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Estudo de glic?dios de Angiostrongylus cantonensis e o papel no imunodiagn?stico / Glycan study of the Angiostrongylus cantonensis and their role on the immunodiagnosis

Ver?ssimo, Carolina De Marco 31 August 2015 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-05-30T16:54:35Z No. of bitstreams: 1 TES_CAROLINA_DE_MARCO_VERISSIMO_COMPLETO.pdf: 3480923 bytes, checksum: c145d85afafb9cc7cd5782a17ac34cfb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-30T16:54:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_CAROLINA_DE_MARCO_VERISSIMO_COMPLETO.pdf: 3480923 bytes, checksum: c145d85afafb9cc7cd5782a17ac34cfb (MD5) Previous issue date: 2015-08-31 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico - CNPq / Angiostrongylus cantonensis is a nematode parasite, main etiologic agent of the eosinophilic meningitis (EM) in humans, a disease endemic in many tropical and sub tropical countries. The diagnosis of EM involves clinical evaluation, eosinophils counting >10% in liquor, and consuming historical of raw mollusks, as they are the intermediate hosts of the Angiostrongylus. Definitive diagnosis through larvae visualization in the liquor is rare. Serological test, mainly involving the 31-kDa component detection, which presents high sensitivity and specificity, has been employed as an alternative way for diagnostic. The 31-kDa antigen is composed for glycoproteins and tentatives in producing it in a recombinant way, using either prokaryotic or eukaryotic models, were inable to mantain immunological recognition, probably due the lack or deficient glycosilation of the molecules. Due the lack of information about A. cantonensis glycans and the need of producing a standard antigen able to be used worldwide in a diagnostic test, the main goal of this work was to study the A. cantonensis glycan profile and their role on the immune diagnosis of EM. It was used total soluble extract (TE) and excretory-secretory products (ES) as sources of glycans and glycoconjugates. The N-linked glycans and glycoconjugates from A. cantonensis female TE and 31-kDa antigen were analyzed and identified by mass spectrometry (MS) and lectin array, and the immunogenecity of these molecules were characterized by dot blot and Western blots. Furthermore, It was investigated the biosynthesis routes of glycans using in silico analysis of the Angiostrongylus genome and transcriptome dataset. N-glycans containing complex structures, with truncated antennas containing terminal with galactose and N-acetylgalactosamine, and core ?1-6 fucosylated were identified. Lectin array analysis could also dentify Gal and GalNAc structures in Angiostrongylus glycoconjugates. Eight genes involved with biosynthesis of N-glycans, among them GCS1; GANAB, MAN1, MGAT2 and FUT8; and three involved with O-glycan biosynthesis, GALNT, C1GALT1 e OFUT1 were found by in silico analysis. Immunogenicity of the 31-kDa antigen is tottaly dependent of N-glycans and not to O-glycans. Modeling of proteins of the 31kDa component showed N-glycosilation sites and predicted structures that were the same identified by MS analysis. Taking together, the data generated in this study shown the glycan importance for angiostrongyliasis diagnosis and also the glycan repertoire that Angiostrongylus produces. This work is an important contribution to the development of a standard diagnosis for EM and also for new perspectives in the study of angiostrongyliasis diagnosis, parasite biology and host-parasite relationship. / Angiostrongylus cantonensis ? um nemat?deo parasita, principal agente etiol?gico da meningite eosinof?lica (ME) em humanos, doen?a end?mica em diversos pa?ses tropicais e subtropicais. A ME se caracteriza pela eosinofilia >10% no l?quor, e hist?rico de ingest?o de moluscos crus, j? que estes s?o hospedeiros intermedi?rios do Angiostrongylus. O diagn?stico definitivo ? raramente poss?vel atrav?s da visualiza??o da larva no liquor. Testes sorol?gicos envolvendo principalmente a detec??o do componente de 31-kDa, que apresenta alta sensibilidade e especificidade, tem sido empregados como uma alternativa diagn?stica. O ant?geno de 31-kDa ? composto por glicoprote?nas e tentativas em produzi-lo de maneira recombinante, em modelos procari?ticos ou eucari?ticos, n?o tiveram sucesso em manter o reconhecimento imunol?gico, provavelmente pela incorreta ou insuficiente glicosila??o das mol?culas. Devido ? falta de informa??o sobre glic?dios de A. cantonensis e a necessidade de produzir um ant?geno padr?o capaz de ser usado em um teste de diagn?stico para distribui??o mundial, o objetivo principal deste trabalho foi estudar o perfil glic?dico de A. cantonensis e o papel dessas mol?culas no imunodiagn?stico da ME. Foram utilizados extratos sol?veis totais (ET) de vermes adultos machos e f?meas e produtos de excre??o e secre??o (ES) como fontes dos glic?dios e glicoconjugados estudados. Os N-glic?dios e glicoconjugados do ET de verme f?mea de A. cantonensis e o ant?geno de 31-kDa foram analisados e identificados por espectrometria de massa (EM) e lectina array, e a import?ncia imunog?nica destas mol?culas foi caracterizada por tratamento com glicosidases aliado a dot blot ou Western blot. Al?m disso, foi investigada a presen?a de enzimas envolvidas na s?ntese de diferentes glic?dios a partir de an?lises in silico do genoma e transcriptoma do Angiostrongylus. Diversos N-glic?dios foram identificados nas amostras analisadas. Estes continham estruturas complexas, com antenas truncadas contendo galactose e N-acetilgalactosamina em posi??es terminais e n?cleo ?1-6 fucosilado. As mesmas estruturas terminais foram identificadas pela an?lise de Lectin Array. Em rela??o a an?lise in s?lico da bioss?ntese de glic?dios em Angiostrongylus, foram identificados oito genes envolvidos na s?ntese de N-glic?dios, entre eles GCS1; GANAB, MAN1, MGAT2 e FUT8; e pelo menos tr?s genes envolvidos na s?ntese de O-glic?dios, GALNT, C1GALT1 e OFUT1. Os N-glic?dios se mostraram essenciais para a imunogenicidade do ant?geno de 31-kDa quando soros positivos para A. cantonensis foram testados. Uma modelagem in silico dos componentes de 31-kDa, demonstrou s?tios de glicosila??o para N-glic?dios, e previu as mesmas estruturas que foram identificadas por EM. Em conjunto, os dados gerados neste estudo mostraram a import?ncia de glic?dios para o diagn?stico de angiostrongil?ases e tamb?m o repert?rio de glic?dios que este parasito pode produzir. Este trabalho ? uma contribui??o importante para o desenvolvimento de um diagn?stico padr?o para a ME e tamb?m para novas perspectivas no estudo do diagn?stico de angiostrongil?ases, biologia do parasito e rela??o parasito-hospedeiro.
