Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-04T22:01:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Fabrício Andrade Martins Esteves.pdf: 2070591 bytes, checksum: cd3f61e4b208e5062bd0ee88b718cf5f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T22:01:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Fabrício Andrade Martins Esteves.pdf: 2070591 bytes, checksum: cd3f61e4b208e5062bd0ee88b718cf5f (MD5) Previous issue date: 2015-09-09 / A Doença Celíaca (DC) trata-se de uma enteropatia imuno-mediada causada pela intolerância ao glúten. Através da ativação de linfócitos T presentes na lâmina própria da mucosa intestinal em indivíduos geneticamente susceptíveis, são desencadeados mecanismos inflamatórios regulados pelo balanço entre citocinas de perfil Th1, como o interferon gama (IFNg), o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), a interleucina 6 (IL-6), a interleucina 15 (IL-15) e interleucina-18 (IL-18) e outras reguladoras tais como TGFβ e interleucina-10 (IL-10). Em consequência ao mecanismo inflamatório desencadeado, a doença celíaca cursa com mal- absorção e diarréia secundária à diminuição da superfície de absorção da mucosa do intestino delgado. Uma vez que o grau e o tipo de alterações que sofre a mucosa intestinal depende do padrão de citocinas e de suas concentrações locais, o presente estudo avaliou a possível relação entre os polimorfismos nas regiões promotoras dos genes das IL-10, IL-6 e TNF-α na imunopatogênese da Doença celíaca em uma população de pacientes italianos. Participaram do estudo 204 indivíduos italianos portadores de doença celíaca (subdivididos em 96 indivíduos HLA-DQ2+ e 96 indivíduos HLADQ8+) e 96 indivíduos saudáveis (grupo controle). Foram realizadas genotipagens para as regiões promotoras dos genes da IL-10 (posições -1082G>A, -819C>T e - 592C>A), IL-6 (posição -174G>C) e TNF- alfa (posição -308G>A). Foram estabelecidas as frequencias alélicas, genotípicas e haplotípicas dos grupos. Com intervalo de confiança de 95%, após a aplicação do teste de Qui-Quadrado, diferenças de frequencias que apresentaram valores de p < 5% foram consideradas estatisticamente significativas para estabelecimento da Odds Ratio (O.R.). Diferenças significativas foram observadas para o polimorfismo do TNF-α (-308 G>A) quando foram comparados os seguintes grupos celíacos DQ2-positive com controles (OR = 0.45, p = 0.0002), celíacos DQ8-positivos com controles (OR = 3.55, p< 0.0001) e celíacos DQ2-positivos com celíacos DQ8-positive (OR = 0.12, p < 0.0001). Não foram observadas diferenças de frequências estatisticamente significativas para o polimorfismo da IL-6 (-174 G>C) entre celíacos e indivíduos saudáveis (p > 0.05). Também não foram observadas diferenças significativas entre as frequências dos polimorfismos da região promotora do gene da IL-10 (posições - 1082G>A, -819C>T e -592C>A). A análise de haplótipos da região promotora do gene desta citocina demonstrou que, na população estudada, não houve associação que pudesse sugerir uma participação imunomoduladora da IL-10 na Doença celíaca. Contudo, por ter um caráter anti-inflamatório, a IL-10 poderia eventualmente desempenhar algum papel no tipo de forma clínica da Doença celíaca. Ou seja, indivíduos com haplótipos de baixa produção de IL-10 estariam mais susceptíveis a apresentar as formas mais graves dessa enteropatia imunomediada. Sugerimos que o polimorfismo da região promotora do gene do TNF-alfa (posição -308G>A) possa estar envolvido na imunopatogênese do mecanismo inflamatório desencadeado pela exposição alimentar ao glúten em portadores da Doença celíaca. / Celiac disease (CD) it is an immune-mediated enteropathy caused by intolerance to gluten, a family of proteins in wheat and various grains. Through the activation of T lymphocytes present in the lamina propria of the gut mucosa in genetically susceptible individuals are triggered inflammatory mechanisms regulated by the balance between Th1 cytokines such as interferon gamma (IFNg), Tumor necrosis factor (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) interleukin 15 (IL-15) and interleukin-18 (IL-18) and other regulatory and TGFb such as interleukin-10 (IL-10). As a result of the inflammatory mechanism triggered, celiac disease progresses with malabsorption and diarrhea secondary to decreased mucosal absorptive surface of the small intestine. Since the degree and type of changes that suffers the intestinal mucosa depends on the pattern of cytokines and their local concentrations, the present study evaluated the possible relationship between polymorphisms in the promoter regions of the genes of interleukins IL-10, IL -6 and TNF-α in the immunopathogenesis of celiac disease