanto para o indiv?duo quanto para a sociedade e, se n?o for tratada, pode levar ao aumento da morbidade e mortalidade. O uso de f?rmacos antidepressivos ? a base dos tratamentos para depress?o. Os inibidores seletivos da recapta??o de serotonina, como a fluoxetina e a sertralina, e os antidepressivos tric?clicos, nortriptilina e clomipramina, s?o constantemente utilizados no tratamento para a depress?o. Evid?ncias t?m demonstrado o importante papel desempenhado pelo ATP e a adenosina no sistema nervoso central. O ATP pode ser armazenado e co-liberado juntamente com outros neurotransmissores, tais como a noradrenalina e a serotonina. O ATP extracelular pode ser hidrolisado at? adenosina pela a??o de um grupo de ecto-nucleotidases. Estas ecto-enzimas promovem a convers?o enzim?tica de ATP, controlando os n?veis deste nucleot?deo e do seu nucleos?deo adenosina. Dentro do grupo das ecto-nucleotidases, podemos destacar a fam?lia das NTPDases (Nucleos?deo trifosfato difosfoidrolases) e a ecto-5?- nucleotidase. Considerando que: (i) a adenosina exerce um importante papel neuromodulador, (ii) o ATP pode ser co-liberado com serotonina e noradrenalina e (iii) as ecto-nucleotidases representam a principal rota de forma??o de adenosina extracelular atrav?s do catabolismo do ATP, torna-se importante avaliar o efeito de f?rmacos antidepressivos sobre a via das ecto-nucleotidases. Fluoxetina, sertralina, nortriptilina e clomipramina foram testadas no tratamento in vitro, nas concentra??es de 100, 250 e 500 ?M no soro e em sinaptossomas de hipocampo e c?rtex cerebral de ratos. A hidr?lise de ATP e ADP foram inibidas de maneira dose-dependente no tratamento in vitro realizado com os quatro f?rmacos em sinaptosomas de hipocampo e c?rtex cerebral de ratos, mas a hidr?lise de AMP n?o foi alterada. O tratamento in vitro em soro de ratos n?o afetou nenhuma das atividades enzim?ticas estudadas. Fluoxetina e nortriptilina foram testadas no tratamento in vivo, na dose de 10mg/Kg. O tratamento agudo (1 hora ap?s a administra??o) com nortriptilina provocou uma inibi??o na hidr?lise de ATP em soro de ratos. Entretanto, o tratamento cr?nico (14 dias) com ambas as drogas provocou uma inibi??o na atividade das NTPDases e da ecto-5?-nucleotidase em soro. O tratamento agudo com fluoxetina n?o alterou a atividade das enzimas em sinaptossomas de hipocampo e c?rtex cerebral. Entretanto, o tratamento agudo com nortriptilina levou a um aumento na hidr?lise de ADP no c?rtex cerebral e induziu uma diminui??o na hidr?lise de ATP e ADP no hipocampo. O tratamento cr?nico com fluoxetina provocou uma inibi??o na hidr?lise de ATP no hipocampo e no c?rtex cerebral e aumentou a hidr?lise de ADP e AMP no c?rtex cerebral. Ap?s tratamento cr?nico com nortriptilina, houve uma diminui??o da hidr?lise de ATP no hipocampo, mas foi observado um aumento nas atividades destas enzimas no c?rtex cerebral. A express?o g?nica das NTPDases e ecto-5?-nucleotidase foi alterada ap?s os tratamentos agudo e cr?nico com fluoxetina e nortriptilina em hipocampo e c?rtex cerebral de ratos. Os resultados demonstram que estes f?rmacos antidepressivos podem influenciar as enzimas envolvidas na forma??o do neuromodulador adenosina, sugerindo que o sistema purin?rgico pode ser alvo dos efeitos neuroqu?micos promovidos por estes f?rmacos

