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Efeitos hipolipidêmicos e toxicológicos de complexos de rutina com organoestânicos / Hipolipidemic and toxicologic effects of complexes of rutina with organotin

Mello, Vanessa Jóia de 28 August 2001 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-27T11:34:50Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1855386 bytes, checksum: 78dcb1f5fe444c68d596a83fdf8d900a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-27T11:34:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1855386 bytes, checksum: 78dcb1f5fe444c68d596a83fdf8d900a (MD5) Previous issue date: 2001-08-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Dois ensaios biológicos foram realizados com o objetivo de avaliar os efeitos hipolipidêmicos e toxicológicos de complexos do flavonóide rutina com organoestânicos [SnCl2Ph2], [SnClPh3], [SnCl3Ph] e [SnCl4]. Inicialmente promoveu- se a síntese dos complexos obtendo-se os produtos: [SnCl2Ph2(Rut)].H2O, [SnClPh3(Rut)].6H2O, [SnClPh(Rut)].H2O, [SnCl(Rut)].H2O, (SN1, SN2, SN3, SN4, respectivamente). Estes produtos foram caracterizados a partir de análise elementar (CHN), ponto de fusão, espectroscopia no infravermelho, ressonância magnética nuclear de 119 Sn. Em posse dos resultados, realizou-se o primeiro ensaio biológico, com complexos sintetizados. Para fins de comparação e avaliação do efeito hipolipidêmico destas substâncias utilizou-se no mesmo ensaio, o flavonóide rutina isoladamente e a atorvastatina cálcica (presente no medicamento liptor). Estas substancias foram testadas no metabolismo de coelhos da raça Nova Zelândia Branco, com hiperlipidemia induzida por colesterol (0,5%) + ácido cólico (0,1%) administrados na ração dos animais, que receberam as substâncias em estudo encapsuladas, na dose de 5mg/dia. As dosagens foram efetuadas no 1°, 16° e 31° dias de realização do experimento. Todos os complexos foram eficazes na redução do colesterol total, sendo o mais eficiente o complexo do flavonóide rutina com o [SnCl4] ([SnCl(Rut)].H2O), apresentando um resultado bem similar ao expressado pela atorvastatina cálcica. Dentre os compostos o que promoveu maior elevação da lipoproteína colesterol-HDL foi o complexo do flavonóide rutina com o composto [SnClPh3] ([SnClPh3(Rut)].6H2O) aos 15 dias, e o principio ativo atorvastatina cálcica aos 30 dias. A redução da lipoproteína colesterol-LDL foi mais pronunciada também pelo complexo do flavonóide rutina com o composto [SnClPh3] ([SnClPh3(Rut)].6H2O). Os complexos não apresentaram taxas satisfatórias de redução da concentração de triacilgliceróis. Os complexos do flavonóide rutina com os organoestânicos [SnClPh3], ([SnClPh3(Rut)].6H2O) e [SnCl4] ([SnCl(Rut)].H2O) que apresentaram os melhores resultados no primeiro experimento, foram utilizados na dose de 100 mg/dia, no segundo experimento. Este ensaio biológico foi realizado com a finalidade de obter- se a toxicologia aguda destas substâncias. Efetuaram-se dosagens do colesterol total, triacilgliceróis, colesterol-HDL, glicose, proteínas totais, albumina, bilirrubina total, uréia, ácido úrico, fósforo, cálcio, gama glutamil transferase (Gama-GT) e as transaminase glutâmico-piruvica (TGP) e transaminase glutâmico oxaloacética (TGO) no 1°, 16° e 31° dias de realização do experimento. Nesta dosagem estas substâncias não apresentaram efeitos hiperlipidêmicos. As concentrações lipídica sanguínea apresentaram uma elevação considerável. Foram observadas elevações nas concentrações das transaminases glutâmico-piruvica (TGP) e glutâmico oxaloacética (TGO) bem como na concentração de ácido úrico aos 30 dias. Para os outros constituintes não se observou efeito tóxico destas substâncias. / Two biological assay were carried out to access the hipolipidemic and toxicologic effects of the complexes made by the rutin flavonoid add to organotin [SnCl2Ph2], [SnClPh3], [SnCl3Ph] and [SnCl4]. The reaticon of these two substance put together make the synthesis of the complexes: [SnCl2Ph2(Rut)].H2O, [SnClPh3(Rut)].6H2O, [SnClPh(Rut)].H2O, [SnCl(Rut)].H2O, (SN1, SN2, SN3, SN4, respectively). These compounds were characterized by elementary analysis (CHN), meelting point, infra-red spectroscopy, nuclear magnetic resonance of 119 Sn. One biological assay was carried out with synthecized complexes to access and compare the hipolipidemic effects of these substances. Two pararel treatements, one with flavonoid rutin and the other with atorvastatin (present in the liptor medicine) were tested in metabolism of rabbits of the White New Zeland race. These substances were tested in metabolism of rabbits with induced hiperlipidem for cholesterol (0.5%) + colic acid (0.1%) which fed the animals They received encapsulated substances in study in the dose of 5mg/day. The blood samples were take on the 1°, 16° and 31° days along the experiment. All the complexes had shown efficiency in reducing the total cholesterol, and the most efficient complex result to be the flavonoid rutina plus [SnCl4] ([SnCl(Rut)].H2O) presented a quite similar to that expressed by the calcic atorvastatina compound. Among these complexes one that caused the high level of the lipoprotein cholesterol-HDL were ([SnClPh3(Rut)].6H2O)] after the 15o day, and the atorvastatina after 30oday. The reduction of the lipoprotein cholesterol-LDL more intensive than that caused by ([SnClPh3(Rut)].6H2O) complex. The complexes did not present satisfactory rates of reduction in triglyceride concentration. The complexes ([SnClPh3(Rut)].6H2O) and ([SnCl(Rut)].H2O), which presented the best results in the first experiment were used in the dose 100 of mg/day in second experiment. This biological assay was carried out to reach a acute toxicology of these substances. Rates of total cholesterol, triglyceride, cholesterol-HDL, glucose, proteins, albumen, total bilirubin, urea, acid úrico, phosphorus, calcium, glutamil gamma transferase (Gama-GT), alanine aminotransferase (GPT) and aspartate aminotransferase (GOT) were analized on 1°, 16° and 31° days of the experimental period. In this dosagem these substances did not present hiperlipidemic effect. The lipidic concentrations in the blood presented a considerable rise. There were high concentrations of alanine aminotransferase (GPT) and aspartate aminotransferase (GOT) after 15o and 30o days of treatement but concentration of uric acid was high only after 30o days. No toxicologic effects was observed on the others constituents.
