Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2013 / Made available in DSpace on 2013-12-05T23:05:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 318432.pdf: 1682275 bytes, checksum: b1ff1c1bc0e1156c2b36ddc92e31ec5b (MD5) Previous issue date: 2013 / A agmatina é uma amina catiônica endógena cuja ação antidepressiva é reportada em diversos estudos nos últimos anos. O presente estudo investigou o efeito do tratamento agudo com agmatina no teste da suspensão pela cauda (TSC) em camundongos, um modelo animal preditivo, amplamente utilizado na investigação de novos compostos com ação antidepressiva. O tratamento oral com agmatina em baixas doses (0,001, 0,01, 0,1 e 1 mg/kg) reduziu o tempo de imobilidade dos animais no TSC confirmando seu efeito tipo-antidepressivo neste teste. Além disso, considerando a estreita relação entre inflamação e depressão, e a necessidade de investigar o potencial antidepressivo dessa amina em modelos animais de depressão, foi investigado o efeito da agmatina em um modelo que induz um comportamento tipo-depressivo nos animais após administração do fator de necrose tumoral (TNF-a). A administração intracerebroventricular (i.c.v.) de TNF-a (0,001 fg/sítio) promoveu um aumento no tempo de imobilidade dos animais no TSC, caracterizando um comportamento tipo-depressivo, que foi prevenido pelo tratamento com agmatina (0,0001, 0,1 e 1 mg/kg). Adicionalmente, foi avaliado o envolvimento dos sistemas monoaminérgicos, glutamatérgico e da via L-arginina-óxido nítrico no efeito antidepressivo da agmatina no modelo de comportamento tipo-depressivo induzido por TNF-a no TSC. Em animais que não receberam TNF-a, foi observado que a administração de agmatina em uma dose sub-ativa (0,0001 mg/kg) combinada com doses sub-ativas de fluoxetina (5 mg/kg, p.o., inibidor seletivo da recaptação de serotonina), imipramina (0,1 mg/kg, p.o., inibidor da recaptação de serotonina e noradrenalina/antidepressivo tricíclico), bupropiona (1 mg/kg, p.o, inibidor da recaptação de dopamina, com atividade na recaptação de noradrenalina), MK-801 (0,001 mg/kg, p.o., antagonista não competitivo de receptores NMDA) ou 7-nitroindazol (7-NI) (25 mg/kg, i.p., inibidor da enzima óxido nítrico sintase neuronal), foi capaz de produzir um efeito tipoantidepressivo sinérgico. Todas essas administrações, inclusive o prétratamento com agmatina, antidepressivos, MK-801 e 7-NI isoladamente em suas doses sub-ativas, foram capazes de prevenir o aumento do tempo de imobilidade dos animais induzido pela administração de TNFa. Nenhuma alteração locomotora dos animais foi verificada no teste do campo aberto. Considerando a relação bem estabelecida entre as citocinas pró-inflamatórias e apoptose, além do potencial anti-apoptótico da agmatina e dos antidepressivos convencionais, foi investigado o envolvimento de vias de sinalização que regulam neuroplasticidade e sobrevivência celular: proteína anti-apoptótica Bcl-2, proteína próapoptótica Bax e glicogênio sintase cinase 3ß (GSK-3ß) sobre o efeito antidepressivo da agmatina no modelo do TNF-a. Nenhuma alteração significativa na expressão das proteínas Bax e Bcl-2 e fosforilação de GSK-3ß (Ser9) foram observadas por western blot. Nosso conjunto de resultados demonstrou que o efeito antidepressivo da agmatina parece ser mediado, pelo menos em parte, por uma interação com os sistemas serotonérgico, noradrenérgico, dopaminérgico, pelo antagonismo de receptores NMDA e inibição da síntese de óxido nítrico, indicando que esta amina catiônica pode se constituir em uma nova alternativa terapêutica para o tratamento da depressão associada à inflamação. / Abstract: Agmatine is an endogenous cationic amine that has been shown to exert antidepressant-like effect. The present study investigated the effect of acute treatment with agmatine in tail suspension test (TST) in mice, a predictive animal model, widely used in research for new compounds with antidepressant action. Oral treatment with agmatine at low doses (0.001, 0.01, 0.1 and 1 mg/kg) reduced the immobility time in the TST confirming its antidepressant-like effect in this test. Furthermore, given the close relationship between inflammation and depression, and the need to investigate the antidepressant potential of this amine in animal models of depression, we investigated the effect of agmatine