A adição de soro de queijo ao leite é uma das fraudes mais frequentes, tendo em vista a similaridade entre as matrizes, não havendo necessidade de correções de pH, teor de proteínas dentre outros parâmetros físico-químicos. A metodologia analítica, aplicada pelos laboratórios do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), para a detecção deste tipo de fraude, está baseada na determinação do índice de caseinomacropeptídeo (CMP), composto que está presente no soro de queijo após o processamento. Entretanto, a presença de bactérias no leite, principalmente Pseudomonas fluorescens, por estocagem indevida, produz peptídeo semelhante, o pseudo-caseinomacropeptídeo (pseudo-CMP). O método atualmente utilizado pelo MAPA não é capaz de diferenciar a fraude por adição de soro de queijo da contaminação bacteriana. A partir desta consideração, neste trabalho foram desenvolvidos dois métodos analíticos capazes de diferenciar e quantificar o peptídeo marcador da adulteração (CMP) do peptídeo gerado pela contaminação bacteriana do leite (pseudo-CMP). Ambas as metodologias utilizaram cromatografia a liquido acoplada a espectrometria de massas em tandem e eletrospray no modo positivo. A preparação das amostras foi baseada na digestão enzimática (com tripsina e a pepsina) dos peptídeos. Os parâmetros de espectrometria de massas foram otimizados com peptídeos sintéticos correspondentes aos fragmentos gerados pela digestão enzimática. Na metodologia com tripsina foi realizada pré-concentração, purificação dos analitos e mudança de solvente por extração em fase sólida (EFS) utilizando o cartucho de estireno-divinilbenzeno como fase sólida. Para extração dos analitos foi desenvolvido um método utilizando banho de ultrassom. Este método foi validado e os coeficientes de variação dos ensaios de repetitividade e reprodutibilidade, respectivamente foram: de 4,6 a 6,8% e de 1,1 a 3,0%. A faixa de linearidade foi de 25 a 200 mg mL-1 com coeficientes de determinação maiores que 0,99. Na metodologia com pepsina não houve a necessidade de EFS e a avaliação de desempenho do método foi satisfatória. Os limites de detecção e quantificação obtidos foram de 1 e 5 mg mL-1, respectivamente com coeficientes de variação menores que 10 e 16% para os ensaios de repetitividade e reprodutibilidade. A análise de amostras reais mostrou que ambos os métodos são capazes de identificar e diferenciar adulteração de contaminação bacteriana do leite. / The addition of whey to milk is one of the most frequent frauds due to the similarity between matrices, with no need of pH corrections, protein content among and other physicochemical parameters. The analytical methodology used in the laboratories of the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply (MAPA), for detecting this fraud is based in the determination of the caseinomacropeptídeo (CMP) index, which is a compound present in the whey. However, the presence of bacteria in milk, especially Pseudomonas fluorescens, for improper storage, can produce a very similar peptide called pseudo-caseinomacropeptídeo (pseudo-CMP). The methodology currently used by MAPA is not able to differentiate fraud by addition of whey or by bacterial contamination. From this consideration, in this work two analytical methods have been proposed to differentiate and quantify the CMP from the pseudo-CMP. These methodologies uses liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry and electrospray ionization in positive mode. The sample preparation was based on the enzymatic digestion (with pepsin and trypsin) of the peptides. The parameters for mass spectrometry wee optimized with synthetic peptides corresponding to fragments generated by enzymatic digestion. When trypsin was used, the pre-concentration, purification of the analytes and change of solvent, has been done by solid phase extraction (SPE) with styrene-divinylbenzene cartridge. The extraction step was performed by ultrasound bath. The methodology was fully validated with coefficient of variation for repeatability and reproducibility, respectively ranging from 4.6 to 6.8% and 1.1 to 3.0%. The linear range was evaluated from 25 to 200 mg mL-1 with correlation coefficients greater than 0.99. In the methodology that uses pepsin, the SPE was not necessary to ensure the performance of the method. The limits of detection and quantification were 1 and 5 m g mL-1, respectively, with coefficients of variation lower than 10 and 16% for the repeatability and reproducibility. The analysis of real samples showed that both methods are capable to differentiate and identify adulteration from the bacterial contamination in milk.

