Diss. (sammanfattning) Uppsala : Univ., 2002. / Härtill 4 uppsatser.

Diss. (sammanfattning) Stockholm : Karol. inst., 2004. / Härtill 6 uppsatser.

Brazil is considered a holder country of a great biodiversity, which the popular use of medicinal plants contributes an important source to discovery the new active compounds. Plants of the family Bignoniaceae and Tabebuia genus are widely used in traditional medicine in several countries for the treatment of various diseases and have an excellent potential for scientific studies, which may result in the discovery of new compounds having therapeutic interest. In this context, evidence the need to assess the biological potential of Tabebuia aurea, investigate their cytotoxic, antimicrobial activity, antiradical, antiedematogenic and lead the phytochemical screening to identify classes of bioactive compounds. We evaluated two ethanolic extracts from flowers and leaves, both subject to cell viability assay Metiltetrazólio by the colorimetric method for assessing the presence of cytotoxicity. The antimicrobial activity was evaluated using the broth microdilution assay, which provided the minimum inhibitory concentration (MIC) of the extracts against microbial growth. We performed the test ear edema induced by capsaicin to determine the antiedematogenic action and the evaluation of antiradical activity, the test verifies that the scavenging capacity of free radical opposite to 2,2-difenil-1-picrilidazila (DPPH) radical. The cell viability assay showed that the leaves ethanolic extract showed no cytotoxicity, since the LC50 value was greater than the maximum concentration used (≥ 1,0 mg ml-1), while the flowers ethanolic extract had no cytotoxicity at concentrations ≤ 0,5 mg mL-1. The ethanol extracts of flowers and leaves of T. aurea showed antibacterial activity, especially toward those Gram-positive bacteria. The flowers ethanol extract proved to be active with bactericidal action against the strain of S. epidermidis at MIC of 0,06 mg mL-1 and the leaves ethanol extract moderately active against S. epidermidis (CIM: 0,25 mg ml-1) and S. aureus (MIC: 0,50 mg mL-1) with bacteriostatic action to both strains. Both extracts inhibited edema formation induced by capsaicin. Treatment with flowers ethanol extract showed a significant inhibition of edema of 40,50% and the ethanol extract of leaves of 41,73%. The ethanol extracts of T. aurea showed no antiradical activity against the DPPH radical. The plant species used was identified by the presence of organic acids, naphthoquinones, anthraquinones and saponins. These results scientifically prove the antiedematogenic potential of the species and its promising antibacterial activity, with no cytotoxicity. Representing security evidence on the therapeutic use of plant species in preclinical in vivo tests. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Brasil é considerado um país detentor de uma grande biodiversidade, no qual o uso popular de plantas medicinais contribui como importante fonte para a descoberta de novos compostos ativos. As plantas da família Bignoniaceae e do gênero Tabebuia são amplamente utilizadas na medicina tradicional de vários países, para o tratamento de diversas doenças e possuem um excelente potencial para estudos científicos, que podem resultar na descoberta de novos compostos com interesse terapêutico. Nesse contexto, evidenciou-se a necessidade de avaliar o potencial biológico de Tabebuia aurea, investigando sua atividade citotóxica, antimicrobiana, antirradicalar, antiedematogênica e conduzindo a prospecção fitoquímica para identificar as classes de compostos bioativos. Foram avaliados dois extratos etanólicos, um proveniente de flores e outro de folhas, ambos submetidos ao ensaio de viabilidade celular pelo método colorimétrico de Metiltetrazólio, para avaliar a presença de citotoxicidade. O potencial antimicrobiano foi avaliado com o teste de microdiluição em caldo, o qual forneceu a concentração inibitória mínima (CIM) dos extratos frente ao crescimento microbiano. Para determinar a ação antiedematogênica, realizou-se o teste de edema de orelha induzido por capsaicina e para a avaliação da atividade antirradicalar, o ensaio que verifica a