Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Resumo: Estudamos comparativamente a avaliação do ganho de peso corpóreo, altura da cernelha, características da carcaça e qualidade da carne em bezerros submetidos à castração pelos métodos de burdizzo e Barburtsyan (castração russa). Foram utilizados 48 animais, gerados de coito natural, nascidos de parto eutócico, com idades entre 01 e 15 dias, provenientes de: fêmeas Nelore X touro ½ Simental ½ Nelore (NS), e vacas ¾ Nelore + ¼ Simental X touros das raças Limousin (LN); Brangus (BN) e Simental (SN).Após exame clínico os animais, considerados hígidos, foram distribuídos, em número de 12 por grupo (4 NS, 3 LN, 3 BN e 2 SN), randomicamente na composição dos quatro grupos experimentais a saber: grupo um (G1), machos orquiectomizados pelo método da castração russa; grupo dois (G2), o mesmo do grupo G1 acrescido, a partir do 4o. mês de idade, da administração, mês-a-mês, pela via subcutânea, de 10 mL de modificador orgânico (Modificador Orgânico Leivas Leite ®); grupo três (G3), controle; grupo quatro (G4), animais castrados com burdizzo, aos 13 meses de idade. Todos os bezerros receberam aleitamento natural até o 7o. mês e as avaliações, de ganho de peso corpóreo e altura foram feitas, cada 30 dias, até o abate que ocorreu quando os animais atingiram 19 meses de idade.As características observadas após o abate foram: peso da carcaça quente (PCQ), escore de acabamento de gordura (EAG), pH da carcaça resfriada (pHC) área de olho de lombo (AOL), espessura da gordura do músculo "longissimus dorsi" (EG) e maciez da carne (MC).Os resultados revelaram que: no ganho de peso e crescimento dos animais não houve diferença significativa (P=0,10) entre os grupos; na análise da maciez da carne, realizada pelo método de Warner Bratzler, o G2 apresentou melhor resultado. / Abstract: We comparativily study the evaluation of corporeal weight profit whiters height, carcass characteristics and meat quality in steers submitted to castration for the methods of Burdizzo and Barburtsyan (Russian castration); 48 animals, generated of natural coitus had been used, born of natural childbirth, with ages between 01 and 15 days, proceeding from: females Nelore X bull ½ Simental ½ Nelore (NS), and cows ¾ Nelore + ¼ Simental X bulls of the Limousin races (LN); Brangus (BN) and Simental (SN) After clinical examination the animals, considered sanitaries, had been distributed, in number of 12 for group (4 NS, 3 LN, 3 BN and 2 SN),, at random, in the composition of four experimental groups to know: group one (G1), males orchiectomyzed for the method of the Russian castration; group two (G2), the same of the G1 group increased of administration,, from 4o. month of age, month by month, for the subcutaneous way, of 10 mL of organic modifier (Organic Modifier Leivas Leite ®); group three (G3), control; group four (G4), animals castrated with burdizzo, in 13 months of age. All steers had sucked natural milk until 7o. month and evaluations, of corporeal weight and height profit had been made, each 30 days, until slaughter, that occurred when animals had reached 19 months of age. The characteristics observed after slaughter had been: hot carcass weight (PCQ), fat finishing props up (EAG), cooled carcass pH (pHC) loin beef eye area (AOL), thickness of "longissimus dorsi" muscle fat (EG) and meat tenderness (MC). The results had disclosed that: in weight and growth profit of the animals it did not have significant difference (P = 0,10) between the groups; in the analysis of meat tenderness, carried through the method of Warner Bratzler, the G2 presented better results. / Mestre

Orientador: Fernanda da Cruz Landim-Alvarenga / Banca: Alício Martins Junior / Banca: Yeda Fumie Watanabe / Resumo: As técnicas de produção in vitro de embriões bovinos ainda precisam ser melhoradas em relação às taxas de embriões produzidos e sua qualidade. A adição de fatores de crescimento aos meios de cultivo de embriões bovinos tem sido estudada, com o intuito de melhorar a produção e a qualidade embrionária. O objetivo deste experimento foi testar a adição de GH, IGF-1 e Insulina em duas etapas do processo de produção in vitro: na maturação dos ovócitos e no cultivo dos embriões, visando aumentar as taxas de produção de blastocistos e a qualidade dos embriões produzidos, além de verificar a viabilidade de uma coloração com acridina orange e iodeto de propídeo para avaliação da qualidade dos embriões. No experimento 1, avaliou-se as taxas de clivagem e formação de blastocistos após maturação ovocitária em meio 199 (sais de Earle e L-glutamina e 2,2 mg/ml de bicarbonato de sódio, médium 199, Sigma, Saint Louis, EUA, # M-4530 ), na presença de 10% de SFB, de sódio, 1 mg/ml de 17 estradiol (E2 - Sigma, Saint Louis, EUA, # E-2758), 50 g/ml de hCG (Profasi® 5.000UI), 5 g/ml de FSH (Folltropin-V®, Vetrepharm, Ontário, Canadá), e 75æg/ml de sulfato de gentamicina, suplementado com IGF-1 , GH, Insulina, adicionados separadamente ou em conjunto. No experimento 2 foram avaliadas as taxas de clivagem e formação de blastocistos em meio composto por HTF (Human Tubal Fluid, HTF , Irvane) e BME (Basal Medium Eagle, BME , Sigma, Saint Louis, EUA), na proporção de 1:1 (HTF:BME) acrescido de 0,6% de BSA, 0,01% de Mioinositol e 75 g/ml de gentamicina, incubados em estufa a 38, 5oC, a 5% de CO2 e umidade absoluta, com suplementação de 10% de SFB no dia 3 de cultivo. O meio foi suplementado com IGF-1, GH, Insulina,adicionados separadamente ou em