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Papel imunorregulador da Hsp70 de Mycobacterium tuberculosis, murina e humana

Lopes, Rafael Lisboa 16 March 2016 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-08-03T18:08:58Z No. of bitstreams: 1 DIS_RAFAEL_LISBOA_LOPES_COMPLETO.pdf: 9085477 bytes, checksum: b4223f63e2f669559a5830cd87644a78 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T18:08:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_RAFAEL_LISBOA_LOPES_COMPLETO.pdf: 9085477 bytes, checksum: b4223f63e2f669559a5830cd87644a78 (MD5) Previous issue date: 2016-03-16 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Hsp70 (Heat shock protein 70 kDa) is a chaperone protein which has intra- and extracellular functions. In the early studies, only intracellular functions were operated, as to aid in folding, prevent aggregation and protein refolding. In 80?s a study has shown that this protein can be exported into the extracellular environment exerting effects on other cells, such as the immune system. Our group are exploring the role of this protein in key immune response cells such as macrophages and dendritic cells. Present study noted that the Hsp70 of Mycobacterium tuberculosis can polarize macrophages to a M2 phenotype and this response is dependent on IL-10. Peritoneal and bone marrow derived macrophages were treated with DnaK (Hsp70 prokaryotic homolog) from M. tuberculosis for 24 hours. After this period there was an increase of M2 classic phenotype markers, such as FIZZ1, YM1, CD206, IL-10 and Arg1. On the other hand, there was a decrease in expression of IL-6, MCP-1, TNF-?, NO, MHC class II and CD86 (M1 markers), and these cells are able to promote tumor growth in allogeneic model. It was also observed with KO cells or blocking IL-10R that this modulation is dependent on IL-10. In addition, this cellular modulation is not restricted to macrophages; such protein acting on dendritic cells by modulating them with an immature phenotype, as has been shown in prior works of our group (Borges et al, 2010;. Motta et al., 2007 ). However, it is not yet known what specific region of the protein is essential for that purpose and whether it is restricted to that homologues, DnaK from M. tuberculosis. Therefore, another objective was to express and purify in the same system their counterparts Hspa1a (murine Hsp70) and HSPA1A (human Hsp70) and subsequently testing them in parallel in immunological experimental models. Work is currently in progress with regard to purification of Hspa1a and initial dendritic cells activation state tests were conducted. It is believed that whether there is an effect with DnaK homologues, this effect is less obvious, according to previous results. / A Hsp70 (Heat shock protein 70 kDa) ? uma prote?na de choque t?rmico de 70 kDa que possui fun??es intra e extracelulares. Nos estudos iniciais, somente as fun??es intracelulares eram exploradas, como o aux?lio no dobramento, impedir a agrega??o e o redobramento prot?ico H? d?cadas mostrou-se que essa prote?na pode ser exportada para o ambiente extracelular e exercer efeitos sobre outras c?lulas, como as do sistema imune. O nosso grupo v?m explorando o papel dessa prote?na em c?lulas chave da resposta imune, como macr?fagos e c?lulas dendr?ticas. O presente trabalho observou que a Hsp70 de Mycobacterium tuberculosis pode polarizar macr?fagos a um fen?tipo M2 e que essa resposta ? dependente de IL-10. Macr?fagos peritoneais e derivados de medula ?ssea foram tratados com DnaK (hom?logo procari?tico da Hsp70) de Mycobacterium tuberculosis por 24h. Ap?s esse per?odo observou-se o aumento de marcadores cl?ssicos de fen?tipo M2, como: FIZZ1, YM1, CD206, IL-10, Arg1. Por outro lado, houve uma diminui??o na express?o de IL-6, MCP-1, TNF-?, NO, MHC de classe II e CD86, al?m de essas c?lulas serem capazes de promover o crescimento tumoral em modelo alog?nico. Observou-se tamb?m, com c?lulas KO ou bloqueando o IL-10R que essa modula??o ? dependente de IL-10. Al?m disso, essa modula??o celular n?o ? restrita aos macr?fagos, podendo essa prote?na agir sobre c?lulas dendr?ticas, modulando-as a um fen?tipo imaturo, como j? mostrado em trabalho anteriores do grupo (1,2). Por?m, n?o se sabe ainda qual regi?o espec?fica da prote?na ? essencial para esse efeito e se ele ? restrito a esse hom?lo, DnaK de M. tuberculosis. Portanto, outro objetivo do trabalho foi expressar e purificar no mesmo sistema os seus hom?logos Hspa1a (Hsp70 murina) e HSPA1A (Hsp70 humana) e posteriormente, test?-las em paralelo em modelos experimentais imunol?gicos. O trabalho est? em andamento atualmente em rela??o a purifica??o da Hspa1a e os primeiros testes de estado de ativa??o de c?lulas dendr?ticas foram realizados. Acredita-se que se h? um efeito dos hom?logos de DnaK, esse efeito ? menos evidente, segundo resultados pr?vios.
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Associa??o entre exposi??o ao estresse precoce e a cogni??o na vida adulta : vulnerabilidade, resili?ncia e epigen?tica

Albuquerque Filho, Manoel Os?rio 29 February 2016 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-08-03T18:12:49Z No. of bitstreams: 1 DIS_MANOEL_OSORIO_ALBUQUERQUE_FILHO_COMPLETO.pdf: 1445518 bytes, checksum: 398ccd6bab55b53f888f953ea35d9bb4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T18:12:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_MANOEL_OSORIO_ALBUQUERQUE_FILHO_COMPLETO.pdf: 1445518 bytes, checksum: 398ccd6bab55b53f888f953ea35d9bb4 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Exposure to stressful events early in life may have permanent deleterious consequences on nervous system function and increase the susceptibility to cognitive impairment later in life. Maternal deprivation, commonly used as a source of early life stress, impairs memory in adult rats and reduces hippocampal brain-derived neurotrophic factor (BDNF) levels in a very heterogeneous way among individuals. The aim of the present study was to investigate the possible epigenetic modulation underlying recognition memory impairment and reduced BDNF levels in the hippocampus of adult maternal deprived rats. We also evaluated the potential ameliorating properties of the histone deacetylase (HDAC) inhibitor, sodium butyrate, on memory deficits and BDNF changes associated with maternal deprivation. For this study, maternal deprived animals were categorized as ?inferior learners? and ?superior learners? according to their performance in novel object recognition memory task. Results indicated that HDAC activity was higher in individuals submitted to maternal deprivation with the worst cognitive performance (inferior learners). Acute administration of sodium butyrate increased