capacidade sequestradora de radicais livres frente ao radical 2,2-difenil- 1-picrilidazila (DPPH). O ensaio de viabilidade celular revelou que o extrato etanólico das folhas não evidenciou citotoxidade, uma vez que a CL50 foi superior a concentração máxima utilizada (≥ 1,0 mg mL-1), enquanto que o extrato etanólico de flores não teve citotoxidade nas concentrações ≤ 0,5 mg mL-1. Os extratos etanólicos de flores e de folhas de T. aurea apresentaram atividade antibacteriana, principalmente, frente às bactérias Gram-positivas. O extrato etanólico de flores demonstrou-se ativo, com ação bactericida, frente à linhagem de S. epidermidis na CIM de 0,06 mg mL-1 e o extrato etanólico de folhas moderadamente ativo frente a S. epidermidis (CIM: 0,25 mg mL-1) e S. aureus (CIM: 0,50 mg mL-1), com ação bacteriostática para ambas as linhagens. Ambos os extratos inibiram a formação do edema induzido por capsaicina. O tratamento com o extrato etanólico de flores apresentou uma porcentagem de inibição do edema de 40,50% e o extrato etanólico de folhas de 41,73%. Os extratos etanólicos de T. aurea não apresentaram atividade antirradicalar frente ao radical DPPH. Foram idenficados na espécie vegetal avaliada a presença de ácidos orgânicos, naftoquinonas, antraquinonas e saponinas. Esses resultados comprovam cientificamente o potencial antiedematogênico da espécie e sua promissora atividade antibacteriana, com ausência de citotoxidade. Representando indícios de segurança na utilização terapêutica da espécie vegetal nos testes pré-clínicos in vivo.

Submitted by MARCIA ROVADOSCHI (marciar@unifra.br) on 2018-08-17T20:54:40Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AnaPaulaTasquettodaSilva.pdf: 2539140 bytes, checksum: 82d4a7a56c7dc9a95260cfcf38baddca (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T20:54:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_AnaPaulaTasquettodaSilva.pdf: 2539140 bytes, checksum: 82d4a7a56c7dc9a95260cfcf38baddca (MD5) Previous issue date: 2016-07-26 / The ascorbyl palmitate (AP) has wide application in pharmaceutical, medical and cosmetic products, however, it is easily degraded when used as a free molecule. To overcome this problem, nanostructures have been developed. With the advancement of new products employing nanotechnology, it becomes increasingly essential that in addition to their physical and chemical activity, biological tests are carried out to assess its efficacy and safety. Thus, this study aimed to develop, characterize and determine the physical-chemical stability of nanostructures containing ascorbyl palmitate and evaluate its biological activity in vitro. Lipid nanoparticles (LNAP) and nanoemulsions (NEAP) containing ascorbyl palmitate, and lipid nanoparticles (LNBC) and nanoemulsions (NEBC) without active, have been developed and characterized, and stability was assessed for 90 days (25 ± 2 °C and 5 ± 2 °C). Inicially, the LNAP have a content of 88.90%, pH 4.34, particle diameter of 86.41 nm and zeta potential of -12.20 mV. The NEAP initially presented with a content of 101.47%, pH 4.07, particle diameter of 236.01 nm and zeta potential of -42.43 mV. The NEAP were still characterized by Transmission Electronic Microscopy (TEM), showing spherical morphology. After, they were incorporated into semi-solid bases of Carbopol® Ultrez 10 NF the active in free form (GAP) and associated with nanostructures (GLNAP and GNEAP) and stored for 90 days, for the stability study, by quantifying the content active, determination of organoleptic characteristics and pH determinations. All formulations initially presented a homogeneous aspect and slightly acid pH, around 5.14 to GLNAP, 5.29 to GNEAP and 4.61 to GAP. We obtained a initial concentration of active to GLNAP of 84.89%, to GNEAP of 97.03% and to GPA of 100.48%. However, we observed a decrease in both formulations, in different temperatures, after 90 days of analysis; where at the end of this period, the GNEAP remained with a higher concentration of AP. Finally, we assessed cell viability (MTT), in peripheral blood mononuclear cells (PBMC), in VERO and B16F10 cell; genotoxicity (mitotic index and nuclear anomalies) in PBMC and melanin content in B16F10, for samples of NEAP, NEBC