Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-12T15:27:19Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-12T15:27:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-12T15:27:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-06-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The increase in world cheese production, the scarcity of animal rennet, associated with the rejection of genetically modified proteases, encourages the search for new sources of milkclotting enzymes. Among fungi, edible mushrooms have stood out as alternative sources of peptidases that can be used as milk-clotting. This research aimed to evaluate the synthesis of proteases by six edible mushrooms from DPUA Culture Collection and select a milk-clotting producer species with physicochemical characteristics for cheese production. The submerged fermentation was carried out in GYP medium (glucose, yeast extract and peptone) with 0.5% (w/v) of gelatine. The edible mushroom that produced proteases with higher coagulant ratio in the liquid medium was cultivated in Amazon agroindustrial wastes as substrate: angelim sawdust, cupuaçu, exocarp of tucumã, banana leaf and açai seeds, supplemented with rice bran. The proteolytic activity was determined using 1% (w/v) of azocasein as substrate and the determinination of milk-clotting activity was used 10% (w/v) of skimmed milk solution as substrate. Some parameters were used to evaluate the influence of milk-clotting enzymes production (pH of the culture medium, fermentation time, size and age of the inoculum). The enzymes were characterized according to optimums pH and temperature, pH and temperature stabilities, and effect of metallic ions and inhibitors. The cytotoxic effect of the selected mushroom crude extract was evaluated in human MRC-5 fibroblast. The analysis of centesimal and microbiological composition was determined in the elaborated cheese. In submerged fermentation conditions, Pleurotus albidus was the best protease producer (34.00 U/mL) and the synthesis of theses enzymes were stimulated by culture age (10 days) e inoculum volume [5% (p/v)]. The enzymes showed optimum activities at pH 5 and 60°C, with stabilies at pH 5 to 8 and 30°C to 60°C, being classified as cysteine and serine proteases. The milk-clotting enzymes from Pleurotus albidus expressed the highest coagulant ratio (21.60) with maximum activity at 60 °C and pH 6. Iodoacetic acid was the inhibitor of higher action in the proteolytic activity suggesting the presence of cysteine proteases. Pleurotus albidus milk-clotting enzymes showed no toxicity against human fibroblasts (MRC5). In the solid fermentation, Pleurotus albidus presented high enzyme production in the mixture composed by açai seeds and rice bran (90:10, w/w). The milk-clotting enzymes demonstrated coagulant ratio of 14.58, abundant whey formation and strong coagulation in milk solution. The best conditions to milk-clotting enzymes production were: inoculum with 10 days of age, culture medium at pH 6 and inoculum size of 2.5% (p/v). The enzymes exhibited maximum catalytic activity at pH 5 and 55 ° C with stability until 45°C. They were completely inhibited by iodoacetic acid. The cheese produced with Pleurotus albidus milk-clotting enzymes as coagulant agent demonstrated contents of moisture, lipid and protein of 55%, 20% and 18%, respectively. The microbiological analysis showed that the cheese was under the standards required by Brazilian legislation. Pleurotus albidus is a potential source of coagulant that can be applied in dairy industry, especially in the manufacture of cheese. / O aumento da produção mundial de queijos, a escassez do coalho animal e a rejeição de proteases geneticamente modificadas, incentiva a busca por novas fontes de coagulantes do leite. Dentre os fungos, os cogumelos têm se destacado como fonte alternativa de peptidases coagulantes para aplicação na indústria de laticínios. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar a síntese de proteases por seis cogumelos do acervo da Coleção de Culturas DPUA para selecionar uma espécie produtora de coagulante com características físico-químicas para elaboração de queijo. A fermentação em meio líquido foi realizada em GYP [(20 g de glicose, 5 g de extrato de levedura, 15 g de peptona/1000 mL de água)], com 0,5 % de gelatina (p/v). O macrofungo produtor de proteases com elevada razão coagulante, em meio líquido, foi cultivado em resíduos lignocelulósicos amazônicos: serragem de angelim, exocarpos de cupuaçu e tucumã, engaço de banana e semente de açaí, suplementados com farelo de arroz. As atividades proteolítica e coagulante foram determinadas utilizando como substratos azocaseína 1% (p/v) e leite desnatado em pó a 10% (p/v), respectivamente. Os parâmetros que influenciam a produção de coagulantes (pH do meio de cultivo, tempo de fermentação, tamanho e idade do inóculo) foram avaliados. O coagulante foi caracterizado quanto ao pH e temperatura ótimos, estabilidade ao pH e à temperatura, e efeito de íons metálicos e inibidores. A citotoxicidade do coagulante foi avaliada em fibroblastos humanos MRC-5. No queijo elaborado com o coagulante foi determinada a composição centesimal e a microbiológica. Na fermentação submersa, Pleurotus albidus foi o produtor significativo de proteases (34,00 U/mL) e a síntese dessas enzimas foi estimulada pela idade (10 dias) e volume do inóculo (5%, p/v). As proteases mostraram atividade ótima em pH 5 a 60°C, estabilidade em pH (5-8), temperatura de 30°C até 60°C, sendo classificadas como cisteíno e serinoproteases. O coagulante de Pleurotus albidus expressou razão coagulante de 21,60 com máxima atividade a 60 °C, pH 6. Ácido iodoacético inibiu significativamente a atividade coagulante, sugerindo maior quantitativo de cisteínoproteases. As enzimas de Pleurotus albidus não apresentaram toxicidade contra fibroblastos humanos (MRC5). Em matriz sólida, Pleurotus albidus cultivado em semente de açaí e farelo de arroz (90:10, p/p) produziu protease com elevada razão coagulante (14,58), formação de soro abundante e forte coagulação. As condições ideais para produção do coagulante foram: inóculo (10 dias de idade), meio de cultivo pH 6, tamanho do inóculo (2,5%, p/v) e idade do inóculo 10 dias. O coagulante exibiu máxima atividade em pH 5, a 55 °C, com estabilidade até 45 °C, sendo inibido por ácido iodoacético. O quejo elaborado apresentou umidade (55%), lipídios (20%), proteínas (18%) e atendeu aos padrões microbiológicos exigidos pela legislação brasileira. Pleurotus albidus é uma fonte de coagulante que pode ser aplicada na indústria de laticinios, em especial na fabricação de queijo.