in a model that induces a depressive-like behavior in animals after administration of factor tumor necrosis factor (TNF-a). Acute administration of TNF-a (0.001 fg/site, i.c.v.) increased immobility time in TST, indicative of a depressive-like behavior, and the treatment with agmatine (0.0001, 0.1 and 1 mg/kg) was able to prevent this effect. Additionally, we examined the involvement of monoaminergic systems, NMDA receptors and Larginine-nitric oxide pathway in the antidepressant-like effect of agmatine in the model of depression induced by TNF-a in the TST. In control mice (not received TNF-a) administration of sub-effective doses of agmatine (0.0001 mg/kg) combined with sub-effective doses of fluoxetine (5 mg/kg, p.o., a selective serotonin reuptake inhibitor), imipramine (0.1 mg/kg, p.o., tricyclic antidepressant), bupropion (1 mg/kg, p.o., dopamine reuptake inhibitor with subtle activity on noradrenergic reuptake), MK-801 (0.001 mg/kg, p.o.noncompetitive antagonist of NMDA receptors) or 7-nitroindazole (7-NI) (25 mg/kg, i.p.inhibitor of neuronal NOS), produced a synergistic antidepressantlike effect in the TST. All these administrations and also agmatine, antidepressants, MK-801 and 7-NI administered alone at a sub-effective dose were able to prevent the increased immobility time induced by TNF-a. These effects were not accompanied by alterations in mice locomotor activity. Moreover, given the well-established relationship between pro-inflammatory cytokines and apoptosis, beyond the antiapoptotic potential of agmatine and conventional antidepressants, we investigated the involvement of signaling pathways that regulate neuroplasticity and cellular survival: anti-apoptotic protein Bcl2 protein, pro-apoptotic Bax and glycogen synthase kinase 3ß (GSK-3ß) phosphorylation (Ser9) on the antidepressant effect of agmatine in TNF-a induced animal model. No significant changes in protein expression of Bax and Bcl-2 and in phosphorylation of GSK-3ß (Ser9) were observed by Western blot. Our set of results showed that the acute effect of agmatine on the TNF-a induced animal model of depression appears to be mediated, at least in part by an interaction with monoaminergic systems and by the inhibition of NMDA receptors and nitric oxide synthesis, indicating that this cationic amine may constitute a new therapeutic alternative for the treatment of depression associated with inflammation.

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-04. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:08Z : No. of bitstreams: 1 000870615_20170104.pdf: 317584 bytes, checksum: 6a269491df3512a27244ef461e746baa (MD5) Bitstreams deleted on 2017-01-06T13:21:19Z: 000870615_20170104.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2017-01-06T13:22:02Z : No. of bitstreams: 1 000870615.pdf: 515774 bytes, checksum: 03bc759e34cba0d37722957c82943ef6 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic disease that can be fatal to humans and dogs. The disease is caused by the intracellular parasite Leishmania infantum and is transmitted by the bite of the sandfly (phlebotomines). In dogs, VL is observed as an intense chronic inflammatory reaction in the liver, spleen, skin, bone marrow and lymph nodes. Arginase activity is important in VL because an increase of this enzyme may contribute to the multiplication of the parasite and a reduction of nitric oxide (NO) synthesis, predisposing a macrophage to infection. Prostaglandin E2 (PGE2) can play a regulatory role in the production of tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10), however, there have been no studies in dogs with LV. This study aimed to evaluate the arginase activity in adherent macrophages cultivated from the lymph nodes of 18 healthy and 23 naturally infected dogs and to examine levels of NO and PGE2 in the supernatant of these cultures. The regulatory effect of PGE2 on the production of TNF-α and IL-10 was also evaluated in supernatants of total lymph node leukocytes cultures. These results help to clarify the mechanisms of the immune response in CVL. / FAPESP: 2013/066849