conjunto. No experimento 3, a coloração com acridina orange e iodeto de propídeo foi testada para avaliar a qualidade das estruturas produzidas. / Abstract: In vitro embryo production techniques in bovines still need to be improved due to the embryo production rate and the quality. The addition of growth factors to the bovine embryo culture medium has been studied due to their effects on the production and embryo quality. The objective of this experiment was to study the addition of GH, IGF-1 and Insulin at two steps of the in vitro embryo production such as oocyte maturation and embryo culture, aiming at to increase the blastocysts rates as well their quality, as evidenced by the viability after staining with acridine orange and propideium iodete. In experiment 1, the cleavage rate and blastocyst production were evaluated after oocyte maturation in medium 199 with Earle's salt, L-glutamine and 2.2 mg/ml sodium bicarbonate, medium 199, Sigma, Saint Louis, USA, # M-4530) plus 10% BFS, 50 æg /ml sodium piruvate, 1 mg/ml estradiol 17 ß (E2 - Sigma, Saint Louis, USA., # E-2758), 50æg/ml hCG (Profasi® 5.000UI), 5 æg/ml FSH (Foltropin-V®, Vetrepharm, Ontário, Canada), and 75æg/ml gentamicin sulfate, supplemented either with IGF-1, GH, Insulin alone or in combination. In experiment 2, the cleavage rate and blastocyst formation were evaluated after in vitro embryo culture in HTF (Human Tubal Fluid, HTF ®, Irvane) and BME (Basal Medium Eagle, BME ®, Sigma), in 1:1 proportion (HTF: BME) plus 0.6% of BSA, 0.01% of Mioynositol and 75 æg/ml of gentamicin sulfate, at 38, 5ºC, 5% of CO2 and absolute humidity atmosphere, supplemented with 10% FCS at day 3 of culture. The medium was supplemented with IGF-1, GH, Insulin alone or in combination. In experiment 3, the acridine orange and propideium iodete stain was used to evaluate the quality of produced morulae produced as in experiment 1 or 2. The number and percentage of cells with DNA fragmentation was used to determine marulae quality. / Mestre

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Banca: Maria Angélica Miglino / Banca: Paula de Carvalho Papa / Banca: César Roberto Esper / Banca: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Resumo: Devido às elevadas perdas gestacionais verificadas nas fases embrionária e fetal, principalmente em animais produzidos in vitro (TN e/ou FIV), o presente trabalho avaliou, por RIE, a participação dos produtos secretados pelas BNCs na síntese in vitro de PGF2alfa pelas células BEND e constatou que o meio condicionado, na presença de PDBu, determinou o aumento da produção de PGF2alfa (de 435,84a para 1323,94b pg/mL; p<0,05), mas não na ausência de PDBu (19,01a; 15,08a; 16,83a e 23,10a pg/mL; respectivamente para MCSS; 1:25; 1:50 e 1:100; p<0,05), indicando a participação destes produtos na modulação da síntese de PGF2alfa, provavelmente na etapa da enzima PKC. A expressão gênica relativa de LP e VEGF foi avaliada pela técnica de PCR em tempo real, em placentas de animais TN e FIV, comparados a animais MN e, embora haja uma tendência de .down-regulation. para o VEGF (-1,41a e .0,72a; respectivamente para TN e FIV, p<0,05) não se verificou diferença na expressão entre os grupos. Quanto ao LP, também não foi verificada diferença na sua expressão, embora haja uma tendência numérica de .up-regulation. em TN (+0,11) e .down-regulation. em FIV (-3,18). Estes dados confirmam a capacidade de modulação de síntese de PGF2alfa pela BNC, bem como a não diferença na expressão gênica relativa de VEGF e LP em placentas de animais TN e FIV, quando comparados à MN. / Abstract: Due to the high pregnancy failures during foetal and embryo stages, mainly in in vitro produced-animals (by NT and/or IVF), this work evaluated the BNCs products on in vitro PGF2alpha synthesis, by RIA, from BEND cells and showed that the conditioned medium, with PDBu, increased the PGF2alpha synthesis (from 435.84a to 1323.94bpg/mL, p<0.05), but not without PDBu (19.01a; 15.08a; 16.83a and 23.10a pg/mL; respectively to MCSS; 1:25; 1:50 and 1:100; p<0.05), showing the function of these cellular products on PGF2alpha synthesis modulation, probably at PKC level. The PL and VEGF relative gene expression were evaluated, by Real Time PCR, in NT and IVF placentas, compared to AI placentas and, although there was a tendency for VEGF to be down-regulated (-1,41a and .0,72a; respectively to TN and IVF, p<0,05), no differences between groups were observed. In relation to LP gene expression, although there was a tendency for upregulation in NT group (+0.11) and down-regulation in IVF (-3.18), no statistical differences were shown also. These data shown the modulation capacity on PGF2alpha synthesis by BNC, as well the no differences on relative gene expression of VEGF and PL in NT and FIV placentas, when compared to IA placentas. / Doutor

