Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-03-03T12:25:50Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Roberta Campos Lino - 2011.pdf: 1432716 bytes, checksum: ea016e33d406838b8bfc9495db04d2c0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-03-04T11:10:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Roberta Campos Lino - 2011.pdf: 1432716 bytes, checksum: ea016e33d406838b8bfc9495db04d2c0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T11:10:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Roberta Campos Lino - 2011.pdf: 1432716 bytes, checksum: ea016e33d406838b8bfc9495db04d2c0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2011-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The anti-inflammatory drugs available in the market, anti-inflammatory non steroidal and steroidal, are widely used, are effective but are still far from being ideal drugs because they have several side effects (eg. gastrointestinal, renal, etc.). In this paper, two new molecules synthesized by the Laboratory of Medicinal Chemistry Pharmaceutical-UFG LQFM-015 and LQFM-002, are evaluated for their ability antiinflammatory and antinociceptive. Previous studies have shown inhibitory activity on phospholipase A2 of LQFM-015 and LQFM-002. LQFM-015 was synthesized from the metabolite 4-nerolidylcathecol, which also inhibits the enzyme phospholipase A2 (PLA2). In this study, treatment with LQFM-015 (100, 200 and 400 μmol/kg, p.o.) reduced the writhings numbers, but without alters the parameters of open field, rotarod and in the barbituric-induced sleep test. The antinociceptive action was confirmed in the second phase (inflammatory pain) on formalin-induced pain test, whereas the three doses (100, 200 and 400 μmol/kg, p.o.) reduced the time used for reactivity to pain. Treatment with LQFM-015 (100, 200 and 400 μmol/kg, p.o) also reduced edema in rat paw edema model in mice. This anti-inflammatory activity was confirmed by the decreased the cell migration (26%) and the activity of the enzyme myeloperoxidase (56%) with LQFM-015 (155 μmol/kg, p.o.) in the pleurisy model in mice. LQFM-002 is a derivative of pyrazole that in previous studies was capable of reducing PLA2 activity in vitro, reducing cell migration and the concentration of Evans blue in pleural exudate. In this study we evaluated the anti-inflammatory and/or the antinociceptive activity LQFM-002 in vivo. In the model of pain induced by acetic acid treatment (LQFM-002 200 μmol/kg, p.o.) reduced the number of writhing and pain reactivity in the test of pain induced by formalin in the first and second phase. Treatments with LQFM-002 (400 and 800 μmol/kg, p.o.) increased the pain latency in hot plate, also showed changes in the parameters of open field suggestive of an anxiolytic action. In the barbituric-induced sleep LQFM-002 800 μmol/kg, p.o., increased the sleep time is in agreement with an anxiolytic action seen in the open field, but without alters the parameters rota-rod test. Treatment with LQFM-002 reduced the concentration of TNF-α by approximately 25% when compared with vehicle group. The antiinflammatory action of this molecule may be due to reduction of TNF-α. In conclusion LQFM-015 showed anti-inflammatory action that may be related to the reduction of myeloperoxidase activity and LQFM-002 had an anti-inflammatory action possibly due decreased in the levels of TNF-α and analgesic activity involving central mechanisms. / Os medicamentos anti-inflamatórios disponíveis no mercado, não esteróidais e esteróidais, apesar de muito utilizados e eficazes ainda estão longe de serem os medicamentos ideais por possuírem vários efeitos adversos (ex. distúrbios gastrointestinais, renais etc.). No presente trabalho duas novas moléculas sintetizadas pelo Laboratório de Química Farmacêutica Medicinal-UFG, LQFM-002 e LQFM-015, foram avaliadas quanto à suas atividades anti-inflamatória e antinociceptiva. Estudos anteriores mostraram a atividade de LQFM-002 e LQFM-015 na inibição da atividade da enzima PLA2 in vitro. LQFM-015 foi sintetizada a partir do metabólito 4- nerolidilcatecol, que também inibe a enzima fosfolipase A2 (PLA2). No presente estudo o tratamento com LQFM-015 (100, 200 e 400 μmoL/kg, v.o.) reduziu as contorções abdominais, não alterou os parâmetros observados no campo aberto, não demonstrou ação relaxante e/ou perda de coordenação motora no teste de rota rod e não apresentou ação depressora no sistema nervoso central no teste de sono barbitúrico. A ação antinociceptiva foi confirmada na segunda fase (dor nflamatória) do teste de dor induzida pela formalina, visto que, as três doses (100, 200 e 400 μmoL/kg, v.o.) utilizadas reduziram o tempo de reatividade a dor. O tratamento com LQFM-015 (100,200 e 400 μmoL/kg, v.o.) também reduziu o edema no modelo de edema de pata em camundongos. Esta ação anti-inflamatória foi confirmada com a redução da migração celular (em 26 %) e da atividade da enzima mieloperoxidase (em 56 %) com LQFM-015 (155 μmoL/kg, v.o.) no modelo de pleurisia em camundongos. LQFM-002 é um derivado pirazólico que em estudos anteriores foi capaz de reduzir a atividade da PLA2 in vitro, reduzir a migração celular e a concentração de azul de Evans em exsudato pleural. Neste trabalho avaliou-se a atividade anti-inflamatória e/ou