Las nuevas vacunas de subunidades están abriéndose paso dentro de la vacunología veterinaria y entre ellas, las pseudopartículas virales o VLPs (por su nombre en inglés “virus-like particles”) son una de las estrategias más atractivas que están abriendo nuevas fronteras en la vacunación de animales. Las VLPs son estructuras proteicas rígidas con un tamaño dentro del rango de los nanómetros, que presentan una geometría muy bien definida y una espectacular uniformidad que mimetiza la estructura de los virus nativos de los que proceden. Las VLPs tienen importantes ventajas en relación a la seguridad por el hecho de carecer de genoma viral, que elimina cualquier riesgo asociado a la replicación viral, reversión, recombinación o reorganizamiento genómico. La proteína de la cápside del virus de la fiebre hemorrágica del conejo (por su nombre en inglés “Rabbit haemorrhagic disease virus” o RHDV) es capaz de formar RHDVVLPs y estas partículas han demostrado poseer una fuerte inmunogenicidad, protegiendo al hospedador natural tras un desafío mortal. Además, estudios anteriores apuntaron la posibilidad de usar RHDV-VLPs como vector para mejorar la inmunoterapia contra el cáncer. Sin embargo, no hay estudios que hayan investigado la posibilidad de usar las RHDV-VLPs como vector vacunal con epitopos de enfermedades virales de animales. El objetivo de esta tesis es estudiar el potencial inmunogénico de las RHDV-VLPs como vectores vacunales de enfermedades virales en diferentes animales. En los dos primeros estudios, se investigó la inmunogenicidad de las RHDV-VLPs en el modelo murino, tanto in vitro como in vivo. Los resultados de estos estudios demostraron que el epítopo insertado era procesado y presentado mediante MHC-I por células dendríticas y que la inmunogenicidad dependía de los diferentes sitios de inserción. Las RHDV-VLPs quiméricas fueron capaces de proteger a los ratones frente a un desafío viral. También, la respuesta se vio alterada según la ruta de administración del antígeno. El tercer estudio confirmó los resultados en ratón, pero esta vez en experimentos in vitro con células de cerdo. Por último, se estudió inmunogenicidad de las RHDV-VLPs quiméricas en cerdo. Los resultados mostraron que la ruta de administración y el adjuvante determinaron la respuesta inmune después de la inmunización con las RHDVVLPs quiméricas y que los animales presentaban muy buena respuesta inmune celular y humoral, no solo frente a RHDV-VLPs sino frente al epítopo antigénico. Estudios posteriores se tendrán que abordar para demostrar la protección de los cerdos. En conclusión, en esta tesis se demuestra el potencial de las RHDV-VLPs como inmunógenos en dos sistemas animales diferentes. / New subunit vaccines are getting a foothold in veterinary vaccinology and virus-like particles (VLPs) are one of the most appealing approaches opening up frontiers in animal vaccines. VLPs are robust protein cages in the nanometer range exhibiting welldefined geometry and remarkable uniformity that mimic the overall structure of the native virions. VLPs have an important advantage in terms of safety; indeed, lacking the genome of the virus avoid any of the risks associated with virus replication, reversion, recombination or re-assortment. Rabbit haemorrhagic disease virus (RHDV) capsid protein is able to form RHDV-VLPs and these particles showed a strong immunogenicity and protected the natural host after a lethal challenge. Additionally, previous studies described the possibility to use RHDV-VLPs as platform for the insertion of foreign epitopes or for DNA packaging. Nowadays, one study has shown the possibility to use RHDV-VLPs as carrier for improving cancer immunotherapies but no studies have investigated the possibility to use RHDV-VLPs as vaccine vectors carrying epitopes corresponding to viral animal diseases. This thesis is aimed to study the potential immunogenicity of RHDV-VLPs as epitope carriers for viral disease in different animal models. In the first two studies, the immunogenicity of chimeric RHDV-VLPs was investigated in a murine system in vitro and in vivo. Results from these studies demonstrated that the inserted epitope was processed and presented in an MHC-I context by dendritic cells (DCs) and that the different sites of insertion of the epitope influenced the immunogenicity of the VLPs. Chimeric RHDV-VLPs were able to protect mice from a viral challenge. Also, the route of antigen delivery influenced the immunogenicity of the particles. The third study confirmed the initial results but this time in in vitro experiments using porcine cells. Lastly, chimeric RHDV-VLPs were studied as immunogens in pigs. The results showed that the delivery route and adjuvant influenced immune responses after chimeric RHDV-VLP immunization and more importantly that pigs exhibited very good cellular and humoral immune responses against not only RHDV-VLPs but also against the antigenic epitope. Further studies have to be performed to prove protection in pigs. In conclusion, in this thesis we demonstrated the potential of RHDV-VLPs as immunogens in two different animal systems.