Orientador: Fabíola Freitas de Paula Lopes / Banca: Ciro Moraes Barros / Banca: José Antônio Visintin / Resumo: O estresse térmico materno compromete a fertilidade de vacas leiteiras. Os oócitos nas fases de vesícula germinativa (VG) e maturação são susceptíveis aos efeitos deletérios causados pelo estresse térmico, entretanto os mecanismos celulares desencadeados pela temperatura elevada são pouco conhecidos. Os danos celulares induzidos pelo estresse térmico podem ser manipulados por amplo espectro de fatores biológicos, incluindo o fator de crescimento semelhante à insulina- I (IGF-I). Dessa forma, os objetivos gerais desta proposta foram caracterizar as alterações celulares e de desenvolvimento induzidas pela temperatura elevada em oócitos na fase de VG e avaliar o papel termoprotetor do IGF-I neste contexto. Para tanto, os experimentos 1 e 2 visaram estabelecer o modelo de bloqueio meiótico in vitro. No primeiro experimento foram avaliadas concentrações crescentes (50; 75; 100; 150 e 200 μM) do bloqueador meiótico roscovitina. A porcentagem de oócitos em VG (taxa de bloqueio meiótico) foi baixa em todas as doses de roscovitina testadas. No segundo experimento foram avaliadas diferentes concentrações de butirolactona (0; 12,5; 25; 50 e 100 μM) em meio de inibição meiótica contendo 0 ou 3 mg/ml de albumina sérica bovina (BSA) na porcentagem de oócitos em VG e na porcentagem de oócitos em metáfase II (taxa de reversão do bloqueio meiótico após a maturação in vitro). A eficiência do bloqueio meiótico foi alta para todas as doses de butirolactona avaliadas, exceto 12,5 μM de butirolactona com BSA. De maneira similar, a porcentagem de oócitos em MII foi alta para todos os tratamentos, exceto para dose de 100 μM de butirolactona sem BSA, indicando possível efeito tóxico desta concentração. Com base nestes resultados o modelo de inibição meiótica utilizado para todos os demais experimentos fez uso... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Maternal heat stress compromises fertility of lactating dairy cows. Germinal vesicle stage (GV) and mature oocytes are susceptible to deleterious effects of maternal heat stress. However, the cellular mechanisms triggered by elevated temperature are not well known. The cellular damage induced by heat stress can be manipulated by a wide range of biological factors, such as insulin-like growth factor-I (IGF-I). Therefore, overall objectives of this proposal were to characterize cellular and developmental changes induced by elevated temperature on GV oocytes and evaluate the role of IGF-I in this context. Experiments 1 and 2 aimed to establish an in vitro meiotic arrest model. The first study evaluated the effect of increasing concentrations (50, 75, 100, 150 and 200 μM) of the meiotic inhibitor roscovitine. The percentage of GV oocytes (rate of meiotic arrest) was low at all roscovitine doses tested. In the second experiment different butyrolactoneconcentrations (0, 12.5, 25, 50 and 100 uM) were evaluated in meiotic inhibition medium containing 0 or 3 mg/mL bovine serum albumin (BSA) in percentage of GV oocytes and percentage of metaphase II oocytes (rate of meiotic arrest reversibly after in vitro maturation). Meiotic arrest efficiency was high for all butyrolactone doses tested, except 12.5 μM butyrolactone with BSA. Similarly, the percentage of MII oocytes was high for all doses, except for 100 μM butyrolactone without BSA, indicating a possible toxic effect of this concentration. Based on these results the meiotic arrest model used for all subsequent experiments used 12.5 μM butyrolactone in the absence of BSA. The third experiment evaluated the effect of various IGF-I concentrations (0, 12.5, 25, 50 and 100 ng/ml) on heat-induced DNA fragmentation on GV oocyte. In the absence of IGF-I, heat shock of 41°C for 14 hours increased... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Nereu Carlos Prestes / Banca: Eunice Oba / Banca: Regina Kiomi Takahira / Banca: Daniel Bartceli de Souza / Banca: Gilson Hélio Toniollo / Resumo: O presente trabalho teve por objetivo comparar a composição bioquímica e as concentrações de testosterona e progesterona no líquido amniótico de fetos bovino da raça Nelore produzidos por fecundação in vivo, fecundação in vivo com transferência de embrião (TE) e produção in vitro (PIV). Os problemas fetais observados ao momento do parto e pós-parto imediato em animais oriundos de PIV e a escassez de pesquisas que determinem a composição do líquido amniótico associada aos três sistemas de produção embrionária permitiram o desenvolvimento deste trabalho. Utilizaram-se 60 animais divididos em: grupo 01 - vacas Nelore gestando bezerros oriundos de inseminação artificial (IA) (n=20); grupo 02 - receptoras gestando bezerros Nelore provenientes de inovulações de embriões oriundos de doadoras superovuladas pelo método convencional (n=20); grupo 03 - receptoras de embriões gestando bezerros Nelore originados de inovulações de embriões oriundos de doadoras pelo método de aspiração folicular (n=20). No momento do parto, após a visualização das bolsas, colheram-se 15mL de líquido amniótico por punção da bolsa com agulha e seringa adequadas. As amostras foram processadas e analisadas no serviço de laboratório clínico do Departamento de Clínica Veterinária da FMVZ/UNESP de Botucatu-SP e no Laboratório de Endocrinologia do departamento de Reprodução Animal e Radiologia Veterinária. Para análise bioquímica foram utilizados Kits comerciais seguindo a técnica recomendada pelo fabricante. A dosagem hormonal de progesterona (P4) e testosterona (T) foi determinada por meio de radioimunoensaio em fase sólida com a leitura realizada em contador Gama Count Cobra II. Os dados obtidos na avaliação bioquímica e no perfil hormonal foram submetidos à análise de variância (ANOVA) e, uma vez demonstrada diferença estatística por 22 esse teste aplicou-se o Método de Tukey, com 5% de nível de significância. / Abstract: The present work had for objective to compare the biochemical composition and the concentrations of testosterone and progesterone in the amniotic fluid of fetuses of the Nelore cows produced by in vivo fecundation, in vivo