A indústria de celulose do Brasil progrediu muito nas últimas décadas no que tange ao gerenciamento ambiental de seus resíduos. Entretanto, existem perspectivas para usos mais nobres destes resíduos, objetivando-se um gerenciamento ambiental ainda melhor e, eventualmente, economicamente vantajoso. Neste trabalho, a serragem, o resíduo do digestor e o lodo da ETE foram submetidos a condições de pirólise. O processo de pirólise foi desenvolvido para o resíduo do digestor, e após, foi aplicado para as demais biomassas, a fim de avaliar o potencial de todos os resíduos para a produção de bio-óleos. As cromatografias gasosas monodimensional (1D-GC/qMS) e bidimensional abrangente (GC×GC/TOFMS) foram utilizadas para análise qualitativa e semiquantitativa dos bio-óleos. A maior eficiência da GC×GC/TOFMS proporcionou um estudo detalhado da composição dos bio-óleos, indicando a presença de um maior número de compostos detectados e tentativamente identificados e de coeluições que ocorreram na 1D-GC/qMS, aprimorando a investigação de caracterização dos bio-óleos. Por outro lado, a 1D-GC implica em uma análise mais simples e de menor custo, que forneceu uma visão geral dos componentes majoritários dos bio-óleos. Produtos de importância industrial, como fenóis, foram identificados como componentes majoritários nos bio-óleos, da serragem e do resíduo do digestor, indicando seu uso potencial como fontes destas matérias-primas para a indústria, e a semelhança química entre eles abre perspectivas para a pirólise conjunta destas biomassas. / Brazilian pulp industry has greatly improved in the last decades regarding environmental residues management. However, there is still perspective for a better use of its residues, having in mind an improved environmental management and a potential economic advantage. This study, sawdust, digester residue and the wastewater treatment sludge underwent pyrolysis conditions. The pyrolysis process was developed for digester residue, and than, was applied to the others biomasses, in order to investigate the potential of resulting bio-oils for further applications. One-dimension (1D-GC/qMS) and comprehensive two-dimension gas chromatography (GC×GC/TOFMS) have been employed for qualitative and semi-quantitative analysis of these bio-oils. The higher chromatographic efficiency of GC×GC provided a detailed study of the composition of bio-oils, resulting in a higher number of compounds detected and tentatively identified, and it also unveiled co-elutions that happened in 1D-GC, providing a higher quality characterization of these matrices. On the other hand, 1D-GC resulted in a simpler and cheaper analysis that has provided a general view of the major components of the bio-oils. Products of industrial importance, such as phenols, were identified as major components in the bio-oils of sawdust and digester residue, indicating the potential use of these bio-oils as sources of raw material for the industry, and chemical similarity between them opens prospects for the combination of these biomasses pyrolysis.

