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Estudo do efeito da hidroxiuréia no mecanismo de gelatinização das suspensões de colágeno e de hemoglobina.Alves, Ellen Denise Lopes January 2014 (has links)
Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Materiais. Rede Temática em Engenharia de Materiais, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-11-20T19:39:57Z
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Previous issue date: 2014 / A hidroxiuréia, antineoplásico potente usado no tratamento de vários tipos de câncer e na síndrome da imunodeficiência adquirida, é um inibidor eficiente na síntese de DNA de células humanas e bacterianas, e também é considerada a principal droga ministrada em pacientes com anemia falciforme. A anemia falciforme é consequência da polimerização da hemoglobina mutante – no seu estado desoxigenado - gerando fibras nanométricas que provocam a gelificação da suspensão de hemoglobina, causando um fenômeno chamado afoiçamento dos eritrócitos do sangue. A hidroxiuréia age na anemia falciforme causando uma diminuição da expressão das moléculas de adesão, aumento da concentração da produção de oxido nítrico e de hemoglobina fetal. A hipótese de estudo deste trabalho baseia-se no fato da hidroxiuréia apresentar um efeito anti-gelificante, dissolve o gel de hemoglobina falciforme, e diminui, portanto, o risco de vaso-oclusão. Para investigar a ação de anti-coagulação da hidroxiuréia foi utilizado o colágeno bovino e hemoglobinas liofilizadas comerciais reticuladas em glutaraldeído em suspensão. As técnicas utilizadas para neste trabalho foram microscopia ótica e eletrônica de varredura, análises térmicas por DSC, reológicas e fotométricas. As imagens obtidas pela microscopia apresentam diferenças estruturais entre os géis à medida que a hidroxiuréia é adicionada, resultados estes que corroboram com os ensaios reométricos e de viscosidade. O método de temperatura modulada do DSC chamado StepScan forneceu características térmicas do comportamento das amostras baseado na mudança de capacidade térmica dos géis sob a adição de hidroxiuréia. Através dos resultados experimentais pôde-se inferir que a adição de hidroxiuréia influencia no processo de gelificação dos géis estudados, portanto, hipoteticamente, possa ter efeito na polimerização de hemoglobina falciforme nos casos de pacientes com anemia falciforme. ______________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The hydroxyurea, antineoplastic used in the treatment of variety of cancer and in the acquired immune deficiency syndrome. It is efficient inhibitor blocking DNA synthesis in both human and bacterial cells. The hydroxyurea is considered the main drug for sickle cell anemia that is a haemoglobinopathy. The sickle cell anemia is caused for the polymerization of the mutant hemoglobin – in its deoxygenated state – generates nanometric fibers which causes the gelification of the hemoglobin-serum suspension, a phenomenon called sickling of the red blood cell. The hydroxyurea acts in sickle cell anemia causing a decrease in the expression of adhesion molecules, increasing the concentration of nitric oxide and fetal hemoglobin. The research hypothesis of this study is based in the hypothesis that HU has an antigelling effect, dissolving the sickle hemoglobin gel, and decreasing the vascular occlusion risk. To investigate the anti-gelling action of HU we used bovine collagen type I and lyophilized commercial hemoglobins crosslinked with glutaraldehyde as suspension. The techniques used in this study were optical and scanning electron microscopy, thermal analysis by DSC and rheological. The microscopy show structural differences between gels when hydroxyurea is added, these results corroborated with rheometer and viscosimeter assays. The method of temperature-modulated DSC called StepScan gave characteristics of the behavior of the samples based on the change in heat capacity of the gels on the addition of hydroxyurea. Through the experimental results it can be inferred that the addition of hydroxyurea influence the gelation of the gels studied therefore hypothesized process can has effect in the polymerization of sickle hemoglobin in cases of sickle cell anemia patients.