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Produção de celulases e xilanases por Penicillium echinulatum em processo submerso utilizando biorreatores com agitação mecânica e airlift de circulação interna

Ritter, Carla Eliana Todero 01 December 2009 (has links)
Complexos celulolíticos possuem aplicações principalmente nas indústrias alimentícia, do vestuário e do papel; entretanto, seu uso de maior potencial é a hidrólise da celulose, componente dos resíduos lignocelulósicos, visando à produção do etanol. Dentre os microorganismos produtores de celulases, destacam-se os mutantes do gênero Trichoderma, que são os mais estudados e utilizados industrialmente. Mutantes de Penicillium echinulatum também estão entre os micro-organismos atualmente estudados para a produção de celulases. Neste trabalho, são apresentados dados de produção de celulases por P. echinulatum em cultivos submersos em frascos agitados e em biorreatores com agitação mecânica e airlift de circulação interna, na presença de celulose e sorbitol. A caracterização do meio e o tempo de adição do indutor e fontes de carbono também foram estudados, inicialmente, em frascos sob agitação recíproca. As condições que apresentaram os melhores resultados em frascos foram testadas em biorreatores com agitação mecânica e airlift. Estudaram-se condições hidrodinâmicas, como velocidade de fluxo e aeração em biorreator airlift para a otimização da produção de celulases, bem como composições de meios em biorreator com agitação mecânica, onde o oxigênio dissolvido foi mantido em níveis mínimos de 20% da saturação. Como indicadores de avaliação, foram realizadas análises enzimáticas de FPA (atividade sobre papel filtro), β-glicosidase, endoglicanase e xilanase; concentração de biomassa; consumo da fonte de carbono e variação do pH. Os resultados obtidos em frascos sob agitação mostraram que sorbitol, ao ser empregado como substituto parcial da celulose, apresenta vantagem na produção enzimática e na reologia do cultivo. Também, constatou-se que o tempo de adição da celulose influencia a produção enzimática em cultivos submersos e que a lactose, associada ao sorbitol, promove maiores títulos enzimáticos. Em relação ao uso dos biorreatores, verificaram-se melhores resultados em airlift para o meio contendo 0,25% (m/v) de sorbitol e 0,75% (m/v) de celulose, quando comparado ao biorreator com agitação mecânica. Ensaios com alimentação em três estágios não apresentaram resultados relevantes quanto à produção enzimática e à produtividade volumétrica. Testes iniciados com sorbitol e alimentados com celulose apresentaram melhores resultados com relação aos realizados em regime de batelada. Ensaios iniciados com 0,25% (m/v) de sorbitol apresentaram maior produtividade volumétrica quando comparados aos iniciados com 1% (m/v). Constatou-se que a celulose pode ser substituída, também, por uma fonte de carbono insolúvel, de baixo custo e de fácil obtenção, o bagaço de cana de açúcar. Em frascos sob agitação, a atividade de celulases e xilanases em cultivos com bagaço apresentaram atividade similar a cultivos contendo celulose cristalina. / Submitted by Marcelo Teixeira (mvteixeira@ucs.br) on 2014-05-29T19:10:52Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Carla Eliana Todero Ritter.pdf: 1645876 bytes, checksum: 6a9ed7c12fe070ac0185405e87dfc3f6 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-29T19:10:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Carla Eliana Todero Ritter.pdf: 1645876 bytes, checksum: 6a9ed7c12fe070ac0185405e87dfc3f6 (MD5) / Cellulolytic enzymes have many uses, particularly in the food, textile, and paper industries. However, their major potential use is in the hydrolysis of cellulose a component of lignocellulosic residues for ethanol fuel production. Among the cellulase-producing microorganisms, mutants of the Trichoderma genus are the most studied and most widely used in the industry. Penicillium echinulatum mutants are also among those microorganisms currently being studied for cellulase production. The present study provides data on cellulase production by P. echinulatum in submerged culture in flasks under agitation and in stirred tank and internal circulation airlift bioreactors, in the presence of cellulose and sorbitol. Medium composition and supplementation timing of inducers and carbon sources, initially for flasks under agitation, were also studied. Assay conditions showing the best results in flasks were tested in bioreactors with mechanical agitation and airlift. Hydrodynamic conditions, such as flow speed and aeration in airlift bioreactor for cellulase production optimization, as well as medium formulations in bioreactor with mechanical agitation, with oxygen maintained at a minimum 20% saturation level, were studied. Enzymatic analyses of FPA (filter paper activity), β-glucosidase, endogluconase, and xylanase; biomass concentration; carbon source consumption; and pH variation were used as evaluation indicators. Results obtained in flasks under agitation showed that sorbitol might be used as a partial substitute of cellulose, in favor of enzymatic production and cultivation rheology. It was further observed that cellulose supplementation influences the enzymatic production in submerged cultures, and that lactose in association with sorbitol produces higher enzymatic titers. With regard to bioreactors, the best results were obtained with the airlift bioreactor for a medium containing 0.25% (w/v) sorbitol and 0.75% (w/v) cellulose, when compared to the bioreactor with mechanical agitation. Assays with 3-phase supplementation did not show any relevant results with regard to enzymatic production and volumetric productivity. Assays initiated with sorbitol and supplemented with cellulose showed better results when compared to those conducted in the batch-production model. Assays initiated with 0.25% (w/v) sorbitol showed higher volumetric productivity compared to those initiated with 1% (w/v) sorbitol. It was found that cellulose might be replaced by sugar cane bagasse, a low-cost and readily available source of insoluble carbon.