Suele decirse que las familias homoparentales son diversas, pues por tratarse de una unidad formada por dos personas del mismo sexo, ésta debiera diferenciarse de las familias heterosexuales. La cuestión es saber si basta con esta diferencia para asegurar la diversidad familiar en las familias homoparentales. Los efectos de la legalización de la estas familias nos enfrentan a la posibilidad de convertir la homoparentalidad en un mandato social y repetir la discriminación con aquellxs que no desean cumplir con el mandato. La normalización de la homoparentalidad, en vez de cambiar las cosas, podría terminar manteniéndolas igual. En esta tesis hemos cuestionado la homoparentalidad respecto de su capacidad para mantener o modificar el núcleo central de la familia heterosexual, a saber, la estructura binaria de género. Para ello hemos descrito las posiciones de sujeto (Davies & Harré, 1990) disponibles para la homoparentalidad, los argumentos que las sustentan y hemos analizado su potencial de cambio y reificación. Hemos trabajado con un total de 19 personas (lesbianas, gays y bisexuales), de edades entre 28 y 45 años, todxs pertenecientes a la Unión Europea. La recolección de información se desarrolló en función de entrevistas en profundidad semiestructuradas (Wilton, 2005), organizadas sobre la base de un guión temático flexible, que fue modificándose en la medida que emergían temas y problemáticas nuevas en el transcurso del trabajo de campo. El corpus de análisis quedó constituido por 17 conversaciones transcritas, que constituyen textos argumentativos (Toulmin, 1958 en Santibañez Yañez, 2002) y de las que se analizaron tanto los enunciados de las personas participantes, como los de la entrevistadora. Tanto el proceso de elaboración del guión temático así como sus modificaciones, nos llevaron a un trabajo de reflexión respecto de nuestras propios supuestos y nuestra pregunta de investigación. Para el análisis hemos tomado como marco epistemológico el socioconstruccionismo (Gergen, 1985; Gergen y Gergen, 2011) del que se desprende un papel activo de las prácticas discursivas en la construcción de realidades. Utilizamos análisis de discurso (AD), trabajando con Repertorios Interpretativos (Wetherell y Potter, 1988) y realizando análisis retórico (Gill y Whedbee, 1997, en van Dijk (Comp) 2000; Toulmin, 1958 en Santibañez, 2002). Los principales resultados de nuestra tesis, describen las cinco posiciones de sujeto que encontramos disponibles para la homoparentalidad: padre heterosexual/madre heterosexual, padre gay/padre heterosexual, madre lesbiana/madre heterosexual, lesbiana/mujer, buen gay/mal gay, así como los discursos que organizan sus ideologías: biológico, normativo y psicológico. Terminando esta tesis nos damos cuenta de que no hay una sola respuesta a nuestra pregunta de investigación. Las familias homoparentales son al mismo tiempo una forma de cuestionar el orden heteronormativo y una forma de reificarlo. Palabras clave: Homoparentalidad, Análisis de Discurso, Posiciones de Sujeto, Repertorios Interpretativos, Análisis Retórico / Homoparental families appear diverse just because they are formed by same-sex couples, but is this diferent enough to assure familiar diversity? The legalisation of same-sex marriage and its effects shows us that there is a chance that homoparenting becomes a social norm, thus discriminating lesbians and gays who would not fullfill that norm. Instead of changing the social order, the normalization of homoparenting could just maintain it. Through this tesis we have questioned homoparenting's capacity of maintaining or modifying the central core of heterosexual family: binary gender structure. For that we have described subject positions (Davies & Harré, 1990) available for homoparenting and their arguments, and we have analyzed their potential for change and reification. We have worked with 19 people (lesbian, gay and bisexual), from 28 to 45 years-old, living in the European Union. The information we worked with was colected through in-depth interviews (Wilton, 2005), using a flexible thematic script, which was modified through the field work. The analytic corpus was 17 conversations which were treated as argumentative texts (Toulmin, 1958 in Santibañez Yañez, 2002). We analyzed both the participants' propositions and our own. Through the process of elaboration of the tematic script and its modifications, we did a reflexive work about our own assumptions and research question. For the analysis we took a socioconstructionist point of view (Gergen, 1985; Gergen y Gergen, 2011), using discoursive analysis (DA) with Interpretative Repertoire elements (Wetherell & Potter, 