La capacitation des spermatozoïdes est un processus indispensable au succès de la reproduction chez les animaux à fécondation interne. In vivo, ce processus se produit dans les voies génitales femelles où les spermatozoïdes peuvent interagir avec les cellules épithéliales de l'oviducte et leurs sécrétions. Les interactions avec les différentes molécules composant cet environnement permettent aux gamètes mâles de conserver et de promouvoir leur capacité à féconder l'ovule. Également, il ne faut pas négliger l'apport des gamètes. Les protéines intrinsèques aux spermatozoïdes participent aussi à l'obtention d'une cellule compétente à interagir avec l'ovule. Ce mémoire présente une étude portant sur la localisation de deux protéines chaperonnes ubiquitaires, Hsp60 et Grp78, dans les spermatozoïdes et le système reproducteur femelle ainsi que sur l'effet des protéines Hsp60 et Grp78 recombinantes commerciales sur les différentes fonctions des spermatozoïdes humains. / Sperm capacitation is a prerequisite to ensure internal fertilization. In vivo, this process occurs in the female genital tract where sperm cells interact with oviduct epithelial cells as well as their secretions. These interactions allow to spermatozoa to maintain and promote their capacity of achieving fertilization. Endogenous sperm proteins also contribute to the success of fertilization. They sustain the possibility to obtain a competent sperm cell able to interact and fuse with the egg. The present study investigates the presence of Hsp60 and Grp78 in spermatozoa and female reproductive tract as well as the effect of commercial recombinant exogenous Hsp60 and Grp78 on human sperm functions in vitro.

L’obtention de spermatozoïdes fécondants est un processus long et multi étapes, débutant par la production des gamètes mâles dans le testicule. Les spermatozoïdes sont ensuite successivement maturés au cours du transit épididymaire puis lors de leur passage dans les voies génitales femelles au cours du processus de capacitation. Ces étapes de maturation post-testiculaires concernent notamment la composition lipidique du gamète pour lui permettre d’acquérir une fluidité membranaire essentielle à la fécondation. Les résultats présentés dans cette thèse mettent en évidence l’importance de l’homéostasie lipidique épididymaire pour la maturation lipidique des spermatozoïdes et l’acquisition du pouvoir fécondant. Au niveau moléculaire cette homéostasie lipidique est régulée par les isoformes α et β des LXRs, les récepteurs nucléaires des oxystérols (NR1H3 et NR1H2, respectivement). Un régime alimentaire enrichi en cholestérol chez des souris jeunes invalidées pour les LXRs entraîne une infertilité avec une atteinte spécifique de l’épididyme. La maturation épididymaire des spermatozoïdes est alors altérée, entraînant des défauts de compositions lipidiques et protéiques de la membrane plasmique spermatique. Ces défauts ont des répercussions délétères sur la capacitation, issues de perturbations des flux calciques et de la tyrosine phosphorylation. En plus de leurs répercussions endocriniennes, les dyslipidémies semblent également affecter la maturation post-testiculaire. Ces résultats sont à considérer dans le cadre des protocoles de PMA puisque le bilan lipidique plasmatique ne fait pas partie des examens classiques des couples en PMA. Or en France, 55% des hommes entre 30 et 54 ans sont atteints d’une dyslipidémie. Ces désordres métaboliques lipidiques pourraient altérer la maturation post-testiculaire des gamètes, provoquant un certain nombre d’infertilités et/ou d’échecs en PMA. / The acquisition of fertile spermatozoa is a long and multi-stage process, beginning with the production of male gametes in the testis. Spermatozoa then undergo two successive maturation steps, first during the epididymal transit and then in the female genital tract during the capacitation process. The post-testicular maturation particularly impacts sperm lipid composition, leading to a higher membrane fluidity considered to be essential for fertilization. The results presented in this work show the importance of epididymal lipid homeostasis for sperm lipid maturation and acquisition of fertilizing ability. At the molecular level, lipid homeostasis is regulated by the LXRs (α and β isoforms), the oxysterol nuclear receptors (NR1H3 and NR1H2, respectively). A cholesterol-enriched diet in young LXR-null mice leads to infertility with a specific epididymal alteration. Sperm epididymal maturation is altered, leading to defects in lipid and protein composition of the spermatic plasma membrane. These defects have detrimental effects on the capacitation process, characterized by disturbances of calcium flows and tyrosine phosphorylation. In addition to their endocrine effects, dyslipidemia also appear to affect post-testicular maturation. These results have to be considered in the context of ART protocols, since the plasma lipid status is not part of the routine examinations for couples in ART protocols. Concomitantly, in France, 55% of men aged 30-54 are dyslipidemic, suggesting that these lipid metabolic disorders could alter sperm post-testicular maturation, causing a number of infertility and / or ART failures.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Thesis (Ph. D.)--University of Washington, 2006. / Vita. Includes bibliographical references (leaves 85-97).

Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2004. / Bibliogr. Publié aussi en version électronique.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2003. / Bibliogr.: f. 97-108. Publié aussi en version électronique.

Orientador: José Antônio Dell'aqua Junior / Resumo: Tem sido relatado que altas concentrações de osteopontina (OPN) no plasma seminal de diversar espécies esta correlacionada com animais de alta fertilidade, identificando-a como bio marcador reprodutivo. De igual maneira estudos mostram uma maior taxa de fertilização in vitro quando é implementada nos meios para fertilização. Visto que a OPN pode ter funções antagônicas, o presente estudo visou identificar se suas funções são dose dependente, adicionando 4 diferentes concentrações de OPN sobre o sêmen sexado bovino por 30 minutos e avaliar por (i) citometria de fluxo a viabilidade, integridade de membrana e capacitação espermática; (ii) teste de ligação a células epiteliais da tuba uterina bovina (BOECs), para quantificar o numero de espermatozoides ligados às células epiteliais, formando o que seria in vivo o reservatório espermático e (iii) avaliar a produção de embriões in vitro. Na avaliação por citometria não foi observada uma interação da adição de OPN com os espermatozoides sexados e não sexados, diferente dos outros dois testes onde se evidenciou que independente da dose a OPN diminuiu a ligação dos espermatozoides às BOECs e a concentração de 0.5g/1x106 espermatozoides aumento a taxa de clivagem e formação de blastocistos. Isto ratifica o poder capacitante da OPN de 60KDa sobre os espermatozoides e confirma que esta, pode ter associações diretas com ambos gametos, gerando melhores taxas de fertilização in vitro e, por tanto, melhor desenvolvimento embrionário nos bovi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It has been reported that high concentrations of osteopontin (OPN) in the seminal plasma of diverse species is correlated with high fertility animals, identifying it as a bio-reproductive marker. Likewise studies show a higher rate of in vitro fertilization when it´s implemented in fertilization media. Since OPN may have antagonistic functions, the present study aimed to identify if its functions are dose-dependent, adding four different concentrations of OPN on the sex-sorted and non-sorted bovine sperm for 30 minutes. The samples were evaluated by means of (i) flow cytometry the viability, membrane integrity and sperm capacitation; (ii) sperm-binding assay to BOECs, to quantify the number of sperm attached to the epithelial cells, forming what would be in vivo the spermatic reservoir and (iii) to evaluate the in vitro embryo production. In flow cytometry an interaction of the addition of OPN with the sex-sorted and non-sorted sperm was not observed, different from the other two tests where it was evidenced that regardless of the dose, the OPN decreased the sperm binding to the BOECs and the concentration of 0.5 µg /1 x 106 spermatozoa increased the rate of cleavage and formation of blastocysts. This corroborates the capacitive power of the OPN of 60KDa on the spermatozoa, and confirm that it can have direct associations with both gametes, generating better rates of in vitro fertilization and, therefore, better embryonic development in cattle. However, from the results obtai... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Este estudo teve como objetivo a análise de um curso de capacitação profissional para alunos com deficiência intelectual numa escola especial. Os objetivos específicos foram: a) analisar o desenvolvimento social e o desempenho dos alunos nas atividades do curso; b) investigar as expectativas dos alunos e seus familiares em relação ao papel da escola especial no contexto da capacitação profissional; c) compartilhar o conhecimento produzido na escola especial e na universidade sobre alternativas pedagógicas para o ensino de alunos com deficiência intelectual. Para atender aos objetivos foi realizado um estudo de caso por meio da metodologia da pesquisa-ação, a qual consistiu de um trabalho colaborativo entre a pesquisadora e a professora da turma. Entre os procedimentos incluem-se observações das atividades do curso; entrevistas com a professora, funcionário da escola, alunos do curso