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Avaliação da produção de melanina em Cryptococcus neoformans sob diferentes condições de cultivo e por meio da eletroforese não-desnaturante: influência in vitro na atividade de antifúngicosPEREIRA, Cristiane Bigatti 27 August 2008 (has links)
A criptococose é infecção fúngica oportunista causada pelo Cryptococcus neoformans
com alta incidência em indivíduos imunodebilitados, principalmente entre pacientes com Aids,
sendo o número de casos registrados da doença no Brasil, 474.279, de 1980 a junho de 2007.
Para melhor compreensão do agente etiológico, da criptococose e dos fatores associados à
virulência são necessários estudos adicionais sobre a patogênese deste microrganismo. Dentre
os fatores relacionados à virulência, a melanina é um dos principais e sua síntese ocorre por
ação da lacase. Assim sendo, foram realizados estudos para avaliar a produção do pigmento
entre amostras clínicas e ambientais de C. neoformans sob diferentes condições de pH (5, 6 e
7) e temperatura (25 °C, 30 °C e 35°C). A relação do pigmento com o perfil de sensibilidade
aos antifúngicos fluconazol e anfotericina B também foi avaliada. Os resultados mostraram
que não houve comportamento uniforme de melanização entre as amostras. As maiores
alterações de pigmentação e crescimento das leveduras foram observadas nos meios de
cultura com pH 7 incubados a 35 °C. A técnica de eletroforese em gel PAGE nãodesnaturante
mostrou-se uma ferramenta útil na análise da lacase produzida pelas amostras de
C. neoformans com posterior quantificação de melanina por densitometria das bandas após
reação com o substrato L-dopa. As amostras ambientais apresentaram os maiores valores de
intensidade de melanina e ampla faixa de variação. Mais da metade das amostras clínicas
(56,2 %) apresentaram as menores intensidades de melanina. A amostra clínica ICB 88
revelou duas bandas de melanina no gel indicando a presença de duas isoformas da lacase. Os
testes de sensibilidade aos antifúngicos fluconazol e anfotericina B, através das metodologias
de difusão em agar por disco e fita (E-test®), mostraram que a leitura após 72 h de incubação
pode levar a erro na classificação quanto ao perfil de sensibilidade, tanto nos testes com ou
sem adição de melanina. Adição de melanina pareceu não interferir nos resultados frente ao
fluconazol nas metodologias de difusão em agar a partir de disco e fita (E-test®). Para
anfotericina B houve aumento de CIMs para 90,9 % das amostras, sendo 45,4 % superior a 2
diluições com adição de melanina nos testes de sensibilidade na metodologia de difusão em
agar a partir de fita (E-test®). / Cryptococcosis is an opportunistic fungal infection caused by Cryptococcus
neoformans that has presented increased incidence with the great number of
immunocompromised patients, mainly AIDS ones, being 474.273, the number of cases
registered in Brazil since 1980 to june 2007. Additional studies about microorganism’s
pathogenesis is necessary for better comprehension about the aethyological agent,
criptococosis and associated factors to virulence. Among virulence’s factors, melanin is one
of the mainly and its synthesis occurs by laccases action. So, some studies were performed to
evaluate the melanin pigment’s production between clinical and environmental strains of C.
neoformans under different conditions of pH (5, 6 and 7) and temperatures (25 °C, 30 °C and
35 °C). The pigment and susceptibility to fluconazole and amphotericin B relation’s was also
evaluated. The results showed that there wasn’t comparable behaviour of melanization among
the strains. The higher alterations on yeast’s pigmentation and growth were noted under pH 7
and at 35 °C. The electrophoresis technique on non-denaturant PAGE gel showed to be an
useful tool to the analysis of laccase produced by C. neoformans strains and posterior
quantification of melanin by spot’s densitometry after reaction with L-dopa substrate. The
environmental strains showed the higher values of melanin intensities and large variation
range. Over than a half of clinical strains (56.2 %) showed the lower melanin’s intensities.
The clinical strain, ICB 88 revealed two melanin spots on gel indicating the presence of two
laccase isoforms. The susceptibility antifungal tests with fluconazole and amphotericin B
through disk diffusion and E-test® methods showed that reading after 72 hours can induce to
mistakes on the susceptibility profile of strains, either in presence or absence of melanin.
Addition of melanin on medium surface appears not change the results of susceptibility to
fluconazole in disk diffusion and E-test®, but to amphotericin B was observed increase of
MICs to 90.9 % of strains, been 45.4 % upper to 2 dilutions after addition of melanin in Etest
® methodology.