histone H3 acetylation and BDNF levels, and restored recognition memory in maternally deprived animals with the worst cognitive performance. Moreover, we also showed that there is a positive correlation between BDNF levels and memory performance. Taken together, the results indicated that HDAC inhibitors could be considered as a possible therapeutic agent to improve cognitive performance in inferior learners individuals. Further studies need to be conducted for a better understanding of the mechanisms associated with persistent alterations observed in adult life induced by early stressful events and those leading to resilience. / Estudos recentes t?m mostrado que o estresse no per?odo de desenvolvimento do SNC pode ter consequ?ncias vari?veis sobre a cogni??o, alterando a forma como o indiv?duo responde frente a situa??es semelhantes a que ? exposto na vida adulta, aumentando a susceptibilidade ou resili?ncia de uma forma dependente tanto do background gen?tico do indiv?duo como da forma como ele ? exposto ao estressor na inf?ncia e na vida adulta. A t?cnica da priva??o materna, que busca mimetizar a exposi??o ao estresse na inf?ncia por meio da separa??o da m?e de sua prole no per?odo considerado chave para o desenvolvimento do SNC, foi utilizada neste estudo com a finalidade de se investigar a variabilidade de resposta ao estresse na vida adulta em animais separados da m?e, bem como para se investigar poss?veis mecanismos epigen?ticos envolvidos no comprometimento da mem?ria de reconhecimento dos animais adultos e n?veis de BDNF no hipocampo, prote?na esta chave para o processo de consolida??o da mem?ria. Epigen?tica ? um termo que se refere a um tipo de mem?ria que envolve mudan?a estrutural e funcional na cromatina, incluindo a express?o de genes na resposta a um est?mulo ambiental, por?m sem promover mudan?as na sequ?ncia de DNA. Para investigar, neste estudo, os efeitos da modula??o epigen?tica sobre a mem?ria, foi realizada a medida da atividade da enzima histona deacetilase (HDAC), dos n?veis de acetila??o da Histona H3 e dos n?veis da prote?na BDNF, marcadores estes que d?o ideia sobre a atividade de express?o do gene, e comparados os resultados com aqueles obtidos em tarefas de mem?ria de reconhecimento. Investigamos tamb?m as propriedades potenciais do Butirato de S?dio, conhecido inibidor da HDAC, em reverter atrav?s dos mecanismos epigen?ticos os d?ficits de mem?ria nos animais de pior desempenho cognitivo. Verificamos que a atividade da HDAC foi maior em ratos submetidos ? priva??o materna com pior desempenho cognitivo e que o uso do Butirato n?o s? reverteu os n?veis de acetila??o de histonas H3 como ainda influenciou a melhora da cogni??o nos animais separados que haviam tido desempenho cognitivo inferior no primeiro teste de reconhecimento, restaurando sua mem?ria. Esta descoberta refor?a a ideia de que o aumento da atividade da HDAC reduz a acetila??o da Histona H3 levando a uma redu??o na transcri??o de BDNF e consequentemente a um d?ficit de mem?ria. Al?m disso, observamos uma correla??o positiva entre n?veis de BDNF e o desempenho de mem?ria em ratos separados da m?e. Juntos os resultados indicam o uso de inibidores da HDAC como um poss?vel agente terap?utico no tratamento de d?ficits cognitivos. Entretanto, mais estudos que reforcem o entendimento das altera??es persistentes observadas em adultos e induzidas por eventos estressores precoces, bem como dos mecanismos envolvidos no desenvolvimento da resili?ncia, s?o necess?rios.
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Mem?ria traum?tica resistente ? extin??o, comportamento sens?rio-motor da marcha e histofisiologia da am?gdala medial : uma an?lise integrativa em um modelo murino

Medeiros, Filipe Mello 29 February 2016 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-08-18T11:26:45Z No. of bitstreams: 1 DIS_FILIPE_MELLO_MEDEIROS_PARCIAL.pdf: 1007074 bytes, checksum: f175c8e576b3cb5241401084e4179d0d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-18T11:26:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_FILIPE_MELLO_MEDEIROS_PARCIAL.pdf: 1007074 bytes, checksum: f175c8e576b3cb5241401084e4179d0d (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Suffer traumatic experiences are a risk factor for developing neuropsychiatric movement disorders. In the present study, we test the hypothesis that aversive, resistant to extinction memories could impair skilled walking performance and change neuron and glia densities as well as neuron-glia ratio in medial amygdala in male Wistar rats. Thus, we established a major trauma protocol able to induce a resistant to extinction memory followed by testing its effects on skilled walking performance and medial amygdala histophysiology. Footshocks exposure reduces skilled walking performance 3 days after the hit (P<0.0001). Additionally, the adoption of a ?safety behavior? in the plus maze test was associated with worse ladder walking performance (P<0.001). Statistical trend of significance were founded for changing glia (P=0.10) and neuron-glia ratio (P=0.08) in medial amygdala as well as for their correlation with sensorimotor performance (P=0.06). Therefore, suffering traumatic experiences able to generate resistant to extinction memories could result in long-term impairment of gait control, which affects the walking ability. / Sofrer experi?ncias traum?ticas constitui um fator de risco para o desenvolvimento de transtornos psiqui?tricos, com ou sem envolvimento aparente do sistema sens?rio-motor. No presente estudo n?s testamos a hip?tese de que mem?rias aversivas resistentes ? extin??o podem prejudicar o desempenho da marcha e alterar as densidades neuronal e glial, assim como a raz?o neur?nio-glia na am?gdala medial, em ratos Wistar adultos. Desta forma, n?s estabelecemos um protocolo de trauma capaz de induzir uma mem?ria resistente ? extin??o, testando na sequ?ncia seus efeitos sobre o desempenho sens?rio-motor da marcha e a histofisiologia da am?gdala medial. Verificamos que a exposi??o ao protocolo de choque nas patas reduz o desempenho na marcha 3 dias ap?s o referido evento aversivo (P<0.0001). Al?m disso, a ado??o de um ?comportamento de seguran?a? no teste do labirinto em cruz elevado foi associada ao pior desempenho na marcha (P<0.001). Uma tend?ncia de signific?ncia estat?stica foi encontrada para a mudan?as na densidade glial (P=0.10) e na raz?o neur?nio-glia (P=0.08) da am?gdala medial, assim como para a correla??o destas vari?veis com o desempenho sens?rio-motor (P=0.06). Portanto, sofrer uma experi?ncia traum?tica capaz de gerar mem?rias resistentes ? extin??o pode impactar em preju?zos ? longo prazo no controle da marcha, afetando a habilidade de caminhar.