e seus familiares. A análise dos dados destacou como aspectos relevantes: o desenvolvimento de uma proposta diferenciada de formação profissional para este alunado, a investimento pessoal da professora em uma capacitação para aprender a ensinar em um novo contexto, e a inciativa da escola de buscar parcerias para implementação de mudanças no seu escopo de atuação enquanto instituição especializada. A escuta dos alunos, seus familiares e uma profissional da escola colaborou para a proposição de novas ações dentro do contexto investigado. Nos dados obtidos também se evidenciou que as atividades de aula planejadas pela professora do curso foram determinantes para o bom desempenho dos alunos, sobretudo por serem realizadas no contexto real onde tais ações se executam. O trabalho colaborativo da pesquisadora e da professora viabilizando a elaboração de um plano individual de acompanhamento para os alunos no treinamento pode ser apontado como uma alternativa para o planejamento do processo de transição para a vida pós-escola. Entre outros aspectos, as entrevistas com os responsáveis indicaram a necessidade de um trabalho mais pontual da equipe da escola com as famílias sobre a perspectiva de vida pós-escolar dos alunos. De forma mais geral, o estudo de caso demonstrou que a escola especial, tem procurado encontrar caminhos para sua ressignificação por meio da aproximação e parceria com a universidade. Os dados obtidos permitem concluir que a formação continuada dos professores para atuar na capacitação profissional de alunos com deficiência intelectual é um processo que necessita do trabalho colaborativo de diferentes atores, conforme apontado pela própria professora do curso analisado. / Among other aspects, the interviews with the families showed the need of a more specific work by the school team with the families about the perspective of life after graduation for the students. In general, the case study demonstrated that the special school has been looking for ways of its re-signification by means of approach and partnership with the university. The data obtained allow to concluded that continuous formation of teachers to act in professional capacitation of students with intellectual disabilities is a process that demands the collaborative work of different actors, as pointed out by the teacher of the analyzed course. The interviews with the students, their families and school staff help the proposal of new actions within the investigated context. The data collect also showed that the classs activities planned by the teacher were determinant for the good progress of the students, specially because they were developed in the real context where those actions are executed. The collaborative work between the researcher and the teacher, allowing for the elaboration of an individual follow up plan for the students in training can also be pointed as an alternative for the planning of the transition process of life after graduation. In order to respond to the proposed objectives it was undertaken a case study by means of the action-research methodology, that consisted of a collaborative work between the researcher and the teacher. The procedures included observations of the course activities; interview with the teacher, school staff, students and their families. The data analysis showed as relevant aspects: the development of a differentiated project of professional formation for this type of student, the teachers personal investment in a capacitation in order to learn how to teach in a new context, and the schools initiative in searching for partnerships for implementation of changes in the scope of its programs as a specialized school. The main objective of this study was the analysis of a professional capacitation course for students with intellectual disabilities in a special school. The specific objectives were: a) to analyze the social development and the students outcome in the courses activities; b) to investigate the students and their families expectations in relation with the special schools role in the context of professional capacitation; c) to share the knowledge produced in the special school and the university in regard to pedagogical alternatives for teaching of students with intellectual disabilities.