and free AP, in concentrations of 25; 50; 100 and 200 μM. The cell viability assay (MTT) were expressed as percentage of control. The results of the MTT assay after 72h, showed no reduction in cell viability for all concentrations tested for the NEAP, NEBC and free AP, in PBMC. To VERO and B16F10 cells there was a decrease in cell viability for NEAP and NEBC, at concentrations of 100 and 200 μM. By microscopic analysis did not metanucleares changes and chromosomal instabilities in concentrations of NEAP, NEBC and AP free, thus not showing the genotoxicity test applied were verified. According to the present results, it can be concluded that the NEAP showed a higher partial protection to the AP against the instability, and that the nanostructure non-cytotoxic. There was no chromosomal instability in the samples, not showing so genotoxicity. / O palmitato de ascorbila (PA) tem ampla aplicação em produtos farmacêuticos, médicos e cosméticos, no entanto, é facilmente degradado quando utilizado como uma molécula livre. Para superar este problema, nanoestruturas têm sido desenvolvidas. Com o avanço de novos produtos empregando a nanotecnologia, torna-se cada vez mais essencial que, além das suas propriedades físico-químicas, ensaios biológicos sejam realizados a fim de avaliar sua eficácia e segurança. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo desenvolver, caracterizar e determinar a estabilidade físico-química de nanoestruturas contendo palmitato de ascorbila e avaliar sua atividade biológica in vitro. Foram desenvolvidas e caracterizadas nanopartículas lipídicas (NLPA) e nanoemulsões (NEPA) contendo palmitato de ascorbila e nanopartículas lipídicas (NLBC) e nanoemulsões (NEBC) sem o ativo, sendo que a estabilidade foi avaliada durante 90 dias (25 ºC ± 2 ºC e 5 ºC ± 2 ºC). As NLPA apresentaram inicialmente um teor de 88,90%, pH 4,34, diâmetro de partícula de 86,41 nm e potencial zeta de -12,20 mV. As NEPA apresentaram inicialmente um teor de 101,47%, pH 4,07, diâmetro de partícula de 236,01 nm e potencial zeta de -42,43 mV. As NEPA ainda foram caracterizadas por Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET), demonstrando morfologia esférica. Posteriormente, foram incorporados em bases semissólidas de gel de Carbopol® Ultrez 10 NF o ativo na forma livre (GPA) e associado às nanoestruturas (GNLPA e GNEPA), sendo armazenados, por 90 dias, para estudo de estabilidade, através da quantificação do teor de ativo, determinação das características organolépticas e determinações de pH. Todas as formulações apresentaram inicialmente um aspecto homogêneo e pH levemente ácido, em torno de 5,14 para o GNLPA, 5,29 para o GNEPA e 4,61 para o GPA. Obteve-se uma concentração inicial de ativo para o GNLPA de 84,89%, para o GNEPA de 97,03%, e para o GPA de 100,48%. Contudo, foi possível observar uma diminuição em ambas as formulações, nas diferentes temperaturas, após 90 dias de análise; sendo que, ao final deste período, o GNEPA permaneceu com uma maior concentração de PA. Por fim, foram avaliados a viabilidade celular (MTT), em células mononucleares de sangue periférico (CMSP), células VERO e B16F10; genotoxicidade (índice mitótico e anomalias nucleares) em CMSP e o conteúdo de melanina, em B16F10, para as amostras de NEPA, NEBC e PA livre, nas concentrações de 25; 50; 100 e 200 μM. O ensaio de viabilidade celular (MTT) foi expresso em porcentagem do controle. Os resultados decorrentes do ensaio MTT, após 72 h, não demonstraram redução da viabilidade celular para todas as concentrações testadas de NEPA, NEBC e PA livre, em CMSP. Para as células VERO e B16F10 houve uma diminuição na viabilidade celular com as NEPA e NEBC, nas concentrações de 100 e 200 μM. Pela análise microscópica, não foram verificadas alterações metanucleares e instabilidades cromossômicas nas concentrações testadas das NEPA, NEBC e PA livre, não evidenciando assim genotoxicidade pelo teste aplicado. De acordo com os resultados obtidos neste trabalho, pode-se concluir que as NEPA demonstraram uma maior proteção parcial ao PA frente à instabilidade, bem como não demonstraram efeitos citotóxicos. Não foi verificada instabilidade cromossômica nas amostras, não evidenciando assim, genotoxicidade.