antinociceptiva de LQFM-002 in vivo. No modelo de dor induzido por ácido acético, o tratamento com LQFM-002 (200 μmoL/kg, v.o) foi capaz de reduzir o número de contorções abdominais e o tempo de reatividade à dor no teste de dor induzido pela formalina na primeira e na segunda fase. Os tratamentos com LQFM-002 (400 e 800 μmoL/kg, v.o.) aumentaram o tempo de latência à dor na placa quente, e mostraram alterações nos parâmetros do campo aberto sugestivo de uma ação ansiolítica. No teste de sono induzido por pentobarbital, o tratamento com LQFM-002 800 μmoL/kg, v.o potencializou o tempo de sono induzido por pentobarbital, aumentou a movimentação do animal no campo aberto e no rota Rota-rod não houve alterações sugestivas de ação relaxante muscular e/ ou perda de coordenação motora. O tratamento com LQFM-002 foi capaz de reduzir a concentração de TNF-α em aproximadamente 25 %, quando comparado ao grupo tratado com veículo. A ação anti-inflamatória desta molécula pode ser devida a redução de TNF-α. Em conclusão, LQFM-015 apresentou uma ação anti-inflamatória que pode estar relacionada com a redução da atividade da mieloperoxidase e LQFM-002 teve uma ação anti-inflamatória possivelmente devido à redução dos níveis de TNF-α e atividade analgésica que envolve mecanismos centrais.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-09-29T21:12:50Z No. of bitstreams: 2 dissertação - Luciano Fabris Sgarbi - 2013.pdf: 999185 bytes, checksum: 50cfabc28ef2f2a980b8eca008bff6c0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-09-29T21:13:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 dissertação - Luciano Fabris Sgarbi - 2013.pdf: 999185 bytes, checksum: 50cfabc28ef2f2a980b8eca008bff6c0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-29T21:13:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 dissertação - Luciano Fabris Sgarbi - 2013.pdf: 999185 bytes, checksum: 50cfabc28ef2f2a980b8eca008bff6c0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-05-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / (Sem resumo em outra língua) / Entender processos que causam a variação na distribuição dos táxons, observada na natureza, é um dos principais objetivos da ecologia. Neste sentido, processos baseados na tolerância dos táxons á fatores bióticos e abióticos ou processos baseados na diferença de habilidade de dispersão entre táxons são explicações para estes padrões. No entanto, o efeito destes processos podem mudar em função da escala de estudo. Esta mudança ocorre pois de modo geral o efeito de processos relacionados a habilidade de dispersão aumentam com o aumento da escala espacial, enquanto o efeito de processos relacionados a variáveis bióticas e abióticas apresenta efeito contrário, sendo mais importantes em escalas locais. Neste sentido, avaliei como atributos relacionados á dispersão e a abundância média dos táxons de insetos aquáticos afetam a proporção de locais ocupados em várias escalas espaciais (de 2.500 a 1.000.000 km²). Também avaliei grupos de variáveis físicas e grupos de variáveis químicas influenciam na variação na abundância de gêneros que compõem comunidades de insetos aquáticos. Avaliei estes dois objetivos com dados de composição de insetos aquáticos das ordens Ephemeroptera, Plecoptera e Trichoptera. De modo geral, a abundância e a ocorrência no deriva influenciaram positivamente a proporção de locais ocupados para todas as ordens estudadas, e o efeito destes atributos apresentaram relação positiva com o aumento da escala. Os demais atributos diretamente relacionados à dispersão tiveram efeitos variáveis entre as ordens e de modo geral, apenas a proporção de locais ocupados pelos gêneros de Trichoptera foi influenciada pelos atributos de dispersão. Ao nível de comunidades, as variáveis ambientais não foram importantes para explicar a variação na abundância dos gêneros nas escalas estudadas e ao mesmo tempo, a ausência de efeito se manteve constante ao longo de todas as escalas estudadas.

Submitted by Jorge Silva (jorgelmsilva@ufrrj.br) on 2016-10-18T18:36:37Z No. of bitstreams: 1 2015 - Ivan Pierozzi Junior.pdf: 92591526 bytes, checksum: b6f151111ef71de5cd89f7d46f910fff (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-18T18:36:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015 - Ivan Pierozzi Junior.pdf: 92591526 bytes, checksum: b6f151111ef71de5cd89f7d46f910fff (MD5) Previous issue date: 2015-11-27 / CAPES / Rhodolith bed has aroused growing interest of the scientific community, not being different to the Fernando de Noronha Archipelago (FNA). FNA rhodolith banks occur at depths of 10 to 100m and are peculiar habitat that increases structural complexity, providing increased associated diversity compared to unconsolidated substrates. The interaction between rhodoliths and sponges is the focus of this study. On the banks of AFN sponges play an important role in the stabilization mechanism of rhodoliths, accounting for coalescing neighbour nodules, which may point to an early stage of an on going process of stabilization in the form of a consolidated reef. The presence of reef-building corals in the adjacent rocky shore can also be related to the rhodolith banks as polyp?s skeletons were found nucleating rhodoliths. This study identified which organisms were agglutinating rhodolith nodules at