Métodos voltamétricos e por cromatografia capilar eletrocinética em microemulsão (MEEKC) com detecção UV foram empregados neste estudo para desenvolver metodologia de análise direta dos antioxidantes BHA, TBHQ, BHT e PG em biodiesel, sem extração ou pré-concentração, empregando a técnica de adição de padrão. Água, SDS e n-pentanol constituem a microemulsão do tipo água em óleo (ME a/o) na qual foi dissolvida a amostra de biodiesel. Nesse meio, a partição dos analitos ocorre entre a fase contínua da ME e as gotículas de água. Tanto medidas por voltametria potenciodinâmica como de pulso diferencial indicaram uma relação linear entre o teor de TBHQ no meio e a corrente de oxidação, obtendo-se, a partir das curvas analíticas, concentrações em biodiesel de mesma ordem de grandeza, o que evidencia a viabilidade dessa determinação.Nos ensaios por MEEKC, não foi possível separar os antioxidantes BHA, TBHQ e BHT, provavelmente por terem mobilidades semelhantes às dos ésteres do biodiesel, nas condições dos experimentos.A adição de trietilamina (TEA) à ME a/o, visando obter o ânion correspondente ao PG, permitiu sua separação e identificação com um tempo de retenção de 17 minutos e tempo de migração relativo 0,23. A reação entre o PG e a TEA foi confirmada por espectrometria de absorção no UV-Vis. Ainda, as baixas condutividades das MEs a/o contendo biodiesel evitaram o efeito antistacking, favorecendo seu uso na análise direta de antioxidantes por voltametria e MEEKC. / Voltammetry and microemulsion electrokinetic chromatography (MEEKC) with UV detection were employed in this study aiming the direct analysis of the antioxidants BHA, TBHQ, BHT and PG in biodiesel, without pre-concentration or extraction, using the standard addition method. The biodiesel sample was dissolved in a water-in-oil microemulsion (w/o ME) containing water, n-pentanol and SDS. In this medium, the partitioning of the analytes takes place between the w/o ME continuous phase and the disperded water droplets. Determination of the TBHQ content in biodiesel, either through potentiodynamic voltammetry or differential pulse voltammetry indicated a linear relationship between the oxidation current and the concentration of the antioxidant. The results obtained from the analytical curves showed concentrations of the analyte in biodiesel of the same order of magnitude, evidencing the viability of the procedure. Separation of the antioxidants BHA, BHT and TBHQ were not feasible through MEEKC, probably because their mobilities are similar to those of the biodiesel esters under the experimental conditions employed. Addition of triethylamine (TEA) to the w/o ME, in order to obtain the PG corresponding anion, allowed its separation and identification with a retention time of 17 minutes and a relative migration time of 0.23. The reaction between PG and TEA in the w/o ME was confirmed by UV-Vis absorption spectroscopy. Still, the low conductivities of the w/o MEs containing biodiesel avoided antistacking effect, thus favoring the direct analysis of antioxidants by voltammetry and MEEKC.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:32:42Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6460_1.pdf: 4697982 bytes, checksum: 75807767b4cc104522e97b8b81fea2e7 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Atualmente, o setor magistral exerce um importante papel nos cuidados para com a saúde, sendo necessário cada vez mais sua adequação à legislação vigente, de modo a garantir a qualidade de seus produtos. No Brasil, é crescente a opção por fórmulas manipuladas, como alternativa aos medicamentos industrializados, uma vez que é possível o preparo de medicamentos personalizados, com qualidade e de custo reduzido, em relação aos medicamentos industrializados. Dentre os benefícios que o medicamento manipulado apresenta, podemos destacar a possibilidade da associação entre fármacos nas diversas classes terapêuticas, incluindo a classe dos anti-reumáticos. A partir deste cenário, o presente trabalho teve como objetivo analisar termicamente as alterações nos fármacos anti-reumáticos, ciclobenzaprina, hidroxicloroquina, meloxicam, diacereína e prednisona e suas possíveis associações binárias. Primeiramente foi realizado um estudo térmico, através da Análise Térmica Diferencial (DTA) nos fármacos isolados e nas misturas binárias, para avaliar as mudanças nas propriedades físico-químicas em conseqüência da temperatura. Os resultados mostraram que as misturas binárias apresentaram ponto de fusão característico de misturas eutéticas com deslocamento para temperaturas inferiores, podendo indicar interações entre os fármacos utilizados nas misturas, deixando-os menos estáveis. Em seguida, foi realizado estudo de Espectrometria no Infravermelho (IV) e de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE), nos