Globally, methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has become increasingly difficult to manage in the clinic and new antibiotics are required. The structure activity relationship (SAR) study presented in this thesis forms part of an international collaborative effort to identify potent and selective inhibitors of an MRSA pyruvate kinase (PK) enzyme target. In earlier work the known marine natural product bromodeoxytopsentin (1.6), isolated from a South African marine sponge Topsentia pachastrelloides, exhibited selective and significant inhibition of MRSA PK (IC₅₀ 60 nM). Accordingly bromodeoxytopsentin provided the initial chemical scaffold around which our SAR study was developed. Following a comprehensive introduction, providing the necessary background to the research described in subsequent Chapters, this thesis has been divided into three major parts. Part one (Chapter 2) documents the synthesis of two natural imidazole containing topsentin analogues 1.40, 1.46, five new synthetic analogues 1.58—1.61, 2.104. In the process we developed a new method for the synthesis of topsentin derivatives via selenium dioxide mediated oxidation of N-Boc protected 3-acetylindoles to yield glyoxal intermediates which were subsequently cyclized and deprotected to yield the desired products. Interestingly we were able to demonstrate a delicate relationship between the relative equivalents of selenium dioxide and water used during the oxidation step, careful manipulation of which was required to prevent the uncontrolled formation of side products. Synthetic compounds 1.40, 1.46, 1.58—1.61 were found to be potent inhibitors of MRSA PK (IC₅₀ 238, 2.1, 23, 1.4, 6.3 and 3.2 nM respectively) with 1000-10000 fold selectivity for MRSA PK over four human orthologs. In the second part of this thesis (Chapter 3) we report the successful synthesis of a cohort of previously unknown thiazole containing bisindole topsentin analogues 1.62—1.68 via a Hantzsch thiazole synthesis. Bioassay results revealed that these compounds were only moderate inhibitors of MRSA PK (IC₅₀ 5.1—20 μM) which suggested that inhibitory activity was significantly reduced upon substitution of the central imidazole ring of topsentin type analogues with a thiazole type ring. In addition in Chapter 3 we describe unsuccessful attempts to regiospecifically synthesize oxazole and imidazole topsentin analogues through a similar Hantzsch method. As a consequence of our efforts in this regard we investigated three key reactions in depth, namely the synthesis of 2.2, 3.38, 3.40, 3.41 via α-bromination of 3-acetylindole and the synthesis of indolyl-3-carbonylnitriles 2.13, 3.45—3.47 and α-oxo-1H-indole-3-thioacetamides 3.48—3.51. The investigation of the latter led to the isolation and elucidation of two anomalous N,N-dimethyl-1H-indole-3-carboxamides 3.52 and 3.53. Finally the third part of this thesis (Chapter 4) deals with in silico assessment of the binding of both the imidazole and thiazole containing bisindole alkaloids to the MRSA PK protein which initially guided our SAR studies. In this chapter we reveal that there appears to be no correlation between in silico binding predictions and in vitro MRSA PK inhibitory bioassay data. Superficially it seems that binding energy as determined by the docking program used for these studies correlated with the size of the indole substituents and did not reflect IC₅₀ MRSA PK inhibitory data. Although this led us to computationally explore possible alternative binding sites no clear alternative has been identified.

No description available.