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Vírus que afetam Apis mellifera Linnaeus 1758 (Hymenoptera:Apidae) em apiários de Minas Gerais / Virus that affecting Apis mellifera Linnaeus 1758 (Hymenoptera:Apidae) in apiaries of Minas Gerais

Souza, Amanda Martins da Cruz 19 February 2018 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-08-07T12:47:59Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1005646 bytes, checksum: 4d359018a6d3500032d11c14616f3e03 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-07T12:47:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1005646 bytes, checksum: 4d359018a6d3500032d11c14616f3e03 (MD5) Previous issue date: 2018-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Na abelha Apis mellifera são identificados 24 vírus, que persistem de forma natural nas colônias, em baixos títulos e sem sintomas aparentes. Porém, esta infecção silenciosa, associada a outros tipos de perturbações individuais, pode ser prejudicial e levar à morte de toda a colônia, como relatada no CCD. Vários vírus de abelhas foram descritos em A. mellifera, mas somente alguns são considerados como capazes de causar doenças, assim sendo, estes vírus estudados com mais frequência: Vírus da Paralisia Crônica (CBPV), Vírus da Paralisia Aguda (ABPV), Vírus Deformador da Asa (DWV), Vírus da Realeira Negra (BQCV), Vírus da Cria Ensacada (SBV), Vírus Caxemira (KBV), SBPV (Slow Bee Paralysis Virus), VDV1 (Vírus V. destructor -1) e, mais recentemente, o Vírus Israelense da Paralisia Aguda (IAPV). Baseando-se na importância da apicultura no Brasil, além do valor ecológico das abelhas como polinizadoras, o presente trabalho buscou verificar a ocorrência de vírus que afetam A. mellifera no estado de Minas Gerais, em treze cidades de sete Mesorregiões. As amostras foram coletadas em colônias distintas, em apiários cujo número variou entre 1 e 3 por mesorregião. O RNA total presente em seis abdômens (pool) de operárias por apiário foi extraído e feita a síntese de DNA complementar. O cDNA obtido foi utilizado para a amplificação por reação de polimerização em cadeia (PCR) com primers já previamente publicados. Posteriormente, cada fragmento gerado foi purificado e inserido no vetor pGEM-T Easy para sequenciamento. Neste trabalho pode-se detectar a presença de três tipos virais: ABPV, BQCV e CBPV. Dois na cidade de Passa Quatro no Sul (ABPV e BQCV) e um (CBPV) nas cidades de Viçosa, Caratinga, Divinópolis e Diamantina. Para os vírus DWV, IAPV, KBV, SBV, SBPV e VDV1 não foram obtidos amplicons. A presença do CBPV se dá em maior frequência (30,76%), sendo registrada em quatro cidades mineiras; ABPV e BQCV a 7,69% em uma localidade; das cidades analisadas 61,55% não apresentaram amplicons para os vírus analisados. / Honey bee Apis mellifera can be identified by 24 viruses, which persist naturally in the colonies, low titers and no apparent symptoms. However, this infection, associated with other types of individual disorders, can be harmful and lead to the death of the entire colony, as reported in CCD. Several bee viruses have been described in A. mellifera, but only some are considered to be capable of causing diseases, so these, viruses are most frequently studied: Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV), Acute Bee Paralysis Virus (ABPV), Deformed Wing Virus (DWV), Black Queen Cell Virus (BQCV), Sacbrood Virus (SBV), Kashmir Virus (KBV), SBPV (Slow Bee Paralysis Virus), VDV1 (Vírus V. destructor -1) and more recently, the Israeli Acute Paralysis Virus (IAPV). Based on the importance of beekeeping in Brazil, in addition to the ecological value of bees as pollinators, the present work sought to verify the occurrence of viruses that affect A. mellifera in the state of Minas Gerais, in thirteen cities of seven Meso-regions. The samples were collected in distinct colonies, in apiaries whose number varied between 1 and 3 per mesoregion. The total RNA present in six abdomens (pool) of workers per apiary was extracted and the synthesis of complementary DNA was made. The obtained cDNA was used for amplification by polymerization chain reaction (PCR) with previously published primers. Subsequently, each generated fragment was purified and inserted into the pGEM-T Easy vector for sequencing. In this work we can detect the presence of three viral types: ABPV, BQCV and CBPV. Two in the city of Passa Quatro in the South (ABPV and BQCV) and one (CBPV) in the cities of Viçosa, Caratinga, Divinópolis and Diamantina. For the viruses DWV, IAPV, KBV, SBV, SBPV and VDV1 no amplicons were obtained. The presence of CBPV occurs more frequently (30.76%), being registered in four cities in Minas Gerais; ABPV and BQCV at 7.69% in one locality; of the analyzed cities 61.55% did not present amplicons for the virus analyzed.
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Análise da vacinação BCG segundo a classificação operacional e gênero nos casos novos de hanseníase no município de Ubá/MG, de 2000 a 2016 / Analysis of BCG vaccination according to the operational classification and gender in new cases of leprosy in the municipality of Ubá/MG, from 2000 to 2016

Garcia, Ingrid Rabite 07 February 2018 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-08-07T13:16:41Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 871584 bytes, checksum: c215b1c4d757144719a832c0ea627eb2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-07T13:16:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 871584 bytes, checksum: c215b1c4d757144719a832c0ea627eb2 (MD5) Previous issue date: 2018-02-07 / A hanseníase é uma doença de notificação compulsória que permanece como um problema de saúde pública no Brasil. A Organização Mundial da Saúde (OMS), com intuito de facilitar a classificação da doença para fins de tratamento, adotou a classificação operacional que estabelece os pacientes com até cinco lesões como paucibacilares e aqueles com seis ou mais lesões como multibacilares. A presença da cicatriz de BCG é reconhecida como um fator protetor contra a hanseníase. Alguns estudos demonstram que uma dose adicional de BCG oferece um acréscimo na proteção. Além disso, há estudos em que a BCG proporciona maior proteção contra as formas multibacilares. Diante desse quadro, o presente trabalho tem como objetivo descrever e relacionar as variáveis classificação operacional, vacinação BCG e o gênero dos casos novos de hanseníase ocorridos na comunidade ao redor da Casa de Saúde Padre Damião (CSPD), município de Ubá, no período de 2000 a 2016. Trata-se de um estudo descritivo, retrospectivo, com abordagem quantitativa dos dados e inter-relacional das variáveis. Os dados foram coletados das fichas do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN), contidas nos prontuários dos pacientes, ou por entrevista para observação da cicatriz vacinal de BCG. Foram identificados e analisados 43 casos novos de hanseníase. A análise descritiva das variáveis demonstrou o predomínio do gênero feminino, forma multibacilar e de vacinados entre os casos novos. Ao relacionarmos as variáveis, na distribuição da classificação operacional segundo vacinação ocorreu uma diminuição significativa na porcentagem de casos multibacilares entre os sem cicatriz de BCG (94%) e aqueles com uma ou duas cicatrizes (65%). Quando feita a análise de estratificação por gênero, essa diminuição foi observada entre nenhuma (100%) e uma cicatriz de BCG (58%) nas mulheres. Nos homens, essa diminuição ocorreu entre nenhuma ou uma cicatriz (85%) e aqueles com duas cicatrizes de BCG (0%), sendo todos classificados como paucibacilares. Os achados desse estudo sugerem que a presença da cicatriz de BCG (1 ou 2) possa oferecer maior proteção contra a forma multibacilar e a segunda cicatriz, possa oferecer um acréscimo de proteção nos homens contra essa forma. / Leprosy is a