fármacos isolados e nas misturas binárias, preparadas na proporção 1:1. As análises foram realizadas antes e após submeter às amostras ao aquecimento, com intuito de analisar a presença ou não de alterações decorrentes do aquecimento. Os resultados mostraram que através do IV não foi possível identificar alterações significativas nos fármacos isolados e nas misturas, antes e após o aquecimento. Porém, através da CLAE foi possível observar essas alterações, uma vez que todos os fármacos foram degradados após o aquecimento. As misturas binárias mostraram-se instáveis, pois houve degradação dos fármacos após o aquecimento, resultados esses que corroboram com os obtidos na análise térmica, podendo indicar uma possível redução na estabilidade desses fármacos quando associados. As técnicas utilizadas neste trabalho para avaliação dos fármacos anti-reumáticos frequentemente utilizados na manipulação se mostraram eficazes, uma vez que foi possível avaliar as modificações nas propriedades físico-químicas, as alterações e interações, antes e após o aquecimento, nos fármacos isolados e nas misturas binárias

Made available in DSpace on 2018-09-11T12:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_12525_Versão Final - ELZIANE.FAVORETO.ALVES.FIRMINO20180829-110236.pdf: 3016458 bytes, checksum: 30954e33b5bfa449713008cc6b94142a (MD5) Previous issue date: 2018-05-03 / A atividade agrícola utiliza-se de grande quantidade de defensivos para a garantia e aumento da sua produtividade. No entanto, tal prática impacta o meio-ambiente, principalmente a qualidade dos corpos dágua. A persistência de agrotóxicos no meio ambiente pode ser outro agravante, pois sua mobilidade está relacionada com a retenção/liberação nos solos e sedimentos. Assim, neste estudo, avaliou-se a qualidade da água superficial e do sedimento de rio de três localidades da Sub-bacia hidrográfica do rio Alegre em relação ao uso e ocupação do solo e à contaminação por agrotóxico. Pelo período de um ano, foram coletadas amostras de água para determinação de variáveis físico-químicas e estabelecimento do Índice de Qualidade de Água (IQA). As águas foram enquadradas como de classe 2, segundo CONAMA 357/2005, e em sua maioria classificadas como boa ou ótima pelo IQA. Das variáveis analisadas pelo método de Análise de Componentes Principais, as mais representativas da variabilidade espacial e temporal da qualidade da água foram: sólidos totais, sólidos fixos, condutividade, alcalinidade, ortofosfato, pH e oxigênio dissolvido. No mesmo período, coletaram-se amostras de sedimento para investigar a presença do pesticida flutriafol. Nas determinações cromatográficas, não foi detectado flutriafol nas amostras de sedimento em qualquer período de amostragem. O método apresentou eficiência de recuperação acima de 78% para as amostras fortificadas, que pode ser considerado satisfatório, dada a natureza complexa da matriz.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-20T20:59:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Fabíola Bernardo Carneiro.pdf: 3023831 bytes, checksum: 529d070bb96efe5eb6775ad4f7dbc996 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-28T18:16:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Fabíola Bernardo Carneiro.pdf: 3023831 bytes, checksum: 529d070bb96efe5eb6775ad4f7dbc996 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T18:16:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) TESE Fabíola Bernardo Carneiro.pdf: 3023831 bytes, checksum: 529d070bb96efe5eb6775ad4f7dbc996 (MD5) Previous issue date: 2017-04-27 / medicina tradicional e a medicina complementar e alternativa reforçando o compromisso de estimular o desenvolvimento de políticas públicas a fim de inseri-las no sistema oficial de saúde. As iniciativas do Ministério da Saúde, em parceria com órgãos do governo e sociedade civil, visam viabilizar a utilização racional de plantas medicinais e fitoterápicos, tendo como linhas condutoras à preservação da biodiversidade, o desenvolvimento sustentável, a repartição de benefícios, além do benefício à população brasileira. A qualidade da matéria-prima vegetal tem um importante papel na obtenção de produtos fitoterápicos, já que esta apresenta como características a complexidade e a variabilidade da sua composição. A Schinus terebinthifolius Raddi é popularmente conhecida por aroeira pertence à família Anacardiaceae e apresenta atividades antiinflamatória, antidiarréica, diurética e antipirética. Neste trabalho aSchinus terebinthifolius Raddi, coletada em diferentes estados do nordeste brasileiro, foi caracterizada por métodos cromatográficosaplicados em um estudo de monitorização quantitativa dos extratos vegetais obtidos pelo processo de turbólise. A análise química mostrou que os exemplares estudados