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-26T13:15:00Z No. of bitstreams: 2 Tese - Kayena Delaix Zaqueo.pdf: 7739033 bytes, checksum: 806f81f900a0ed32e6a2052560d17a5f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-26T13:15:18Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Kayena Delaix Zaqueo.pdf: 7739033 bytes, checksum: 806f81f900a0ed32e6a2052560d17a5f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-26T13:15:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Kayena Delaix Zaqueo.pdf: 7739033 bytes, checksum: 806f81f900a0ed32e6a2052560d17a5f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Snake venoms are formed by organic and inorganic compounds and result in a complex product of biological nature which present as main objectives the detention, death and the promotion of initial digestion of its prey. In addition, presents a vast potential for exploration of molecules with pharmaceutical applications. Among organic compounds protease should be highlighted due its ability to cause changes on hemostatic system. Snake venoms serine proteases (SVSPs) are a class of proteases that act on different factors of the coagulation cascade. One SVSPs class is described as thrombin-like (SVTLEs) by mimicking some thrombin activities and displays coagulant ability in vitro through the degradation of fibrinogen chains α and/or β. The objectives were (i) to characterize structurally BpirSP-39 previously isolated from Bothrops pirajai venom and (ii) to isolate and characterize the first serine protease (SP) of B. brazili. Studies of this magnitude are justified because they can provide important information on the involvement of proteins during envenoming, which can contribute to a better understanding of the mechanisms of action of these enzymes. Primary and tertiary structures model of both isolated SPs were elucidated. BpirSP-39 presented 224 amino acids and has high identity when compared to other SVSPs. BbrzSP-32 was obtained from B. brazili venom after two chromatographic steps (affinity and reverse phase) and its primary structure showed 240 amino acid residues. Both SPs characterized are enzymes which may take the SP’s structure of Agkistrodon halys (PDB ID: 4E7N), an enzyme used as a model for molecular modeling. The enzymes are glycoproteins globular and monomeric with two α-helices and two barrels formed by sheet-β. BbrzSP- 32 showed 36 kDa of relative molecular mass and its absolute mass was confirmed by mass spectrometry as 32,520 Da. It present 79.48% identity when compared to other SVSPs and was able to degrade the α-chain of fibrinogen, in vitro models, and is considered a SVTLE-A. It showed a dose-dependent activity in the process of degradation of fibrin networks demonstrating greater specificity for this activity when compared to its thrombolytic action. BbrzSP-32 demonstrated proteolysis activity on gelatin and chromogenic substrates for serine proteases and thrombin-like enzymes (S- 2288 and S-2238 respectively), besides having coagulant activity on human plasma. 13 After pre-incubation with PMSF and benzamidine the coagulants and proteolytic activities on S-2288 and S-2238 substrate were reduced. BbrzSP-32 shows stability against pH and temperature variations, demonstrating optimum activity between 30 and 40 °C and in the pH range 7.5 to 8.5. The enzyme does not induce or interferes with the clotting washed platelets. When incubated with parasites Trypanosoma cruzi or Leishmania infantum, promastigotes and the epimastigote forms, respectively, and S. epidermidis (gram positive-bacteria), the enzyme presented to cytotoxic on microorganisms, furthermore, was able to reduce the biofilm formation by the bacteria species. Both SPs present potential biotechnological. / Os venenos de serpentes são constituídos por compostos orgânicos e inorgânicos, resultando em um produto biológico eficiente e de natureza complexa, que tem como principais objetivos a imobilização, morte e a promoção da digestão inicial das presas. Além disso, apresentam um enorme potencial para prospecção de moléculas com aplicação farmacológica. Dentre os compostos orgânicos destacam-se as proteínas, principalmente as proteases, pois apresentam capacidade em alterar o sistema hemostático. As serinoproteases dos venenos de serpentes (SVSPs) pertencem à classe de proteases que agem sobre diferentes fatores da cascata de coagulação. Uma das classes de SVSPs é descrita como trombina-símile (SVTLEs) por mimetizar algumas atividades da trombina, exibindo capacidade coagulante in vitro por intermédio da degradação das cadeias α e/ou β do fibrinogênio. Os objetivos do trabalho foram (i) caracterizar estruturalmente a BpirSP-39 isolada previamente do veneno de Bothrops pirajai e (ii) isolar e caracterizar a primeira serinoprotease (SP) do veneno de B. brazili. Estudos dessa magnitude justificam-se, pois podem trazer importantes informações sobre a participação das proteínas durante o envenenamento, podendo auxiliar no melhor conhecimento sobre os mecanismos de ações destas enzimas. As estruturas primárias, bem como, os modelos tridimensionais de ambas SPs isoladas foram elucidados. A BpirSP-39 possui 224 aminoácidos e apresenta elevada identidade com outras SVSPs. A BbrzSP-32 foi obtida do veneno de B. brazili após duas etapas cromatográficas (afinidade e fase reversa) e sua estrutura primária apresentou 240 resíduos de aminoácidos. Ambas as enzimas caracterizadas podem assumir a estrutura da SP de Agkistrodon halys (PDB ID: 4E7N), proteína utilizada como modelo para a modelagem molecular, sendo glicoproteínas monoméricas globulares com duas α- hélices e dois barris formados por folhas-β. Com relação à BbrzSP-32, por intermédio de eletroforese foi obtida a massa molecular relativa (36 kDa), sendo sua massa absoluta confirmada por espectrometria de massa como 32.520 Da. A BbrzSP-32 possui identidade de até 79,48% quando comparada a outras SVSPs e foi capaz de, em modelos in vitro, degradar a cadeia α do fibrinogênio, sendo considerada uma SVTLE11 A. Possui atividade dose dependente no processo de degradação de redes de fibrina, demonstrando maior especificidade por essa atividade quando comparada à sua ação trombolítica. Apresenta atividade de proteólise sobre gelatina e substratos cromogênicos, para serinoproteases e enzimas trombina-símile (S-2288 e S-2238, respectivamente), além de possuir atividade coagulante sobre o plasma humano. As atividades de proteólise sobre os substratos S-2288 e S-2238, bem como, coagulantes, foram reduzidas por PMSF e benzamidina e, em menor proporção por EDTA. A BbrzSP-32 apresenta relativa estabilidade frente a variações de pH e temperatura, demonstrando maiores atividades entre 30 e 40 ºC e, em intervalo de pH 7,5 à 8,5. A enzima não induz ou interfere na coagulação de plaquetas lavadas. Quando incubada com os parasitos Trypanosoma cruzi e Leishmania infantum, nas formas epimastigota e promastigota, respectivamente, e bactérias gram-positiva da espécie Staphylococcus epidermidis, apresentou-se citotóxica sobre os microrganismos, além disso, foi capaz de reduzir o biofilme formado pela espécie de bactéria. Ambas SPs apresentam potenciais biotecnológicos.