Este estudo teve como objetivo a análise de um curso de capacitação profissional para alunos com deficiência intelectual numa escola especial. Os objetivos específicos foram: a) analisar o desenvolvimento social e o desempenho dos alunos nas atividades do curso; b) investigar as expectativas dos alunos e seus familiares em relação ao papel da escola especial no contexto da capacitação profissional; c) compartilhar o conhecimento produzido na escola especial e na universidade sobre alternativas pedagógicas para o ensino de alunos com deficiência intelectual. Para atender aos objetivos foi realizado um estudo de caso por meio da metodologia da pesquisa-ação, a qual consistiu de um trabalho colaborativo entre a pesquisadora e a professora da turma. Entre os procedimentos incluem-se observações das atividades do curso; entrevistas com a professora, funcionário da escola, alunos do curso e seus familiares. A análise dos dados destacou como aspectos relevantes: o desenvolvimento de uma proposta diferenciada de formação profissional para este alunado, a investimento pessoal da professora em uma capacitação para aprender a ensinar em um novo contexto, e a inciativa da escola de buscar parcerias para implementação de mudanças no seu escopo de atuação enquanto instituição especializada. A escuta dos alunos, seus familiares e uma profissional da escola colaborou para a proposição de novas ações dentro do contexto investigado. Nos dados obtidos também se evidenciou que as atividades de aula planejadas pela professora do curso foram determinantes para o bom desempenho dos alunos, sobretudo por serem realizadas no contexto real onde tais ações se executam. O trabalho colaborativo da pesquisadora e da professora viabilizando a elaboração de um plano individual de acompanhamento para os alunos no treinamento pode ser apontado como uma alternativa para o planejamento do processo de transição para a vida pós-escola. Entre outros aspectos, as entrevistas com os responsáveis indicaram a necessidade de um trabalho mais pontual da equipe da escola com as famílias sobre a perspectiva de vida pós-escolar dos alunos. De forma mais geral, o estudo de caso demonstrou que a escola especial, tem procurado encontrar caminhos para sua ressignificação por meio da aproximação e parceria com a universidade. Os dados obtidos permitem concluir que a formação continuada dos professores para atuar na capacitação profissional de alunos com deficiência intelectual é um processo que necessita do trabalho colaborativo de diferentes atores, conforme apontado pela própria professora do curso analisado. / Among other aspects, the interviews with the families showed the need of a more specific work by the school team with the families about the perspective of life after graduation for the students. In general, the case study demonstrated that the special school has been looking for ways of its re-signification by means of approach and partnership with the university. The data obtained allow to concluded that continuous formation of teachers to act in professional capacitation of students with intellectual disabilities is a process that demands the collaborative work of different actors, as pointed out by the teacher of the analyzed course. The interviews with the students, their families and school staff help the proposal of new actions within the investigated context. The data collect also showed that the classs activities planned by the teacher were determinant for the good progress of the students, specially because they were developed in the real context where those actions are executed. The collaborative work between the researcher and the teacher, allowing for the elaboration of an individual follow up plan for the students in training can also be pointed as an alternative for the planning of the transition process of life after graduation. In order to respond to the proposed objectives it was undertaken a case study by means of the action-research methodology, that consisted of a collaborative work between the researcher and the teacher. The procedures included observations of the course activities; interview with the teacher, school staff, students and their families. The data analysis showed as relevant aspects: the development of a differentiated project of professional formation for this type of student, the teachers personal investment in a capacitation in order to learn how to teach in a new context, and the schools initiative in searching for partnerships for implementation of changes in the scope of its programs as a specialized school. The main objective of this study was the analysis of a professional capacitation course for students with intellectual disabilities in a special school. The specific objectives were: a) to analyze the social development and the students outcome in the courses activities; b) to investigate the students and their families expectations in relation with the special schools role in the context of professional capacitation; c) to share the knowledge produced in the special school and the university in regard to pedagogical alternatives for teaching of students with intellectual disabilities.

