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Avaliação de Fitoquímicos e das Atividades Antioxidante Celular e Antiproliferativa do Suco de Araçá-Una (Psidium Eugeniaefolia) e Araçá Morango (Psidium cattleianum var. lucidum).

CUNHA, Débora Cristina da 07 August 2014 (has links)
As frutas nativas brasileiras são excelentes fontes de compostos bioativos que estão associados com uma menor incidência de doenças crônicas como o câncer. O araçá-una (Psidium eugeniaefolia) e o araçá morango (Psidium cattleianum var. lucidum) são encontrados na Mata Atlântica e pertencem à família Myrtaceae, a qual possui algumas frutas com atividades biológicas já estudadas. Esse estudo teve como objetivo determinar o conteúdo total de compostos fenólicos e flavonóides, atividade antioxidante celular e antiproliferativa, além de identificação dos compostos bioativos de extratos de araçá-una e araçá morango. Para a quantificação dos compostos fenólicos utilizou-se o método colorimétrico de Folin-Ciocalteu e para os flavonóides o método colorimétrico modificado. A atividade antioxidante foi determinada pelo ensaio de Capacidade Sequestrante de Radicais Peroxil (PSC) e atividade antioxidante celular (CAA). Atividade antiproliferativa em linhagens de células de carcinoma humano hepático (HepG2), mamário (MCF-7) e pulmonar (A549) foi avaliada pelos métodos MTS e contagem com azul de tripano. A identificação dos compostos fenólicos foi feita através de comatografia liquida de alta performace (CLAE) e ressonância magnética nuclear (RMN). O teor de fenólicos totais e flavonoides do araçá-morango (463,75 ± 23,68 mgGAE /100g de amostra e 107,75 ± 29,35 mgCE/100g de amostra, respectivamente) foram maiores do que no araçá-una (252,08 ± 11,46 mgGAE /100g de amostra e 66,51 ± 4,29 mgCE/100g de amostra, respectivamente) . Nos testes de PSC e CAA o araçá-una (599,11 ± 3,81 mmol de Vit C equiv/100g e 117,91 ± 14,14 mmol QE/100g, respectivamente) e araçá morango (482,26 ± 28,36 mmol de Vit C equiv/100g e 98,72 ± 3,14 mmol QE/100g, respectivamente) apresentaram atividade antioxidante similar, sendo maior que outras frutas já estudadas. Houve diminuição da viabilidade de células MCF-7 tratadas com 50μg/ml de araçá morango no teste de MTS. A contagem com o azul de tripano mostrou uma maior quantidade de células não viáveis em linhagem MCF7 tratadas com 50μg/ml de araçá morango. Na cromatografia líquida não foi encontrado quercetina, caterquina, kampferol, rutina e apigenina em nenhum dos extratos e o teste de RMN mostrou presença de açúcares, aos quais pode haver compostos fenólicos ligados. Dessa forma, esse estudo mostrou que os sucos de araçá-una e araçá morango são boas estratégias de detoxificação por serem fontes de compostos fenólicos e flavonoides, além de apresentarem atividade antioxidante e no caso do araçá morango atividade antiproliferativa relacionada à apoptose de células cancerígenas. / Brazilian native fruits are excellent sources of bioactive compounds that are associated with a lower incidence of chronic diseases such as cancer. The araçá-una (Psidium eugeniaefolia) and araçá morango (Psidium cattleianum var. lucidum) are found in the rainforest and belong to the Myrtaceae family, which has some fruit with biological activities have been studied. This study aimed to determine the total phenolic content and flavonoids, cell antiproliferative and antioxidant activity, and identification of bioactive compounds from extracts of araçá-una e araçá morango. For quantification of the phenolic compounds used the colorimetric method of Folin-Ciocalteu reagent and flavonoids modified colorimetric method. The antioxidant activity was determined by Peroxyl Radical Scavenging Capacity assay (PSC) and cellular antioxidant activity (CAA). Antiproliferative activity of hepatic (HepG2), breast (MCF-7) and lung (A549) carcinoma cells was evaluated by MTS methods and count with trypan blue. The identification of phenolic compounds was performed by high-performace liquid comatografia (HPLC) and nuclear magnetic resonance (NMR). The content of total phenols and flavonoids of araçá morango (463.75 ± 23.68 mgGAE/100g sample and 107.75 ± 29.35 mgCE/100g sample, respectively) were higher than in the araçá-una (252 08 ± 11.46 mgGAE/100 g of sample and 66.51 ± 4.29 mgCE/100g sample, respectively). In tests of the CAA and PSC araçá-una (599.11 ± 3.81 mmol equiv of Vit C/100g and 117.91 ± 14.14 mmol QE/100g, respectively) and araçá morango (482.26 ± 28.36 mmol equiv of Vit C/100g and 98.72 ± 3.14 mmol QE/100g, respectively) showed similar antioxidant activity, which is higher than other fruits have been studied. Decreased the viability of MCF-7 cells treated with 50μg/ml of strawberry guava in the MTS test. The count with trypan blue showed a greater amount of non-viable cells in MCF7 cells treated with 50μg/ml of strawberry guava. In liquid chromatography were not found quercetin, caterquina, kampferol, rutin and apigenin in any of the extracts and the NMR test showed the presence of sugars, which can be linked phenolic compounds. Thus, this study showed that juice of araçá-una and araçá morang are good strategies for detoxification because are sources of phenolic compounds and flavonoids, and show antioxidant activity and in the case of araçá morango antiproliferative activity related to apoptosis of cancer cells. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Estudo farmacognóstico e avaliação das atividades biológicas de Raphanus sativus var. oleiferus Metzg.