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-26T14:57:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Aurora Del Carmen R. Soria.pdf: 1359045 bytes, checksum: 15293f7897fb65bcb5cac643cf5347fb (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-09-26T14:57:55Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Aurora Del Carmen R. Soria.pdf: 1359045 bytes, checksum: 15293f7897fb65bcb5cac643cf5347fb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-26T14:57:55Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Aurora Del Carmen R. Soria.pdf: 1359045 bytes, checksum: 15293f7897fb65bcb5cac643cf5347fb (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Tuberculosis demands today great sanitary importance due to it’s high prevalence and lethality. It possesses antimicrobial resistance and hits vulnerable populational groups. The Cytomegalovirus (CMV) and the Epstein-Barr virus (EBV), after initial exposure, are capable of establishing latency in the tissues, causing modulatory effects on the immune system, allowing protection against intercurrent infections, but enabling cancer and autoimmunity in individuals with a favorable genetic backround. This work is a controlled case study aiming to verify if the viral co-infection by EBV and CMV have any influence on the onset of Tuberculosis (TB). IgG and IgM serology were carried out for EBV and CMV, also viral genome research through the Polymerase Chain Reaction technique in real time on the plasma of TB patients, and controls (subjects that had interdomiciiary contact with index cases of TB). 68 patients participated, ages ranging from 18 to 36 years and 56 paired controls. It was observed that 100% of cases and controls had positive IgG for EBV; and that 100% of cases and 96,4% of controls were IgG positive for CMV. Therefore, in that small transversal sampling the high prevalence of infection by EBV and CMV was confirmed, but not an association between the infection/latency of the viruses and the occurrence of TB. Low presence of the viral genome on the plasma was verified: 7 occurrences in the cases (10,3%) and 9 in the controls (16,1%). Despite the numerical difference, maybe highliting a tendency, there was no statistical significance. It is important that this study continues, in this way, in a longitudinal cohort of exposed individuals (home infected), with higher “n” sampling, and a smaller populational age range, that houses more prevalence of seronegatives exposed to EBV and CMV, allowing observation of the contrast with seropositives. / A tuberculose se investe na atualidade de grande importância sanitária devido a sua alta prevalência e letalidade. Possui resistência e acomete grupos populacionais vulneráveis. O citomegalovírus (CMV) e o vírus Epstein Barr (EBV), após a aquisição inicial, são capazes de estabelecer latência nos tecidos, provocando efeitos modulatórios no sistema imune, podendo proteger de infecções intercorrentes, mas favorecendo o câncer e a autoimunidade em indivíduos com o background genético favorável. O presente trabalho é um estudo de caso controle com o objetivo de verificar se a coinfecção viral pelo EBV e CMV influencia no aparecimento da Tuberculose (TB). Procedeu-se à sorologia IgG e IgM para EBV e CMV, e à pesquisa do genoma viral por meio da técnica de Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real no plasma de pacientes com TB e controles (indivíduos que tiveram contacto intradomiciliar com casos index de tuberculose). Participaram 68 pacientes com idade entre 18 a 36 anos e 56 controles pareados. Observou-se que 100% de casos e controles eram IgG positivos para EBV; 100% de casos e 96,4% de controles eram IgG positivos para o CMV, portanto, nessa pequena amostragem transversal, confirmou-se a alta prevalência da infecção pelo EBV e CMV, mas, não se observou associação entre a infecção/latência dos vírus e a ocorrência de tuberculose. Verificou-se baixa presença do genoma viral no plasma: 7 ocorrências nos casos (10,3%) e 9 ocorrências nos controles (16,1%). Apesar da diferença numérica, talvez mostrando uma tendência, não houve significância estatística. É muito importante a continuidade do estudo, desta feita em uma coorte longitudinal de indivíduos expostos (contactantes domiciliares), com maior “n” amostral, e faixa etária populacional menor, que comporte maior prevalência de expostos soronegativos para o EBV e CMV, permitindo observar contraste com expostos seropositivos.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-18T13:53:57Z No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-18T13:54:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-18T13:54:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / The genus Pleurotus (Fr.) Quél belongs to the order Agaricales, family Pleurotaceae and constitutes a group of cosmopolitan mushrooms, found in regions of temperate climate. Pleurotus has a large number of edible species that grow in different substrates. They are considered to be easy to grow fast and with low costs using inexpensive and available raw materials such as straw, grass and bagasse. The aim of this study was to evaluate the production and nutritional properties of P. albidus to supplement a pasta and evaluating the nutritional quality of different combinations of its dehydrated biomass on the final product. The results showed that P. albidus grew and excreted proteases in all tested substrates: cupuaçu exocarp (Theobroma grandiflorum, Schum) and açaí seed (Euterpe oleracea), supplemented with rice bran (Oryza sativa) and crueira (residue of Manihot esculenta). The substrates supplemented with rice bran showed significant values of proteolytic activity than the ones supplemented with crueira. The enzymes showed optimum activity at pH 6.0, 40 °C and 50 °C and they were characterized as being cysteine and metalloprotease. The crude extract was not toxic in the hemolysis and human fibroblast cells test. It showed antioxidant capacity in DPPH (68.47 μg / ml), ABTS radical (93.99 μg / mL), total phenols (79.9 mgEq / g) and flavonoids (14.8 mgEq / g). In the nutritional quality, the biomass presented total carbohydrate content of 60.3%, 36.3% of protein, 2.7% of crude fiber, 0.8% of ash, 0.4% of lipids and 376.3 Kcal. Potassium was the most abundant macromineral, followed by phosphorus, sulfur, magnesium, and calcium with 21.08 g.Kg -1, 10.31 g.Kg -1, 2.08 g.Kg -1, 1.33 g .Kg-1 and 0.26 g.Kg-1, respectively. Among the microminerals, iron (131.85 mg.Kg -1) and zinc (95.78 mg.Kg -1) were higher, followed by boron, sodium, manganese and copper with 39.48 mg.Kg- 1, 33.04 mg.Kg -1, 7.27 mg.Kg -1, and 2.0 mg.Kg -1, respectively. In the evaluation of the microbiological quality the noodle produced and supplemented with P. albidus biomass were considered safe for human consumption. The addition of mushroom biomass increased proteins, fibers and mineral content. The noodle also showed quality in the cooking test and texture. According to the results, the addition of P. albidus has potential for development of food products with nutritional qualities. / O gênero Pleurotus pertence à ordem Agaricales, família Pleurotaceae e constitui um grupo de cogumelos cosmopolitas, encontrados em regiões de clima temperado. Os Pleurotus possuem um grande número de espécies comestíveis que crescem em diferentes condições de substratos, considerados de fácil produção e com pouco investimento, utilizando matérias-primas baratas e facilmente disponíveis como, palha, capim e bagaço. O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção e as propriedades nutricionais de P. albidus para fortificar produto de panificação do tipo massa alimentícia e avaliar o efeito de diferentes combinações da biomassa desidratada do cogumelo sobre a qualidade nutricional das massas elaboradas. Os resultados mostraram que P. albidus cresceu e excretou proteases