1988), and rethoric analysis (Gill & Whedbee, 1997, in van Dijk (Comp) 2000; Toulmin, 1958 in Santibañez, 2002). The main results describe five subject positions available for homoparenting: heterosexual father/heterosexual mother, gay father/heterosexual father, lesbian mother/heterosexual mother, lesbian/woman, and good gay/bad gay. Additionally, three different discourses were found: bological, normative and psychological. Finally, we realise there is not just one answer to our question. Homoparental families are, at the same time, a way to question heteronormativity as well as a way to reificate it. Key words: Homoparenting, Discourse Analysis, Subject Positions, Interpretative Repertoir, Rethoric Analysis

Introducción La amputación de una extremidad inferior es un procedimiento quirúrgico permanente que tiene importantes secuelas funcionales, psicológicas y sociales que pueden influir en la calidad de vida de la persona con amputación. El porcentaje de amputaciones femorales se sitúa en Europa alrededor de un 20-35% del total de amputaciones de la extremidad inferior. El 75% de todas las amputaciones de la extremidad inferior ocurren en pacientes mayores de 65 años al igual que ocurre en Estados Unidos. Diversos estudios han demostrado que los pacientes desarticulados de rodilla consumen menos oxígeno en la marcha y la osteoporosis del muñón es inferior que los de nivel femoral. Objetivo del estudio El objetivo de este estudio es la evaluación de la funcionalidad de pacientes amputados de nivel femoral con un implante que permite el apoyo distal del muñón y la mejora de los parámetros de dolor, calidad de vida, control y estabilidad del muñón, aumentar la densidad mineral ósea y disminuir el gasto energético respecto al uso del encaje convencional, en personas que han sufrido una amputación del miembro inferior por encima de la rodilla. Material y métodos Se ha llevado a cabo un estudio experimental prospectivo no aleatorizado de tipo antes - después realizado en el Hospital de Mataró en 10 pacientes amputados femorales tras la colocación de un implante de titanio entre 1 de marzo de 2011 a 1 de marzo de 2013. Se obtuvo el informe favorable del Comité de Ética del Hospital de Mataró para este estudio y todos los pacientes firmaron un consentimiento informado previo al inicio del estudio. Resultados La media de la edad fue de 50,3 ±16,3 años, con una mayor proporción de hombres participantes 6 (60%). La media de evolución de la amputación fue de 96,9 ± 96,3 meses, amputándose más la extremidad derecha 6 (60%). La etiología más frecuente de la amputación fue la traumática en 6 pacientes (40%). Todos los pacientes habían sido amputados en el tercio medio del fémur. Tras los 14 meses de seguimiento del procedimiento quirúrgico los pacientes incrementaron de forma significativa los metros recorridos en la prueba de 2 MWT obteniendo una media de 122,5 metros (p=0,008) y de la velocidad, pasando de 49,2 m/s previa a la intervención a 61,3 m/s a los 14 meses (p=0,008).También hubo una mejora del dolor en el muñón tras la cirugía (2,9 vs 0,4 p=0,04) y en la utilización de la prótesis en número de horas al día (10,1h vs 12,9 h p=0,01). Conclusiones Los resultados de nuestro estudio muestran una mejora de la capacidad funcional valorado en el total de metros recorridos y velocidad de marcha evaluados mediante la prueba de los 2 MWT, en pacientes amputados, principalmente de causa vascular a los 14 meses de ser intervenidos quirúrgicamente realizándose un implante femoral. / Introduction Lower-limb amputation is a permanent surgical procedure that leads to a series of physical, psychological and social consequences that may affect the quality of life of the amputee.The percentage of transfemoral amputations in Europe is estimated in 20-35% of all lower limb amputations. Around 75% of the individuals who require an amputation of the lower limb are over 65 years old. Several studies have shown that individuals with a knee disarticulation have less oxygen consumption during gait performing and have less residual limb osteoporosis than individuals with a transfemoral lower limb amputation. Objective of the study The objective of this study was to investigate the functional level of individuals with a transfemoral amputation and an implant that allows distal support to the residual limb, as well as to investigate the clinical improvement in terms of pain, quality of life, residual limb control and stability, improvement of the bone mineral density and decrease of the energy expenditure when comparing with the use of a conventional socket in individuals with an above knee amputation. Materials and methods This