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 391815.pdf: 353852 bytes, checksum: 1f18d70cef489dfb3cfe41e9e9478f45 (MD5) Previous issue date: 2007-04-13 / Foi comparado o efeito de diferentes dietas no metabolismo energ?tico, n?veis de lipoperoxida??o e atividade da enzima Na+/K+ATPase de Hyalella castroi assim como sob aspectos reprodutivos. Este crust?ceo vive em ambiente l?mnico no planalto do Rio Grande do Sul, Brasil. Os animais foram coletados durante os meses de outono de 2006 em S?o Jos? dos Ausentes. Em laborat?rio, os animais foram mantidos separados por sexo em aqu?rios sob condi??es controladas e alimentados ad libitum por 21 dias com diferentes dietas, sendo estas isocal?ricas. No final do per?odo experimental, os animais foram imediatamente congelados para determina??o dos diferentes par?metros bioqu?micos. Parte dos animais foram mantidos nas mesmas condi??es j? citadas, por?m em aqu?rios que permitiam o contato entre machos e f?meas. Para an?lise de alguns par?metros reprodutivos (n?mero de pareamentos, n?mero de f?meas ov?geras e n?mero de juvenis eclodidos). A an?lise estat?stica revelou diferen?a significativa na composi??o bioqu?mica ente os sexos e as dietas ao longo do cultivo experimental. As dietas foram capazes de alterar o padr?o bioqu?mico dos animais trazidos de campo e determinaram um alto percentual de sobreviv?ncia ao longo do per?odo de cultivo; contudo, n?o foram adequadas para permitirem o pleno sucesso reprodutivo principalmente em rela??o ao n?mero de f?meas ov?geras, a fertilidade e a qualidade dos ovos. Al?m disso, ambos os sexos mostraram respostas metab?licas e reprodutivas melhores quando alimentados com a dieta 1, a qual possui maior teor de carboidratos (43.19g/100g) e menor de prote?nas (30.88g/100g)

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 392208.pdf: 680503 bytes, checksum: f878615d3cb5271fa0bad4f5e273c6b6 (MD5) Previous issue date: 2006-10-17 / A disfun??o de m?ltplos ?rg?os e a Insufici?ncia renal aguda compartilham muitos dos fatores fisiopatol?gicos envolvidos na sua instala??o. Estudos recentes correlacionam a heran?a gen?tica com a suscetibilidade ? disfun??o de org?os entre pacientes criticamente doentes. Muitos consideram que o gene da ECA poderia ser um potencial candidato a fator de risco genetico em pacientes de UTI. Em nosso estudo, examinamos os efeitos dos polimorfismos I/D e -262A>T do gene da ECA na fun??o renal em pacientes criticamente doentes de uma UTI do sul do Brasil. Um escore de disfun??o multiorg?nico mundialmente reconhecido, o SOFA (avalia??o seq?encial da disfun??o do ?rg?o), foi empregado para determinar o estado basal da sa?de no primeiro dia de admiss?o ? UTI. Considerando o escore SOFA da admiss?o e a tend?ncia da fun??o renal (atrav?s do escore di?rio do SOFA renal, determinado pela medida di?ria da creatinina s?rica e da diurese), n?s consideramos a hip?tese de que os polimorfismos I/D e -262A>T do gene ECA poderiam influenciar na tend?ncia da fun??o renal em pacientes de ICU. Um total de 153 pacientes adultos, criticamente doentes (79 homens e 77 mulheres), foi inclu?do neste estudo. N?s monitoramos os pacientes diariamente durante sua perman?ncia na UTI e hospitalar (per?odo m?ximo de observa??o de 224 dias). Foi observada a progress?o ? disfun??o renal (valores 3 e 4 de escores SOFA) nos primeiros sete dias da interna??o em UTI e a necessidade de di?lise durante este per?odo. As freq??ncias genot?picas totais em nossa amostra foram II=0.17; ID=0.46; DD=0.37 e AA=0.30; AT=0.55; TT=0.15, e as freq??ncias al?lica foram I=0.40; D=0.60 e A=0.56; T=0.44. Este ? o primeiro estudo delineado para verificar a influ?ncia de polimorfismos I/D e -262A>T do gene ECA na disfun??o renal aguda entre pacientes de UTI. Nenhuma associa??o significativa foi encontrada entre a evolu??o da fun??o renal durante a primeira semana de interna??o na UTI e os gen?tipos ou freq??ncias al?licas dos polimomrfismos em quest?o. Os polimorfismos I/D e -262A>T n?o apresentaram nenhum impacto significativo na tend?ncia da fun??o renal durante a primeira semana de interna??o na UTI, igualmente, n?o houve influ?ncia da heran?a gen?tica sobre a mortalidade nos pacientes criticamente doentes estudados