apresentaram compostos químicos majoritários distintos, α-pineno, limoneno, felandreno e careno, infere-se que, as variações obtidas possam estar relacionadas às condições ambientais, a diferença de solo, além da idade fisiológica das plantas. Estudo quimiométrico de análise de componentes principais (PCA)foi realizado para confirmar as semelhanças químicas entre as plantas coletadas. Os ensaios realizados por cromatografia gasosa acoplada a detector de massas e tratados por PCA demonstraram que o grupo A formado pelos estados de RN, PB, SE, PE, AL, grupo B formado pelo estado do CE e o grupo C formado pelos estados de PI, MA, BA apresentaram respectivamente careno, felandreno e limoneno, como marcadores que influenciaram na formação dos grupos por similaridade, podendo-se afirmar que as plantas pertencentes ao mesmo grupo são semelhantes porque apresentam os mesmos metabólitos secundários. A Análise realizada por CCD-AE revelou a presença de ácido gálico e catequina confirmado por CLAE-DAD e foi útil na separação e identificação de taninos e flavonoides em folhas de S. terebinthifolius. Em função dos resultados encontrados pode-se concluir que os métodos empregados neste trabalho permitiram alcançar os objetivos propostos de caracterização qualitativa e quantitativa do extrato bruto de folhas deS. terebinthifolius. Para avaliar a atividade biológicados extratos,sobre o crescimento das cepas de bactérias e de fungos, foi realizado o teste de concentração inibitória mínima (CIM) nas concentrações de 1024 μg/mL a 32 μg/mL, os quais não produziraminibição nesta concentração, o que não quer dizer que a amostra vegetal não tenha atividade contra os micro-organismos testados em concentrações superiores a esta. / In Brazil, the federal government has invested in the global strategy for traditional medicine, complementary and alternative medicine through number programs, reinforcing the commitment to stimulate the development of public policies in order to introduce them into the official health system. The Ministry of Health initiatives, in partnership with government agencies and civil society, aim to enable the rational use of medicinal plants and phytotherapics, having as a guideline the preservation of biodiversity, sustainable development, health and economic benefits to the population. The quality of the vegetal raw material has an important role in the production of herbal products due to the complexity and variability of its composition. Schinus terebinthifolius Raddi is popularly known as aroeira belongs to family Anacardiaceae and has anti-inflammatory, antidiarrheal, diuretic and antipyretic activities. In the present work, Schinus terebinthifolius Raddi collected in different states of northeastern Brazil, was characterized by chromatographic methods and used in a quantitative monitoring study of the plant extracts obtained by the turbo extraction process. The chemical analysis showed that the studied specimens presented different chemical compounds, α-pinene, limonene, phellandrene and carene, it is inferred that, the variations obtained could be related to the environmental conditions, the soil differences, in addition to the physiological age of the plants. A major component analysis (PCA) was performed to confirm the chemical similarities between the collected plants. The tests performed by gas chromatography coupled to mass detector and treated by PCA, demonstrated that the group A formed by the strains collected on the states of RN, PB, SE, PE, AL, group B formed by the strains collected on the state of the EC and group C formed by the strains collected ont the states of PI , MA, BA, presented carene, phellandrene and limonene as markers that influenced the formation of groups by similarity, and it is correct to say that plants belonging to the same group are similar because they have the same secondary metabolites. Analysis by high-performance thin-layer chromatography revealed the presence of gallic acid and catechin, which was confirmed by high performance liquid chromatography. Such techniques were useful in the separation and identification of tannins and flavonoids presents in the leaves of S. terebinthifolius. Based on the results, it can be concluded that the methods peformed in this work made it possible for us to characterize the raw extracts of S. terebinthifolius leaves. In order to evaluate the biological activity of the extracts on the growth of bacterial and fungal strains, a minimum inhibitory concentration (MIC) test was performed at concentrations from 1024 μg / mL to 32 μg / mL. No inhibition was observed at these concentrations. The fact that there was no CIM does not mean that the plant sample has no activity. Concentrations higher than tested may exhibit antibacterial and fungicidal activity.