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Leishmaniose tegumentar americana: análise epidemiológica de pacientes de diferentes regiões de Minas Gerais e caracterização molecular do gênero LeishmaniaPELOSO, Eduardo de Figueiredo 16 October 2007 (has links)
A leishmaniose tegumentar americana (LTA), uma das formas clínicas das leishmanioses, está em expansão no Brasil e representa importante causa de morbidade para populações residentes em áreas endêmicas. Avaliações do perfil epidemiológico, dos serviços de diagnóstico e tratamento são necessárias para o estabelecimento de estratégias de controle da doença, assim como o emprego de novas ferramentas laboratoriais, como a PCR. Neste trabalho foram avaliados os aspectos epidemiológicos, de diagnóstico e tratamento de pacientes com LTA de diferentes regiões de Minas Gerais, além do uso de diferentes técnicas de extração de DNA e de iniciadores na PCR para a identificação e diferenciação do agente etiológico. Adicionalmente, foi comparada a positividade dos iniciadores dirigidos para a região conservada (150/152) e variável (13Y/13Z) do minicírculo do kDNA de Leishmania em amostras biológicas de pacientes sugestivos para LTA. Foi realizado levantamento epidemiológico, de diagnóstico e tratamento de 824 pacientes portadores de LTA, sendo 261 da região sul e sudoeste do estado de Minas Gerais (SSMG) e 563 do Vale do Rio Doce (VRD). Os dados foram obtidos através das fichas de notificação das Gerências Regionais de Saúde (GRS) do SSMG e do ambulatório de Leishmanioses “Dr. Paulo Araújo Magalhães” de Caratinga (VRD) entre 2002 e 2006. Trinta e nove pacientes com lesões sugestivas para LTA, provenientes destas regiões foram submetidos a exames laboratoriais, além da PCR. As amostras de DNA foram extraídas por aquecimento, pela técnica do fenol/clorofórmio, proteinase K e kit Wizard, e posteriormente usadas na PCR e PCR-RFLP. No período analisado, foi observada diminuição de 59,7% dos casos de LTA no SSMG e de até 25,7% no VRD. A forma clínica cutânea foi a predominante, com 91,9 e 93,6% no SSMG e VRD respectivamente. No SSMG, a maioria dos pacientes (51,7%) tem residência urbana, enquanto que no VRD a rural foi predominante (95,7%). No SSMG houve positividade em 55,6, 10,7 e 19,5% dos casos de LTA no Teste de Montenegro (TM), nos exames parasitológico e histopatológico, respectivamente. No VRD a positividade dos casos de LTA foi de 84,0 no TM e 73,0% no exame parasitológico. A alta por cura com a medicação empregada variou de 71,8 a 92,0% no SSMG e chegou a 78,0% no VRD. Dos 39 pacientes sugestivos, 32 foram confirmados para LTA. As extrações permitiram observar que mesmo a partir de DNA total degradado foi possível detectar kDNA de Leishmania. Nas amostras sugestivas, a positividade com 13Y/13Z e 150/152 foi de 56,4 e 76,9% respectivamente. Nos pacientes confirmados para LTA, a positividade com 13Y/13Z foi de 68,7% e com 150/152 foi de 93,7%. O emprego dos iniciadores 150/152 foi mais viável, o que não descarta o uso de 13Y/13Z, dada a expressiva positividade alcançada em amostras que requerem extração simplificada de DNA e com baixo custo. A PCR-RFLP possibilitou a identificação de L. (V.) braziliensis nas amostras biológicas dos pacientes com LTA. Os dados do presente trabalho também reforçam a necessidade de ações que estabeleçam um centro de referência no diagnóstico e tratamento da LTA no SSMG. / The american tegumentary leishmaniasis, (ATL), one of clinic forms of leishmaniasis, is in expansion in Brazil and represent important cause of morbidity for populations who live in endemic areas. Profile epidemiological studies, health services and treatment are needs to establish strategies of disease control, as well as to employ new tools laboratorials, like PCR ones. This research evaluated the epidemiological aspects, diagnoses and treatment from patients with ATL from different regions Minas Gerais, beyond to use varied extraction techniques DNA and different primers in PCR to make possible the identification and differentiation of the etiological agents. Additionally, it compared the positivity of the primers addressed to the conserved (150/152) and variable (13Y/13Z) region of the Leishmania kDNA minicircle in biological samples of patients suggestive to ATL. It was to carried out epidemiological studies, diagnoses and treatment of 824 patients with ATL, being 261 from Southern and Southwestern regions of Minas Gerais state (SSMG) and 563 from river Doce valley (VRD). The data were obtained from notification files Regional Health Authorities – RHA of SSMG and from Leishmaniasis ambulatory “Dr. Paulo Araújo Magalhães” at Caratinga city (VRD) between 2002 and 2006. Thirty nine patients from these regions and with suggestive ATL lesions were submitted to laboratorial exams, beyond of the PCR. The DNA samples extracted by heating, phenol/ chloroform technique, proteinase K and by Wizard kit, and later used in the PCR and PCR-RFLP. In the period analyzed, it was observed decrease of 59.7% of ATL cases in SSMG and of up to 25.7% in VRD. The cutaneous clinic form was predominant with 91.9 and 93.6% in SSMG and VRD respectively. The greatest part of the patients from SSMG has urban residence (51.7%) while in VRD the rural was predominant (95.7%). In the SSMG there was positivity in 55.6, 10.7 and 19.5% of ATL cases in the Montenegro test (MT), parasitological and histopatological exams, respectively. In the VRD the positivity was 84.0 in the MT and 73.0% in the parasitological exam. Discharge from the treatment due to cure varied of 71.8 to 92.0% in the SSMG and reached 78.0% in VRD. From the 39 suggestive patients, 32 were confirmed to ATL. The DNA extractions allowed observing that even starting from total degraded DNA was possible to detect kDNA of Leishmania. In the suggestive samples, the positivity of DNA with 13Y/13Z and 150/152 was about 56.4 and 76.9% respectively. In the confirmed patients to ATL, the positivity to 13Y/13Z was about 68.7% and to 150/152 was of 93.7%. The employment of the primers 150/152 was viable, what doesn't discard the use of 13Y/13Z, given the expressive positivity reached in samples that request simplified extraction of DNA and with low cost. PCR-RFLP made possible the identification of L. (V.) braziliensis in the patients' biological samples with LTA. The data of the present work they also reinforce the need of actions that establish a reference center in the diagnosis and treatment of LTA in SSMG. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Caracterização de isolados de Candida spp de cavidade bucal quanto aos aspectos fenótípicos e moleculares e obtenção de mutantes heteroresistentes à antotericina B e fluconazolCLAUDINO, André Luís Ribeiro 13 July 2007 (has links)
Nos últimos anos o aumento na incidência de candidose superficial e invasiva causada por
espécies emergentes resistentes tem sido atribuído a disseminação do uso de antibióticos e
agentes imunossupressores. O aumento de Candida não-albicans deve-se ao incremento de
pacientes imunodeprimidos, neutropênicos, recém nascidos de baixo peso, procedimentos
invasivos e iatrogenia. Todos esses fatores permitem que agentes pouco virulentos, causem
doenças. Vários estudos bioquímicos e moleculares foram realizados no sentido de elucidar as
causas da resistência a antifúngicos em leveduras. Os objetivos do presente estudo foram:
estudar leveduras do gênero Candida isoladas da cavidade bucal de pacientes com e sem HIV;
comparação de métodos de identificação dos isolados; determinar o perfil de sensibilidade aos
antifúngicos anfotericina B e fluconazol pelas metodologias de microdiluição CLSI, AFSTEUCAST
e difusão em agar Etest e obter amostras heterorresistentes à anfotericina B e ao
fluconazol por indução e seleção. Foram identificados 22 isolados de C. albicans, 3 de C.