Resumo:A leishmaniose visceral (LV) é uma doença crônica que pode ser fatal para os humanos. A doença é causada por um parasita intracelular, Leishmania infantum e é transmitida pela picada do mosquito flebótomo. Em cães com LV observa-se uma intensa reação inflamatória crônica no fígado, baço, pele, medula óssea e gânglios linfáticos. A atividade arginase é importante na LV, pois o aumento dessa enzima pode contribuir para a multiplicação do parasita e para a redução da síntese de óxido nítrico (NO), predispondo o macrófago à infecção. A prostaglandina E2 (PGE2) pode regular a produção do fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e da interleucina-10 (IL-10), porém nenhum estudo ainda foi realizado em cães com LV. O presente estudo teve como objetivo avaliar a atividade arginase em macrófagos aderentes de cultura de linfonodos de 23 cães naturalmente infectados e 18 saudáveis, e os níveis de NO e PGE2 no sobrenadante dessas culturas. O efeito regulatório de PGE2 na produção de TNF-α e IL-10 também foi avaliado em cultura de leucócitos totais de linfonodo. Esse estudo ajuda a esclarecer o mecanismo da resposta imunológica na LVC. / Abstract:Visceral leishmaniasis (VL) is a chronic disease that can be fatal to humans and dogs. The disease is caused by the intracellular parasite Leishmania infantum and is transmitted by the bite of the sandfly (phlebotomines). In dogs, VL is observed as an intense chronic inflammatory reaction in the liver, spleen, skin, bone marrow and lymph nodes. Arginase activity is important in VL because an increase of this enzyme may contribute to the multiplication of the parasite and a reduction of nitric oxide (NO) synthesis, predisposing a macrophage to infection. Prostaglandin E2 (PGE2) can play a regulatory role in the production of tumor necrosis factor (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10), however, there have been no studies in dogs with LV. This study aimed to evaluate the arginase activity in adherent macrophages cultivated from the lymph nodes of 18 healthy and 23 naturally infected dogs and to examine levels of NO and PGE2 in the supernatant of these cultures. The regulatory effect of PGE2 on the production of TNF-α and IL-10 was also evaluated in supernatants of total lymph node leukocytes cultures. These results help to clarify the mechanisms of the immune response in CVL. / Orientador:Valéria Marçal Felix de Lima / Banca:Alexandra Ivo de Medeiros / Banca:Caris Maroni Nunes / Mestre

Orientador: Luis Carlos Spolidorio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T20:01:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Neves_KarinaAntunes_D.pdf: 1751187 bytes, checksum: adac4b09e6d649c2ec3a0006d3b1ae83 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Vários relatos na literatura sugerem que a Ciclosporina A (CsA) aumenta a remodelação óssea com a reabsorção excedendo a formação, resultando em perda óssea. Os mecanismos da perda óssea associada à CsA são complexos e envolvem marcadores ósseos celulares e produtos dos osteoblastos e osteoclastos. Dentre os mediadores imunológicos, a CsA parece ter efeitos na produção de óxido nítrico (NO), o qual exerce efeitos bifásicos sobre o osso. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos da CsA sobre o osso através da mensuração da densidade mineral óssea (BMD), análise bioquímica (fosfatase alcalina total, cálcio sérico e fósforo) e relacionar com a expressão de NO e TNFa pelos macrófagos peritoniais de camundongos. Sessenta camundongos foram divididos em 4 grupos e receberam injeções subcutâneas diárias de CsA 50mg/kg peso corporal, durante os períodos de 7, 14, 28 e 60 dias (n=lO) e o controle recebeu solução salina (n=5). Amostras sanguíneas foram obtidas através de punção cardíaca e foram analisados: cálcio sérico, fósforo e fosfatase alcalina. Os macrófagos peritoniais foram obtidos de cada camundongo, 3 dias após a injeção intraperitonial de tioglicolato de sódio. As células foram incubadas com lipopolossacarídeo . (LPS) e os sobrenadantes foram usados para o ensaio de produção de NO e TNFa. As radiografias digitais dos fêmures foram obtidas através de um sistema de imagem digital, CDRR. A densidade mineral óssea -(BMD) foi avaliada com o auxílio do software Photoshop 7,0 (Microsoft, 2003). A concentração dos marcadores séricos ósseos variou com o tempo de administração da CsA. Houve diminuição de cálcio após 28 dias e fósforo e ALP após 7 dias. A BMD diminuiu significativamente na epífise distal dos fêmures, a partir de 14 dias e na epífise