Cabe?o da Sapata (45m deep) and if is there any relationship between physical characteristics of the bank and the occurrence of agglutinated complex. It was also described the physical structure and the frequency of occurrence of agglutinated rhodolith. Sponges was the main group of sessile fauna found coalescing rhodoliths and this process points to a relationship between size of the nodules and the variation in size between the nodes. The importance of sponges to the rhodoliths beds and potentially to the process of consolidated reefs formation is reinforced by this study. / Os bancos de rodolitos tem despertado interesse cada vez maior da comunidade cient?fica, n?o sendo diferente para o Arquip?lago de Fernando de Noronha (AFN). No AFN os bancos de rodolitos ocorrem em profundidades de 10 a 100m e s?o habitat peculiares que aumentam a complexidade estrutural, propiciando um aumento da diversidade associada quando comparados com substratos n?o consolidados. A intera??o entre os rodolitos e por?feros ? o foco desse estudo. Nos bancos do AFN as esponjas desempenham um importante papel no mecanismo de estabiliza??o dos rodolitos, sendo respons?veis por aglutinar n?dulos pr?ximos, o que pode apontar para um estagio inicial de um processo permanente de estabiliza??o, na forma de um recife consolidado. A presen?a de recifes coral?neos no cost?o rochoso adjacente tamb?m podem ter rela??o com os bancos de rodolitos j? que esqueletos de p?lipos foram encontrados nucleando rodolitos. Neste estudo foram identificados quais organismos foram respons?veis pela aglutina??o de n?dulos do banco de rodolitos do Cabe?o da Sapata (45m de profundidade) e se existe rela??o entre caracter?sticas f?sicas do banco e a ocorr?ncia de aglutinados. Tamb?m foi descrita a estrutura f?sica e a frequ?ncia de ocorr?ncia de aglutinados de rodolitos. Por?fero foi o principal grupo da fauna s?ssil encontrado aglutinando rodolitos e esse processo aponta para uma rela??o entre tamanho dos n?dulos e a varia??o de tamanho entre os n?dulos. A import?ncia das esponjas nos bancos de rodolitos, e potencialmente no processo de forma??o de recifes consolidados, ? refor?ada pelo presente estudo,

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-10-24T15:48:35Z No. of bitstreams: 1 DIS_CALINO_FERREIRA_PACHECO_NETO_COMPLETO.pdf: 463906 bytes, checksum: b8097cd7556014c152e145a0681d517a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-24T15:48:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_CALINO_FERREIRA_PACHECO_NETO_COMPLETO.pdf: 463906 bytes, checksum: b8097cd7556014c152e145a0681d517a (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Rhizoctonia solani is a pathogenic ubiquitous fungus in Solanum tuberosum cultures, causing severe losses in production. Plant resistance can be induced by molecules that promote natural plant defense system. In the present study, the efficiency of the inducers Acibenzolar-Smethyl (BION?), Ceratocystis fimbriata extract and Xanthomonas axonopodis extract against the pathogenic fungus Rhizoctonia solani in potato plants was evaluated. Plants treated with the inducer XTH were resistant to the pathogen at 21 dpi. The biotic inducer XTH was more efficient than Bion? and CTS on promoting plant resistance. The highest activity of POX was observed at 9 dpi on the XTH treatment. Inoculation of R. solani caused a progressive increase in the PPO activity in XTH- and control-plants. Both inducers CTS and Bion? caused a reduction on PPO activity over time. Levels of phenolics compounds and flavonoids were similar among all treatments. Plants were more susceptible to R. solani when induced with CTS or Bion?. XTH did not show a negative effect on plant resistance. XTH presented a good potential as inducer, delaying disease progression and promoting plant resistance against R. solani. / Apesar da batata ser um dos alimentos mais consumidos do mundo, a sua produ??o apresenta s?rias dificuldades devido a doen?as causadas por fungos, bact?rias e v?rus, reduzindo a produtividade e aumentando os custos de produ??o. Assim, este trabalho teve por objetivo analisar os mecanismos envolvidos na defesa cruzada de Solanum tuberosum cv. ?gata, atrav?s a a??o de indutores bi?ticos no metabolismo de fenilpropan?ides. Plantas jovens de S. tuberosum mantidas em casa de vegeta??o foram aspergidas com indutores de defesa: extratos autoclavados de Xanthomonas axonopodis e de Ceratocystis fimbriata, al?m do indutor sint?tico Bion?. Ap?s cinco dias do tratamento, as plantas foram desafiadas com o fungo patog?nico Rhizoctonia solani, sendo analisados o progresso da doen?a e os par?metros bioqu?micos: compostos fen?licos totais, flavon?ides quercet?nicos e atividade das enzimas polifenoloxidase e peroxidases. As plantas tratadas com o indutor XTH foram resistentes ao pat?geno at? 21 dpi. O indutor bi?tico XTH foi mais eficiente que o Bion? e CTS na promo??o da resist?ncia vegetal. A atividade mais elevada da POX foi observada em 9 dpi com o tratamento XTH. A inocula??o de R. solani causou o aumento progressivo da atividade da PPO nas plantas dos tratamentos XTH e controle. Os indutores CTS e Bion? causaram a diminui??o da atividade de PPO ao longo do experimento. Os n?veis dos compostos fen?licos e dos flavonoides foram similares entre todos os tratamentos. As plantas foram mais suscet?veis ao pat?geno R. solani quando aspergidas previamente com CTS ou Bion?. O XTH apresenta um bom potencial de utiliza??o como indutor de resist?ncia, retardando o progresso da doen?a e promovendo a resist?ncia contra R. solani.