tropicalis, 3 de C. parapsilosis e 2 de C. glabrata segundo o método clássico. A identificação
por métodos morfológicos e bioquímicos foi 100% concordante com o método molecular
(PCR), tanto pela amplificação dos primers espécies-específicos (C. albicans e C.
dubliniensis) quanto pela comparação do tamanho do fragmento amplificado pelos primers da
região ITS2. A correlação entre a metodologia Etest e os dois métodos de microdiluição foi
alta. Todas as amostras selvagens foram sensíveis a anfotericina B (CIM£2,0μg/mL) e apenas
um isolado (3,33%) de C. tropicalis foi resistente ao fluconazol (CIM³64,0μg/mL por CLSI e
CIM³64,0μg/mL por AFST-EUCAST). Foram selecionadas amostras heteroresistentes
através da pressão seletiva utilizando meio adicionado de fluconazol (8μg/mL) e em seguida
com anfotericina B (1,0μg/mL). A pressão seletiva também foi feita iniciando-se com
anfotericina B e em seguida fluconazol. Paralelamente, as amostras selvagens foram
submetidas à indução de resistência através do cultivo primeiro em concentrações crescentes
de fluconazol (16,0; 32,0; 64,0; 128 e 256mg/mL) e em seguida com anfotericina B (0,5; 1,0;
1,5; 2,0; 2,5 e 3,0mg/mL). Os testes também foram feitos invertendo-se os antifúngicos,
iniciando com anfotericina B e depois fluconazol. Foram obtidas três amostras
heterorresistentes a fluconazol, das quais duas foram por indução (C. glabrata e C. tropicalis)
e uma por seleção (C. tropicalis.). Ambas amostras de C. tropicalis foram originadas de um
mesmo isolado selvagem. Nenhuma amostra mudou seu perfil de sensibilidade para
anfotericina B, apesar de alguns isolados apresentarem capacidade de crescimento em várias
concentrações deste antifúngico (1,0 a 3,0μg/mL). Após cultivos sucessivos em meio livre de
droga, somente a cepa obtida por seleção manteve seu fenótipo de resistência. As cepas
selvagens e suas mutantes apresentaram o mesmo perfil quando comparadas pela amplificação
da região ITS2. Conclui-se que, embora a maior parte das espécies estudadas seja C. albicans
(73,33%) todas as amostras heteroresistentes ao fluconazol obtidas foram Candida nãoalbicans
(10%). As duas cepas mutantes obtidas pelo mesmo isolado inicial possuem,
possivelmente, mecanismos múltiplos e distintos de resistência que, associado ao isolado,
conferem resistência e/ou adaptabilidade à levedura frente ao antifúngico. / In the last years the increase in the incidence of superficial and invasive candidosis caused by
resistant species has been attributed to the use of antibiotics and immunosuppression drugs.
The increase do Candida non-albicans isolate due to the increment of patient
immunocompromised, immunodeficiency virus infection, neutropenic, newly born of low
weight, procedures invasives and iatrogenic. All those factors allow that agents a little
virulent, caused diseases. Several biochemical and molecular studies have been accomplished
for elucidating the causes of resistance in yeasts. The aims of the present research were: to
study yeasts of the gender Candida isolated of the buccal cavity patients with and without
HIV; comparison of methods of identification of isolates ; to determine the sensibility profile
to the amphotericin B and fluconazole antifungals by microdilution methodologies CLSI,
AFST-EUCAST and Etest difusion agar and acquisition of heteroresistent samples to
amphotericin B and to fluconazole by induction and selection experiments. Were
identifications 22 C. albicans, 3 C. tropicalis, 3 C. parapsilosis and 2 C. glabrata through the
classic methods. The identification by morphologic and biochemisth was 100% agreement
with the results obtained by the molecular method (PCR), them by the amplification of the
species with specific primers (C. albicans and C. dubliniensis) as for the comparison of the
size of the fragment amplified by the primers of region ITS2. The correlation among the
methodology Etest and the two microdilution methods (CLSI and AFST-EUCAST) was higth.
All samples wilds were suscetibility to amphotericin B (CIM£2,0μg/mL) and just one isolate
(3,33%) of C. tropicalis was resistent to fluconazole (CIM³64,0μg/mL por CLSI e CIM³
64,0μg/mL por AFST-EUCAST). Resistant strains were obtained by selective pressure using
a medium amended with Fluconazole (8 μg/mL) and after that a medium with Amphothericin
B (1.0 μg/mL). The selective pressure was also performed using Amphothericin B at first
followed by Fluconazole. Similarly, wild samples were submitted to the induction of
resistance by culturing in increasing concentrations of Fluconazole (16.0; 32.0; 64.0; 128 e
256mg/mL) followed by culturing in increasing concentrations of Amphotericin B (0.5; 1.0;
1.5; 2.0; 2.5 e 3.0mg/mL) and, after that, inverting the antifungal agents: Amphotericin B at
first, followed by Fluconazole. Three samples heteroresistant to Fluconazole were obtained,
two of which obtained by induction (C. glabrata and C. tropicalis) and one by selection (C.