em todos os substratos testados, exocarpo de cupuaçu (Theobroma grandiflorum, Schum) e semente de açaí (Euterpe oleracea), suplementados com farelo de arroz (Oryza sativa) e crueira (residuo grosseiro da Manihot esculenta), apresentando valores significativos para as misturas suplementadas com farelo de arroz. O padrão proteolítico das enzimas em extrato bruto usando inibidores indica ser císteina e metaloprotease, pH 6,0 e temperatura ótima 40 e 50 °C. As enzimas mantiveram estáveis entre 60 a 90 minutos nas temperaturas de 30 a 50 ºC. A biomassa não apresentou toxicidade nos testes de hemólise em sangue comercial de carneiro e na avaliação citotóxica em célula de fibroblasto humano. Mostrou capacidade antioxidante em DPPH (68,47μg/ml), radical ABTS (93,99 μg/mL), fenóis totais (79,9 mgEq/g) e flavonoides (14,8 mgEq/g). Na qualidade nutricional, a biomassa apresentou teor de carboidratos totais de 60,3%, 36,3% de proteínas, 2,7% de fibra bruta, 0,8% de cinzas, 0,4% de lipídios e 376,3 Kcal. O potássio foi o macromineral mais abundante, seguido de fósforo, enxofre, magnésio, e cálcio com 21,08 g.Kg-1, 10,31 g.Kg-1, 2,08 g.Kg-1, 1,33 g.Kg-1 e 0,26 g.Kg-1, respectivamente. Já entre os microminerais o ferro (131,85 mg.Kg-1) e zinco (95,78 mg.Kg-1) estão em maior quantidade, seguido do boro, sódio, manganês e cobre, 39,48 mg.Kg-1, 33,04 mg.Kg-1, 7,27 mg.Kg-1, e 2,0 mg.Kg-1, respectivamente. Na avaliação da qualidade microbiológica os macarrões elaborados com a biomassa de P. albidus foram consideradas seguras para consumo humano. A adição da biomassa elevou o teor de minerais e apresentou um aumento de 53% e 64% de proteínas e fibras, respectivamente, as massas demonstraram qualidade no teste de cozimento e textura, mostrando que a adição de P. albidus tem potencial para o desenvolvimento de produto alimentício com qualidades nutricional.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-19T17:55:26Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Anderson V. Santos.pdf: 2503396 bytes, checksum: 798075b245748d36caf1028a360cf9ff (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-19T17:55:42Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Anderson V. Santos.pdf: 2503396 bytes, checksum: 798075b245748d36caf1028a360cf9ff (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-19T17:55:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Anderson V. Santos.pdf: 2503396 bytes, checksum: 798075b245748d36caf1028a360cf9ff (MD5) Previous issue date: 2017-06-21 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Brazil is the leading producer and exporter of coffee world. The use of resistant coffee cultivars is one of the most economical ways to control the Root-knot nematodes Meloidogyne spp. However, studies are needed to demonstrate the best methodologies used in resistance tests of coffee to the gnath nematode to be Possible to reduce experimental errors and to standardize test facilities so that the results of different jobs can be compared with confidence. Therefore, the objective of this work is to analyze the effects of adjusting the inoculum concentration and evaluation period on the reaction of Coffea canephora and weed clones to Meloidogyne incognita (Est I2) in Rondônia, as well as to evaluate the reaction of 56 clones as resistance to the Root-knot nematodes M. incognita. For this, three experiments were conducted separately. Firstly, samples of coffee roots were collected in five producing areas of the municipality of Cacoal and sent to the biochemical characterization by esterase enzyme (Est) of the species (s) of Meloidogyne spp., where a single pattern of Meloidogyne incognita (Est I2) in all samples. One of them was used to obtain a pure nematode population of M. incognita and multiplied in cv. Saint Clara. The first experiment was set up as follows: Six-month-old seedlings of C. canephora "194", "125" and "750" clones, as well as of the Obatã variety of C. arabica, from the germplasm bank of Embrapa Rondônia, were transplanted to 8-liter vessels containing 2: 1: 1: 1 sterilized substrates (natural soil, vermiculite medium texture, sand and organic compost, respectively). As a susceptible control, tomato plants (Solanum Iycopersicum L.) cv Santa Clara were used to verify the viability of the inoculum of M. incognita used in this experiment. After fifteen days of adaptation of the coffee tree seedlings in the pots, six plants of each one of the coffee genotypes was inoculated with different concentrations of M. incognita, being 1000, 5000, 10000 and 20000 eggs + J2 per plants, constituting 11 treatments with six replicates. However the seedlings of the susceptible control, the tomato, were inoculated with 5000 eggs of the nematode/plant. After the inoculations the treatments were arranged in a completely randomized design in the shelter. Evaluations were performed at 5 and 8 months after inoculation. It was observed that the lowest concentrations of inoculum (1000 and 5000 eggs / pot) were the most efficient for nematode establishment and reproduction in both coffee genotypes. In the second experiment, clones of C. canephora of the BRS Ouro Preto variety, 8 months old were transplanted to vessels containing autoclaved soil and inoculated with 5,000 eggs + juveniles of the second stage (J2) of the nematode (first trial). The design was completely randomized, with six replicates for each genotype tested. Tomatoes cv. Santa Clara represented the positive witness and coffee clones Apoatã the negative witnesses, inoculated with the same level of inoculum of the others. After 148 days of inoculation the plants were removed from the vases and the roots separated from the aerial part, washed, weighed and evaluated for number of galls (NG). Then, the number of eggs of M. incognita (NO) from the roots was extracted and counted, obtaining the breeding factor (FR) of the nematode (FR = final population / initial population) in each tested plant. Considering immune genotypes with FR = 0.00; Resistant, FR <1.00; And, susceptible, FR> 1.00. The M. incognita NG and FR values were submitted to ANOVA and the means were compared by the Scott Knott test (1974) at 5% probability. The results showed that only clone 750 was susceptible to M. incognita. Apoatã clones obtained FR = 0, being considered non-hosts. The clones of the cultivar BRS Ouro Preto behaved as resistant to M. incognita. The second assay was installed on July 2, 2015, in order to evaluate the reaction of thirty - two clones of C. canephora to M. incognita, using the same methodology of the first assay, being evaluated on 02/11 / 2015. At 150 DAI the C. canephora clones of the botanical variety Conilon 694, 160, 837, 46, 909, 890 and the hybrid materials 844, 1005, 169, 543, 453, 120, 193, 636, both with early ripening cycle, Have behaved as resistant to M. incognita and can be used in breeding programs to obtain nematode-resistant precocious coffee cultivars under soil and climate conditions in Rondônia. / Foi ojetivo deste trabalho analisar os efeitos do ajuste da densidade de inóculo e época de avaliação de ensaios na reação de clones de Coffea canephora à Meloidogyne incognita (Est I2) sob condições controladas. Para tanto, foram conduzidos três experimentos