proximal, somente após 60 dias, nos camundongos submetidos ao tratamento com CsA. A produção de NO e TNF-a aumentou significativamente nos camundongos tratados com CsA (período de 7 e 14 dias). A partir dos resultados do presente trabalho confirmamos que a CsA induziu perda óssea. Houve um sinergismo entre a perda óssea e a diminuição de ALP' cálcio e fósforo sérico, assim como o aumento dos níveis de NO e TNF-a / Abstract: Several reports suggest that Cyclosporin A (CsA) causes increased bone turnover and remodeling with resorption exceeding formation, resulting in bone loss. The mechanism of CsA-induced bone loss is complex and can involve cellular bone markers and osteoblasts and osteoclasts products. CsA seems to have effects on nitric oxide (NO) production, which has a biphasic effect on osteoclastic bone resorption. The aim of the present study was to evaluate the effects of the CsA on bone by Bone Mineral Density (BMD), biochemical analysis (Total Alkaline Phosphatase - ALP and serum calcium) and to relate them with the expression of NO and Tumor necrosis factor alpha (TNFa.) by peritoneal macrophage of mice. Sixty male mice were distributed into 4 groups and CsA (Sandimmun Novartis) was injected subcutaneously in a daily dose of 50mg/kg body weight during the periods of 7, 14, 28 and 60 days (n=10), whereas control mice received saline solution (n=5). Blood samples were obtained by direct cardiac puncture. Serum calcium and total alkaline phosphatase levels were obtained. Macrophages were obtained trom the peritoneal cavities of treated and control mice 3 days after intraperitoneal administration of sodium thyoglycollate. Cells were incubated with lipopolysaccharide (LPS). After incubation, the culture supernatants were used for NO-and TNFa production assays. Digital radiographs of femurs were obtained with the use of a computerized imaging system, CDR R. Bone mineral density (BMD) measurements were made with the help of the software Photoshop 7,0 (Microsoft, 2003). The concentration of serum bone markers varied with the period of CsA administration. There was a significant decrease in the calcium levels after 28 days and ALP after 7 days. The BMD decreased significantly on distal epiphysis of femurs after 14 days and on proximal epiphysis after 60 days, in the mice submitted to CsA therapy. NO and TNF-a production had a significant increase in mice treated with CsA (7 and 14 days). Based on the results ofthe present study we confirmed that CsA induces bone loss in vivo. There was a synergism between the bone loss and the decrease of alkaline phosphatase, and calcium, and the increase ofNO and TNF-a / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Made available in DSpace on 2016-05-17T16:51:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-06. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-17T16:54:50Z : No. of bitstreams: 1 000864249.pdf: 7320039 bytes, checksum: 72267d35491b03d5cd6737c361481e7c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Oncolytic virotherapy is a novel strategy for treatment of cancer in humans and companion animals as well. Canine distemper virus (CDV), a paramyxovirus, has proven to be oncolytic through induction of apoptosis in canine-derived tumour cells, yet the mechanism behind this inhibitory action is poorly understood. In this study, three human mammary tumour cell lines and one canine-derived adenofibrossarcoma cell line were tested regarding to their susceptibility to CDV infection, apoptosis, mitochondrial membrane potential (MMP) and expression of tumour necrosis factor-alpha-induced protein 8 (TNFAIP8). CDV replication induced cytopathic effect and > 45% of infected cells were considered death and/or under late apoptosis/necrosis. TNFAIP8 and CDV M gene expression were positively correlated in all cell lines. In addition, MMP was highly associated with increase in virus titres (p<0.005). Thus, these results strongly suggest that both human and canine mammary tumour cells are potential candidates for studies concerning CDV-induced cancer therapy