in a population of Italian patients. Methods: A total of 204 individuals Italian patients with celiac disease (subdivided into 96 HLA-DQ2 + individuals and 96 individuals HLA-DQ8 +) and 96 healthy subjects (control group). Genotyping was performed in the promoter regions of the genes of IL-10 (positions -1082G> A, - 819C> T and -592C> A), IL-6 (-174G position> C) and TNF-alpha (position -308G> A). The frequencies were established allelic, genotypic and haplotype of the above groups. With 95% confidence interval, after applying the chi-square test, differences in frequencies with values of p <5% were considered statistically significant for establishment of Odds Ratio (OR). Significant differences were observed for the polymorphism of TNF-α (-308 G> A) when the celiac groups DQ2-positive with controls were compared (OR = 0:45, p = 0.0002), DQ8- positive celiac with controls (OR = 3.55, p <0.0001) and celiac DQ2-positive with celiac DQ8-positive (OR = 0:12, p <0.0001). Statistically significant differences in frequencies were observed for IL-6 polymorphism (-174 G> C) from celiac and healthy individuals (p> 0.05). Also there was no difference between the frequencies of polymorphisms of the promoter region of the IL-10 gene (positions -1082G> A, -819C> T and -592C> A). The haplotype analysis of the promoter region of the gene of this cytokine showed that in the population studied, there was no association that would suggest an immunomodulatory participation of IL-10 in celiac disease. However, being an anti-inflammatory protein, IL-10 could eventually play a role in the type of clinical presentation of celiac disease. Thus, patients with IL-10 low production haplotypes could present more likely the severe forms of this immune-mediated enteropathy. We suggest that the polymorphism of TNF-alpha promoter region of the gene (position - 308 G>A) may be involved in the immunopathogenesis of nflammatory mechanism triggered by dietary exposure to gluten in patients with celiac disease.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T19:15:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Rejected by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br), reason: on 2018-08-02T19:39:45Z (GMT) / Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-02T19:45:59Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-03T22:29:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:30:07Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Maria Juliana Galvão Nunes.pdf: 2729731 bytes, checksum: 4b3c67fb4b7b283bbee0c2baa651bfef (MD5) Previous issue date: 2017-03-03 / FACEPE / A incidência de carcinoma anal e lesões precursoras relacionadas tem aumentado no mundo, em homens e mulheres e a infecção persistente pelo Papilomavírus humano (HPV) desempenha um papel fundamental na carcinogênese anal. Os fatores de risco para o desenvolvimento de câncer anal incluem intercurso anal, múltiplos parceiros e infecção cervical pelo HPV. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a infecção simultânea pelo HPV na mucosa cervical e anal e elucidar a associação entre a expressão local da proteína p16, β-defensina-2 e 3 e TNF-α (fator de necrose tumoral alfa) na mucosa anal e o grau de lesões anais associadas ao HPV. O grupo de estudo foi constituído por mulheres sexualmente ativas, com idade entre 18 e 60 anos. A coleta de células foi realizada a partir da mucosa cervical e anal com escova ginecológica, seguida de exame de colposcopia e anuscopia. O DNA foi extraído de amostras de células anais e cervicais e a PCR convencional foi realizada para detectar presença de HPV (tipos: 6, 16, 18, 31 e 33). A PCR em tempo real foi realizada utilizando primers específicos para a β-defensina 2, 3 e TNF-α. Os fragmentos de biopsia foram submetidos a coloração hematoxilina-eosina de rotina para a avaliação histológica e reação imunohistoquímica utilizando anticorpo anti-p16. Neste estudo, a positividade para p16 foi associada ao grupo com neoplasia, estatisticamente significativo (p = 0,0002) e padrão contínuo foi predominante. Cerca de 75% dos pacientes com neoplasia foram positivos para HPV e p16. Verificou-se alta taxa de infecção por HPV nas mucosas anal (70,52%), cervical (74,73%) e infecção simultânea cervical e anal (54,73%). A infecção simultânea (mucosa anal e cervical) pelo mesmo tipo de HPV foi observada em 17,30% dos pacientes. Entre os tipos de HPV identificados, o genótipo predominante nas amostras anal e cervical foi HPV6 (26,38%) e (19,71%), respectivamente. Nossos resultados também mostraram uma diminuição da expressão de TNF-α em lesões anais de alto grau em comparação com o normal HPV-positivo (p <0,0001), enquanto que os níveis de expressão de