nÃo hà / Os serviÃos de urgÃncia e emergÃncia constituem importantes componentes do sistema nacional de saÃde, destinados ao atendimento de pacientes com afecÃÃes agudas, com ou sem risco de morte, exigindo profissionais preparados para oferecer assistÃncia imediata aos clientes. Deste modo, os profissionais que atuam nessas unidades deveriam receber treinamento especÃfico. Objetivou-se avaliar o efeito do treinamento no conhecimento dos enfermeiros sobre acolhimento com classificaÃÃo de risco em unidade de urgÃncia e emergÃncia. Trata-se de um estudo de delineamento prÃ- experimental, modelo prÃ- teste / pÃs-teste com um Ãnico grupo, enfocando o efeito de um treinamento em acolhimento com classificaÃÃo de risco. A pesquisa foi realizada em um hospital pÃblico municipal de urgÃncia e emergÃncia, situado na cidade de Fortaleza-CE. A populaÃÃo foi composta por enfermeiros com escala de plantÃo na unidade de emergÃncia e seguindo os critÃrios de inclusÃo e exclusÃo a amostra ficou constituÃda por 30 enfermeiros. Como instrumento utilizou-se um questionÃrio autoaplicativo (prà e pÃs-treinamento). Os dados foram digitados em uma base de dados no Microsoft Access 2002 e, apÃs digitaÃÃo, foram exportados para o programa estatÃstico STATA v.8 para tratamento e geraÃÃo dos resultados. A pesquisa foi aprovada pelo Comità de Ãtica da Universidade Federal do Cearà - COMEPE sob o Protocolo n 108/11. Os resultados apontam que o grupo foi constituÃdo em sua totalidade pelo sexo feminino onde a maioria (66,6%) tinha idade superior a 40 anos e eram casadas ou em uniÃo estÃvel (56,6%). Quanto ao tempo de graduaÃÃo em Enfermagem, 73,3% computaram perÃodo igual ou superior a dezesseis anos e 90% tinham concluÃdo uma especializaÃÃo. O grupo apresentava atuaÃÃo em Enfermagem igual e superior a dezesseis anos (66,7%), com tempo de serviÃo em emergÃncia de atà cinco anos (53,3%). Identificou-se que 76,6% das enfermeiras trabalham em outra (s) instituiÃÃo (Ães). Deste modo, encontrou-se uma Carga HorÃria (CH) semanal de trabalho igual ou superior a quarenta horas em 63,6%. Na anÃlise relacionada à prÃtica do acolhimento com classificaÃÃo de risco houve um aumento significativo da primeira para a segunda etapa quanto aos acertos, ficando essa mudanÃa mais perceptÃvel nas questÃes: C1 (de 63,3% para 90%); C2 (de 50% para 83,3%); C4 (de 43,3% para 73,3%); C5 (de 46,7% para 73,3%); C6 (de 3,3% para 40%) e C12 (de 16,7% para 56,7%). Nas questÃes associadas Ãs situaÃÃes de urgÃncia e emergÃncia nÃo foram identificadas mudanÃas expressivas. Somente em alguns casos as mudanÃas foram positivas na avaliaÃÃo do conhecimento: C3 (de 66,7% para 80%); C15 (de 33,3% para 50%); C16 (de 83,3% para 96,7%); C17 (de 46,7% para 76,7%) e C25 (de 53,3% para 66,7%). Nas quinze questÃes que abordaram a classificaÃÃo de risco observou-se que na primeira etapa somente uma questÃo (6,6%) teve percentual de acerto igual ou superior a 50% (D10 â 83,3%). Na segunda etapa esse quantitativo cresceu para cinco questÃes (33,3%): D1 (66,7%); D3 (60%); D10 (90%); D11 (56,7%) e D14 (50%). à possÃvel inferir que o treinamento contribuiu para mudar o nÃvel de conhecimento dos enfermeiros, contudo ainda hà necessidade de a instituiÃÃo implementar programas de educaÃÃo continuada, favorecendo a qualificaÃÃo de seus profissionais, proporcionando aos seus clientes um atendimento eficiente e de qualidade.