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-12-06T16:15:51Z No. of bitstreams: 1 DIS_BRUNO_SILVEIRA_ADAMI_COMPLETO.pdf: 3612629 bytes, checksum: 63b867a36eb597783caf8d145a728bfe (MD5) / Made available in DSpace on 2016-12-06T16:15:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_BRUNO_SILVEIRA_ADAMI_COMPLETO.pdf: 3612629 bytes, checksum: 63b867a36eb597783caf8d145a728bfe (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / The number on the citations of resveratrol has been increased over the last decade. This increase is directly related to the versatility of compound, commonly known by the benefits of wine. Contiguous to resveratrol, another growing issue in the scientific community is the microbiota and its possible modulation by compounds with prebiotic action. It is well know that resveratrol does not have a consolidated mechanism of action, and large amounts of the compound are retained in the gastrointestinal tract, we analyze the influence of resveratrol ingestion and their metabolite in populations of specific bacteria. For the induction of intestinal dysbiosis, we used experimental model of type 1 diabetes in rats. The treatment with resveratrol was performed during thirty days with daily doses of 5, 10 and 20 mg.kg-1. The quantification of the metabolite and resveratrol was accomplished through UPLC-MS/MS (Ultra-Performance Liquid Chromatography-Electrospray Tandem Mass Spectrometry). Quantification of A. muciniphila, Bacteroidetes and Prevotella was carried out by qPCR (Polymerase Chain Reaction). The study demonstrated increased population of A. muciniphila, Bacteroidetes and Prevotella in both normal and diabetic rats trated with resveratrol. This increase presented nonlinear response. The metabolite production was dose-dependent, however, a significant increase was observed in healthy animals compared to diabetic rats. We also observed significantIt is also observed correlation between different bacteria and resveratrol metabolite in healthy and diabetic animals. In conclusion, our study show that treatment with resveratrol promote changes in the microbiota. Data also reveled an increase in bacterial populations very important for intestinal health, such as: A. muciniphila, Bacteroidetes in healthy and diabetic Wistar rats in nonlinear manner. / Os estudos sobre resveratrol t?m aumentado de forma not?vel nos ?ltimos anos. Este aumento est? diretamente relacionado com a versatilidade do composto, popularmente conhecido em decorr?ncia aos benef?cios do vinho. Contiguo ao resveratrol, outro assunto crescente na comunidade cient?fica ? a microbiota e sua poss?vel modula??o atrav?s de compostos com a??o prebi?tica. Sabendo-se que o resveratrol ainda n?o tem um mecanismo de a??o consolidado e, que grande quantidade do composto fica retida no trato gastrointestinal. O presente trabalho avaliou a influ?ncia da ingest?o de resveratrol e, seu metab?lito, dihidroresveratrol, em popula??es bact?rianas especificas. Para a indu??o da disbiose intestinal, foi utilizado um modelo experimental de diabetes tipo 1 em ratos. O tratamento com resveratrol foi realizado durante trinta dias, com doses di?rias de 5, 10 e 20 mg.kg-1. A quantifica??o dos metab?litos de resveratrol foi realizada atrav?s de UPLC-MS / MS (Ultra-Performance Liquid Chromatography-lectrospray Tandem Mass Spectrometry). A quantifica??o da A. muciniphila, Bacteroidetes e Prevotella ocorreu atrav?s de qPCR (Reaction Polimerase Chain). O estudo demonstrou aumento na popula??o de A. muciniphila, Bacteroidetes e Prevotella tanto em ratos normais, quanto em animais diab?ticos trados com resveratrol. Este aumento demonstrou uma resposta n?o linear. O metab?lito apresentou uma produ??o dependente da dose, no entanto, foi observado um aumento significativo nos animais saud?veis em rela??o aos ratos diab?ticos. Observaram-se tamb?m diferentes correla??es entre as Bact?rias e o metabolito do resveratrol em animais saud?veis e diab?ticos. Em suma, o presente estudo demonstra que o tratamento com resveratrol promove altera??es na microbiota. Foi observado aumento de popula??es bacterianas importantes para a sa?de intestinal, como: A. muciniphila, Bacteroidetes, em ratos Wistar saud?veis e diab?ticos, de maneira n?o linear.

Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2017-03-07T18:02:42Z No. of bitstreams: 1 DIS_NAYARA_MARIA_BERNHARDT_LEVIN_COMPLETO.pdf: 2253906 bytes, checksum: 347d5947bf640845e7934a922c486c79 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-07T18:02:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_NAYARA_MARIA_BERNHARDT_LEVIN_COMPLETO.pdf: 2253906 bytes, checksum: 347d5947bf640845e7934a922c486c79 (MD5) Previous issue date: 2016-12-16 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Cyclin-dependent kinases (CDKs) comprise an interesting biological system for development of docking protocols and scoring functions, due to the abundance of complexed structures for which binding affinity data is available. Here, we report application of an integrated computational approach to carry out docking against a data set composed of 176 structures of CDK in complex with inhibitors. To our knowledge, this is the largest data set of CDK crystallographic structures submitted to molecular docking simulation. Our results indicate that the proposed strategy for docking against CDKs generates poses with docking root-mean square deviation below 2.0 ? for most of the structures in the data set. In addition, we describe the development of scoring functions tailored to CDKs. Statistical analysis of pre-docking and re-docking results, using the proposed scoring functions for CDKs, indicates that these functions are able to predict affinity with better performance when compared with previously reported benchmarks for CDKs. / Quinases dependentes de ciclina (CDKs) s?o sistemas biol?gicos de interesse para o desenvolvimento de protocolos de docking e fun??es escore, devido ? abund?ncia de estruturas cristalogr?ficas complexadas para as quais h? disponibilidade de dados de afinidade de liga??o. Neste trabalho relatamos a aplica??o de uma abordagem computacional integrada para realizar o docking molecular em um conjunto de dados composto por 176 estruturas cristalogr?ficas de CDK em complexo com inibidores. De nosso conhecimento, este ? o maior conjunto de dados de estruturas cristalogr?ficas de CDKs utilizado para simula??o de docking molecular. Nossos resultados indicam que a estrat?gia proposta para docking de CDKs gera poses com desvio m?dio quadr?tico abaixo de 2,0 ? para a maioria das estruturas do conjunto de dados. Al?m disso, descrevemos o desenvolvimento das fun??es escore adaptados ?s CDKs. A an?lise estat?stica dos resultados de pr?-docking e re-docking, empregando as fun??es escore propostas para CDKs, indica que estas fun??es s?o capazes de prever afinidade com o melhor desempenho quando comparado com as fun??es previamente relatadas para CDKs.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449081.pdf: 619736 bytes, checksum: f49f3ff20314e610e563f984cfead299 (MD5) Previous issue date: 2013-04-30 / Salmonella Enteritidis is the most prevalent serotype isolated in Brazil, mainly associated with poultry products, which have been primarily involved in foodborne disease outbreaks. The high prevalence of reduced susceptibility to antimicrobial agents in various Salmonella serotypes isolated from samples related to livestock animal, animal foods and human has been reported worldwide. Therefore, has increased the interest in investigating the genetic mechanisms involved in resistance to antimicrobial agents, especially genetic elements capable of carrying resistance genes cassettes, which could be the origin of multi-resistant strains. Besides the genetically determined antimicrobial resistance, bacteria can also exhibit resistance by the ability to form biofilm, which protects bacteria from environmental stresses, favoring the colonization and persistence of these microorganisms in the environment. Thus, the aim of this study was to determine the antimicrobial susceptibility of S. Enteritidis strains and investigate the genes involved in the main resistance determined, as well as evaluate the ability of these strains in to produce biofilm. Forty-seven S. Enteritidis strains isolated from human, poultry, swine, and food were analyzed. Sixteen isolates (34%) were phenotypically resistant to at least one antibiotic tested. Of these, four isolates harbored class 1 integron. All strains resistant to sulfonamide had concomitantly genes sul1 and sul2. The genes strA, strB, aadA and aadB were identified in the majority of the aminoglycosides resistant isolates, whereas 92.9% showed strA, 71.4% strB, 7.1% aadA and 50% aadB. The tetB gene was detected in two of the three strains resistant to tetracycline, and tetC in one. In the three strains resistant to ampicillin the blaTEM gene was detected. Overall, among the 47 S. Enteritidis tested, 89.4% strains were able to form biofilm on polystyrene plates. Among these, 42.4% were considered weak biofilm producers, 14.9% moderate producers and 34% strong producers. It has been demonstrated that the majority of the S. Enteritidis strains that showed resistance to at least one antimicrobial agent were able to form biofilm, which increases concerns about food contamination, especially by the possibility of persistence of bacteria resistant to antibiotics on the environment and the subsequently dissemination of these strains to human. / A Salmonella Enteritidis tem sido o sorotipo mais prevalente no Brasil, principalmente associado a produtos de origem av?cola, que t?m sido prioritariamente envolvidos em surtos de doen?as transmitidas por alimentos. A alta preval?ncia de suscetibilidade reduzida a antimicrobianos em diversos sorotipos de Salmonella isolados de amostras relacionadas a animais de produ??o, a humanos e a alimentos de origem animal vem sendo relatada no mundo inteiro. Com isto, tem aumentado o interesse em investigar os mecanismos gen?ticos envolvidos na resist?ncia a antimicrobianos, especialmente elementos gen?ticos capazes de carrear cassetes de genes de resist?ncia, o que pode constituir a origem de cepas multi-resistentes. Al?m da resist?ncia a antimicrobianos determinada geneticamente, as bact?rias tamb?m podem apresentar resist?ncia pela