Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-09-04T17:32:14Z No. of bitstreams: 1 Vanessa Investigacao do efeito cititóxico....pdf: 1637760 bytes, checksum: 53a0a5f0c495bc04a29d54e8f4415870 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-04T17:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanessa Investigacao do efeito cititóxico....pdf: 1637760 bytes, checksum: 53a0a5f0c495bc04a29d54e8f4415870 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / Investigar a capacidade antitumoral do extrato metanólico de Bixa orellana em células neoplásicas de Glioblastoma multiforme (GL-15) e Glioma murino (C6), sem toxicidadade para as células astrocitárias normais in vitro. Métodos e resultados: Caracterização do extrato por espectrofotometria por absorção de luz visível apresentou picos em 286, 363 e 435 nm. Determinou-se os teores de bixina e compostos fenólicos – 0,17 mg/mg e 0,05 mg por equivalência de pirogalol/mg de extrato seco, respectivamente. A citoxicidade foi investigada pelo teste de Brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium. A Mínima Concentração Citotóxica (MCC) para GL-15 foi 180 e 80 μg/mL para C6, para astrócitos foi 240 μg/mL, após 48 horas de tratamento. O teste de exclusão com azul tripan confirmou a EC50 para GL-15 após 24 horas. A análise morfológica foi realizada por microscopia de contrataste de fase e fluorescência. Comprovou-se a diminuição de células neoplásicas e alterações celulares na MCC em astrócitos. A capacidade de fluorescência foi comprovada em GL-15. A citotoxicidade não depletou GSH. Investigou-se alterações de ciclo celular e morte celular por citometria de fluxo. Alterações de ciclo celular não foram evidenciadas. O tipo de morte celular foi investigado com marcação para anexina V e Iodeto de Propídio comprovou morte por necrose em GL-15 e por apoptose tardia em C6, os astrócitos apresentaram valores pequenos de morte por apoptose tardia e necrose. Conclusão: Os dados indicam um potencial antitumoral das substâncias presentes neste extrato para células neoplásicas sem ser tóxico para células normais. / This work investigated the hypothesis that the methanol extract of Bixa orellana decreases the viability of GL-15 and C6 cells, without being toxic to normal astrocytes in vitro. Methods: The methanol extract of B. orellana seeds was obtained and characterized by UV-Vis spectrophotometry. The cytotoxic effects were assayed in vitro using the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide method. The cell morphology was investigated by phase contrast and fluorescence microscopy. The depletion of reduced glutathione (GSH) was observed by fluorescence microscopy. The effects on cell cycle and the mode of cell death was studied by flow cytometry. Results: The contents of bixin and phenol were 0.17 mg/mg of extract and 0.05 mg of pyrogallol equivalent/mg of extract, respectively. Three peaks were observed at 286, 363, and 435 nm. The extract killed cells in a dose-dependent manner. The minimum cytotoxic concentrations in the two tumoral cells (GL-15 and C6) were respectively: 180 μg/mL and 80 μg/mL, meanwhile in astrocytes it was 240 μg/mL after 48 hours. The trypan blue assay confirmed the cytotoxic effect to GL-15 cells. Morphological degeneration of treated glioma cells was observed. The same was observed with astrocytes, but at a higher concentration. Treated cells became fluorescent, probably due to incorporation of bixin. The treatment neither depleted GSH, nor interfered on the cell cycle. The main kind of cell death was necrosis. Conclusions: Compounds present in B. orellana seeds are potentially cytotoxic to glioma cells, meanwhile primary astrocytes are more resistant.

DANTAS, F. D. T. Resíduo da semente do urucum em rações contendo sorgo para poedeiras comerciais. 2014. 60 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia) - Centro de Ciências Agrárias, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2014. / Submitted by Daniel Eduardo Alencar da Silva (dealencar.silva@gmail.com) on 2014-12-10T20:55:58Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_fdtdantas.pdf: 594724 bytes, checksum: f164a75dae62c7cb389fb106a69d8eaa (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2016-03-22T16:20:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_fdtdantas.pdf: 594724 bytes, checksum: f164a75dae62c7cb389fb106a69d8eaa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-22T16:20:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_fdtdantas.pdf: 594724 bytes, checksum: f164a75dae62c7cb389fb106a69d8eaa (MD5) Previous issue date: 2014 / In order to assess the effects of including the annatto seed residue (RSU) in diets containing sorghum on the utilization of nutrients of the ration, the performance and characteristics of eggs, an experiment was conducted with 288 hens lineage Lohman Brown, being distributed in a completely randomized design with six treatments and six replicates of eight birds each. Treatments consisted of a diet consisting of corn and soybean meal; ration with 100% sorghum replacing corn without adding pigmentante and the other in diets with 100% sorghum replacing corn with the addition of 2.5; 4.5; 6.5 and 8.5% annatto seed residue (RSU), respectively. Increasing levels of RSU did not affect the digestibility of nutrients, and harnessing the energy of the feed. It was also observed that there was no significant influence on the performance and parameters egg quality, except for yolk color. The inclusion of RSU promoted linear increase in yolk color assessed by colorimetric fan, and also a linear increase in the intensity values of red color (a *) and yellowness (b *) and linear reduction in lightness value (L * ) evaluated by digital colorimeter. To evaluate the economic feasibility of using the annatto seed residue also was not found significant difference among treatments for: feed cost per egg mass produced, index of economic viability and cost index. We conclude that, in diets of laying where sorghum is the main energy source, can include up to 8.5% of RSU, and can reduce the problems of yolk