β-defensina 3 aumentaram em pacientes de alto grau (p = 0,0009). A aquisição de infecção simultânea anal e cervical pode ocorrer por diferentes meios, mostrando que o canal anal é uma fonte de infecção. / The incidence of anal carcinoma and related precursor lesions have been increasing worldwide for both men and women. The human papillomaviruses (HPVs) play a fundamental role in anal carcinogenesis, through persistent infection. Women with cervical cancer and history anal intercourse have an increased risk of anal cancer. The aim of this study was to evaluate simultaneous HPV infection in cervical and anal mucosa and to elucidate the association between p16 protein, β-defensin-2, 3 and TNF-α (tumor necrosis factor alpha) expression local in the anal mucosa and the degree of HPV-associated anal lesions. Study group was composed of sexually active immunocompetent women. Cells collection was performed from cervical and anal mucosa with a brush, followed by anuscopy and colposcopy exam. DNA was extracted from anal and cervical cell samples and PCR was performed to detect HPV presence (types: 6, 16, 18, 31 and 33). Real-time PCR was performed using specific primers to β-defensin 2, 3 and TNF-α. Biopsy fragments were subjected to routine hematoxylin-eosin staining for the histological assessment and immunohistochemistry reaction using anti-p16 antibody. In our study, positivity for p16 was frequently associated with group with neoplasia, statistically significant (P = 0.0002) and continuous pattern was predominant. About 75% of patients with neoplasia were positive for HPV and p16. A high rate of HPV infection in anal (70.52%), cervical (74.73%) and simultaneous cervical and anal mucosa (54.73%) was found. Simultaneous infection (anal and cervical mucosa) by the same type HPV was observed in 17.30% of the patients. Among all HPV types identified, the predominant genotype in anal and cervical samples was HPV6 (26.38%) and (19.71%), respectively. Our findings also showed a decreased TNF-α expression in high-grade anal lesion compared to normal HPV-positive (p < 0.0001), whereas expression levels of β-defensin 3 were increased in high-grade patients (p = 0.0009). The acquisition of simultaneous infection anal and cervical may occur by different means, showing that the anal canal is also a source of infection.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, Florianópolis, 2011. / Made available in DSpace on 2015-03-18T20:32:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 326329.pdf: 1578139 bytes, checksum: 93b9a1d1eccbb0e9b62d1078f594ab16 (MD5) Previous issue date: 2011 / O trauma cranio-encefálico (TCE) é uma causa mundial de morbidade e mortalidade. A concentração sanguinea de citocinas têm sido associada com TCE. Neste estudo, nós investigamos os níveis séricos de IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, TNF-a e INF-? como biomarcadores de gravidade da lesão cerebral traumática e sua associação com a mortalidade hospitalar. As concentrações séricas de citocinas foram determinadas em média (IQ 25/75) de tempo de 10 (18/05) horas após o TCE, em 93 pacientes consecutivos admitidos no Hospital Governador Celso Ramos. Para as comparações, foram selecionados aleatoriamente pacientes com TCE leve(n = 18) e moderado (n = 16), atendidos em nossa emergência. Em pacientes com TCE grave, 2 amostras adicionais de sangue foram analisadas 30 (22/37) e 68 (55/78) horas após a lesão. Os dados coletados incluíram idade, sexo, achados tomográficos, CSG de admissão e as reações da pupila, presença de trauma e a mortalidade hospitalar associada. Mesmo em casos graves, os soros dos pacientes permaneceram indetectáveis para as citocinas IL-2, IL-4, IL-5 e IFN-? após o TCE, por citometria de fluxo. Os níveis de IL-10, mas não os de TNF-a, correlacionam-se significativamente com a gravidade da GCS (p = coeficiente de 0,42, Sperman <0,0001) e foram associadas com a mortalidade hospitalar de pacientes com TCE grave. A elevação dos níveis séricos de IL-10 permaneceram significativamente associados com a mortalidade (p = 0,01) no subgrupo de pacientes com TCE grave isolado (n = 74). A análise de regressão logística mostrou que a concentração dos níveis séricos de IL-10 (> 0,9 pg/ml), medidos 10 ou 30 horas após a lesão, foram, respectivamente, 6 vezes (OR 6,2, IC 95% 1,2-25,1, p = 0,03) e 5 vezes (OR 5,4, IC 95% 1,2-25,1, p = 0,03) mais associados com a mortalidade do que os níveis mais baixos (<0,05 pg/ml), independentemente da idade, do GCS admissão e ou a presença de traumas associados. Nenhuma associação foi observada entre os níveis séricos de IL-10 medidos 68 horas após o TCE e a mortalidade (p = 0,22). Desta forma, pudemos concluir que os níveis séricos de IL-10 medidos no início do 2 primeiros dias após TCE grave estão independentemente associados com mortalidade hospitalar aumentada e pode ser útil como marcador do TCE e seu prognóstico.