SILVA, Ana Flávia da 28 July 2014 (has links)
As espécies da família Brassicaceae são amplamente utilizadas na medicina popular para diversos fins terapêuticos. Pesquisas têm demonstrado que o rabanete (Raphanus sativus L.) contém muitas classes de fitoquímicos biologicamente ativos com propriedades anti-inflamatória, antimicrobiana, antioxidante e antimutagênica. Neste contexto, este estudo teve por objetivos: fornecer parâmetros de qualidade para a droga vegetal; realizar as análises químicas e avaliar as atividades antimicrobiana, leishmanicida e citotóxica do extrato seco e das frações das folhas de Raphanus sativus var. oleiferus Metzg. Inicialmente, realizou-se a triagem fitoquímica preliminar, por meio de testes qualitativos e Cromatografia em Camada Delgada no extrato seco, que permitiram a detecção de compostos como: flavonoides, taninos e terpenos. Posteriormente, o extrato seco e as frações foram analisados em espectrômetro de massas, o que possibilitou a identificação de alguns constituintes químicos, baseando-se na massa molecular e nos mecanismos de fragmentação das moléculas. As análises químicas quantitativas demonstraram que os teores de fenóis nas frações foram superiores à concentração obtida no extrato seco, sendo que os fenóis ficaram mais concentrados na fração butanólica (121,27 mg EAG/g). Os teores de flavonoides nas frações, exceto na fração aquosa, também foram superiores ao obtido no extrato seco, sendo que os flavonoides ficaram mais concentrados na fração acetato de etila (98,02 mg EQ/g). Nas avaliações da atividade antioxidante in vitro, observou-se que a atividade antirradicalar e o poder redutor das frações demonstraram resultados mais significativos em relação ao extrato seco, sendo que a fração acetato de etila apresentou os melhores resultados em ambos os experimentos, com porcentagem de sequestro de radicais DPPH de 83,45% e com porcentagem de redução de íons férrico de 11,34%. A análise da atividade antimicrobiana revelou que o extrato seco teve maior média de halos de inibição frente ao Bacillus subtilis (18,67 mm), sendo considerada uma média estatísticamente superior as produzidas pelas frações (p<0,05). Entretanto, os menores valores da concentração inibitória mínima (CIM) foram obtidos para Micrococcus luteus, sendo que a fração acetato de etila demonstrou menor concentração inibitória mínima (0,1 mg/mL) para esse micro-organismo, sendo considerada a fração mais ativa (80%). A bactéria Micrococcus luteus foi inibida por 50% das frações testadas com concentração inibitória mínima inferior ou igual a 1 mg/mL. O extrato seco e as frações não demonstraram atividade contra as bactérias Gram-negativas, as micobactérias e os fungos, e também não foram ativos contra os parasitos de Leishmania amazonensis. Os estudos demonstraram uma moderada correlação entre os mais baixos valores da CIM e as maiores quantidades de fenóis e de flavonoides, sugerindo que a atividade antimicrobiana não está relacionada somente com esses compostos, porém houve uma forte correlação entre os melhores valores da atividade antioxidante in vitro (pelo método do radical DPPH e pelo método do poder redutor) e as maiores quantidades de fenóis e de flavonoides no extrato e frações avaliados, sugerindo que os compostos fenólicos, especialmente os flavonoides, sejam os principais responsáveis pela atividade antioxidante in vitro da espécie vegetal em estudo. / The species of the Brassicaceae family are widely used in folk medicine for various therapeutic purposes. Research has shown that the radish (Raphanus sativus L.) contains many classes of biologically active phytochemicals with anti-inflammatory, antimicrobial, antioxidant and antimutagenic properties. In this context, this study aimed: to provide the quality parameters for plant drug; perform chemical analyzes and evaluate antimicrobial, antileishmanial and cytotoxic dry extract and fractions from the leaves of Raphanus sativus var. oleiferus Metzg. Initially, there was the preliminary phytochemical screening using qualitative tests and Thin Layer Chromatography in dry extract, which allowed the detection of compounds such as flavonoids, tannins and terpenes. Subsequently, the dry extract and fractions were analyzed in a mass spectrometer, which allowed the identification of some chemical constituents, based on the molecular mass and fragmentation mechanisms of molecules. Quantitative chemical analysis showed that the levels of phenolics in the fractions obtained were higher than the concentration in dry extract, and phenols were more concentrated in the butanol fraction (121,27 mg GAE/g). The content of flavonoids in the fractions, except the aqueous fraction, were also higher than those reported in dry extract, and flavonoids were more concentrated in the ethyl acetate fraction (98,02 mg EQ/g). The evaluation of the antioxidant activity in vitro, it was observed that the antiradical activity and reducing power of the fractions showed most significant results on the dry extract, and the ethyl acetate fraction showed the best results in both experiments, with percentage of sequestration DPPH radical of 83,45% and a percentage reduction of ferric ions 11,34%. The analysis of antimicrobial activity revealed that the dry extract had higher mean inhibition zones against Bacillus subtilis (18,67 mm) and is considered a statistically higher mean those produced by the fractions (p<0,05). The lowest values of minimum inhibitory concentration (MIC) were obtained for Micrococcus luteus, and the ethyl acetate fraction showed lowest minimum inhibitory concentration (0,1 mg/mL) for this micro-organism, is considered the most active fraction (80%). The bacterium Micrococcus luteus was inhibited by 50% of the tested fractions with lower or equal minimum 1 mg/mL inhibitory concentration. The dry extract and fractions do not show activity against Gram-negative bacteria, mycobacteria and fungi, and also were not active against the parasite Leishmania amazonensis. The studies showed a moderate correlation between the lowest MIC values and the highest amounts of phenolics and flavonoids, suggesting that the antimicrobial activity is not related only to these compounds, however there was a strong correlation between the best values antioxidant activity in vitro (by the method DPPH radical and by the method of reducing power) and higher amounts of phenolics and flavonoids in the extract and fractions evaluated, suggesting that phenolic compounds, especially flavonoids, are mainly responsible for the antioxidant activity in vitro plant species under study.
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Avaliação de fitoquímicos e das atividades antioxidante celular e antiproliferativa do suco de grumixama (Eugenia brasiliensis) e do suco de cambuci (Campomanesia phaea).