Previous studies have demonstrated that the feeding behaviour of Lumbriculus variegatus may be significantly inhibited during exposure to toxic substances. The potential use of an in situ sediment bioassay, using L.variegatus post-exposure feeding inhibition as an endpoint, was investigated. The bioassay consisted of exposing animals in the field for a six-day exposure period and feeding rates were measured immediately afterwards over a twenty-four hour post-exposure period. The bioassay methodology developed in the laboratory produced a consistent baseline response that was reliable and repeatable. Endpoint sensitivity was demonstrated under laboratory conditions, where bioassay organisms exhibited delayed recovery from feeding inhibition after previous exposure to sediment-associated contaminants. The apparent insensitivity of the bioassay to sediment-associated metals means that the technique should only be used as part of a suite of bioassays that employ representative deposit feeders. The ecological relevance of the bioassay endpoint was also demonstrated by comparing short-term measures of post-exposure feeding inhibition with the longer-term effects of a toxicant on L.variegatus populations. The bioassay methodology was successfully adapted for in situ use. Post-exposure feeding inhibition was detected at contaminated field sites. However, the consistent baseline response produced in the laboratory could not be replicated during deployments of the bioassay at upstream (“clean”) field sites. Increased environmental “noise” may have been a result of a number of confounding factors that could limit the sensitivity of the bioassay endpoint if not adequately controlled. Despite the above concerns, the in situ bioassay is suggested to represent a useful tool, which uses a more realistic field exposure scenario to investigate the effects of sediment-associated toxicants with an important functional component of aquatic ecosystems.

A Câmara de Topo Aberto, CTA, foi adaptada para gerar um gradiente da concentração da poluição atmosférica ambiente por material particulado fino, capaz de ser utilizado em experimentos toxicológicos. Uma vez que os aerossóis urbanos são composições quimicamente complexas, com comprovada toxicidade na saúde e mecanismos de ação sobre o homem ainda pouco conhecidos, a utilização conjunta da CTA com sistemas sentinela simples e de baixo custo, capazes de detectar efeitos tóxicos agudos, constituem alternativa para avaliação desse ambiente. A Câmara de Topo Aberto, CTA, foi documentada em termos de dimensões, especificações e características operacionais, e avaliada durante 60 dias. A concentração ambiental média diária de material particulado fino no período foi de 28,6 ug/m3 e a redução média dessa concentração obtida no interior da CTA foi de 75%. Tradescantia clone 4430, KU20 e pallida cv. Purpurea foram colocadas dentro e fora da CTA para avaliar a resposta de bioensaios nesse gradiente de exposição. O protocolo de mutação em inflorescência (Trad-MCN) foi aplicado nos três espécimes vegetais, e detectou uma menor quantidade de micronúcleos no interior da CTA (p=0,002). Nos clones foram aplicados os protocolos de mutação em pêlo estaminal (Trad-SHM) e aborto em grão de pólen, tendo sido detectada menor resposta para as plantas colocadas no interior da CTA (p=0,007 para pêlo estaminal e p= 0,041 para grão de pólen). Folhas dos três espécimes foram coletadas e submetidas à análise por fluorescência de raio-X. Foi detectada redução na concentração de titânio nas folhas coletadas dentro da CTA (p=0,049). A análise fatorial identificou a presença de fontes de solo e automotiva, com menor concentração observada nas folhas colhidas dentro da CTA. A utilização da CTA com bioensaios no ambiente urbano mostrou ser capaz de detectar efeitos agudos em plantas frente ao gradiente de exposição obtido. / Open Top Chamber was modified to obtain a differential concentration on environmental pollution capable to be used on toxicological studies. Since urban aerosol constitutes a very complex chemical composition, with well known toxic action on health but requesting clarification about their biological mechanisms, the use of Open Top Chamber with low cost sentinel systems seems to be an alternative to detect acute toxic effects on such environment. Open Top Chamber was described on its dimensional and operational characteristics, and operated on a 60 days campaign. During this campaign the daily average concentration of fine particles was 28,6 ug/m3 and inside the Open Top Chamber it was obtained a reduction about 75% on such concentration. Tradescantia clone 4430, KU20 and pallida cv. Purpurea were placed inside and outside the chamber to evaluate bioassay response on each pollution concentration. The Trad-MCN bioassay detected a lower micronuclei count on plants inside the chamber (p=0,002). Clones were submitted to stamen hair mutation (Trad-SHM) and pollen mother cell abortion protocols, detecting also a lower effect on plants inside the chamber (p=0,007 for stamen hair mutation and p=0,041 for pollen mother cells abortion). Leaves of all spices were collected and submitted to X-ray fluorescence analysis. The titanium concentration was lower on samplers collected inside the chamber (p=0,049). The factorial analysis identified the presence of elements from soil and automotive sources with a lower concentration on samples collected inside the chamber. The combined use of Open Top Chamber with bioassay on urban environment is capable to detect acute effects on plants when submitted to the obtained particulate concentration reduction.