Made available in DSpace on 2018-09-11T12:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_12525_Versão Final - ELZIANE.FAVORETO.ALVES.FIRMINO20180829-110236.pdf: 3016458 bytes, checksum: 30954e33b5bfa449713008cc6b94142a (MD5) Previous issue date: 2018-05-03 / A atividade agrícola utiliza-se de grande quantidade de defensivos para a garantia e aumento da sua produtividade. No entanto, tal prática impacta o meio-ambiente, principalmente a qualidade dos corpos dágua. A persistência de agrotóxicos no meio ambiente pode ser outro agravante, pois sua mobilidade está relacionada com a retenção/liberação nos solos e sedimentos. Assim, neste estudo, avaliou-se a qualidade da água superficial e do sedimento de rio de três localidades da Sub-bacia hidrográfica do rio Alegre em relação ao uso e ocupação do solo e à contaminação por agrotóxico. Pelo período de um ano, foram coletadas amostras de água para determinação de variáveis físico-químicas e estabelecimento do Índice de Qualidade de Água (IQA). As águas foram enquadradas como de classe 2, segundo CONAMA 357/2005, e em sua maioria classificadas como boa ou ótima pelo IQA. Das variáveis analisadas pelo método de Análise de Componentes Principais, as mais representativas da variabilidade espacial e temporal da qualidade da água foram: sólidos totais, sólidos fixos, condutividade, alcalinidade, ortofosfato, pH e oxigênio dissolvido. No mesmo período, coletaram-se amostras de sedimento para investigar a presença do pesticida flutriafol. Nas determinações cromatográficas, não foi detectado flutriafol nas amostras de sedimento em qualquer período de amostragem. O método apresentou eficiência de recuperação acima de 78% para as amostras fortificadas, que pode ser considerado satisfatório, dada a natureza complexa da matriz.

Orientador: Francisco Maugeri Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-20T21:29:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kamimura_ElianaSetsuko_M.pdf: 2252737 bytes, checksum: 28619ec44da619f51644f2e94dfd3cd9 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Neste trabalho foi proposto um modelo matemático para descrever o comportamento de coluna cromatográfica por afinidade. O processo foi modelado a partir dos balanços de massa de uma coluna de leito fixo e equações cinéticas de adsorção levando consideração também a resistência à transferência de massa externa e a dispersão axial, Obteve-se um sistema de equações diferenciais. A resolução numérica deste sistema foi obtida utilizando-se, simultaneamente, os métodos de Crank-Nicholson e Runge-Kutta de quarta ordem. A validade do modelo foi verificada a partir de dados experimentais obtidos da literatura, sendo que o parâmetro de ajuste do modelo proposto foi a porosidade do leito. Com o intuito de verificar as influências dos parâmetros cinéticos e condições de operação na eficiência de colunas de adsorção, foi realizado um estudo paramétrico. Em ambas escalas estudadas (de laboratório e de produção industrial), foi observado que a porosidade, velocidade superficial e diâmetro da coluna são os parâmetros de maior sensibilidade. No entanto, foi demonstrado que a operação de uma coluna de adsorção por afinidade apresenta considerável estabilidade, haja vista que nenhum parâmetro afeta significativamente a operação da coluna. Por outro lado, parâmetros como Qm (capacidade máxima de adsorção), k1 e k2 (constantes cinéticas de adsorção) devem ser otimizados antecipadamente, através da escolha do adsorvente e condições de adsorção desejáveis. E ainda, com relação aos problemas de limitações do processo de adsorção dentro da coluna, foi observado que o processo é limitado pela taxa de reação, podendo ser negligenciados os problemas de transferência de massa. Para diferentes valores do coeficiente de dispersão, foi possível verificar que a coluna opera aproximadamente como um reator tubular ideal. As conclusões de que se pode desprezar tanto os problemas de transferência de massa como