<br> / Abstract : Traumatic brain injury (TBI) is a worldwide cause of morbidity and mortality. Blood levels of cytokines have been associated with TBI. Here we investigated the serum levels of IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, TNF-a and INF-? as biomarkers of traumatic brain injury severity and its association with hospital mortality. The serum levels cytokines were determined at a median (IQ 25/75) time of 10 (5/18) hours after TBI in 93 consecutive patients admitted in our hospital. For comparisons, we selected randomly patients with mild (n = 18) and moderate (n = 16) TBI attended in our emergence. In patients with severe TBI 2 additional blood samples were analyzed 30 (22/37) and 68 (55/78) hours after injury. Data collected included age, gender, CT findings, admission GCS and pupillary reactions, presence of associated trauma and hospital mortality. Even in severe cases, the serum IL2, IL4, IL5 and IFN-? levels remain undetectable after TBI by flow cytometry. The serum IL-10 levels, but not TNF-a, correlates significantly with GCS severity (Sperman s coefficient = 0.42, p<0.0001) and were associated with hospital mortality of patients with severe TBI. The elevated serum IL-10 levels remain significantly associated with mortality (p = 0.01) in the subset of patients with isolated severe TBI (n = 74). Multiple logistic regression analysis shows that higher serum IL-10 levels (> 0.09 pg/ml) measured 10 or 30 hours after the injury were respectively 6 times (OR 6.2, CI 95% 1.2  25.1, p = 0.03) and 5 times (OR 5.4, CI 95% 1.2  25.1, p = 0.03) more associated with hospital mortality than lower levels (< 0.05 pg/ml) independently on age, admission GCS and pupils or presence of associated trauma. No association was observed between serum IL-10 measured at 68 hour after TBI and mortality (p = 0.22). Serum IL-10 levels measured earlier in the first 2 days after severe TBI are independently associated with higher hospital mortality and may be a useful marker of TBI and its prognosis.

Orientador: Clementino Zeni Neto / Co-orientador: João Carlos Domingues Repka / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde / Resumo: 0 objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da obstrução biliar extrahepática sobre a ocorrência de translocação bacteriana, endotoxemia e Fator de Necrose Tumoral a em ratos. Foram utilizados 60 ratos da linhagem Wistar, machos, divididos em seis grupos, com 10 ratos cada, a saber: grupo Controle, grupo Simulação, grupo 1D, grupo 2D, grupo 7D e grupo 14D. Os ratos do grupo Controle foram submetidos diretamente ao sacrifício, com coleta de sangue e órgãos, sem nenhum procedimento cirúrgico prévio. Os ratos do grupo Simulação foram submetidos a laparotomia com manipulação e simulação de ligadura do dueto biliar comum, 24 horas ante do sacrifício. Os ratos dos grupos 1D, 2D, 7D e 14D foram submetidos a ligadura do dueto biliar comum, com sacrifício após 1, 2, 7 e 14 dias respectivamente. Durante o sacrifício, foi coletado sangue por punção intracardíaca, para dosagens de bilirrubinas, endotoxinas, TNFa e para hemocultura. Em seguida, foram coletados swab de esfregaço de retroperitônio, rins, baço, fígado, pulmões e linfonodos mesentéricos para cultura, e fragmento de intestino delgado para contagem de bactérias. Cinco ratos morreram durante o experimento: 1 rato do grupo 2D, 1 rato do grupo 7D e 3 ratos do grupo Simulação Com relação às dosagens de endotoxinas e TNFa, todos os grupos com obstrução biliar extrahepática apresentaram níveis detectáveis., com aumento proporcional ao tempo de obstrução biliar extra-hepática. Ocorreu translocação bacteriana em 30% dos ratos do grupo 1D, 66,66% dos ratos do grupo 2D, 100% dos ratos dos grupos 7 e 14D e 28,57% dos ratos do grupo Simulação. Em relação ao número de bactérias translocadas, observou-se maior quantidade de bactérias nos grupos com maior tempo de obstrução biliar, sendo mais evidente no grupo 14D. Concluiu-se que obstrução biliar extra-hepática causa translocação bacteriana, endotoxemia e aumento dos níveis de TNFa circulantes. O aumento do tempo de obstrução biliar, cursa com aumento dos índices de translocação bacteriana, endotoxemia e TNFa circulantes. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effects of obstructive jaundice over the occurrence of bacterial translocation, endotoxemie and TNFa in a rat model. Sixty male Wistar rats were used, divided in 6 groups of 10 rats each, as follows: Control group, Sham ligated group, ID group, 2D group, 7D group and 14D group. Rats in the Control group were sacrificed for blood and tissue sampling only. In the Sham ligated group, a laparotomy was performed, with manipulation and sham ligation of the common bile ducts 24 hours prior to sacrifice. In groups ID, 2D, 7D and 14D, common bile ducts were ligated and the animals were sacrificed in 1 day, 2 days, 7 days and 14 days, respectively. During the sacrifice, blood was collected by intra-cardiac punch for bilirubins, endotoxins, TNFa measuring, and culture. After this, swabs of the retroperitoneal fluids, kidneys, spleen, liver, lungs and mesenteric limph node complex, were collected for culture, and fragment of small bowel was sent to bacterial count. Five rats died during the experiment. All rats with common bile ducts ligated had detectable levels of the endotoxins and TNFa, with proportional increase acquainted with obstruction time. Bacterial translocation occurred in 30% of the rats in the ID group, 66,66% of the rats in the 2D group, 100% of the rats in the 7D and 14D groups, and 28,57% of the rats in the sham operated group. The number of translocated bacterial was higher in the groups with higher time of the biliar obstruction. This was more evident in the 14D group. In conclusion, the extra-hepatic biliar obstruction causes bacterial translocation, endotoxemie and increase of seric levels of TNF. The increased time of biliar obstruction, leads to an even higher bacterial translocation rate, endotoxemie and seric levels of TNFa.

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:40Z : No. of bitstreams: 1 000835480.pdf: 1335733 bytes, checksum: 2cd18cf85420b81fe402a40c37a0f05d (MD5) / A catarata situa-se entre as afecções oculares mais frequentes em cães. A facoemulsificação é o método que melhor se adéqua à terapia e o preferido entre os oftalmologistas. A celularidade do endotélio é condição a ser considerada para o sucesso da cirurgia, uma vez que lesões endoteliais podem induzir descompensação corneal permanente. Avaliou-se o papel antioxidante do ácido ascórbico intracameral sobre o endotélio corneal e sobre o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) expresso no humor aquoso, em cães submetidos à facoemulsificação. Utilizaram-se 40 olhos de 20 pacientes, machos ou fêmeas, com 7 a 12 anos, portando catarata senil bilateral. Conceberam-se dois grupos (n=20). Grupo 1 (G1), recebeu solução salina balanceada (BSS); Grupo 2 (G2), recebeu 0,001M de ácido ascórbico estéril diluído em BSS. O endotélio corneal foi avaliado à microscopia especular de não contato, antes e em diferentes momentos após a facoemulsificação. Avaliaram-se a densidade (células/mm2) e a área (mm2) celular, a espessura corneal (mm), a hexagonalidade e o coeficiente de variação do tamanho celular. O humor aquoso foi avaliado quanto à expressão do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Valores de p iguais ou inferiores a 0,05 foram considerados significativos. Com relação à densidade de células endoteliais, ambos os grupos apresentaram perdas, porém essas foram menores no G2. Relativamente à espessura corneal, não houve diferença. A hexagonalidade diminuiu significativamente no pós-operatório imediato no G1. Ainda no G1, o coeficiente de variação do tamanho celular aumentou significativamente. Não se encontrou reação marcada do TNF-α em ambos os grupos. De consoante com os resultados obtidos, admiti-se que o ácido ascórbico contribuiu para se minimizarem perdas celulares, relativamente ao endotélio corneal na facoemulsificação / Cataract is among the most common eye diseases in dogs. Phacoemulsification is the method that best fits to therapy and a favorite among veterinary ophthalmologists. The cellularity of the corneal endothelium is considered to be a condition for the success of the surgery, since a permanent endothelial injury can induce corneal decompensation. The goal of this study was to evaluate the antioxidant effects of ascorbic acid on the corneal endothelium, as well as the expression of the tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in the aqueous humor was evaluated of dogs submitted to phacoemulsification. It was used 40 eyes of 20 dogs, male or female, with 7 to 12 years, and bilateral senile cataracts. The dogs were separated into two groups (n = 20), differing only in the composition of the solution used to irrigate the eyes in the phacoemulsification. Group 1 (G1) received balanced salt solution (BSS) and Group 2 (G2) received sterile BSS containing 0.001 M ascorbic acid. The corneal endothelium was evaluated by non-contact specular microscopy before and at different times after phacoemulsification, in terms of