notifiable disease that remains a public health problem in Brazil. The World Health Organization (WHO), in order to facilitate the classification of the disease for treatment purposes, adopted the operational classification that establishes patients with up to five lesions as paucibacillary and those with six or more lesions as multibacillary. The presence of the BCG scar is recognized as a protective factor against leprosy. Some studies have shown that an additional dose of BCG offers an increase in protection. In addition, there are studies in which BCG provides greater protection against multibacillary forms. In view of this situation, the present study aims to describe and relate the variables operational classification, BCG vaccination and the gender of new cases of leprosy occurring in the community around the Padre Damião Health House (CSPD), in the municipality of Ubá, in the 2000 to 2016. It is a descriptive study, retrospective with quantitative data approach and inter-relational variables. The data were collected from the records of the Notification of Injury Information System (SINAN), contained in the patients' medical records, or by interview to observe the BCG vaccine scar. 43 new cases of leprosy were identified and analyzed. The descriptive analysis of the variables showed the predominance of the female gender, multibacillary form and of vaccinated among the new cases. When we related the variables, in the distribution of the operational classification according to vaccination there was a significant decrease in the percentage of multibacillary cases among those without BCG scar (94%) and those with one or two scars (65%). When the gender stratification analysis was performed, this decrease was observed between none (100%) and one BCG scar (58%) in women. In men, this decrease occurred between none or one scar (85%) and those with two BCG scars (0%), all being classified as paucibacillary. The findings of this study suggest that the presence of the BCG scar (1 or 2) may offer greater protection against the multibacillary form and the second scar, may offer an additional protection in men against this form.
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Produção de celulases e xilanases por Penicillium echinulatum em processo submerso utilizando biorreatores com agitação mecânica e airlift de circulação interna

Ritter, Carla Eliana Todero 01 December 2009 (has links)
Complexos celulolíticos possuem aplicações principalmente nas indústrias alimentícia, do vestuário e do papel; entretanto, seu uso de maior potencial é a hidrólise da celulose, componente dos resíduos lignocelulósicos, visando à produção do etanol. Dentre os microorganismos produtores de celulases, destacam-se os mutantes do gênero Trichoderma, que são os mais estudados e utilizados industrialmente. Mutantes de Penicillium echinulatum também estão entre os micro-organismos atualmente estudados para a produção de celulases. Neste trabalho, são apresentados dados de produção de celulases por P. echinulatum em cultivos submersos em frascos agitados e em biorreatores com agitação mecânica e airlift de circulação interna, na presença de celulose e sorbitol. A caracterização do meio e o tempo de adição do indutor e fontes de carbono também foram estudados, inicialmente, em frascos sob agitação recíproca. As condições que apresentaram os melhores resultados em frascos foram testadas em biorreatores com agitação mecânica e airlift. Estudaram-se condições hidrodinâmicas, como velocidade de fluxo e aeração em biorreator airlift para a otimização da produção de celulases, bem como composições de meios em biorreator com agitação mecânica, onde o oxigênio dissolvido foi mantido em níveis mínimos de 20% da saturação. Como indicadores de avaliação, foram realizadas análises enzimáticas de FPA (atividade sobre papel filtro), β-glicosidase, endoglicanase e xilanase; concentração de biomassa; consumo da fonte de carbono e variação do pH. Os resultados obtidos em frascos sob agitação mostraram que sorbitol, ao ser empregado como substituto parcial da celulose, apresenta vantagem na produção enzimática e na reologia do cultivo. Também, constatou-se que o tempo de adição da celulose influencia a produção enzimática em cultivos submersos e que a lactose, associada ao sorbitol, promove maiores títulos enzimáticos. Em relação ao uso dos biorreatores, verificaram-se melhores resultados em airlift para o meio contendo 0,25% (m/v) de sorbitol e 0,75% (m/v) de celulose, quando comparado ao biorreator com agitação mecânica. Ensaios com alimentação em três estágios não apresentaram resultados relevantes quanto à produção enzimática e à produtividade volumétrica. Testes iniciados com sorbitol e alimentados com celulose apresentaram melhores resultados com relação aos realizados em regime de batelada. Ensaios iniciados com 0,25% (m/v) de sorbitol apresentaram maior produtividade volumétrica quando comparados aos iniciados com 1% (m/v). Constatou-se que a celulose pode ser substituída, também, por uma fonte de carbono insolúvel, de baixo custo e de fácil obtenção, o bagaço de cana de açúcar. Em frascos sob agitação, a atividade de celulases e xilanases em cultivos com bagaço apresentaram atividade similar a cultivos contendo celulose cristalina. / Cellulolytic enzymes have many uses, particularly in the food, textile, and paper industries. However, their major potential use is in the hydrolysis of cellulose a component of lignocellulosic residues for ethanol fuel production. Among the cellulase-producing microorganisms, mutants of the Trichoderma genus are the most studied and most widely used in the industry. Penicillium echinulatum mutants are also among those microorganisms currently being studied for cellulase production. The present study provides data on cellulase production by P. echinulatum in submerged culture in flasks under agitation and in stirred tank and internal circulation airlift bioreactors, in the presence of cellulose and sorbitol. Medium composition and supplementation timing of inducers and carbon sources, initially for flasks under agitation, were also studied. Assay conditions showing the best results in flasks were tested in bioreactors with mechanical agitation and airlift. Hydrodynamic conditions, such as flow speed and aeration in airlift bioreactor for cellulase production optimization, as well as medium formulations in bioreactor with mechanical agitation, with oxygen maintained at a minimum 20% saturation level, were studied. Enzymatic analyses of FPA (filter paper activity), β-glucosidase, endogluconase, and xylanase; biomass concentration; carbon source consumption; and pH variation were used as evaluation indicators. Results obtained in flasks under agitation showed that sorbitol might be used as a partial substitute of cellulose, in favor of enzymatic production and cultivation rheology. It was further observed that cellulose supplementation influences the enzymatic production in submerged cultures, and that lactose in association with sorbitol produces higher enzymatic titers. With regard to bioreactors, the best results were obtained with the airlift bioreactor for a medium containing 0.25% (w/v) sorbitol and 0.75% (w/v) cellulose, when compared to the bioreactor with mechanical agitation. Assays with 3-phase supplementation did not show any relevant results with regard to enzymatic production and volumetric productivity. Assays initiated with sorbitol and supplemented with cellulose showed better results when compared to those conducted in the batch-production model. Assays initiated with 0.25% (w/v) sorbitol showed higher volumetric productivity compared to those initiated with 1% (w/v) sorbitol. It was found that cellulose might be replaced by sugar cane bagasse, a low-cost and readily available source of insoluble carbon.