A macroprolactinemia é condição freqüente na hiperprolactinemia e em geral, sem impacto clínico. Os dados sobre a atividade biológica da macroprolactina (bbPRL) são controversos e baseados em bioensaio heterólogo com células de rato Nb2. A atividade biológica da bbPRL é observada in vitro e não in vivo, provavelmente porque seu alto peso molecular evita sua passagem pelos capilares. A bioatividade da bbPRL talvez varie de acordo com a especificidade do receptor de prolactina (PRLR). Avaliamos a bioatividade da bbPRL de indivíduos macroprolactinêmicos (Grupo I, n = 18) e da PRL monomérica (mPRL) de pacientes hiperprolactinêmicos sem bbPRL (Grupo II, n = 5) em Nb2 e em células Ba/F-LLP, transfectadas com o PRLR humano. Enquanto ambos ensaios apresentam resultados similares para a atividade de mPRL, nossos resultados indicam que a atividade da bbPRL é presente em ensaio heterólogo e não em ensaio homólogo. O ensaio Ba/F-LLP é sensível e apresenta melhor correlação com a atividade in vivo da bbPRL / Macroprolactinemia is a frequent finding in hyperprolactinemic individuals, usually without clinical impact. Data on biological activity of macroprolactin (bbPRL) is mostly based on a heterologous bioassay (Nb2 cell). Biological activity of bbPRL observed in vitro but not in vivo maybe due to its high molecular weight preventing its passage through capillary barrier. Alternatively, bbPRL bioactivity may differ depending on the PRL receptor species specificity. BbPRL from macroprolactinemic individuals and monomeric PRL (mPRL) from hyperprolactinemic patients without macroprolactinemia were tested in two bioassays: Nb2 and in Ba/F-LLP, which expresses human prolactin receptor. While both bioassays achieve similar results considering mPRL activity, our results indicate that bbPRL displays activity in a heterologous but not in a homologous bioassay, consistently with the apparent absence of bbPRL bioactivity in vivo

A inibição da secreção pulsátil de prostaglandina F2alfa (PGF2α) uterina (atividade antiluteolítica) pela ação do interferon-tau (IFN-τ) trofoblástico, mantêm a secreção de progesterona pelo corpo lúteo, fundamental ao estabelecimento da gestação nas fêmeas bovinas. Supõe-se que essa atividade antiluteolítica esteja presente no microambiente uterino bovino, portanto objetivou-se estudá-la. Dada à inexistência de ensaios que meçam especificamente a atividade antiluteolítica propôs-se elaborar um ensaio biológico para tal. Observou-se que células BEND tratadas com forbol 12,13 dibutirato (PdBu) por 6 horas em cultivo sintetizam PGF2α e tal síntese é inibida na presença de interferon-tau recombinante bovino (rbIFN-τ). Em outro estudo definiu-se que 25 ng/mL de PdBu promove estímulo consistente à síntese de PGF2α. A partir da análise de regressão do percentual de inibição à síntese de PGF2α estimulada por PdBu, em função da concentração de interferon-tau recombinante (rbIFN-τ), calculou-se a concentração de rbIFN-τ que inibiu em 50% a síntese máxima de PGF2α (observada na presença apenas de PdBu). Definiu-se a atividade antiluteolítica como o recíproco da concentração proteica requerida para atingir esse percentual de inibição (50%), e que a solução com uma unidade antiluteolítica é aquela que com um micrograma exerça tal efeito. Caracterizou-se a utilização dessa isoforma como padrão do ensaio antiluteolítico e calculou-se a atividade antiluteolítica do mesmo, 9,61 x 10² UA/µg de proteína. Em estudo seguinte observou-se a modulação da síntese de PGF2α estimulada por PdBu, em função da concentração proteica de um pool de lavados uterinos ou meios condicionados por conceptos obtidos no décimo sétimo dia de gestação. Notou-se que para cada fluido testado há um intervalo de concentrações onde observa-se aumento linear na atividade antiluteolítica em função do acréscimo proteico. A partir da análise por regressão linear desse evento calculou-se a atividade antiluteolítica de cada amostra. Para o pool de lavados uterinos calculou-se 1,63 x 10-¹ UA/ µg de