cell density (cells/mm2), cell area (mm2), corneal thickness (mm), hexagonality, and coefficient of variation in cell size. The expression of TNF-α in the aqueous humor was measured by competitive enzyme immunoassay. P values equal to or less than 0.05 were considered significant. Regarding the density of endothelial cells, both groups showed losses, but these were lower in G2. There were no significant differences in corneal thickness (P>0.05). The hexagonality significantly reduced in the immediate postoperative of G1. Also in G1, the coefficient of variation in cell size increased. TNF-α expression was not observed in the aqueous humor in G1 and G2. According to the results, it can be assumed that ascorbic acid was able to minimize losses in endothelial cellularity arising from phacoemulsification

Orientador: José Luiz Laus / Banca: Paola Castro Moraes / Banca: Marcela Aldrovani Rodrigues / Banca: Arianne Pontes Oria / Banca: Adriana Morales / Resumo: A catarata situa-se entre as afecções oculares mais frequentes em cães. A facoemulsificação é o método que melhor se adéqua à terapia e o preferido entre os oftalmologistas. A celularidade do endotélio é condição a ser considerada para o sucesso da cirurgia, uma vez que lesões endoteliais podem induzir descompensação corneal permanente. Avaliou-se o papel antioxidante do ácido ascórbico intracameral sobre o endotélio corneal e sobre o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) expresso no humor aquoso, em cães submetidos à facoemulsificação. Utilizaram-se 40 olhos de 20 pacientes, machos ou fêmeas, com 7 a 12 anos, portando catarata senil bilateral. Conceberam-se dois grupos (n=20). Grupo 1 (G1), recebeu solução salina balanceada (BSS); Grupo 2 (G2), recebeu 0,001M de ácido ascórbico estéril diluído em BSS. O endotélio corneal foi avaliado à microscopia especular de não contato, antes e em diferentes momentos após a facoemulsificação. Avaliaram-se a densidade (células/mm2) e a área (mm2) celular, a espessura corneal (mm), a hexagonalidade e o coeficiente de variação do tamanho celular. O humor aquoso foi avaliado quanto à expressão do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α). Valores de p iguais ou inferiores a 0,05 foram considerados significativos. Com relação à densidade de células endoteliais, ambos os grupos apresentaram perdas, porém essas foram menores no G2. Relativamente à espessura corneal, não houve diferença. A hexagonalidade diminuiu significativamente no pós-operatório imediato no G1. Ainda no G1, o coeficiente de variação do tamanho celular aumentou significativamente. Não se encontrou reação marcada do TNF-α em ambos os grupos. De consoante com os resultados obtidos, admiti-se que o ácido ascórbico contribuiu para se minimizarem perdas celulares, relativamente ao endotélio corneal na facoemulsificação / Abstract: Cataract is among the most common eye diseases in dogs. Phacoemulsification is the method that best fits to therapy and a favorite among veterinary ophthalmologists. The cellularity of the corneal endothelium is considered to be a condition for the success of the surgery, since a permanent endothelial injury can induce corneal decompensation. The goal of this study was to evaluate the antioxidant effects of ascorbic acid on the corneal endothelium, as well as the expression of the tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in the aqueous humor was evaluated of dogs submitted to phacoemulsification. It was used 40 eyes of 20 dogs, male or female, with 7 to 12 years, and bilateral senile cataracts. The dogs were separated into two groups (n = 20), differing only in the composition of the solution used to irrigate the eyes in the phacoemulsification. Group 1 (G1) received balanced salt solution (BSS) and Group 2 (G2) received sterile BSS containing 0.001 M ascorbic acid. The corneal endothelium was evaluated by non-contact specular microscopy before and at different times after phacoemulsification, in terms of cell density (cells/mm2), cell area (mm2), corneal thickness (mm), hexagonality, and coefficient of variation in cell size. The expression of TNF-α in the aqueous humor was measured by competitive enzyme immunoassay. P values equal to or less than 0.05 were considered significant. Regarding the density of endothelial cells, both groups showed losses, but these were lower in G2. There were no significant differences in corneal thickness (P>0.05). The hexagonality significantly reduced in the immediate postoperative of G1. Also in G1, the coefficient of variation in cell size increased. TNF-α expression was not observed in the aqueous humor in G1 and G2. According to the results, it can be assumed that ascorbic acid was able to minimize losses in endothelial cellularity arising from phacoemulsification / Doutor