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Estudo do papel da ecto-5'-nucleotidase no contexto da inflama??o avaliando par?metros citol?gicos, bioqu?micos, moleculares e imagens de ?PET/CT em Zebrafish

Nazario, Luiza Reali 21 March 2016 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-08-25T16:23:46Z No. of bitstreams: 1 DIS_LUIZA_REALI_NAZARIO_PARCIAL.pdf: 804114 bytes, checksum: d4d4d3525f9a5a4a62c1c8080197776f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-25T16:23:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DIS_LUIZA_REALI_NAZARIO_PARCIAL.pdf: 804114 bytes, checksum: d4d4d3525f9a5a4a62c1c8080197776f (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / The LPS mechanism of action is still not completely elucidated on vertebrates like fish, and indeed differs from higher vertebrates. In zebrafish, LPS is capable of increasing the recruitment of immune cells and the expression of genes related to the immune response. The purinergic system has a great relation to the regulation of the immune system and inflammatory responses. The nucleotide ATP is able to induce cytokine secretion, recruitment and differentiation of immune cells. ATP can be dephosphorylated sequentially generating adenosine. In the context of inflammation adenosine serves as an innate immunomodulatory molecule. The control of adenosine extracellular levels is performed by nucleoside transporters and ecto-5'-nucleotidase. The ecto-5'-nucelotidase is an ectonucleotidase with pacemaker role in the production of adenosine and is one of the focuses of this study. Considering the analysis of the input images approach to the study of inflammation context, it is known that in rodents the uptake of 18F-FDG, an analogue of glucose, is increased under inflammation, which generates a differential image. The micro Positron Emission Tomography/ Computed Tomography (?PET /CT) is used for research in small animals and take images using a radiopharmaceutical. The use of ?PET/CT contributes with information at the molecular, structural and functional level and allows too monitor the effect of drugs in physiological / pathological situations in the range of a small animal as the zebrafish. The technology ?PET/CT is relatively new and so far there are no published scientific studies applying radiopharmaceuticals in zebrafish. In this context, the aim of the project was to study the involvement of the enzyme ecto-5'-nucleotidase in the development of inflammation induced by LPS using the cytological, biochemical, molecular and image (?PET) in different tissues of adult zebrafish (Danio rerio). To induce inflammation in zebrafish, the animals were injected with a solution of LPS (10 ug/g body weight, i.p) after being subjected to anesthesia (tricaine 0.1 g/L). The animals were kept for 2 hours or 24 hours in this treatment. For confirmation of inflammation were analyzed the gene expression of specific markers (tnf-? and cox-2) in encephalon, heart, kidney and intestine and differential counts of cells of the immune system. The activity and expression of ecto-5'-nucleotidase enzyme was analyzed in the encephalon, heart, kidney and intestine of control and treated animals. To keep the animals in ?PET/CT was performed anesthetic concentration curve (tricaine - 0.1, 0.12, 0.15 g/L) and standardized an apparatus to keep the fish in the presence of water, but yet still. A curve of time after injection of 18F-FDG was performed to obtain images in ?PET/CT (0, 10, 20 and 30 min) for standardizing the radiation quantitation in a gamma counter (15, 30, 60 90 and 120 min). Exposure to the LPS was able to increase the tnf-? expression in nearly all tissues studied (heart, kidney and intestine) and cox-2 in the kidney. The number of active peripheral blood white cells was also increased, confirming the induction of the inflammatory response. Hydrolysis of AMP in animals injected with LPS was increased in the heart in 24 hpi [72% compared to control] with no change in gene expression of ecto-5'-nucleotidase. The gene expression of ecto-5'-nucleotidase was adjusted temporarily in the kidney and intestine without altering the enzyme activity. After patterning images with ?PET/ CT and quantitation radiation by gamma counter for each organ examined, 30 minutes was defined as the best time for the biodistribution of 18F-FDG. After acquiring inflamed animal ?PET images it was not identified changes in the uptake of 18F-FDG compared to the control. Tissue quantification radiation registered a decrease in bone samples in animals treated with LPS, while other tissues have not changed. These data indicate that zebrafish responds to LPS by altering gene expression of specific markers, especially in kidney, and activation of white blood cells. The inflammation appears to be accompanied by a fine adjustment tissue-specific expression and activity of ecto-5'-nucleotidase in response to the inflammatory process. Although inflammation has been confirmed, the registration images by ?PET and radiation determination in different tissues have not been able to register differences in metabolic activity in animals treated with LPS. However, standardization of these techniques provides an advance in the use of radiopharmaceuticals in small animals, such as zebrafish. / O mecanismo de a??o do LPS ainda n?o ? completamente elucidado em vertebrados como os peixes, e se diferencia dos vertebrados superiores. Em zebrafish, o LPS ? capaz de aumentar o recrutamento de c?lulas imunes e a express?o de genes relacionados com a resposta imune. O sistema purin?rgico tem uma grande rela??o com a regula??o do sistema imune e as respostas inflamat?rias. O ATP ? um nucleot?deo importante na secre??o de citocinas e no recrutamento e diferencia??o de c?lulas imunes, podendo ser sequencialmente desfosforilado gerando adenosina. No contexto da inflama??o, a adenosina atua como uma mol?cula imunomodulat?ria inata. Participam do controle dos n?veis extracelulares da adenosina, os transportadores de nucleos?deos e a ecto-5?-nucleotidase. A ecto-5?-nucleotidase ? uma enzima com papel de marcapasso na produ??o de adenosina e constitui um dos focos do presente estudo. Considerando a contribui??o da abordagem de an?lise de imagens no contexto do estudo da inflama??o, ? sabido que a capta??o do radiof?rmaco 18F-FDG, um an?logo da glicoseest? aumentada em roedores submetidos ? inflama??o, o que gera uma imagem diferenciada. O micro Tom?grafo por Emiss?o de P?sitron/Tomografia Computadorizada (?PET/CT) ? utilizado para pesquisas em animais de pequeno porte e obt?m imagens utilizando um radiof?rmaco. O uso da ?PET/CT contribui com informa??es a n?vel molecular, funcional e estrutural em tempo real e permite acompanhar o efeito de f?rmacos em situa??es fisiol?gicas/patol?gicas na escala de um animal diminuto como o zebrafish. A tecnologia do ?PET/CT ? relativamente nova e at? o momento n?o existem estudos cient?ficos publicados aplicando radiof?rmacos em zebrafish. Neste contexto, o objetivo do projeto foi estudar o envolvimento da enzima ecto-5?-nucleotidase no desenvolvimento de inflama??o induzida por LPS utilizando-se de par?metros citol?gicos, bioqu?micos, moleculares e de imagem por ?PET em diferentes tecidos de zebrafish adulto (Danio rerio). Para induzir inflama??o no zebrafish, os animais foram injetados com uma solu??o de LPS (10 ?g/g de peso corporal; i.p) ap?s terem sido submetidos ? anestesia (trica?na 0.1 g/L). Os animais permaneceram por 2 h ou 24 h neste tratamento. Para confirma??o da inflama??o foram analisadas a express?o g?nica de marcadores espec?ficos (tnf-? e cox-2) em enc?falo, cora??o, rim e intestino e contagem diferencial de c?lulas do sistema imune. A atividade e express?o da enzima ecto-5?