pigmentation with total replacement of corn by sorghum with the inclusion of RSU from 2.5%. / Com o objetivo de avaliar os efeitos da inclusão do resíduo da semente do urucum (RSU) em rações contendo sorgo sobre o aproveitamento dos nutrientes da ração, o desempenho e nas características dos ovos, foi realizado um experimento com 288 poedeiras da linhagem Lohman Brown, distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado com seis tratamentos e seis repetições de oito aves. Os tratamentos consistiram em ração composta por milho e farelo de soja; ração com 100% de sorgo em substituição ao milho sem a adição de pigmentante e os demais em rações com 100% de sorgo em substituição ao milho com a adição de 2,5; 4,5; 6,5 e 8,5% de resíduo da semente de urucum (RSU), respectivamente. Os crescentes níveis do RSU não influenciaram os coeficientes de digestibilidade dos nutrientes, e o aproveitamento da energia das rações. Observou-se também que não houve influência sobre o desempenho e os parâmetros de qualidade do ovo, com exceção da cor da gema. A inclusão do RSU promoveu aumento linear na cor da gema avaliada pelo leque colorimétrico e, também, ainda aumento linear nos valores de intensidade de cor vermelha (a*) e cor amarela (b*) e redução linear no valor de luminosidade (L*) avaliados pelo colorímetro digital. Na avaliação da viabilidade econômica do uso do RSU, também não foi verificada diferença significativa entre os tratamentos quanto ao custo da ração por massa de ovo produzida, índice de eficiência econômica e índice de custo. Conclui-se que, em rações de poedeiras contendo sorgo como principal fonte de energia, pode-se incluir até 8,5% do RSU, sendo possível reduzir os problemas de pigmentação da gema com a substituição total do milho pelo sorgo com a inclusão do RSU a partir de 2,5%.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-11-09T08:35:29Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1961523 bytes, checksum: 799f7b3e7935d265d6d9366f8865fce3 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-09T08:35:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1961523 bytes, checksum: 799f7b3e7935d265d6d9366f8865fce3 (MD5) Previous issue date: 2012-12-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As sementes do urucum (Bixa orellana L.), que apresentam dormência, e as estruturas secretoras de bixina do tegumento seminal, ainda são pouco compreendidas do ponto de vista anatômico, histoquímico e químico. Este trabalho teve como objetivo caracterizar o desenvolvimento das sementes de urucum e a ontogenia das estruturas secretoras de bixina por meio de análises anatômicas, micromorfológicas, histoquímicas e químicas. Sementes de urucum foram coletadas da antese aos 180 dias após a antese (d.a.a.), com intervalos de 5 a 15 dias. O material foi processado de acordo com técnicas usuais em microscopia de luz e eletrônica de varredura e também submetido à análise química para detecção de compostos de reserva e bixinoides. O óvulo é anátropo, bitegumentado e crassinucelado. O endosperma é nuclear e a semente é bitegumentada. A testa é parenquimatosa e na mesotesta predominam estruturas secretoras de bixina. A principal camada mecânica é o exotégmen, com células de paredes espessadas dispostas em paliçada. Além de açúcares solúveis acumulados na semente, o endosperma acumula lipídio, amido e proteína, e o embrião acumula apenas lipídio e proteína. Não é constada dormência morfológica, uma vez que o embrião já está desenvolvido na semente madura. Há dormência imposta pelo tegumento, como esclerificação e acúmulo de fenólicos no tégmen e tampão calazal. As estruturas secretoras de bixina se formam no mesofilo da testa de sementes em desenvolvimento, a partir de uma célula inicial com núcleo e nucléolo conspícuos, vários vacúolos pequenos e citoplasma denso. Ocorre coalescimento gradativo de células adjacentes e dissolução de paredes que fazem contato entre estas células, estabelecendo-se uma condição cenocítica. Os vacúolos coalescem e formam um espaço central, delimitado por uma faixa citoplasmática periférica, os núcleos degeneram e a secreção acumula-se no centro. O teor de bixinoides atinge o valor máximo de 0,22% aos 90 d.a.a, e se estabiliza. / The seeds of annatto (Bixa orellana L.), that have dormancy, and the bixin glands of the seed coat, are still poorly understood in terms of anatomy, histochemistry and chemistry. This study aimed to characterize the development of annatto seeds and ontogeny of bixin glands through anatomical, micromorphological, histochemical and chemical analysis. Annatto seeds were collected from anthesis to 180 days after anthesis (d.a.a.), with intervals of 5 to 15 days. The material was processed according to standard techniques for light microscopy and scanning electron microscopy and also subjected to chemical analysis for detection of storage compounds and bixinoids. The ovule is anatropous, bitegmic and crassinucellate. The endosperm is nuclear and the seed is bitegmic. The testa is parenchymatous and bixin glands predominate in the mesotesta. The main mechanical layer is exotegmen, composed of thick-walled cells arranged in palisade. In addition to soluble sugars that are accumulated in the seeds, the endosperm accumulates lipid, starch and protein, and the embryo accumulates only lipid and protein. Morphological dormancy is not observed, since the embryo is fully developed in the mature seed. There is dormancy imposed by the seed coat, as sclerified cells and accumulation of phenolic compounds in the tegmen and chalazal plug. Bixin glands are formed in the mesophyll of the testa in developing seeds, from a single initial cell with nucleus and nucleolus conspicuous, several small vacuoles and dense cytoplasm. Gradual coalescence of adjacent cells and dissolution of cell walls of these cells occur, setting up a cenocitic condition. The vacuoles coalesce and form a central space delimited by a band of peripheral cytoplasm, the nuclei degenerate and secretion accumulates in the center. Bixinoids content reaches the maximum value of 0.22% at 90 d.a.a., and stabilizes.

