FundaÃÃo Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Cientifico e TecnolÃgico / O presente trabalho descreve os resultados da avaliaÃÃo de duas cepas de bactÃrias isoladas a partir de um efluente contaminado com Ãleo, para degradar derivados do petrÃleo e produzir biossurfactantes. AtravÃs de estudos de suas caracterÃsticas morfolÃgicas, culturais, bioquÃmicas e fisiolÃgicas, as bactÃrias selecionadas, nomeadas preliminarmente cepa 03 e cepa 04, foram identificadas como Acinetobacter spp. e Bacillus spp., respectivamente. A capacidade biodegradativa dessas bactÃrias foi avaliada cultivando-as em meio mineral mÃnimo, contendo, sempre, um dos hidrocarbonetos a serem testados, como Ãnica fonte de carbono e energia. As duas bactÃrias degradaram o glicerol, a gasolina, o querosene e o diesel e, produziram biossurfactantes. De maneira geral, as bactÃrias mostraram melhor desempenho na presenÃa de glicerol, como confirmado pelas medidas de densidade celular e atividade emulsificante, enquanto o diesel foi o pior substrato para ambas as bactÃrias. A produÃÃo de biossurfactante foi avaliada medindo-se a sua capacidade para emulsificar o querosene. AtravÃs dessa tÃcnica, encontrou-se um porcentual de 50% de emulsificaÃÃo para os biossurfactantes produzidos pelas duas bactÃrias a partir de glicerol. O Bacillus spp., praticamente, nÃo cresceu e nÃo produziu biossurfactante quando cultivado em meio com diesel, sobrevivendo, contudo, na forma de esporos. A suplementaÃÃo dessa cultura com extrato de levedura 0,04%, entretanto, promoveu a estimulaÃÃo do crescimento e da produÃÃo de biossurfactantes, atingindo um percentual de 95% de emulsificaÃÃo. Os resultados das anÃlises dos biossurfactantes extraÃdos a partir das culturas com glicerol, por espectroscopia infravermelha e anÃlises de carboidratos e proteÃnas, sugerem as classes dos lipossacarÃdios e polipeptÃdios, para os biossurfactantes produzidos pelas bactÃrias Acinetobacter spp. e Bacillus spp., respectivamente. As duas bactÃrias se mostraram suscetÃveis ao calor, sendo destruÃdas à temperatura de 46 ÂC, 1 ppm de hipoclorito de sÃdio e pH abaixo de 5,0. Por outro lado, resistiram a 5% de NaCl, uma caracterÃstica desejÃvel para utilizaÃÃo dessas cepas em situaÃÃes de biorremediaÃÃo de ambientes marinhos contaminados com Ãleo. / The present work describes the results of the evaluation of two bacteria strains isolated from the oil polluted effluent, to degrade petroleum derivatives and to produce biosurfactants. Morphologic, cultural, biochemical and physiologic studies showed that these bacteria, previously denominated strain 03 and strain 04, could be identified as Acinetobacter spp. and Bacillus spp., respectively. The biodegradation potential of these bacteria was evaluated by cultivating them in mineral broth, containing, glycerol, gasoline, kerosene or diesel as the only source of carbon and energy. Both bacteria degraded glycerol, gasoline, kerosene and diesel and produced biosurfactants. In general, the bacteria showed better performances at glycerol presence, as confirmed by the measures of cellular density and emulsificant activity, while the diesel was the worst substrate to both bacteria. The biosurfactant production was evaluated by measuring bacteria capacity for emulsificating kerosene. The results showed an emulsification of 50% for the biosurfactants produced from glycerol by the bacteria. Bacillus spp., practically, did not grow and did not produce biosurfactant when cultivated in medium with diesel, surviving, however, in the spore form. The supplementation of that culture with 0.04 % of yeast extract, however, stimulated the growth and biosurfactants production, reaching 95% of emulsification. The results of the analyses of the biosurfactants extracted from the cultures with glycerol, by infrared spectroscopy and carbohydrate and protein analyses, suggest the classes of the liposaccharides and polypeptides for the biosurfactants produced by the bacteria Acinetobacter spp. and Bacillus spp., respectively. These bacteria were shown to be susceptible to heat, being destroyed at the temperature of 46 ÂC, at 1,0 mg/L of sodium hypochloride and pH below 5.0. On the other hand, they resisted to 5% NaCl, a desirable characteristic for use in marine bioremediation programs.