is an experimental prospective non randomized study before-and-after intervention type developed at the Hospital de Mataró in 10 individuals with transfemoral amputation after a titanium implant placement between March 1st,2011 and March 1st, 2013. The local Ethics Committee of Hospital de Mataró approved the study and patients gave informed consent before being enrolled as participants. Results The average age was 50,3 ±16,3 years, with a higher proportion of men participating 6 (60%). The average of time since lower limb amputation was 96,9 ± 96,3 months, most of them, amputation of the right lower limb 6 (60%). The most prevalent aetiology of amputation was traumatic in 6 participants (60%). All participants had been amputated in the middle third of the femur. At the end of the 14 months of follow-up, participants significantly improved the total of meters walked in the 2 MWT, the mean was 122,5 meters (p=0,008) and they also improved the speed of gait, from 49,2 m/s before intervention to 61,3 m/s 14 months after (p=0,008). An improvement in pain was observed too after surgery (2,9 vs 0,4 p=0,04) and the number of hours using the prosthesis also improved after intervention (10,1h vs 12,9 h p=0,01). Conclusions The results of our study show an improvement in the functional capability in terms of number of meters walked and speed of gait using the 2MWT, in individuals with a lower limb amputation mainly secondary to peripheral vascular disease, 14 months after surgery for a femoral implant placement.

El conocimiento sobre la patogenia de las enfermedades respiratorias ha experimentado un cambio notable en los últimos años, lo que en parte ha sido posible gracias a la utilización de biomarcadores que permiten un mayor acercamiento a la fisiopatogenia de la enfermedad. La determinación de óxido nítrico (NO), biomarcador inflamatorio, ha despertado un interés creciente en la comunidad científica, con utilidad y aplicaciones en el diagnóstico, el control y la monitorización de la respuesta terapéutica en diferentes procesos respiratorios. El objetivo general de la investigación de esta tesis fue evaluar la técnica de la determinación de NO en aire espirado en sus diferentes métodos, su utilidad como medida no invasiva de inflamación en el manejo diagnóstico del asma, y como medida indirecta de inflamación de la vía aérea y de disfunción endotelial en el Síndrome de apnea-hipoapnea obstructiva del sueño (SAHS). En el primer estudio se describe el método y procedimiento de la determinación de la fracción espirada de óxido nítrico (FENO) mediante el equipo portátil, NIOX-MINO® así como la obtención de valores de referencia de FENO mediante este equipo en un grupo de 28 individuos sanos en comparación con los valores obtenidos por el equipo de quimioluminiscencia habitualmente utilizado. La obtención de valores superiores de FENO con el equipo portátil requirió el desarrollo de un factor de corrección lineal para equiparar ambos equipos dada la buena correlación entre ambos. El equipo portátil NIOX-MINO® permite la determinación de FENO mediante una técnica sencilla y con ventajas respecto al equipo clásico de quimioluminiscencia: no requiere calibración, sólo precisa de una determinación, tiene portabilidad y la posibilidad de autorrealización por parte del paciente. En el segundo estudio se desarrolla y describe el modelo bicompartimental de NO para la determinación de la concentración alveolar de óxido nítrico (CANO) mediante la técnica de espiración a múltiples flujos. Además se establecieron valores de referencia de CANO en un grupo de 33 individuos sanos, (3,04 ± 1,30 ppb; rango de valores entre 1,45 y 6,31 ppb) sin presentar variabilidad respecto a los datos demográficos y espirométricos. Estos resultados permiten poner en práctica el modelo bicompartimental del NO para la cuantificación de valores de CANO, biomarcador del estado inflamatorio de la vía aérea distal y del estado endotelial pulmonar. El tercer estudio, realizado en un grupo de pacientes con síntomas sugestivos de asma, y en el que se comparó la determinación de FENO respecto a los métodos convencionales de diagnóstico (espirometría, prueba broncodilatadora y prueba de provocación bronquial con metacolina) y al esputo inducido, demostró que la determinación de FENO presenta excelente correlación con la prueba de provocación bronquial con metacolina en el diagnóstico de asma y además aporta una mayor capacidad diagnóstica que la espirometría, la prueba broncodilatadora y el esputo inducido. Además, la combinación de pruebas que miden el estado inflamatorio de la vía aérea superior, FENO y esputo inducido, superan la capacidad diagnóstica