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Utilização de abelhas adultas em análises de citometria de fluxo / Use of adult bees in flow cytometry analyzes

Faustino, Alessandra de Oliveira 20 February 2018 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-09-03T18:45:27Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 521431 bytes, checksum: f1d795099ef7fc1ce72a69d0855ecd37 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-03T18:45:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 521431 bytes, checksum: f1d795099ef7fc1ce72a69d0855ecd37 (MD5) Previous issue date: 2018-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O primeiro trabalho de citometria de fluxo utilizando abelhas da tribo Meliponini, quantificou o genoma de três espécies, as quais apresentaram conteúdo de DNA de 0,43 pg em Scaptotrigona xantotricha, 0,93 pg em Melipona rufiventris e 0,95 pg em Melipona mondury. Posteriormente à determinação do seu conteúdo genômico, S. xantotricha passou a ser utilizada como padrão interno, em todos os estudos de citometria com meliponíneos. Atualmente, valores de apenas 63 espécies de abelhas estão disponíveis, mostrando uma escassez de dados nesse grupo. Uma das razões para esse desprovimento de dados, pode ser devido à dificuldade do acesso as larvas e pupas, que foram as únicas utilizadas, até o momento, nos estudos de quantificação do genoma de abelhas. Sendo assim, a busca pela utilização de material mais acessível, pode ser uma estratégia para que mais espécies sejam analisadas. Portanto, o presente estudo teve como objetivo testar diferentes tampões para a quantificação do conteúdo de DNA nuclear em abelhas adultas. Para a preparação das suspenções nucleares, a serem analisadas no citômetro de fluxo, foram utilizadas abelhas adultas da espécie S. xantotricha e o padrão interno Drosophila melanogaster, juntamente com os tampões LB01, Galbraith, MgSO 4 e TRIS. Os histogramas obtidos, apresentaram bons níveis de resolução e coeficiente de variação satisfatórios, com percentuais menores do que 5%, variando de 2,24% com o tampão Galbraith a 3,34% com o tampão LB01. O tamanho do genoma de adultos de S. xantotricha apresentou valores muito próximos ou idênticos aos dados disponíveis na literatura para as larvas e pupas dessa mesma espécie. Da mesma forma, a razão experimental não apresentou grandes variações em relação à teórica (2,39), sendo o tampão MgSO 4 com razão de 2,34 o mais distante. Em relação à porcentagem de debri celular, as amostras que utilizaram os tampões Galbraith, MgSO 4 e TRIS, mostraram-se mais limpas em relação as que utilizaram o tampão LB01. Por fim, os resultados dos parâmetros analisados, no mesmo dia da extração e 24 após extração, foram muito semelhantes. Mediante o exposto, podemos concluir que a utilização de abelhas adultas para a determinação do conteúdo de DNA é tão eficaz quanto ao uso de larvas e pupas, visto que seus resultados não apresentaram diferenças estatisticamente significantes quando comparados com os dados da literatura. / The first work of flow cytometry using bees from Meliponini tribe quantified the genome of three species, to which they presented DNA content of 0.43 pg in Scaptotrigona xantotricha, 0.93 pg in Melipona rufiventris and 0.95 pg in Melipona mondury. After the determination of its genomic content, S. xantotricha became to be was used as the internal standard in all the studies of meliponine cytometry. Currently, values of just 63 species of bees are available, showing a scarcity of data in this group. One of the reasons for this data shortage may be due to the difficulty of access the larvae and pupae, which were the only ones used, until the moment, in the studies of quantifying the genome of bees. Thus, the search for the use of more accessible material may be a strategy for more species to be analyzed. Therefore, the present study aimed to test different buffers for the quantification of nuclear DNA content in adult bees. For the preparation of the nuclear suspensions, to be analyzed in the flow cytometer, adult bees of the species S. xantotricha and the internal standard Drosophila melanogaster, along with LB01, Galbraith, MgSO4 and TRIS buffers. The histograms obtained had good resolution levels and coefficient of variation of satisfactory, with percentages lower than 5%, ranging from 2.24% with Galbraith buffer to 3.34% with LBO1 buffer. The size of the genome obtained with the use of adults of S. xantotricha values very close or identical to the available data in the literature for the larvae and pupae of the same species. Similarly, the experimental coefficient did not show great variations in relation to the theoretical one (2.39), and the MgSO4 buffer with a ratio of 2.34 was the most distant. In relation to the percentage of debri cell, the samples using the Galbraith, MgSO4 and TRIS buffers were cleaner compared to those using the LB01 buffer. Finally, the results of analyzed parameter in the same day of extraction and 24 hours after extraction were very similar. In front of this fact, we can conclude that the utilization of adult bee for the determination of DNA content is so effective as to use of larvae and pupae, since its result not showed significant statistical differences when compared with the literature data.
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Farmacologia da Cecropia sciadophylla mart. nativa da Amazônia: efeitos antiúlcera gástrica e na musculatura esquelética correlacionados com a atividade da h+, k+-atpase e da ca+2-atpase.

