Orientador: Fernanda da Cruz Landim / Coorientador: José Buratini Junior / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: José Antonio Visentini / Banca: Mario Binelli / Resumo: Objetivo deste experimento foi estudar os mecanismos envolvidos na sobrevivência à criopreservação de embriões Bos taurus indicus (Nelore) e Bos taurus taurus (Simental) produzidos in vitro (PIV) e in vivo (TE). Em um arranjo fatorial 2 x 2, duas subespécies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) e duas origens (PIV vs TE) foram utilizadas para testar a hipótese de que a capacidade de sobrevivência após a criopreservação é um evento multifatorial, e que a composição lipídica e o padrão de expressão gênica global afetam a criotolerância embrionária. Vacas Nelore (N=14) e Simental (N=14) foram submetidas a OPU e os oócitos recuperados (N=840 e 450, respectivamente) foram submetidos a MIV, FIV e CIV. Além disso, vacas Nelore (N=7) e Simental (N=8) foram submetidas a superestimulação ovariana, IATF e lavagem uterina. Os embriões PIV (N=349 e N=105) e TE (N=80 e N=74), respectivamente Nelore e Simental, foram submetidos as técnicas de vitrificação (N=70-94), coloração de Sudan Black (n=30), espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-MS; N=8 por grupo), microarray genômico (Nelore PIV N=4, Nelore TE N=4, Simental PIV N=3, Simental TE N=3) e validação no qPCR (N=8 por grupo). Modelos univariados (PROC LOGISTIC e PROC GLIMMIX- SAS 9.2) e multivariados (análise dos componentes principais-PCA- Piruete v.3.11 e MetaboAnalyst) foram utilizados na análise estatística. A análise do Microarray genômico procedeu-se no FlexArray 1.6.1.1. Genes com "fold change" de 1,5 e P≤0,05 foram considerados diferentemente expressos. Embriões Simental apresentaram maior sobrevivência após a vitrificação que os Nelore (34,6 vs 20,2%; P<0,05). Apesar disso, os embriões Simental apresentaram maior conteúdo lipídico do que os Nelore (3,4±0,3 vs 2,4±0,3 intensidade de cinza x 10-4 / μm3 ; P<0,05)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective was to study mechanisms involved in the post-cryopreservation survival of Bos taurus indicus (Nellore) and Bos taurus taurus (Simmental) in vitro (IVP) and in vivo (ET) produced embryos. In a 2x2 factorial experimental design, two subspecies (Bos taurus indicus vs Bos taurus taurus) and two origins (PIV vs ET) were used to test the hypotheses that the postcryopreservation embryo survival capacity is a multifactorial event and that the lipid composition and the global gene expression pattern affect embryo cryotolerance. Nellore and Simmental cows (N=14) were submitted to OPU sessions and recovered oocytes (840 and 450, respectively) underwent IVM, IVF and IVC. Moreover, Nellore (N=7) and Simmental (N=8) cows were submitted to ovary superstimulation, FTAI, and uterine flushing. The IVP (N=349 and N=105) and ET (N=80 and N=74) embryos, Nellore and Simmental respectively, were used in the vitrification (N=70-94), Sudan Black B stain (N=30), matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDIMS) (N=8 per group), genomic microarray (Nellore IVP N=4, Nellore ET N=4, Simmental IVP N=3, Simmental ET N=3) and qPCR (N=8 per group) techniques. Univariate (PROC LOGISTIC and PROC GLIMMIX, SAS 9.2) and multivariate (PCA - Piruete v.3.11 and MetaboAnalyst) models were used for the statistical analysis. Microarray data analysis was performed in FlexArray 1.6.1.1 software. Genes with a fold change of at least 1.5 and a probability of P<0.05 were considered differentially expressed. Simmental embryos had higher post-vitrification survival (34.6 vs 20.2%; P<0.05) compared with Nellore. Nevertheless, Simmental embryos had higher lipid content than Nellore (3.4±0.3 vs 2.4±0.3 gray intensity x 10-4 / μm3; P<0.05). When compared ET with PIV embryos, it was observed that the former had higher post-vitrification... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Resumo: O sistema de acasalamento mais empregado na pecuária de corte extensiva é a monta a campo com o uso de reprodutores múltiplos. Este sistema traz diversas facilidades ao produtor, entretanto não permite a identificação da paternidade das crias, impossibilitando a comparação do desempenho reprodutivo e produtivo dos diferentes touros, o que afeta negativamente as avaliações genéticas e o progresso genético pela seleção. Objetivou-se com este trabalho comparar metodologias estatísticas que permitam considerar rotineiramente o uso da informação de acasalamentos com touros múltiplos na avaliação genética. Para tanto, foram analisados registros de ganhos de pesos pós-desmama e peso ao sobreano, mensurados em machos e fêmeas de animais da raça Nelore, nascidos no período de 1984 a 2006. Foram aplicados diferentes procedimentos estatísticos que consideram dados de animais com incerteza de paternidade na estimação de parâmetros e valores genéticos. As estimativas dos componentes de (co)variâncias genéticas e dos valores genéticos para os animais presentes no pedigree foram comparadas entre os diferentes procedimentos estatísticos. No capítulo 2, foram utilizados o modelo de paternidade desconhecida e o modelo de grupos genéticos para comparação. Verificou-se que o modelo de grupo genético, definido pelo intervalo de gerações dos machos deve ser usado para classificar e predizer o mérito genético dos filhos de reprodutores múltiplos. No capítulo 3, comparou-se o modelo com base na matriz de parentesco médio e o modelo hierárquico bayesiano (HIER) para incerteza de paternidade. Concluiu-se que o HIER é o modelo que melhor ajustou os dados para estimar os parâmetros genéticos de animais que possuem paternidade incerta. No capítulo 4, propôs-se uma aproximação do modelo hierárquico Bayesiano, usando procedimentos Bayesianos empíricos e máxima ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Multiple-sire (MS) mating is the most used mating system in extensive beef cattle systems. This system provides several conveniences to the farmers, but does not allow for paternity identification of the offspring, making impossible to compare the reproductive and productive performance of different bulls, negatively affecting the genetic evaluations and therefore the genetic progress. The aim of this work was to compare statistical approaches that allow for considering information from mating with multiple sires in genetic evaluation. Records from postweaning gain and long yearling weight, measured in males and females of Nellore animals, born from 1984 to 2006 were used. We applied different statistical approaches, which consider data from animals with uncertain paternity in the estimation of genetic parameters and values. The estimated values of the (co) variance components and breeding values for the animals in the pedigree were compared from the different statistical procedures. In chapter 2, we compared unknown parentage and genetic groups models. It was found that the genetic group model defined by the generation interval of males was more appropriate to predict the genetic merit of animals with unknown paternity. In chapter 3, we compared the model based on the use of an average numerator relationship matrix and a hierarchical Bayes model (HIER) accounting for uncertain paternity. We concluded that HIER was the best data fitting model to estimate genetic parameters of animals with uncertain paternity. In chapter 4, we proposed a Bayesian hierarchical model approximation, using empirical Bayesian procedures and maximum likelihood. The proposed model represented a computationally feasible alternative to calculate the probabilities of candidate sires and animal genetic effects on genetic evaluations of large datasets, when there are uncertainty paternity assignments for some animals / Doutor

Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-10-16T11:25:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 566274 bytes, checksum: 435b70c31d30f285a894df8e6609cd67 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-16T11:25:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 566274 bytes, checksum: 435b70c31d30f285a894df8e6609cd67 (MD5) Previous issue date: 2015-06-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da adição de L-carnitina, um acelerador do metabolismo lipídico, e ácido linoléico conjugado (trans-10, cis-12) em diferentes fases da produção in vitro de embriões sobre o desenvolvimento e criotolerância embrionária. Em todos os experimentos, embriões foram produzidos in vitro utilizando-se complexos cumulos-oócitos (CCO) provenientes de ovários coletados em abatedouro. Foram calculadas as taxas de clivagem (dia 3 do cultivo), taxa de formação de blastocistos expandidos e blastocistos em estágio avançado de desenvolvimento (dia 7 do cultivo) em função do total de CCO inseminados. Embriões em estágio de blastocisto expandido foram coletados de cada tratamento no dia 7 do cultivo in vitro e submetidos ao congelamento lento. Avaliou-se a taxa de reexpansão e eclosão embrionária 24, 48 e 72 h após o descongelamento em função do total de embriões descongelados. No experimento 1, oócitos fertilizados foram incubados em meio de cultivo contendo diferentes concentrações de L-carnitina (0,00; 0,75; 1,50 ou 3,03 mM) suplementado ou não com 5 % de soro fetal bovino (SFB). A adição de L-carnitina ao meio de cultivo na concentração de 1,5 mM melhorou a taxa de formação de blastocistos em estágio avançado de desenvolvimento quando comparado ao grupo controle (15,2±2,0 vs. 11,2±1,5; P<0,05). A L-carnitina também apresentou efeito positivo sobre a reexpansão embrionária 24 e 48 h pós-descongelamento quando adicionada na concentração de 0,75 e 3,03 mM (77,4±4,5; 80,1±4,0 e 75,0±5,5; 78,0±4,2 vs. 64,0±4,7; 67,4±4,7) ao meio de cultivo (P<0,05). Não houve interação entre os efeitos da adição de L-carnitina e SFB ao meio de cultivo embrionário. Apesar da suplementação do meio de cultivo com SFB ter melhorado o desenvolvimento embrionário (27,2±1,1 vs. 19,4±0,9; P<0,01), houve uma redução das taxas de reexpansão 24, 48 e 72 h pós-descongelamento (65,8±2,9; 67,8±2,8; 66,0±3,0 vs. 78,1±3,8; 81,4±3,0; 79,1±3,5; P<0,01). No experimento 2, os embriões foram cultivados em meio contendo L-carnitina (0,75 mM) ou ácido linoleíco conjugado (CLA – 100 mM) durante as primeiras 96 h, últimas 72 h ou durante todo o cultivo in vitro. A suplementação do meio de cultivo com L-carnitina ou CLA durante diferentes vifases do cultivo in vitro não afetou o desenvolvimento e a criotolerância embrionária. No experimento 3, avaliou-se o desenvolvimento e a crioresistência embrionária quando oócitos foram maturados em meio suplementado com L-carnitina (3.03 mM) e/ou CLA (100 mM). L-carnitina e CLA não afetaram o desenvolvimento embrionário quando adicionados ao meio de maturação. Apesar da L-carnitina não ter afetado a a taxa de reexpansão embrionária pós-descongelamento, o CLA apresentou efeito negativo sobre a eclosão embrionária 72h pós-descongelamento (53,3±3,6 vs. 65,1±4,3; P<0,05) quando adicionado ao meio de maturação oócitaria. Como conclusão, a L- carnitina melhora a criotolerância de embriões produzidos in vitro quando adicionada à concentração de 0,75 mM ao meio de cultivo embrionário. Já o CLA apresenta efeito negativo sobre a sobrevivência embrionária após o descongelamento quando adicionado ao meio de maturação oócitaria. / High lipid content in embryo is associated with low freezing tolerance. This study assessed the effects of exogenous L-carnitine and trans-10, cis-12 (t10, c12) conjugated linoleic acid (CLA) on in-vitro development and cryotolerance of bovine embryos when added during different stages of in vitro production of embryos. For all experiments, embryos were produced in vitro using slaughterhouse cows oocytes. Cleavage rates on Day 3, blastocyst and advanced blastocyst (hatching/hatched blastocyst) formation rates on Day 7 were calculated from the total number of oocytes subjected to in vitro fertilization (IVF). Expanded blastocysts-stage embryos from each treatment were harvested on Day 7 and subjected to slow freezing. Embryo viability was assessed 24, 48 and 72 h after thawing. In experiment 1, fertilized oocytes were incubated with different L-carnitine concentrations (0.0, 0.75, 1.50 or 3.03 mM) in the presence or absence of fetal bovine serum (FBS). There was an improvement (P<0.05) on embryo development when 1.5 mM of L-carnitine was added to in vitro culture (IVC) medium. L-carnitine had also a positive effect (P<0.05) on post thaw embryo competence when supplemented at 0.75 and 3.03 mM during IVC. There was no interaction (P>0.05) between the effects of L-carnitine and FBS supplementation on IVC on embryo development and cryosurvival. Although FBS supplementation had increased blastocyst development (P<0.05), it reduced the reexpansion rates at 24, 48 and 72 h post thawing. In experiment 2, L-carnitine (0.75 mM) or CLA (100 mM) were supplemented during the first 96 h, last 72 h or throughout the entire IVC period. There was no effect of L-carnitine or CLA supplementation during different periods of IVC on embryo development and cryotolerance. In experiment 3, embryo development and cryosurvival were evaluated when oocytes were maturated in medium supplemented with L-carnitine (3.03 mM) or/and CLA (100 mM). No effect of L-carnitine and CLA supplementation during in vitro maturation (IVM) on IVP embryo development was detected. Although there was no effect (P>0.05) of L-carnitine supplementation on embryo cryotolerance, CLA showed a negative effect (P<0.05) on embryo cryosurvival when added during IVM. In conclusion, L-carnitine improved embryo cryosurvival viiiwhen added at 0.75 mM during IVC and CLA supplementation during IVM has a negative effect on post thaw embryo survival.