de ambas técnicas valoradas de forma individual. El cuarto estudio determinó valores de FENO y de CANO en un grupo de pacientes con SAHS en comparación con un grupo de individuos sanos demostrando la presencia de valores superiores de FENO en el grupo de SAHS como reflejo del estado inflamatorio local que presentan estos pacientes, y valores inferiores de CANO como reflejo de la de la menor biodisponibilidad de NO asociada a la disfunción endotelial. Además os valores de FENO y de CANO en pacientes con SAHS se relacionaron con la gravedad de la entidad lo que probablemente refleja un mayor componente de inflamación local y de disfunción endotelial en los sujetos más graves. El tratamiento con CPAP durante 3 meses restableció los valores de FENO y de CANO hasta la normalidad. Estos resultados hacen de la determinación no invasiva de FENO y CANO posibles marcadores de gravedad del SAHS e indicadores precoces de disfunción endotelial, pudiendo ser parámetros útiles en la toma de decisiones terapéuticas de pacientes con SAHS, conjuntamente con el IAH y la clínica. / Knowledge about the pathogenesis of respiratory diseases has undergone considerable change in recent years, which in part has been made possible by the use of biomarkers that allow a better approach to the pathogenesis of the disease. The measurement of nitric oxide (NO), inflammatory biomarker, has attracted increasing attention in the scientific community, with utilities and applications in the diagnosis, control and monitoring of therapeutic response in different respiratory processes. The overall objective of this research was to evaluate the technique of exhaled NO measurement by different methods, their usefulness as a noninvasive measure of inflammation in asthma diagnosis and management, and it use as an indirect measure of airway inflammation and endothelial dysfunction in obstructive sleep apnea (OSA) patients. The first study describes the method and the procedure of exhaled nitric oxide (FENO) measurement by NIOX-MINO® device and FENO reference values in a group of 28 healthy subjects. These values were compared to the values obtained by the chemiluminescence device, commonly used. We obtained higher FENO values with NIOX-MINO® device an it required the development of a linear correction factor to match both devices. The NIOX-MINO® device allows FENO measurement by a simple technique and it has advantages over chemiluminescence device: it just requires one maneuver, it has portability and the possibility of self-realization by the patient. The second study develops and describes the two-compartment model to alveolar NO concentration (CANO) measurement by the use of the multiple expiratory flows technique. Furthermore CANO reference values were established in a group of 33 healthy subjects (3.04 ± 1.30 ppb, range of values between 1.45 and 6.31 ppb) without showing variability with respect to demographic and spirometric data. These results allow to perform the two- compartment model for quantifying CANO values, wich is an inflammatory biomarker of distal airway and lung endothelial state. The third study was conducted in a group of patients with suggestive asthma symptoms. We compared in these patients FENO measurement over conventional diagnostic methods (spirometry, bronchodilator test and bronchial provocation test with methacholine) and over induced sputum. The results showed that the FENO measurement has excellent correlation with methacholine bronchial provocation test in asthma diagnosis and it also provides greater diagnostic accuracy than the spirometry, bronchodilator testing and induced sputum. Furthermore, the combination of airway inflammatory tests, induced sputum and FENO, increase the diagnostic accuracy of both techniques evaluated individually. The fourth study compared FENO and CANO values in a group of OSA patients compared with a group of healthy subjets. The results showed the presence of higher FENO values in OSA group reflecting the local inflammatory status in these patients, and lower CANO values reflecting the decreased bioavailability of NO associated with endothelial dysfunction in OSA patients. Morever FENO and CANO were related to the severity of OSA which probably reflects a major component of local inflammation and endothelial dysfunction in the most severe patients. CPAP Treatment for 3 months restored the FENO and CANO values to normal. These results about a non-invasive measurement, FENO and CANO values, would be potential markers of OSA severity and early indicators of endothelial dysfunction. They could be useful parameters for making treatment decisions for OSA patients, with AHI and clinical.