habilidade de formar biofilme, protegendo-as de estresses ambientais, favorecendo a coloniza??o e persist?ncia desses microrganismos no ambiente. Deste modo, o objetivo deste estudo foi determinar a suscetibilidade a antimicrobianos de cepas de S. Enteritidis e investigar os genes envolvidos nas principais resist?ncias determinadas, bem como avaliar a capacidade de forma??o de biofilme destas cepas. Para tanto, foram analisadas 47 cepas de S. Enteritidis isoladas de humanos, aves, su?nos e alimentos. Dezesseis isolados (34%) se mostraram fenotipicamente resistentes a pelo menos um antimicrobiano testado. Destes, quatro apresentaram integron de classe 1. Todas as cepas resistentes ? sulfonamida apresentaram concomitantemente os genes sul1 e sul2. Os genes strA, strB, aadA e aadB foram identificados na maioria dos isolados que apresentaram resist?ncia a aminoglicos?deos, sendo que 92,9% apresentaram o gene strA, 71,4% strB, 7,1% aadA e 50% aadB. O gene tetB foi detectado em duas das tr?s cepas resistentes ? tetraciclina e o tetC em uma. J? as tr?s cepas resistentes ? ampicilina apresentaram o gene blaTEM. No total, dentre as 47 cepas de S. Enteritidis testadas, 89,4% foram capazes de formar biofilme em placas de poliestireno. Dentre estas, 42,4% foram consideradas fracas produtoras de biofilme, 14,9% produtoras moderadas e 34% fortes produtoras. Foi demonstrado que a maioria das cepas que mostraram resist?ncia a pelo menos um antimicrobiano foram capazes de formar biofilme, o que aumenta a preocupa??o a respeito da contamina??o de alimentos, especialmente pela possibilidade de persist?ncia de microrganismos resistentes a antimicrobianos no ambiente e a subsequente dissemina??o destas cepas para humanos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 449167.pdf: 7073688 bytes, checksum: 13ee832fb2876ff096e89bb359eef9f8 (MD5) Previous issue date: 2013-03-22 / Psychosocial stress has important role in activating endocrine, immune and central nervous systems. Stress exacerbates many chronic inflammatory conditions and is an important risk factor for several mood disorders. Early exposure to stress can be even more detrimental as it may lead to alterations in stress reactivity/responsivity later in life. Several studies have shown important neuroimmune changes associated with the pathophysiology of mood disorders. Previous studies from our group and others reported a pro‐inflammatory profile and increased cellular activation in patients with bipolar disorder (BD). The objectives of the thesis are: 1) to analyze the stress effects on development using animal model of early life stress (maternal separation); 2) to analyze the neuroimmunendocrine responses to acute stress exposure (Trier Social Stress Test) in BD patients. Data presented here suggests that early life stress results in immune activation, characterized by increased pro‐inflammatory serum levels (specifically IL1‐β). As a consequence of this inflammation, a reduction of parvalbumin containing interneurons, substantial for serotonergic branches development, was also observed. Peripheral inflammation is a biological marker of neuronal damage observed, as interleukin‐10 (IL‐10, main anti‐inflammatory cytokine) central administration overturned the neuronal damages as well as peripheral inflammation per se. In the second study, patients with BD showed blunted sympathetic and neuroendocrine (cortisol) stress responses following acute stress compared to healthy controls. Basal data corroborates the presence of increased cellular activation in BD patients as observed by reduced T regulatory (Treg) cells, increased activated T cells (CD4+CD25+) as well as increased intracellular signaling through increased ERK1/2 and NF‐κB phosphorylation. Furthermore, an inability in reducing immune activation in response to stress was observed as increased percentage of activated T cells and concomitantly reduction in regulatory T cells in BD patients. Such inability in controlling immune response after stress exposure may be explained not only by reduced cortisol levels but also by reduced glucocorticoid sensitivity observed in BD patients. Given that, we conclude that BD patients have important HPA axis alterations that may lead to reduced endocrine reactivity to stress as well as inability to duly modulate immune responses. / O estresse psicossocial ? um importante mecanismo de ativa??o dos sistemas nervoso, end?crino e imune muitas vezes levando ? exacerba??o de diversas doen?as inflamat?rias cr?nicas, assim como ? um fator de risco importante para diversos transtornos de humor. A exposi??o ao estresse pode ser mais danosa quando esta ocorre cedo no desenvolvimento e pode resultar em altera??es na reatividade/responsividade ao estresse na vida adulta. Diversos estudos v?m demonstrando altera??es neuroimunoend?crinas importantes na patofisiologia dos transtornos de humor. Estudos pr?vios do nosso grupo e outros t?m observado um perfil pr?‐inflamat?rio perif?rico e uma maior ativa??o linfocit?ria em pacientes com transtorno bipolar (TB). Os objetivos da tese s?o: 1) analisar os efeitos do estresse no desenvolvimento atrav?s do protocolo de separa??o materna em modelo animal; 2) analisar par?metros neuroimunoend?crinos em resposta ao estresse em pacientes com TB tipo 1 eut?micos, utilizando‐se um protocolo de estresse laboratorial, o Trier Social Stress Test (TSST). Dados do presente trabalho demonstram que a exposi??o ao estresse na inf?ncia (em modelo animal) resulta em ativa??o imune, caracterizada por aumento nos n?veis plasm?ticos de citocinas pr?