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Influência da clareação dentária sobre o tecido pulpar de ratos diabéticos: aspectos histológicos e imunológicosFerreira, Luciana Louzada [UNESP] 25 September 2015 (has links) (PDF)
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000857967.pdf: 995926 bytes, checksum: 77522175ce40f88fad48a03141519508 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivo: Avaliar a influência da clareação dentária sobre o tecido pulpar de ratos diabéticos por meio da observação dos aspectos histológicos e imunológicos. Material e Método: Vinte e oito ratos Wistar foram divididos em quatro grupos: (N) normoglicêmicos; (NCla) normoglicêmicos-clareados; (D) diabéticos; (DCla) diabéticos-clareados. Quatorze animais receberam uma dose de 150mg/kg de aloxano para indução da diabetes, via IM. Após 3 dias, todos os animais foram anestesiados e realizado o procedimento clareador com gel de peróxido de hidrogênio (H2O2) a 35% (Whiteness HP Maxx) aplicado uma vez nos molares superiores direitos por 30 minutos. Os molares superiores esquerdos foram usados como controle. Após 2 e 30 dias os animais foram eutanaziados e as maxilas processadas para análise histológica e histoquímica. Foram realizadas análises qualitativas para a reação inflamatória e imunomarcação, e quantitativas para a redução da área da camara pulpar e fibras colágenas. Os resultados foram submetidos à análise estatística com nível de significância de 5% (p<0.05). Resultados: Aos 2 dias observou-se infiltrado inflamatório leve no grupo NCla e severo no grupo DCla (p<0.05). Quanto ao grau de maturação das fibras colágenas, aos 2 dias observou-se maior quantidade de fibras imaturas no grupo N, com diferença estatística para os demais grupos (p<0.05), e, menor quantidade de fibras maduras no grupo N com diferença significante para os demais grupos (p<0.05). Aos 30 dias não foi observado concentração de células inflamatórias e não houve diferença estatística entre os grupos para ambas as fibras colágenas (p>0.05). Entretanto, houve diferença significante quando comparados os grupos NCla e DCla em relação à redução da área da câmara pulpar devido a deposição de dentina reacionária... / Objective: To evaluate the influence of dental bleaching on the pulp tissue of diabetic rats over the histological aspects and proinflammatory cytokines regulation. Methods: Twenty-eight Wistar rats were divided into four groups: (N) normoglycemic; (NBle) normoglycemic-bleached, (D) diabetic, (DBle) diabeticbleached. Fourteen animals reveiced a 150mg/kg dose of alloxan for diabetes induction, via IM. After 3 days, all animals were anesthetized and the dental bleaching performed using 35% hydrogen peroxide (H2O2) gel (Whiteness HP Maxx) in the right maxillary molars for 30 minutes. Left upper molars were used as control. Two and 30 days after the animals were euthanized, and the hemi-maxillae processed for histological and histochemistry analysis. Qualitative analyses were performed for inflammatory reaction and immunolabelling, and quantitative for pulp chamber area reduction and collagen fibers. The results were submitted to statistical analysis (p<0.05). Results: At two days a mild inflammation was observed in NBle group and severe for DCla (p<0.05). For the maturation of collagen fibers, at two days was observed an increase amount of immature fibers in the N group, with statistical difference to the other groups (p<0.05), and a reduced amount of mature fibers in the N group with significant diference to the other groups (p<0.05). At 30 days no inflammatory cells were observed and there was no statistical difference between the groups for both fibers type (p>0.05). However, there was a significant difference when NBle and DBle groups were compared with regards to reduction of the pulp chamber area due the presence of reactionary dentin deposition (p<0.05). With regards to immunoistochemistry, was observed for IL-6 at 2 days an increased immunolabelling in the bleached groups (NBle and DBle) (p<0.05)...
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Influência de inibidores de proteases no potencial de degradação do colágeno proveniente da dentina sadia, esclerótica e afetada por cárie /Reis, Bruna de Oliveira. January 2017 (has links)
Orientador: Paulo Henrique dos Santos / Coorientadora: Ticiane Cestari Fagundes Tozzi / Banca: André Luiz Fraga Briso / Banca: Eduardo Bresciani / Resumo: Objetivo: Avaliar a influência de inibidores de proteases no potencial de degradação do colágeno das dentina sadia, esclerótica e afetada por cárie. Materiais e métodos: Trinta e nove molares humanos foram utilizados, treze para cada condição dentinária. Três fatias foram obtidas de cada dente, cada uma imersa em diferentes soluções: 1) saliva artificial; 2) clorexidina 2%; 3) EGCG 0,5%. Após incubação nas soluções por 1h, amostras foram sujeitas à degradação enzimática pela colagenase derivada da Clostridium histolyticum. Propriedades mecânicas de nanodureza (HIT) e módulo de elasticidade (Er) dos três diferentes tipos de dentina foram mensuradas antes e após a degradação, bem como a resistência à tração do colágeno. Resultados do teste de resistência à tração e nanoindentação foram submetidos à ANOVA dois e três fatores para medidas repetidas, e pós-teste de Tukey (α=0,05). Resultados: Maiores valores de resistência à tração foram encontrados para dentina sadia, nos grupos controle (40,30 ± 21,38 MPa) e EGCG 0,5% (30,05 ± 19,67 MPa). Antes da degradação, maiores valores de HIT (0,237 ± 0,062 GPa) e Er (5,58 ± 1,75 GPa) foram encontrados para o grupo EGCG 0,5%, na dentina afetada por cárie. Após a degradação, grupo clorexidina 2% apresentou maiores valores de HIT e Er para dentinas sadia (0,134 ± 0,020 GPa e 3,57 ± 0,40 GPa) e esclerótica (0,201 ± 0,048 GPa e 4,30 ± 0,56 GPa). Conclusões: O uso da clorexidina 2%, principalmente em dentina esclerótica, mostrou-se mais efet... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objetive: To evaluate the influence of proteases inhibitors on the collagen degradation from sound, sclerotic and caries-affected dentin. Materials and Methods: Thirty-nine human molars were used, thirteen for each dentin condition. Three slices were obtained from each tooth, each one immersed in different solutions: 1) artificial saliva; 2) 2% chlorhexidine; 3) 0.5% EGCG. After incubation in the solutions for 1h, samples were subjected to enzymatic degradation by collagenase derived from Clostridium histolyticum. Mechanical properties of nanohardness (HIT) and elastic modulus (Er) of the three types of dentin were measured before and after degradation, as well as the microtensile strength. Results of the microtensile strength and nanoindentation tests were submitted to ANOVA two and three factors for repeated measurements, and Tukey post-test (α = 0.05). Results: Higher values of tensile strength were found for sound dentin in control (40.30 ± 21.38 MPa) and 0.5% EGCG (30.05 ± 19.67 MPa) groups. Before degradation, higher values of HIT (0.237 ± 0.062 GPa) and Er (5.58 ± 1.75 GPa) were found for the 0.5% EGCG group in caries-affected dentin. After degradation, 2% chlorhexidine group had higher values of HIT and Er for sound (0.134 ± 0.020 GPa and 3.57 ± 0.40 GPa) and sclerotic (0.201 ± 0.048 GPa and 4.30 ± 0.56 GPa) dentin. Conclusions: The use of 2% chlorhexidine, mainly in sclerotic dentin, was shown to be more effective in promoting increase in the microtensile st... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Estudo do colágeno total e do colágeno tipo I em fáscia transversal de pacientes com hérnia inguinal direta submetidos à correção videolaparoscópicaWolwacz Júnior, Igor January 2000 (has links)
No presente trabalho, amostras de fáscias transversais de 23 pacientes, entre 20 e 60 anos de idade, com hérnia inguinal direta, coletadas no momento da correção videolaparoscópica, foram analisadas quanto à espessura, elementos constitutivos, presença de colágeno tipo I e quantificação do colágeno total. Compararam-se os resultados com 22 amostras do mesmo tecido, retiradas de cadáveres. Utilizaram-se as técnicas de coloração de Hematoxilina-Eosina, Picrosirius e imuno-histoquímica com anticorpo monoclonal anti-colágeno tipo I. As imagens captadas foram analisadas por técnica videomorfométrica assistida por computador. Constatou-se uma espessura de fáscia transversal nos controles, em média, de 4.5 milímetros. A espessura da fáscia transversal dos pacientes com hérnia foi, em média, 58 % menor (p< 0.001). Não se evidenciou algum processo de degeneração das fibras de colágeno atribuível à senilidade. O principal elemento constitutivo da fáscia, nos dois grupos, foi o tecido conjuntivo denso, representando cerca de 75 % nos controles e sendo um terço menor nos pacientes (p< 0.001). A área média percentual de colágeno no campo amostral dos pacientes encontrada foi a metade da área dos controles (p< 0.001), resultando em uma menor quantidade de colágeno na parede posterior herniada. Por fim, a técnica de imuno-histoquímica permitiu-nos identificar nas amostras o colágeno tipo I como sendo o principal constituinte do tecido conjuntivo denso na fáscia transversal. / In the present work, samples of transversalis fascia from 23 direct inguinal hernia patients, between twenty and sixty years of age and colected at the moment of laparoscopic repair, were analysed in respect to thickness, constitutive elements, presence of type I collagen and total collagen quantification. They were compaired with 22 samples of the same tissue, obtained from corpse. The samples were stained for Hematoxiline-eosine, Sirius-Red and immunohistochemistry with collagen type I monoclonal antibody. The video captured images were analysed by computer-assisted videomorphometric techenic. We noticed the thickness of normal transversalis fascia to be 4.5 milimetres. Otherwise, the transversalis fascia from patients were t58 % thinner (p< 0.001). There was no evidence of any senile degenerative process involving the collagen fibres. The Dense connective tissue was the principal constitutive element in both groups being responsable for 75 % of control's fascia and 49 % for hernia ones (p< 0.001). The collagen's mean percentual area in the sample field from patients were half the control's area (p< 0.001), stablishing that there are less collagen in the hernia's wall. Finally, by the immunohistochemistry it was possible to identify the type I collagen as being almost all the collagen of the dense connective tissue in fascia transversalis.