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / This study aimed to evaluate rainy and dry season effect on plasma seminal composition and semen quality of 17 crossbred male goats raised in tropical region and to investigate if the biochemical composition of seminal plasma (SP) is correlated to semen quality in relation to the season of the year. Other objective of this experiment was to evaluate if the phospholipase A2 (PLA2) activity level in the SP affects the ejaculate and epididymal spermatozoa. This study was divided into three experiments: in the first phase, seventeen male goats were used and then eight animals with low or high PLA2 activity in SP were separated to the second and third phases. In the first experiment, the ejaculates were collected in artificial vagina, weekly, the SP was separated to evaluate the biochemical parameters and biweekly for quality semen determination. The sperm was diluted in coconut water added 2,5% of egg yolk (200 x 106 sperm/mL) and stored at 4 oC for 48 hours. The vigor (0-5) and motility (1-100%) were measured at 2, 24 and 48 hours after cooling by thermoresistance test (TRT). Slides of sperm were made during TRT and 200 cells were classified as normal or abnormal cellular morphology. The fructose, citric acid, total proteins, calcium, phosphorus, magnesium level and the PLA2 activity level in the SP were measured. In the second experiment, eight bucks were separated in two groups according to PLA2 activity level in SP, in group I (<6.7U/mL) and group II (> 11.0 U/mL). The semen was obtained by artificial vagina, diluted and separate in two samples: the first aliquot was the control treatment (nonwashed semen) and the second aliquot was centrifuged at 550 g for 10 minutes to remove the SP (washed semen). In the third experiment, the semen of the eight bucks was collected and the SP obtained by centrifugation. The SP of each buck was added to aliquots of epididymal spermatozoa pool collected from another male goat and a ninth aliquot was added only to diluent (control). After that, the final dilution (200 x 106 sperm/mL) was made in all samples. In the second and third experiments, after the treatment and final dilution, the semen samples were stored at 4 oC for 48 hours and an aliquot was incubated at 38 oC and evaluated to vigor and motility at 0, 2, 12, 24 and 48 hours of cooling. Slides of sperm were made during TRT and 200 cells were classified as normal or abnormal morphology. In all experiments, the semen quality decreased with time (p<0,001). In the first experiment, the semen obtained in the rainy season was better quality than semen collected in the dry season of the year. In addition, the fructose, citric acid, total proteins, phosphorus and magnesium levels in the SP were higher in rainy season, while the PLA2 activity was lower in this period. The fructose, citric acid and total proteins concentration showed positive correlations to vigor and motility in both seasons. The total sperm morphology alterations (TSMA) showed negative correlation with fructose level and positive correlations with citric acid, total proteins concentrations and PLA2 activity level. In the second experiment, the treatment (washed semen) improved the seminal quality, mainly in washed semen of the group I. The PLA2 activity level showed no effect on sperm performance in the ejaculate spermatozoa, except at 48h in washed semen and at 24h in the non-washed semen. Finally, in the third experiment, the SP addition on epididymal spermatozoa decreased the seminal parameters and this effect was higher in group II. However, the TSMA were lower when the PLA2 activity