separadamente. Primeiramente, amostras de raízes de café foram coletadas em cinco áreas produtoras do município de Cacoal e encaminhadas para a caracterização bioquímica através da enzima esterase (Est) da(s) espécie(s) de Meloidogyne spp., onde se reconheceu um único padrão de Meloidogyne incognita (Est I2) em todas as amostras. Uma delas foi utilizada para a obtenção de uma população pura do nematoide das galhas M. incognita e multiplicado em tomateiro cv. Santa Clara. No primeiro experimento mudas com seis meses de idade dos clones de C. canephora “194”, “125” e “750”, além da variedade Obatã IAC-1669-20 de C. arabica e plantas de tomate (Solanum Iycopersicum L.) cv Santa Clara (testemunhas) foram transplantadas para vasos. Após quinze dias de adaptação das mudas seis plantas de cada genótipo de café foram inoculadas com diferentes concentrações de M. incognita, sendo elas 1000, 5000, 10000 e 20000 ovos + J2 por plantas, constituindo 11 tratamentos com seis repetições em delinemamento inteiramente casualizado mantidos em casa de vegetação. O tomateiro foi inoculado com 5000 ovos do nematoide/planta. As avaliações foram realizadas aos 5 e 8 meses após a inoculação. Foi observado que as menores concentrações de inóculo (1000 e 5000 ovos/planta) foram as mais eficientes para o estabelecimento e reprodução do nematoide em ambos os genótipos, expressando de forma adequada os níveis de resistência e/ou suscetibilidade dos cafeeiros. No segundo experimento, quinze clones de C. canephora da variedade BRS Ouro Preto, foram inoculados com 5.000 ovos + juvenis de segundo estádio (J2) da mesma população de Meloidogyne incognita (Est I2). O delineamento foi completamente casualizado, com seis repetições para cada clone testado. Tomateiros cv. Santa Clara e clones de café Apoatã representaram as testemunhas (positiva e negativa, respectivamente). Após 148 dias da inoculação as plantas foram avaliadas quanto ao número de galhas (NG) e o fator de reprodução (FR) do nematoide (FR = população final/população inicial) em cada planta testada. Os resultados demonstraram que os clones de Apoatã foram imunes ao nematoide (FR=0) e todos os clones da cultivar BRS Ouro Preto se comportaram como resistentes à M. incognita (FR<1), diferenciando-se significativamente das testemunhas suscetíveis (FR>1). O terceiro experimento foi instalado em julho de 2015, com o objetivo de avaliar a reação de trinta e dois clones de C. canephora das variedades botânicas Conilon, Robusta e Híbridos Intervarietais à mesma população de M. incognita (Est I2), utilizando a mesma metodologia do segundo experimento. Aos 150 DAI os clones de C. canephora da variedade botânica Conilon 694, 160, 837, 46, 909, 890 e os materiais híbridos 844, 1005, 169, 54, 453, 120, 193, 636, ambos com ciclo precoce de maturação, se comportaram como resistentes à M. incognita.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-11-22T14:32:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-11-22T14:33:09Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-22T14:33:09Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-04-17 / Five Amazonian Byrsonima species, B. crispa, B. duckeana, B. garcibarrigae, B. incarnata and B. japurensis, were selected to investigate the anti-inflammatory and antimicrobial properties of its extracts and semi-synthetic substances. The ability of aqueous extracts from the stem bark to act synergistically through inhibition of cyclooxygenase-2 (COX-2), lipoxygenase (LOX), inducible nitric oxide synthase (iNOS) and / or antioxidant activity was investigated by in vitro, in silico and in vivo models. In turn, the hexane extracts were rich in α and β-amyrin triterpenes, which were obtained in high quantity and high purity by a simple and cheap method developed in this work. These triterpenes were used in the semisynthesis of 24 derivatives, of which 18 were evaluated for their antimicrobial properties. The aqueous extracts contained phenolic compounds and flavonoids, resulting in a high antioxidant capacity in the DPPH•, ABTS●+ and superoxide tests and in the bacterial lipopolysaccharide activated macrophage assay, i.e. an in vitro model of inflammatory response. They also showed good enzymatic inhibition capacity and their phenolic components showed a good affinity for COX-2, LOX and iNOS in the in-silico evaluation, suggesting an interesting synergistic effect. B. japurensis, only species used in folk medicine, showed more potent anti-inflammatory and analgesic activities in in vivo models, possibly by the specific combination of some phenolic compounds that are well absorbed by the oral route. Of the 18 derivatives developed with the triterpenes α and β-amirin, five showed activity against Trypanosoma cruzi, T. brucei, Leishmania infantum, Candida albicans, Staphylococcus aureus and Escherichia coli, with different degrees of potency and specificity. Possibly, they act by interaction with lipid components of the cell membrane and also by inhibition of 14α-demethylase (CYP51), for which all the compounds presented different degrees of affinity in the in-silico evaluation. The method developed to obtain the inclusion complexes with sulfobutyl ether-β-cyclodextrin can be further optimized and used in modulating the selectivity and toxicity of these active substances, which is a strategy already reported in the literature for different drugs. In conclusion, this study was able to demonstrate that the five species of Byrsonima may be promising sources of new medicines. In particular, B. japurensis would serve as a promising model for a new multitarget medicine to treat inflammation. The hexane extracts provided interesting chemical skeletons that can be converted into very promising substances for the antimicrobial arsenal, in a simple, inexpensive and highly reproducible way. / Cinco do gênero Byrsonima da Amazônia Brasileira, B. crispa, B. duckeana, B. garcibarrigae, B. incarnata e B. japurensis foram selecionadas para uma investigação das propriedades anti-inflamatórias e antimicrobianas de seus extratos e substâncias semissintéticas. A capacidade de dos extratos aquosos da casca do caule inibirem sinergicamente a ciclo-oxigenase-2 (COX-2), a lipoxigenase (LOX), e a sintase do óxido nítrico indutível (iNOS) e/ou apresentarem atividade antioxidante foram avaliadas em diferentes modelos químicos, in silico, in vitro e in vivo. Por sua vez, os extratos hexânicos mostraram-se ricos nos triterpenos α e β-amirinas, os quais foram obtidos em grande quantidade e alto grau de pureza por um método simples e barato desenvolvido neste trabalho, e foram usados na semissíntese de 24 derivados, dos quais 18 foram avaliados quanto as suas propriedades antimicrobianas. Os extratos aquosos mostraram expressiva quantidade de compostos fenólicos e flavonoides que explicam sua ampla capacidade antioxidante demonstrada nos testes do DPPH•, ABTS●+ e Superóxido e no ensaio do macrófago ativado por lipopolissacarídeo bacteriano, o qual é também considerado um modelo de atividade anti-inflamatória in vitro. Eles também apresentaram boa capacidade de inibição enzimática e seus componentes fenólicos apresentaram boa afinidade pela COX-2, LOX e iNOS na avaliação in silico, sugerindo um efeito