A multiplicação de espécies como as da planta de urucum tem limitações em função do conhecimento limitado das características morfológicas e fisiológicas das sementes e das plântulas e da restrição de métodos para determinar a qualidade dessas sementes. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi estudar métodos para determinar a viabilidade e o vigor das sementes de urucum (Bixa Orellana L.). Para tanto foram utilizadas sementes de quatro acessos genéticos mantidos pelo Instituto Agronômico, em Campinas, SP, analisadas em duas etapas; na primeira, foram avaliados os métodos para os testes de germinação e de tetrazólio e, na segunda, métodos para estimar o vigor que incluíram os testes de condutividade elétrica, de envelhecimento acelerado e de frio e a determinação do comprimento da plântula. A avaliação da qualidade das sementes foi complementada pela determinação do teor de água, pelos testes de germinação, primeira contagem e classificação de vigor da plântula, pelo desenvolvimento da plântula e determinações do teor de bixina e da composição química das sementes. A adequação dos métodos propostos para caracterizar a qualidade das sementes de urucum foi verificada também pelo progresso da deterioração das sementes durante o armazenamento, pelo período de um ano. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e comparação de médias por meio do teste de Tukey a 5% de probabilidade. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que independentemente do acesso genético, o intervalo adequado de temperatura, favorável para germinação de sementes de urucum, é o entre 29,5°C e 31°C, e o substrato papel (entre papel). Para o teste de tetrazólio os métodos entre papel ou imersão em água são adequados para hidratar as sementes e o teor de água indicado é 40%; os períodos de duas horas, quatro horas ou seis horas são eficientes para avaliar a viabilidade das sementes. Os testes de condutividade elétrica utilizando 25 ou 50 sementes, hidratadas em 50 ou 75mL de água destilada a 20°C ou 25°C por oito horas, 16 horas ou 24 horas, o de envelhecimento acelerado com água ou solução salina por 72 horas ou 96 horas e o de frio nas temperaturas de 15°C ou 20°C por cinco ou sete dias são eficientes para classificar as sementes de urucum quanto à qualidade. / The multiplication of annatto plant has limitations due to the limited knowledge of the morphological and physiological characteristics of seeds and seedlings and restricted methods to determine the quality of the seed. The objective of this research was to study methods to determine the viability and vigor of annatto seeds (Bixa Orellana L.). Four seeds genetic access kept by the Agronomic Institute of Campinas, SP were used for research, analyzed in two stages: firstly, methods for testing the germination and tetrazolium and in the second, methods were evaluated to estimate the vigor, electrical conductivity, accelerated aging and cold and seedling length. The evaluation of seed quality was complemented by the determination of water content, germination test, the first count and seedling vigor classification, seedling development and the determination of bixin and seeds chemical composition. The appropriateness of the proposed methods to characterize the quality of annatto seeds was also verified by the progress of seed deterioration during storage for one year. The experimental design was completely randomized with four replications. The results were subjected to variance analysis and means were compared by the Tukey test at 5% probability. According to the results, regardless of the genetic access, the appropriate temperature range for annatto seeds germination is between 29,5°C and 31°C, and the paper substrate (between paper). To tetrazolium test the methods between paper or water immersion are appropriate to hydrate the seeds and the water content appropriate is 40%. The periods two hours, four hours or six hours are efficient to evaluate the seeds viability. The electrical conductivity test using 25 or 50 seeds, hydrated in 50 or 75 mL of distilled water, the temperature of 20°C and 25°C for eight hours, 16 hours or 24 hours, the accelerated aging with water and salt solution for 72 hours or 96 hours and the cold tests at temperatures of 15°C or 20°C for five or seven days are effective for classify the annatto seeds quality.