FERRARI, Angélica Simões 07 August 2014 (has links)
O Brasil está entre os países detentores das maiores biodiversidades do planeta, apresentando uma grande variedade de espécies de frutas nativas, selvagens e/ou exóticas, dentre elas a grumixama e o cambuci, e que são excelentes fontes de compostos bioativos que possuem diversas atividades biológicas. Vários estudos vêm mostrando que as frutas nativas brasileiras, inclusive muitas das espécies pertencentes à família Myrtaceae, apresentam alta concentração de fitoquímicos, exibindo atividades antioxidante e antiproliferativa. Dessa maneira teve-se como objetivo investigar o conteúdo total de fenólicos e o teor de flavonoides, identificar a presença de compostos bioativos e principais açúcares e investigar a atividade antioxidante celular e antiproliferativa dos extratos das frutas grumixama e cambuci. Para a quantificação dos compostos fenólicos, foi utilizado o método colorimétrico de Folin-Ciocalteu e para a quantificação do teor flavonoides, foi utilizado um método colorimétrico modificado. As identificações de compostos bioativos e principais açúcares foram feitas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e Ressonância Magnética Nuclear, respectivamente. A atividade antioxidante celular foi determinada de acordo com o Teste da Capacidade Sequestrante de Radicais Peroxil (PSC) e Ensaio da Atividade Antioxidante Celular (CAA). A atividade antiproliferativa contra linhagem de células cancerígenas HepG2, A549 e MCF7 foi avaliada por meio de ensaio colorimétrico (MTS) e a viabilidade celular por meio da exclusão com o azul de tripano. O total de fenólicos e flavonoides para a grumixama foi 938,21 ± 11,05 mg GAE/100 g de amostra e 133,11 ± 31,21 mg CE/100 g de peso seco da amostra, respectivamente, e para o cambuci foi 367,84 ± 10,79 mg GAE/100 g de amostra e 79,73 ± 15,27 mg CE/100 g de peso seco da amostra, respectivamente. Através dos métodos do PSC e CAA, a grumixama apresentou maior atividade antioxidante (434,50 ± 3,63 μmol de Vitamina C equivalente/100 g de amostra e 93,47 ± 15,25 μmol QE/100 g de amostra, respectivamente) quando comparada ao cambuci (249,54 ± 2,56 μmol de Vitamina C equivalente/100 g de amostra e 19,30 ± 4,07 μmol QE/100 g de amostra, respectivamente). Os cromatogramas da CLAE sugeriram a presença dos flavonoides rutina e quercetina no extrato de grumixama e os espectros de RMN sugeriram a presença de frutose, glicose, sacarose, manitol e manose em ambos os extratos. A viabilidade das culturas HepG2 e A549 não foi afetada pelo tratamento com os extratos. Entretanto, foi observada redução da viabilidade celular nas culturas MCF7 na concentração de 50 μg/mL. O ensaio de viabilidade, determinado por exclusão com azul de tripano, mostrou que o extrato de grumixama na concentração de 50 μg/mL apresenta atividade antiproliferativa sobre a linhagem MCF7 através da indução de morte celular e que a atividade antiproliferativa do extrato de cambuci, na mesma concentração, pode estar relacionada à inibição da proliferação celular. Portanto, atribui-se grande importância às frutas grumixama e cambuci, sugerindo-se que as mesmas podem ajudar a prevenir a incidência de doenças causadas por estresse oxidativo, sendo uma boa estratégia nutricional. / Brazil is among the holders of the greatest biodiversity on the planet countries, presenting a wide variety of native fruits, wild and/or exotic among them grumixama and cambuci, and are excellent sources of bioactive compounds that have diverse biological activities. Several studies have shown that Brazilian native fruits, including many species belonging to the family Myrtaceae has shown high concentrations of phytochemicals, exhibiting antioxidant and antiproliferative activities. Thus, care has to investigate the total phenolic content and the content of flavonoids, identify the presence of bioactive compounds and sugars and investigate the antioxidant and antiproliferative activity of grumixama and cambuci. For quantification of the phenolic compounds was utilized colorimetric Folin-Ciocalteu reagent and to quantify the content of flavonoids a modified colorimetric method was used. The identification of bioactive compounds and sugars was made by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and Nuclear Magnetic Resonance (NMR), respectively. The antioxidant activity was determined according to the test of Peroxyl Radical Scavenging Capacity (PSC) and Cellular Antioxidant Activity (CAA). The antiproliferative activity against lineage of cancer cells HepG2, A549 and MCF7 was assessed by colorimetric assay (MTS) and the cell viability by exclusion of trypan blue. The total phenolics, and flavonoids for grumixama was 938.21 ± 11.05 mg GAE/100 g of sample and 133.11 ± 31.21 mg EC/100 g of dry weight of the sample, respectively, and for the cambuci was 367.84 ± 10.79 mg GAE/100 g of sample and 79.73 ± 15.27 mg EC/100 g of dry weight of the sample, respectively. By the methods of PSC and CAA, the grumixama showed higher antioxidant activity (434.50 ± 3.63 μmol of Vitamin C equivalent/100 g and 93.47 ± 15.25 μmol EQ/100 g of sample, respectively) when compared to cambuci (249.54 ± 2.56 μmol of Vitamin C equivalent/100 g and 19.30 ± 4.07 EQ/100 g of sample, respectively). The HPLC chromatograms suggested the presence of flavonoids quercetin and rutin in the extract of grumixama and the NMR spectra suggested the presence of fructose, glucose, sucrose, mannitol and mannose in both extracts. The viability of HepG2 and A549 cultures was not affected by treatment with the extracts. However, reduction of cell viability was observed on MCF7 cultures at a concentration of 50 mg/mL. The test of viability, determined by trypan blue exclusion, at a concentration of 50 mg/mL, showed that the extract of grumixama has antiproliferative activity on MCF7 lineage by inducing cell death and that the antiproliferative activity of the extract of cambuci, at the same concentration, may be related to inhibition of cell proliferation. Therefore attaches great importance to fruits grumixama and cambuci, suggesting that they can help prevent the incidence of diseases caused by oxidative stress and is a good nutritional strategy. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Análise do perfil global de metilação do DNA e do promotor do fator de necrose tumoral alfa e do interferon gama em pacientes infectados pelo Dengue virus

GOMES, Alessandra Vilas Boas Terra 03 August 2015 (has links)