Maciel, Lucinei Alves 11 November 2010 (has links)
Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-07T20:35:08Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lucinei Alves Maciel.pdf: 1863455 bytes, checksum: a1a109eb4e2da8cb6f164b17e8b12813 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-08T20:09:47Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lucinei Alves Maciel.pdf: 1863455 bytes, checksum: a1a109eb4e2da8cb6f164b17e8b12813 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-08T20:16:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lucinei Alves Maciel.pdf: 1863455 bytes, checksum: a1a109eb4e2da8cb6f164b17e8b12813 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-08T20:16:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Lucinei Alves Maciel.pdf: 1863455 bytes, checksum: a1a109eb4e2da8cb6f164b17e8b12813 (MD5) Previous issue date: 2010-11-11 / Não Informada / Species of the genus Cecropia known as embaúba, are used in the folk medicine to treat hypertension, bronchitis, gastric ulcer, diabetes, arthritis and other regional endemic affections. Several authors have mentioned the anti-malarial activity of some species. With the aim to compare the activity of an Amazonian species without previous pharmacological study, the present work describes the Cecropia sciadophylla Mart, its collect and extraction, the chemical standardization criteria and the purification of the leaves aqueous extract (AE). The obtention of the semi-purified buthanolic fraction (BuF) and the pharmacological effects of these extracts, emphasizing the actions in the central nervous system, the antinociceptive effect, the action in the arterial blood pressure, the muscular action and the gastrointestinal activity are also described in this work. Partition of the aqueous extract of the leaves 2,5% (AE) with n-buthanol originated the BuF, more stable, more concentrated and more active, with the same chromatographic fingerprint of AE in the HPLC. For future molecular studies, 26 fractions with well defined retention times were isolated from BuF; some of them were already identified: catechin, quercetin-3-O-β-glucopyranoside and 2" -O-ramnosilvitexin. The general pharmacological screening of the extracts in mice showed hyperactivity and increased motricity, not described in other Cecropia species, but the anti-depressive effect was common to the others. The antinociceptive and the anti-inflammatory effects were poorly consistent, perhaps by the central stimulating activity. The intravenous injection of BuF produced hypotension without interfering with the noradrenalin action or with the cardiac activity. In vitro, the BuF relaxed the adrenergic tonus only in the intact endothelium aortic rings, indicating vasodilatory action dependent on the NO synthesis. Previous treatment of rats with the BuF protected the gastric mucosal against cold stress- and ethanol-induced ulcers; this effect was correlated with the reduction of the gastric secretion acidity and the in vitro inhibition of the H+, K+-ATPase activity. In rodents isolated diaphragm, the BuF potentiated the direct elicited twitches of the muscle fiber; this effect was correlated to the inhibition of the Ca+2-ATPase activity, but not by the acetylcholinesterase inhibition. / Espécies do gênero Cecropia conhecidas como embaúba, são usadas na medicina popular para pressão alta, bronquite, úlcera, diabetes, artrite e outras afecções endêmicas regionais. Alguns autores mencionam atividade antimalárica de algumas espécies. Com o objetivo de comparar a atividade de uma espécie amazônica sem estudo farmacológico anterior, o presente trabalho descreve a Cecropia sciadophylla Mart, sua coleta e extração, o critério de padronização química e purificação do extrato aquoso (EA) das folhas. A obtenção da fração butanólica (FBut) semi-purificada e a farmacologia desses extratos, enfatizando as ações no sistema nervoso central, a ação antinociceptiva, a ação pressórica, a ação muscular e a atividade gastrintestinal também são descritos neste trabalho. O chá das folhas a 2,5% (EA) particionado com n-butanol originou a FBut mais estável, concentrada e ativa, conservando o mesmo perfil cromatográfico em CLAE. Da FBut foram isoladas 26 frações com tempos de retenção bem definidos que foram preparadas para estudos moleculares futuros. Alguns compostos já foram identificados: catequina, quercetina-3-O-β-glucopiranosideo e 2"-Oramnosilvitexina. A triagem farmacológica geral dos extratos em camundongos evidenciou hiperatividade e aumento da motricidade, não descritas com outras espécies de Cecropia, mas o efeito tipo-antidepressivo detectado foi comum às demais. As atividades antinociceptiva e anti-inflamatória foram pouco consistentes, talvez em vista da ação estimulante central. A injeção endovenosa de FBut produziu hipotensão sem interferir com a ação da noradrenalina ou com a atividade cardíaca. In vitro a FBut relaxou o tônus induzido por noradrenalina apenas na aorta com endotélio íntegro, indicando ação vasodilatadora dependente da síntese de óxido nítrico. O tratamento prévio de ratos com FBut protegeu a mucosa gástrica contra úlceras por stress e as produzidas por etanol; este efeito foi correlacionado com diminuição da acidez livre da secreção gástrica e com inibição in vitro da atividade da H+, K+-ATPase da mucosa gástrica de suíno. No músculo diafragma de roedores, a FBut potenciou a contração ao estímulo direto da fibra muscular; este efeito foi correlacionado com a inibição da Ca+2- ATPase extraída de músculo esquelético de coelho, mas não à inibição da acetilcolinesterase.