was higher. These results indicated that male goats raised in tropical region showed better seminal quality in the rainy season. In addition, the fructose, citric acid, total proteins, phosphorus and magnesium concentration levels in the SP were higher in rainy season, while the PLA2 activity was lower in this period. The correlations between the seminal and biochemical parameters in SP could indicate that the differences in the semen parameters in the rainy and dry season occurred due the biochemical parameter variations. The SP addition during the semen storage at 4 oC decreased the seminal quality. However the PLA2 activity level was not a determinant factor of the seminal quality in the ejaculate spermatozoa. Therefore, it cannot be used as an indicative of the spermatic quality of male goats raised in tropical region / Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da Ãpoca chuvosa e seca do ano sobre a composiÃÃo do plasma seminal (PS) e os parÃmetros seminais de 17 caprinos sem padrÃo racial definido (SPRD), criados em clima tropical, alÃm de avaliar se a composiÃÃo bioquÃmica do PS apresenta correlaÃÃo com os parÃmetros seminais, em funÃÃo da Ãpoca do ano, assim como, investigar se o nÃvel de atividade da fosfolipase A2 (FLA2) no PS de caprinos pode ser utilizado como indicativo da qualidade espermÃtica e se esse nÃvel exerce influÃncia na preservaÃÃo dos espermatozÃides ejaculados e epididimÃrios quando conservados a 4 ÂC, por 48 horas. O estudo foi realizado em trÃs etapas: na primeira foram utilizados dezessete machos caprinos e a partir desta, oito bodes com diferentes nÃveis de atividade de FLA2 no PS foram selecionados para realizaÃÃo da segunda e terceira etapas. No primeiro experimento durante a Ãpoca chuvosa e seca, os ejaculados dos animais foram coletados semanalmente, em vagina artificial, para avaliaÃÃo bioquÃmica do PS e a cada 14 dias para determinaÃÃo dos parÃmetros seminais. O sÃmen foi diluÃdo em Ãgua de coco-2,5% gema (200 x 106 sptz/mL), resfriado a 4 ÂC por 48 horas e avaliado o vigor e a motilidade Ãs 2, 24 e 48 horas de resfriamento (T2, T24 e T48), pelo teste de termorresistÃncia lento (TTR). EsfregaÃos do sÃmen diluÃdo foram confeccionados durante o TTR e 200 cÃlulas foram avaliadas e classificadas morfologicamente em normais ou anormais. Determinaram-se ainda as concentraÃÃes de frutose, Ãcido cÃtrico, proteÃnas totais, Ca, P, MG e nÃvel de atividade da FLA2. No segundo experimento, oito caprinos divididos, em funÃÃo do nÃvel de atividade da FLA2 no PS em: grupo I (<6,70 U/mL) e o grupo II (>11,00 U/mL). O sÃmen foi coletado, diluÃdo e dividido em duas alÃquota : a primeira constituiu o tratamento controle (sÃmen nÃo lavado) e a segunda foi centrifugada para remoÃÃo do PS (sÃmen lavado). No terceiro experimento, o sÃmen dos oito animais foi coletado e centrifugado para recuperaÃÃo do PS e adicionados a alÃquotas de um Ãnico âpoolâ de espermatozÃides epididimÃrios obtidos de caprinos castrados cirurgicamente. Uma nona alÃquota foi adicionada apenas de diluidor (grupo controle). Em seguida, procedeu-se a diluiÃÃo final em todas as amostras utilizando o mesmo diluidor. No segundo e terceiro experimentos, apÃs a realizaÃÃo dos tratamentos e diluiÃÃo final, o sÃmen foi resfriado a 4 ÂC por atà 48 horas e amostra de cada tratamento foi avaliada pelo TTR Ãs 0 (fresco), 2, 12, 24 e 48 horas de resfriamento. EsfregaÃos do sÃmen foram confeccionados para avaliaÃÃo da morfologia espermÃtica. Em todos os experimentos, a qualidade espermÃtica diminuiu à medida que se prolongou o tempo de preservaÃÃo (p < 0,001). No experimento 1, o sÃmen apresentou qualidade superior na Ãpoca chuvosa e tambÃm as concentraÃÃes de frutose, Ãcido cÃtrico, proteÃnas totais, P e Mg foram maiores nesta Ãpoca. A FLA2 apresentou menor atividade na Ãpoca chuvosa (p < 0,05). A concentraÃÃo de frutose, Ãcido cÃtrico e proteÃnas totais mostraram correlaÃÃes positivas com o vigor e a motilidade e negativas com