Orientador: Osvaldo Magro Filho / Banca: Élio Hitoshi Shinohara / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Fábio Yoshio Tanaka / Banca: André Caroli Rocha / Resumo: Proposição: O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de três meios de armazenamento temporário no processo de reparo de enxertos ósseos retirados de calota craniana e fixados em mandíbula de coelhos. Material e Método: Foram removidos dois blocos ósseos de 9mm da calota craniana de 40 coelhos machos e colocados no ângulo mandibular direito e esquerdo. O enxerto ósseo foi fixado ao leito receptor imediatamente após a sua remoção (G1), fixado 2 horas após armazenamento em meio seco (G2), 2 horas imerso em solução fisiológica (G3) e 2 horas imerso em solução de Euro Collins® (G4), todos a temperatura ambiente. Os animais foram sacrificados aos 7, 15, 30 e 60 dias pós-operatórios. Uma medida macroscópica padronizada da espessura do enxerto posicionado no leito receptor foi aferida no transoperatório e após o sacrifício de cada grupo. Os cortes histológicos foram corados pela hematoxilina e eosina e pela técnica de imunoistoquímica, através da expressão das proteínas osteocalcina (OC) e fosfatase ácida tartarato-resistente (TRAP). Resultado: A espessura do enxerto e rebordo evidenciou um comportamento uniforme entre os grupos, quando comparados no mesmo período, não havendo diferença estatisticamente significativa. A análise histométrica do percentual de osso neoformado na interface entre o leito receptor e o enxerto demonstrou não haver diferença estatística entre os grupos, no período de 7 e 15 dias pós-operatórios, exceto o grupo G1 que mostrou-se estatisticamente superior em relação ao grupo G4 (p=0,0227) aos 15 dias. Houve uma maior imunomarcação para TRAP e OC verificada no grupo G1, porém sem diferença significante entre os grupos do mesmo período. Conclusão: A solução fisiológica e de Euro Collins® utilizadas como meio de armazenamento temporário, demonstraram influenciar de forma semelhante na biocompatibilidade... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Purpose: The aim of this study was to evaluate the influence of three temporary storage environments in the repair process of bone grafts removed from the calvaria and fixed in rabbits' mandible. Materials and Methods: Two bone blocks with 9 mm were removed from the calvaria of 40 male rabbits and placed on their right and left mandible angles. Bone graft was placed at the receptor site immediately after its removal (G1), placed 2 hours after storage in dry environment (G2), 2 hours immersed in physiological solution (G3) and 2 hours immersed in Euro Collins® solution (G4), all of them at room temperature. The animals were euthanized at 7, 15, 30 and 60 post-operative days. A standard macroscopic measurement of the graft thickness positioned at the receptor site was done at the trans-operative period and after the euthanasia of each group. Histological sections were stained by hematoxylin and eosin and by immunohistochemical technique, through the expression of the proteins osteocalcin (OC) and tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP). Results: Ridge and graft thicknesses evidenced an uniform behavior among the groups, when the same periods were compared, and there was no statistically significant difference. Histometric analysis of the newly formed bone percentage at the interface between the receptor site and the graft showed no statistical difference among the groups in the post-operative periods of 7 and 15 days, except G1 group, which showed to be statistically higher when compared to G4 group (p=0,0227), at 15 days. There was a higher immunomarking for TRAP and OC, verified at G1 group, however without significant difference between the groups of the same period. Conclusion: Physiological and Euro Collins® solutions used as temporary storage environments showed to influence, similarly, the biocompatibility process of the autogenous bone graft, presenting a repair process dynamics close to immediate grafting procedure. / Doutor