fecundation at embryo transfer (ET) and in vitro production (IVP). The fetal problems observed at the delivery moment and at the immediate post-partum in animals originating from IVP and the shortage of researches that determine the composition of the amniotic fluid associated to the three systems of embryonic production allowed the development of this work, adding results to the studies that are being done by other researchers with the placenta of IVP animals. Sixty animals were used divided into 3 groups: Group 1 - Nelore cows pregnant with calves conceived by artificial insemination (AI) (n=20); Group 2 - receptor cows pregnant with Nelore calves provement from superovulation of embryo donors (n=20); Group 3 - receptor cows pregnant with Nelore calves obtained by in vitro production after follicular aspiration (n=20). At the delivery moment, after the visualization of the sacs, 15mL of amniotic liquid were collected by puncture. The samples were processed and analyzed in the service of clinical laboratory of the Department of Veterinary Clinic of FMVZ/UNESP of Botucatu-SP and in the Laboratory of Endocrinology of the department of Animal Reproduction and Veterinary Radiology. For biochemical analysis commercial kits were used following the technique recommended by the manufacturer. The hormonal determinaton of progesterone (P4) and testosterone (T) was performed through radioimmunossay (RIA) in solid phase with the reading accomplished in accountant Gama Count Collects II. The data obtained in the biochemical evaluation and in the hormonal profile were submitted to the variance analysis (ANOVA) and, once demonstrated a statistic difference by that method the Tukey test was applied, with a 24 5% of level significancy. / Doutor

Tese (Doutorado)—Universidade Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2012. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-08-21T11:52:14Z No. of bitstreams: 1 2012_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 4964531 bytes, checksum: 9d463cc52f0602d4161f0a4808dbf390 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2012-08-21T11:52:42Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 4964531 bytes, checksum: 9d463cc52f0602d4161f0a4808dbf390 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-08-21T11:52:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 4964531 bytes, checksum: 9d463cc52f0602d4161f0a4808dbf390 (MD5) / A avaliação de embriões produzidos in vitro (PIV) no estágio pós-eclosão é uma importante ferramenta para verificar a qualidade de embriões PIV. É justamente nessa fase, em que ocorre a maior perda embrionária. Para avaliar os embriões nesse estágio, esse trabalho propõe a utilização do sistema de cultivo pós-eclosão (PHD). Esse sistema é um método alternativo que pode auxiliar na avaliação do potencial de desenvolvimento dos embriões sem a necessidade de transferi-los para receptoras. Mas, para utilizar esse sistema na rotina é necessário verificar sua eficiência. Portanto, esse trabalho teve por objetivo avaliar a viabilidade do sistema PHD através de avaliações morfológicas e moleculares de embriões produzidos nesse sistema. Esse trabalho foi composto de três estudos. O primeiro visou validar o sistema PHD no laboratório e verificar o melhor protocolo para realizar esse sistema. Para isso, túneis de agarose foram construídos com água Milli-Q ou com solução fosfato salina (PBS) foram utilizados para o desenvolvimento dos embriões PIV. O segundo trabalho, após a escolha do melhor protocolo, objetivou avaliar o comportamento de embriões produzidos in vivo e in vitro de D7 cultivados no sistema PHD até D14. E finalmente, o último trabalho, verificou a eficiência do sistema PHD para o cultivo de embriões PIV até D14 comparado à transferência múltipla para o útero de receptoras. Durante o período de cultivo, os embriões foram mensurados e avaliados quanto à qualidade morfológica do trofoblasto e botão embrionário. Além disso, o perfil molecular foi avaliado pela quantificação da expressão de genes relacionado com qualidade do embrião, SLC2A1, SLC2A3, G6PD, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSOD , HSP70, IFNT, nos embriões de D7 e D14. Quanto ao primeiro trabalho observou-se que o melhor protocolo para o sistema PHD foi quando se utilizou a água Milli-Q para a construção dos túneis, pois nesse os embriões tiveram um maior crescimento durante o cultivo. No segundo, trabalho verificouse que apesar da baixa taxa de crescimento os embriões in vivo tiveram desenvolvimento semelhante no sistema PHD do que os in vitro. E quando se comparou os embriões totalmente in vitro com os totalmente in vivo, verificou-se que os in vitro eram menores, mas a maioria da expressão dos genes foi semelhante entre os grupos (SLC2A3, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSO , IFNT). E, no último trabalho, o principal resultado foi que os embriões in vitro cultivados até D14 no útero de receptoras foram semelhantes ao grupo controle (totalmente in vivo), mas esses dois tipos de embriões foram diferentes dos cultivados no sistema PHD, principalmente, em relação à porcentagem de embriões crescidos/recuperados, ao tamanho e a expressão gênica. Porém, verificou-se a possibilidade de embriões PIV se desenvolverem nos túneis de agarose. Concluiu-se que o sistema PHD ainda não está apto para se utilizado na rotina, principalmente, devido à baixa porcentagem de embriões que se desenvolvem. Portanto, investimentos em métodos para que ele se torne menos seletivo e dê condições para o desenvolvimento de embriões de boa qualidade que se desenvolveria normalmente em ambiente uterino seriam de grande valia. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The evaluation of in vitro-produced embryos (IVP) in the post hatching stage is an important tool to verify the quality of IVP embryos, as is in this phase that most embryonic loss occurs. In the order to evaluate the embryos at this developemental stage, the present study proposes the use of the post-hatching development (PHD) system. This system is an alternative method which may help to evaluate the developmental potential of embryos without transfering them to a recipient’s uterus. However, to use this system routinely in the laboratory, it is necessary to verify its efficiency. Therefore, this study aimed to evaluate the viability of the PHD system using morphological and molecular evaluations of embryos produced in this system. This study was conducted in three different studies. The first was designed to validate the PHD system in the laboratory and to determine the best testing protocol. Agarose tunnels were subsequently constructed either with Milli-Q water or with phosphate buffer saline (PBS) and IVP embryo development was evaluated. Sencondly, after selecting the best protocol, we aimed to evaluate the behavior of in vivo and in vitro embryos in the PHD system from Day (D)7 through D14. Finally, in the third study, we verified the efficiency of the PHD system and multiple transfer protocol for culture IVP embryos until D14. During the culture period, embryos were measured and evaluated for morphological quality of the embryonic trophoblast and embryonic disc. The molecular profile was determined by quantification of the expression of genes related to embryo quality, such as SLC2A1, SLC2A3, G6PD, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSOD, HSP70, IFNT, in D7 and D14 embryos, using qPCR. In the first study, we concluded that the best protocol was when agarose tunnels were constructed with Milli-Q water, as embryos demonstrade a greater increase in size. In the second study, we found in vivo embryos presented a lower development rate in the PHD system, when compared morphologically to the in vitro embryos. On comparison of the completely in vitro embryos with completely in vivo embryos, it was found that in vitro embryos were smaller than the in vivo embryos, but most of the genes had similar expression between the groups (SLC2A3, PGK-1, KRT8, PLAC 8, CD9, HSF-1, MNSOD, IFNT). In the last study, we concluded that IVP embryos cultured until D14 in a recipients uterus were similar to control group (completely in vivo), and both were different from embryos cultured in the PHD system. Although the PHD system is inefficient we demonstrated that it can be used to develop IVP embryos. It was concluded that the PHD system is not yet able to be routinely used, especially due to the low percentage of embryos that develop in it. Therefore, an investment into this method, it can become less selective and provide conditions for the develop of good quality embryos that would normally development in uterine conditions, would be of great value.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2008. / Submitted by Natália Cristina Ramos dos Santos (nataliaguilera3@hotmail.com) on 2009-09-29T14:39:20Z No. of bitstreams: 1 2008_WilsonJoseBrandaoJunior.pdf: 383503 bytes, checksum: 6de7529fe53d7fae89dc52ea51d5a5e7 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2009-09-30T15:37:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_WilsonJoseBrandaoJunior.pdf: 383503 bytes, checksum: 6de7529fe53d7fae89dc52ea51d5a5e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-09-30T15:37:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_WilsonJoseBrandaoJunior.pdf: 383503 bytes, checksum: 6de7529fe53d7fae89dc52ea51d5a5e7 (MD5) Previous issue date: 2008-06 / Objetivou-se avaliar as características de crescimento, Peso no Início da Concepção e Peso aos 550 dias de vida, em relação à variável resposta, Idade à Concepção, além dos efeitos fixos (Raça, Estação de nascimento e Ano de avaliação) e aleatórios (Criatórios), quem podem influenciar na precocidade sexual dos zebuínos de corte da categoria elite. Para a elaboração de um Modelo Misto, os dados foram obtidos através de um estudo observacional de 83 criatórios sob a condição de terem mais de dois animais a nos sete anos, totalizando 1263 pesagens de 421 animais. Foi utilizado PROC MIXED do SAS®, onde se verificou a existência de significância das (co)variáveis Peso no Início da Concepção e Peso aos 550 dias e em alguns casos dos efeitos raça, ano e estação, além de suas interações, demonstrando suas influências na variável resposta. O estudo se estendeu em analisar o comportamento das médias, e os resultados mostram que existe um comportamento inverso das (co)variáveis, sendo o Peso no Início da Concepção positiva e Peso aos 550 dias negativa, e que este peso deve ser acompanhado até a puberdade das novilhas de forma mais intensa, devido aos animais com menor peso corpóreo obterem precocidade sexual superior as demais e chegando aos 550 dias mais pesadas, comparativamente. Mesmo fornecido além das exigências dos animais, o manejo nutricional influencia a capacidade reprodutiva, pois o excesso de gordura interfere nas funções reprodutivas negativamente, além de mascarar outros efeitos que seriam identificados caso os animais não estivessem nas mesmas