proteína, e para o pool de meios condicionados por conceptos 1,66 x 10² UA/µg de proteína. Estes estudos permitiram desenvolver uma metodologia para observar a atividade antiluteolítica em humores biológicos. Aplicando o ensaio antiluteolítico estudou-se a atividade antiluteolítica presente em lavados uterinos obtidos durante o período crítico de fêmeas bovinas prenhes ou cíclicas ( respectivamente, 56,2 e 33,9 UA/µg de proteina), notou-se que a atividade antiluteolítica foi maior no microambiente uterino de fêmeas gestantes. Tal resultado associado à potente atividade antiluteolítica observada para os meios condicionados por conceptos indicam a participação do IFN-τ secretado pelo concepto na modulação da síntese de PGF2α. Entretanto, observou-se atividade antiluteolítica nos lavados uterinos obtidos de fêmeas cíclicas, o que indica que a síntese de PGF2α estimulada por PdBu pode ser modulada por outras proteínas, além do IFN-τ. Sugere-se que a atividade antiluteolítica, observada através do ensaio biológico proposto, é resultante da atuação de fatores estimulatórios e inibitórios presentes nos humores biológicos. Conclui-se que a atividade antiluteolítica pode ser mensurada pelo ensaio biológico proposto, no entanto outros estudos devem ser conduzidos para correlacionar essa atividade com a atuação do IFN-τ. / The inhibition of pulsatile secretion of PGF2α mediated by interferon-tau (IFN) is fundamental on the maternal recognition of pregnancy, maintaining the progesterone secretion by corpus luteum. Therefore the measurement of interferon activity in the uterine microenvironment was studied. Due to a lack of assays those measure specific antiluteolytic capacities we suggest develop a biological assay for it. In this research we observed that BEND cells treated with PdBu synthesize PGF2α, wich is inhibited by the presence of recombinant bovine interferon-tau (rbIFN-τ). Following we defined 25ng/mL as PdBu (phorbol 12,13 dibutirate) stimulus at the PGF2α synthesis to be applied in this biological assay. Studies about the modulation of PdBu-stimulated PGF2α synthesis by the rbIFN-τ validate the use of this isoform as a reference, defining a standard-curve and allowing estimating the antiluteolytic activity of 9.61 x 10² antiluteolytic units per microgram (UA/µg) of protein. Further, we observed the modulation of PdBu-stimulated PGF2α synthesis exerted by a pool of uterine flushings or conceptus conditioned medium, and for each tested fluid, there is a range of concentrations where is observed an increasing rate on the inhibition of PGF2α synthesis. A restrict analysis on this concentrations range shows a linear behavior and allow calculate the antiluteolytic activity of each sample1.63 x 10-¹ UA/ µg of protein from a pool of uterine flushings, and 1.66 x 10² UA/µg from conceptus conditioned medium. These studies validated a method to observe the antiluteolytic activity from biological fluids. Using the antiluteolytic assay, we studied the antiluteolytic activity present in uterine flushings obtained during the critic period by pregnant or cyclic bovine females cíclicas (respectively 56,2 e 33,9 UA/µg of protein). We observed higher antiluteolytic activity from pregnant uterine microenvironment than in cyclic uterine microenvironment. This result linked with the high antiluteolytic activity observed to conceptus conditioned medium, suggest the participation of IFN-τ secreted by the conceptus in the PGF2α synthesis modulation. However, we observed the antiluteolytic activity in uterine flushing obtained by cyclic cows, suggesting that the PGF2α synthesis could be modulated by another proteins. We believe that the antiluteolytic activity, observed by the antiluteolytic assay, ensue the action of inhibitors or stimulators factors in the biological fluids. We conclude that the antiluteolytic assay could be measured by the proposed biological assay, nevertheless another studies must be done in order to correlate this activity with the interferon action.