os de dispersão, podem simplificar significativamente a modelagem e simulação de colunas de adsorção por afinidade / Abstract: In this work a mathematical model was proposed to describe the behavior of affinity chromatographic column. The process was modeled from mass balance and affinity adsorption kinetics equations in a fixed-bed column. By considering the extern mass transfer resistance and axial dispersion a set of differential equations was obtained. A combination of the Crank-Nicholson and Runge-Kutta fourth order numerical methods was used in the simulation procedure. The model validity was verified using experimental data from the literature. The adjustment parameter was the void column. This same model was used to predict the behavior of large-scale adsorption columns. A parametric study was performed in order to study the influence of both kinetics and operating conditions in the adsorption column efficiency. The more sensitive parameters were showed to be the porosity, superficial velocity and column diameter for both scales analyzed. It was showed, however, that an affinity adsorption column operation is very stable since no parameters \significantly affects the column operation. On the other hand, parameters like Qm (the maximum adsorption parameter), k1 (the forward kinetic constant) and k2 (the backward kinetic constant) must be optimized previously by choosing the suitable adsorption conditions and adsorbent. Also, looking into the limitation problems of the adsorption process inside the column, it was showed that the process is rate reaction limited, so that mass transfer problems can be neglected. By changing the dispersion coefficient it was also showed that the column operate nearly of an ideal plug flow reactor. Both findings no mass transfer problems and no dispersion problems can simplify the modelling and simulation of affinity adsorption columns / Mestrado / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Carol Hollingworth Collins / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-07-21T08:51:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_PauloRobertoNogueira_D.pdf: 2958951 bytes, checksum: f467e72e3d59648c165286cecd155d38 (MD5) Previous issue date: 1996 / Doutorado

Orientador: Gilberto de Nucci / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T10:06:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bento_AntonioCarlos_D.pdf: 5486208 bytes, checksum: 86e0d68eb8dc5a8d1275f317cfca657e (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Nesta tese, caracterizamos bioquímica e farmacologicamente três polipeptídeos do veneno da aranha Phoneutria nigriventer. Após o fracionamento parcial do veneno através da filtração em gel de Sephadex G-1 O e cromatografia de troca iônica, obtivemos oito frações com atividade espasmogênica em tecidos arteriais e venosos de coelho e uma fração com atividade edematogênica em pele de coelho. Duas das frações com atividade sobre o músculo liso vascular foram selecionadas para purificação em HPLC e caracterização bioquímica através de eletroforese, determinação da composição de aminoácidos e seqüenciamento da região N-terminal dos polipeptídeos, denominados PNV1 e PNV2. A fração com atividade edematogênica em pele de coelho foi também purificada e o polipeptídeo responsável por esta atividade caracterizado bioquimicamente e denominado PNV3. A atividade espasmogênica do PNV1, PNV2 e das frações provenientes das várias etapas de purificação, foi testada num sistema de cascata. Os coelhos anestesiados, foram exsanguinados e os vasos sanguíneos (artéria pulmonar e veias cava e mesentérica) foram removidos, cortados em espiral e montados para registro isotônico das contrações. O PNV1, PNV2 e as frações obtidas após purificação por HPLC foram liofilizadas, ressuspendidas em H2O deionizada e injetadas na forma de "bolus" sobre os tecidos. A atividade edematogênica do PNV3 e das frações provenientes das várias etapas de purificação, foi testada