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O papel do trânsito de cálcio e de compostos da matriz extracelular no modelo de insuficiência aórtica aguda experimental em ratosBussoni, Márjory Fernanda [UNESP] 12 September 2015 (has links) (PDF)
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000866809.pdf: 1747343 bytes, checksum: 1bd62536c1ab61130611dd2e937d842f (MD5) / Os mecanismos envolvidos na remodelação cardíaca por sobrecarga de volume e o momento que a hipertrofia excêntrica apresenta prejuízo da função cardíaca são pouco conhecidos. Objetivos: a) Comparar alterações morfofuncionais, celulares (hipertrofia) e intersticiais (fibrose) em diferentes momentos da evolução da insuficiência aórtica; b) Verificar quais dos seguintes mecanismos estão envolvidos na remodelação cardíaca induzida pela IAo e em qual momento esta alteração acontece: alteração na metaloprotease 2 (MMP2) e do inibidor tecidual de metaloprotease 1 (TIMP1), alterações dos RNAs mensageiros específicos para a codificação das proteínas envolvidas na homeostase do cálcio (Fosfolambam, Ryr e Serca2a), alterações da expressão de proteínas fosfolambam e Serca2a do trânsito de cálcio. Casuística e Métodos: Estudo experimental com 64 ratos Wistar machos, 32 animais submetidos à insuficiência aórtica aguda (grupo IAo) e 32 animais a procedimento simulado (grupo Controle). Todos os animais foram seguidos com 1, 4, 8 e 12 semanas através de ecocardiogramas seriados e, após eutanásia, foram analisada morfometria do tecido cardíaco, atividade da MMP2 e TIMP-1, expressão gênica por Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real das proteínas do trânsito de cálcio, expressão das proteínas Serca2a e fosfolambam pela técnica Western Blot. A análise estatística foi efetuada pela ANOVA de dois fatores; o pós teste de Holm Sidak; teste t grupo a grupo; Anova de 1 via, complementada por Tukey; correção por Bonferroni; teste de correlação de Spearman e teste de correlação de Pearson. Em todos os casos, o nível de significância adotado foi p<0,05. Resultados: Observou-se, na primeira semana, que o peso do VE e a pressão diastólica foi maior no grupo IAo. Na quarta semana, MMP2, TIMP-1, iMVE e fração de colágeno foram maiores no grupo IAo. A área do miócito e DDVE foram maiores... / The mechanisms that are involved in cardiac remodeling by volume overload and the moment the eccentric hypertrophy has impaired cardiac function are largely unknown. Objectives: a) to compare morphological, cell (hypertrophy) and interstitial (fibrosis) changes at different times of the evolution of aortic regurgitation (AR); b) to analyze which of the following mechanisms are involved in cardiac remodeling induced by aortic failure and at what moment this change takes place: change in the metalloprotease 2 (MMP 2) and tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP1); changes of messenger RNAs to code proteins involved in calcium homeostasis (phospholamban, Ryr and SERCA2a), changes in expression of phospholamban and SERCA2a in the calcium transit. Methods: Experimental study with 64 male Wistar rats, 32 animals submitted to acute aortic regurgitation (AR group) and 32 animals sham procedure (Sham group). All animals were followed with 1, 4, 8 and 12 weeks by serial echocardiography and after euthanasia, were analyzed morphometry of cardiac tissue, the activity of MMP2 and TIMP-1, gene expression by RT-PCR of calcium homeostasis protein, SERCA2a and phospholamban expression by Western Blotting. Statistical analysis was performed by two-way ANOVA; the Holm Sidak post test; t test group to group; Anova one way, complemented by Tukey; Bonferroni correction; Spearman correlation test and Pearson's correlation test. In all cases, the significance level was set at p <0.05. Results: In the first week it was observed that weight of the LV and diastolic blood pressure were higher in the AR group. In the fourth week, MMP 2, TIMP-1, and collagen fraction were higher in the AR group. The myocyte area and left ventricle diastolic diameter (LVDD) were higher in the AR group compared to the sham group, from the eighth week. At weeks 8 and 12, the wall thickness (WT) was higher in the AR group than the...