tropicalis.). Both C. tropicalis samples were originated from te same wild strain.None sample
chamged its susceptibility profile to amphotericin B, in spite of some isolates that presented
capacity of growth in several concentrations of this antifungals (1,0 a 3,0μg/mL). After
successive cultivations in medium free of drugs, only the sample obtained by selection
maintained your resistance phenotype. The wild samples and their mutants presented the same
profile when compared by the amplification of the region ITS2. In conclusion, although most
of the studied species were C. albicans (73,33%), all the fluconazol-heteroresistant samples
obtained were Candida no-albicans (10%). The two mutant samples obtained from the same
initial isolate possibly possess multiple and different mechanisms of resistance that, associated
to the isolate, confer resistance and/or adaptability to the yeast in front to antifungal. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Avaliação do efeito da membrana de látex de Hevea brasiliensis no reparo de defeito da parede abdominal de ratoFERREIRA, Pablo Gomes 15 February 2007 (has links)
A hérnia incisional (HI) é uma das complicações tardias das laparotomias, podendo
acometer até 20% dos pacientes operados. A utilização de próteses representou um avanço
sem precedentes no reparo da HI. Contudo, não há ainda tratamento ideal para o reparo e
prevenção desse mal. A membrana de látex da seringueira demonstrou atividade cicatrizante e
angiogênica em estudos in vitro e in vivo. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito
da membrana de látex sobre o reparo da parede abdominal lesada de ratos. Foram utilizados
ratos machos Wistar com peso de 340 ± 20 g, nos quais foi induzido um defeito na parede
abdominal de 1 x 2 cm, tendo a linha alba ao centro. Os animais foram divididos em dois
grupos experimentais: Controle (sem reparo) e Látex (reparo com a membrana) e submetidos
à eutanásia aos 3, 5, 7 e 28 dias após a indução do defeito. Os fragmentos da parede
abdominal foram retirados, divididos em duas partes e utilizados para análise histológica e
bioquímica. A análise histológica revelou que o látex induziu a proliferação de vasos
sangüíneos, o aumento de fibras musculares novas e a regeneração tecidual. Observou-se
ainda o aumento da densidade de fibroblastos e deposição de colágeno, o que é importante
para determinar o aumento da resistência a forças tensoras no tecido cicatricial, evitando a
deiscência da ferida e a instalação da HI. Houve aumento gradual de deposição e organização
das fibras colágenas durante o período de estudo. O látex induziu ainda a expressão dos
fatores de crescimento celular, FGF-2 e TGFb; a diminuição da expressão de IGF e PDGF e
não alterou a expressão de TGFa. A regeneração tecidual requer a influência de fatores de
crescimento celular e uma seqüência de eventos celulares, que resultam na regulação celular,
com proliferação, sobrevivência e diferenciação. Assim, a modulação de fatores de
crescimento pela membrana de látex, parece ter contribuído positivamente para a regeneração
do defeito da parede abdominal. Conclui-se que a membrana de látex da seringueira, quando
usada para reconstrução da parede abdominal de ratos, permite a regeneração tecidual, a
formação de tecido conjuntivo fibroso de reparação, podendo ser utilizada efetivamente na
hernioplastia. / The incisional hernia (IH) formation is one complication after abdominal surgery,
affecting up to 20% of the reoperated patients. The use of prosthesis increased the repair of
IH, however there is not yet an ideal treatment to repair or prevent the IH. The latex
membrane from rubber tree has demonstrated to be cicatrizing and angiogenic, both in in
vitro and in vivo studies. The aim of this work was to evaluate the effect of the latex
membrane on the repair of the injuried abdominal wall of rats. Male Wistar rats with 340 ± 20
g were used and it was induced an abdominal wall defect with 1 x 2 cm and the alba line at
the centre. The animals were divided into two experimental groups: Control (without repair)
and Latex (with membrane repair) and were euthanized at 3, 5, 7 e 28 days after the defect
induction. The abdominal wall fragments were removed, divided into two parts and used for
histological and biochemical analysis. The histological analysis revealed that the latex
membrane induced blood vessels proliferation, new muscle fiber formation and tissue
regeneration. It was also observed a fibroblast density and collagen deposition increasing that
is important to increase the resistance to tension forces and prevent the incision dehisce and
IH formation. There was also a gradual increasing on the deposition and organization of
collagen fibers during the experiment. The latex membrane induced the expression of cellular
growth factors, FGF-2 and TGFb; decreased the expression of IGF and PDGF and did not
alter the TGFa expression. Tissue regeneration requires the influence of growth factors in a
sequence of cellular events that results on the cell regulation, proliferation, surviving and
differentiation. The modulation of growth factor by the latex membrane may have contributed
positively to the abdominal wall defect regeneration. It can be concluded that the latex
membrane from rubber tree, when used to reconstruct the rat abdominal wall, allows tissue
regeneration, fiber connective tissue formation and may be used effectively in hernioplasty. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Efeito da associação da doxiciclina com enxerto autógeno particulado no reparo ósseo: estudo histomorfométrico em calvária de ratosLUCATELI, Ribamar Lazanha 14 December 2015 (has links)
O objetivo do estudo foi avaliar, por meio de análise descritiva e histomorfométrica, o efeito da doxiciclina a 10% com gel de natrosol associada ao enxerto autógeno em relação ao reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico em calvária de ratos. Um total de cinquenta animais foram selecionados. Um defeito de 5 mm de diâmetro foi confeccionado com trefina na calvária dos animais. Os animais foram divididos em 5 grupos (n= 10) de acordo com o material utilizado para preencher o defeito: G1 – Sem preenchimento (CO - coágulo sanguíneo/ controle); G2 – Doxiciclina a 10% em gel de natrosol (DOX); G3 – Gel de natrosol (NAT); G4 – Osso autógeno (OA) e G5 – Osso autógeno associado a doxiciclina a 10% em gel de natrosol (OA + DOX). Os animais foram mortos após 4 e 8 semanas pós-operatório. Foram realizadas análises qualitativas e quantitativas. A neoformação óssea foi calculada como a porcentagem de osso compreendido na área total do defeito original. A análise estatística foi realizada utilizando os testes de ANOVA e Tukey (p < 0,05). O novo osso formado limitou-se às bordas dos defeitos cirúrgicos. Na análise das 4 e 8 semanas, o grupo OA + DOX apresentou a maior porcentagem de neoformação óssea (38,59% e 47,86%, respectivamente), com diferença estatística em relação ao grupo CO (19,52%) no período de 4 semanas e em relação aos grupos CO (18,80%), DOX (22,05%) e NAT (15,89%) no período de 8 semanas (p < 0,05). O estudo permitiu concluir que a associação da doxiciclina a 10% com osso autógeno aumenta significativamente o reparo ósseo em defeitos de tamanho crítico em calvária de ratos em relação aos defeitos não preenchidos (CO) e preenchidos com DOX e NAT. / The aim of the study was to evaluate, descriptively and histologically the effect of association of 10% doxycycline in natrosol gel with autogenous bone on bone repair of simulated critical-size defects in rat calvaria. A total of fifty albino rats were selected. A 5-mm diameter defect was created in the calvarium of each animal. The animals were divided into 5 groups (n = 10) according to the material used to fill the defect: G1 – Defect unfilled (CO - blood clot/ control); G2 – 10% Doxycycline in natrosol gel (DOX); G3 – Natrosol gel (NAT); G4 – Autogenous bone (OA) and G5 – Autogenous bone associated with 10% Doxycycline in natrosol gel (OA + DOX). The animals were killed at 4 and 8 weeks postoperatively. Qualitative and quantitative analyses were performed. The amount of new bone formed was calculated as a percentage of bone inside the total area of the original defect. Statistical analysis was performed using ANOVA and Tukey tests (p < 0.05). New bone formation was limited to the margins of the defect with no complete bone repair for all groups. At 4 and 8 weeks of analysis, the group OA + DOX showed high percentage of bone formation (38.59% and 47.86%, respectively), with statistical difference in comparison with the group CO (19.52%) at 4 weeks and with the groups CO (18.80%), DOX (22.05%) and NAT (15.89%) at 8 weeks (p < 0.05). The study suggest that the association of 10% doxycycline with autogenous bone improve significatively bone healing in critical-size defects in rat calvaria in comparison to defects not filled (CO) and filled with DOX and NAT.
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Estudo da resposta pulpar após o uso de diferentes materiais capeadores em pulpotomiasJUNQUEIRA, Marina Azevedo 24 November 2015 (has links)
O objetivo deste estudo foi avaliar histologicamente a reação inflamatória do tecido pulpar de molares de ratos após pulpotomia com MTA branco e Sulfato Férrico à 15,5%, nos períodos de 24, 48 e 72 horas e a resposta clínica, radiográfica e histológica do complexo dentino-pulpar de dentes decíduos humanos até 18 meses da realização de pulpotomias com os mesmos agentes capeadores. Foram utilizados 26 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente em 2 grupos (MTA e Sulfato Férrico) e divididos em 3 subgrupos, conforme o tempo experimental (24, 48 e 72 horas). Os dentes foram preparados e posteriormente corados com Hematoxilina e Eosina (HE) para realização da análise histológica. Todos os dentes avaliados mantiveram vitalidade pulpar no remanescente radicular. Em ambos os grupos observou-se a presença de vasos sanguíneos hiperêmicos e neutrófilos em concentrações variadas, caracterizando diferentes graus de inflamação no terço cervical da polpa radicular. O infiltrado inflamatório foi maior no período de 24 horas, havendo uma regressão no período de 48 e 72 horas após o tratamento. Para o estudo em humanos, 31 molares decíduos inferiores ou superiores de 19 crianças com idades entre 6 e 9 anos de idade foram selecionados, distribuídos randomicamente em dois grupos (MTA e Sulfato Férrico) e avaliados clínica e radiograficamente nos períodos de 3, 6, 12 e 18 meses. Os dentes que estavam no período de esfoliação foram extraídos e preparados e corados para análise histológica. Todos os dentes tratados com MTA apresentaram sucesso clínico e radiográfico ao longo do período experimental. Um dente tratado com Sulfato Férrico apresentou lesão interradicular aos 18 meses. Nenhum dente mostrou sinais de mobilidade, fístula, inflamação ou inchaço nos tecidos gengivais. Histologicamente, os dentes tratados com MTA apresentaram formação de barreira dentinária e tecido conjuntivo subjacente com características de normalidade. Alguns dentes tratados com Sulfato Férrico apresentaram necrose tecidual, inflamação crônica e estenose radicular; outros apresentaram um tecido conjuntivo sadio e estenose radicular. Com base nos resultados deste estudo podemos concluir que ambos os materiais foram eficazes para pulpotomias em dentes decíduos e a reação inflamatória gerada foi similar e regrediu com o passar do tempo em molares de ratos. / The purpose of the present study was to evaluate histologically the inflammatory reaction of rat molar pulp tissue after pulpotomy performed with white MTA and 15.5% Ferric Sulfate, at 24, 48 and 72 hours, as well as the clinic, radiographic and histological response of the dentin-pulp complex of human primary molars until 18 months after pulpotomy with the same capping agents. Twenty six Wistar rats were used, randomly distributed into 2 groups (MTA and Ferric Sulfate) and divided into 3 subgroups, according to the experimental period (24, 48 and 72 hours). The teeth were prepared and subsequently stained with hematoxylin and eosin (HE) to perform histological analysis. All the teeth evaluated preserved the vitality of the remaining radicular pulp. Hyperemic blood vessels and variable concentrations of neutrophils were observed in both groups, which characterized different levels of inflammation in the cervical third of the radicular pulp. Larger inflammatory infiltrate was detected at 24 hours, which decreased after 48 and 72 hours. For the human study, 31 lower or upper primary molars from 19 children aging between 6 and 9 years old were selected, randomly distributed into two groups (MTA and Ferric Sulfate) and clinically and radiographically evaluated at 3, 6, 12 and 18 months. The teeth at the exfoliation period underwent surgical removal and were prepared and stained for histology. All of the teeth treated with MTA presented clinical and radiographic success over the experimental period. One tooth treated with Ferric Sulfate presented interradicular lesion at 18 months. None of the teeth had mobility, fistula, inflammation or swelling in the gingival tissue. Histologically, the teeth treated with MTA presented dentin barrier formation and subjacent connective tissue with normal features. Some teeth treated with Ferric Sulfate had tissue necrosis, chronic inflammation and radicular stenosis; other teeth presented normal connective tissue and radicular stenosis. Taken together, our results allow us to conclude that both materials were effective for pulpotomy of primary teeth and caused similar inflammatory reaction, decreasing over time in rat molars. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Ensino-aprendizagem sobre diagnósticos, intervenções e resultados de enfermagem, de acordo com a CIPE®, utilizando o ambiente virtual de aprendizagemAVELINO, Carolina Costa Valcanti 09 November 2015 (has links)