a TDM, nas duas Ãpocas. Em relaÃÃo Ãs alteraÃÃes morfolÃgicas totais (AMT), a concentraÃÃo de frutose mostrou correlaÃÃes negativas, enquanto as de Ãcido cÃtrico, proteÃnas totais e atividade da FLA2, positivas. Os nÃveis de fÃsforo no PS apresentaram correlaÃÃo com os parÃmetros seminais apenas na Ãpoca seca, sendo negativa para vigor, motilidade e AMT e positiva para TDM. A concentraÃÃo de Mg correlacionou-se positivamente com a motilidade na Ãpoca chuvosa e AMT na seca. No segundo experimento, o tratamento influenciou a qualidade seminal principalmente no grupo I, sendo o desempenho espermÃtico superior no sÃmen lavado. O nÃvel de atividade da FLA2 nÃo afetou a qualidade dos espermatozÃides ejaculados, exceto em T48 do sÃmen lavado e T24 do sÃmen nÃo lavado. Enquanto no terceiro experimento, a adiÃÃo do PS aos espermatozÃides epididimÃrios diminuiu a qualidade espermÃtica e este efeito foi mais pronunciado quando o nÃvel de atividade de FLA2 foi maior. Contudo, no que se refere e AMT, a adiÃÃo do PS foi benÃfica, reduzindo o nÃmero de alteraÃÃes. Os resultados do presente estudo indicam que caprinos criados em clima tropical apresentam melhor qualidade espermÃtica no perÃodo chuvoso, alÃm das concentraÃÃes de frutose, acido cÃtrico, proteÃnas totais, P e Mg serem mais elevados nesta Ãpoca, enquanto a atividade da FLA2 foi menor neste perÃodo. As correlaÃÃes entre os parÃmetros seminais e a composiÃÃo bioquÃmica do PS podem indicar que as diferenÃas detectadas quanto à qualidade espermÃtica entre as Ãpocas do ano deve-se justamente Ãs variaÃÃes na concentraÃÃo destes componentes. A presenÃa do PS durante a conservaÃÃo do sÃmen caprino a 4 ÂC reduziu a qualidade espermÃtica, contudo o nÃvel de atividade da FLA2 nÃo foi um fator determinante da qualidade seminal para os espermatozÃides ejaculados, por isso, nÃo deve ser utilizado como indicativo de qualidade espermÃtica de caprinos criados em regiÃo de clima tropical

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / As doenÃas cardiovasculares (CVDs) compreendem um amplo espectro de doenÃas do coraÃÃo e vasos sanguÃneos (artÃrias e veias), entre as quais se incluem a doenÃa das artÃrias coronÃrias, o ataque cardÃaco, a angina, a sÃndrome coronariana aguda, o aneurisma da aorta, arritmias cardÃacas, a doenÃa cardÃaca congÃnita, a insuficiÃncia cardÃaca e a doenÃa cardÃaca reumÃtica. Entre os principias fÃrmacos que tratam as doenÃas cardiovasculares estÃo: (i) as estatinas, que atuam inibindo a 3-hidroxi-3-metilgluratil coenzima A (HMG-CoA) redutase no processo de conversÃo da HMG-CoA em mevalonato, numa das etapas da biossÃntese do colesterol. Observa-se em ensaios clÃnicos que a aÃÃo das estatinas pode diminuir os nÃveis de colesterol de baixa densidade (LDL) entre 20\% e 60\%, reduzindo os eventos coronarianos em atà 1/3 no perÃodo de cinco anos; (ii) a aspirina, com a qual hà mais de 400 preparaÃÃes nos EUA e se produz cerca de 20 mil toneladas anualmente. ApÃs mais de um sÃculo de prÃtica clÃnica, a aspirina continua sendo a droga antitrombÃtica, antitÃrmica, analgÃsica e antiproliferativa mais amplamente recomendada. Ela age bloqueando a biossÃntese de hormÃnios inflamatÃrios prostanÃides atravÃs da inibiÃÃo das enzimas ciclooxigenase COX-1 e COX-2; (iii) os anti-hipertensivos, para os quais a Enzima Conversora de Angiotensina (ECA) à o principal alvo (inibidores da ECA estÃo no mercado a mais de 20 anos) visando o combate das pressÃes arteriais elevadas, que provocam alteraÃÃes nos vasos sanguÃneos e na musculatura do coraÃÃo, e levam a hipertrofia do ventrÃculo esquerdo do coraÃÃo, acidente vascular cerebral, infarto do miocÃrdio, morte sÃbita, insuficiÃncias renal e cardÃaca, etc. A hipertensÃo arterial (HTA) ou hipertensÃo arterial sistÃmica (HAS), conhecida popularmente como pressÃo alta, à uma das doenÃas com maior prevalÃncia no mundo moderno. A ECA atua na regulaÃÃo da pressÃo sanguÃnea via conversÃo do decapeptÃdeo angiotensina I no potente