A multiplicação de espécies como as da planta de urucum tem limitações em função do conhecimento limitado das características morfológicas e fisiológicas das sementes e das plântulas e da restrição de métodos para determinar a qualidade dessas sementes. Assim, o objetivo dessa pesquisa foi estudar métodos para determinar a viabilidade e o vigor das sementes de urucum (Bixa Orellana L.). Para tanto foram utilizadas sementes de quatro acessos genéticos mantidos pelo Instituto Agronômico, em Campinas, SP, analisadas em duas etapas; na primeira, foram avaliados os métodos para os testes de germinação e de tetrazólio e, na segunda, métodos para estimar o vigor que incluíram os testes de condutividade elétrica, de envelhecimento acelerado e de frio e a determinação do comprimento da plântula. A avaliação da qualidade das sementes foi complementada pela determinação do teor de água, pelos testes de germinação, primeira contagem e classificação de vigor da plântula, pelo desenvolvimento da plântula e determinações do teor de bixina e da composição química das sementes. A adequação dos métodos propostos para caracterizar a qualidade das sementes de urucum foi verificada também pelo progresso da deterioração das sementes durante o armazenamento, pelo período de um ano. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repetições. Os dados foram submetidos à análise de variância e comparação de médias por meio do teste de Tukey a 5% de probabilidade. De acordo com os resultados obtidos, foi possível concluir que independentemente do acesso genético, o intervalo adequado de temperatura, favorável para germinação de sementes de urucum, é o entre 29,5°C e 31°C, e o substrato papel (entre papel). Para o teste de tetrazólio os métodos entre papel ou imersão em água são adequados para hidratar as sementes e o teor de água indicado é 40%; os períodos de duas horas, quatro horas ou seis horas são eficientes para avaliar a viabilidade das sementes. Os testes de condutividade elétrica utilizando 25 ou 50 sementes, hidratadas em 50 ou 75mL de água destilada a 20°C ou 25°C por oito horas, 16 horas ou 24 horas, o de envelhecimento acelerado com água ou solução salina por 72 horas ou 96 horas e o de frio nas temperaturas de 15°C ou 20°C por cinco ou sete dias são eficientes para classificar as sementes de urucum quanto à qualidade. / The multiplication of annatto plant has limitations due to the limited knowledge of the morphological and physiological characteristics of seeds and seedlings and restricted methods to determine the quality of the seed. The objective of this research was to study methods to determine the viability and vigor of annatto seeds (Bixa Orellana L.). Four seeds genetic access kept by the Agronomic Institute of Campinas, SP were used for research, analyzed in two stages: firstly, methods for testing the germination and tetrazolium and in the second, methods were evaluated to estimate the vigor, electrical conductivity, accelerated aging and cold and seedling length. The evaluation of seed quality was complemented by the determination of water content, germination test, the first count and seedling vigor classification, seedling development and the determination of bixin and seeds chemical composition. The appropriateness of the proposed methods to characterize the quality of annatto seeds was also verified by the progress of seed deterioration during storage for one year. The experimental design was completely randomized with four replications. The results were subjected to variance analysis and means were compared by the Tukey test at 5% probability. According to the results, regardless of the genetic access, the appropriate temperature range for annatto seeds germination is between 29,5°C and 31°C, and the paper substrate (between paper). To tetrazolium test the methods between paper or water immersion are appropriate to hydrate the seeds and the water content appropriate is 40%. The periods two hours, four hours or six hours are efficient to evaluate the seeds viability. The electrical conductivity test using 25 or 50 seeds, hydrated in 50 or 75 mL of distilled water, the temperature of 20°C and 25°C for eight hours, 16 hours or 24 hours, the accelerated aging with water and salt solution for 72 hours or 96 hours and the cold tests at temperatures of 15°C or 20°C for five or seven days are effective for classify the annatto seeds quality.

Objective To evaluate the cytotoxic and antibacterial effect of Bixa orellana L. (B. orellana) (achiote) methanol extract against Streptococcus mutans (ATCC 25175) (S. mutans) and Streptococcus sanguinis (ATCC 10556) (S. sanguinis). Methods Two methanol extracts of B. orellana were prepared in vitro, from the seeds and leaves. The antibacterial activity of extracts against S. mutans and S. sanguinis was evaluated using the cup-plate agar diffusion method. The minimum inhibitory concentration (MIC) was determined using the microdilution method and the cytotoxic activity was determinated by using the cell line MDCK. Results A stronger antibacterial effect was observed with the leaves methanolic extract with an inhibition zone of (19.97 ± 1.31) mm against S. mutans and (19.97 ± 1.26) mm against S. sanguinis. The methanolic extract of the seeds had an activity of (15.11 ± 1.03) mm and (16.15 ± 2.15) mm against S. mutans and S. sanguinis, respectively. The MIC of the leaf and the seed extracts against S. sanguinis was 62.5 and 125 μg/mL, respectively, and the MIC of the leaf extract against S. mutans was 62.5 μg/mL, and for the seed extract it was 31.25 μg/mL. The 50% cytotoxic concentration was 366.45 and 325.05 μg/mL for the leaves and seeds extracts, respectively. Conclusions The experimental findings demonstrated the antibacterial effect of the methanolic extract of B. orellana (achiote) on S. mutans and S. sanguinis. The extract of this plant is cytotoxic at high concentrations. / Peer review