sinérgico interessante para novos anti-inflamatórios. B. japurensis, única planta medicinal dentre as estudadas, foi a espécie mais ativa in vivo, possivelmente pela combinação específica de compostos fenólicos normalmente bem absorvidos pela via oral. Dos 18 derivados desenvolvidos com os triterpenos α e β-amirina e testados quanto a atividade antimicrobiana, cinco derivados apresentaram atividade contra Trypanosoma cruzi, T. brucei, Leishmania infantum, Candida albicans, Staphylococcus aureus e Escherichia coli, com diferentes graus de potência e especificidade. Possivelmente, eles atuam por interação com componentes lipídicos da membrana plasmática e também por inibição da 14α-demetilase (CYP51), para o qual a todos os compostos apresentaram variados graus de afinidade na avaliação in silico. O método desenvolvido para a obtenção dos complexos de inclusão entre sulfobutiléter-β-ciclodextrina e os derivados mais lipofílicos, pode ainda ser otimizado e utilizado na modulação da seletividade e toxicidade dessas substâncias ativas, estratégia já relatada na literatura para diferentes fármacos. Sendo assim, este estudo conseguiu demonstrar que as cinco espécies de Byrsonima analisadas podem ser promissoras fontes de medicamentos. Em especial, a espécie B. japurensis serviria de um promissor modelo de novo polifármaco multialvo para o tratamento da inflamação. Os extratos hexânicos forneceram interessantes esqueletos químicos que podem ser convertidos em substâncias bastante promissoras para o arsenal antimicrobiano, de modo simples, barato e altamente reprodutível.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-12T15:53:19Z No. of bitstreams: 2 Tese - Habdel Nasser.pdf: 15126039 bytes, checksum: 87f29159443eecef88032880bd6b9dce (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-12T15:53:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Habdel Nasser.pdf: 15126039 bytes, checksum: 87f29159443eecef88032880bd6b9dce (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-12T15:53:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Habdel Nasser.pdf: 15126039 bytes, checksum: 87f29159443eecef88032880bd6b9dce (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2007-08-10 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Most of the snakebite incidents in the Amazon region involve the Bothrops atrox, whose venom presents the most potent edematogenic and necrotic activities in the genus. This work describes the studies of isolation of the chemical constituents and antiedematogenic activity of the species Peltodon radicans (Lamiaceae), which is used in the treatment of snakebites and scorpion stings in the region. The extracts presented aliphatic hydrocarbons, 3-OH,-amirin (1), 3-OH,-amirin (2), -sitosterol (3), stigmasterol (4), ursolic acid (5), 2,3,19-trihydroxy-urs-12-en-28-oic acid (tormentic acid, 6), methyl 3-hydroxy,28-methyl-ursolate (7), sitosterol-3-O--D-glucopyranoside (8), and stigmasterol-3-O--D-glucopyranoside (9). The flower extracts presented the largest antiedematogenic activity. This is the first report on the study of the flowers, stem, and roots of this plant. / A maioria dos acidentes com serpentes na região Amazônica envolve a espécie Bothrops atrox, cujo veneno apresenta as atividades edematogênica e necrótica mais potentes no gênero. Este trabalho descreve o estudo do isolamento dos constituintes químicos e da atividade antiedematogênica de Peltodon radicans (Lamiaceae), espécie vegetal que é usada no tratamento de picadas de serpentes e escorpiões na região. O extrato apresentou hidrocarbonetos alifáticos, 3-OH,-amirina (1), 3-OH,-amirina (2), -sitosterol (3), estigmasterol (4), ácido ursólico (5), ácido 2,3,19-tri-hidroxi-urs-12-en-28-óico (ácido tormêntico 6), 3-hidroxi,28-metil-ursolato de metila (7), 3-O--D-glicopiranosíl-sitosterol (8) e 3-O--D-glicopiranosíl-estigmasterol (9). Os extratos das flores apresentaram maiores atividades edematogênicas. Este é o primeiro registro do estudo das flores, caules e raízes dessa planta.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-20T14:22:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-12-20T14:22:56Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-20T14:22:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-09-15 / The food industry produces a series of wastes of high economic value which, if subjected to appropriate technologies, can be converted into commercial products or raw materials for secondary processes. Edible mushrooms are alternatives for the recycling of these residues and the substrate generated at the end of the bioprocess can be used in the elaboration of food products, since its nutritional characteristics, combined with the richness of available nutrients, favors the utilization of these by-products. In addition, the environmental impacts caused by irregular waste disposal are minimized. The objective of this research was to develop and characterize three shakes, formulated with bioproducts resulting from the processing of pineapple peel as an alternative food, source of fiber. The bioproducts were characterized for antioxidant activity, total phenol content, in vitro protein digestibility, bioassay of toxicity against Artemia salina, qualitative hemolytic activity and cytotoxic activity against human MCR5 fibroblasts. Shakes were made using formulations composed of powdered bioproducts in the proportions of 0 and 100%, replacing oat flour to obtain four formulations, including the standard one. The shakes produced were submitted to determination of centesimal composition, mineral content, determination of pH and total titratable acidity, and determination of the microbiological quality. The bioproducts presented antioxidant activity and reduced content of total phenols and high protein digestibility. All toxicological tests have shown that these products are safe for human consumption. When oatmeal was replaced by bioproducts there was an increase in minerals and fibers contente and the reduction of total calories. In addition, there was increase of potassium, calcium, sodium, copper and manganese. The pH of the shake products presented lower value than the standard sample, higher total titratable acidity and microbiological quality within the sanitary and hygienic specifications. / A indústria de alimentos produz uma série de resíduos de alto valor econômico que, se submetidos à tecnologias adequadas, podem ser convertidos em produtos comerciais ou matérias-primas para processos secundários. Para a reciclagem destes resíduos, os cogumelos comestíveis são alternativas para produção de biomassa, sendo que o substrato gerado ao final do bioprocesso pode ser utilizado na elaboração de produtos alimentícios, pois suas características nutricionais aliadas à riqueza de nutrientes disponíveis favorece o aproveitamento desses subprodutos. Além disso, os impactos ambientais causados pelo descarte irregular de resíduos são minimizados. Esta pesquisa teve como objetivo desenvolver e caracterizar três produtos alimentícios do tipo shake formulados com bioprodutos resultantes do processamento da casca de abacaxi como uma alternativa alimentar fonte de fibras. Os bioprodutos foram caracterizados quanto à atividade antioxidante, teor