condições. ________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The goal was to evaluate the characteristics of growth, weight in the beginning of the conception, and weight on the 550th day of life, in relation to the variable answer, age to the conception, besides the fixed effects (race, station of birth and year of evaluation) and random (flocks), which can influence in the sexual precocity of the beef zebu of the elite category. For the elaboration of a mixed model, the data obtained through a study of observations of 83 flocks under the condition that they have more than two animals in the seven years, totaling 1263 weightings of 421 animals. PROC MIXED of SAS® was used, where the existence of the significance of the (co)variables of weight in the beginning of the conception and weight on the 550th day, and in some cases of the effects race, year and station, besides their interactions was verified, demonstrating their influences in the variable answer. The study extended in analyzing the behavior of the averages, and the results show that an inverse behavior of the (co)variables exists, being the weight in the beginning of the positive Conception and weight on the 550th day negative, and that this weight should be accompanied until the puberty of the heifers in a more intense way, due to the fact that the animals with smaller body weight obtain superior sexual precocity than the others and arriving at the 550th day comparatively heavier. Same supplied besides the demands of the animals, the nutritional handling influences the reproductive capacity, because the excess of fat interferes with the reproductive functions negatively, besides masking other effects that would be identified case the animals were not in the same conditions.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Diogo Trindade Fóis (diogo_fois@hotmail.com) on 2009-10-13T15:56:58Z No. of bitstreams: 1 2008_RosangelaBatistaVasconcelos.pdf: 3213459 bytes, checksum: b9cfce3ea8f8eb38c4fed7e8a078f0a6 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2009-10-15T15:10:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_RosangelaBatistaVasconcelos.pdf: 3213459 bytes, checksum: b9cfce3ea8f8eb38c4fed7e8a078f0a6 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-10-15T15:10:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_RosangelaBatistaVasconcelos.pdf: 3213459 bytes, checksum: b9cfce3ea8f8eb38c4fed7e8a078f0a6 (MD5) Previous issue date: 2008-06 / Os efeitos dos hormônios gonadotrópicos sobre o desenvolvimento folicular já são bem caracterizados, no entanto, interações entre gonadotrofinas, esteróides e fatores de crescimento sobre os mecanismos intraovarianos envolvidos na regulação da foliculogênese e steroidogenesis ainda são pouco compreendidos. Neste sentido, o presente trabalho padroniza sistemas de cultivo com as células somáticas da parede do folículo, representado pela hemissecção da parede folicular, utilizando dois meios distintos: Um meio definido, aqui denominado ?-MEM e um meio indefinido, aqui denominado TCM. Os sistemas de cultura foram avaliados com relação à manutenção da atividade esteroidogênica, por dosagem dos hormônios estradiol e progesterona, expressão do RNAm da proteína StAR, enzimas da steroidogenesis, e receptor de FSH, aspectos morfológicos e imunomarcação para Cx43 nas hemissecções antes e após cultivo por 24 e 48 horas. Foram utilizados ovários de vacas abatidas em frigoríficos e transportados até o laboratório em solução salina à 37 ºC, dos quais foram dissecados folículos aparentemente saudáveis com 4 e 5 mm diâmetro. Os folículos foram seccionados ao meio para obter as hemissecções da parede do folículo, ou em três para obtenção das partes utilizadas na análise de RT-PCR. As secções do folículo foram cultivadas em meio 100ul do meio e incubadas em estufa a 37,5°C com 5% CO2 e 95% umidade por 24 ou 48 horas. Os Resultados mostram que os meios possuem capacidades de regulação distintas sobre a steroidogenesis folicular, características morfológicas e imunomarcação para Cx43. Os Sistemas de cultura com meio TCM apresentaram elevada concentração de P4 com 24 horas, e aumento progressivo da secreção deste hormônio no cultivo com 48 horas, redução da luminosidade das bandas das enzimas da steroidogenesis ( P450scc, arom, 17bHSD, 3bHSD) e do receptor do FSH após cultivo de 48 horas, além de alteração da morfologia celular a qual adquire forma semelhante a fibroblastos e perda da comunicação célula-célula evidenciada pela ausência da imunomarcação para Cx43 nas células foliculares; resultados que indicam luteinização celular, que podem ser decorrentes do uso do soro fetal bovino e elevadas concentração de FSH utilizado neste meio. Já os resultados obtidos para os sistemas de cultura que utilizaram o meio definido a-MEM puro ou acrescido de FSH em concentração fisiológica, mostra habilidade deste meio em manter atividade esteroidogênica ao longo do tempo de cultura, com menor secreção de P4 do que a obtida no meio indefinido, que não se altera ao longo da cultura, manutenção da expressão das enzimas da steroidogenesis após 48 horas de cultivo, além de conservar a característica morfológica das células semelhantes às obtidas in vivo e elevada expressão da proteína Cx43, resultados semelhantes àqueles obtidos com outros sistemas de cultivo livre de soro, e deixa evidente a capacidade do meio em manter as células foliculares in vitro com comportamento semelhante àquele de células de folículos saudáveis e em desenvolvimento. No meio a-MEM acrescido com FSH foi evidente o efeito estimulante sobre atividade esteroidogênica das células somáticas quando utilizado em dose fisiológica, por estimular a P450 aromatase e prevenir morte celular.