A dengue é uma infecção viral sistêmica, autolimitada, transmitida para os humanos através da picada de mosquitos fêmeas infectadas do gênero Aedes sp. Trata-se de uma doença com grandes impactos na economia e na saúde pública, e estima-se que entre 50 a 100 milhões novas infecções ocorram anualmente em mais de 100 países. A dengue é causada pelo Dengue virus (DENV), um vírus pertencente à família Flaviviridae, com genoma composto de uma única molécula de RNA, fita simples com polaridade positiva. A infecção pelo DENV pode ser assintomática ou apresentar diferentes manifestações clínicas, como febre do dengue (FD), febre hemorrágica do dengue (FHD) e Síndrome do Choque do dengue (SCD). Dados da literatura indicam que algumas infecções virais podem causar alterações epigenéticas em seus hospedeiros, principalmente a metilação do DNA. Assim, o propósito deste trabalho foi investigar a influência da infecção pelo DENV no perfil global de metilação dos pacientes, através da técnica de MethELISA, e analisar o padrão de metilação no promotor dos genes fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) e interferon gama (IFN-γ). Os resultados obtidos indicam uma tendência na diminuição do percentual relativo de metilação após a infecção pelo DENV, sugerindo uma influência da infecção viral nos mecanismos epigenéticos do hospedeiro. Observou-se também uma maior taxa de desmetilação do promotor do TNF-α dos pacientes infectados em relação ao grupo controle. Em relação ao IFN-γ, não foi observada diferença no padrão de metilação do gene entre os dois grupos analisados. A meta-análise de microarranjos de DNA obtidos de pacientes infectados pelo DENV indica um aumento na expressão dos genes da Timina DNA Glicosilase (TDG) e das DNA Metiltransferases 1 e 3 (DNMT1 e DNMT3) nos pacientes infectados. Estes dados sugerem que o DENV é capaz de interferir com os mecanismos epigenéticos do hospedeiro. / Dengue fever is a systemic viral infection, self-limited, transmitted to humans through the bite of infected female mosquito from Aedes genus. It is a disease with major impacts on the economy and public health, and it is estimated that between 50 to 100 million new dengue infections occur annually in more than 100 countries. Dengue fever is caused by Dengue virus (DENV), a single strand positive sense RNA virus belonging to the Flaviviridae family. The DENV infection may be asymptomatic or present different clinical manifestations, such as dengue fever (DF), hemorrhagic fever (DHF) and dengue shock syndrome (DSS). Published data indicate that some viral infections can cause epigenetic changes in their hosts, especially in the DNA methylation. Thus, the aim of this study was to investigate the influence of DENV infection in global methylation profile of DENV infected patients by MethELISA technique, and analyze the pattern of methylation in the promoter of tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and interferon gamma (IFN-γ) genes. The results obtained show a decrease the relative methylation percentage after DENV infection, suggesting an influence of viral infection in the epigenetic mechanisms of the host. There was also detected a higher rate of demethylation of TNF-α promoter in infected patients if compared to the control group. No difference was found in the methylation frequency between the two analyzed groups regarding the IFN-γ promoter. Meta-analysis of DNA microarray indicates that patients infected with DENV shows an increase in the expression of Thymine DNA Glycosylase (TDG) and DNA methyltransferases 1 and 3 (DNMT1 and DNMT3) genes, all involved in epigenetic regulation. So, these data indicated that DENV is able to interfere with the host epigenetic mechanisms. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Bebida láctea funcional tipo “shake” a base de farinha de banana (Musa spp.) verde: desenvolvimento, aceitabilidade e efeito no estado nutricional antropométrico, metabólico e dietético de mulheres com excesso de peso e adiposidade abdominal.

LOMEU, Fernanda Laurides Ribeiro de Oliveira 31 July 2015 (has links)
O amido resistente, presente na farinha de banana verde (FBV), tem sido alvo de estudos por reduzir a resposta glicêmica, a liberação de insulina e melhorar o perfil de lipídios em animais; no entanto, estudos com humanos são escassos. Portanto, esta pesquisa objetivou avaliar o efeito da ingestão de bebida láctea funcional tipo “shake” desenvolvida a base de FBV no estado nutricional antropométrico, metabólico e dietético de mulheres com excesso de peso e adiposidade abdominal. Inicialmente foi desenvolvido um pó para preparo da bebida láctea tipo shake a base de FBV e outro sem FBV. Realizou-se avaliação sensorial por meio de escala hedônica gráfica e análise microbiológica (Salmonella spp., Bacillus cereus, coliformes a 45ºC, estafilococos coagulase positiva, contagem de bolores e leveduras) dos dois tipos de shake. A avaliação da composição química incluiu composição centesimal, determinação do teor de amido resistente e concentração de fenólicos totais. Para avaliação dos efeitos antropométricos, metabólicos e dietéticos foi realizado um ensaio clínico prospectivo randomizado duplo-cego com dois grupos de voluntárias. Um grupo recebeu o shake teste com FBV (SBV) e outro grupo o shake controle sem FBV (SC). O estudo teve duração de seis semanas, com avaliações na pré-intervenção e após o consumo; 52 mulheres finalizaram o estudo, sendo 26 de cada grupo (teste e controle). A população do estudo foi homogeneamente randomizada não havendo diferença estatisticamente significante em relação às variáveis antropométricas, metabólicas e dietéticas no período pré-intervenção. Em relação aos resultados encontrados, desenvolveu-se a bebida láctea funcional tipo shake a base de FBV, que apresentou boa aceitação entre os provadores e participantes do estudo, estando de acordo com os padrões microbiológicos legais vigentes, portanto apta para consumo humano. A alegação de funcionalidade do produto foi possível devido à quantidade de fibras alimentares, cujo valor foi elevado pela presença do amido resistente da banana verde. O produto também forneceu compostos fenólicos em quantidade considerável, oriundos tanto da FBV quanto do cacau presente na composição do mesmo. Conforme previsto nos critérios de inclusão, as mulheres do estudo estavam com excesso de peso ou obesidade e circunferência da cintura elevada, portanto em risco metabólico, coronariano e de morbimortalidade para o desenvolvimento de doenças crônicas não transmissíveis. Algumas mulheres apresentavam perfil de lipídios alterado e a maioria um consumo deficiente em micronutrientes, com grande número de práticas alimentares não saudáveis. A intervenção com o SBV por seis semanas foi mais efetiva que o SC quanto à redução de circunferência da cintura, relação cintura-quadril e razão cintura-estatura promovendo redução do risco de complicações metabólicas, cardiovasculares e desenvolvimento de doenças associadas, bem como para o aumento da ingestão de fibra alimentar total. O SBV foi fonte de fibras, principalmente insolúveis, amido resistente e compostos fenólicos, auxiliando na melhoria da qualidade da alimentação. / The resistant starch, present in green banana flour (FBV), has been investigated to reduce the glycemic response, the release of insulin and improve the lipid profile in animals; however, human studies are scarce. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of functional dairy beverage type "shake" developed with FBV in the nutritional status anthropometric, metabolic and dietary of women with overweight and abdominal obesity. Initially it developed a powder to prepare the dairy beverage type shake with FBV and one without FBV. Sensory evaluation was carried out through graphic hedonic scale and microbiological analysis (Salmonella spp., Bacillus cereus, coliforms at 45ºC, coagulase-positive staphylococci, yeast and mold count) of the two types of shake. The chemical composition included chemical composition, determining the resistant starch content and concentration of total phenolic. For evaluation of anthropometric, metabolic and dietary effects was conducted a double-blind randomized prospective clinical trial with two volunteer groups. One group received the shake test with FBV (SBV) and another group the shake placebo without FBV (SC). The study of six weeks duration, with assessments at pre-intervention and after consumption; 52 women completed the study, 26 in each group (test and control). The study population was evenly randomized with no statistically significant difference from the anthropometric, metabolic, and dietary variables in the pre-intervention period. Regarding the results, it developed the functional milk drink type shake with FBV, which showed good acceptance among panelists and participants of the study, which is consistent with existing legal microbiological standards and was therefore safe for human consumption. The product of claim functionality was made possible due to the amount of fiber, which value was increased by the presence of resistant starch green bananas. The product has also provided considerable amount phenolic compounds, either derived from FBV as cocoa present in the composition thereof. As provided in the inclusion criteria, the women in the study were overweight or obesity and increased waist circumference, so in metabolic risk, and coronary morbidity and mortality for the development of chronic diseases. Some women had altered lipid profile and most deficient in micronutrients consumption, with large numbers of unhealthy eating habits. The intervention with the SBV for six weeks was more effective than the SC regarding the reduction of waist circumference, waist-hip ratio and waist-height ratio promoting reduced risk of metabolic complications, cardiovascular and development of associated diseases as well as for the increase in total dietary fiber intake. The SBV was source of fiber, especially insoluble, resistant starch and phenolic compounds, helping to improve food quality.
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Avaliação do efeito do extrato, frações e alcaloides piperidínicos obtidos das flores de Senna spectabilis (DC.) sobre Schistosoma mansoni

CASTRO, Andreísa Teixeira de 10 August 2015 (has links)
A esquistossomose é uma doença parasitária crônica causada por parasitos do gênero Schistosoma e apresenta um significativo impacto social e econômico. Atualmente, o praziquantel (PZQ) é o medicamento utilizado para o tratamento da doença, indicado pela Organização Mundial da Saúde. No entanto, a dependência de um único fármaco é preocupante, pois com reinfecções constantes e repetição de tratamento pode ocorrer a seleção de cepas resistentes. Sendo assim, a busca por novas substâncias com atividade esquistossomicida é essencial. O gênero Senna é alvo de muitos estudos devido ao reconhecimento de sua grande diversidade biológica e propriedades farmacológicas. No presente trabalho foi avaliada a atividade esquistossomicida in vitro do extrato etanólico (EEt), frações do extrato (FAE e FDm), e de alcaloides majoritários obtidos das flores de Senna spectabilis. Dos alcaloides piperidínicos também foi avaliada a atividade cercaricida e seu efeito em interação com PZQ. Os vermes adultos de S. mansoni foram expostos a diferentes concentrações do EEt, FAE e FDm, e mistura de substância cassina/ espectalina para avaliação de viabilidade dos parasitos e cálculo de concentração inibitória de 50%. Foi avaliada a atividade excretora e lesões de tegumento dos vermes adultos de S. mansoni expostos à mistura de alcaloides cassina/espectalina por meio de marcação com sondas fluorescentes. A viabilidade celular foi avaliada utilizando células mononucleares do sangue periférico humano (PBMC) por ensaio de redução de MTT. O extrato etanólico e a fração acetato de etila de S. spectabilis, em concentrações elevadas provocam diminuição da ovoposição, paralisação de sistema excretor e lesões de tegumento. A fração diclorometano exerce atividade significativa quando comparada ao controle, visto que tal atividade é resultado da maior concentração de alcaloides nesta fração. A mistura (cassina/ espectalina) causou paralisia total dos vermes adultos de S. mansoni além de inibir a atividade excretora e provocar lesões de tegumento consideráveis no parasito na concentração de 50,0 µg/mL. Em relação à atividade cercaricida, os alcaloides supracitados provocaram paralisação e perda de cauda a partir da concentração de 50,0 µg/mL, e exibiram resultados relevantes em sinergismo com PZQ. A mistura de alcaloides também exibiu baixo valor de DL50 34,7 µg/mL; e apresentou potencial citotóxico moderado CC50 132,1 µg/mL. Estes resultados são promissores quanto à atividade esquistossomicida, portanto requerem estudos mais aprofundados. / Schistosomiasis is a chronic parasitic disease caused by parasites of the genus Schistosoma and presents a significant social and economic impact. Currently, praziquantel (PZQ) is the drug used for the treatment of the disease, indicated by the World Health Organization. However, the dependence on a single drug is concerning, since with constant reinfections and retreatment the emergence of resistant strains can occur. Therefore, the search for new compounds with schistosomicidal activity is essential. The genus Senna is the subject of many studies due to the recognition of its great biological diversity and pharmacological properties. In the present study, in vitro schistosomicidal activity was evaluated of the ethanolic extract, fractions from the extract and majoritarian alkaloids obtained from Senna spectabilis flowers. From the last two compounds, the cercaricidal activity and its effect in interaction with PZQ were