A educação a distância é uma modalidade de ensino que se encontra em expansão no país a qual aliada aos avanços tecnológicos podem oportunizar uma aprendizagem mais motivadora, estimulante e atrativa. Isso justifica a realização do presente estudo, que teve como objetivo principal avaliar o processo de ensino-aprendizagem de graduandos, pós-graduandos e profissionais enfermeiros sobre diagnósticos, intervenções e resultados de enfermagem, de acordo com a CIPE®, utilizando o ambiente virtual de aprendizagem. Trata-se de uma pesquisa mista realizada durante o período de setembro a novembro de 2014 junto a 25 graduandos de enfermagem e 26 profissionais enfermeiros, totalizando uma amostra de 51 participantes divididos em dois grupos na Plataforma Moodle e nos encontros presenciais, cada um com uma tutoria a distância. Os recursos tecnológicos e as estratégias pedagógicas utilizadas foram: Wiki, Fórum, material de apoio didático em formato de livro virtual, vídeo de animação e Método do Arco de Maguerez. Para a avaliação quantitativa foram aplicados um questionário de caracterização dos participantes, um de avaliação do curso, recursos e estratégias adotados e o Inquérito COLLES. Esses dados foram tabulados e analisados por meio do Software SPSS, versão 17.0 para Windows. E para a avaliação qualitativa foram realizados quatro grupos focais com 8 a 12 participantes. Após a realização dos grupos focais, as entrevistas gravadas foram transcritas e submetidas à análise de conteúdo. Houve predomínio do sexo feminino (92,2%), com média de idade de 29 anos, 58,8% já realizaram curso de informática, 88,2% possuem notebook, 98% acessam a internet em casa, 92,2% utilizam a internet para estudo, 78,4% já realizaram algum curso ou disciplina no ambiente virtual, 90,2% conheciam a Plataforma Moodle e apenas 25,5% conheciam a CIPE®. Após a aplicação do curso, os participantes avaliaram como muito adequados a estrutura do ambiente virtual, os recursos tecnológicos e as estratégias pedagógicas utilizadas, com associação estatística significativa entre o wiki com o vídeo de animação (p=0,002) e o Método do Arco de Maguerez (p=0,044); entre o fórum com o tempo disponibilizado (p=0,009) e o material de apoio didático (P<0,001); entre o conhecimento adquirido sobre a CIPE® com o wiki (p=0,045), o material do apoio didático (p=0,016), o método do arco (p=0,014) e o vídeo de animação como estratégia mais motivadora (p=0,01); e entre a preferência em utilizar o ambiente virtual com o vídeo de animação (p=0,001) e as maiores idades (p=0,01). Na análise de conteúdo emergiram quatro categorias temáticas: inovação na aplicação de recursos tecnológicos, educação a distância na formação profissional e educação permanente, o processo de ensino-aprendizagem sobre a CIPE® de forma colaborativa e fatores relacionados ao sucesso do curso. Os resultados encontrados na realização desta pesquisa podem servir de estímulo para a qualificação de estudantes de enfermagem e profissionais enfermeiros no uso da CIPE®, na prática clínica, particularmente na atenção primária à saúde, uma vez que o curso mostrou-se ser uma potencial ferramenta pedagógica de ensino e aprendizagem dos enunciados diagnósticos, intervenções e resultados de enfermagem, no ambiente virtual de aprendizagem, a partir de uma linguagem padronizada, que confere cientificidade e legitimidade ao cuidado de enfermagem. / Distance education is an educational modality that is expanding in the country and that, coupled with technological advances, can generate an opportunity of learning more motivating, stimulating and attractive. This justifies conducting this study, which aimed to evaluate the teaching-learning process of undergraduate students, graduate students and professionals in the nursing field about diagnoses, interventions and nursing outcomes, according to ICNP®, using the virtual learning environment. It is a mixed survey carried out during the period of September-November 2014 along with 25 nursing students and 26 graduated nurses, totaling a sample of 51 participants split into two groups on the Moodle platform and in-person meetings. This course featured a coaching distance for each group. The following technological resources and pedagogical strategies have been used: wiki, forum, didactic support material in virtual book format, animation video and Arch of Maguerez method. For the quantitative assessment were applied a questionnaire for participants characterization, a questionnaire for course assessment, adopted resources and strategies and the COLLES Enquiry. The software SPSS for Windows v17.0 has been used to tabulate and analyze the data. For the qualitative assessment, four focus groups were conducted with 8-12 participants. After conducting the focus groups, the recorded interviews were transcribed and subjected to content analysis. There was predominance of women (92.2%) with mean age of 29 years, 58.8% already held computer course, 88.2% have a notebook, 98% access the Internet at home, 92.2% use the internet to study, 78.4% have had some course or subject in the virtual environment, 90.2% knew the Moodle platform and only 25.5% knew the ICNP®. After applying the course, the participants assessed how well suited the structure of the virtual environment, technological resources and teaching strategies that were used. Considering the statistically significant association between: wiki with animated video (p=0.002) and Arch of Maguerez method (p=0.044); forum with the available time (p=0.009) and teaching support material (P<0.001); knowledge acquired on the ICNP® with wiki (p=0.045), teaching support material (p=0.016), arch method (p=0.014) and animation video as more motivating strategy (p= 0,01); and preferably use of the virtual environment with video animation (p=0.001) and higher ages (p=0.01). In the content analysis emerged four themes: innovation in the application of technological resources, distance education in professional education and lifelong learning, process of teaching-learning about ICNP® collaboratively, and factors related to the success of the course. The results found in this research can serve as a stimulus for qualifying nursing students and professional nurses in the use of ICNP® in clinical practice. Particularly in primary health care, as the course turned out to be a potential educational tool for teaching and learning of listed diagnoses, interventions and nursing outcomes in the virtual learning environment, based on a standardized language, which provides legitimacy and scientific to the nursing care. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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A práxis gerencial do enfermeiro responsável técnico de instituições hospitalares: o exercício da liderançaMOTTA, Ana Leticia Carnevalli 03 December 2015 (has links)
Este estudo tem por objetivo analisar na práxis gerencial do enfermeiro responsável técnico
de instituições hospitalares o exercício da liderança para com a sua equipe. Aprovado pelo
Comitê de Ética em Pesquisa da UNIFAL-MG, Parecer nº 795.401. Estudo de natureza
qualitativa com abordagem na Hermenêutica Dialética, realizado com 15 enfermeiros,