Orientador: Marco Antonio Bottino / Banca: Lafayette Nogueira Jr. / Banca: Wilson Roberto Sendyk / Banca: Márcia Carneiro Valera Garakis / Banca: Renata Faria / Resumo: A utilização de enxerto ósseo autógeno previamente à instalação de implantes osseointegráveis tem apresentado bons resultados, entretanto, a necessidade de uma segunda área cirúrgica como fonte doadora e o grau de morbidade da técnica têm direcionado a busca por alternativas seguras para a reconstrução óssea. O propósito desta pesquisa foi avaliar o efeito do enxerto de osso alógeno fresco congelado, oriundo de Banco de Tecido, em comparação ao autógeno no processo de reparação de enxertos na calvária de coelhos. Foram utilizados 15 coelhos adultos, nos quais foram realizados 2 enxertos em blocos nos ossos parietais, divididos aleatoriamente nos seguintes grupos de acordo com o tratamento: autógeno (A - enxerto com osso autógeno) e alógeno (B - enxerto com osso alógeno processado em Banco). Decorridos 15, 30 e 60 dias, 5 animais foram sacrificados por período, sendo as peças contendo os enxertos processadas para análises histológica e histomorfométrica. Os resultados foram submetidos ao teste RM ANOVA e de comparação múltipla de Tukey, demonstrando diferenças estatisticamente significantes entre os grupos e entre os tempos estudados. Concluímos que o enxerto alógeno promove formação óssea, porém em menor quantidade e de forma mais lenta em comparação ao enxerto autógeno / Abstract: The use of autogenous bone graft prior to installation of dental implants has shown good results, however, the need for a second surgical site and donor source and degree of morbidity of the technique have led the search for safe alternatives to bone reconstruction. The purpose of this study was to evaluate the effect of allogeneic bone graft, fresh frozen from Bank of tissue, as compared to autograft in the repair of calvarial grafts in rabbits. A total of 15 adult rabbits, in which grafts were performed in two blocks in the parietal bone were divided randomly into four groups according to treatment: autogenous (A - with autogenous bone graft) and allogeneic (B - allogeneic bone graft processed in Bank Bone). After 15, 30 and 60 days, five animals were sacrificed by period, and the pieces containing the grafts were processed for histology and histomorphometry. The results were submitted to the RM ANOVA and Tukey's multiple comparison, statistically significant differences between groups and between time points. We conclude that allograft promotes bone formation, but fewer and more slowly compared to autografts / Doutor

Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da associação de osso autógeno (OA) e de vidro bioativo (VB) ao plasma rico em plaquetas (PRP) como substitutos ósseos no interior de seios maxilares (SM) de coelhos, por meio de análise radiográfica da densidade óssea e da dimensão fractal e análise histomorfométrica. Adicionalmente, pretendeu-se validar os métodos da densidade óssea e dimensão fractal como indicadores da neoformação óssea. Para tanto, 20 coelhos divididos em dois grupos (G1 e G2) foram submetidos à cirurgia de levantamento de SM. No G1, 10 SM esquerdos foram enxertados com OA e 10 SM direitos com VB. No G2, 10 SM esquerdos foram enxertados com uma combinação de OA+PRP e 10 SM direitos com VB+PRP. Após 90 dias, os animais foram sacrificados e radiografias padronizadas dos SMs foram obtidas. Os valores médios (desvio padrão) da densidade óssea, expressa em milímetros equivalentes de alumínio, para os tratamentos OA, VB, OA+PRP e VB+PRP foram, respectivamente, 1,79(0,316), 2,04(0,398), 1,61(0,285) e 1,53(0,309), sendo que diferenças estatisticamente significantes (p<0,05) foram encontradas entre os valores de VB e OA, e, VB+PRP e VB. Na dimensão fractal, os valores encontrados, que podem variar de 1 a 2, foram 1,48(0,040), 1,35(0,084), 1,44(0,043) e 1,44(0,066), respectivamente. Diferenças significantes (p<0,05) foram encontradas entre os valores de VB e OA, e, OA+PRP e VB. Na histometria, expressa em porcentagem de preenchimento ósseo, os valores obtidos foram 63,30l8,609, 52,65(10,415), 55,25(7,018) e 51,07(10,255), respectivamente. Não foram encontradas diferenças estatísticas entre os tratamentos. Não houve correlação estatisticamente significante entre as variáveis densidade óssea, dimensão fractal e porcentagem de osso. Na análise histológica dos SM tratados com OA observou-se tecido ósseo neoformado, ricamente... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of the present study was to evaluate the use of autogenous bone (AB) and bioactive glass (BG) and the association of these materials with platelet-rich plasma (PRP), as bone substitutes in the rabbit maxillary sinus (MS) by means of radiographical bone density and fractal dimension and by histomorphometrical analysis. In addition, the study aimed at validating the two radiographic methods as indicators of bone formation. Twenty rabbits divided into two groups (G1 and G2) were submitted to sinus lift surgery. In G1, 10 left MS were grafted with AB and 10 right MS were grafted with BG. In G2, 10 left MS were grafted with AB+PRP and 10 right MS were grafted with VB+PRP. Ninety days after, the animals were sacrificed and standardized radiographs were taken. Mean values (standard deviation) of bone density, expressed as aluminium equivalent milimeters, in MS grafted with OA, VB, OA+PRP and VB+PRP were 1,79l0,316, 2,04l0,398, 1,61l0,285 and 1,53l0,309, respectively. Statistically significant differences (p <0,05) were observed in bone density between BG and AB, and between BG+PRP and BG. Mean values of fractal dimension, which can vary from 1 to 2, were 1,48l0,040, 1,35l0,084, 1,44l0,043 and 1,44l0,066, respectively. Significant differences were observed between BG and AB and AB+PRP and BG. Mean values of percentage of bone inside MS, assessed by histometrical analysis were, respectively, 63,30l8,609, 52,65l10,415, 55,25l7,018 and 51,07l10,255. Differences were not statistically significant. No correlations were observed among bone density, fractal dimension and percentage of bone. Histological analysis showed that MS treated with AB presented newly formed and mature lamellar bone, with active bone formation presenting several vessels and osteoblasts. The other groups showed minor bone formation, with a diffuse marrow and thin network of newly... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Gulnara Scaf / Coorientador: Elcio Marcantonio Junior / Banca: Maria Lúcia Rubo de Rezende / Banca: Eduardo Sant'Ana / Banca: Eduardo Hochuli Vieira / Banca: Joni Augusto Cirelli / Doutor

Orientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Banca: Eduardo Hochuli Vieira / Banca: Márcio de Moraes / Banca: André Alberto Camara Puppin / Resumo: (1) Proposiç ão: Este estudo avaliou o uso do c opolímero de ácido poliláctico e poliglicólico (PLA/PGA) associado ao osso autógeno raspado, no reparo ósseo ocorrido ao redor de implantes inseridos em leitos sobrefresados, em tíbias de coelhos. (2) Material e métodos: Foram incluídos no estudo 20 coelhos e inseridos 40 implantes, divididos em dois grupos: Controle (C) e PLA/PGA adicionado a osso autógeno (G). Após fresagem controlada para simular a perda da estabilidade primária, cada implante foi inserido no leito preparado, tendo sido adicionado a sua superfície o copolímero PLA/PGA associado a osso autógeno raspado obtido manualmente. O grupo controle consistiu do implante com o espaço do leito preenchido por coágulo sangüíneo. Os animais foram sacrificados nos períodos de 15, 40 e 60 dias pós-operatórios, e foram realizadas as análises biomecânica e Imunoistoquímica. As tíbias onde estavam inseridos os implantes foram removidas, desc alcificadas, crioprotegidas e obtidos cortes que foram submetidos à reação imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para RANKL, OPG e OC. No período de 60 dias pós-operatórios a analise biomecânica de torque-reverso foi realizada antes da descalcificação. (3) Resultados: Os resultados obtidos demonstraram que o copolímero PLA/PGA misturado ao osso autógeno apresentou-se biocompatível, bioabsorvivel e permitiu a neoformação óssea em contato com o implante, revelada pela análise da expressão das proteínas que regulam o ganho e a perda de massa óssea. E, houve predominância significante de deposição óssea e estabilidade revelada pela análise de torque-reverso (a= 0,05). (4) Conclusões: O copolímero de PLA/PGA pode ser utilizado no preenchimento de defeitos sobrefresados ao redor... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: (1) Purpose: This study evaluated the polylactic and polyglycolic acid copolymer (PLA/PGA) with sc raped bone harvest in the bone repair occurrence of implants placed in large stream beds, in rabbit tibia. (2) Materials and Methods: Twenty rabbits had been enclosed in the study and 40 implants, in two groups: Control (C), PLA/PGA with the autologous bone scraped (G). After controlled drilled to simulate the loss of the primary stability, each implant was placed in the prepared stream bed, having been added to its surface the PLA/PGA copolymer with autologous bone scraped manually (G). The control group consisted of the implant placed in the space filled by blood. The animals had been sacrificed in the periods 15, 40 and 60 postoperative days, where the analyses had been carried through biomechanics and imunohistochemistry. The tibias where the implants were inserted had been removed, decalcified, frozen and getting cuts that had been submitted the imunoistochemistry reaction by means of the use of primary antibodies for RANK L, OPG and OC. In the 60 days period postoperative the against-torque biomechanics was carried through before the decalcified. (3) Results: The gotten results had disclosed that the copolymer PLA/PGA with bone graft showed biocompatibility, bioabsorption and allowed bone growing in contact with the implant, disclosed by expression of the proteins that regulate the profit and mass bone loss. And, had significant predominance of bone deposition and stability disclosed by against-torque ( = 0,05). (4) Conclusions: The PLA/PGA copolymer can be used filling defects drilled around implants in tibia of rabbits, when added bone harvest sc raped, therefore it presents characteristic s like biocompatibility and biodegradation, being totally resorpted and substituted by bone, allowing the bone formation with quality in the interface bone/implant. / Doutor

Orientador: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Roberta Okamoto / Banca: Élio Hitoshi Shinohara / Banca: Oswaldo Bergamaschi / Banca: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Resumo: O presente estudo teve por finalidade analisar as respostas teciduais do tecido subcutâneo na presença de transplante homógeno de células de medula óssea, por meio dos estudos histológico e imunoistoquímico das proteínas Cbfa1/Runx2 e osteocalcina. A metodologia utilizada nesse estudo envolve processamento em tecido descalcificado e neste caso, possibilitando cortes com menor espessura, para análise das características morfológicas das células presentes no tecido formado ao redor do enxerto e mesmo a resposta inflamatória do tecido subcutâneo ao material enxertado. Como complementação realizou-se o processamento em tecidos calcificados, após a injeção de fluorocromos, a calceína aos 10 dias e a alizarina aos 20 dias possibilitando a análise do processo de deposição de cálcio ao redor do material enxertado no tecido subcutâneo. Com a análise histológica, verificou-se que o enxerto de medula óssea isoladamente foi incorporado ao tecido subcutâneo, sendo que no período de 20 dias são observadas algumas estruturas semelhantes a tecido ósseo, pois apresentam-se morfologicamente, como tecido calcificado. Com o objetivo de caracterizar o tecido medular implantado no tecido conjuntivo subcutâneo, foi observada imunomarcação positiva contra Cbfa1/Runx2 e contra osteoclacina. Os resultados sugerem que a presença da medula óssea junto ao osso cortical, quando transplantada em seres de mesma espécie, em tecido subcutâneo, favoreceu a osteogênese pelo processo de osteoindução. / Abstract: The purpose of this study was to analyze the cellular response to the subcutaneous tissue in a presence of autolougous bone marrow cells transplantation, through the histological and imunohistochemic study of Cbfa1/Runx2 and osteocalcin proteins. The methodology uses the decalcified tissue processing, and in this case, provides thinnest slices cuts for the morphological analyses and inflammatory responses of the cells around the graft in the subcutaneous tissue. As an extra study, was evaluated the calcified tissues after the fluorochroms injection, calcein in the tenth day and alizarin in the twentieth day, given the possibility to analyze the calcium deposition process around the graft in the subcutaneous tissue. Through the histological analyses it was possible to verify that the bone marrow was well accepted by the connective tissue, at the twentieth day it was possible to see some structures similar to bone, because it was morphologically similar to calcified tissue. With the objective to characterize the bone marrow implanted in the conjunctive subcutaneous tissue, positive results against Cbfa1/Runx2 and osteocalcin was observed. The results suggest that the presence of the bone marrow next to the cortical bone, when grafted in beings of same species, in subcutaneous tissue, it favored osteogneses for the osteoinduction process. / Doutor