vasopressor angiotensina II e tambÃm pela inativaÃÃo da bradicinina, sendo componente central do Sistema Renina-Angiotensina-Aldeosterona (SRAA), que controla a pressÃo sanguÃnea e tem forte influÃncia nas funÃÃes relacionadas ao coraÃÃo e os rins, bem como na contraÃÃo dos vasos sanguÃneos. Nesta tese realiza-se um estudo da bioquÃmica quÃntica de estatinas (atorvastina, rosuvastatina, cerivastatina, mevastatina, sinvastatina e fluvastatina), da aspirina/bromoaspirina e de anti-hipertensivos (captopril, enalapril, lisinopril, ramipril, trandolapril e perindopril) levando-se em conta dados cristalogrÃficos dos seus sÃtios de ligaÃÃo nas proteÃnas HMGR, COX-1 (o da aspirina foi simulado partindo-se dos dados da bromoaspirina) e ECA, respectivamente. As simulaÃÃes computacionais foram realizadas considerando-se a Teoria do Funcional de Densidade (DFT) na aproximaÃÃo da densidade local (LDA) e funcional de troca e correlaÃÃo PWC, com energia de interaÃÃo entre os resÃduos das proteÃnas circunscritos ao sÃtio de ligaÃÃo de raio r e os fÃrmacos calculada atravÃs do mÃtodo de fracionamento molecular com capas conjugadas (MFCC). Os resultados obtidos para as estatinas sugerem que: (i) as mais (menos) eficazes sÃo a atorvastatina e a rosuvastatina (sinvastatina e fluvastatina), o que està de acordo com a clÃnica e valores dos seus Ãndices de concentraÃÃes inibitÃrias IC50; (ii) sÃtios de ligaÃÃo com raios de pelo menos 12 à (alÃm do raio de 9,5 à sugerido pela anÃlise estrita de dados cristalogrÃficos) devem ser considerados para que resÃduos importantes como E665, D767, e R702 sejam considerados para que as eficiÃncias das estatinas sejam corretamente explicadas. Para a aspirina/bromoaspirina utilizou-se um refinamento quÃntico de segunda ordem dos dados cristalogrÃficos para se demonstrar que a energia de ligaÃÃo de ambos com a COX-1 sÃo aproximadamente a mesma, o que explica resultados experimentais de IC50 similares. A existÃncia de resÃduos atrativos e resulsivos à destacada, mostrando-se que Arg120 à o resÃduo que mais atrai o Ãcido salicÃlico apÃs acetilaÃÃo da Ser530, seguido de Ala527, Leu531, Leu359 e Ser353; por outro lado, Glu524 à o resÃduo repulsivo mais efetivo (intensidade comparÃvel ao Arg120), nunca tendo sido antes considerado como resÃduo importante no sÃtio de ligaÃÃo da aspirina/bromoaspirina na COX-1. Finalmente, no caso dos anti-hipertensivos, obtÃm-se que à necessÃrio se considerar raios do sÃtio de ligaÃÃo de 16 à para se obter que o lisinopropil e o ramipril (trandolapril e perindopril) apresentam as maiores (menores) energias de ligaÃÃo, o que explica a maior (menor) constante de inibiÃÃo dos mesmos entre os anti-hipertensivos estudados para a ACE da Drosophila melanogaster.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Os valores de referÃncia de exames laboratoriais sÃo definidos com base em critÃrios estatÃsticos para uma amostra aleatÃria de indivÃduos. Os parÃmetros de referÃncia publicados sÃo provenientes de uma variedade de amostras, incluindo doadores de sangue, participantes de exames admissionais e voluntÃrios normais que fazem exames de rotina para ensaios clÃnicos. Esta pesquisa à do tipo documental com abordagem quantitativa. A amostra foi constituÃda por 1.947 exames laboratoriais dos voluntÃrios sadios, de ambos os sexos, com idade mÃdia de 25 anos, que participaram de ensaios clÃnicos na UNIFAC, entre os anos de 1999 e 2003. Para a realizaÃÃo do estudo, foram colhidos dos prontuÃrios as seguintes informaÃÃes: dados de identificaÃÃo do voluntÃrio, alÃm dos parÃmetros hematolÃgicos e bioquÃmicos. Foram investigados setenta e cinco ensaios clÃnicos, tendo os resultados demonstrado diferenÃa estatÃstica entre os sexo, para a maioria dos parÃmetros analisados. As faixas de referÃncia foram calculadas pelo mÃtodo dos percentis, sendo encontrado os seguintes valores para a anÃlise hematolÃgica para mulheres e homens, respectivamente: eritrÃcitos - de 3,9 a 5,0 milhÃes/mm3 e 