also evaluated. The adult worms of S. mansoni were exposed to different concentrations of ethanolic extract (EEt), ethyl acetate (FAE) and dichloromethane (FDm) fractions, and mixtures of compounds cassina/espectalina for the assessment of parasites viability and calculation of the inhibitory concentration of 50%. The excretory activity and tegument lesions of adult worms of S. mansoni exposed to the mixture of alkaloids cassina/espectalina were evaluated through staining with fluorescent probes. Cell viability was assessed using human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) by MTT reduction assay. The (EEt) and (FAE) of S. spectabilis, in high concentrations, cause decrease in oviposition, excretory system shutdown and tegument lesions. FDm fraction has significant activity when compared to the control, as this activity is result of higher concentration of alkaloids in this fraction. The mixture (cassina/espectalina) caused complete paralysis of adult worms of S. mansoni, in addition to inhibit the excretory activity and lead to considerable tegument lesions in the concentration of 50.0µg/mL. Regarding cercaricidal activity, the above-mentioned alkaloids caused paralysis and tail loss starting at a concentration of 50.0 µg/mL, and relevant results were obtained in the synergism with PZQ. The alkaloids mixture also showed low DL50 value 34.7µg/mL; and presented potential moderate cytotoxic CC50 132.1µg/mL. These results are promising regarding the schistosomicidal activity, therefore require further study. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG
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Atividade da mieloperoxidase e metaloproteinase 8 da matriz em resposta a diferentes materiais capeadores para pulpotomias em ratos Wistar

CUNHA, Nayara Nery de Oliveira 01 September 2015 (has links)
As reações iniciais dos materiais capeadores sobre o tecido pulpar não estão bem elucidadas. A metaloproteinase da matriz (MMP) atua no remodelamento da matriz extracelular e a mieloperoxidase (MPO) está associada com infiltração neutrofílica nos tecidos. O objetivo deste estudo foi avaliar polpas de molares de ratos após pulpotomia com agregado trióxido mineral (MTA), BiodentineTM (BDT) e Hidróxido de cálcio (HC) associado à solução salina estéril, nos períodos de 24, 72 horas, 7 e 15 dias correlacionando a atividade da MPO com neutrófilos ativos e atividade de MMP8 (EC3.4.24.34) com remodelação tecidual. Foram utilizados 36 ratos Wistar, distribuídos aleatoriamente nos grupos controle, MTA, BDT e HC e subdividos conforme o tempo de 24, 72 horas, 7 e 15 dias após pulpotomia e um foi utilizado para o controle.. A atividade da MMP8 foi avaliada utilizando a técnica de fluorescência e a atividade de MPO foi determinada utilizando o ensaio de MPO. Houve diminuição gradativa da atividade de MPO e MMP8 para o MTA ao longo dos períodos experimentais (p<0.05), ao contrário do BDT e HC que apresentaram aumento da atividade aos 7 e 15 dias (p<0.05). O MTA demonstrou decréscimo de valores de MPO e MMP8 indicando atividade potencialmente curativa no tecido pulpar. Já BDT e HC apresentaram aumento do potencial irritante dificultando o processo cicatricial. / The initial reactions of capping materials on pulp tissue are not well understood. The matrix metalloproteinases-8 (MMP8) acts on remodeling the extracellular matrix and myeloperoxidase (MPO) is associated to neutrophil infiltration in the tissues. This study aimed to evaluate the pulp tissue of rats’ molars after pulpotomies with mineral trioxide aggregate (MTA), BiodentineTM (BDT) and calcium hydroxide (CH) associated with sterile saline solution, at 24 and 72 hours, 7 and 15 days through correlating MPO activity with active neutrophils and MMP8 (EC3.4.24.34) activity with tissue remodelation. Thirty six Wistar rats were randomly distributed into groups: control, MTA, BDT and CH and subdivided according to the study period of de 24 and 72 hours, 7 and 15 days after pulpotomy and one was used for the control. MMP8 activity was evaluated through fluorescence technique and MPO activity was determined using the MPO assay. A gradual decrease of MPO and MM8 activity occurred in group MTA over the experimental periods (p<.05). Unlikely, groups BDT and CH exhibited an increase in the activity at 7 and 15 days (p<.05). MTA demonstrated a decrease in MPO and MMP8 values indicating a potentially curative activity in pulp tissue. Conversely, BDT and CH showed the increasing of the irritating potential which makes difficult the healing process. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES
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Atividade biológica do extrato da fermentação do fungo endófito de café Alternaria alternata

FERNANDES, Maurette dos Reis Vieira 21 July 2009 (has links)
A busca de novos princípios ativos de microrganismos é uma das áreas em que mais se investe nos países desenvolvidos. Entre estes microrganismos, os fungos têm grande destaque por sua produção de diversos metabólitos de interesse farmacológico. Endófitos são todos os microrganismos, cultiváveis ou não, que habitam o interior dos tecidos vegetais, sem causar danos ao hospedeiro e sem desenvolver estruturas externas, excluindo, dessa forma, bactérias noduladoras e micorrizas. Considerando a importância da cultura do café no estado de Minas Gerais, pesquisas com fungos endófitos de café, permitem a ampliação do conhecimento da diversidade desses fungos. Neste estudo, um total de 22 fungos endófitos isolados de café (Coffea arabica L.) foi cultivado in vitro. O screening foi conduzido usando o método de difusão em agar contra bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e leveduras. O isolado mais efetivo contra todos os microrganismos testados foi a linhagem Alternaria alternata e posteriormente, seu extrato bruto foi analisado. A concentração de fenólicos totais do extrato bruto do endófito foi de 3,44 μgEAG/mg de extrato. Para os testes de atividade antimicrobiana, a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida e fungicida mínima (CBFM) conta Staphylococcus aureus, Escherichia coli e Candida albicans foram determinadas. Os valores de CIM variaram entre 50-100 μg/mL para S. aureus e 400-800 μg/mL para E. coli. O extrato não apresentou atividade nas concentrações testadas para C. albicans. Além destes testes, foi avaliada a atividade antioxidante pela capacidade sequestrante de radicais DPPH e pela oxidação do sistema β-caroteno/ácido linoleico, as quais não apresentaram resultados significativos. A atividade antitumoral foi avaliada pelo teste do MTT. À diluição de 400 μg/mL, o extrato apresentou atividade de aproximadamente 50% sobre células HeLa in vitro. Esses resultados demonstram que