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 389451.pdf: 5571098 bytes, checksum: 770defaacf3399bd51f2eda83ca17963 (MD5) Previous issue date: 2007-04-04 / A forma?ao dos complexos protefna DNA depende da complementaridade de cargas entre as cadelas laterals dos amino?cidos que comp?ern a protelna e os nudeotIdeos que compOern a cadeia de DNA (reconhecimento direto) e do reconhecirnento da estrutura, da conforma?ao tridimensional, adotada ou capaz de ser adotada pela cadeia de DNA (reconhecimento indireto). A prote?na PDEF est? relacionada com o controle da transcri??o de genes respons?veis pelo desenvolvimento de tumores em tecidos sujeitos ? regula??o por horm?nios sexuais; principalmente c?ncer de mama e de pr?stata. Assim como as demais prote?nas da fam?lia ETS de fatores de transcri??o, a PDEF reconhece e se liga ? cadeia de DNA atrav?s do dom?nio ETS, que caracteriza esta fam?lia. As prote?nas ETS apresentam maior depend?ncia dos fatores de reconhecimento indiretos na forma??o dos complexos prote?na - DNA. Ou seja, a conforma??o adotada pela cadeia de DNA tem maior influ?ncia sobre a afinidade de liga??o da prote?na do que a pr?pria seq??ncia de nucleot?deos. Ao contr?rio das demais prote?nas ETS, que reconhecem com alta afinidade a seq??ncia 5 -GGAA-3, e apresentam baixa ou nenhuma afinidade pela seq??ncia 5 -GGAT-3, a prote?na PDEF apresenta alta afinidade de liga??o pela seq??ncia 5 -GGAT-3 e n?o forma complexos com cadeias de DNA que contenham o s?tio de liga??o 5 -GGAA-3. A PDEF apresenta ainda substitui??es ?nicas de amino?cidos na h?lice de reconhecimento da cadeia de DNA.Para avaliar os efeitos destas substitui??es de amino?cidos e das substitui??es de pares de base no s?tio de liga??o da prote?na na conforma??o tridimensional da cadeia de DNA, e consequentemente, na afinidade de liga??o entre prote?na e DNA, foram realizadas an?lises das seq??ncias de amino?cidos das prote?nas ETS e das intera??es observadas experimentalmente na interface prote?na-DNA e simula??es pela din?mica molecular dos tridec?meros de DNA que cont?m as seq??ncias de alta e de baixa afinidade pela prote?na PDEF (GGAT e GGAG, respectivamente) e do sistema controle sem afinidade de liga??o, GGAA. Os resultados das an?lises e das simula??es pela din?mica molecular indicam que as altera??es na seq??ncia de amino?cidos da prote?na, e a substitui??o dos grupamentos expostos no sulco maior da cadeia de DNA (padr?o de reconhecimento direto, ou intermolecular), aliados a altera??es na conforma??o da cadeia de DNA induzidas pelas substitui??es das bases na posi??o +4 do sitio de liga??o (padr?o de reconhecimento indireto ou intramolecular) parecem ser respons?veis pelo padr?o de afinidade distinto da PDEF. No entanto, a n?o conserva??o dos res?duos que interagem com a cadeia de DNA, e a grande n?mero de contatos n?o espec?ficos com a cadeia fosfato-a??car corroboram o padr?o de leitura intramolecular como o principal mecanismo de reconhecimento da cadeia de DNA pelas prote?nas ETS.