4,4 a 5,7 milhÃes/mm3; hemoglobina - de 14,8 a 15,3 g/dL e 13,6 a 16,9 g/dL; leucÃcitos - de 4.400 a 10.500/ mm3 e 4.200 a 10.100/mm3; plaquetas â de 165.000 a 397.000/ mm3 e 155600 a 354400/ mm3. Jà para os parÃmetros bioquÃmicos, verificaram-se os seguintes valores para mulheres e homens, respectivamente: creatinina - de 0,5 a 0,9 mg/dL e 0,7 a 1,2 mg/dL; glicose - de 69 a 96 mg/dL e 71 a 100 mg/dL; colesterol - de 118 a 224 mg/dL e 112 a 219 mg/dL; triglicerÃdeos - de 38,0 a 171 mg/dL e 42 a 197 mg/dL. Os nossos achados sugerem que os valores de referÃncia dos parÃmetros investigados, para a populaÃÃo metropolitana de Fortaleza, sejam redefinidos como aqueles incluÃdos no intervalo entre os percentis 2,5o e 97o, os quais correspondem a 95% da distribuiÃÃo total dos valores de cada parÃmetro. / The values of reference of laboratorial parameters are defined on the basis of statistical criteria for a random sample of individuals. The published parameters of reference are proceeding from a variety of samples, including blood donors, participants of job admission examinations and normal voluntaries that are submitted to routine examinations for clinical assays. This research is of the documentary type with quantitative approach. The sample was constituted by 1.947 laboratorial parameters of healthy volunteers, of both genders, with average of 25 years, which had participated of clinical assays in the Clinical Pharmacological Unit (UNIFAC â UFC), between the years of 1999 and 2003. For the accomplishment of the study, the following information had been obtained from case report files: identification of the volunteer, besides the hematological and biochemical parameters. Seventy five clinical assays have been investigated. The results demonstrated statistical differences between the genders, for the majority of the analyzed parameters. The normal reference intervals have been calculated by the method of percentiles, being found the following values for the hematological analysis for women and men, respectively: erytrocytes â from 3.9 to 5.0 millions/mm3 and from 4.4 to 5.7 millions/mm3; hemoglobin â from 14.8 to 15.3 g/dL, and from 13.6 to 16.9 g/dL; leukocytes â between 4.400 and 10.500/mm3, and between 4.200 and 10.100//mm3; platelets â from 165.000 to 397.000/mm3, and from 155.600 to 354.400/mm3. For the biochemical parameters, there were found the following values for women and men, respectively: creatinine â from 0.5 to 0.9 mg/dL, and from 0.7 to 1.2 mg/dL; glucose â between 69 and 96 mg/dL, and between 71 and 100 mg/dL; cholesterol â between 118 and 224 mg/dL, and between 112 and 219 mg/dL; triglycerides â from 38 to 171 mg/dL, and from 42 to 197 mg/dL. Our findings suggest that the reference values of investigated parameters, for the metropolitan population of Fortaleza, must be redefined as that enclosed in the interval between the 2.5 and 97, which correspond to 95% of the total distribution of the values of each parameter.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / This work reports the biochemical characterization, cytotoxic and allergenic effects of a lipid transfer protein isolated from M. citrifolia seeds (McLTP1), with trypsin and alpha-amylase inhibition properties. McLTP1 was purified with a procedure involving trichloroacetic acid precipitation and gel filtration chromatography. This protein showed significant inhibitory activities against trypsin (767,10  8,36 TIU/mgP), chymotrypsin (25,36  0,86 IU/mgP), papain (65,419  0,152 IU/mgP) and alpha-amylase (24,40%). Atomic force microscopy displayed that McLTP1 oligomerized in tetramers showing a central channel. Fluorescence and CD assays revealed that the McLTP1 structure is highly stable, regardless of pH and temperature levels. In vitro, McLTP1 presented a selective cytotoxic effect to human ovarian cancer cells (OVCAR-8; IC50 of 16,6 &#956;g/mL) and demonstrated hemolytic effect against fresh rabbit red blood cels. Similarly to other