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Influência de inibidores de proteases no potencial de degradação do colágeno proveniente da dentina sadia, esclerótica e afetada por cárie / Influence of protease inhibitors on the degradation potential of collagen from sound, sclerotic and caries-affected dentinReis, Bruna de Oliveira [UNESP] 15 August 2017 (has links)
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Previous issue date: 2017-08-15 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Objetivo: Avaliar a influência de inibidores de proteases no potencial de degradação do colágeno das dentina sadia, esclerótica e afetada por cárie. Materiais e métodos: Trinta e nove molares humanos foram utilizados, treze para cada condição dentinária. Três fatias foram obtidas de cada dente, cada uma imersa em diferentes soluções: 1) saliva artificial; 2) clorexidina 2%; 3) EGCG 0,5%. Após incubação nas soluções por 1h, amostras foram sujeitas à degradação enzimática pela colagenase derivada da Clostridium histolyticum. Propriedades mecânicas de nanodureza (HIT) e módulo de elasticidade (Er) dos três diferentes tipos de dentina foram mensuradas antes e após a degradação, bem como a resistência à tração do colágeno. Resultados do teste de resistência à tração e nanoindentação foram submetidos à ANOVA dois e três fatores para medidas repetidas, e pós-teste de Tukey (α=0,05). Resultados: Maiores valores de resistência à tração foram encontrados para dentina sadia, nos grupos controle (40,30 ± 21,38 MPa) e EGCG 0,5% (30,05 ± 19,67 MPa). Antes da degradação, maiores valores de HIT (0,237 ± 0,062 GPa) e Er (5,58 ± 1,75 GPa) foram encontrados para o grupo EGCG 0,5%, na dentina afetada por cárie. Após a degradação, grupo clorexidina 2% apresentou maiores valores de HIT e Er para dentinas sadia (0,134 ± 0,020 GPa e 3,57 ± 0,40 GPa) e esclerótica (0,201 ± 0,048 GPa e 4,30 ± 0,56 GPa). Conclusões: O uso da clorexidina 2%, principalmente em dentina esclerótica, mostrou-se mais efetivo em promover aumento na resistência à tração e nas propriedades mecânicas, antes e após a degradação. A EGCG 0,5% apresentou melhor efeito sobre as propriedades mecânicas na dentina afetada por cárie, especialmente antes da degradação enzimática. Relevância Clínica: O efetivo conhecimento do mecanismo de ação de inibidores de proteases em diferentes tipos de dentina poderia contribuir para melhoria da resistência do substrato e para maior longevidade dos processos de união sobre este tecido. / Objetive: To evaluate the influence of proteases inhibitors on the collagen degradation from sound, sclerotic and caries-affected dentin. Materials and Methods: Thirty-nine human molars were used, thirteen for each dentin condition. Three slices were obtained from each tooth, each one immersed in different solutions: 1) artificial saliva; 2) 2% chlorhexidine; 3) 0.5% EGCG. After incubation in the solutions for 1h, samples were subjected to enzymatic degradation by collagenase derived from Clostridium histolyticum. Mechanical properties of nanohardness (HIT) and elastic modulus (Er) of the three types of dentin were measured before and after degradation, as well as the microtensile strength. Results of the microtensile strength and nanoindentation tests were submitted to ANOVA two and three factors for repeated measurements, and Tukey post-test (α = 0.05). Results: Higher values of tensile strength were found for sound dentin in control (40.30 ± 21.38 MPa) and 0.5% EGCG (30.05 ± 19.67 MPa) groups. Before degradation, higher values of HIT (0.237 ± 0.062 GPa) and Er (5.58 ± 1.75 GPa) were found for the 0.5% EGCG group in caries-affected dentin. After degradation, 2% chlorhexidine group had higher values of HIT and Er for sound (0.134 ± 0.020 GPa and 3.57 ± 0.40 GPa) and sclerotic (0.201 ± 0.048 GPa and 4.30 ± 0.56 GPa) dentin. Conclusions: The use of 2% chlorhexidine, mainly in sclerotic dentin, was shown to be more effective in promoting increase in the microtensile strength and mechanical properties, before and after the degradation. The 0.5% EGCG showed a better effect on mechanical properties in caries-affected dentin, before the enzymatic degradation. Clinical Relevance: The effective knowledge of the mechanism of action of protease inhibitors in different types of dentin could contribute to the improvement of the resistance of the substrate and to the longer longevity of the bonding processes on this tissue. / FAPESP: 2015/10566-7