responsáveis técnicos de instituições hospitalares, de 8 cidades do sul de Minas Gerais,
selecionados a partir da Técnica Snowball Sampling. A coleta de dados foi realizada no
período de outubro de 2014 a fevereiro de 2015, utilizando a entrevista semi estruturada, com
a seguinte questão norteadora “como você, na função de responsável técnico, conduz no dia a
dia a liderança sobre os seus colaboradores”. Utilizou-se a análise de conteúdo, elegendo-se 3
categorias empíricas: a razão de ser do hospital e a força do modelo biomédico; o exercício da
liderança face às dimensões do trabalho da enfermagem e, a percepção do enfermeiro
responsável técnico sobre sua atuação como líder. Considera-se que o (a) enfermeiro (a)
responsável técnico (a) respaldado pela Lei do exercício profissional, se depara com diversos
desafios relacionados à influência histórica, formação curricular e ao poder do modelo
assistencial clínico vigente, no exercício da liderança para com a sua equipe, na sua práxis
gerencial. Constata- se assim que o enfermeiro responsável técnico diante dos desafios e
percalços leva consigo o valor do cuidar para a pessoa humana e assim conseguem mobilizar
e envolver os profissionais de enfermagem transformando o cotidiano de trabalho
positivamente em prol da integralidade da assistência. Apesar disto há que se destacar o
longo caminho a ser percorrido para que a enfermagem atue por meio de uma gestão
assistencial plena, linear e homogênea, e este caminho pode ser menos tortuoso se incentivado
pela instituição hospitalar empregadora. / This study aims to analyze the managerial practice of the nurse technician in charge of
hospitals exercise leadership towards its staff. Approved by the Research Ethics Committee of
UNIFAL-MG, Opinion No. 795 401. Qualitative study approach to hermeneutics dialectic,
carried out with 15 nurses, technicians hospitals charge of 8 cities in southern Minas Gerais,
selected from the Technical Snowball Sampling. Data collection was conducted from October
2014 to February 2015, using a semi-structured interview, with the following guiding
question "how do you, the responsible technical function, leads the day-to-day leadership over
its employees”. We used content analysis, electing to three empirical categories: the reason
for the hospital and the strength of the biomedical model; exercise leadership in the face of
the nursing work dimensions, and the perception of the technician responsible nurse about
your role as leader. That it is considered (a) nurse (a) technical manager (a) backed by the
professional practice law, is faced with many challenges related to historical influence,
training curriculum and the power of the current clinical care model, to exercise leadership to
with its staff in its management practice. Reports say as soon as the technical lead nurse
facing the challenges and pitfalls carries the value of caring for the human person and thus
can mobilize and involve nursing professionals transforming the daily work positively in
favor of complete assistance. Despite this it is necessary to highlight the long way to go to the
nursing act through a full assistance management, linear and homogeneous, and this way may
be less tortuous be encouraged by the employing hospital. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Observatório de gestão hospitalar: educação permanente da equipe de enfermagem e acreditação hospitalarDOMINGUES, Adriana Lopes 04 December 2015 (has links)
A Acreditação Hospitalar é um método de avaliação de caráter voluntário e tem se
apresentado como uma importante ferramenta de gestão, constituindo-se, essencialmente de
um processo educativo. A Educação Permanente é uma forma de compartilhar conhecimentos
com a equipe multidisciplinar tornando o profissional sujeito ativo no processo de ensino/
aprendizagem e permitindo o incremento da qualidade da assistência ao usuário do serviço de
saúde. Trata-se de um estudo de caso descritivo e documental, de abordagem quantitativa,
com o objetivo geral de verificar como a participação do processo de Acreditação Hospitalar
impacta nas ações de Educação Permanente. O cenário foi uma instituição hospitalar privada
do Sul de Minas Gerais Acreditada nível 1 em 2013. Participaram desse estudo 7 enfermeiros,
33 técnicos de enfermagem e 1 auxiliar de enfermagem. A coleta de dados documental foi
realizada após a aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa da Universidade Federal de
Alfenas (Processo nº 38738214.3.0000.5142). Como instrumentos de pesquisa foram
utilizados questionários semi-estruturados e roteiros sistemáticos de coleta de dados
documentais. Os resultados evidenciaram que o processo de Acreditação interferiu nas
educações permanentes e treinamentos com aumento da quantidade total, abrangendo toda
equipe de saúde como instrutores e receptores destas ações, englobando assuntos pertinentes
conforme requisitos da Organização Nacional de Acreditação. A maioria da equipe de
enfermagem tem conhecimento sobre o processo de Acreditação, sendo os enfermeiros atores
mais relevantes. Pode-se concluir que o processo de Acreditação Hospitalar induziu um
incremento das ações educativas voltadas, principalmente, para a segurança do paciente, do
trabalhador e qualidade da assistência à saúde, sendo os profissionais enfermeiros os mais
envolvidos em todo o processo. / The Hospital Accreditation is a voluntary assessment method and has emerged as an
important management tool, being primarily an educational process. The Continuing
Education is a way to share knowledge with the multidisciplinary team making the active
subject in professional teaching / learning process and allowing an increase in the quality of
care to users of the health service. It is a descriptive case study and documentary with a
quantitative approach, with the overall objective to see how the participation of the Hospital
Accreditation process impacts the actions of Continuing Education. The setting was a private
hospital in the South of Minas Gerais Accredited level 1 in 2013. participated in this study 7
nurses, 33 nursing technicians and one nursing assistant. The collection of documentary data
was conducted after approval by the Ethics Committee of the Federal University of Alfenas
(Process nº 38738214.3.0000.5142). As instruments of reserch were used semi-structured
questionnaires and systematic routes gathering documentary evidence. The results showed
that the accreditation process interfered with permanent educations and trainings to increase
the total amount, covering all health staff as trainers and receivers of these actions, including
pertinent issues as requirements of National Accreditation Organization. Most of the nursing
staff is knowledgeable about the accreditation process, with nurses most relevant actors. It can
be concluded that the Hospital Accreditation process induced an increase in educational
activities geared mainly to patient safety, worker and quality of health care, and the
professional nurses the most involved in the whole process.