‐inflamat?rias (interleucina 1‐β) perifericamente. Uma poss?vel consequ?ncia dessa ativa??o imune ? a perda de neur?nios contendo parvalbumina, importantes para o desenvolvimento de comunica??o serotonin?rgica. A inflama??o perif?rica serviu como marcador para os danos neuronais observados, pois quando houve a administra??o de interleucina‐10 (IL‐10, principal citocina anti‐inflamat?ria) foi poss?vel reverter os danos neuronais e a inflama??o perif?rica. Neste trabalho, os pacientes com TB apresentaram respostas simp?ticas e neuroend?crinas (cortisol) muito reduzidas ap?s o estresse agudo quando comparados aos controles saud?veis. Ao n?vel basal, os pacientes com TB apresentaram uma redu??o na porcentagem de c?lulas T regulat?rias (Treg), aumento na porcentagem das c?lulas T ativadas (CD4+CD25+) e aumento na sinaliza??o celular atrav?s de uma maior fosforila??o de ERK1/2 e NF‐κB corroborando para um estado de ativa??o celular. Al?m disso, observamos uma incapacidade em reduzir a ativa??o imune em resposta ao estresse, caracterizada pelo aumento ainda maior na porcentagem de c?lulas T ativadas e concomitante redu??o nas c?lulas Treg em pacientes TB. Tal incapacidade em controlar a resposta imune ao estresse pode ser explicada n?o apenas pelos baixos n?veis de cortisol secretado, mas tamb?m a uma maior insensibilidade aos glicocorticoides no TB. Conclu?mos que os indiv?duos com TB possuem altera??es no eixo HPA que resultam em reduzida reatividade end?crina ao estresse assim como incapacidade de modular corretamente as respostas imunes.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 450693.pdf: 903446 bytes, checksum: 6805922c966dfb108b00594643df2744 (MD5) Previous issue date: 2013-03-27 / The elderly population, characterized as people over 60 years old, has grown rapidly in recent years in Brazil, and with this increase in life expectancy, age-related changes appear, for example, immunosenescence. Some studies have shown that there are differences in the immunological profile of the elderly, often related to the numbers of T cells. The immune risk profile (IRP) has been defined as CD4/CD8 T-cell ratio <1 and positivity for serum anti-cytomegalovirus (CMV) antibodies. In this study, we investigated patterns of activation and differentiation of T lymphocytes by flow cytometry in an elderly population in IRP, compared with elderly people without risk profile (non-IRP), seeking to identify additional markers for this risk profile immune. For this study we recruited 60 elderly SUS patients in Porto Alegre, aged 60 years, 30 IRP and 30 non-IRP. Lymphocytes were isolated and stimulated in vitro to evaluate the production of cytokines and the expression of transcription factors. The subpopulations of T lymphocytes found were consistent with previous studies in which IRP patients had fewer naive and central memory T cells, as well as an increase was observed in the percentage of T cells CD8 + CD28-T cells and CD8 + PD-1 + in the IRP individuals. Furthermore, there was a reduction in mean fluorescence intensity (MFI) of transcription factors to canonical subtypes of T cell help (CD4 +) in IRP patients when compared to patients without IRP. The percentages of the different subtypes (TH1, TH2, TH17; Treg) of these cells were not different between the two groups. After stimulation with anti-CD3/anti-CD28 antibodies in culture for 24 hours, the concentration of cytokines in culture supernatants increased, but no significant differences between the two groups were found, except for IL-10, which was higher in IRP patients before stimulation. These results suggested that transcriptional mechanisms important in the differentiation of helper T cells are altered in IRP patients, which may affect the immune response of these individuals. / A popula??o de idosos, caracterizada como pessoas com mais de 60 anos, vem aumentando muito nos ?ltimos anos no Brasil, e com esse aumento da expectativa de vida surgem altera??es relacionadas com a idade, por exemplo, a imunossenesc?ncia. Alguns estudos t?m demonstrado que existem diferen?as no perfil imunol?gico dos idosos, frequentemente relacionadas ao n?mero de c?lulas T. O perfil de risco imune (IRP) tem sido definido como taxa de c?lulas T CD4/CD8<1 e soro positividade para citomegalov?rus (CMV). Neste estudo, n?s investigamos padr?es de ativa??o e diferencia??o de linf?citos T, por citometria de fluxo, em uma popula??o idosa IRP, comparando com a popula??o idosa sem perfil de risco (n?o-IRP), buscando identificar marcadores adicionais para esse perfil de risco imune. Foram recrutados para esse estudo 60 idosos da rede SUS (sistema ?nico de sa?de) de Porto Alegre, com idade superior a 60 anos, sendo 30 IRP e 30 n?o-IRP. Linf?citos foram isolados e estimulados in vitro para avaliar a produ??o de citocinas e a express?o de fatores de transcri??o. As subpopula??es de linf?citos T encontradas foram condizentes com estudos anteriores em que os pacientes IRP possu?am menos c?lulas T naive e de mem?ria central, assim como foi observado