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-03-16T11:29:46Z No. of bitstreams: 2 texto completo.pdf: 542484 bytes, checksum: ce7405ee8e6a21702cc15252ef074236 (MD5) texto completo.pdf: 542484 bytes, checksum: ce7405ee8e6a21702cc15252ef074236 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-16T11:29:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 texto completo.pdf: 542484 bytes, checksum: ce7405ee8e6a21702cc15252ef074236 (MD5) texto completo.pdf: 542484 bytes, checksum: ce7405ee8e6a21702cc15252ef074236 (MD5) Previous issue date: 2015-07-24 / Um dos problemas mais importantes da indústria da inseminação artificial é a determinação do potencial de fertilidade do sêmen, pois, as metodologias convencionais utilizadas para avaliar a qualidade de sêmen não têm demonstrado boa correlação com fertilidade dos espermatozoides. Resultados de recentes estudos com sêmen congelado-descongelados quando submetidos a uma filtragem antes das avaliações espermáticas tem melhor correlação entre as características dos espermatozoides e a fertilidade in vivo. Além disso, a utilização de diferentes sondas fluorescentes nas análises do sêmen permitem avaliação ampla e individual dos espermatozoides, além de sua qualidade funcional, bioquímica e estrutural. Desde modo, o presente estudo teve como objetivo empregar diferentes testes complementares de avaliação espermática pré e pós-filtragem em solução coloidal de sêmen criopreservado e verificar sua correlação com a fertilidade in vivo. Foram utilizadas duas amostras (palhetas da mesma partida) de sêmen congelado de 18 touros doadores de sêmen, sendo 11 reprodutores da raça Nelore, cinco Composto Montana Tropical, um Senepol, e um Red Angus, escolhidos de acordo com os animais utilizados em programa de Inseminação Artificial em Tempo Fixo (IATF) imposto em um rebanho comercial. Os dados obtidos foram divididos de acordo com a fertilidade obtida após as inseminações, sendo fertilidade satisfatória (≥ 55 % de taxa de prenhez) e fertilidade insatisfatória (˂ 55 % de taxa de prenhez) Todas as fêmeas foram sincronizadas por uso de protocolos de sincronização e inseminação artificial em tempo fixo (IATF). Os testes empregados para análise do sêmen foram motilidade e vigor espermático, análise quanto à integridade de membrana plasmática e acrossomal, produção de peróxido de hidrogênio intracelular, e organização da bicamada, por meio de sondas fluorescentes (IP, FITC-PSA, M540) empregando a Citômetria de fluxo. Houve efeito de touro sobre a taxa de prenhez (P<0,05) com máximo de 76 % (19/25) e mínimo de 15,6 % (5/32) sendo a média de 54,6 % (723/1325) de prenhez com uma inseminação. Quanto aos grupos de fertilidade houve diferença (P<0,05) entre as médias, sendo 62 % de prenhez para o grupo FERTILIDADE SATISFATÓRIA e 40,6 % para o grupo FERTILIDADE INSATISFATÓRIA. Na avaliação convencional do sêmen, o grupo de fertilidade satisfatória apresentou maior média de motilidade espermática progressiva retilínea (60,49%) que o grupo de fertilidade insatisfatória. Nas avaliações realizadas por citometria de fluxo, o grupo de fertilidade insatisfatória obteve maiores médias percentuais para populações celulares com membrana plasmática lesionada e membrana acrossomal intacta (7,18 %), para células com alto grau de peroxidação e lesão de membrana plasmática (25,5 %) e menor média percentual de populações celulares com membrana plasmática íntegra e estável (19,5 %) que diferiram (p<0,05) do grupo e fertilidade satisfatória. A centrifugação do sêmen em solução coloidal foi eficiente em reter as células com lesões na membrana plasmática e células com lesões na membrana acrossomal (16,8; 31,9 e 7,0 %); células com alta peroxidação intracelular (4,17; 64,3 e 15,0 %). Concluiu-se que as populações de espermatozóides com lesão na membrana acrossomal representam o maior percentual das células espermáticas em sêmen submetido ao processo de congelamento e relacionam-se com à alta taxa de fertilidade obtida em programa de inseminação artificial em tempo fixo (IATF); populações de espermatozóides com lesão de membrana plasmática e alta taxa de peroxidação intracelular estão relacionadas à baixa taxa de fertilidade em programas de inseminação artificial em tempo fixo (IATF); a seleção de espermatozoides com membranas acrossomal e espermática intactas é possível pela centrifugação associado ao uso de soluções coloidais (Androcoll®) e a avaliação da motilidade espermática progressiva retilina está relacionada a alta taxa de fertilidade em programa de inseminação artificial em tempo fixo. / One of the most important problems of the artificial insemination industry is the determination of semen fertility potential for the conventional methods used to assess the quality of semen have not shown good correlation with fertility of sperm. Results of recent studies with frozen-thawed semen when subjected to filtering before the spermatic reviews have better correlation between the characteristics of sperm and fertility in vivo. In addition, the use of different fluorescent probes in semen analysis allow for a wide and individual assessment of sperm, as well as its functional, biochemical and structural. In this way, the present study aims to employ different complementary tests pre sperm and post-filtering in colloidal solution and check its correlation with fertility in vivo semen. Two samples were used (vanes in the same match) frozen semen of 18 donor bulls semen, 11 breeding Nelore five Composite Montana Tropical, one Senepol, and Red Angus, chosen according to the animals used in program Fixed-Time Artificial insemination (FTAI). It was previously established that the data obtained would be divided into fertility group, being satisfactory (≥ 55% pregnancy rate) and unsatisfactory (˂ 55% pregnancy rate) All females were synchronized by using synchronization protocols and fixed-time artificial insemination (FTAI). For data analysis of semen were motility and sperm vigor, analysis of the integrity of plasma and acrosomal membrane of intracellular hydrogen peroxide production, and organization of the bilayer by means of fluorescent probes (IP FITC-PSA, M540) in flow cytometer. There was bull effect on the pregnancy rate (P<0.05) with a maximum of 76% (19/25) and a minimum of 15.6% (5/32) with a mean of 54.6% (723/1325 ) of pregnancy. As for fertility groups difference (P <0.05) between the average, 62% of pregnancy for SATISFACTORY group and 40.6% for UNSATISFACTORY group. In conventional semen evaluation, the satisfactory group showed higher mean rectilinear motility (60.49%) than the poor group. In the assessments performed by flow cytometry, the UNSATISFACTORY group had higher average percentage for cell populations with damaged plasma membrane and intact acrosome membrane (7.18%; IP + PSA-) for cells with a high degree of peroxidation and plasma membrane injury (25.5%; DCFDA + PI +) and lower mean percentage of cell populations with full and stable plasma membrane (19.5% M540-6DCFDA +) that differed (p <0.05) SATISFACTORY group. The centrifugation of semen in colloidal solution was efficient in retaining the cells with lesions in the plasma membrane and cell injuries in the acrosome membrane (16.8% IP + PSA-; 31.9%, IP + PSA +, 7.0% IP-PSA +); cells with high intracellular peroxidation (4.17% DCFDA-PI +; 64.3% DCFDA + PI + 15.0%, + DCFDA PI). It was concluded that the populations of sperm with injury acrosome membrane represent the highest percentage of sperm cells in semen subjected to the freezing process and are related to the high fertility rate obtained in fixed-time artificial insemination (FTAI); sperm populations of plasma membrane damage and high intracellular peroxidation rate represent the highest percentages of sperm populations of cryopreserved semen, and are related to low fertility rate in fixed-time artificial insemination (FTAI); the selection of sperm with intact acrosome and sperm membranes is possible by centrifugation associated with the use of colloidal solutions (Androcoll®) and evaluation of sperm motility by light microscopy is related to high fertility rate in fixed-time artificial insemination (FTAI) program.