non-specific lipid transfer protein reported, McLTP1 showed allergenic properties in mice, being considered as a true food allergen since it was able to sensitize the animals via the gastrointestinal tract. / Morinda citrifolia L. à uma espÃcie nativa do Sudeste da Ãsia intensamente investigada em funÃÃo de suas propriedades terapÃuticas reportadas hà mais de 2.000 anos. Recentemente, uma proteÃna transferidora de lipÃdeos denominada McLTP1 (UniProt Accession Number: C0HJH5) foi isolada de sementes de noni pelo nosso grupo de pesquisa. McLTP1 à uma proteÃna termoestÃvel de massa molecular 9,4 kDa, resistente à proteÃlise e dotada de atividades moduladoras da inflamaÃÃo e da dor pela via oral, promissoras e inÃditas para esse grupo de molÃculas. Este trabalho objetivou caracterizar bioquimicamente McLTP1, bem como avaliar o seu potencial alergÃnico em camundongos, como etapas bÃsicas para o seu uso racional e seguro do ponto de vista farmacolÃgico. Em adiÃÃo, as propriedades terapÃuticas de McLTP1 foram tambÃm ampliadas, atravÃs da investigaÃÃo de seu efeito citotÃxico em diferentes linhagens de cÃlulas tumorais. A proteÃna em estudo foi isolada utilizando o protocolo jà estabelecido, envolvendo as etapas de precipitaÃÃo seletiva de proteÃnas do extrato total das sementes de noni com Ãcido tricloroacÃtico 2,5% e cromatografia de exclusÃo molecular. O ensaio de alergenicidade in vivo foi conduzido apÃs prÃvia aprovaÃÃo pelo Comità de Ãtica para Uso de Animais da Universidade Federal do Cearà e utilizou fÃmeas nulÃparas com massa corporal entre 25 e 30 g. McLTP1 apresentou in vitro atividades inibitÃrias de tripsina (767,10  8,36 UIT/mgP), quimotripsina (25,36  0,86 UI/mgP), papaÃna (65,419  0,152 UI/mgP) e alfa-amilase (24,40%). A atividade inibitÃria de tripsina de McLTP1 foi reduzida significativamente em temperaturas superiores a 37 ÂC, apresentando atividade residual de apenas 5,91% quando aquecida a 100 ÂC por 30 min. Essa atividade foi tambÃm influenciada pelo pH, sendo de apenas 30,13% e 39,05% quando a proteÃna foi incubada em tampÃes de pH 3,0 e 12,0. O padrÃo de oligomerizaÃÃo de McLTP1 demonstrou a formaÃÃo de agregados dimÃricos/tetramÃricos delimitando um canal central de diÃmetro de 4,4 nm. As anÃlises espectroscÃpicas mostraram que McLTP1 apresenta espectro de CD similar Ãquele apresentado por outras proteÃnas transferidoras de lipÃdeos e caracterÃstico de proteÃnas ricas em alfa-hÃlice. Espectro de CD de McLTP1 nÃo mostrou alteraÃÃes significativas em diferentes temperaturas e pHs, corroborando com os dados de estabilidade obtidos anteriormente. Diferentemente, em condiÃÃes redutoras (DTT 1 mM) o espectro de CD mostrou alteraÃÃo na estrutura secundÃria da proteÃna e os mÃnimos e mÃximos de elipticidade molar foram tambÃm alterados na presenÃa de micelas iÃnicas de SDS (10 mM). McLTP1 apresentou atividade citotÃxica seletiva contra cÃlulas de cÃncer de ovÃrio (Ovcar-8; CI50: 16,6 &#956;g/mL), nÃo sendo citotÃxica para as cÃlulas tumorais de cÃlon humano (HCT-116), leucemia humano (HL-60) e glioblastoma humano (SF-295) testadas. McLTP1 foi capaz de promover hemÃlise significativa em hemÃcias de coelho a partir da concentraÃÃo de 0,005 mgP/mL. McLTP1 apresentou potencial efeito alergÃnico in silico e em camundongos imunizados pela via oral, induzindo a sÃntese de anticorpos IgG e IgG1. Tal como descrito na literatura para outras LTPs, anticorpos anti-McLTP1 produzidos em coelho foram tambÃm capazes de reconhecer proteÃnas presentes em extratos de Rosaceae, Cucurbitaceae e na polpa do fruto de noni. Os dados obtidos permitiram caracterizar parcialmente a proteÃna em estudo, bem como avaliar o seu potencial imunogÃnico apÃs administraÃÃo oral. Novos testes serÃo conduzidos objetivando avaliar a importÃncia clÃnica dessas respostas, uma vez que testes de toxicidade demonstraram que McLTP1 nÃo foi capaz de promover reaÃÃes adversas em camundongos, mesmo apÃs administraÃÃo da dose de 8 mg/kg por 28 dias.