em coelhos anestesiados e injetados com uma mistura de azul de Evans (0,5 ml/kg, 2,5%) e 1251-albumina (1,5 µCi/kg). As substâncias testadas foram injetadas intradermicamente no dorso dos animais. Após 30 minutos, foi coletado o sangue e o animal sacrificado. A pele dorsal foi removida e os sítios cortados para contagem de radioatividade acumulada. O PNV1, PNV2 e PNV3 possuem massa molecular de 13,9 kDa, 12,1 kDa e 14,5 kDa, com 125, 102 e 132 resíduos, respectivamente. A seqüência N-terminal para os três polipeptídeos foi a seguinte: EAFPGQST, LAKRADICQPGKTSQRACET e AVFAIQDQPC, respectivamente. A purificação e caracterização bioquímica destes peptídeos se constitui em ferramentas úteis não apenas para uma melhor compreensão dos mecanismos fisiopatológicos decorrentes do envenenamento humano por Phoneutria nigriventer mas também para a compreensão do papel do sistema calicreína tissular-cininogênio cinina, tendo em vista que nossos resultado sugerem fortemente que o PNV3 é capaz de ativar este sistema / Abstract: This thesis describes the biochemical and pharmacological characterization of three polypeptides from the venom of the spider Phoneutria nigriventer. The fractionation of Phoneutria nigriventer venom by gel filtration on Sephadex G-10-120 provided eight peaks (SI to S-VIII) of which only the first (S-I) was investigated further. lonexchange chromatography of S-I on CM-cellulose-52 yielded 16 fractions (C-I to C-XVI). Of these, Fractions C-VII + VIII and C-X +XI were further purified by reverse phase HPLC to yield two polypeptides (PNV1 and PNV2) with contractile activity. Similar purification of Fraction C-XIII by HPLC resulted in the isolation of the polypeptide with oedematogenic activity (PNV3). Ali three proteins were single chain polypeptides (as shown by SDS-PAGE under reducing conditions) with global amino acid compositions (excluding Trp) of 125, 102 and 132 residues corresponding to molecular weights of 13,900, 12,100 and 14,500 for PNV1, PNV2 and PNV3, respectively. The N-terminal amino acid sequencesof PNV1, PNV2 and PNV3 were: EAFPGQST, LAKRADICQPGKTSQRACET, and AVFAIQDQPC. The contractile activity of PNV1 and PNV2 was examined using rabbit arterial and venous vessels. The vessels were mounted in a cascade system and perfused with warm (37°C) and oxygenated (95% O2 + 5% CO2 Krebs' solution. Since the spasmogenic effect of whole Phoneutria nigriventer venom in rabbit vascular smooth muscle is not affected by tetrodotoxin, it is unlikely that sodium channel activation plays a role in these tissues, as it does in both rat phrenic-diaphragm muscle-nerve preparation and guinea-pig isolated atria. Furthermore, the finding that the a-adrenoceptor antagonist phenoxybenzamine does not affect PNV-induced contractions excludes the possibility that Phoneutria nígríventer venom induces endogenous noradrenaline release from autonomic nerve endings present in the vascular walls, as occurs in guinea pig auricles. Phoneutría envenomation is mainly characterized by severe local pain, but it may be accompanied by vascular disturbances such as lung oedema and priapism. Whether these peptides with vascular smooth muscle spasmogenic activity are responsible for the mentioned permeability alterations, it remains to be further investigated. The oedema formation induced by PNV3 was investigated in rabbit skin as the local accumulation of 1251-human serum albumin. Our results showed that PNV3 significantly increased the vascular permeability in the rabbit skin. The increased microvascular permeability induced by whole Phoneutría nígríventer venom in rabbit skin involves local kinin synthesis in response to the activation of tissue (but not plasma) kallikrein-kininogen-kinin system. The biochemical identification of the peptide responsible for this activity in Phoneutría venom might provide a useful tool to further understand the role of tissue kallikrein-kinin system / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas