Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-02-17T16:58:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_Gabriela_SVMello atualizado.pdf: 5201640 bytes, checksum: e88ac57910ad21718907b08ec59a74f7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-17T16:58:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Tese_Gabriela_SVMello atualizado.pdf: 5201640 bytes, checksum: e88ac57910ad21718907b08ec59a74f7 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / CAPES / O câncer de mama apresentou na última década um aumento na ocorrência e consequente mortalidade, sendo o segundo tipo de câncer mais comum e o primeiro entre as mulheres. A sua forma in situ é caracterizada pelo crescimento confinado das células tumorais, e o que leva à invasão ainda permanece em discussão. Esta neoplasia está intimamente associada com a expressão modificada de diversas enzimas e resíduos de carboidrato de superfície associados a um mau prognóstico, que alteram a capacidade de crescimento, adesão e reconhecimento das células tumorais. Este trabalho teve como objetivo comparar a presença dos terminais sacarídicos N-acetilglicosaminas, ácido siálico e N-acetilgalactosaminas na superfície celular entre os tipos histológicos de lesões encontradas com carcinoma ductal in situ (CDIS), e correlacionar a expressão destes, e das enzimas GnT-III, ppGalNAc-T6 e -T8 com o histórico clínico e histopatológico dos pacientes na predição de um prognóstico/diagnóstico mais acurado e na investigação destas moléculas como potencias biomarcadores. Foram utilizadas biópsias diagnosticadas como CDIS e CDIS com componente invasivo (CDI). As biópsias em bloco de parafina e em microarranjos de tecidos (tissue microarrays - TMA) foram avaliadas utilizando histoquímica com lectinas (WGA, L-PHA, MAL-II, SNA, PNA conjugadas à peroxidase) e imunohistoquímica contra GnT-III, ppGalNAc-T6 e -T8. Entre as cinco lectinas analisadas nas 218 lesões de CDIS puras a MAL-II foi mais expressa em lesões cribriformes quando comparadas com as comedônicas (p=0,0191) e com as sólidas (p=0,0440), enquanto a PNA mostrou maior reatividade em lesões comedônicas (p=0,0052) e micropapilares (p=0,0010) comparadas às sólidas. As demais lectinas não demostraram diferenças estatisticamente relevantes em suas expressões. 109 pacientes, 47 com CDIS puro e 62 com CDIS mais CDI foram analisados em lâminas de TMA, os resultados mostraram que em lesões puras de CDIS o α2,3 ácido siálico (reconhecido pela MAL-II) se correlaciona inversamente com a expressão dos receptores de estrógeno (RE, p=0,015) e progesterona (PR, p=0,024) e é altamente expresso em tumores >5 cm (p= 0,01), em adição a expressão da GnT-III associou-se a presença de lesões comedônicas (p=0,007) e a ppGalNAc-T8 com pacientes na pré-menopausa (p=0,037). Nas lesões mistas, o α2,3 ácido siálico foi inversamente correlacionado com o HER-2 (p=0,038) e a expressão da GnT-III foi maior em tumores com alto grau nuclear (p=0,039). Os resultados mostram que, entre todos os marcadores avaliados, o α2,3 ácido siálico se destacou como um potencial fator prognóstico para as lesões mais agressivas no CDIS, indicando a lectina MAL-II como uma importante ferramenta diagnóstica bem como a glicosiltranferase ppGalNAc-T8. / Breast cancer presented in the last decade an increased occurrence and consequent mortality, being the second most common cancer and the first among women. The in situ form is characterized by the confined growth of tumor cells, and what leads to invasion is still under discussion. This neoplasia is closely associated with altered expression of several enzymes and surface carbohydrates residues associated with a poor prognosis, which alter the capacity for growth, adhesion en recognition of tumoral cells. This work aimed to compare the presence of the terminal saccharide N-acetylglucosamines, sialic acids and N-acetylgalactosamines on the cell surface among the histologic types of lesions found in ductal carcinoma in situ (DCIS), and to correlate the expression of these and the enzymes GnT-III, ppGalNAc-T6 and -T8 with clinic-histopathology parameters in order to investigate these molecules as potential biomarkers and to have a more accurate prognosis/diagnosis and in the. Biopsies diagnosed as pure DCIS and DCIS with invasive (IDC) component were used. Parrafin-embeded biopsies and tissue microarrays (TMA) were evaluated with lectins histochemistry (WGA, PHA-L, MAL-II, SNA, PNA conjugated to peroxidase) and immunohistochemistry against GNT-III, ppGalNac-6 and -8. Among the five lectins analyzed in 218 of pure DCIS lesions, MAL-II was positive in cribriform lesions when compared with comedo (p = 0.0191) and solid ones (p = 0.0440), while PNA showed a high reactivity in comedo lesions (p=0.0052) and micropapillary (p=0.0010) in comparison with solid subtype. The other lectins did not show statistically significant differences in their stainings. From the total of 109 patients, 47 with pure DCIS and 62 with DCIS with IDC were analyzed in TMA slides and results revealed that in pure DCIS the α2,3-linked sialic acid (recognized by MAL-II) inversely correlates with the expression of estrogen (p=0.015) and progesterone (p=0.024) receptors and is highly expressed in tumors bigger than 5 cm (p= 0.01). In the same population, the GnT-III was associated with comedo lesions (p=0.007) and ppGalNAc-T8 with premenopausal patients (p=0.037). In DCIS with IDC α2,3-linked sialic acid was inversely correlated with HER-2 (p=0.038) and GnT-III expression was higher in high grade tumors (p=0,039). Results indicated that α2,3-limked sialic acid is a potential prognostic factor to highly aggressive DCIS lesions, indicating MAL-II as an diagnostic tool as well the glycosyltranfese ppGalNAc-T8.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2051_1.pdf: 8092045 bytes, checksum: 8577d67df344268f1c0c079e1d25d53a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O câncer é uma das doenças que mais atinge a população mundial. Seu tratamento geralmente é invasivo, oneroso e extremamente tóxico ao paciente. A liberação de agentes terapêuticos no tumor é um grande problema no tratamento da doença por causa da estrutura da massa tumoral. Uma das propostas atuais é melhorar as propriedades dos fármacos já existentes, como carreadores de fármacos, com o objetivo de melhorar a eficácia do tratamento e diminuir a alta toxicidade aos tecidos sadios causada por esse tipo de tratamento. Vários materiais têm sido pesquisados para este fim. A proposta deste trabalho é a utilização de metal-organic frameworks (MOFs), uma nova classe de material poroso, como um carreador de fármaco, permitindo a incorporação de um agente terapêutico em suas cavidades com uma taxa de liberação suficientemente lenta para que o mesmo permaneça em concentrações ótimas na corrente sanguínea. Neste trabalho foi sintetizada e caracterizada uma MOF, [Zn(BDC)(H2O)2], por espectroscopia na região do infravermelho, análise elementar, análise termogravimétrica, difração de raios- X, microscopia eletrônica de varredura e espectroscopia de energia dispersiva, Primeiramente foram realizados ensaios de toxicidade aguda a fim de observar alguma toxicidade da MOF em cobaias e foi visto que a mesma apresenta tal toxicidade. A esta MOF foi incorporado um fármaco antitumoral (6- mercaptopurina) em diferentes proporções e foram avaliados como sistemas carreadores de fármacos através de ensaios de perfil de liberação, mostrando que a MOF se mostra eficiente para este fim. Os sistemas em diferentes proporções foram testados em ensaios antitumorais in vitro e in vivo onde apresentaram atividade de inibição do crescimento tumoral. A avaliação histológica dos órgãos dos animais que passaram por esses experimentos mostraram que a MOF quando incorporada ao fármaco não apresenta alterações histológicas graves

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1527_1.pdf: 1835283 bytes, checksum: 1f1ad67f95038279850ea3b3eec8c441 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O câncer cervical tem sido uma patologia grave no Brasil e no mundo com cerca de 18.680 mulheres infectadas anualmente. O Papilomavírus Humano (HPV) tem sido biologicamente associado ao desenvolvimento de lesões cervicais, devido a sua capacidade de infectar células epiteliais, e progressão ao câncer do colo de útero. O diagnóstico tardio pode inviabilizar o tratamento e levar a óbito muitas mulheres. Este diagnóstico poderia ser antecipado pelo uso de biossensores de DNA, que são dispositivos analíticos que resultam da integração entre uma sonda seqüência específica e um sinal transdutor. Entre outras técnicas eletroquímicas, os biossensores amperométricos têm sido descritos como atrativos devido à sua simplicidade, baixos custos de instrumentação, possibilidade de realização em tempo real e geralmente alta sensibilidade. Neste trabalho, foi desenvolvido um genossensor para detecção de seqüências do vírus HPV usando azul de metileno (AM) como mediador químico. Os sinais biológicos captados foram transduzidos por Voltametria de Pulso Diferencial (VPD). Os eletrodos de trabalho e referência foram produzidos através de técnica de impressão sob uma superfície de polivinil álcool. Os mesmos foram constituídos de carbono e Ag\AgCl, respectivamente. O eletrodo de trabalho foi modificado com quitosana para a imobilização de pequenas seqüências de DNA para hibridização com uma seqüência alvo. A seqüência alvo usada para hibridização foi o gene E6 do HPV18, uma cadeia extensa com 500 pares de bases disponíveis para anelamento com seqüências de 20 bases. Análises de bioinformática foram realizados para verificar possíveis regiões de anelamento destas seqüências curtas ao genoma viral. Os resultados demonstraram um aumento no sinal do AM quando a hibridização ocorreu, evidenciado pelo aumento dos picos de corrente de VPD analisados graficamente. As diferenças entre os sinais emitidos a partir de um eletrodo contendo reações de hibridização e outro isento das mesmas, foi usada para detectar seqüências de DNA viral obtidas de amostras clínicas. Os resultados indicaram ser o método passível de aplicações em diagnósticos clínicos, e a técnica de impressão, um instrumento viável para a construção dos biossensores de DNA utilizando o azul de metileno como indicador de sinais de hibridização

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4616_1.pdf: 3279839 bytes, checksum: 621a02ed93906efb52f341ee3990cadb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O caramujo Biomphalaria glabrata é o hospedeiro intermediário mais susceptível ao Schistosoma mansoni, no Brasil. O uso de plantas com propriedades moluscicidas poderia ser uma alternativa para o controle do vetor. Como teste alternativo para determinar a toxicidade de produtos químicos e naturais tem sido usado a Artemia salina, um invertebrado de grande importância na indústria de aqüicultura. Cratylia mollis é uma planta nativa, perene do semi-árido do sertão de Pernambuco. Sementes de C. mollis foram avaliadas quanto à presença de lectinas que são proteínas ou glicoproteínas capazes de ligar-se especificamente e reversivelmente a carboidratos. Três isolectinas foram obtidas a partir de diferentes frações (F) de precipitados salinos (F0-40, F40-60 e F60-80). Cramoll 1,4 foi obtida da F40-60 e purificada por cromatografia de afinidade. Cramoll 1,4 e F 60-80 promoveram a morte de todos espécimes avaliados de B. glabrata em 80 e 100 ppm. Cramoll 1,4 (LC90 = 23.581) apresentou maior toxicidade contra A. salina que F60-80 (LC90 = 62.988), mas nenhuma delas teve atividade na desova e cercária. A toxicidade para A. salina é um indicativo do uso potencial da Cramoll 1,4 e F 60-80 como inibidores do crescimento celular tumoral. Portanto, a partir desse resultado foi investigado o efeito da Cramoll 1,4 sobre as células de tumor de Walker variante AR (sarcoma de rato), e sobre a linhagem de células LNCaP originalmente obtida de carcinoma prostático metastásico humano. Cramoll 1,4 em baixas concentrações (4 μg/ml) induziu apoptose nas células tumorais de Walker e LNCaP, em 4 horas de tratamento. Análises realizadas em 2,5 h de tratamento promoveu elevação do Ca2+ citosólico, mas este efeito não foi visualizado na mitocôndria. Cramoll 1,4 também aumentou a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs), as quais foram reduzidas na presença de DPI sugerindo que a produção de EROs ocorreu no citosol. Testes adicionais realizados com as células de Walker demonstraram que a atividade antitumoral da Cramoll 1,4 foi totalmente inibida pelo antioxidante desferal (DFO) e parcialmente inibida pelo inibidor da caspase 8. Os resultados do presente trabalho demonstram que Cramoll 1,4 tem potencial para utilização: 1) no controle da B. glabrata; 2) como composto promissor na terapia alternativa anticancer, haja vista que induz a morte de células tumorais pelo processo deapoptose resultando na perda irreversível da estrutura e funções vitais dessas células; 3) no diagnóstico laboratorial de anormalidades glicoproteicas em soro de pacientes portadores do dengue

Made available in DSpace on 2014-06-12T17:35:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4395_1.pdf: 3922797 bytes, checksum: a1dc248c7ea987d6774455051d9ae6bb (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2000 / Uma das formas de tratamento do câncer de colo uterino é a braquiterapia. Neste tipo de radioterapia, a fonte radioativa é colocada em contato ou dentro do tumor de sorte a maximizar a dose no volume tumoral e minimizar a dose absorvida pelos tecidos sãos circunvizinhos. A depender da taxa de dose empregada, essa técnica é classificada em braquiterapia de baixa taxa de dose (LDR) ou de alta taxa de dose (HDR). Em Recife, cidade de maior índice de câncer de colo de útero do Brasil, o Centro de Radioterapia de Pernambuco (CERAPE) vem desenvolvendo um programa de tratamento desta neoplasia utilizando a braquiterapia tipo HDR. Isto, motivado tanto pela rapidez do tratamento, quanto pelos efeitos da alta taxa de dose sobre células cancerosas. A eficácia do tratamento depende de muitos fatores e envolve a interação de diferentes profissionais de saúde. Para o seu sucesso, recomenda-se o emprego de um programa de controle de qualidade. Neste caso, o objetivo é o de proporcionar sua execução conforme as prescrições médicas, bem como o de garantir as condições de segurança tanto para o paciente quanto para os profissionais de saúde. O objetivo deste trabalho foi o de avaliar a sistematização dos diversos parâmetros que envolvem o tratamento de câncer de colo de útero com o sistema de alta taxa de dose Microselectron e propor um programa de controle de qualidade da braquiterapia com este equipamento. Além disso, a partir do planejamento em questão, foram avaliadas as doses recebidas pelo reto e bexiga em função do posicionamento das pernas da paciente durante a simulação, bem como, a importância do acompanhamento psicológico durante todo o tratamento com a paciente a partir da avaliação do seu estado emocional

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-06-13T18:29:21Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Beltrao, MFS_Tese_25Fev2015 BC.compressed.pdf: 3247617 bytes, checksum: b0d4526070b692dcc91263360b816b1e (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-13T18:29:21Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Beltrao, MFS_Tese_25Fev2015 BC.compressed.pdf: 3247617 bytes, checksum: b0d4526070b692dcc91263360b816b1e (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / FACEPE / BRAF é conhecido como um proto-oncogene que apresenta diversas mutações, sendo a V600E a mais comumente encontrada em neoplasias humanas. A proteína BRAF quinase oncogênica tornou-se um alvo para terapia específica em oncologia por fazer parte de vias importantes como a Ras-MEK-ERK. A mutação BRAFV600E tem sido encontrada em pacientes com melanoma, câncer de tireóide, colorretal e neoplasias hematológicas. No entanto, a importância dessa molécula em carcinoma tireoidiano papilar e Histiocitose das células de Langerhans ainda não é muito clara. Para isso, modelos murinos para essas doenças foram desenvolvidos para testar a hipótese de que a mutação V600E do gene BRAF em camundongos é suficiente para induzir características fenotípicas semelhantes a observadas em pacientes com câncer tireoidiano papilifero (PTC) e Histiocitose das células de langerhnas (LCH). Nos modelos de PTC e LCH, o gene BRAF mutado é expresso nas células foliculares da tireóide (animal chamado TCB) e nas células do compartimento mielóide CX3CR1+ (animal chamado FRBRAF), respectivamente. Após 90 dias de administração de tamoxifeno para induzir a mutação, histologicamente, os animais TCB apresentam tireóide com hiperplasia folicular, protusões papilares e recrutamento leucocítico; enquanto os animais FRBRAF apresentam hepatoesplenomegalia com infiltrados inflamatórios no fígado, pulmão e baço. Análise de citometria de fluxo demonstrou aumento no número de linfócitos T predominantemente T CD4+ com presença de células Tregs Foxp3+ e Th17 na tireóide transformada em camundongos TCB. Mesma analises, em camundongos FRBRAF revelou a expansão do compartimento mielóide. Expressão de citocinas e quimiocinas são características comuns aos dois modelos animais como é o caso de CCL2, 5, 6, 8, 9/10, 17, 22 CXCL-1, 2 na tireóide de camundongos TCB e TNFα, IL- 1α, M-CSF, IL-7, CCL17 no fígado de animais FRBRAF. Com destaque, observamos que no modelo de LCH, células CD11b+MHCII+Langerin+, marcador comum da lesão em humanos, também foram encontradas no fígado desses animais. Dessa forma, concluímos que a expressão de BRAFV600E em camundongos é capaz de gerar fenótipo semelhante ao de pacientes com câncer tireoidiano papilifero com infiltrado inflamatório e Histiocitose das células de langerhnas no figado. Esses resultados implicam diretamente na importância de BRAF nesses doenças. / BRAF is known as a proto-oncogene that has multiple mutations, V600E is commonly found in human cancers. The oncogenic protein kinase BRAF has become a target for specific therapy in oncology because of their involvemnt in the Ras-MEK-ERK pathway. The BRAFV600E mutation has been found in patients with melanoma, thyroid, colorectal cancer and hematologic malignancies. However, the importance of this molecule in papillary thryoid cancer and Langerhans cell histiocytosis is still not very clear. For this, murine models for these diseases have been developed to test the hypothesis that the BRAF V600E mutation in mice is sufficient to induce a similar phenotypic characteristics observed in patients with papillar thyroid cancer (PTC) and langerhnas cell histiocytosis (LCH). In these murine models of PTC and LCH, BRAF activacted is expressed in the thyroid follicular cells (TCB mouse), and in the myeloid cells CX3CR1+ (FRBRAF mouse), respectively. After 90 days of administration of tamoxifen to induce mutation, histologically, TCB thyroid had follicular hyperplasia, papillary protrusions and leukocyte recruitment; while FRBRAF mice had hepatosplenomegaly with inflammatory infiltrates in the liver, lung and spleen. Flow cytometric analysis demonstrated an increase in the number of T lymphocytes CD4+ predominantly Foxp3+ regulatory T cells and Th17 cells inside the TCB thyroid. Similar analyse in FRBRAF mice showed an expansion of the myeloid compartment. Expression of cytokines and chemokines are common features in two models such as CCL2, 5, 6, 8, 9/10, 17, 22 CXCL-1, 2, in TCB thyroid and TNF, IL-1α, M-CSF, IL-7, CCL17 in FRBRAF liver. Remarkably, CD11b+MHCII+ Langerin+ cells, typically found within LCH lesions in humans, were also present in the liver infiltrates. Thus, we conclude that the expression of BRAFV600E in mice is able to resemble human PTC and LCH. These results directly implicate BRAFV600E in both diseases.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2017-12-26T17:52:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTACAO_mestrado_natanael_definitiva.pdf: 2310595 bytes, checksum: b128dcd148293f1f1f515421fe2a26d2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-26T17:52:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTACAO_mestrado_natanael_definitiva.pdf: 2310595 bytes, checksum: b128dcd148293f1f1f515421fe2a26d2 (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / CNPQ / As neoplasias malignas (cânceres), caracterizadas prioritariamente por anormalidade na taxa de crescimento celular são responsáveis por elevada morbidade e destacada mortalidade em várias partes do Globo. O desenvolvimento de resistência às drogas atualmente disponíveis, além do perfil da grande toxicidade por parte desses agentes quimioterápicos, fazem com que as pesquisas por novos fármacos que possuam maior segurança e efetividade terapêuticas sejam imprescindíveis. Com base na literatura, diversos compostos contendo em sua estrutura as classes orgânicas 2-isoxazolina ou tiossemicarbazona demonstraram possuir diversas propriedades: antiviral, antibacteriana, antinociceptiva, antitumoral, antichagásica, entre outras. Isso posto, o presente trabalho teve por finalidade, a partir da estratégia de hibridação molecular, realizar a síntese de novos híbridos tiossemicarbazônicos isoxazolínicos aza-bicíclicos, avaliando sua potencial ação citotóxica, em continuidade com estudos prévios do grupo de pesquisa. Os aldeídos contendo o núcleo 2-isoxazolina, obtido a partir da reação de cicloadição 1,3-dipolar entre enamidas/enecarbamatos endocíclicos e óxido de nitrila (CEFNO), foram condensados com tiossemicarbazidas substituídas em N-4 para gerar sete inéditas tiossemicarbazonas isoxazolínicas, em bons rendimentos (52,53 a 84,08%). Auxiliados pelas análises de infravermelho e espectrometria de massas, sinais diagnósticos nos espectros de RMN 1H e 13C possibilitaram a elucidação estrutural das moléculas finais. A avaliação in vitro de citotoxicidade, executada contra as linhagens de células tumorais NCI-H292, HT-29, HEp-2, MCF-7, HL-60, por ensaio de MTT, demonstrou a incapacidade das moléculas testadas em inibir o crescimento celular neoplásico (0,0 a 53% de inibição do crescimento). Adicionalmente, a fim de verificar a potencial atividade antichagásica dos novos compostos sintetizados, estudos complementares de toxicidade sobre as formas evolutivas de T. cruzi estão atualmente em curso. / The malignant tumors, primarily characterized by abnormal growth of cells, are responsible for high morbidity and highlighted mortality rates in several regions of the globe. The development of resistance to the drugs currently available, beyond the important toxicity profile presented by these chemoterapeutic agents, are reasons why new researches for safer drugs and with higher therapeutic effectiveness are primordials. Based on literature, several chemical compounds containing 2-isoxazoline or thiosemicarbazone in their structures have shown antiviral, antibacterial, antinociceptive, anticancer, anti-Chagas disease, among other properties. The aim of this work was realize the synthesis of new hybrids aza-bicyclic isoxazolines thiosemicarbazones using molecular hybridization approach, analyzing their cytotoxic potential. The 2-isoxazoline aldehydes obtained from the reaction of 1,3-dipolar cycleaddition among enamide/enecarbamate endocyclic and nitrile oxide (CEFNO), were condensed with N-4 substituted thiosemicarbazide to generate seven new isoxazolinic thiosemicarbazone in good yields (52,53 to 84,08%). With infrared and mass spectrometry analyzis, diagnostic signs on 1H and 13C NMR spectra allowed the elucidation of the final molecules structure. In vitro evaluation of cytotoxicity executed against tumor cell lines NCI-H292, HT-29, HEp-2, MCF-7, HL-60 by MTT assay, showed the molecules incapacity in inhibiting neoplastic cells growth (0.0 to 53% of growth control). Additionally, in order to verify the possible anti-Chagas disease activity from the new synthesized compounds, some complementary toxicity studies about forms in differentiation of T. cruzi have being performed.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-25T20:36:15Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Marek Henrique Ferreira Ekert.pdf: 3742586 bytes, checksum: 5f032421e7302b07ac32bd89c6bf9e5d (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-07-27T22:31:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Marek Henrique Ferreira Ekert.pdf: 3742586 bytes, checksum: 5f032421e7302b07ac32bd89c6bf9e5d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-27T22:31:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Marek Henrique Ferreira Ekert.pdf: 3742586 bytes, checksum: 5f032421e7302b07ac32bd89c6bf9e5d (MD5) Previous issue date: 2017-02-06 / FACEPE / Atualmente o mercado global de marcadores moleculares está avaliado em US$ 24.10 blihões. Eles são ferramentas muito versáteis, utilizados na área forense e na medicina. Na identificação humana, o uso do DNA (marcadores STR) continua revolucionando as áreas jurídicas e criminais. Por outro lado, a infeção pelo Papilomavírus Humano (HPV) ainda não possui marcadores precoces para diagnóstico. A resposta imune contra o HPV é caracterizada pela imunidade celular local e nesse processo, os receptores Toll-Like (TLRs) desempenham um papel importante na detecção de moléculas pertencentes à agentes microbianos, desencadeando cascatas imunológicas para ativar fatores de transcrição, como o IRF3 e consequentemente, a inflamação e resposta antiviral. O presente trabalho objetivou utilizar marcadores moleculares para identificação humana e selecionar possíveis biomarcadores para a infecção pelo HPV. Através dos marcadores STR, foi possível realizar, com êxito, a identificação de 125 vítimas de crimes no estado de Pernambuco. Ademais, mediante esses marcadores genéticos, elucidou-se um caso de homicídio, que gerou grande repercussão no estado de Alagoas, no qual identificou-se uma vítima de esquartejamento. O contexto social atual obriga por parte do governo, profissionais de segurança pública e cientistas, uma busca constante por alternativas e metodologias cada vez mais eficientes que permitam identificar criminalmente as vítimas e os autores dos ilícitos penais. A integridade genômica do TLR2 é importante para evitar a infecção pelo HPV, quando esta sinalização é previamente estimulada através de vaginose bacteriana. A população estudada não mostrou associação do polimorfismo S427T no gene IRF3 com susceptibilidade à infecção pelo HPV ou vaginose bacteriana. No entanto, estudos adicionais são necessários para explorar o papel dos polimorfismos das TLRs, principalmente a TLR2 e, também das moléculas de suas cascatas de ativação imunológica, especialmente o IRF3, no risco de infecção pelo HPV associado com níveis de citocinas e recrutamento celular imune neste tecido. Dessa forma, pode-se tentar elucidar o papel dessas moléculas na resposta imune contra HPV. / Currently, the global market for molecular markers is valued at $ 24.10 bln. They are very versatile tools, used in the forensic area and in medicine. In human identification, the use of DNA (STR markers) continues to revolutionize as legal and criminal areas. On the other hand, a Human Papillomavirus (HPV) infection does not yet have early markers for diagnosis. The response is similar to HPV and is characterized by local cellular immunity and by the process, Toll-Like receptors (TLRs) play an important role in detecting molecules belonging to microbial agents, triggering immunological cascades to activate transcription factors, such as IRF3 and Consequently, inflammation and antiviral response. The present work aimed to use molecular markers for human identification and to select possible biomarkers for an HPV infection. Through the STR markers, it was possible to successfully identify 125 victims of crimes in the state of Pernambuco. In addition, through these genetic markers, a case of homicide was elucidated, that generated great repercussion in the state of Alagoas, in which a victim of quartering was identified. The current social context, by the government, public security professionals and scientists, a constant search for alternatives and increasingly efficient methodologies that allow criminally identify as victims and perpetrators of criminal offenses. The genomic integrity of TLR2 is important to prevent HPV infection when it is estimated through the bacterial vaginosis. The studied population showed no association of the S427T polymorphism with any IRF3 gene with susceptibility to HPV infection or bacterial vaginosis. However, additional studies are needed to explore the role of TLR polymorphisms, especially a TLR2 and also the molecules of their immunological activation cascades, especially IRF3, no risk of HPV infection associated with cytokine levels and immune cell recruitment in this Tissue In this way, one can try to elucidate the role of theses molecules in the immune response against HPV.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T19:15:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Rejected by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br), reason: on 2018-08-02T19:39:45Z (GMT) / Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T19:45:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-03T22:29:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:30:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / FACEPE / A incidência de carcinoma anal e lesões precursoras relacionadas tem aumentado no mundo, em homens e mulheres e a infecção persistente pelo Papilomavírus humano (HPV) desempenha um papel fundamental na carcinogênese anal. Os fatores de risco para o desenvolvimento de câncer anal incluem intercurso anal, múltiplos parceiros e infecção cervical pelo HPV. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a infecção simultânea pelo HPV na mucosa cervical e anal e elucidar a associação entre a expressão local da proteína p16, β-defensina-2 e 3 e TNF-α (fator de necrose tumoral alfa) na mucosa anal e o grau de lesões anais associadas ao HPV. O grupo de estudo foi constituído por mulheres sexualmente ativas, com idade entre 18 e 60 anos. A coleta de células foi realizada a partir da mucosa cervical e anal com escova ginecológica, seguida de exame de colposcopia e anuscopia. O DNA foi extraído de amostras de células anais e cervicais e a PCR convencional foi realizada para detectar presença de HPV (tipos: 6, 16, 18, 31 e 33). A PCR em tempo real foi realizada utilizando primers específicos para a β-defensina 2, 3 e TNF-α. Os fragmentos de biopsia foram submetidos a coloração hematoxilina-eosina de rotina para a avaliação histológica e reação imunohistoquímica utilizando anticorpo anti-p16. Neste estudo, a positividade para p16 foi associada ao grupo com neoplasia, estatisticamente significativo (p = 0,0002) e padrão contínuo foi predominante. Cerca de 75% dos pacientes com neoplasia foram positivos para HPV e p16. Verificou-se alta taxa de infecção por HPV nas mucosas anal (70,52%), cervical (74,73%) e infecção simultânea cervical e anal (54,73%). A infecção simultânea (mucosa anal e cervical) pelo mesmo tipo de HPV foi observada em 17,30% dos pacientes. Entre os tipos de HPV identificados, o genótipo predominante nas amostras anal e cervical foi HPV6 (26,38%) e (19,71%), respectivamente. Nossos resultados também mostraram uma diminuição da expressão de TNF-α em lesões anais de alto grau em comparação com o normal HPV-positivo (p <0,0001), enquanto que os níveis de expressão de β-defensina 3 aumentaram em pacientes de alto grau (p = 0,0009). A aquisição de infecção simultânea anal e cervical pode ocorrer por diferentes meios, mostrando que o canal anal é uma fonte de infecção. / The incidence of anal carcinoma and related precursor lesions have been increasing worldwide for both men and women. The human papillomaviruses (HPVs) play a fundamental role in anal carcinogenesis, through persistent infection. Women with cervical cancer and history anal intercourse have an increased risk of anal cancer. The aim of this study was to evaluate simultaneous HPV infection in cervical and anal mucosa and to elucidate the association between p16 protein, β-defensin-2, 3 and TNF-α (tumor necrosis factor alpha) expression local in the anal mucosa and the degree of HPV-associated anal lesions. Study group was composed of sexually active immunocompetent women. Cells collection was performed from cervical and anal mucosa with a brush, followed by anuscopy and colposcopy exam. DNA was extracted from anal and cervical cell samples and PCR was performed to detect HPV presence (types: 6, 16, 18, 31 and 33). Real-time PCR was performed using specific primers to β-defensin 2, 3 and TNF-α. Biopsy fragments were subjected to routine hematoxylin-eosin staining for the histological assessment and immunohistochemistry reaction using anti-p16 antibody. In our study, positivity for p16 was frequently associated with group with neoplasia, statistically significant (P = 0.0002) and continuous pattern was predominant. About 75% of patients with neoplasia were positive for HPV and p16. A high rate of HPV infection in anal (70.52%), cervical (74.73%) and simultaneous cervical and anal mucosa (54.73%) was found. Simultaneous infection (anal and cervical mucosa) by the same type HPV was observed in 17.30% of the patients. Among all HPV types identified, the predominant genotype in anal and cervical samples was HPV6 (26.38%) and (19.71%), respectively. Our findings also showed a decreased TNF-α expression in high-grade anal lesion compared to normal HPV-positive (p < 0.0001), whereas expression levels of β-defensin 3 were increased in high-grade patients (p = 0.0009). The acquisition of simultaneous infection anal and cervical may occur by different means, showing that the anal canal is also a source of infection.

PEREIRA, Gisnayle Ana da Silva, também é conhecida em citações bibliográficas por: SILVA, Gisnayle Ana da / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-14T22:46:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Gisnayle Ana da Silva Pereira.pdf: 3581049 bytes, checksum: 0e1c269d58eb70f1e94adebbfd3193ea (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-16T18:35:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Gisnayle Ana da Silva Pereira.pdf: 3581049 bytes, checksum: 0e1c269d58eb70f1e94adebbfd3193ea (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T18:35:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Gisnayle Ana da Silva Pereira.pdf: 3581049 bytes, checksum: 0e1c269d58eb70f1e94adebbfd3193ea (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CAPES / O câncer do colo do útero é um dos principais tipos de câncer no mundo, e seu desenvolvimento está associado principalmente à infecção pelo Papilomavirus humano (HPV). Embora esse tipo de infecção esteja intimamente associado à atividade sexual, a alta incidência das lesões cervicais pode estar relacionada a uma deficiência na resposta imune. Receptores Toll-like (TLRs) tem um importante papel na imunidade inata, atuando no reconhecimento de antígenos e gerando sinais para produção das citocinas pró-inflamatórias. O TLR9, atua no reconhecimento do DNA bacteriano e viral conduzindo ao recrutamento de células imunológicas para os sítios da infecção. Polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) em TLR9 podem influenciar no aumento da susceptibilidade a diversas doenças, como, por exemplo, o câncer cervical. O presente estudo teve por objetivo identificar polimorfismos não sinônimos com potencial correlação com a infecção por HPV, assim como avaliar efeitos estruturais e funcionais ocasionados por essas mutações em TLR9 através de ferramentas in silico. Análises para 5 nsSNPs da TLR9 foram realizadas por PCR-RFLP em amostras cervicais de 57 pacientes atendidas nas Unidades de Saúde da Família (SUS, Olinda – PE). Adicionalmente, para determinar como SNPs não sinônimos (nsSNPs) podem afetar a estrutura molecular e a função de TLR9, uma análise de nsSNPs existentes para TLR9 foi realizada e apenas nsSNPs que possuíam variação no grau de hidrofobicidade maior ou igual a 50% foram utilizados para análise preditiva do efeito estrutural e funcional através de 16 algoritmos. A metodologia para PCR-RFLP para os polimorfismos 7021T>G (Met85Arg), 7191G>A (Glu115Gln), 7351C>T (Ala168Val), 7986G>T (Asp380Tyr), 8159G>T (Met347Ile) foi desenhada através de bioinformática. A análise molecular demonstrou que para TR9 8159G>T, o alelo T pode estar associado com lesões cervicais (p=0.0005). Em relação à predição computacional, 18 nsSNPs foram encontrados com alto impacto funcional/estrutural para a TLR9, sendo 12 nsSNPs localizados na região de reconhecimento do patógeno. Através do nosso estudo, descobrimos polimorfismos que podem ter alta correlação com doenças causadas por agentes patogênicos, de acordo com a previsão dos impactos estruturais e funcionais através de polimorfismo deletério não sinônimo na molécula de TLR9. / Cervical cancer is among the main types of cancer of higher incidence in the world. It is associated mainly with human papillomavirus (HPV) infection. Although this type of infection is closely associated with sexual activity, the high incidence of cervical lesions may be also related to a deficiency in the immune response. Toll-like Receptors (TLRs) play an important role in innate immunity, acting in the recognition of antigens and the generation of signals that produce proinflammatory cytokines. TLR9 operates in the recognition of bacterial and viral DNA leading the recruitment of immune cells to the infection sites. Therefore, single nucleotide polymorphisms (SNPs) in TLR9 could influence the increased susceptibility to many diseases, for example, cervical cancer. This study aimed to identify non-synonymous SNPs (nsSNPs) with potential correlation with HPV infection, also evaluating structural and functional effects caused by these mutations in TLR9 through computational analysis. Evaluation of 5 nsSNPs in TLR9 was performed by PCR-RFLP in cervical samples of 57 patients treated in the Family Health Units (SUS, Olinda - PE). To determine how nsSNPs may affect the molecular structure and function of TLR9, a computational analysis was performed, and only nsSNPs with of hydrophobicity variation degree equal or greater than 50% were used for predictive analysis of structural and functional effect through 16 algorithms. The PCR-RFLP test for 7021T> G (Met85Arg), 7191G> A (Glu115Gln), 7351C> T (Ala168Val), 7986G> T (Asp380Tyr), 8159G>T (Met347Ile) was determined through by bioinformatics approaches. Molecular analysis showed that T allele of TR9 8159G> T may be associated with cervical lesions (p=0.0005). Regarding the computational prediction, 18 nsSNPs were found with high functional/structural impact for TLR9, 12 nsSNPs located in pathogen recognition region. Through our study, we found polymorphisms that may have high correlation with diseases caused by pathogens, according to the prediction of structural and functional impacts through deleterious polymorphism not synonymous in TLR9 molecule.