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Diabetes promove potencialização da reabsorção óssea alveolar e causa desequilíbrio entre MMPS e colágeno em camundongos com doença periodontal experimental /Beltran, Carluci Taís. January 2016 (has links)
Orientadora: Sandra Helena Penha de Oliveira / Banca: Letícia Helena Theodoro / Banca: Ana Paula Campanelli / Resumo: A doença periodontal (DP) e o diabetes mellitus (DM) são doenças inflamatórias crônicas, e quando associadas aumentam a destruição da região periodontal. Por esta razão, o objetivo do nosso trabalho foi avaliar o papel do diabetes sobre o processo inflamatório, reabsorção óssea alveolar, produção de metaloproteinase de matriz (MMP), colágeno e TGF-β1 em camundongos com DP experimental. Foram utilizados 40 camundongos Balb/c machos de 18 - 22 g, distribuídos igualmente em 4 grupos, sendo estes, normal (N), normal com doença periodontal (N+DP), diabético (DM) e diabético com doença periodontal (DM+DP). O diabetes foi induzido por tratamento com estreptozotocina 200 mg/kg por via intraperitoneal. Passados 7 dias os índices glicêmicos foram verificados, e os animais foram considerados diabéticos quando a glicemia apresentava-se igual ou superior a 250 mg/dL. Posteriormente, os camundongos do grupo com DP foram submetidos a uma ligadura em torno dos primeiros molares inferiores, e no 15º dia, estes animais foram eutanasiados e as amostras foram coletadas para as análises seguintes. O tecido gengival marginal foi coletado para as análises de marcadores inflamatórios, tais como, níveis de CXCL2, CCL3 e TGF-β1 por ELISA, expressão gênica de MMP-2, MMP-9, TGF-β1 e col1a2 por RT-PCR em tempo real, e atividade enzimática de MMP-2 e MMP-9 por zimografia. Os parâmetros de reabsorção de osso alveolar, recrutamento de neutrófilos e quantificação de colágeno também foram avaliados, pelo ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Periodontal disease (DP) and diabetes mellitus (DM) are chronic inflammatory diseases that when associated increase destruction in the periodontal region. Then, the aim of our study was to evaluate the role of DM in inflammatory process, bone resorption, matrix metalloproteinase (MMP), collagen and TGF-β1 production during periodontal disease experimental in mice. Forty Balb/c mice 18-22 g were used, divided equally into 4 groups, normal (N), normal with periodontal disease (N+DP), diabetic (DM), diabetic with periodontal disease (DM+DP). The diabetes was induced by 200 mg/kg streptozotocin via intraperitoneal. After of 7 days the glycemic indices was evaluated, and animals were considered diabetics than blood glucose has become equal to or greater than 250 mg/dL. Mice of the DP group had a ligature around the first molars, and 15th day, the animals were euthanized and samples were collected for the following analyzes. The gingival tissue was collected to analysis inflammatory markers, such as CXCL2, CCL3 and TGF-β1 levels by ELISA; gene expression of MMP-2, MMP-9, TGF-β1 and col1a2 by real time RT-PCR; and MMP-2 and MMP-9 enzyme activity by zymography. The parameters of alveolar bone resorption, neutrophil recruitment and collagen quantification also were evaluated by histological processing of the hemimandibles, which showed significant difference in DM+DP group. Periodontal disease was able to increase CXCL2, CCL3 and TGF-β1 production, however only CXCL2 and CCL3 producti... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Astenia dérmica regional hereditária equina : diagnóstico, ocorrência no Brasil e caracterização clinica /Badial, Peres Ramos. January 2013 (has links)
Orientador: Alexandre Secorun Borges / Banca: Carlos Alberto Hussni / Banca: João Pessoa Araújo Junior / Banca: Luiz Claudio Nogueira Mendes / Banca: Paulo Henrique Jorge da Cunha / Resumo: Este estudo foi realizado para caracterizar os achados dermatológicos, oftalmológicos e morfológicos da pele de cavalos com Astenia Dérmica Regional Hereditária Equina (HERDA) e padronizar um ensaio de "High Resolution Melting" (HRM), para determinar a ocorrência de heterozigotos. As avaliações e a padronização do HRM foram realizadas em cinco cavalos afetados (GA) e cinco não afetados (GC). Adicionalmente, cinco animais heterozigotos (GH) foram utilizados para padronizar o HRM. A ocorrência de heterozigotos foi determinada em 690 animais. Diversas regiões da pele foram mensuradas com cutímetro no GA e GC. Biópsias de pele foram submetidas aos exames histopatológico e ultraestrutural. Avaliação histopatológica foi realizada por dois patologistas. O exame