de fenóis totais, digestibilidade in vitro das proteínas, bioensaio de toxicidade frente à Artemia salina, atividade hemolítica qualitativa e atividade citotóxica contra fibroblastos humanos MCR5. Os shakes foram elaborados utilizando formulações compostas pelos bioprodutos em pó, nas proporções de 0 e 100%, em substituição à farinha de aveia para obtenção de quatro formulações, incluindo a padrão. Os shakes produzidos foram submetidos à determinação de composição centesimal, teor de minerais, determinação de pH e acidez titulável total, e determinação da qualidade microbiológica. Os bioprodutos apresentaram atividade antioxidante e reduzido teor de fenóis totais e elevada digestibilidade de proteínas. Todos os ensaios toxicológicos revelaram que se tratam de produtos seguros para o consumo humano. Quando substituída a farinha de aveia pelos bioprodutos houve aumento de minerais, fibras, potássio, cálcio, sódio, cobre e manganês, além da redução das calorias totais.. O pH dos produtos do tipo shake apresentaram menor valor que a amostra padrão, maior acidez titulável total e qualidade microbiológica dentro das especificações higiênico-sanitárias em vigor.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-10T21:05:54Z No. of bitstreams: 4 1-CapaFinal_1.pdf: 90775 bytes, checksum: c4f6f2534fe59c39e7eb14147ce16e9a (MD5) 2-ficha.pdf: 6030 bytes, checksum: b4b337f5058b8d68854f98d82a614d6c (MD5) 3-SumarioFinal_1.pdf: 188058 bytes, checksum: 96e5c8a96c05703663265eb75c5d68ce (MD5) 4-TeseCorrigida_1.pdf: 2150184 bytes, checksum: 94512b258a1bcccdeaa694a3d19716f2 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-13T14:32:35Z (GMT) No. of bitstreams: 4 1-CapaFinal_1.pdf: 90775 bytes, checksum: c4f6f2534fe59c39e7eb14147ce16e9a (MD5) 2-ficha.pdf: 6030 bytes, checksum: b4b337f5058b8d68854f98d82a614d6c (MD5) 3-SumarioFinal_1.pdf: 188058 bytes, checksum: 96e5c8a96c05703663265eb75c5d68ce (MD5) 4-TeseCorrigida_1.pdf: 2150184 bytes, checksum: 94512b258a1bcccdeaa694a3d19716f2 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-13T14:37:37Z (GMT) No. of bitstreams: 4 1-CapaFinal_1.pdf: 90775 bytes, checksum: c4f6f2534fe59c39e7eb14147ce16e9a (MD5) 2-ficha.pdf: 6030 bytes, checksum: b4b337f5058b8d68854f98d82a614d6c (MD5) 3-SumarioFinal_1.pdf: 188058 bytes, checksum: 96e5c8a96c05703663265eb75c5d68ce (MD5) 4-TeseCorrigida_1.pdf: 2150184 bytes, checksum: 94512b258a1bcccdeaa694a3d19716f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-13T14:37:37Z (GMT). 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Once the H. pylori is considered one of the etiological agents of this malignitude, the objective of this study was to determine the prevalence of the infection for H. pylori and to accomplish the rising of epidemic variables and of susceptibility related to the bacterial infection in riverine communities, and to validate a rehearsal copromolecular for diagnosis of the infection. The accomplished study was of the type traverse, contemporary, analytical and observacional, understanding a sample of 200 individuals, of which they were collected blood, saliva and feces, besides the application of a questionnaire epidemic employee, with subjects driven to his/her identification, obtaining data on the conditions socioeconomic, hygienic, sanitary and symptoms. For detection sorologic of antibodies of the type IgG anti-H. pylori were used plasma samples that were tested for systemic antibodies of the type IgG anti-H. pylori through a rehearsal immunological, using the Kit Ridascreen Helicobacter IgG (RBiopharm AG, Germany); for detection it activates of the H. pylori, it was used the samples of feces that were tested through the Kit MKBIO H. pylori (MK BIO GMBH, DIMA, Germany). Besides the detection of antibodies and antigens for H. pylori, they were also applied techniques of molecular biology, in the fecal samples, to confirm the diagnosis of the infection, for direct detection of bacterial DNA, using the primers RNAr16S that amplify a fragment gene of 1200bp of the gender Helicobacter and the primers p1 and p2, which amplify a fragment gênico of 298 pb that codifies a protein antigenic of 26kDa species specify of the H. pylori. This research had about central point to the infection for the bacterium H. pylori, that was detected through three diagnosis methods: The sorologia, fecal antigen and PCR. The sorologia went to the chosen technique to relate with the epidemic aspects regarding the study, and the obtained results revealed a frequency of soropositive of 83,5% (167/200). The analysis of the epidemic variables related to the bacterial infection demonstrated a larger frequency of infected individuals female, in the age group from 0 to 17 years, in addition 97,4% of the population that ingested water without treatment were positive the infection. The comparison of the prevalence of the infection, obtained through the three different detection methods, they were high, however the detection copromolecular was what detected a smaller number of positive individuals (113/200), although it presents the largest indexes of sensibility 79% and specificities 100%. The detection copromolecular demonstrated to be an important tool in the detection of the bacterial infection, making possible in these populations the application of a test high sensibility and specificity, could be applied in the precocious detection of the patogen. / e sócio-econômicas suspeitas para o condicionamento à infecção por Helicobacter pylori, bactéria associada à etiopatogenia de várias doenças gastrointestinais. No Brasil, são registrados em média, quinze mil casos de câncer do aparelho digestivo por ano, com um maior percentual na região norte. Uma vez que o H. pylori é considerada um dos agentes etiológicos desta malignitude, o objetivo deste estudo foi determinar a prevalência da infecção por H. pylori e realizar o levantamento de variáveis epidemiológicas e de suscetibilidade relacionados à infecção bacteriana em comunidades ribeirinhas, e validar um ensaio copromolecular para diagnóstico da infecção. O estudo realizado foi do tipo transversal, contemporâneo, analítico e observacional, compreendendo uma amostra de 200 indivíduos, dos quais foram coletados sangue, saliva e fezes, além da aplicação de um questionário epidemiológico empregado, com questões dirigidas à sua identificação, obtendo dados sobre as condições socioeconômicas, higiênicas, sanitárias e sintomatologia apresentada. Para detecção sorológica de anticorpos do tipo IgG anti-H. pylori específicos foram utilizados amostras de plasma que foram testadas para anticorpos sistêmicos do tipo IgG anti-H. pylori através de um ensaio imunoenzimático, usando o Kit Ridascreen Helicobacter IgG (R-Biopharm AG, Alemanha); para detecção ativa do H. pylori, foi utilizado as amostras de fezes que foram testadas através do Kit MKBIO H. pylori (MK BIO GMBH, DIMA, Alemanha). Além da detecção de anticorpos e antígenos para H. pylori, também foram aplicadas técnicas de biologia molecular, nas amostras fecais, para confirmar o diagnóstico da infecção, por detecção direta do DNA bacteriano, utilizando os primers RNAr16S que amplificam um fragmento gênico de 1200bp do gênero Helicobacter e os primers P1 e P2, os quais amplificam um