Les maladies tropicales négligées, telle que la leishmaniose, constituent un problème majeur de santé publique, en particulier dans les pays à faible revenu où cette maladie sévit. Le nombre limité des médicaments disponibles, leurs coûts, leurs effets indésirables et l’émergence de résistances, exige la recherche de nouveaux agents thérapeutiques. Les champignons endophytes constituent une source prometteuse de nouvelles molécules bioactives. Dans ce contexte, une étude mycochimique a été menée sur une souche endophyte de Botryosphaeria mamane, un micromycète relativement peu étudié, isolée des feuilles de Bixa orellana. Cette souche a été sélectionnée suite à un criblage préliminaire mené contre un modèle d’amastigotes axéniques de Leishmania infantum. Les études chimiques sur ce champignon ont permis d’isoler 9 molécules pures (BM1-BM9), dont 6 de structures nouvelles (BM1-BM4, BM8, BM9) et deux mélanges BM10 et BM11. Les molécules BM1-BM4 appartiennent à la famille des cyclopeptides de type thiodicétopipérazines que nous avons nommés botryosulfuranols A-D. Ils possèdent un squelette original caractérisé par deux centres spirocycliques. BM5-BM7 se sont révélés être des isocoumarines dérivés de la mélleine (cis-4-hydroxymélleine, trans-4-hydroxymélleine et 5-hydroxymélleine). BM8 et BM9 sont deux polycétides de structure nouvelle. Enfin, BM10 et BM11, sont des mélanges de cyclopentapeptides. L’évaluation de leur activité biologique sur amastigotes axéniques de Leishmania infantum a révélé que les thiodicétopipérazines avaient les meilleures activités. Le composé BM4 est le plus actif (CI50 = 0.03 µM) mais également le plus sélectif (IS = 190) de L. infantum par comparaison avec sa cytotoxicité sur des macrophages. BM1 et BM3 sont aussi actifs mais peu sélectifs (CI50 = 0.69 et 0.44 µM, IS = 3 et 15, respectivement) en raison de leur toxicité sur macrophages, et BM2 (CI50 = 3.88 µM) n’a montré aucune sélectivité. Les composés BM8 et BM9, bien que non cytotoxiques sur macrophages, ont montré une activité plus modérée contre L. infantum. Les composés BM5-BM7, et les mélanges BM10, BM11 n’ont présenté aucune activité leishmanicide. L'ensemble de ce travail souligne ainsi l'intérêt des endophytes fongiques comme sources de nouveaux composés leishmanicides. / Neglected tropical diseases, such as leishmaniasis, are a major public health problem, especially in the poorest countries of the world. The limited number of drugs available, their costs, adverse effects and the emergence of resistances, require the search for new therapeutic agents. Endophytic fungi are a promising source of new bioactive molecules. In this context, a mycochemical study was carried out on an endophytic strain of Botryosphaeria mamane, a relatively poorly studied micromycete, isolated from Bixa orellana leaves. This strain was selected from a preliminary screening for its good activity against Leishmania infantum axenic amastigotes. Chemical investigations on this fungus led to the isolation of 9 pure molecules (BM1-BM9), 6 of which are new structures (BM1-BM4, and BM8, BM9) and two mixtures BM10 and BM11. BM1-BM4 belong to the family of cyclodipeptides and are thiodiketopiperazines derivatives that we called botryosulfuranols A-D. The latter possess an unprecedent skeleton characterized by two spirocyclic centers. BM5-BM7 are isocoumarins derived from mellein (cis-4-hydroxymellein, trans-4-hydroxymellein and 5-hydroxymellein). BM8 and BM9 are two new polyketides. Finally, BM10 and BM11 are mixtures of cyclopentapeptides. Evaluation of leishmanicidal activities of these 9 compounds and the two mixtures on axenic amastigotes of Leishmania infantum showed that thiodiketopiperazines possessed the highest activities. BM4 was the most active (IC50 = 0.03 μM) and the most selective (IS = 190) when compared to its cytotoxicity on macrophages. The other thiodiketopiperazines BM1 and BM3 were active but less selective (IC50 = 0.69 and 0.44 μM, SI = 3 and 15, respectively), whereas BM2 was moderately active (IC50 = 3.88 μM) and not selective. BM8 and BM9, despite their absence of cytotoxicity against macrophages, were also moderately active against L. infantum (IC50 = 13.35 and 4.53 μM respectively). Compounds BM5-BM7, and the mixtures BM10 and BM11 did not show any leishmanicidal activities. This work highlights the interest of fungal endophytes as sources of new leishmanicidal compounds.