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 394311.pdf: 1832578 bytes, checksum: 91146fdf9a4b7bd5db10cdc2e07c965f (MD5) Previous issue date: 2007-06-28 / As estrias representam um problema muito comum e desagrad?vel na maioria das mulheres saud?veis. Essa les?o d?rmica ? freq?entemente encontrada em regi?es que sofrem estiramento excessivo e progressivo da pele como coxas, gl?teos e seios. As estrias s?o classificadas inicialmente como estrias rubras e posteriormente como estrias albas. O tratamento das estrias inclui muitas modalidades, por?m os resultados t?m sido frustrantes para estrias albas. O presente estudo descreve o uso da galvanopuntura como uma alternativa para o tratamento da estria alba. Este m?todo provoca uma inflama??o local, que estimula a prolifera??o celular e a s?ntese de col?geno. Inflama??es locais podem ser acompanhadas de uma resposta sist?mica. Sabe-se que h? uma rela??o significativa entre a inflama??o, estresse oxidativo e o perfil lip?dico. Por isso, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos inflamat?rios sist?micos da galvanopuntura no tratamento da estria alba; e examinar se o m?todo aumenta o estresse oxidativo ou altera o perfil lip?dico. Trinta e duas mulheres, entre 20 e 30 anos, com estrias albas em gl?teos foram selecionadas para o estudo. Todas as pacientes receberam o tratamento uma vez por semana durante dez semanas. Foram analisadas as concentra??es plasm?ticas de PCR, TNF-α, NO, TBARS, LDL-C oxidada, HDL-C, colesterol total, CAT e ?cido ?rico. As an?lises bioqu?micas das amostras de sangue mostraram que a galvanopuntura n?o induz nenhum processo inflamat?rio sist?mico, diminui consideravelmente o estresse oxidativo e melhora o perfil lip?dico. A galvanopuntura parece ser uma t?cnica promissora no tratamento de estrias albas

Submitted by Ricardo Cedraz Duque Moliterno (ricardo.moliterno@uefs.br) on 2015-08-08T00:17:42Z No. of bitstreams: 1 Disserta??oFinal.CORRIGIDA.Regina.pdf: 7075716 bytes, checksum: 23fbdf64abf1f7854256e33234630f36 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-08-08T00:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Disserta??oFinal.CORRIGIDA.Regina.pdf: 7075716 bytes, checksum: 23fbdf64abf1f7854256e33234630f36 (MD5) Previous issue date: 2013-07-31 / Communities living around the areas of access to natural resources hold important information about the use and potential of useful plants available, as well as the skills and techniques adopted for collection. However, overpumping of plants can modify their population structure and change the dynamics of the individual in the long term. Thus, this study collected data on knowledge, use and collection techniques of candomb? (Vellozia sincorana L.B.Sm. & Ayensu), an endemic plant of the rocky fields of Chapada Diamantina, Bahia, Brazil, used by locals as fuel to start burning in wood stoves, and evaluate their population structure in collection areas suggested by local collectors, whose populations are under varying degrees of accessibility. The study was outlined to answer the following questions: a) To what purpose the residents of local communities in the Chapada Diamantina use candomb?? b) The uses listed vary by occupation and gender of the informants? c) What are the most used categories of use in communities? d) What are the main sites for the extraction of the species? e) What are the techniques used to cut and plant selection? f) There are differences in the densities, heights and diameters of the individual populations of V. sincorana two operating environments? We interviewed 37 key informants in six rural communities in the Chapada Diamantina. The usage category "Fuel" was the most reported with 55 citations, followed by trade (12) technology (10) ritual (2). Both men (G = 14.1272, p <0.01), compared to women, as the ex-miners (G = 32.643, p <0.001) compared to other occupations seem significantly better understand the utility of the species indicating that probably the difficult access to candomb?, associated with its location in the vicinity of the old mining areas benefited men to better knowledge of candomb?. We sampled 814 individuals of V. sincorana the six populations studied. Environments more distant tracks presented density (ind.m?) is significantly higher compared to the environments closest track, indicating that the environments more accessible to the resource are more disturbed, but now seem to be being replaced by more distant areas, which can be found higher plant density and individuals with characteristics preferred by collectors. It can be inferred that currently candomb? has no economic importance, but has great cultural significance for human populations in rural communities of the Chapada Diamantina, which hold techniques and skills for collecting the resource that are relevant to subsidize actions management and conservation of V. sincorana, since this species populations showed changes in structure between different access environments the species. / Comunidades que vivem nos arredores de ?reas de acesso a recursos naturais det?m informa??es importantes sobre o uso e potencial de plantas ?teis dispon?-veis, assim como as t?cnicas e habilidades adotadas para coleta. No entanto, a extra??o exagerada de plantas pode modificar a sua estrutura populacional e alte-rar a din?mica do indiv?duo em longo prazo. Desta forma, o presente estudo le-vantou informa??es sobre conhecimento, uso e t?cnicas de coleta do candomb? (Vellozia sincorana L.B.Sm. & Ayensu), planta end?mica dos campos rupestres da Chapada Diamantina, Bahia, Brasil, utilizada por moradores locais como combus-t?vel para iniciar queima em fog?es a lenha, al?m de avaliar a sua estrutura po-pulacional em ?reas de coleta sugeridas por coletores locais, cujas popula??es est?o sob diferentes graus de acessibilidade. O estudo foi esquematizado para responder as seguintes perguntas: a) Para qual finalidade os moradores de co-munidades locais da Chapada Diamantina utilizam o candomb?? b) Os usos indi-cados variam de acordo com a ocupa??o e g?nero dos informantes? c) Quais s?o as categorias de uso mais utilizadas nas comunidades? d) Quais s?o os principais locais para extra??o da esp?cie? e) Quais s?o as t?cnicas usadas para corte e sele??o da planta? f) H? diferen?as nas densidades, alturas e di?metros dos indi-v?duos de popula??es de V. sincorana em dois ambientes de explora??o? Entre-vistaram-se 37 informantes-chave em seis comunidades rurais da Chapada Dia-mantina. A categoria de uso ?combust?vel? foi a mais reportada com 55 cita??es, seguida de com?rcio (12), tecnol?gico (10) e Ritual (2). Tanto os homens (G=14,1272; p<0,01), em rela??o ?s mulheres, quanto os ex-garimpeiros (G=32,643; p<0,001), em rela??o ?s demais ocupa??es parecem significativamente conhecer melhor as utilidades da esp?cie, indicando que provavelmente o dif?cil acesso ao candomb?, associado ? sua localiza??o no entorno das antigas ?reas de minera??o beneficiou os homens para melhor conhecimento do candomb?. Foram amostrados 814 indiv?duos de V. sincorana nas seis popula??es estudadas. Os ambientes mais distantes das trilhas apresentaram densidade (ind.m?) significativamente maior em rela??o aos ambientes mais pr?ximos da trilha, indicando que os ambientes mais acess?veis ao recurso s?o mais perturbados, por?m atualmente parecem estar sendo substitu?dos por ?reas mais distantes, onde pode ser encontrada maior densidade de plantas e indiv?duos com caracter?sticas preferidas por coletores. Pode-se inferir que atualmente o candomb? n?o possui import?ncia econ?mica, mas tem grande import?ncia cultural para as popula??es humanas de comunidades rurais da Chapada Diamantina, que det?m t?cnicas e habilidades para coleta do recurso que s?o relevantes para subsidiar a??es de manejo e conserva??o de V. sincorana, uma vez que as popula??es desta esp?cie apresentaram altera??es na sua estrutura entre os diferentes ambientes de acesso a esp?cie.