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O efeito da umidade e de fatores edáficos na dinâmica de infecção e na manipulação comportamental de formigas infectadas por fungos entomopatogênicos em uma floresta de terra firme da Amazônia Central

Cardoso Neto, José Aragão 25 July 2016 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-01-26T13:44:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - José A. Cardoso Neto.pdf: 1328784 bytes, checksum: 4ff955e231389d71b7fd2c667f905152 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-01-26T13:45:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - José A. Cardoso Neto.pdf: 1328784 bytes, checksum: 4ff955e231389d71b7fd2c667f905152 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-01-26T13:45:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - José A. Cardoso Neto.pdf: 1328784 bytes, checksum: 4ff955e231389d71b7fd2c667f905152 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-01-26T13:45:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - José A. Cardoso Neto.pdf: 1328784 bytes, checksum: 4ff955e231389d71b7fd2c667f905152 (MD5) Previous issue date: 2016-07-25 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The fungi of the genus Ophiocordyceps parasite several species of ants, manipulating the behavior (extended phenotype) of their hosts. The objective of the present study was to evaluate the effect of air humidity and HAND on the occurrence and expression of the extended phenotype of ants parasitized by the most abundant entomopathogenic fungi Ophiocordyceps unilateralis sl, O. kniphofioides Sl And O. australis s.l. Fifteen 250 - m - long plots were monitored seven times over 14 months, actively searching for corpses of parasitic ants biting leaf tissue, buried in mosses of trees, hugged in sticks, or on the ground. There were 4,277 parasitized ants, distributed in 26 species and 4 morphotypes. The fungus complex O. unilateralis s.l. Was the most abundant, with 3,811 ants parasitized and the ant species Camponotus atriceps was the most abundant, representing 2,599 parasitized ants. The occurrence and extended phenotype of the species of ants parasitized by O. australis s.l. And O. kniphofioides s.l. Had no relation to air humidity and HAND. The species of C. atriceps and C. bispinosus parasitized by O. unilateralis s.l. Had more parasitized individuals when the air humidity was higher, and these ants die at higher altitudes after periods of higher air humidity. Conversely, the abundance and height of C. senex parasitized was higher when the HAND was consequently drier. These results suggest that air humidity and HAND can control both the occurrence and expression of the phenotype of some parasites. In addition, the response to the same environmental gradient depends on the parasite species in question. / Os fungos do gênero Ophiocordyceps parasitam diversas espécies de formigas, manipulando o comportamento (fenótipo estendido) de seus hospedeiros. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da umidade do ar e do HAND (distância vertical da drenagem mais próxima), na ocorrência e expressão do fenótipo estendido das formigas parasitadas pelos complexos mais abundantes de fungos entomopatogênicos, Ophiocordyceps unilateralis s.l., O. kniphofioides s.l. e O. australis s.l. Foram monitoradas 15 parcelas de 250 m de comprimento por sete vezes ao longo de 14 meses, buscando ativamente os cadáveres de formigas parasitadas mordendo tecido foliar, enterradas em musgos de árvores, abraçadas em gravetos, ou sobre o solo. Foram encontradas 4.277 formigas parasitadas, distribuídas em 26 espécies e 4 morfotipos. O complexo de fungo O. unilateralis s.l. foi o mais abundante, com 3.811 formigas parasitadas e a espécie de formiga Camponotus atriceps foi a mais abundante, representando 2.599 formigas parasitadas. A ocorrência e o fenótipo estendido das espécies de formigas parasitadas por O. australis s.l. e O. kniphofioides s.l. não tiveram relação com a umidade do ar e HAND. Já as espécies de formigas C. atriceps e C. bispinosus parasitadas por O. unilateralis s.l. tiveram mais indivíduos parasitados quando a umidade do ar era maior, além dessas formigas morrem em alturas maiores após períodos de maior umidade do ar. Contrariamente, a abundância e a altura de C. senex parasitados foi maior quando o HAND era elevado, consequentemente, mais secos. Esses resultados sugerem que a umidade do ar e o HAND podem controlar tanto a ocorrência como a expressão do fenótipo de alguns parasitas. Além disso, a resposta ao mesmo gradiente ambiental depende da espécie de parasita em questão.
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Atividade diária e pesca do camarão-da-amazônia Macrobrachium amazonicum (HELLER, 1862), no município de Itacoatiara-AM

Fernandes, Ellan Rodrigo Monteiro Paes 29 July 2016 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-06T18:38:09Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ellan R. M. P. Fernandes.pdf: 1918107 bytes, checksum: e40b31b039bd79b7c501e51d879121dc (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-06T18:53:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ellan R. M. P. Fernandes.pdf: 1918107 bytes, checksum: e40b31b039bd79b7c501e51d879121dc (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-02-06T18:53:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ellan R. M. P. Fernandes.pdf: 1918107 bytes, checksum: e40b31b039bd79b7c501e51d879121dc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-06T18:53:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Ellan R. M. P. Fernandes.pdf: 1918107 bytes, checksum: e40b31b039bd79b7c501e51d879121dc (MD5) Previous issue date: 2016-07-29 / Agência de Fomento não informada / With wide distribution in various states of Brazil, the species of Macrobrachium amazonicum prawn has aroused interest in aquaculture. Behavior information and standard description of activities M. amazonicum are important to optimize the management in captivity of this species. The aim of this study was to describe the behavioral daily activities and selection of M. amazonicum substrate. The animals were kept in 30 L tanks with continuous aeration, weeds in the water column and bottom divided into 50% gravel and 50% sand. A total of 132 prawns (12 prawns reserves), divided into: Experiment 1 (T1: adults and juveniles; T2: youth; T3: adults) and experiment 2 with just 1 treatment (adult prawn with simulation of the flood pulse), both treatments were divided into three replicates of 10 shrimp per tank were observed for 48 hours at intervals of one hour in experiment 1 (T1, T2 and T3), and for 40 days in experiment 2 every 12 hours with the frequency register the activities and location on the substrate. For the analysis of behavioral data in all treatments was carried out principal component analysis (PCA) for "bootstrap" using R software, comparing the frequencies of the day and night and to compare the selection of substrate M. amazonicum was used chi-test square using PAST 2:16 software (P <0.05) in experiment 1, and principal component analysis (PCA) in experiment 2. Significant difference in behavioral activity M. amazonicum was recorded between the periods of day and night, and also before simulated flood pulse. In the experiments, the shrimp were most active at night, and environmental exploitation the most frequent behavior. In the daytime, the most common behavior was feeding. The selection of the substrate showed difference between periods in all experimental treatments 1 and experiment 2 