fungos endófitos podem ser uma promissora fonte de compostos antimicrobianos necessitando de estudos posteriores. / The search for new active components of microorganisms is one of the areas of greatest investment in developed countries. Among these microorganisms, fungi are distinguished by their ability to produce diverse metabolites for pharmacological purposes. Endophytes are all microorganisms, cultivated or not, that live inside plant tissue, without causing harm to the host and without developing external structures, excluding nodule bacteria and mycorrhiza. Considering the importance of coffee production in the state of Minas Gerais, studies of endophytic fungi in coffee allow for greater understanding of the diversity of these fungi. In this study, a total of 22 endophytic fungi isolated from coffee (Coffea arabica L.) were cultivated in vitro. The screening was conducted using the agar diffusion method against Gram-positive and Gram-negative bacteria and yeast. The most effective isolated fungus among all of the tested microorganisms was the lineage Alternaria alternata, and subsequently, its extract was assayed. The total phenolic content was 3.44 μgGAE/mg of the crude extract. For the antimicrobial activity assays, the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal and fungicidal concentration (MBFC) against Staphylococcus aureus, Escherichia coli and Candida albicans were determined. The ranges of MIC values were 50-100 μg/mL for S. aureus and 800-1000 μg/mL for E. coli. The crude extract did not show activity in the tested concentrations for C. albicans. Through these tests, the antioxidant activity of the fungus was assayed through its ability to scavenge DPPH radicals and through β-carotene/linoleic acid system oxidation, both of which were not significant. Antitumour activity was studied by the MTT assay. At a dilution of 400 μg/mL, the extract displayed a cytotoxic activity of approximately 50% towards HeLa cells in vitro. These results indicate that endophytic fungi could be a promising source of antimicrobial compounds and are worthy of further study.
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Pesquisa de pátogenos oportunistas em medicamentos tópicos: padronização e análise comparativa de metodologias

VIEIRA, Daniela Cristina de Macedo 19 November 2007 (has links)
Com a ampla disseminação da AIDS, uma grande gama de microrganismos tem aparecido como patógenos emergentes, causando importantes infecções em pacientes imunocomprometidos. Por exemplo, Rhodococcus equi, um agente incomum de infecções em humanos, tem sido isolado em pacientes imunocomprometidos. A presença deste microrganismo oportunista em produtos farmacêuticos não tem tido considerável atenção. No presente trabalho, o método de reação em cadeia da polimerase (PCR) foi comparado com métodos convencionais para rápida detecção de três espécies bacterianas em amostras de cremes tópicos contaminadas artificialmente. As amostras foram incubadas por 24 horas a 37ºC. Depois da incubação em caldo com 10% de tween 20, amostras foram semeadas em meio para crescimento seletivo. Identificação bioquímica de Bacillus cereus e Rhodococus equi foram feitas utilizando o sistemas de identificação API 20E® e API Coryne®, respectivamente. Para identificação de Micrococcus luteus foram utilizados os testes de catalase, oxidase, morfologias das colônias e o sistema Gram. O DNA foi extraído usando o método do fenol-clorofórmio. Os iniciadores utilizados contendo a seqüência específica foram para B. cereus (BC1 e BC2), R. equi (COX-F e COX-R) e para M. luteus (ML-ISR-R e ML-ISR-F) foram utilizados na reação de PCR. Para validação da metodologia molecular, as seqüências dos produtos de PCR foram determinadas e analizadas utilizando-se os programas Blastn e Blastx. Foi observado uma alta similaridade (E .value 0,0) e uma alta identidade ( > 99%) para as bactérias utilizadas neste estudo. Os métodos convencional e de PCR detectaram B. cereus, R. equi e M. luteus em todas as amostras contaminadas artificialmente. O tempo para completar o método de PCR incluindo o preparo de amostras e a amplificação específica do DNA bacteriano foi de 27 horas. Para o método convencional foi necessário de 72 a 96 horas para o isolamento e identificação bioquímica dos microrganismos pesquisados. A rápida detecção de PCR para B. cereus, R. equi e M. luteus mostrada neste trabalho sugerem o uso desta metodologia em controle de qualidade microbiológica de produtos tópicos não estéreis, especialmente utilizados por pacientes imunocomprometidos. / With the ample dissemination of the AIDS, a wide range microorganisms has blunted as emergent pathogens, causing important infection in immunocompromised patients. For example, Rhodococcus equi, an unusual cause of infection in humans, has been isolated from HIV-infected patients. The presence of these opportunistic microorganisms in pharmaceutical products has not receiv considerable attention. In the present work PCR assay were compared with standard microbiological methods for rapid detection of three bacterial species from artificially contaminated sample of topical creams. Artificially contaminated samples were incubated for 24 horas at 37º C. After incubation in broth with 10% tween 20, samples were streaked on seletive growth media. Biochemical identification of Bacillus cereus and R. equi was performed using API 20E® and API Coryne® identification systems, respectivelly. For Micrococcus luteus identification, colony an Gram-stained morphology of the bacterium and the biochemical tests of catalase and oxidase were used.DNA was extracted using phenol-chloroform method. DNA primers containing the specific sequences of the BC1 and BC2 for B. cereus, COX-R and COX-F for R. equi and ML-ISR-F and ML-ISR-F for M. luteus were used for detection in the PCR reaction. In order to validate this methodology, DNA sequences of the products were determined. The sequences of the cloned PCR products were analysed using Blastn and Blastx programs. It was observed a marked similarity (E.value 0,0) and a high identity (> 99%) to the bacteria used in the study. Both the PCR and the standard enrichment tests method detected B. cereus, R. equi and M. luteus in all of the deliberately contaminated samples. The time to complete the PCR assay including sample preparation and PCR amplification of the specific DNA bacterial targets was 27 h. Standard plating methods required 72-96 h for the bacteria to be isolated, purified and biochemecally identified. Rapid PCR detection of B. cereus, R. equi and M. luteus showed in this work suggests the use of this methodology in the microbiology control of non-sterile topical products, specially intended for use with immunocompromised patients.