Made available in DSpace on 2017-07-10T14:38:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mayara Scur.pdf: 968967 bytes, checksum: f336e15f1077c09648e11d7dea343c1d (MD5) Previous issue date: 2014-03-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The constant search for natural antimicrobial products in substitution of synthetics, has increased in recent decades, mainly due to the indiscriminate use of conventional synthetic antimicrobials, resulting in the selection of resistant micro-organisms. In addition, there is a requirement of a share of consumers who demand products that do not harm the environment. Therewith, biodegradable disinfectants, plant extracts and essential oils are highlighted in studies that aim to control pathogens. Therefore, the objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of commercial disinfectants (emphasizing biodegradable), but also evaluate plant extracts and essential oil of Psidium cattleianum regarding potential antimicrobial, antioxidant and phytochemical characterization of them. To do so, disinfectants against strains of Salmonella, isolated from poultry environment, were tested, while plant extracts and essential oil using the broth microdilution methodology against standard strains. Regarding disinfectants, organic acid, peracetic acid, glutaraldehyde and quaternary ammonium were the most effective against Salmonella serotypes in the absence of organic matter, while the organic acids showed the best performance in the presence of organic matter. As to the phytochemical study of P. cattleianum, flavonoids, terpenoids and tannins in aqueous and ethanolic were found in the aqueous plant extract, while the essential oil presented as the major compounds &#945;-copaene, eucalyptol, &#948;-cadinene and &#945;-selinene respectively. Regarding antimicrobial activity, microorganisms have proved susceptible when evaluated against aqueous and ethanolic plant extracts, also to the essential oil (although this on higher concentration), demonstrating its antimicrobial potential of P. cattleianum. For antioxidant activity, the ethanolic and aqueous extracts had significant values comparable to synthetic antioxidants, while the essential oil showed no antioxidant activity / A constante busca por produtos antimicrobianos naturais em substituição aos produtos sintéticos tem aumentado nas últimas décadas, devido a principalmente o uso indiscriminado dos antimicrobianos sintéticos convencionais, acarretando na seleção de micro-organismos resistentes. Além disso, existe uma exigência de uma parcela dos consumidores que almejam produtos que não prejudiquem o meio ambiente. Com isso, os desinfetantes biodegradáveis, extratos vegetais e óleos essenciais ganham destaque em pesquisas que visem o controle de patógenos. Para tanto, o objetivo do trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana de desinfetantes comerciais (enfatizando-se os biodegradáveis), como também avaliar extratos vegetais e óleo essencial de Psidium cattleianum quanto ao potencial antimicrobiano, antioxidante e caracterização fitoquímica dos mesmos. Para tanto, os desinfetantes foram testados frente a cepas de Salmonella isoladas do ambiente avícola, enquanto os extratos vegetais e óleo essencial utilizando-se a metodologia de microdiluição em caldo frente a cepas padrão. Quanto aos desinfetantes, os ácidos orgânicos, ácido peracético, glutaraldeído e amônia quaternária foram os mais eficazes frente aos sorotipos de Salmonella na ausência de matéria orgânica, enquanto os ácidos orgânicos apresentou o melhor desempenho na presença de matéria orgânica. Quanto ao estudo fitoquímico de P. cattleianum, foram encontradas a presença de flavonóides, terpenóides e taninos nos extratos vegetais aquoso e etanolico, enquanto o óleo essencial apresentou como compostos majoritários o &#945;-copaene, eucaliptol, &#948;-cadinene e &#945;-selinene, respectivamente. Em relação à atividade antimicrobiana, os micro-organismos se mostraram suscetíveis quando avaliados frente aos extratos vegetais aquoso e etanólico, assim como frente ao óleo essencial (embora este em maior concentração), demonstrando potencial antimicrobiano da P. cattleianum. Quanto à atividade antioxidante, os extratos etanólico e aquoso expressaram valores significativos comparáveis a antioxidantes sintéticos, enquanto o óleo essencial não apresentou atividade antioxidante