La terapia musical puede y debe constituir una herramienta más del arsenal terapéutico actual del que se dispone para el tratamiento de distintas enfermedades. Es una terapia individual y coadyuvante de otras aceptadas como estándar a las que complementa pero no substituye. En el apartado 1, se hace una exhaustiva revisión histórica para situarnos y poder entender mejor el significado y objeto de la terapia musical y se describen las razones que han llevado a realizar este trabajo. En el apartado 2 se describe de forma genérica la importancia del arte como terapia. La música constituye una expresión artística y no es posible entender sus efectos terapéuticos (el efecto ansiolítico en nuestro caso) sin una explicación previa de la influencia y efectos del arte sobre el hombre. En el apartado 3 se explica por qué la música es terapéutica. Son muchas las teorías que intentan dar una explicación de los distintos efectos, entre ellos los terapéuticos, que la música produce sobre el cuerpo humano. En este apartado se explica cómo afecta a nuestro organismo a nivel tanto biológico como fisiológico, psicológico, intelectual, social y espiritual. El apartado 4 nos habla de las aplicaciones de la terapia musical. En particular, se hace una descripción de la terapia musical en el contexto de las intervenciones quirúrgicas. Una exposición del trabajo de G.A. Light nos hace comprender como en los años 50 se aplica de forma seria y profesional la terapia musical en EE.UU, así como referencias a trabajos publicados recientemente. El apartado 5 presenta las distintas fases de la intervención quirúrgica y como se ha aplicado la terapia musical en cada una de ellas. En este apartado no sólo se hace una mención de los trabajos que refuerza la hipótesis de esta tesis, sino también los trabajos cuyos resultados son contradictorios a los nuestros. No se han escatimados esfuerzos en la búsqueda bibliográfica ni en las valoraciones de los diferentes autores que han publicado sobre la terapia musical o musicoterapia. Podemos encontrar desde las últimas publicaciones hasta algunas no tan recientes, seleccionadas tras una detenida lectura y solo aquellas que a criterios de este doctorando merecían ser incluidas en base a la aportación que en uno u otro sentido realizaban. En el apartado 6 se explica donde y cuando se inicia la aplicación terapéutica de la música en el campo de la medicina y se explica detalladamente la importancia de disminuir la ansiedad en el período preoperatoria, ámbito concreto de aplicación de la terapia musical en este trabajo. En los apartados 7 y 8 se expone la hipótesis y sus objetivos de esta tesis. En el apartado 9 se explica el material y métodos (diseño del estudio) empleados en esta tesis: las variables utilizadas para medir los efectos, evaluación de la ansiedad, etc, así como el estudio estadístico empleado. Se ha utilizado el programa informático SPSS v17.0. Para la estadística descriptiva se usa porcentajes para las variables cualitativas y medias y desviación estándar para las cuantitativas. Para comparar la bondad de la aleatorización se ha utilizado el cálculo estadístico bivariable, con la χ2 para variables cualitativas y la t de Student para las cuantitativas, o sus equivalentes no paramétricas. En el apartado 10 se exponen los resultados obtenidos, y en los apartados restantes se realiza una discusión de estos resultados, se exponen posibles aplicaciones clínicas y se enumeran las conclusiones. / Music therapy could and should constitute another tool of the current therapeutic arsenal available for the treatment of different diseases. It is one individual and adjuvant therapy of others, accepted as standard, which complements but does not replace them. In part 1, an exhaustive historical review is made to situate us and to a better understanding of the meaning and purpose of music therapy and it describes the reasons that have led to do this work. Part 2 describes, in a general way, the importance of art as therapy. Music is an artistic expression and it is not possible to understand its therapeutic effects (the anxiolytic effect in our case) without prior explanation of the influence and effects of art on humans. Section 3 explains why music is therapeutic. There are many theories that tries to give an explanation of the various effects, including the therapeutic one, which music produces on the human body. This section explains how it