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Açúcar no sangue: estado doente na perspectiva da pessoa com diagnóstico biomédico de diabetes mellitusGOMES, Daisy Moreira 12 February 2016 (has links)
Este estudo teve como objetivo compreender os significados da doença na perspectiva de pessoas com diagnóstico biomédico de Diabetes Mellitus. Para tal compreensão, adotamos o referencial teórico da Antropologia Interpretativa e o método Etnográfico. Participaram deste estudo dezesseis pessoas com diagnóstico biomédico de Diabetes Mellitus. Foram respeitados os preceitos éticos, como a aprovação do estudo pelo Comitê de Ética e assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido pelos participantes. Estudo desenvolvido no período de agosto de 2014 a outubro de 2015, em visita domiciliária, por meio de entrevistas em profundidade gravadas, observação participante e de anotações em diário de campo. A análise e a interpretação foram empreendidas a partir do primeiro capítulo do livro de Geertz, Uma Descrição Densa: Por uma Teoria Interpretativa da Cultura. Dessa análise, constatamos uma alternância entre os estados doente e não doente, motivo pelo qual denominamos como eixo transversal: Autopercepção de um estado doente e dos eixos horizontais: Significado da doença e Representação cultural de cuidado do estado doente. Apreendemos que os significados do Diabetes Mellitus se relacionam à presença do açúcar, problema de açúcar no sangue, sangue grosso e doença silenciosa. A causalidade da doença é conferida a fatores externos como uma entidade que ataca e esparrama, diante de condições como o desejo de Deus, o envelhecimento, os efeitos dos medicamentos e dos alimentos e o nervoso. O estado doente é marcado pelo corpo deitado e medicado caracterizado por moleza, bambeza, fraqueza e sensação de mal estar. O significado de cronicidade se relaciona as ameaças constantes que são capazes de ataca-los e produzir o estado doente. As representações de cuidado do estado doente apontam para o tratamento alopático à sua maneira e a dosagem da glicemia capilar, embora haja ambiguidades quanto aos seus benefícios, para dissipar as manifestações corporais, afastar a entidade e reconquistar a saúde. A religião e o sistema popular são valorizados para tratamento e cura. Ao darmos relevância à dimensão social e cultural na perspectiva da pessoa com diagnóstico biomédico de DM, compreendemos o universo imaginativo dentro do qual os significados da doença e a cronicidade são determinados e orientam sua prática. A enfermagem precisa tentar compreender o outro para que não haja confusão e a comunicação seja minimamente compreendida, o que possibilita ofertar cuidados contextualizados na perspectiva da integralidade. / This study aimed to understand the meanings of the disease from the perspective of people with biomedical diagnosis of Diabetes Mellitus. To this end, we have adopted the theoretical understanding of Interpretive Anthropology and Ethnographic method. Sixteen people participated in this study with biomedical diagnosis of Diabetes Mellitus. Been complied with the ethical principles, such as the approval of the study by the Ethics Committee and signing the informed consent by participants. Study developed in the period of August to October 2014 2015, home visit, through in-depth interviews, participant observation and recorded notes in field journal. Analysis and interpretation were undertaken from the first chapter of the book of Geertz, A Dense Description: For an Interpretive Theory of culture. Of this analysis, we can see a toggle between the sick and not sick, why we as transaxle: Self-perception of a sick state and horizontal axes: meaning of disease and cultural Representation of state patient care. We apprehend that the meanings of Diabetes Mellitus relate to the presence of sugar, blood sugar problem, thick blood and silent disease. The causality of disease is given to external factors as an entity that attacks and splashes, before conditions such as the desire for God, the ageing, the effects of medicines and foodstuffs and the nervous. The state is marked by the body lying sick and medicated characterized by a breeze, bambeza, weakness and sick feeling. The meaning of chronicity relates the constant threats that are able to attack them and produce the sick state. The representations of state care sick point to the allopathic treatment in their own way and capillary glucose dosage, although there are ambiguities as to their benefits, to dissipate the bodily manifestations, away from the entity and regaining health. Religion and popular system are valued for treatment and cure. To give importance to the social and cultural dimension in the perspective of the person with biomedical diagnosis of DM, we understand the imaginative universe within which the meanings of illness and chronicity are determined and guide their practice. Nursing needs to try to understand each other so there is no confusion and communication is minimally understood, which makes it possible to offer context and care from the perspective of integrality. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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