oftalmológico incluiu, além das avaliações rotineiras, aferição dos diâmetros da córnea, paquimetria e biometria. Foi extraído DNA do sangue colhido do GA, GC, GH e de 690 cavalos e o HRM foi validado. Observou-se menor espessura de pele no GA. A sensibilidade e especificidade do diagnóstico histopatológico da pele dependeram do avaliador e da região, respectivamente. Foram observados menor espessura e maior curvatura e diâmetros da córnea no GA. O HRM apresentou elevadas acurácia e precisão. A frequência de heterozigotos foi de 4,7%. Apesar do padrão regional dos sinais dermatológicos, a diminuição da espessura da pele não é regional. Para o diagnóstico histopatológico, recomenda-se realizar biópsia de pele no pescoço, garupa ou dorso. A relevância clínica dos achados oftalmológicos deve ser investigada. O ensaio de HRM padronizado será útil na seleção dos acasalamentos, visando minimizar a ocorrência da doença / Abstract: The present study was conducted to characterize the dermatological, ophthalmological, and morphological findings from horses affected with Hereditary Equine Regional Dermal Asthenia (HERDA) and to standardize a High Resolution Melting (HRM) genotyping assay to determine the frequency of carriers. The evaluations and HRM standardization were performed in five affected (AG) and five non-affected (CG) horses. Additionally, five heterozygous (HG) horses were used to HRM standardization. The frequency of carriers was determined in 690 horses. Several skin regions of both groups were measured with a cutimeter Skin biopsies were submitted to histopathological and ultrastructural evaluations. Histopathological evaluation was performed by two pathologists. Ophthalmology included, besides the routine evaluations, corneal diameters measurement, pachymetry, and biometry. HRM was validated using purified DNA from blood samples of the AG, CG, HG and 690 horses. Skin thickness decrease was observed in the AG. Histopathological sensitivity and specificity to diagnose HERDA was dependent on the evaluator and region, respectively. HERDA horses exhibited decreased corneal thickness and increased corneal curvature and corneal diameters. The HRM assay resulted in high accuracy and precision. The estimated carrier frequency was 4.7%. Despite of the regional pattern of the dermatological signs, the decrease of skin thickness from HERDA horses is not regional. Skin samples of the neck, croup or back are recommended to diagnose HERDA. The relevance of the ocular findings should be further investigated. The standardized HRM assay will be useful in the management of breeding programs to minimize the occurrence of this disease / Doutor
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Efeito da suplementação do leite com proteínas de diferentes fontes (soro de leite, soja e colágeno) e da composição da cultura lática em iogurtes /Moretti, Bruna Rodrigues. January 2009 (has links)
Orientador: Ana Lúcia Barretto Penna / Banca: Mirna Lúcia Giante / Banca: Mieko Kimura / Resumo: A busca por uma alimentação balanceada e por alimentos que possam trazer benefícios à saúde do consumidor fez aumentar a demanda de alimentos funcionais, incluindo os produtos lácteos probióticos. A combinação de um produto suplementado com proteínas e fermentado por microrganismos probióticos pode gerar um produto com propriedades tecnológicas, sensoriais e funcionais que atendam a demanda por esses produtos. A suplementação do leite para a fabricação de iogurtes com diferentes tipos de proteínas melhora o valor nutricional do produto e afeta principalmente a formação da estrutura do gel do iogurte, alterando propriedades como textura, firmeza, viscosidade, retenção de água e separação do soro. O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da suplementação do leite com proteínas de diferentes fontes (soro de leite, soja e colágeno) e do tipo de cultura láctica (culturas tradicionais e probióticas) sobre as características físico-químicas e microbiológicas de iogurtes. O aumento da concentração de suplemento protéico resultou em aumento da capacidade da retenção de água e em redução da sinérese dos iogurtes. A adição de fibra natural de colágeno aos iogurtes resultou em produtos com maior capacidade de retenção de água, sinérese e consistência, que são propriedades importantes para a qualidade do iogurte. Por outro lado, a suplementação com isolado protéico de soja resultou em produtos com propriedades tecnológicas inadequadas, embora tenha obtido os melhores resultados no estímulo do desenvolvimento das culturas durante a fermentação. Os iogurtes fermentados com a cultura tradicional (S. thermophilus e L. bulgaricus) apresentaram maior acidez titulável, maior capacidade de retenção de água e menor sinérese do que os iogurtes fermentados com a cultura probiótica (S. thermophilus, L. bulgaricus e L. acidophilus). A suplementação... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available. / Mestre
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Influência da clareação dentária sobre o tecido pulpar de ratos diabéticos : aspectos histológicos e imunológicos /Ferreira, Luciana Louzada. January 2015 (has links)
Orientador: Luciano Tavares Angelo Cintra / Banca: André Luiz Fraga Briso / Banca: Eloi Dezan Junior / Banca: Carla Renata Sipert / Banca: Rodrigo Ricci Vivan / Resumo: Objetivo: Avaliar a influência da clareação dentária sobre o tecido pulpar de ratos diabéticos por meio da observação dos aspectos histológicos e imunológicos. Material e Método: Vinte e oito ratos Wistar foram divididos em quatro grupos: (N) normoglicêmicos; (NCla) normoglicêmicos-clareados; (D) diabéticos; (DCla) diabéticos-clareados. Quatorze animais receberam uma dose de 150mg/kg de aloxano para indução da diabetes, via IM. Após 3 dias, todos os animais foram anestesiados e realizado o procedimento clareador com gel de peróxido de hidrogênio (H2O2) a 35% (Whiteness HP Maxx) aplicado uma vez nos molares superiores direitos por 30 minutos. Os molares superiores esquerdos foram usados como controle. Após 2 e 30 dias os animais foram eutanaziados e as maxilas processadas para análise histológica e histoquímica. Foram realizadas análises qualitativas para a reação inflamatória e imunomarcação, e quantitativas para a redução da área da camara pulpar e fibras colágenas. Os resultados foram submetidos à análise estatística com nível de significância de 5% (p<0.05). Resultados: Aos 2 dias observou-se infiltrado inflamatório leve no grupo NCla e severo no grupo DCla (p<0.05). Quanto ao grau de maturação das fibras colágenas, aos 2 dias observou-se maior quantidade de fibras imaturas no grupo N, com diferença estatística para os demais grupos (p<0.05), e, menor quantidade de fibras maduras no grupo N com diferença significante para os demais grupos (p<0.05). Aos 30 dias não foi observado concentração de células inflamatórias e não houve diferença estatística entre os grupos para ambas as fibras colágenas (p>0.05). Entretanto, houve diferença significante quando comparados os grupos NCla e DCla em relação à redução da área da câmara pulpar devido a deposição de dentina reacionária... / Abstract: Objective: To evaluate the influence of dental bleaching on the pulp tissue of diabetic rats over the histological aspects and proinflammatory cytokines regulation. Methods: Twenty-eight Wistar rats were divided into four groups: (N) normoglycemic; (NBle) normoglycemic-bleached, (D) diabetic, (DBle) diabeticbleached. Fourteen animals reveiced a 150mg/kg dose of alloxan for diabetes induction, via IM. After 3 days, all animals were anesthetized and the dental bleaching performed using 35% hydrogen peroxide (H2O2) gel (Whiteness HP Maxx) in the right maxillary molars for 30 minutes. Left upper molars were used as control. Two and 30 days after the animals were euthanized, and the hemi-maxillae processed for histological and histochemistry analysis. Qualitative analyses were performed for inflammatory reaction and immunolabelling, and quantitative for pulp chamber area reduction and collagen fibers. The results were submitted to statistical analysis (p<0.05). Results: At two days a mild inflammation was observed in NBle group and severe for DCla (p<0.05). For the maturation of collagen fibers, at two days was observed an increase amount of immature fibers in the N group, with statistical difference to the other groups (p<0.05), and a reduced amount of mature fibers in the N group with significant diference to the other groups (p<0.05). At 30 days no inflammatory cells were observed and there was no statistical difference between the groups for both fibers type (p>0.05). However, there was a significant difference when NBle and DBle groups were compared with regards to reduction of the pulp chamber area due the presence of reactionary dentin deposition (p<0.05). With regards to immunoistochemistry, was observed for IL-6 at 2 days an increased immunolabelling in the bleached groups (NBle and DBle) (p<0.05)... / Doutor
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