Orientador: Antonio Condino Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:35:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Almeida_AnaCarolinade_M.pdf: 3393669 bytes, checksum: bc888c2b3e7a9f30a4d5b3c3677ca407 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Os fagócitos, dentre eles, macrófagos, granulócitos e eosinófilos contêm uma NADPH oxidase associada à membrana, a qual produz superóxido e outros intermediários do oxigênio, os quais têm importante papel na defesa contra infecções. O colostro humano, além de suas propriedades nutricionais, é considerado uma importante fonte de fatores imunoprotetores para os neonatos. Os macrófagos do colostro constituem parte destes fatores imunoprotetores. O objetivo deste trabalho foi estudar a atividade do sistema NADPH oxidase e a expressão do gene CYBB, que codifica a glicoproteína gp91-phox, em macrófagos do colostro humano, e compará-Ias às de monócitos do sangue periférico e células mielomonocíticas humanas THP-l. Tais células foram cultivadas com IFN-y e TNF-a durante 48 horas. A seguir, a liberação de superóxido foi determinada espectrofotometricamente por meio da redução do cito cromo c especificamente inibida pela superóxido dismutase. A expressão do gene CYBB, que codifica o componente gp91-phox, foi determinada por meio de RT -PCR quantitativo-relativo. Nossos resultados mostram que a liberação espontânea de superóxido por macrófagos do colostro foi superior à de monócitos do sangue periférico. Contudo, ao serem estimulados com PMA e as citocinas IFN-y e TNF-a, macrófagos de colostro e monócitos do sangue periférico apresentam atividade NADPH oxidase equivalente. A liberação de superóxido por macrófagos do colostro e monócitos do sangue periférico foi sempre superior à de células THP-l, mesmo sendo estas, estimuladas com PMA e as citocinas IFN-y e TNF-a. Tais citocinas aumentaram a expressão relativa do gene gp91-phox em células THP-l, mas não em monócitos de sangue periférico e em macrófagos do colostro. Desta forma, após a cultura com as citocinas, as células THP-l passaram a apresentar expressão relativa do gene gp91- phox semelhante às outras duas populações, sem contudo, apresentar atividade NADPH oxidase equivalente, demonstrando que a atividade NADPH oxidase final na linhagem mielomonocítica humana é regulada em parte pela expressão do gene CYBB, é o produto de diferentes eventos do metabolismo celular e está relacionada ao estado de diferenciação celular / Abstract: Phagocytes like macrophages, granulocytes and eosinophils have a membrane-associated NADPH oxidase system, responsible for the production of superoxide and other oxygen reactive intermediates, considered critical factors for the defense against infections. The human colostrum is an important source of human macrophages. The aim of this work was to compare the NADPH oxidase activity and gp91-phox expression in 3 human myelomonocytic cell Unes: colostrum macrophages, the same mother' s blood monocytes, and THP-I cells. Specifically these cells were cultured with and without IFN-y and TNF-a during 48 hours. The assays included the spontaneous and PMA (30 nM)-induced superoxide release and the relative expression ofgp91-phox by RT-PCR. The principal results were: 1) Spontaneous superoxide release: Colostrum macrophages cultured in basal conditions release more superoxide than blood monocytes. IFN-y and TNF-a caused a significant increase in the superoxide release of blood monocytes. Colostrum macrophages were also stimulated by IFN-y and TNF-a but did not reach statistical significance. 2) PMA (30 nM)-induced superoxide release: IFN-y and TNF-a caused a significant increase in the superoxide release by blood monocytes, colostrum macrophages and THP-I cells. Colostrum macrophages and blood monocytes released much more superoxide than THP-I cells in all conditions. 3) Gp91-phox expression by relative RT-PCR analysis IFN-y and TNF-a did not interfere in gp91-phox relative expression of colostrum macrophages. IFN-y and TNF-a caused a discrete increase in gp91-phox expression of blood monocytes. IFN-yand TNF-a caused a dramatic increase in gp91-phox expression of THP-I cells. Overall, afier IFN + TNF incubation, THP-I cells, colostrum macrophages and blood monocytes presented the same relative leveI of gp91-phox expression. Our conclusions were: The basal NADPH oxidase activity is higher in colostrum macrophages compared to blood monocytes. IFN-y and TNF-a drive blood monocytes to behave like colostrum macrophages. The NADPH oxidase activity of colostrum macrophages does not respond to IFN-yand TNF-a. Although