-nucleotidase foi analisada no enc?falo, cora??o, rim e intestino dos animais controle e tratados. Para manter os animais no ?PET/CT foi realizada uma curva de concentra??o de anest?sico MS-222 (0.1, 0. 12, 0.15 g/L) e determinado um aparato para manter o peixe na presen?a de ?gua mas, ainda im?vel. Uma curva de tempo ap?s a inje??o de 18F-FDG foi realizada para a obten??o de imagens em ?PET/CT (0, 10, 20 e 30 min) e para a padroniza??o da quantifica??o de radia??o em um Gamma counter (15, 30, 60, 90 e 120 min). A exposi??o ao LPS foi capaz de aumentar a express?o de tnf-? em quase todos os tecidos estudados (cora??o, rim e intestino) e de cox-2 no rim. O n?mero de c?lulas brancas ativas do sangue perif?rico tamb?m foi aumentado, confirmando a indu??o da resposta inflamat?ria. A hidr?lise de AMP em animais injetados com LPS foi aumentada no cora??o em 24 hpi [72% em rela??o ao controle] com nenhuma altera??o na express?o g?nica da ecto-5?-nucleotidase. A express?o g?nica do ecto-5?-nucleotidase foi ajustada temporalmente no rim e intestino sem altera??o da atividade enzim?tica. Ap?s a padroniza??o de imagens com ?PET/CT e da quantifica??o de radia??o por Gamma counter para cada ?rg?o analisado, definiu-se 30 min como o melhor tempo para a biodistribui??o do 18F-FDG. Ap?s a aquisi??o de imagens em ?PET de animais inflamados n?o se identificou altera??es na capta??o do 18F-FDG comparado com o controle. A quantifica??o tecidual de radia??o registrou uma queda nas amostras de ossos nos animais tratados com LPS, embora os demais tecidos n?o tenham sido alterados. Estes dados indicam que o zebrafish responde ao LPS alterando express?o g?nica de marcadores espec?ficos, especialmente no rim e ativando c?lulas brancas do sangue. A inflama??o induzida parece estar acompanhada por um t?nue ajuste tecido-espec?fico da atividade e express?o da ecto-5?-nucleotidase em resposta ao processo inflamat?rio. Ainda que a inflama??o tenha sido confirmada, o registro de imagens por ?PET e a determina??o de radia??o nos diferentes tecidos n?o foram capazes de registrar diferen?as na atividade metab?lica em animais tratados com LPS. Entretanto, a padroniza??o destas t?cnicas oferece um avan?o no uso de radiof?rmacos em animais de pequeno porte, como o zebrafish.
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As consequ?ncias dos maus-tratos na inf?ncia na reprograma??o neuroimunoend?crina em adolescentes saud?veis e modelo animal de separa??o materna

Prado, Carine Hartmann do 18 July 2016 (has links)
Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2016-09-27T12:32:27Z No. of bitstreams: 1 TES_CARINE_HARTMANN_DO_PRADO_PARCIAL.pdf: 1121010 bytes, checksum: 002f14b965342b7253840e4cb34c96b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T12:32:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TES_CARINE_HARTMANN_DO_PRADO_PARCIAL.pdf: 1121010 bytes, checksum: 002f14b965342b7253840e4cb34c96b5 (MD5) Previous issue date: 2016-07-18 / Funda??o de Amparo ? Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul - FAPERGS / Childhood maltreatment (CM) exposure, including physical, sexual and psychological abuse, as well as physical or emotional neglect, is associated to long-term effects on mental health. The individual?s earlier years of life are characterized by rapid neurobiological and psychological development; therefore, CM is considered an important risk factor for psychological impairment and increased vulnerability to mood disorders. It is well established that alterations in the stress response systems, such as the immune and neuroendocrine systems are involved in this process. Based on this, investigating the effects of CM exposure in healthy adolescents can help to identify patterns of vulnerability to mood disorders in adulthood. The main objectives are: 1) to investigate the effects of CM exposure in neuroimunoendocrine and oxidative parameters in healthy adolescents without mood disorder; 2) to analyze early life stress effects in an animal model of maternal separation (MS) in cognitive performance, immune and oxidative parameters. The first study recruited thirty healthy adolescents reporting CM and twenty-seven healthy adolescents with no history of CM as control group. Blood, plasma and hair samples were obtained from all participants. Lymphocytes were isolated and stimulated in vitro to evaluate lymphocyte subsets, Th1/Th2/Th17 cytokines, mitogen-activated protein kinase (MAPK) and nuclear factor kappa B (Nfkb) signaling pathways as well as lymphocyte sensitivity to dexamethasone by flow cytometry. Brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and hair cortisol were assessed with enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA). Increased percentage of activated T cells (CD3+CD+CD25+ and CD3+CD69+) and senescent T cells (CD8+CD28- and CD4+CD28-), as well as a reduction of NK cells (CD3-CD56+), and NKT cells (CD3+CD56+) were observed in healthy adolescents exposed to CM. Also, it was observed an increase of intracellular signaling through increased phosphorylation of ERK1 / 2 and NF-?B and increased cytokine production, such as IL-2, IFN-y and IL-17 following CM, suggesting increased cellular activation. Increased hair cortisol levels along with increased lymphocyte resistance to glucocorticoids in vitro, as well as low BDNF concentrations were observed in CM, reflecting the chronic stress effects on neuroendocrine parameters. The second study showed cognitive impairment, loss of parvalbumin and increased pro-inflammatory cytokines (TNF-?) peripherally following MS. The intervention of the enriched environment was effective in reversing memory damage as well as inflammation caused by MS. In conclusion, our results suggest that CM alter neuroimunoendocrine and oxidative responses in both, animal and human models. Thus, the understanding of the underlying mechanisms by which CM modulates the central nervous system, endocrine, and immune system and how these systems interact to alter the physiological responses of children and healthy adolescents, may help to increase preventive actions against the development of chronic inflammatory diseases and mood disorders in adulthood. / A exposi??o aos maus-tratos na inf?ncia (MTI), incluindo diferentes formas de abuso e neglig?ncia, est? associada com repercuss?es em longo prazo na sa?de do indiv?duo. Os primeiros anos de vida de um indiv?duo caracterizam-se por r?pido desenvolvimento neurobiol?gico e psicol?gico, portanto os MTI s?o considerados importantes fatores de risco para danos psicol?gicos e aumento da vulnerabilidade para transtornos de humor. Acredita-se que, altera??es em mecanismos de resposta ao estresse, incluindo os sistemas neuroend?crino e imunol?gico/oxidativo, estejam envolvidas neste processo. Diante disto, investigar os efeitos da exposi??o aos MTI no adolescente saud?vel pode ajudar a identificar padr?es de vulnerabilidade para transtornos de humor na idade adulta. Os objetivos da tese apresentada s?o: 1) investigar os efeitos neuroimunoend?crinos e oxidativos da exposi??o aos MTI em adolescentes saud?veis sem transtorno de humor e 2) analisar os efeitos do estresse precoce em modelo