fragmento gênico de 298 pb que codifica uma proteína antigênica de 26kDa espécie especifica da H. pylori. Esta pesquisa teve como ponto central à infecção pela bactéria H. pylori, que foi detectada através de três métodos de diagnóstico: A sorologia, o antígeno fecal e PCR. A sorologia foi à técnica escolhida para relacionar com os aspectos epidemiológicos referentes ao estudo, sendo que os resultados obtidos revelaram uma frequência de soropositividade de 83,5% (167/200). A análise das variáveis epidemiológicas relacionadas à infecção bacteriana demonstrou uma maior frequência de indivíduos infectados do sexo feminino, na faixa etária de 0 a 17 anos, além do que 97,4% da população que ingeriam água sem tratamento foram positivos a infecção. A comparação da prevalência da infecção, obtidas através dos três diferentes métodos de detecção, foram elevadas, no entanto a detecção copromolecular foi o que detectou um menor número de indivíduos positivos (113/200), embora apresente os maiores índices de sensibilidade 79% e especificidades 100%. A detecção copromolecular demonstrou ser uma ferramenta importante na detecção da infecção bacteriana, possibilitando nestas populações a aplicação de um teste de elevada sensibilidade e especificidade, podendo ser aplicada na detecção precoce do patógeno.

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No. of bitstreams: 1 Dissertação - Márcia Caroline Pires Vilhena.pdf: 2598425 bytes, checksum: 39041ac9767e335dfd63902e21daf173 (MD5) Previous issue date: 2012-06-26 / Não informada / Aspidosperma marcgravianum Woodson (Apocynaceae) is popularly known as carapanaúba a high quality wood. The bark is used in the Amazonian folk medicine as infusion to treat malaria, diabetes, gastrointestinal disturbances, in uterus and ovarian inflammation, against cancer and as contraceptive. The few papers available do not confirm the folk use, but the about 50 known indolic alkaloids isolated from A. marcgravianum are often used to explain the toxic effect on Artemia franciscana and the described anti-bacterial activity. The present work aimed to study the in vivo and in vitro effects and mechanisms of action of the alkaloids extracted from Aspidosperma marcgravianum. The bark was extracted with ethanol in Soxhlet apparatus generating the ethanol extract (EETOH, 3% yield). The EETOH was partitioned with chloroform in different pH, yielding the chloroform fraction (FCHCl3); further partition yielded the total alkaloids fraction (TAF). FCHCl3 purification in silica gel column chromatography (CC) yielded six fractions of different alkaloids (F13-23, F24-32, F55-73, F33-43, F44-54 and F74-76). FAT standardization in HPLC showed 11 major peaks with retention times from 3.5 to 27.0 min similar to those obtained for the purified fractions. To know the main pharmacological effects induced of A. marcgravianum, mice were orally treated with EETOH and TAF (1 g/kg). EETOH produced evident muscular relaxation and reduced mice motility, as well as dyspnea; death was not observed within 24 h. Comparatively, TAF produced faster and more intense effects that killed all the animals. In rat isolated atrium, FAT (10 to 100 μg/mL) produced negative chronotropic effect related to the drug concentration, positive inotropic effect at low concentration but contraction inhibition at high one. The diaphragm muscle contractions were potentiated by TAF; this action was neither related to an anticholinesterase activity nor to Ca2+-ATPase inhibition. The diaphragm tetanus after repetitive electrical stimulation (30-50 Hz) was not sustained in presence of FAT (10 to 100 μg/mL) but the initial muscle responses were not proportionally blocked; similar effects were observed for the purified fractions at 1 μg/mL. Since the alkaloids did not induce muscle contracture, neither inhibited SERCA 1 activity, nor reduced the initial responses upon repetitive muscle stimulation, the effect on contraction might putatively be explained by increased action potential duration. This effect would increase the muscle membrane refractoriness and would block the tetanus responses, but at the same time it would increase the myofibrils active state resulting in increased contraction of diaphragm and heart muscles. Usually increased action potential duration is due to potassium channel blockade. The present experiments, however, do not provide any direct evidence for this latter effect. / Aspidosperma marcgravianum Woodson (Apocynaceae) é conhecida como carapanaúba. Além da qualidade da madeira, a casca da espécie é utilizada como infuso na medicina popular da Região Amazônica para tratar malária, diabetes, males do estômago, inflamações do útero e do ovário, contra câncer, e como contraceptivo. Poucos trabalhos científicos confirmam essas ações, mas já são conhecidos cerca de 50 alcaloides indólicos, que parecem ser os responsáveis pela atividade tóxica às larvas de Artemia franciscana e pela atividade antimicrobiana. Este trabalho teve como objetivo estudar os efeitos e o(s) mecanismo(s) de ação dos alcaloides de Aspidosperma marcgravianum Woodson em roedores. O pó das cascas do caule foi extraído em Soxhlet obtendo-se o extrato etanólico (EETOH, rendimento 3%). O EETOH foi particionado com clorofórmio em diferentes pH, dando origem à fração clorofórmica (FCHCl3) e, esta, à fração mais purificada contendo os alcaloides totais (FAT). A purificação da FCHCl3 por cromatografia em coluna (CC), separou seis frações de diferentes alcalóides (F13-23, F24-32, F55-73, F33-43, F44-54 e F74-76). A padronização da FAT em CLAE mostrou 11 picos principais com tempos de retenção que variaram de 3,5 a 26,9 min, coincidentes com os das frações purificadas. Para identificar os principais efeitos farmacológicos de A. marcgravianum, o extrato etanólico (EETOH) e a fração alcaloídica (FAT) foram administrados por via oral (1 g/kg, v.o.), em camundongos. O EETOH produziu diminuição da motilidade e relaxamento muscular evidentes, além de sinais de dispnéia, sem cianose; não houve morte em 24 horas de observação. A FAT produziu os mesmos efeitos, porém rápidos e intensos, com 100% de letalidade. Em átrios isolados de rato, a FAT (10 a 100 μg/mL) produziu efeito cronotrópico negativo proporcionalmente às concentrações e efeito inotrópico positivo na menor concentração e inotrópico negativo na maior concentração. As contrações do músculo diafragma de rato foram potenciadas na presença da FAT; esta ação não foi relacionada a uma atividade anticolinesterásica da FAT ou à inibição da atividade da Ca2+-ATPase de músculo esquelético. Na presença da FAT (10 a 100 μg/mL) o tétano do músculo diafragma de rato não foi sustentado, mas a contração inicial à estimulação tetânica (30 e 50 Hz) não foi inibida na mesma proporção; efeitos semelhantes foram observados com as frações purificadas (1 μg/mL). Estes efeitos indicam que o período refratário da fibra muscular foi aumentado na presença dos alcalóides. O prolongamento do potencial de ação, talvez por bloqueio de canais de potássio na repolarização celular, potenciaria a contração e inibiria a resposta à estimulação tetânica. As experiências, no entanto, não indicam diretamente a ação dos alcalóides nas correntes iônicas do potencial de ação.