IFN-y and TNF-a drive THP-I cells, colostrum macrophages and blood monocytes to present the same relative leveI of gp91-phox expression, the 81 NADPH oxidase activity in macrophages and monocytes is much higher than in THP-I cells. Other factors in these more mature cells up-regulate the NADPH oxidase activity, providing strong and contrasting evidence that the NADPH oxidase activity in the human myelomonocytic lineage is regulated only in part by gp91-phox gene expression / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientadores: Silvana Pereira Barros, Sergio Roberto Peres Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-04T03:46:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vasconcelos_DanielFernandoPereira_M.pdf: 718453 bytes, checksum: 33e7ea7787a27dcce6c7a1cac2b7b5ed (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: A doença periodontal (DP) é causada por interações entre fatores do hospedeiro, microrganismos específicos patogênicos e o sistema imunológico. TNF-b é um imunoregulador multifuncional que está relacionado com a patogênese de diversas desordens imunológicas, incluindo a DP. Nosso estudo analisou a associação entre DP e polimorfismo no gene TNF-b (+252 A/G). O DNA foi extraído de células da mucosa oral de 126 indivíduos brancos: 44 indivíduos controle e 82 indivíduos com DP. O polimorfismo foi analisado pela técnica de PCR, seguida pela RFLP. Os dados foram estatisticamente analisados pelo teste Exato Fisher (p<0,05) e Odds Ratio (OR). A freqüência do polimorfismo mostrou diferença estatisticamente significativa entre os grupos controle e com DP, revelando que indivíduos portadores do alelo G apresentavam 2,6 vezes mais chances de desenvolver a DP do que indivíduos saudáveis (G vs. A, p=0.0019, OR= 2.67, 95% CI 1.45 - 4.78), em relação aos genótipos a presença de pelo menos um alelo G predispõe 3,1 vezes à DP (G/G+ G/A vs. A/A, p=0,0059, OR= 3.1, 95% CI 1.45 - 6.65). Conclui-se que o TNF-b está envolvido na patogênese da periodontite crônica e pode ser utilizado como um marcador de risco para a DP na população estudada / Abstract: Background: Periodontitis is an inflammatory disease that leads to irreversible attachment loss, bone destruction and eventually bone loss, such cascade that culminates in tissue destruction initiates with pathogenic micro-organisms and depends on host response to disease expression. Tumor necrosis factor (TNF) a potent multifunctional immune modulator has been implicated in the pathogenesis of periodontal disease. Objective: In this study we investigated the hypothesis of association between chronic periodontitis (CP) and polymorphisms of the TNF-ß gene. Materials and Methods: One hundred twenty six individuals were evaluated by measuring clinical attachment loss and divided in 44 health individuals (control group-CG) and 82 subjects with CP. DNA samples were obtained from the individual's epithelial cells through scraping of the buccal mucosa. Polymorphism in the TNF-ß gene was analyzed by PCR, followed by NcoI restriction endonuclease digestion (RFLP). Results: The TNF-ß (+252A/G) polymorphism showed association with chronic periodontitis. Significant differences were found for the TNF-ß allele or carriage rate frequencies; odds ratio (OR)=2.67. Conclusions: These findings suggest that genotype composed of TNF- ß gene polymorphism may influence the susceptibility to chronic periodontitis / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Tese (doutorado) - Pontifícia Universidade Catolóca do Paraná, Curitiba, 2009. / Bibliografia: f. 33-36 / A doença renal crônica (DRC) está associada à resposta inflamatória, apesar dos mecanismos envolvidos e das estratégias antiinflamatórias estarem ainda indefinidos. Este estudo teve como objetivo avaliar a translocação de endotoxinas (ET) do lúmen intesti / Background: Renal dysfunction is associated with activation of inflammatory response, but the mechanisms behind this observation and potential antiinflammatory strategies are yet to be defined. Endotoxin (ET) translocation from the intestinal lumen can po

Dissertação (mestrado) - Pontifícia Universidade Católica do Paraná, Curitiba, 2011 / Bibliografia: f. 59-65 / Introdução: A endometriose é uma doença ginecológica benigna que afeta cerca de 10% das mulheres em idade reprodutiva. A fisiopatologia da endometriose não é completamente compreendida, mas parece haver uma imunoreatividade aberrante induzida pela doença, / Introduction: Endometriosis is a common benign gynecologic disease that affects reproductive-aged women. The physiopathology of endometriosis is not completely understood, but there seems to be an aberrant immunoreactivity induced by the disease, resultin