animal atrav?s do protocolo de separa??o materna (SM) no desempenho cognitivo e par?metros imunol?gicos/oxidativos. Para avalia??o do primeiro objetivo, foram recrutados trinta adolescentes saud?veis com hist?rico de MTI e vinte e sete adolescentes saud?veis sem hist?ria de MTI como grupo controle. Amostras de sangue, plasma e cabelo foram obtidas de todos os participantes. Linf?citos foram isolados e estimulados in vitro para identificar subtipos linfocit?rios, citocinas Th1/Th2/Th17, vias de sinaliza??o intracelular MAPKs e NF-?B, bem como a sensibilidade dos linf?citos ao dexametasona, por citometria de fluxo. Ainda, os n?veis de BDNF plasm?tico e cortisol capilar foram avaliados pela t?cnica de ELISA. Os adolescentes com MTI apresentaram um aumento na porcentagem das c?lulas T ativadas (CD3+CD4+CD25+ e CD3+CD69+) e c?lulas T senescentes (CD8CD28- e CD4+CD28-), al?m de redu??o em c?lulas NK (CD3-CD56+) e c?lulas NKT (CD3+CD56+). Al?m disso, os linf?citos de adolescentes expostos aos MTI apresentaram maior resist?ncia ao glicocorticoide dexametasona in vitro. Tamb?m evidenciamos altera??es em rotas de sinaliza??o intracelular, observada por aumento na fosforila??o de ERK1/2 e NF-?B em c?lulas T CD8+, e aumento de citocinas como IL-2, IFN-y and IL-17 ap?s MTI, confirmando um perfil de ativa??o imune celular. Aumento dos n?veis de cortisol capilar juntamente com a redu??o das concentra??es de BDNF plasm?tico foi detectado nos adolescentes expostos aos MTI, refletindo os efeitos a longo prazo do estresse cr?nico em par?metros neuroend?crinos. Ainda, um desequil?brio entre os marcadores de dano oxidativo e defesas antioxidantes foi encontrado nos adolescentes com hist?rico de MTI. Em rela??o ao segundo objetivo, os resultados do estudo experimental demonstraram que a SM causou altera??es de mem?ria, perda de parvalbumina e aumento de citocinas pr?-inflamat?rias (TNF-?) no plasma deanimais adolescentes. Ap?s a interven??o do ambiente enriquecido foi poss?vel reverter os preju?zos de mem?ria e a inflama??o causados pela exposi??o a SM. Concluindo, nossos resultados indicam que a exposi??o ao estresse durante a inf?ncia altera a resposta neuroimunoend?crina e oxidativa em modelo animal e humano. Deste modo, compreender de que forma os MTI modulam o sistema nervoso, end?crino e imune e como estes sistemas interagem entre si para alterar precocemente as respostas fisiol?gicas da crian?a e do adolescente saud?vel pode auxiliar no aumento de a??es preventivas contra o desenvolvimento de doen?as inflamat?rias cr?nicas e transtornos de humor na idade adulta.
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ANIMAIS E PLANTAS UTILIZADAS COMO MEDICINAIS POR UMA COMUNIDADE RURAL DO SEMI-ÁRIDO DA PARAIBA, NORDESTE DO BRASIL / ANIMALS AND PLANTS USED FOR A MEDICINAL PORPOSES BY RURAL COMMUNITY OF THE PARAIBA SEMI-ARID, NORTHEASTERN BRAZIL

Santos, Silene Lima Dourado Ximenes 22 July 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2015-09-25T12:23:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silene Lima Dourado Ximenes Santos.pdf: 1538492 bytes, checksum: 8626ebfe620fe3f21c2f43463804bbf3 (MD5) Previous issue date: 2009-07-22 / The knowledge concerning the therapeutic properties of animals and plants has been developed by human communities since the times remote and last of generations in generations. As the traditional medicine is intimately related to the natural resources, specifically to the biodiversity, it is more evident that the traditional knowledge associated to the use of the biological resources becomes important for its conservation and durable use. It is still more important in areas as the semi-arid Northeasterner, where the biome Caatinga prevails, which is little studied, above all of the point of ethnobiologic view. It was aimed at to accomplish a rising of the animal species and vegetable employees as medicinal in a rural community of the Queimadas Municipal district, semi-arid of the state of Paraíba, Northeast of Brazil, knowing the several related aspects the those practices. Free interviews were accomplished and applied semi-structured forms to the users of medicinal plants and animals. The value of use of each species and the factor of consent of the informers were calculated. A total of 53 medicinal animals (43 vertebrates and 10 spineless), distributed in 42 families, were mentioned for the treatment of 68 diseases. The animal species more mentioned were Gallus gallus - domestic chicken, and Tupinambis merianae - lizard. A total of 143 plants were mentioned, distributed in 64 families, which are used for the treatment of 88 diseases. The species more mentioned were Anacardium occidentale - purple chestnut and Mentha x villosa-nervata - mint-small. The Breathing Apparel was the isolated organic system with larger number of citations of animals and plants together. Some species of animals and plants threatened of extinction are being used by the community. Studies in pharmacology subsequent will be important for identification of bioactives compositions and therapeutic proofs of the used biological resources. Any conservation strategy should have direct connection with improvement of public health, particular ly for rural communities that have limited access to services of health efficient. / O conhecimento acerca das propriedades terapêuticas de animais e plantas vem sendo desenvolvido por comunidades humanas desde os tempos remotos e passado de gerações em gerações. Como a medicina tradicional está intimamente relacionada aos recursos naturais, especificamente à biodiversidade, é cada vez mais evidente que o saber tradicional associado ao uso dos recursos biológicos torna-se importante para sua conservação e uso duradouro. Torna-se ainda mais importante em áreas como o semiárido nordestino, onde predomina o bioma Caatinga, o qual é pouco estudado, sobretudo do ponto de vista etnobiológico. Objetivou-se, neste estudo realizar um levantamento das espécies animais e vegetais empregados como medicinais em uma comunidade rural do Município de Queimadas, no agreste semi-árido do estado da Paraíba, Nordeste do Brasil, conhecendo os vários aspectos relacionados a essas práticas. Foram realizadas entrevistas livres e aplicados formulários semi-estruturados a usuários de plantas e animais medicinais. Foram calculados o valor de uso de cada espécie e o fator de consenso dos informantes. Um total de 53 animais medicinais (43 vertebrados e 10 invertebrados), distribuídos em 42 famílias, foram citados para o tratamento de 68 doenças. As espécies animais mais citadas foram Gallus gallus - galinha doméstica, e Tupinambis merianae - lagarto. Um total de 143 plantas medicinais foram citadas, distribuídas em 64 famílias, as quais são utilizadas para o tratamento de 88 doenças. As espécies mais citadas foram Anacardium occidentale - cajú-rôxo e Mentha x villosanervata - hortelã-miúda. Doencas do Aparelho Respiratório foi o sistema orgânico isolado com maior número de citações de animais e plantas juntos. Algumas espécies de animais e plantas ameaçadas de extinção estão sendo utilizadas pela comunidade. Estudos farmacológicos posteriores serão importantes para identificação de compostos bioativos e comprovações terapêuticas dos recursos biológicos utilizados. Qualquer estratégia de conservação deve ter conexão direta com melhoria de saúde pública, particularmente para comunidades rurais que têm acesso limitado a serviços de saúde eficientes.