observed difference in substrate selection before flood pulse. In the daytime, there was a greater preference for gravel substrate. At night the water column showed a higher occurrence of M. amazonicum. The behavioral pattern of activity exhibited by M. amazonicum shows a species with predominantly nocturnal exploratory habit. The presence of CG1 males and also reducing the space significantly increased the frequency of agonistic behavior in M. amazonicum. / Com ampla distribuição em diversos estados do Brasil, a espécie de camarão Macrobrachium amazonicum vem despertando interesse na aquicultura. Informações de comportamento e descrição do padrão de atividades de M. amazonicum são importantes para otimizar o manejo em cativeiro dessa espécie. O objetivo do presente estudo foi descrever as atividades diárias comportamentais e seleção de substrato de M. amazonicum. Os animais foram mantidos em aquários de 30 L com aeração contínua, macrófitas na coluna d’água e fundo divido em 50% de cascalho e 50% de areia. Um total de 132 camarões (12 camarões reservas), divididos em: experimento 1 (T1: adultos e juvenis; T2: juvenis; T3: adultos) e experimento 2 com apenas 1 tratamento (camarões adultos com simulação do pulso de inundação), ambos tratamentos foram divididos em 3 réplicas com 10 camarões por aquário, foram observados durante 48 horas em intervalos de uma hora no experimento 1 (T1, T2 e T3), e por 40 dias no experimento 2 em intervalos de 12 horas, com registro da frequência das atividades e localização no substrato. Para a análise dos dados comportamentais em todos os tratamentos foi realizada análise de componentes principais (PCA) por “bootstrap” utilizando software R, comparando as frequências do dia e noite e para comparar a seleção do substrato de M. amazonicum foi utilizado teste Qui-quadrado utilizando software PAST 2.16 (P<0,05), no experimento 1, e análise de componentes principais (PCA) no experimento 2. Diferença significativa nas atividades comportamentais de M. amazonicum foi registrada entre os períodos de dia e noite, e também perante pulso de inundação simulado. Nos experimentos, os camarões estiveram mais ativos no período noturno, sendo a exploração do ambiente o comportamento mais frequente. No diurno, o comportamento mais comum foi alimentação. A seleção do substrato apresentou diferença entre períodos em todos os tratamentos do experimento 1 e no experimento 2 observou diferença na seleção de substrato perante pulso de inundação. No diurno, houve maior preferência pelo substrato de cascalho. No noturno a coluna d’água apresentou maior ocorrência de M. amazonicum. O padrão de atividade comportamental exibido por M. amazonicum evidencia uma espécie com hábito exploratório predominantemente noturno. A presença de machos CG1 e também a redução do espaço aumentou significativamente a frequência do comportamento agonístico em M. amazonicum.
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Utilização de peptídeos quiméricos das proteínas de envelope (E) , não estrutural 1 (NS1) e não estrutural 3 (NS3) para produção de insumos diagnósticos da dengue

Rios, Katiúscia Alexandre 27 February 2014 (has links)
Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-03T10:49:31Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Katiúscia A. Rios.pdf: 5557349 bytes, checksum: 1964fe97b319914d498f0df13ea42974 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-03T11:00:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Katiúscia A. Rios.pdf: 5557349 bytes, checksum: 1964fe97b319914d498f0df13ea42974 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-03-03T11:00:33Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Katiúscia A. Rios.pdf: 5557349 bytes, checksum: 1964fe97b319914d498f0df13ea42974 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T11:00:33Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Katiúscia A. Rios.pdf: 5557349 bytes, checksum: 1964fe97b319914d498f0df13ea42974 (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Dengue infection has become a public health problem in tropical and sub-tropical areas. It is a viral disease transmitted by arthropods with high mortality rates. Its clinical diagnosis requires laboratory confirmation because several other conditions can also cause similar symptoms with acute fevers as well as the primary use antibodies or antigens for detection of DENV. The continued development of diagnostic tests that are cheap, sensitive, specific, easy to perform, and that are capable of giving early diagnosis of the dengue virus infection is still a needed. Using bioinformatics, we mapped peptides of Envelope protein (E), Nonstructural 1 and 2 which have antiginity, hidrofility and probality to apper on the surface. The first peptide, with molecular weight of the 17KDa, was called E/ENS3 and corresponds to two Envelope protein (E) sequences and a Nonstructural 3 sequence. The second peptide, with molecular weight of the 15Kda, was called ENS1/3 and it corresponds to a Envelope protein (E) sequence, a Nonstructural 1 sequence and Nonstructural 3 sequence. The peptides were expressed in prokaryotic sistem, purified and used in ELISA (Enzyme-Linked Assay Imunoabsorvente). Using Indirect ELISA in the IgM and IgG antibody detection previously characterized, we obtained as results: (1) IgG research using E/ENS3 and ENS1/3 peptides, sensibility was 65% and the specificity was 91,7% and (2) IgM research, sensibility was 75,7% and and the specificity was 91,8%. These results indicate that use of both E/ENS3 and ENS1/3 peptides may be a alternative to the serological diagnosis of dengue. / A infecção pelo vírus dengue continua sendo um grande problema de saúde pública em regiões tropicais e subtropicais do mundo, sendo a principal doença viral transmitida por artrópodes, com alta morbidade e mortalidade. O diagnóstico clínico da dengue requer confirmação laboratorial devido à semelhança dos sintomas com uma série de outras febres agudas e para detecção de infecções virais primárias ou secundárias. O desenvolvimento de testes baratos, sensíveis, específicos e de fácil execução, que sejam capazes de proporcionar diagnóstico precoce da infecção pelo vírus da dengue, é ainda uma necessidade. Neste trabalho mapeamos, por ferramentas de bioinformática, peptídeos das proteínas de Envelope (E), Não Estrutural 1 e 2 que apresentasse como características: elevada antigenicidade, hidrofilicidade e probabilidade de se apresentar na superfície. O primeiro peptídeo, com peso molecular de 17KDa, foi denominado E/ENS3 e corresponde a duas sequências da proteína de Envelope (E) e uma sequência da Não Estrutural 3. O segundo peptídeo, com peso molecular de 15Kda, foi denominado ENS1/3 e corresponde a uma sequência da proteína de Envelope (E), uma sequência da Não Estrutural 1 e uma sequência da Não Estrutural 3. Os peptídeos foram expressos em sistemas em sistema procarioto, purificados e utilizados em teste de ELISA (Enzyme-Linked Assay Imunoabsorvente). Foram realizadas a detecção de anticorpos IgM e IgG de amostras de laboratório, previamente caracterizadas, através de ELISA Indireto e obteve-se os seguintes resultados: (1) na pesquisa de IgG usando os peptídeos E/ENS3 e ENS1/3, a sensibilidade foi de 65% e a especificidade foi de 91,7% e (2) na pesquisa de IgM a sensibilidade foi de 75,7% e especificidade foi de 91,8%. Estes resultados indicam que a utilização dos peptídeos E/ENS3 e ENS1/3 podem ser uma alternativa para o diagnóstico sorológico da dengue

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