Resumo:A Viroterapia oncolítica é uma nova estratégia para o tratamento de câncer em seres humanos e também em animais de companhia. O vírus da cinomose canina (CDV), um paramixovírus, tem se mostrado ser oncolítico através da indução de apoptose em células tumorais derivadas de cães, ainda que o mecanismo subjacente a esta acção inibidora seja pouco compreendida. Neste estudo, três linhagens de células tumorais mamarias humanas e uma linhagem celular derivada de adenofibrossarcoma canino foram testados quanto à sua suscetibilidade à infecção por CDV, a apoptose, o potencial de membrana mitocondrial (MMP) e a expressão de necrose tumoral-alfa induzida pela proteína de fator 8 (TNFAIP8 ). A replicação CDV induziu o efeito citopático e > 45% das células infectadas foram consideradas no âmbito de morte e/ou apoptose tardia sob necrose. TNFAIP8 e expressão gênica CDV foram positivamente correlacionadas em todas as linhagens celulares. Além disso, a MMP foi altamente associada com o aumento nos títulos de vírus (p <0,005). Assim, estes resultados sugerem fortemente que ambas as células tumorais mamárias humanas e caninas são potenciais candidatos para estudos sobre a terapia do câncer induzido por CDV / Abstract:Oncolytic virotherapy is a novel strategy for treatment of cancer in humans and companion animals as well. Canine distemper virus (CDV), a paramyxovirus, has proven to be oncolytic through induction of apoptosis in canine-derived tumour cells, yet the mechanism behind this inhibitory action is poorly understood. In this study, three human mammary tumour cell lines and one canine-derived adenofibrossarcoma cell line were tested regarding to their susceptibility to CDV infection, apoptosis, mitochondrial membrane potential (MMP) and expression of tumour necrosis factor-alpha-induced protein 8 (TNFAIP8). CDV replication induced cytopathic effect and > 45% of infected cells were considered death and/or under late apoptosis/necrosis. TNFAIP8 and CDV M gene expression were positively correlated in all cell lines. In addition, MMP was highly associated with increase in virus titres (p<0.005). Thus, these results strongly suggest that both human and canine mammary tumour cells are potential candidates for studies concerning CDV-induced cancer therapy / Orientador:Tereza Cristina Cardoso da Silva / Banca:Andréa Fontes Garcia / Banca:Roberto Gameiro de Carvalho / Mestre

Orientador: Juliana Regina Peiró / Coorientador:Sérgio Moraes Aoki / Banca:José Paes de Oliveira Filho / Banca:Flávia de Almeida Lucas / Resumo: Endotoxemia é distúrbio sistêmico que se origina da resposta do hospedeiro a um componente da membrana celular das bactérias Gram- negativas. Esta resposta se dá através da exposição dos receptores celulares TLR-4 e TLR-2 ao LPS. Os objetivos deste estudo foram investigar as alterações na expressão gênica da exposição ao LPS em leucócitos de equinos utilizando a técnica de microarray, avaliar a eficiência do modelo ex vivo para os estudos envolvendo a endotoxemia pela mesma técnica, avaliar a expressão global de genes em vias envolvidas, identificar componentes da cascata metabólica com potenciais para novas terapias, e fornecer subsídio para futuros estudos. Amostras de sangue total (15mL) de cavalos saudáveis (n=6) foram incubadas durante 4 horas a 37°C com 5% de CO2 na presença (1 ou 10 ng/mL) ou ausência de LPS (0 ng/mL). Alíquotas de 500µL de sangue foram coletadas nos momentos 0, 2 e 4 horas após o estímulo do LPS. O RNA, extraído das mostras, foi utilizado para a transcrição do cDNA. A hibridização do cDNA marcado com Cy-3 foi realizada em lâminas 4x44K v2 de humanos contendo sequências homólogas com a espécie equina para os genes de interesse. Após a leitura das lâminas, com filtro para genes 30x mais ou menos expressos, verificou-se um aumento da expressão do TLR-2 na concentração de 10 ng LPS/mL no momento 4 em relação ao momento 2. Este resultado sugere que, embora o receptor TLR-4 seja o principal receptor no reconhecimento do LPS, o receptor TLR-2 também tem um papel no reconhecimento destas moléculas / Abstract: Endotoxemia is systemic disturbance that origins from the host response to a component of the cellular membrane of Gram-negative bacterias. This response occurs through exposure of cellular receptors TLR-4 and TLR-2 to LPS. The objectives of this study were to investigate changes in gene expression of exposure to LPS in horses leukocytes using the microarray technique, to evaluate the efficiency of the ex vivo model for studies of endotoxemia by the same technique, to evaluate the global