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2007. / Submitted by mariana castro (nanacastro0107@hotmail.com) on 2009-12-16T16:22:04Z No. of bitstreams: 1 2007_LarissaDirceudeOliveira.PDF: 426773 bytes, checksum: c8ad856fda16f90c882bc4a96b4d9930 (MD5) / Approved for entry into archive by Daniel Ribeiro(daniel@bce.unb.br) on 2009-12-16T21:47:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_LarissaDirceudeOliveira.PDF: 426773 bytes, checksum: c8ad856fda16f90c882bc4a96b4d9930 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-16T21:47:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_LarissaDirceudeOliveira.PDF: 426773 bytes, checksum: c8ad856fda16f90c882bc4a96b4d9930 (MD5) Previous issue date: 2007-02-17 / O objetivo geral deste trabalho foi avaliar os fatores genéticos e não-genéticos que influenciaram nas características de produção e reprodução. Estimaram-se a herdabilidade direta e materna, variações diretas e de ambiente comum das características: peso ao nascer (PN); peso à desmama corrigido para 205 dias (P205); idade ao primeiro parto (IPP); intervalo entre partos (IEP) e fertilidade real (FR) e também correlações genéticas entre as características de interesse. Foram analisados os dados de um rebanho bovino puro da raça Nelore no município de Padre Bernardo situado no estado de Goiás, o qual de 1400 fêmeas e 1300 machos. Os programas SAS e MTDFREML foram utilizados para análise dos fatores ambientais e genéticos que afetaram as características de interesse. Os efeitos fixos sexo do animal/bezerro, mês de nascimento/parto e ano de nascimento/parto foram significativos (p<0,001) para as características PN, P205 e FR. Já o número do parto da vaca foi significativo (p<0,001) apenas para P205 e FR. Para as características IPP e IEP foram significativos os efeitos do ano de nascimento/parto, sendo que para IEP o número do parto da vaca também foi significativo. As médias para PN, P205, IPP, IEP e FR foram 29,56 Kg, 115,73 Kg, 1340,6 dias, 539,47 dias e 88,41 Kg de bezerro desmamado por ano, respectivamente era composto. A herdabilidade direta e materna para PN e P205 foram 0,28 e 0,73; 0,13 e 0,02, respectivamente. As características IPP, IEP e FR não apresentaram herdabilidade materna, sendo 0,29, 0,10 e 0,16 as herdabilidades diretas respectivamente. Foi encontrado o efeito do ambiente permanente somente nas características PN (0,73) e P205 (0,02). As correlações genéticas PN x P205, IPP x IEP, IEP x FR e FR x P205 foram 0,42, 0,54, 0,33 e 0,64, respectivamente. As regressões de DEPs nos anos mostraram que a seleção para P205 melhorou as outras características como IEP e FR. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The objective of this study was evaluate genetic and non-genetic factors which influence production and reproduction traits in a Nelore herd in Goiás state. Direct and maternal heritabilites and direct and common environmental effects were evaluated for birth weight (PN), weaning weight corrected for 205 days (P205), age at first calving (IPP), calving interval (IEP) and real fertility (FR), as well as genetic correlations between traits of interest. Data came from a Nelore herd in Padre Bernardo, Goiás State which has 1400 females and 1300 males. The SAS and MTDFREML programs were used to analyse the data. The fixed effects of animal/calf and month and year of birth/calving were significant (p<0,001) for PN, P205 and FR. The parturition number was only significant (p<0,001) for P205 and FR. For IPP and IEP year of birth/calving was significant, as was number for parturition for IEP. The means for PN, P205, IPP, IEP and FR were 29.56 Kg, 115.73 Kg, 1340.6 days, 539.47 days and 88.41 Kg calf weaned per year, respectively. The heritability (direct and maternal) for PN and P205 were 0.28 and 0.73; 0.13 and 0.02 respectively. IPP, IEP and FR did not show maternal heritability, with direct heritabilities 0.29, 0.10 and 0.16 respectively. Permanent environment effects were found for PN (0.73) and P205 (0.02). Genetic correlations between PN x P205, IPP x IEP, IEP x FR and FR x P205 were 0.42, 0.54, 0.33 and 0.64, respectively. Regressions of DEPs on year showed that selection for P205 improved the other traits.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2009. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2010-03-30T14:20:06Z No. of bitstreams: 1 2009_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 533514 bytes, checksum: 9cda08d9e438cdb3a1719ae60d8ca5bb (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-18T04:34:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 533514 bytes, checksum: 9cda08d9e438cdb3a1719ae60d8ca5bb (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-18T04:34:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_GrazieliMarinheiroMachado.pdf: 533514 bytes, checksum: 9cda08d9e438cdb3a1719ae60d8ca5bb (MD5) Previous issue date: 2009 / Técnicas de preparação de sêmen são usualmente utilizadas na produção in vitro de embriões (PIV) bovinos visando melhorar a qualidade espermática após o descongelamento. Dentre estas técnicas, a centrifugação em gradiente de Percoll tem sido a mais utilizada. O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de diferentes velocidades, tempo de centrifugação e volume de Percoll nas