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-07-06T18:52:11Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 812421 bytes, checksum: f1b860f2d967f001dbbf6367d56787a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-06T18:52:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 812421 bytes, checksum: f1b860f2d967f001dbbf6367d56787a3 (MD5) Previous issue date: 2017-02-13 / O presente estudo foi realizado com objetivo de determinar o efeito da suplementação de matrizes Nelore mantidas em pastejo nos diferentes períodos da gestação sobre fertilidade pós-parto e desempenho da progênie durante a fase de cria. Assim, foram utilizadas 27 matrizes Nelore, divididas em três grupos (n=9 para cada grupo) como segue: matrizes não suplementadas durante a gestação (UNS), matrizes suplementadas de 30 a 180 dias de gestação (MID) e matrizes suplementadas de 181 a 281 dias de gestação (LATE). A composição percentual dos suplementos fornecido as matrizes foi: grãos de milho moído (26,25%), farelo de trigo (26,25%) e farelo de soja (47,5%). O suplemento foi formulado para conter 30% PB. Foram fornecidos 150 kg de suplemento por animal durante cada período de suplementação (1 e 1,5 kg / dia para vacas nos grupos MID e LATE, respectivamente), acompanhados de mistura mineral oferecida ad libitum. As matrizes UNS, receberam apenas mistura mineral ad libitum durante a gestação. Coletas de sangue para determinar as concentrações de NEFA (ácidos graxos não esterificados), BHBA (β-hidroxibutirato) e glicose foram realizadas nos dias 30, 105, 180, 230 e 281 da gestação das matrizes. Após o parto, nos dias 10, 18 e 30, foram feitas coletas de sangue para determinar a concentração de progesterona (P4), assim como avaliações ultrassonográficas para determinar o tamanho, ausência de líquidos nos cornos uterinos e presença de folículos e corpos lúteos ováricos. Inseminação artificial a tempo fixo (IATF) foi realizada em todas as matrizes aos quarenta e cinco dias pós-parto, e vinte oito dias após inseminação foi feito diagnostico para determinar o porcentual de gestação. Após o nascimento, todas as progênies foram suplementadas por oito meses até o desmame, com o mesmo suplemento em quantidades iguais. A composição percentual do suplemento foi: grão de milho moído (30%), farelo de trigo (30%), farelo de soja (35%) e melaço (5%). O suplemento foi formulado para conter 25% PB. O suplemento foi oferecido numa quantidade de 6 g / kg do peso vivo e a mistura mineral foi oferecida ad libitum. Trinta dias após o parto foi realizado na progênie biópsia de tecido muscular esquelético para determinação do número, tamanho das fibras musculares e expressão de marcadores genéticos. Durante a fase de cria foi avaliado na progênie o ganho de peso, espessura de gordura subcutânea e área de olho de lombo. Menor concentração de NEFA e BHBA (P <0,01) aos 180 e 281 dias de gestação foi observada para matrizes MID e LATE respectivamente. A maior concentração de glicose (P <0,1) durante a gravidez foi observada para matrizes MID a 180 dias e LATE a 281 dias de gestação. A involução do útero foi observada aos 30 dias pós-parto, com tamanho de 14.40±1.31, 15.70±1.20 e 14.70±1.25 mm, respectivamente para os tratamentos UNS, MID e LATE. O desempenho da progênie (P=0,953) não foi influenciado pela suplementação das matrizes gestantes; maior espessura de gordura subcutânea (P=0,006) foi observada na progênie de matrizes LATE; houve maior área de olho de lombo (P=0,077) para progênie de matrizes MID e LATE quando comparadas com UNS. Maior número de fibras musculares (P=0.093) foi observado para progênie de matrizes MID quando comparadas com UNS, mais não foi observado diferencia com matrizes LATE assim como destas com matrizes UNS. Não foi detectado influência da suplementação de matrizes gestantes sobre o tamanho das fibras musculares da progênie (P=0.208). Maior expressão de FGF2 (P=0.003) foi observada para progênie do tratamento MID, igualmente foi observado maior expressão de PPARα (P=0.073) para progênie de matrizes MID quando comparadas com LATE mais não houve diferencia destes dois tratamentos com UNS. A suplementação pré- parto, melhora o balanço energético pelo aumento na concentração de glicose e diminuição na concentração de NEFA e BHBA, sem alterar a involução do útero e a fertilidade pós-parto. A suplementação estratégica de matrizes gestantes em pastejo não altera o desempenho da progênie durante a fase de cria, porém, melhora a expressão de marcadores genéticos (FGF2 e PPARα) com capacidade de influenciar positivamente a myogenesis e adipogenesis fetal. / The present study was carried out with the objective of determining the effect of supplementation of Nelore matrices maintained in grazing during the different gestation periods on postpartum fertility and progeny performance up to 8 months old (weaning). Thus, 27 Nelore matrices were used, divided into three groups (n = 9 for each group) as follows: matrices not supplemented during gestation (UNS), matrices supplemented from 30 to 180 days of gestation (MID) and supplemented matrices of 181 to 281 days of gestation (LATE). The percentage composition of the supplements provided for the matrices was: ground corn (26.25%), wheat bran (26.25%) and soybean meal (47.5%). The supplement was formulated to contain 30% CP. 150 kg of supplement were provided per animal during each supplementation period (1 and 1.5 kg / day for cows in the MID and LATE groups, respectively), accompanied by a mineral blend offered ad libitum. UNS matrices received only mineral mixture ad libitum during gestation. Blood samples were taken to determine the concentrations of NEFA, BHBA (β- hydroxybutyrate) and glucose at days 30, 105, 180, 230 and 281 of gestation of the matrices. After delivery on days 10, 18 and 30, blood samples were taken to determine the progesterone concentration (P4), as well as ultrasonographic assessments to determine the size, absence of fluid in the uterine horns and presence of ovarian follicles and bodies luteous. Fixed-time artificial insemination (FTAI) was performed in all matings at 45 days postpartum and twenty-eight days after insemination, a diagnosis was made to determine the percentage of gestation. After birth, all progenies were supplemented for eight months until weaning, with the same supplement in equal amounts. The percentage composition of the supplement was: ground corn grain (30%), wheat bran (30%), soybean meal (35%) and molasses (5%). The supplement was formulated to contain 25% CP. The supplement was offered in an amount of 6 g / kg body weight, and the mineral blend was offered ad libitum. Thirty days postpartum were performed on progeny biopsy of skeletal muscle tissue to determine number, size of muscle fibers and expression of genetic markers. During the reproduction phase, the weight gain, the thickness of the subcutaneous fat and the loin eye area were evaluated in the progeny. A lower concentration of NEFA and BHBA (P <0.01) at 180 and 281 days of gestation was observed for MID and LATE matrices respectively. Higher glucose concentration (P <0.1) during pregnancy was observed for MID matrices at 180 days and LATE at 281 days of gestation. Involution of the uterus was observed at 30 days postpartum, with a size of 14.40 ± 1.31, 15.70 ± 1.20 and 14.70 ± 1.25 mm, respectively for the treatments UNS, MID and LATE. Progeny performance (P = 0.953) was not influenced by supplementation of the pregnant matrices; greater subcutaneous fat thickness (P = 0.006) was observed in the progeny of LATE matrices; there was larger loin eye area (P = 0.077) for progenies of MID and LATE matrices when compared to the UNS. A higher number of muscle fibers (P = 0.093) was observed for the progeny of the MID matrices when compared to the UNS, but no differences were observed in the LATE matrices and in the UNS matrices. No influence of supplementation of pregnant matrices on the size of the progeny muscle fibers (P = 0.208) was detected. A higher expression of FGF2 (P = 0.003) was observed for the progeny of the MID treatment. Higher PPARα expression (P = 0.073) was also observed for progenies of MID matrices when compared to LATE. Prepartum supplementation improves energy balance by increasing glucose concentration and decreasing the concentration of NEFA and BHBA, without altering uterine involution and postpartum fertility. Strategic supplementation of pregnant grazing matrices does not alter progeny performance during the breeding phase, but improves the expression of genetic markers (FGF2 e PPARα) capable of positively influencing fetal myogenesis and adipogenesis.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-21T15:17:42Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 468549 bytes, checksum: ecfd8b7aff68f74ef6ba8fb1e41a4833 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-21T15:17:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 468549 bytes, checksum: ecfd8b7aff68f74ef6ba8fb1e41a4833 (MD5) Previous issue date: 2016-03-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A reprodução é o componente econômico individual de maior importância em sistemas de produção de carne bovina e a baixa taxa de desfrute observada no rebanho brasileiro reflete a baixa taxa de fertilidade de vacas e a elevada idade à puberdade das novilhas de reposição. Com o intuito de fornecer mais informações sobre estratégias nutricionais para desenvolver novilhas e melhorar o desempenho de matrizes, dois estudos foram realizados e são aqui apresentados na forma de três artigos. Cinquenta novilhas Nelore com 131,8 ± 9,9 kg de peso corporal (PC) médio e 138 ±19 dias de idade foram suplementadas dos 4 aos 14 meses para avaliar os efeitos de alto (A) e baixo (B) níveis de suplementação durante as fases de amamentação e recria sobre o desempenho e as respostas endócrina, metabólica e reprodutiva. Os animais foram distribuídos em cinco planos de suplementação: AA – as novilhas receberam suplemento na quantidade de 6 g/kg do PC durante a amamentação e recria; AB – as novilhas receberam 6 g/kg do PC na fase de amamentação e 3 g/kg do PC durante a recria; BA – as novilhas receberam 3 g/kg do PC durante a amamentação e 6 g/kg do PC durante a recria; BB – as novilhas receberam 3 g/kg do PC durante a amamentação e recria; e CC – controle, nenhum suplemento foi oferecido, apenas sal mineral. Interação entre os níveis fornecidos na amamentação e recria não foram significativos para nenhuma das variáveis de desempenho avaliadas (P > 0,10). O nível de suplementação oferecido durante a amamentação não apresentou efeito sobre as variáveis de desempenho avaliadas posteriormente, na fase de recria (P > 0,10). Houve efeito significativo da suplementação e do nível de suplementação na recria sobre o ganho médio diário (GMD) na recria e PC final (P < 0,05). O GMD total foi também afetado apenas pela suplementação e nível de suplementação utilizado na recria (P < 0,05), animais que receberam 6 g/kg do PC após o desmame tiveram maior GMD total. O diâmetro folicular foi também maior para os animais que receberam 6 g/kg do PC na recria (P < 0,05). Na fase de amamentação, houve uma tendência para maiores níveis de hormônio do crescimento (GH) nas novilhas que receberam 6 g/kg do PC (P < 0,10), e na recria os níveis de GH foram menores para as novilhas suplementadas (P < 0,05). Não houve diferença entre os tratamentos com relação aos níveis de insulina durante a amamentação (P > 0,10), entretanto, os níveis de insulina foram afetados pelo nível de suplementação utilizado na recria (P < 0,05). A maioria dos metabólitos não foi afetada pelo nível de suplementação utilizado durante a amamentação (P > 0,10). Não houve diferença nos níveis de colesterol total, HDL e LDL entre os tratamentos durante a amamentação (P > 0,10). Todos os metabólitos relacionados com o metabolismo da gordura reduziram na recria em relação à fase de amamentação, mas apenas o LDL diferiu significativamente entre os tratamentos (P < 0,05). Houve um efeito positivo do nível de suplementação sobre a concentração de proteína total no soro durante a recria (P < 0,05). A suplementação também aumentou os níveis de albumina na recria (P < 0,05) e, entre os animais suplementados, animais que receberam alta quantidade de suplemento durante a recria apresentaram níveis mais elevados de albumina (P < 0,05). Mas não houve diferença significativa nas concentrações de globulinas (P > 0,10). Em resumo, o desempenho e variáveis endócrina, metabólica e reprodutiva foram incrementados pelo nível de suplementação fornecido na recria, novilhas que receberam suplemento na quantidade de 6 g/kg do PC na recria apresentaram melhores respostas de forma independente do nível recebido anteriormente, durante a amamentação. Os mesmos cinquenta pares vaca-bezerra utilizados no estudo descrito no primeiro artigo foram também utilizados para avaliar os efeitos de alto e baixo níveis de suplementação para bezerras Nelore sobre o desempenho, a produção de leite e o perfil metabólico de suas mães apresentado no segundo artigo. Os mesmos tratamentos avaliados durante a fase de amamentação do artigo anterior foram também aqui avaliados: 0 - controle, nenhum suplemento foi fornecido às bezerras; 3 – as bezerras receberam suplemento em quantidade de 3 g/kg do PC; 6 - as bezerras receberam suplemento em quantidade de 6 g/kg do PC. Não houve efeito significativo do nível de suplementação fornecido à prole sobre o PC, escore de condição corporal e espessura de gordura subcutânea da vaca ao desmame (P > 0,10). O nível de suplementação das bezerras não afetou significativamente a produção de leite corrigida para 4% de gordura (P > 0,10). Os teores de gordura, proteína, lactose e sólidos totais do leite também não diferiram entre os níveis de suplementação (P > 0,10). O nível de suplemento fornecido à prole não influenciou os teores de glicose, colesterol total, HDL, LDL, triglicerídeos, proteínas totais, albumina e globulinas (P > 0,10). Em conclusão, a suplementação de bezerras lactentes nas quantidades de 3 ou 6 g/kg do PC diariamente não afeta o desempenho da matriz lactante. No segundo estudo, apresentado no terceiro artigo, foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar os efeitos de estratégias de fornecimento de suplemento para vacas de corte no terço final da gestação. No Experimento 1, delineado para avaliar o desempenho e as respostas reprodutivas, 35 vacas Nelore gestantes foram distribuídas em delineamento experimental inteiramente casualizado com quatro tratamentos: controle - os animais receberam apenas sal mineral durante todo o experimento; 30d – os animais receberam suplementação durante os últimos 30 dias de gestação na quantidade de 3.0 kg/d; 60d – os animais receberam suplementação durante os últimos 60 dias de gestação na quantidade de 1.5 kg/d e; 90d – os animais receberam suplementação durante os últimos 90 dias de gestação na quantidade de 1.0 kg/d. Todos os tratamentos suplementados receberam a mesma quantidade total de suplemento ao longo do experimento (90 kg; 20% de proteína bruta). O Experimento 2 do terceiro artigo foi delineado com o objetivo de avaliar os efeitos das quantidades que foram diariamente fornecidas para as vacas do Experimento 1 sobre o consumo e metabolismo. Para tanto, quatro vacas Nelore multíparas e gestantes foram utilizadas em delineamento quadrado latino 4 × 4, com 4 períodos experimentais de 15 dias cada. Houve efeito linear de estratégia de suplementação sobre o PC ao parto (P < 0,05) e efeito quadrático sobre a variação de peso pós-parto (P < 0,05), vacas na estratégia 60d perderam menos peso do parto até os 31 dias pós-parto. Nenhuma diferença significativa foi encontrada no PC da prole ao nascimento (P > 0,10). Houve uma tendência quadrática sobre a taxa de gestação na primeira inseminação artificial em tempo fixo (IATF; P < 0,10), mais vacas da estratégia 60d conceberam na primeira IATF, embora nenhuma diferença estatística nas taxas de gestação total tenha sido observada (P > 0,10). O nível de suplementação utilizado não afetou o consumo de forragem ou a digestibilidade da fibra em detergente neutro (P > 0,10). A excreção de N através da urina tendeu a aumentar linearmente com o nível de suplementação (P < 0,10). Conclui-se, portanto, que o fornecimento de 1,5 kg de suplemento durante os últimos 60 dias de gestação melhora o desempenho reprodutivo de vacas de corte na estação de monta subsequente sem nenhum efeito negativo sobre o consumo de forragem. / Reproduction is the single most important economic component in any beef production system and the low offtake rate observed in the Brazilian herd reflects the low fertility rate of cows and the late age at puberty of replacement heifers. In order to provide more information about nutritional strategies to better develop Nellore heifers and to improve dams’ performance, two studies were conducted and the results are here presented in three papers. In the first paper, fifty Nellore heifers with 131.8 ± 9.9 kg average body weight (BW) and 138 ± 19 d of age were supplemented from 4 to 14 months to evaluate the effects of high (H) and low (L) supplementation levels pre and post-weaning on performance, endocrine, metabolic and reproductive responses of heifers. Heifers were distributed in five supplementation plans: HH – animals received 6 g/kg of BW pre and post-weaning; HL – animals received 6 g/kg of BW of supplement pre-weaning and 3 g/kg of BW post-weaning; LH – animals received 3 g/kg of BW pre-weaning and 6 g/kg of BW post-weaning; LL – animals received 3 g/kg of BW pre and post-weaning; and CC – control, no supplement was fed. Interactions between level fed pre and post-weaning were not significant for any performance variables evaluated (P > 0.10). Level of supplement fed pre-weaning did not affect any of the performance variables evaluated at the end of the experiment (P > 0.10). There was a significant effect of supplementation and level of supplementation offered post-weaning on average daily gain (ADG) in the post-weaning phase and final BW (P < 0.05). Overall ADG was also affected only by supplementation and level of supplement fed post-weaning (P < 0.05) with animals receiving 6 g/kg of BW post-weaning gaining more. Follicular diameter was greater for animals receiving 6 g/kg of BW post-weaning (P < 0.05). Growth hormone tended to be higher for heifers receiving 6 g/kg of BW pre-weaning (P < 0.10) and in the post-weaning phase, growth hormone was lower for heifers receiving supplementation (P < 0.05). No difference in insulin levels was observed in the pre-weaning phase (P > 0.10) and insulin levels post-weaning were affected only by level of supplementation offered in that phase (P < 0.05). Most metabolites were not affected by pre-weaning treatment (P > 0.10). There was no difference in total cholesterol, HDL and LDL levels among treatments pre-weaning (P > 0.10). All metabolites related to fat metabolism reduced after weaning but only LDL was significantly different among treatments (P < 0.05). There was a positive effect of level of supplementation post-weaning on serum total protein concentration (P < 0.05). Supplementation increased albumin levels (P < 0.05) and animals receiving high amount of supplement had higher albumin levels as well (P < 0.05). There was no significant difference in globulins concentrations (P > 0.10). In summary, performance, endocrine, metabolic and reproductive variables evaluated were improved by level of supplement fed post-weaning, with heifers receiving 6 g/kg of BW having greater responses, independently of level received pre-weaning. The same fifty pairs used in the study described for the previous paper were used in the second paper to evaluate the effects of high and low supplementation levels for Nellore heifer calves on performance, milk production and metabolic prolife of their dams. The same treatments evaluated during the pre-weaning phase of the previous paper were also here evaluated: 0 – control, no supplement was fed to calves; 3 - calves received supplement in the amount of 3 g/kg of BW; 6 - calves received supplement in the amount of 6 g/kg of BW. There was no significant effect level of supplementation offered to offspring on cow BW, BCS and subcutaneous fat thickness (P > 0.10). Level of supplementation of heifer calves did not significantly affect milk production corrected to 4% of fat (P > 0.10). Fat, protein, lactose and total solids of the milk also did not differ among supplementation strategies (P > 0.10). Level of supplement fed to calves had no effect on cows’ glucose, total cholesterol, HDL, LDL, triglycerides, total protein and albumin levels (P > 0.10). In conclusion, creep-feeding calves in the amounts of 3 or 6 g/kg of BW daily has no major impact on dams’ performance. In the second study, presented in the third paper, two experiments were conducted aiming to evaluate the effects of supplementation strategies for beef cows on the last third of gestation. In Experiment 1, to evaluate performance and reproductive responses, thirty-five pregnant Nellore cows were assigned to a completely randomized design with 4 treatments: control, which received no supplement; supplementation for the last 30 d of gestation (30d; 3.0 kg/d); supplementation for the last 60 d of gestation (60d; 1.5 kg/d); or supplementation for the last 90 d of gestation (90d; 1.0 kg/d). All supplemented treatments received the same total amount of supplement (20% of crude protein) throughout the experiment, 90 kg. Experiment 2 was delineated aiming to evaluate the effects of the amounts fed for cows in Experiment 1 on intake and metabolism. Four multiparous pregnant Nellore cows were assigned to a 4 × 4 Latin square design, with 4 experimental periods of 15 d each. There was a linear effect of days of supplementation on calving body weight (BW; P < 0.05) and a quadratic effect on BW change from parturition to d 31 post-calving (P < 0.05), with cows on the 60d strategy loosing less BW. No difference was found in offspring birth BW (P > 0.10). The 60d strategy tended to have higher pregnancy rate in the first fixed time artificial insemination (FTAI; P < 0.10), but there was no difference in the overall pregnancy rates (P > 0.10). Level of supplementation did not affect forage intake or neutral detergent fiber digestibility (P > 0.10). Nitrogen excreted through urine tended to increase linearly with level of supplementation (P < 0.10). We conclude that providing 1.5 kg of supplement during the last 60 d of gestation improves cow reproductive performance in the following breeding season with no negative effect on forage intake.