um aumento nas porcentagens das c?lulas T CD8+CD28- e das c?lulas T CD8+PD-1+. Al?m disso, foi observada uma redu??o na m?dia de intensidade de fluoresc?ncia (MFI) dos fatores de transcri??o can?nicos para subtipos de c?lulas T de ajuda (CD4+) em pacientes IRP quando comparados com pacientes n?o-IRP. As porcentagens dos diferentes subtipos (TH1; TH2; TH17; Treg) dessas c?lulas n?o foram diferentes entre os dois grupos. Ap?s estimula??o com anticorpos anti-CD3/anti-CD28 em cultura por 24h, a concentra??o de citocinas no sobrenadante das culturas aumentou, mas n?o houve diferen?a significativa entre os dois grupos em rela??o ? concentra??o das citocinas em geral, exceto na IL-10 antes da estimula??o, que foi maior em pacientes IRP. Esses resultados sugerem que mecanismos transcricionais importantes para a diferencia??o de c?lulas T de ajuda est?o alterados em pacientes IRP, o que pode afetar a resposta imune desses indiv?duos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 451454.pdf: 6697842 bytes, checksum: 890c954db41088b36538c3133a7c2606 (MD5) Previous issue date: 2013-09-27 / Epilepsy, characterized by the occurrence of spontaneous and recurrent seizures, is one of the main chronic neurological diseases, affecting around 1% of the world's population. Adenosine is an endogenous modulator of neuronal excitability and has anticonvulsant properties. Thus, the modulation of adenosinergic signalling pathway may presents important effects on epilepsy. In this study we characterize different aspects of the adenosinergic signaling in a model of seizures induced by pentylenetetrazole (PTZ) in zebrafish. In this study we also analyzed the effect of different modulators of adenosinergic signaling on controlling the development of seizures. Our results showed that the activation of type A1 adenosine receptors has an important role in controlling seizures in zebrafish. Furthermore, we observed that ecto-5?-nucleotidase and ADA enzymes, in addition to nucleoside transporters, are directly involved in controlling extracellular adenosine levels and, consequently, in controlling the development of seizures in this teleost. In addition, we clarified the occurrence of controversial data related to the mTOR signaling pathway in oxidative stress. Previous studies have suggested the activation of this pathway in oxidative stress based on the misinterpretation of the phosphorylation of RSK and MSK proteins through the antibody anti-phospho-Thr389-S6K, in addition to protein S6 phosphorylation, regulated by the MAPK signaling pathway in this case. Therefore, these findings might contribute for a better understanding about the signaling pathways involved in the mechanisms of seizure control and represents na alternative for the development of antiepileptic drugs, increasing the therapeutic options in epilepsia. Our results may also contribute to future studies on the characterization and modulation of TOR signaling pathway in zebrafish. / A epilepsia, caracterizada pela ocorr?ncia de crises convulsivas espont?neas e recorrentes, ? umas das principais doen?as neurol?gicas cr?nicas, afetando em torno de 1% da popula??o mundial. A adenosina ? um modulador end?geno da excitabilidade neuronal e apresenta propriedades anticonvulsivantes. Sendo assim, a modula??o da via de sinaliza??o adenosin?rgica pode apresentar um efeito importante na epilepsia. Neste estudo, n?s caracterizamos diferentes aspectos da sinaliza??o adenosin?rgica em modelo de crise convulsiva induzida por pentilenotetrazol (PTZ) em peixe-zebra. Nossos resultados demonstram um aumento nas atividades da adenosina desaminase (ADA), respons?vel pela desamina??o de adenosina em inosina, logo ap?s uma crise convulsiva. Al?m disso, foi observado que os f?rmacos antiepil?pticos gabapentina, fenito?na e ?cido valpr?ico preveniram o efeito estimulat?rio promovido pelo PTZ sobre as atividades da adenosina desaminase. Neste estudo, tamb?m analisamos o efeito de diferentes moduladores da sinaliza??o adenosin?rgica no controle do desenvolvimento de convuls?es induzidas por PTZ. Nossos resultados demonstraram que a ativa??o de receptores de adenosina do tipo A1 tem importante participa??o no controle de crises convulsivas em peixe-zebra. Al?m disso, observamos que as enzimas ecto-5?-nucleotidase e ADA, al?m dos transportadores de nucleos?deos est?o diretamente envolvidos no controle dos n?veis extracelulares de adenosina e, consequentemente, no controle do desenvolvimento de crises convulsivas neste tele?steo. Al?m disso, esclarecemos a ocorr?ncia de dados controversos relacionados ? via de sinaliza??o mTOR em estresse oxidativo. Estudos sugeriram a ativa??o desta via em estresse oxidativo baseados na interpreta??o equivocada da fosforila??o das prote?nas RSK e MSK pelo anticorpo anti-fosfo-Thr389-S6K, al?m da fosforila??o da prote?na S6, regulada neste caso pela via de sinaliza??o MAPK. Este estudo pode contribuir para um maior entendimento das vias de sinaliza??o envolvidas nos mecanismos de controle de crises convulsivas e representar uma alternativa para o desenvolvimento de f?rmacos antiepil?pticos, aumentando as op??es terap?uticas em epilepsia. Nossos resultados tamb?m podem contribuir para futuros estudos referentes ? caracteriza??o e modula??o da via de sinaliza??o TOR em peixe-zebra.