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Itinerário terapêutico do homem com cardiopatia submetido à cirurgia de revascularização do miocárdio

OSUGUI, Denise Maria 27 March 2013 (has links)
Estudo que teve como objetivo compreender o itinerário terapêutico de homens com cardiopatia submetidos à cirurgia de revascularização do miocárdio. Para tal compreensão foram utilizados os referenciais teóricos da antropologia interpretativa Geertz, Antropologia Médica de Kleinman e o método etnográfico. Participaram deste estudo vinte e um homens com cardiopatia submetidos à cirurgia de revascularização do miocárdio em um Instituto de Intervenção Cardiovascular de uma cidade do sul de Minas Gerais. Foram respeitadas as questões éticas e os informantes assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido para participarem do estudo. A coleta de dados ocorreu no período de março a novembro de 2012, no domicílio dos informantes. Foram realizadas entrevistas semiestruturadas gravadas, observação participante e anotações em um diário de campo. A análise e interpretação dos dados foram orientadas pelo referencial teóricometodológico. Da análise surgiram dois núcleos de significados: “Da saúde para a doença: um divisor de águas”; “O corpo marcado”. O primeiro núcleo revela o inicio das manifestações da doença e suas repercussões, como a perda de autonomia em relação ao processo de saúde/doença; a importância da religiosidade frente ao processo de adoecer; o momento da comunicação da necessidade da cirurgia, o medo diante a uma situação inusitada e a preocupação com a família. No segundo núcleo são abordados o período pré e pós-operatório que envolve o preparo do paciente para a intervenção cirúrgica, a despersonalização decorrente da hospitalização, a ruptura do cotidiano e a resignificação do viver. Constatamos que o subsistema familiar é utilizado por todos os homens. No entanto, sob influência do modelo biomédico, a automedicação é amplamente utilizada pelos depoentes. De forma conjugada eles buscam tratamento no subsistema popular e profissional. Este último é dominante sobre os demais, onde os homens, nesta situação de doença encontram a resolutividade e a cura da enfermidade. Percebemos que as “maratonas” experienciadas pelos homens, a falta de resolutividade de alguns serviços, a ineficiência do sistema de referência e contrarreferência, aliadas à hospitalização e à intervenção cirúrgica geram sentimentos como medo, angústia, ansiedade e incertezas. A masculinidade pode ter influenciado o homem a banalizar as primeiras alterações no corpo. No entanto, o homem reafirma sua masculinidade exibindo o corpo marcado pela cicatriz cirúrgica como uma vitória, com bravura. Apreendemos que os profissionais de saúde, especialmente a Enfermagem devem receber uma formação que busque a integralidade do cuidado centrada nas diretrizes do SUS, com ênfase ao acolhimento, escuta qualificada, humanização, resolutividade e o comprometimento com o outro. / This study had as objective to understand the therapeutic itinerary of the men with cardiopathy submitted to the surgery of revascularization of the myocardium. For such an understanding were used the references theoretical of interpretative anthropology Geertz), medical anthropology of Kleinman and the ethnographic method. Twenty-one men participated in this study with cardiopathy submitted to the surgery of revascularization of the myocardium in an Institute of Cardiovascular Intervention of a city southern Minas Gerais. The ethical subjects were respected and the informers signed the Term of Free Consent and Illustrious to participate in the study. The collection of data happened in the period from March to November of 2012, in the informers' home. Interviews semi structured were accomplished recorded, participant observation and annotations in a field diary. The analysis and interpretation of the data were guided by the theoretical-methodological reference. Of the analysis two nuclei of meanings appeared: "From the health for the disease: a divisor of waters"; "The marked" body. The first nucleus reveals the begin of the manifestations of the disease and their repercussions, as the loss of autonomy in relation to the process health/disease; the importance of the religiosity front to the process of getting sick; the moment of the communication of the need of the surgery, the fear before an unusual situation and the concern with the family. In the second nucleus the period pre and postoperative that involves the preparation of the patient for the surgical intervention, the depersonalization due to the hospitalization, the rupture of the daily and the resignification of living. We verified that the family system is used by all of the men. However, under influence of the biomedical model, the self-medication is used thoroughly by the deponent. In a conjugated way they look for treatment in the popular and professional subsystem. This last one is dominant on the others, where the men, in this situation of disease find the resolution and the cure of the illness. We noticed that the "marathons" experienced by the men, the lack of resolutivity of some services, the inefficiency of the system of reference and counterrefence, allied to the hospitalization and the surgical intervention generate feelings as fear, anguish, anxiety and uncertainties. The manliness might have influenced the man to vulgarize the first alterations in the body. However, the man reaffirms his manliness exhibiting the body marked by the surgical scar as a victory, with bravery. We apprehended that the professionals of health, especially the Nursing should receive a formation to look for the integrality of the care centered in the guidelines of SUS, with emphasis to the reception, listens qualified, humanization, resolutivity and the compromising with the other.

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