Made available in DSpace on 2015-10-06T13:02:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-08. Added 1 bitstream(s) on 2015-10-06T13:19:16Z : No. of bitstreams: 1 000849551.pdf: 939514 bytes, checksum: 901efdf4cabd26a394b9aabd01d199d2 (MD5) / A progesterona e seus análogos têm sido utilizados para diversas finalidades na reprodução animal. O objetivo deste estudo foi avaliar a influencia da progesterona injetável no número de oócitos recuperados, na qualidade oocitária e produção embrionária de novilhas Nelore pré-púberes. Foram utilizadas 31 fêmeas com idade entre 18 a 20 meses, não gestantes e não cíclicas. As doadoras de oócitos foram divididas em 3 grupos experimentais em delineamento crossover da seguinte maneira: Grupo P0 (n=11), os animais deste grupo receberam duas aplicações de solução placebo (1 mL), com intervalo de 7 dias iniciando 14 dias (D-14) antes da primeira aspiração (D-0); Grupo P7 (n=10): os animais receberam uma aplicação de solução placebo (1 mL) 14 dias (D-14) e uma de progesterona (P4) injetável (150mg) 7 dias (D-7) antes da aspiração; Grupo P14 (n=10), neste grupo os animais receberam duas aplicações de P4 injetável (150mg) com intervalo de 7 dias, a primeira 14 dias (D-14) e a segunda 7 (D-7) dias antes da aspiração. Realizaram-se um total de três aspirações foliculares em intervalos de 28 dias. Os animais que apresentaram CL durante o experimento foram alocados em um grupo separado para serem analisados e comparados com o grupo sem CL. Os oócitos recuperados foram selecionados e submetidos aos procedimentos da PIVE. Após a confirmação da homocedasticidade (BoxCox) e normalidade (teste de Cramér-von Mises) dos dados, realizou-se a análise de variância (ANOVA). O teste de Tukey foi utilizado para as comparações das médias das variáveis, para as correlações dos dados foi utilizado o teste de correlação de Pearson, e significantes quando p≤ 0,05. Não foram verificadas diferenças significativas (p>0,05) quanto ao número de oócitos recuperados (oócitos totais), oócitos viáveis (G I, II, III), entre os animais tratados (grupos P7 e P14) em relação aos animais que não receberam P4 (grupo P0). As... / Progesterone has been used for various purposes in the animal reproduction. The objective of this study was to evaluate the influence of exogenous progesterone injection in the number of recovered oocyte, oocyte quality and embryo production of prepubertal Nelore heifers. We used 31 females (18 to 20 months) non pregnant and without corpus luteum (CL). Cows were divided in 3 groups in a cross-over design: Group I P0 (n=11), animals received two placebo solution applications (1 mL), 7-day interval and starting 14 days (D-14) before the first aspiration (D-0); Group II P7 (n=10) treated group, the animals received a placebo solution application (1 mL) 14 days (D-14) and injecting progesterone (P4; 150 mg) 7 days (D-7) before aspiration; Group III P14 (n = 10), animals received two injections of P4 (150mμg) with an interval of 7 days, the first 14 days (D-14) and the second 7 days (D-7) before aspiration. We conducted 3 aspiration with 28-day intervals. The animals with CL during the experiment were placed in a separate group to be analyzed and compared with the group without CL. The recovered oocytes were selected and submitted to the procedures of the in vitro embryo production (IVEP). After confirming the homocedasticity (BoxCox) and normality (Cramér-von Mises test) of the data, carried out the analysis of variance (ANOVA). Tukey's test was used to compare the means of the variables and the pearson correlation test was used for correlations of the data, considered significant when p ≤ 0.05. There were no significant differences (p> 0.05) in the number of oocytes retrieved (total oocytes), viable oocytes (GI, II, III), between the animals treated (P7 and P14 groups) and animals that did not receive P4 (P0 group). The animals showed an average of 14.98 ± 10.82 oocytes collected by aspiration session. The mean and standard deviation of rates (%) of viable oocytes and embryos produced did not differ (p> 0.05) between groups. The ...

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-07-31. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:23:57Z : No. of bitstreams: 1 000858103.pdf: 6986071 bytes, checksum: 61cc82fb4f22cd71ec70c868dc8f37e5 (MD5) / Objetivou-se com este estudo realizar associação genômica ampla, visando detectar regiões cromossômicas associadas a características indicadoras de precocidade sexual de bovinos da raça Nelore, bem como avaliar metodologias para a predição de valores genômicos visando à seleção destas características. Foram utilizados dados de animais da raça Nelore, pertencentes a fazendas que integram os programas de melhoramento genético da DeltaGen® e Paint® (CRV Lagoa). As características associadas à precocidade sexual utilizadas neste estudo foram a idade ao primeiro parto (IPP), a ocorrência de prenhez precoce de novilhas (P16) e o perímetro escrotal (PE). Após o controle de qualidade e consistência dos dados fenotípicos, permaneceram para as análises informações de 68.170, 72.675 e 83.911 animais com fenótipo e de 1.738, 1.770 e 1.680 animais genotipados para IPP, P16 e PE, respectivamente, e 412.993 SNPs. No Capítulo 2, as estimativas dos efeitos dos SNPs foram obtidas utilizando-se a metodologia single-step (WssGBLUP). Todos os animais foram utilizados aplicando-se modelo animal unicaracterística para predizer os valores genéticos e, posteriormente, as soluções dos efeitos dos SNPs foram obtidas a partir destes valores genéticos. Foram identificadas as 10 janelas de 150 SNPs que capturaram a maior proporção da variância explicada pelos marcadores. As 10 janelas de maior efeito obtidas para a P16 estão localizadas nos cromossomos 5, 6, 7, 14, 18, 21 e 27 e somadas explicaram 7,91% da variância genética total. Para o PE, estas janelas estão nos cromossomos 4, 8, 11, 13, 14, 19, 22 e 23, explicando 6,78% da variância total. Com as análises de GWAS foi possível identificar regiões cromossômicas associadas com P16 e PE. A identificação dessas regiões possibilita o melhor entendimento e avaliação destas características, além de indicar genes candidatos para estudos futuros de investigação de... / The objective of this study was to perform genome-wide association to detect chromosomal regions associated with indicator traits of sexual precocity of Nellore cattle, and evaluating methodologies for prediction of genomic values to use for selection of these traits. Data from Nellore animals belonging to farms integrating animal breeding programs of DeltaGen® and Paint® (CRV Lagoa), were used. Age at first calving (AFC), the occurrence of early pregnancy of heifers (EP) and scrotal circumference (SC) were used as traits associated with sexual precocity. After quality control and consistency of phenotypic data, information of 68,170; 72,675 and 83,911 animals with phenotype, and of 1,738; 1,770 and 1,680 genotypes for AFC, EP and SC, respectively, and 412,993 SNPs, remained for analysis. In chapter 2, the estimates of the SNP effects were obtained using the single-step method (WssGBLUP). All animals were used applying single trait animal model to predict the genetic values and, subsequently, the solutions of the SNP effects were obtained from these genetic values. The 10 windows of 150 SNPs that captured the greatest proportion of variance explained by markers were identified. The 10 windows with greater effect obtained for EP are located on chromosomes 5, 6, 7, 14, 18, 21 and 27 and together explained 7.91% of the total genetic variance. For SC, these windows are on chromosomes 4, 8, 11, 13, 14, 19, 22 and 23, explaining 6.78% of the total variance. With GWAS analysis it was possible to identify chromosomal regions associated with EP and SC. Identifying these regions enables better understanding and evaluation of these traits, besides indicating candidate genes for future research studies of causal mutations. In Chapter 3, two multi-step methods were used to estimate the marker effects - GBLUP and IBLASSO; besides the single-step method (ssGBLUP). Observed phenotype was used as the dependent variable to estimate the genomic value ...