Resumo: O objetivo deste estudo experimental foi comparar histologicamente o preenchimento do assoalho do seio maxilar por coágulo local com ou sem a associação de osso autógeno (controle), bem como investigar a osseointegração em duas diferentes superfícies de implante sob essas condições, através de medidas histométricas, análises histológicas e em freqüência de ressonância (RFA). Quatro macacos prego (tufted capuchin) tiveram todos os pré-molares e os primeiros molares superiores extraídos. Após quatro meses de reparo, os animais foram submetidos a cirurgia para acessar o assoalho do seio maxilar, através de uma janela óssea, para elevação da membrana do seio. O seio direito foi deixado para que se reparasse espontaneamente (somente coágulo), enquanto o esquerdo foi preenchido com enxerto ósseo autógeno. A membrana dos seios foram mantidas elevadas pela inserção simultânea de dois implantes (um usinado e outro oxidado eletroliticamente, Sistema Branemark®, Nobel Biocare) em cada lado da maxila. A estabilidade dos implantes foi acessada através da freqüência de ressonância (RFA, Ostell®) no momento da fixação dos implantes e no dia do sacrifício. Com a injeção de fluorocromos foi possível investigar o processo de neoformação óssea nos animais bem como relacioná-lo às diferentes superfícies dos implantes. Os animais foram sacrificados 6 meses após a cirurgia para análise histológica e de histomorfometria (contato-osso-implante - BIC, área de osso nas roscas - BA, e área de osso em um retângulo desenhado - BAR). Concluímos que não houve diferença entre o seio preenchido somente com coágulo local e o seio preenchido com osso autógeno, em relação à RFA, BIC, BA e BAR...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This experimental study aimed at comparing histologically the use of coagulum alone or autogenous bone graft (control) for sinus floor augmentation procedures as well as investigating the role played by implants surface on osseointegration under such circumstances, as measured by histological, histometric and resonance frequency analysis (RFA). Four tufted capuchin monkeys had all upper premolars and 1st molar extracted bilaterally. Four months later the animals underwent maxillary sinus floor augmentation surgery using the window technique. The right sinus was left to heal spontaneously (coagulum alone), whilst the left sinus was filled with autogenous bone graft. The Schneider's membrane was kept elevated by insertion of two implants (machined and oxidized, Bränemark System) in both sinuses. Implant stability was assessed through resonance frequency analysis (RFA, Osstell) at installation and at sacrifice. The pattern of bone formation in all experimental sites as well as related to the different implants surface was investigated using fluorochromes. The animals were sacrificed 6 months after MSFA for histology and histomorphometry (bone-to-implant contact - BIC, bone area in threads - BA, and bone area in rectangle - BAR). The results showed no difference between coagulum and bone graft sites regarding RFA, BIC, BA and BAR. As to BIC, the oxidized implants exhibited improved integration compared with machined ones. Oxidized implants showed higher BA compared to machined implants in bone grafts. The amount of bone tissue do not differ in coagulum alone and autogenous bone sites. Histologically, new bone is frequently deposited in contact with Schneider's membrane in coagulum alone sites, confirming the osseoinductive potential of the membrane. The oxidized implants should be preferred to machined implants in sinus floor augmentation procedures. / Orientador: Osvaldo Magro Filho / Coorientador: Luiz Antônio Salata / Banca: Luis Eduardo Marques Padovan / Banca: Renato Mazzonetto / Banca: João Gualberto Cerqueira Luz / Banca: Idelmo Rangel Garcia Júnior / Banca: Paulo Sérgio Perri de Carvalho / Doutor