Plant domestication is an evolutionary process that leads to several modifications in plants to increase adaptation to cultivation and utilization by humans. These modifications may decrease the fitness of plants in the wild habitat but increase it for human exploitation. Annatto (Bixa orellana L.) is a shrubby plant domesticated in Amazonia from wild annatto (Bixa orellana var. urucurana) populations. This thesis presents a more in-depth understanding of the domestication, mating system and genetic diversity and structure of annatto and its wild ancestor in Brazil. In the first study, a new set of 32 microsatellite loci isolated from a microsatellite-enriched genomic library was developed, of which 12 were polymorphic in populations of both cultivated and wild annatto. In the second study, the genetic diversity and structure of wild annatto populations in Brazilian Amazonia were characterized with 16 microsatellite markers. High population structure and positive correlation between genetic and geographic distances were found, suggesting that genetic differentiation might be caused by geographic isolation. Additionally, Ecological Niche Modeling was used to characterize the potential geographical range of this variety in northern South America and detected that South Rondônia, Madre di Dios River basin, Llanos de Mojos, Llanos de Orinoco and eastern Ecuador are highly suitable areas for wild annatto to occur, providing additional targets for future exploration and conservation. In the third study, 16 microsatellite loci and four phytochemical compounds were used to evaluate the genetic diversity of 63 accessions from the annatto germplasm bank at the Agronomic Institute (IAC). In both molecular and phytochemical analysis the results tended to separate the accessions from Rondônia, northern Brazil, from the Southwestern accessions. Rondônia accessions showed higher values for all the phytochemical compounds and higher levels of genetic diversity. Some accessions presented bixin levels well above the average and are promising materials to be used in genetic improvement programs. In the fourth study, 12 microsatellite loci were used to determine the mating system of a cultivated population of annatto from Rondon do Pará, PA. Multilocus outcrossing rate indicated a mixed mating system for this population. Biparental inbreeding also contributed to the selfing rate in this population. Crossings among related individuals were also observed. Due to this mixed breeding system, the collection of open-pollinated seeds for plant breeding or conservation purposes should include at least 60 plants to ensure a representative sample. In the fifth study, the amount and distribution of genetic diversity among samples of cultivated annatto from homegardens of riverside communities along the major rivers in Brazilian Amazonia, and from farmer´s fields along highways, in the States of Rondônia and Pará, and Southeastern Brazil was characterized. The samples collected presented moderate levels of genetic diversity, and moderate to high levels of admixture between geographic groups, occurring mainly due to exchange of seeds among farmers. However, cluster and Bayesian analyses showed a tendency to group samples based on their geographic origin. Isolation by distance was observed, according to Mantel\'s test. In the last study, wild and cultivated annatto samples from Brazilian Amazonia were compared using 16 microsatellite loci and two cpDNA regions. A clear separation between wild and cultivated annatto, supported by high values of FST in both analyses was observed. Wild samples presented higher rates of diversity in relation to cultivated, partly because these populations did not suffer anthropic selection, as in the cultivated varieties. The data suggest the existence of genetic relationship between wild and cultivated annatto, indicated by moderate levels of gene flow. The results also showed the proximity between groups of cultivated and wild accessions from Rondônia and the Madeira River basin. This proximity provides indications that annatto started its domestication in this area from B. orellana var. urucurana. / Domesticação de plantas é um processo evolutivo que pode gerar uma série de modificações nas plantas para aumentar a adaptação para o cultivo e utilização pelos humanos. Estas modificações podem diminuir a aptidão das plantas no habitat selvagem, porém, aumentando sua aptidão para exploração humana. Urucum (Bixa orellana L.) é uma planta arbustiva domesticada na Amazônia a partir de populações de Bixa orellana var. urucurana. Esta tese apresenta um entendimento mais aprofundado sobre a domesticação, sistema reprodutivo e diversidade genética e estrutura de urucum e seu ancestral selvagem no Brasil. No primeiro estudo, um novo conjunto de 32 locos microssatélites foram isolados a partir de uma biblioteca genômica enriquecida com microssatélites, dos quais 12 foram polimórficos em populações de urucum selvagem e cultivado. No segundo estudo, a diversidade e estrutura genética de populações selvagens de urucum na Amazônia brasileira foram caracterizadas usando 16 marcadores microssatélites. Elevada estrutura populacional, e correlações positivas entre distancias genéticas e geográficas foram observadas, sugerindo que a diferenciação genética é resultante de isolamento geográfico. Adicionalmente, Modelagem de Nicho Ecológico foi utilizada para caracterizar a distribuição potencial desta variedade no norte da América do Sul e observamos que o Sul de Rondônia, a bacia do rio Madre de Dios, os Llanos de Mojos e de Orinoco e oeste do Equador são áreas de alta probabilidade de ocorrência de urucum selvagem, fornecendo informações importantes para novas amostragens e conservação. No terceiro estudo, 16 locos de microssatélites e quatro compostos fitoquímicos foram utilizados para avaliar a diversidade genética de 63 acessos do banco de germoplasma de urucum do Instituto Agronômico (IAC). Em ambas as análises, houve uma tendência de separação dos acessos de Rondônia, norte do Brasil, dos acessos do Sudeste. Os acessos de Rondônia apresentaram elevados valores para todos os compostos fitoquímicos e também apresentaram altos níveis de diversidade genética. Alguns acessos apresentaram níveis de bixina acima da média e são considerados materiais promissores para uso em programas de melhoramento genético de urucum. No quarto estudo, 12 locos microssatélites foram utilizados para determinar o sistema de cruzamento de uma população de urucum de Rondon do Pará, PA. A taxa de cruzamento multilocos indicou um sistema misto de cruzamento para esta população. A endogamia biparental também contribuiu para a taxa de autofecundação. Cruzamentos entre indivíduos aparentados também foram observados. Devido ao sistema misto, a coleta de sementes de polinização aberta para fins de conservação e melhoramento genético deve incluir pelo menos 60 plantas para assegurar uma amostragem representativa. No quinto estudo, a distribuição da diversidade genética entre amostras de urucum cultivado de quintais de comunidades ribeirinhas dos principais rios da Amazônia Brasileira, além de plantações ao longo das rodovias dos estados do Rondônia e Pará, além do Sudeste do Brasil foi caracterizada. As amostras coletadas apresentaram moderados níveis de diversidade genética e moderados a altos níveis de fluxo gênico entre os grupos geográficos, principalmente devido ao intercambio de semente entre agricultores. Contudo, análises Bayesianas e de agrupamento indicaram uma tendência de agrupamento baseado na origem geográfica das amostras. Isolamento por distância também foi observado de acordo com o teste de Mantel. No último estudo, amostras de urucum selvagem e cultivado da Amazônia brasileira foram comparados utilizando 16 locos microssatélites e duas regiões de DNA cloroplastidial. Uma clara separação entre cultivados e selvagens, suportada por altos valores de FST em ambas as análises foi observado. Amostras selvagens apresentaram altas taxas de diversidade em relação aos cultivados, parcialmente por não sofrem seleção antrópica como acontece nas variedades cultivadas. Os dados sugerem a existência de relações genéticas entre urucum selvagem e cultivado, indicado por moderados níveis de fluxo gênico. Os resultados também demonstraram a proximidade entre grupos de urucum selvagem e cultivados de Rondônia e da bacia do Rio Madeira. Esta proximidade fornece indícios que a domesticação de urucum iniciou nesta região a partir de B. orellana var. urucurana.