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:21:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-11. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:25:30Z : No. of bitstreams: 1 000858937.pdf: 237984 bytes, checksum: 61c941e361051e9de4cce1254082d23f (MD5) / O presente estudo avaliou se a concentração de P4 durante o desenvolvimento do folículo ovulatório em protocolo a base de P4/BE e com uma aplicação de GnRH em seu início interfere na prenhez à IATF em vacas Holandesas em lactação. A hipótese é que vacas com maior P4 no dia da aplicação da 1ª dose de PGF2α terão maior fertilidade. Para alterar a P4 os animais (n=594) foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos para receberem um ou dois dispositivos intravaginais de P4 (CIDR®, Zoetis, SP, Brasil). O protocolo utilizado foi: no d-11 inserção de 1 CIDR (novo ou previamente usado por 9 dias) + aplicação de 2mg i.m. de BE (Gonadiol®, Zoetis, SP, Brasil) + 100mcg i.m. de GnRH (Cystorelin®, Merial, SP, Brasil); d-4, aplicação de 25mg i.m. de Dinoprost (Lutalyse®, Zoetis, SP, Brasil); d-2, aplicação de 25mg i.m. de Dinoprost + 1mg i.m. de ECP (ECP®, Zoetis, SP, Brasil) + retirada do dispositivo de P4; d0, IATF. Os animais do grupo 2CIDR receberam um CIDR adicional no d-11, o qual foi retirado no d-4. Nos d-11 (n= 117), d-4 (n= 351), d0 (n= 214) e d10 (n= 72) foram colhidas amostras de sangue para determinação da concentração de P4. A P/IA foi determinada através de US nos d32 (DG1) e d60 (DG2). Dados binários foram analisados pelo PROC GLIMMIX, e os dados contínuos pelo PROC MIXED do SAS (foi considerada diferença significativa se P<0,05 e tendência se P<0,1). A P4 não diferiu entre os tratamentos no d-11 (1CIDR= 4,2±0,4 ng/ml; 2CIDR= 4,5± 0,4ng/ml; P>0,1), e no d-4 (1CIDR= 3,5±0,2ng/ml; 2CIDR= 3,8±0,2 ng/ml; P>0,1), porém foi detectada interação entre tratamento e presença de CL no início do protocolo na P4 no d-4 (sem presença de CL e 1CIDR= 2,7±0,3ng/ml; 2CIDR= 3,6±0,3ng/ml, com presença de CL e 1CIDR= 4,3±0,3ng/ml; 2CIDR= 4,0±0,3ng/ml; P<0,05). Não houve diferença na prenhez a IATF e nas perdas gestacionais entre os tratamentos [DG1: 1CIDR= 20,0 ... / The present study evaluated if P4 concentration during ovulatory follicle development in a timed artificial insemination (TAI) protocol based on P4/E2 affects pregnancy per AI in lactating Holstein cows. Our hypothesis is that cows that present higher P4 concentration at PGF2α administration have also higher fertility. To alter P4, animals (n=594) were randomly assigned to receive one or two intravaginals devices of P4 (CIDR®, Zoetis, SP, Brazil). TAI protocol utilized was: d-11 intravaginal device of P4 (new or previously used by 9 days) + 2mg im EB (Gonadiol®, Zoetis, SP, Brazil) + 100mcg im GnRH (Cystorelin®, Merial, SP, Brazil); d-4, 25mg im Dinoprost (Lutalyse®, Zoetis, SP, Brazil); d-2, 25mg im Dinoprost + 1mg im ECP (ECP®, Zoetis, SP, Brazil) + CIDR removal; d0, TAI. Animals in the group 2CIDR received an adicional CIDR at d-11, which was removed at d-4. At d-11 (n=117), d-4 (n=351), d0 (n=214) and d10 (n=72), blood samples were taken from cows for P4 concentration measurements. Pregnancy per AI was determined by ultrasound at d32 (DG1) and d60 (DG2). The binomial data were analyzed using PROC GLIMMIX and continuous data using PROC MIXED of SAS. An effect was considered significant when P<0.05 and tendency when P<0.1. P4 did not differ among treatments at d-11 (1CIDR=4.2±0.4ng/ml; 2CIDR=4.5±0.4ng/ml; P>0.1), and at d-4 (1CIDR=3.5±0.2ng/ml; 2CIDR=3.8±0.2 ng/ml; P>0.1). An interaction was detected between treatment and CL presence at the beginning of TAI protocol in P4 at d-4 (without CL and 1CIDR=2.7±0.3ng/ml; 2CIDR= 3.6±0.3ng/ml, with CL and 1CIDR=4.3±0.3ng/ml; 2CIDR= 4.0±0.3ng/ml; P<0.05). There was no difference among treatments in pregnancy per AI and pregnancy loss between DG1 and DG2 [DG1: 1CIDR= 20,0% (81/310) vs. 2CIDR= 15,7% (65/284); DG2: 1CIDR= 18,2% (74/310) vs. 2CIDR= 13,8% (57/283); Pregnancy loss: 1CIDR= 14,1% (7/81) vs. 2CIDR= 11,5% (7/64); P>0,1]. 37,0% (28/63)...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:25:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-05-02Bitstream added on 2014-06-13T19:12:07Z : No. of bitstreams: 1 pinto_rfp_me_botib.pdf: 235047 bytes, checksum: f66f9dd3e29764cee35ce259fd850b2c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O fator de crescimento fibroblástico (FGF10) atua de forma parácrina no complexo cumulus-oócito, aumentando a expressão de genes relacionados à expansão das células do cumulus e à competência oócitária. Objetivou-se com o presente estudo testar se a adição do FGF10 ao meio de maturação melhora a maturação, diminui as taxas de oócitos apoptóticos e influencia na produção de embriões in vitro e na expressão de genes relacionados à competência e implantação embrionárias (COX2, CDX2 e PLAC8). Em todos os experimentos, oócitos foram obtidos de abatedouro, coletados de vacas adultas e maturados por 22 h em meio TCM 199 suplementado com: 2.5 ng/mL FGF10, 10 ng/mL FGF10, 50 ng/mL FGF10 ou na ausência de FGF10 (grupo controle). No Experimento 1, depois da maturação, os oócitos foram fixados e corados com TUNEL para determinar a porcentagem de oócitos apoptóticos e posteriormente com Hoechst-33342 para avaliação dos diferentes estágios da meiose (metáfase 1, metáfase 2 ou metáfase 2 com extrusão do primeiro corpúsculo polar). No Experimento 2, os oócitos foram fertilizados e cultivados até o estágio de blastocisto inicial. No experimento 3 avaliou-se o efeito da suplementação do FGF10 ao meio de maturação in vitro sobre a expressão dos genes COX2, CDX2 e PLAC8 em embriões bovinos. No experimento 1, os resultados demonstraram que a dose de 2,5 ng/mL FGF10 aumentou a porcentagem de oócitos com extrusão do primeiro corpúsculo polar (36%) quando comparado as doses de 10 ng/mL FGF10 (13%), 50 ng/mL FGF10 (12%) e grupo controle (19%; p≤0.05). Com relação ao número de oócitos apoptóticos, as maiores doses de FGF10 apresentaram menor quantidade de oócitos TUNEL-positivos (10 ng/mL and 50 ng/mL FGF10, 5% e 6%, respectivamente) quando comparados a menor... / Not available