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A construÃÃo de um site educacional por alunos de um curso do ensino mÃdio profissionalizante: contribuiÃÃes para o ensino de biologia / Construction of a site for education students of a course of vocational high school: contributions to the biology of education

ClÃudia Joelma Guerreiro 09 July 2015 (has links)
A identificaÃÃo de uma estratÃgia de aprendizagem ativa, caracteriza os processos de participaÃÃo do aluno nas atividades do grupo, especialmente na integraÃÃo no grupo e no seu envolvimento na realizaÃÃo das tarefas. Para promover um ambiente propÃcio à aprendizagem colaborativa, temos que, inicialmente e no mÃnimo, fornecer um meio de comunicaÃÃo que possibilite a interaÃÃo, como os muitos espaÃos e ambientes apresentados a seguir. Partindo desse pressuposto, foi analisado que quando utilizadas em favor da educaÃÃo, as Tecnologias da InformaÃÃo e ComunicaÃÃo (TIC) utilizam o computador e a internet como ferramentas pedagÃgicas, que sendo um meio auxiliar, intervÃm favoravelmente no processo de aprendizagem, permitindo ao aluno construir e reconstruir o seu conhecimento. Para a realizaÃÃo deste trabalho, buscou-se verificar indÃcios de aprendizagem colaborativa em alunos de uma escola do Ensino MÃdio Profissionalizante, enquanto construÃam um site educativo, utilizando como principal ferramenta, o trabalho em grupos. Foi avaliado ainda o nÃvel de envolvimento dos participantes durante o processo de elaboraÃÃo do aparato. Como metodologia de pesquisa optou-se pelo estudo de caso do tipo Ãnico, atravÃs do qual mediante uma pesquisa profunda em um objeto delimitado, à possÃvel adentrar em uma realidade que nÃo conseguida plenamente por um levantamento amostral e avaliaÃÃo exclusivamente quantitativa. Como tÃcnica de pesquisa, escolheu-se a observaÃÃo participante visto que observar ajuda muito o pesquisador. Sua grande vantagem està relacionada com o fato de o pesquisador obter a informaÃÃo na ocorrÃncia espontÃnea do fato. Em nosso acompanhamento, foi possÃvel constatar que o trabalho em grupos, permitiu que se estabelecesse um clima de aprendizagem colaborativa visto que estes processos integram uma proposta educacional na qual os alunos sÃo estimulados a trabalhar em conjunto no desenvolvimento e construÃÃo do conhecimento. Durante a construÃÃo do site, os alunos foram solicitados a escrever relatÃrios periÃdicos a respeito de suas dificuldades e dos meios utilizados para resolver os problemas que ocorreram ao longo do processo, onde nos foi permitido notar a importÃncia da equipe como fonte de socializaÃÃo de saberes, de discussÃes construtivas e de respeito mÃtuo. Ao concluir a pesquisa, acredita-se ter confirmado ao longo dos resultados, os objetivos que tÃnhamos em mente: a verificaÃÃo de indÃcios de aprendizagem colaborativa, fortemente marcados ao longo do processo, bem como um grande envolvimento dos educandos participantes desta anÃlise, que puderam ser observados durante os muitos momentos de reuniÃes para a elaboraÃÃo da ferramenta. / The identification of a strategy of active learning, characterizes the processes of participation of the pupil in the activities of the group, especially in the integration in the group and its involvement in the accomplishment of the tasks. To promote a propitious environment to the collaborative learning, we have that, initially and at least, to supply a media that makes possible the interaction, as the many presented spaces and environments to follow. Leaving of this estimated, was analyzed that when used for the education, the Technologies of the Information and Communication (TIC) use the computer and the Internet as pedagogical tools, that being a means intervene favorably in the learning process, allowing to the pupil to construct and to reconstruct their knowledge. For the accomplishment of this work, we searched to verify indications of collaborative learning in pupils of a school of Professionalizing Average Education, while they were building an educative site, using as main tool, the work in groups. The level of involvement of the participants during the process of elaboration of the apparatus was still evaluated. As research methodology it was opted to the study of case of the only type, through which by means of a deep research in a delimited object, it is possible to enter in a reality that not obtained fully for a sampling survey and exclusively quantitative evaluation. As research technique, it was chosen participant comment since to observe very aid the researcher. Their great advantage is related with the fact of the researcher to get the information in the spontaneous occurrence of the fact. In our accompaniment, it was possible to evidence that the work in groups, allowed that we established a climate of collaborative learning since these processes integrate a proposal educational in which the pupils are stimulated to work jointly in the development and construction of the knowledge. During the construction of the site, the pupils had been requested to write periodic reports regarding their difficulties and of the used means to decide the problems that had occurred throughout the process, where us were allowed to notice the importance of the team as source of socialization to know, of constructive quarrels and mutual respect. When concluding the research, we believe to have confirmed throughout the results, the objectives that we had in mind: the verification of the knowledge indications of collaborative learning, strongly marked throughout the process, as well as a great involvement of the participant students of this analysis, that could have been observed during many moments of meetings for the elaboration of the tool.