TAVARES, Thaís Cruz Lopes. Qualidade dos ovos frescos e armazenados de poedeiras semipesadas alimentadas com semente residual de urucum. 2015. 72 f. : Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências, Departamento de Zootecnia, Programa de Pós-Graduação em Zootecnia. Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-08-03T13:55:50Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_tcltavares.pdf: 909249 bytes, checksum: 50b90fb0e4fe3a758df556bb8a11e3f5 (MD5) / Approved for entry into archive by Eric Santiago (erichhcl@gmail.com) on 2016-08-03T13:56:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_tcltavares.pdf: 909249 bytes, checksum: 50b90fb0e4fe3a758df556bb8a11e3f5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-03T13:56:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_tcltavares.pdf: 909249 bytes, checksum: 50b90fb0e4fe3a758df556bb8a11e3f5 (MD5) Previous issue date: 2015 / This study was conducted in order to verify the effects of the inclusion of annatto residual seed (SRU) in the feed of laying hens red eggs on the quality of the fresh egg depending on the storage time to 6 ° C for up to 30 days. The experimental design was completely randomized in a factorial 3 x 6 (six experimental diets and three storage times), six replicates per treatment, totaling 108 observations. Initially, 288 laying hens Lohmann Brown at 34 weeks of age were randomly distributed, totaling 48 birds (6 repetitions of 8 birds) for each experimental diet, which consisted of T1 - ration composed based on corn and soybean meal (positive control); T2 - diet containing sorghum in total replacement of corn without the addition of pigmentante (negative control); T3, T4, T5 and T6 - feed containing sorghum in total replacement of corn, with the addition of 2.5; 4.5; 6.5 and 8.5% residual annatto seed (SRU), respectively. In the 10th week, after the start of the experimental supply feed were collected 6 eggs of each repetition for evaluations on day 0 and after 15 and 30 days of storage. We evaluated the albumen quality parameters (Haugh units, percentage, pH, formation and foam stability), gem (percentage and pH, subjective and objective color and lipid oxidation) and bark (percentage and specific gravity). There was a significant interaction between the experimental feed and the storage time, only for yolk color variables. However, the addition SRU linearly increases the perception of color by colorimetric range, reduced lightness (L *), increased redness (a *) and yellow (b *), while increasing storage time increased perception of color by colorimetric range, intensity of yellow (b *) and reduced lightness (L *) and redness (a *). The experimental feed does not influence other gem quality variables, but the storage time caused a loss in the quality of albumen and shell, except the percentage of shell and albumen pH. It is possible to include up to 8.5% of SRU in feed containing sorghum for laying red eggs without harming the quality of the albumen and yolk of fresh and stored eggs, and improve the color of the yolk with the inclusion from 2.5 %. / Este estudo foi realizado com o objetivo de verificar os efeitos da inclusão da semente residual do urucum (SRU) na ração de poedeiras comerciais de ovos vermelhos sobre a qualidade do ovo fresco em função do tempo de armazenamento a 6ºC por até 30 dias. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 6 x 3 (seis rações experimentais e três tempos de armazenamento), sendo seis repetições por tratamento, totalizando 108 observações. Inicialmente, 288 poedeiras Lohmann Brown com 34 semanas de idade foram distribuídas ao acaso, totalizando 48 aves (6 repetições de 8 aves) para cada ração experimental, que consistiram em: T1 - ração composta à base de milho e farelo de soja (controle positivo); T2 - ração contendo sorgo em substituição total ao milho, sem a adição de pigmentante (controle negativo); T3, T4, T5 e T6 – ração contendo sorgo em substituição total ao milho, com a adição de 2,5; 4,5; 6,5 e 8,5% de semente residual de urucum (SRU), respectivamente. Na 10ª semana após o início do fornecimento das rações experimentais foram coletados 6 ovos de cada repetição para as avaliações no dia 0 e após 15 e 30 dias de armazenamento. Foram avaliados os parâmetros de qualidade do albúmen (Unidades Haugh, percentagem, pH, formação e estabilidade da espuma), da gema (percentagem e pH, cores subjetiva e objetiva e oxidação lipídica) e da casca (percentagem e densidade específica). Houve interação significativa entre as rações experimentais e o tempo de armazenamento, apenas para as variáveis de coloração da gema. Porém, a adição de SRU aumentou linearmente a percepção da cor pelo leque colorimétrico, reduziu a luminosidade (L*), aumentou a intensidade de vermelho (a*) e do amarelo (b*), enquanto o aumento do tempo de armazenamento aumentou a percepção da cor pelo leque colorimétrico, intensidade do amarelo (b*) e reduziu a luminosidade (L*) e a intensidade de vermelho (a*). As rações experimentais não influenciaram as demais variáveis de qualidade da gema, entretanto o tempo de armazenamento causou um prejuízo na qualidade do albúmen e da casca, com exceção da percentagem de casca e pH do albúmen. É possível incluir até 8,5% de SRU em rações contendo sorgo para poedeiras de ovos vermelhos sem prejudicar a qualidade do albúmen e da gema dos ovos frescos e armazenados, sendo possível melhorar a coloração da gema com a inclusão a partir de 2,5%.