características espermáticas, na produção e sexo de embriões bovinos. Foram descongeladas amostras de sêmen de quatro touros, que foram submetidas a três diferentes procedimentos no gradiente de Percoll : T1 – 4 mL (volume final) de Percoll 45%:90%, centrifugados por 20 minutos a 700 g; T2 – 800 μL (volume final) de Percoll 45%:90% centrifugados por 20 minutos a 700 g e T3 – 800 μL (volume final) de Percoll 45%:90% centrifugados por por 5 minutos a 5000 g. A avaliação espermática da motilidade, morfologia, integridade de acrossoma, membrana e cromatina, foi realizada antes e após a passagem pelo Percoll. Para a PIV foram utilizados 1194 ovócitos maturados in vitro, sendo a taxa de clivagem avaliada em D2 (48h) e a taxa de blastocisto avaliada no dia 7 após fecundação (D7). Os blastocistos em D7 (n=360) foram congelados para determinação do sexo. Os dados do desenvolvimento embrionário e avaliação espermática foram analisados pela ANOVA considerando o efeito de touro, tratamento e interação touro x tratamento (P<0,05). Para analisar o sexo dos embriões utilizou-se o teste 2 com freqüência esperada de 50:50 (P<0,05). A comparação entre os tratamentos e touro também verificada pelo teste 2. Todos os tratamentos com o Percoll melhoraram significativamente a proporção de espermatozóides móveis. Não houve efeito do tratamento em nenhuma característica espermática avaliada (P>0,05), entretanto, observou-se efeito de touro. A taxa de clivagem e blastocito também não foi afetada pelos tratamentos com o Percoll. Entretanto, foi observado diferenças entre touros (P<0,05). A taxa de clivagem e blastocisto foi melhor para o touro 1 (86 ± 1,6a% e 47 ± 2,6c%) seguido do touro 2 (86 ± 2,1a% e 39 ± 6,6c%) e touro 3 (65 ± 5,9b% e 17 ± 4,1d%). O touro 4 apresentou baixa produção total de blastocisto (n=5), sendo eliminado da análise. A proporção macho:fêmea foi semelhante em todos os tratamentos para os touros 2 e 3. Apenas o touro 1 no T1 apresentou uma maior porcentagem de embriões machos (61%) em relação aos embriões do sexo feminino (39%). Quando apenas os tratamentos foram considerados, independentes dos touros, não foi verificado diferença na proporção macho:fêmea entre T1 (55:45 %), T2 (45:55 %) e T3 (44:56 %). Os resultados mostraram que a utilização de diferentes velocidades, tempo de centrifugação e volume de Percoll não influenciou a taxa de blastocisto e a relação macho:fêmea. Entretanto, para o touro 1 foi observado um desvio para produção de embriões machos quando se utilizou o T1. Esses resultados sugerem a possibilidade de utilizar um menor volume de Percoll por um período de tempo mais curto, diminuindo assim o custo e o tempo para a realização da fecundação in vitro. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Techniques for sperm selection are usually used for bovine in vitro embryo production (IVP) to improve semen quality after thawing. Among these techniques Percoll gradient has been the most used. The aim of this study was to evaluate the effect of different volumes of Percoll, time and force of centrifugation on sperm quality, embryo development and sex of IVP bovine embryos. Frozen-thawed semen from four bulls were submitted to three different Percoll procedures: T1 - 4 mL (final volume) of Percoll 45%:90%, centrifuged for 20 minutes at 700 g, T2 - 800 μL (final volume) of Percoll 45%:90% centrifuged for 20 minutes at 700 g and T3 - 800 μL (final volume) of Percoll 45%:90% centrifuged for 5 minutes at 5000 g. Semen was evaluated before and after Percoll treatment for sperm total motility, morphology, integrity of acrosome, membrane and chromatin. A total of 1194 oocytes were matured, fetilized and cultured in vitro, cleavage rate was valued on D2 and blastocyst rate on D7 after in vitro insemination. The blastocysts in D7 (n=360) were frozen for posterior sex determination. Data from embryo development and sperm characteristic were analyzed by ANOVA considering the effect of bull, treatment and interaction bull x treatment (P <0.05). The ratios were compared with the expected ratio 1:1 by  2 test (P<0.05). All Percoll methods significantly improved the proportion of motile spermatozoa. No effect of treatment was detected in any of the sperm characteristic (P>0.05), however bull-related differences were observed in all parameters tested. Similarly, cleavage and blastocyst rate were not affected by Percoll procedure (P>0.05). However, there was a difference among bulls (P<0.05). Sire 4 had very low embryos production (n=5), and was eliminated from the analysis. Higher rates of cleavage and blastocyst were observed for bull 1 (86 ± 1.6 a % and 47 ± 2.6 c%) and bull 2 (86 ± 2.1a % and 39 ± 6.6c %) showed than for bull 3 (65 ± 5.9b % and 17 ± 4.1d %). The proportion of male:female embryos was similar in all treatments for bulls 2 and 3. Only bull 1 in the T1 presented a greater percentage of male (61%) than female embryos (39%). When only treatments were considered, independent of bulls, no difference was found in proportion male:female (%) among T1 (55:45), T2 (45:55) and T3 (44:56). The results showed that the use of different speed, time of centrifuge and volume of Percoll gradient did not influence the rate of blastocyst and the male:female ratio. However, for bull 1 it was observed a higher production of male embryos when T1 was used. These results suggest the possibility of using a lower volume of Percoll for a shorter period of time, thus reducing the cost and time to perform the in vitro fertilization.