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Enumeração, isolamento e identificação de bactérias aeróbias psicrotróficas viáveis do estômago e do ceco de Tartaruga da Amazônia (Podocnemis expansa) / Enumeration, isolation and identification of viable psychrotrophic aerobic bacteria of the stomach and cecum of Amazon Turtle (Podocnemis expansa)

Oliveira, Wilian Pires de 19 December 1997 (has links)
Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-02-13T12:57:23Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Wilian Pires de Oliveira - 1997.pdf: 733750 bytes, checksum: 52c3e2623b809ecdc5ce5139d3d09344 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-02-13T12:58:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Wilian Pires de Oliveira - 1997.pdf: 733750 bytes, checksum: 52c3e2623b809ecdc5ce5139d3d09344 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-13T12:58:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Wilian Pires de Oliveira - 1997.pdf: 733750 bytes, checksum: 52c3e2623b809ecdc5ce5139d3d09344 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 1997-12-19 / Foram utilizados no presente experimento 480 Tartarugas da Amazonia (Podocnemis expansa) mantidas em 16 caixas d’água, distribuídas em quatro grupos. Cada grupo, recebeu um tipo de ração contendo respectivamente 5,5, 7,0, 8,5 e 10,0% de fibra bruta. Cada caixa recebeu 30 animais recém-nascidos, oriundos da natureza e colhidos no rio Araguaia, na região compreendida entre o Porto de Luiz Alves e a Ponta Sul da Ilha do Bananal. De cada uma das 16 parcelas experimentais foram retirados aleatoriamente dois animais, para colheita de material do estômago e do ceco. Estas colheitas foram feitas aos 15, 89 e 144 dias de idade, totalizando 96 amostras. A análise microbiológica das amostras, permitiu isolar e identificar 17 gêneros de microrganismos aeróbios psicrotróficos viáveis nos conteúdos das visceras analisadas: Pseudomonas, Bacillus, Proteus, Enterobacter, Serratia, Micrococcus, Streptococcus, Flavobacerium, Citrobacter, Corynebacterium, Staphylococcus, Aeromonas, Hafnia, Acinetobacter, Salmonella, Edwardsiella e Klebsiella. O teste de coloração pelo método de Gram das bactérias, nas diferentes idades, revelou que o número de gêneros Gram-positivos permaneceu o mesmo, enquanto que o número de gêneros Gram-negativos reduziu com o aumento da idade. A temperatura da água foi tomada diariamente, e as médias obtidas variaram entre 24,5 e 26,1C. Quanto às características químicas da água representadas pelo pH, O2, CO2 e CaCO3 verificou-se que encontraram-se valores dentro dos limites adequados para organismos aquáticos. As diferentes rações fornecidas aos animais durante a fase experimental não influenciaram significativamente na microbiota, ao nível de 5% de probabilidade. Diferenças significativas, entretanto ocorreram na frequência de gêneros de microrganismos quando foram analisados as variáveis idades e órgãos. / Foram utilizados no presente experimento 480 Tartarugas da Amazonia (Podocnemis expansa) mantidas em 16 caixas d’água, distribuídas em quatro grupos. Cada grupo, recebeu um tipo de ração contendo respectivamente 5,5, 7,0, 8,5 e 10,0% de fibra bruta. Cada caixa recebeu 30 animais recém-nascidos, oriundos da natureza e colhidos no rio Araguaia, na região compreendida entre o Porto de Luiz Alves e a Ponta Sul da Ilha do Bananal. De cada uma das 16 parcelas experimentais foram retirados aleatoriamente dois animais, para colheita de material do estômago e do ceco. Estas colheitas foram feitas aos 15, 89 e 144 dias de idade, totalizando 96 amostras. A análise microbiológica das amostras, permitiu isolar e identificar 17 gêneros de microrganismos aeróbios psicrotróficos viáveis nos conteúdos das visceras analisadas: Pseudomonas, Bacillus, Proteus, Enterobacter, Serratia, Micrococcus, Streptococcus, Flavobacerium, Citrobacter, Corynebacterium, Staphylococcus, Aeromonas, Hafnia, Acinetobacter, Salmonella, Edwardsiella e Klebsiella. O teste de coloração pelo método de Gram das bactérias, nas diferentes idades, revelou que o número de gêneros Gram-positivos permaneceu o mesmo, enquanto que o número de gêneros Gram-negativos reduziu com o aumento da idade. A temperatura da água foi tomada diariamente, e as médias obtidas variaram entre 24,5 e 26,1C. Quanto às características químicas da água representadas pelo pH, O2, CO2 e CaCO3 verificou-se que encontraram-se valores dentro dos limites adequados para organismos aquáticos. As diferentes rações fornecidas aos animais durante a fase experimental não influenciaram significativamente na microbiota, ao nível de 5% de probabilidade. Diferenças significativas, entretanto ocorreram na frequência de gêneros de microrganismos quando foram analisados as variáveis idades e órgãos.
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Impactos ambientais da agroindústria de suínos no sudoeste de Goiás: modelo para o alcance da sustentabilidade da atividade / Environmental impacts of the pig industry in the southwest of Goiás: model the reach of the sustainability of the activity

Lopes, Carlos Romeu Montes 24 March 2014 (has links)
Submitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-02-09T11:07:48Z No. of bitstreams: 2 Tese - Carlos Romeu Montes Lopes - 2014.pdf: 5764220 bytes, checksum: fbc0f45ba3e6e5b400a0fc886f478c7b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-20T10:20:57Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Carlos Romeu Montes Lopes - 2014.pdf: 5764220 bytes, checksum: fbc0f45ba3e6e5b400a0fc886f478c7b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-20T10:20:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Carlos Romeu Montes Lopes - 2014.pdf: 5764220 bytes, checksum: fbc0f45ba3e6e5b400a0fc886f478c7b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The implantation of pig agroindustry in a region causes environmental impacts, while these businesses use the raw material extracted from natural resources and turn their processing into products. As a result, they get waste which causes the soil, rivers, water table and air contamination. Facing this scenario, the companies cannot ignore the stakeholders’ interests, that are constituted by those who affect or can be affected by the activity of the companies. In this sense, it is fundamental that the posture of the contemporary business develops according to the necessities demanded by the environment it is inset, and which strategy be planned according to the sustainable development. The main goal of this research was to develop a model, through the analysis of part of the supply chain of the pig industry, which reaches a better relationship between these companies and the environment. In order to obtain part of the information, some instruments were used, such as data collection of direct observation, interviews, records and documents analysis. Through the quantitative analysis together with the quality study, it was possible to verify that this activity causes a negative impact in both environmental and social field, which is caused by the lack of an environmental control model. This way, the present study proposes a model, constituted by actions that may lead this activity to a reduction of its impacts, to get its feasibility and the environmental reach, which contributes this way to a better balance of this productive process related to the environmental, social and economic field. / A implantação da agroindústria de suínos em uma região provoca impactos ambientais, na medida em que essas empresas utilizam-se da matéria-prima extraída dos recursos naturais e o seu processamento em bens de consumo, resultando deste processo, resíduos os quais causam a contaminação do solo, rios, lençóis freáticos e do ar. Diante deste cenário, essas empresas não podem ignorar os interesses dos seus stakeholders, que são formados pelo público que podem afetar ou serem afetados pela atividade das organizações. Neste sentido, é fundamental que a postura empresarial contemporânea evolua de acordo com as necessidades exigidas pelo meio em que está inserida e cujas estratégias estejam voltadas ao desenvolvimento sustentável. O objetivo principal da presente pesquisa foi desenvolver um modelo, por meio da análise de uma parte da cadeia produtiva da agroindústria de suínos, que alcance uma melhor relação entre essas empresas e o meio ambiente. Para obter parte das informações trabalhadas foram utilizados como instrumentos de coleta de dados observações diretas, entrevistas, análise de documentos e registros. Por meio da análise quantitativa aliada à qualitativa foi constatado que a referida atividade propicia um impacto negativo nas variáveis ambiental e social, causada pela ausência de um modelo de controle ambiental. Assim sendo, o presente estudo propõe um modelo, constituído por ações que podem direcionar essa atividade para a redução dos seus impactos, objetivando a viabilidade e o alcance sustentável da mesma, o que contribui desta forma para um melhor equilíbrio desse processo produtivo nos aspectos ambiental, social e econômico.

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