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / This study was conducted in order to verify the effects of the inclusion of annatto residual seed (SRU) in the feed of laying hens red eggs on the quality of the fresh egg depending on the storage time to 6  C for up to 30 days. The experimental design was completely randomized in a factorial 3 x 6 (six experimental diets and three storage times), six replicates per treatment, totaling 108 observations. Initially, 288 laying hens Lohmann Brown at 34 weeks of age were randomly distributed, totaling 48 birds (6 repetitions of 8 birds) for each experimental diet, which consisted of T1 - ration composed based on corn and soybean meal (positive control); T2 - diet containing sorghum in total replacement of corn without the addition of pigmentante (negative control); T3, T4, T5 and T6 - feed containing sorghum in total replacement of corn, with the addition of 2.5; 4.5; 6.5 and 8.5% residual annatto seed (SRU), respectively. In the 10th week, after the start of the experimental supply feed were collected 6 eggs of each repetition for evaluations on day 0 and after 15 and 30 days of storage. We evaluated the albumen quality parameters (Haugh units, percentage, pH, formation and foam stability), gem (percentage and pH, subjective and objective color and lipid oxidation) and bark (percentage and specific gravity). There was a significant interaction between the experimental feed and the storage time, only for yolk color variables. However, the addition SRU linearly increases the perception of color by colorimetric range, reduced lightness (L *), increased redness (a *) and yellow (b *), while increasing storage time increased perception of color by colorimetric range, intensity of yellow (b *) and reduced lightness (L *) and redness (a *). The experimental feed does not influence other gem quality variables, but the storage time caused a loss in the quality of albumen and shell, except the percentage of shell and albumen pH. It is possible to include up to 8.5% of SRU in feed containing sorghum for laying red eggs without harming the quality of the albumen and yolk of fresh and stored eggs, and improve the color of the yolk with the inclusion from 2.5 %. / Este estudo foi realizado com o objetivo de verificar os efeitos da inclusÃo da semente residual do urucum (SRU) na raÃÃo de poedeiras comerciais de ovos vermelhos sobre a qualidade do ovo fresco em funÃÃo do tempo de armazenamento a 6ÂC por atà 30 dias. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 6 x 3 (seis raÃÃes experimentais e trÃs tempos de armazenamento), sendo seis repetiÃÃes por tratamento, totalizando 108 observaÃÃes. Inicialmente, 288 poedeiras Lohmann Brown com 34 semanas de idade foram distribuÃdas ao acaso, totalizando 48 aves (6 repetiÃÃes de 8 aves) para cada raÃÃo experimental, que consistiram em: T1 - raÃÃo composta à base de milho e farelo de soja (controle positivo); T2 - raÃÃo contendo sorgo em substituiÃÃo total ao milho, sem a adiÃÃo de pigmentante (controle negativo); T3, T4, T5 e T6 â raÃÃo contendo sorgo em substituiÃÃo total ao milho, com a adiÃÃo de 2,5; 4,5; 6,5 e 8,5% de semente residual de urucum (SRU), respectivamente. Na 10 semana apÃs o inÃcio do fornecimento das raÃÃes experimentais foram coletados 6 ovos de cada repetiÃÃo para as avaliaÃÃes no dia 0 e apÃs 15 e 30 dias de armazenamento. Foram avaliados os parÃmetros de qualidade do albÃmen (Unidades Haugh, percentagem, pH, formaÃÃo e estabilidade da espuma), da gema (percentagem e pH, cores subjetiva e objetiva e oxidaÃÃo lipÃdica) e da casca (percentagem e densidade especÃfica). Houve interaÃÃo significativa entre as raÃÃes experimentais e o tempo de armazenamento, apenas para as variÃveis de coloraÃÃo da gema. PorÃm, a adiÃÃo de SRU aumentou linearmente a percepÃÃo da cor pelo leque colorimÃtrico, reduziu a luminosidade (L*), aumentou a intensidade de vermelho (a*) e do amarelo (b*), enquanto o aumento do tempo de armazenamento aumentou a percepÃÃo da cor pelo leque colorimÃtrico, intensidade do amarelo (b*) e reduziu a luminosidade (L*) e a intensidade de vermelho (a*). As raÃÃes experimentais nÃo influenciaram as demais variÃveis de qualidade da gema, entretanto o tempo de armazenamento causou um prejuÃzo na qualidade do albÃmen e da casca, com exceÃÃo da percentagem de casca e pH do albÃmen. à possÃvel incluir atà 8,5% de SRU em raÃÃes contendo sorgo para poedeiras de ovos vermelhos sem prejudicar a qualidade do albÃmen e da gema dos ovos frescos e armazenados, sendo possÃvel melhorar a coloraÃÃo da gema com a inclusÃo a partir de 2,5%.