expression of genes in the metabolic pathways involved, identify components of the metabolic cascade with potential for new therapies, and provide allowance for future studies. Whole blood samples (15mL) of healthy horses (n=6) were incubated for 4 hours at 37°C with 5% of CO2 in the presence (1 or 10 ng/ml) or absence of LPS (0 ng/ml). Aliquots of 500μL of blood were collected at 0,2 and 4 hours after LPS stimulation. The RNAs, extracted from the samples, were used for the transcription of the cDNAs. Hybridization of labeled cDNAs with Cy-3 were performed in 4x44K v2 slides containing human sequences homologous to the equine species for the genes of interest. After the reading of the slides with filter for genes 30x up regulation or down regulation expression, it was observed an increased expression of the TLR-2 concentration of 10 ng LPS/mL at time 4 compared to time 2. This result suggests that, although the TLR-4 receptor is the main LPS recognition receptor, the receptor TLR-2 also plays a role in recognition of these molecules / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-07-17Bitstream added on 2014-06-13T20:29:53Z : No. of bitstreams: 1 dalmagro_p_me_araca.pdf: 405350 bytes, checksum: 6e68960f50834d47030b502e88fb55c8 (MD5) / Endotoxemia é distúrbio sistêmico que se origina da resposta do hospedeiro a um componente da membrana celular das bactérias Gram- negativas. Esta resposta se dá através da exposição dos receptores celulares TLR-4 e TLR-2 ao LPS. Os objetivos deste estudo foram investigar as alterações na expressão gênica da exposição ao LPS em leucócitos de equinos utilizando a técnica de microarray, avaliar a eficiência do modelo ex vivo para os estudos envolvendo a endotoxemia pela mesma técnica, avaliar a expressão global de genes em vias envolvidas, identificar componentes da cascata metabólica com potenciais para novas terapias, e fornecer subsídio para futuros estudos. Amostras de sangue total (15mL) de cavalos saudáveis (n=6) foram incubadas durante 4 horas a 37°C com 5% de CO2 na presença (1 ou 10 ng/mL) ou ausência de LPS (0 ng/mL). Alíquotas de 500µL de sangue foram coletadas nos momentos 0, 2 e 4 horas após o estímulo do LPS. O RNA, extraído das mostras, foi utilizado para a transcrição do cDNA. A hibridização do cDNA marcado com Cy-3 foi realizada em lâminas 4x44K v2 de humanos contendo sequências homólogas com a espécie equina para os genes de interesse. Após a leitura das lâminas, com filtro para genes 30x mais ou menos expressos, verificou-se um aumento da expressão do TLR-2 na concentração de 10 ng LPS/mL no momento 4 em relação ao momento 2. Este resultado sugere que, embora o receptor TLR-4 seja o principal receptor no reconhecimento do LPS, o receptor TLR-2 também tem um papel no reconhecimento destas moléculas / Endotoxemia is systemic disturbance that origins from the host response to a component of the cellular membrane of Gram-negative bacterias. This response occurs through exposure of cellular receptors TLR-4 and TLR-2 to LPS. The objectives of this study were to investigate changes in gene expression of exposure to LPS in horses leukocytes using the microarray technique, to evaluate the efficiency of the ex vivo model for studies of endotoxemia by the same technique, to evaluate the global expression of genes in the metabolic pathways involved, identify components of the metabolic cascade with potential for new therapies, and provide allowance for future studies. Whole blood samples (15mL) of healthy horses (n=6) were incubated for 4 hours at 37°C with 5% of CO2 in the presence (1 or 10 ng/ml) or absence of LPS (0 ng/ml). Aliquots of 500μL of blood were collected at 0,2 and 4 hours after LPS stimulation. The RNAs, extracted from the samples, were used for the transcription of the cDNAs. Hybridization of labeled cDNAs with Cy-3 were performed in 4x44K v2 slides containing human sequences homologous to the equine species for the genes of interest. After the reading of the slides with filter for genes 30x up regulation or down regulation expression, it was observed an increased expression of the TLR-2 concentration of 10 ng LPS/mL at time 4 compared to time 2. This result suggests that, although the TLR-4 receptor is the main LPS recognition receptor, the receptor TLR-2 also plays a role in recognition of these molecules