affects our body in biological, physiological, psychological, intellectual, social and spiritual level. Part 4 talks about music therapy’s applications. In particular, it is a music therapy description in surgical interventions context. An explanation of G.A. Light’s work makes us understand how in the 1950s was applied, in serious and professional ways, music therapy in the United States, as well as works’ references published recently. Section 5 presents the different phases of a surgical intervention and how the music therapy has been applied in each one of them. In this section it is not only made a mention of works which reinforces the hypothesis of this thesis, but also papers whose results are contradictory to our. It has spared no effort in bibliographic research and in the appraisals of the different authors who have published about music therapy. We can find the latest publications and even some not as recent, selected after a close reading and only those who deserve to be included, according to this PhD student criteria, based on the contribution that performed in one or another sense. In part 6 it is explained where and when begins the therapeutic application of music in medicine’s field and it is explained in detail the importance of reducing anxiety in preoperative period, specific field of music therapy applicated in this work. Parts 7 and 8 present the hypothesis and objectives of this thesis. Part 9 explains the material and methods (study design) used in this thesis: the variables used to measure effects, evaluation of anxiety, etc., as well as the statistical study employed. It has been used the computer program SPSS v17.0. For descriptive statistics, it is used percentages for the qualitative variables and mean and standard deviation for the quantitative. To compare randomization’s goodness it has been used statistical bivariate calculus, with the χ2 for qualitative variables and Student T for the quantitative, or their non-parametric equivalences. In section 10 it is presented the obtained results, and in the remaining parts it is made a discussion of these results, possible clinical applications are exposed and listed the conclusions.

Esta tesis trata de construir una visión general y sistemática de la Psicomotricidad en el contexto español a través de la producción científica de la revista "Psicomotricidad: Revista de estudios y experiencias" editada por Citap (Centro de Investigación de Técnicas Aplicadas a la Psicomotricidad) desde su aparición en 1981 hasta 1996. Asimismo, examina las principales variables que conforman la investigación bibliométrica; analiza las tendencias más significativas y aplica técnicas bibliométricas y de análisis de contenido con el fin de evaluar la información contenida en los documentos. El análisis de las características y evolución de la literatura incluida en la revista nos proporciona una aproximación a esta disciplina desde una perspectiva, que permite la delimitación del ámbito de estudio y la identificación de los núcleos temáticos. El análisis realizado tras la aplicación de los diferentes criterios nos permite considerar desde una perspectiva más global que:-La elección de la revista Psicomotricidad editada por Citap es adecuada, ya que incluye los trabajos referidos a este ámbito que nos aproximan al contenido de la Psicomotricidad en la literatura española.-El abordamiento de la Psicomotricidad en la literatura seleccionada coincide con el realizado en general, por la literatura europea desde el movimiento psicomotricista en tanto a concepción y técnica educativa y terapéutica, centradas en el movimiento humano, que aparece de forma evidente en los diferentes trabajos. -El término Psicomotricidad aparece como el más utilizado por los autores que publican en la revista y que siguen la tendencia de la literatura europea y la influencia de la corriente francesa. -La influencia francesa ha sido fundamental en el desarrollo de la psicomotricidad en España y se manifiesta a través del impacto que ejercen las obras de Wallon, Ajuriaguerra, Lapierre, Aucouturier y Vayer en los psicomotricistas que publican en la revista. -El ámbito de aplicación de la Psicomotricidad en España, a través de la revista, se decanta en general hacia el sector educativo de la educación especial y de la educación infantil a diferencia de la corriente oficial francesa, que tiende hacia el ámbito sanitario, reeducativo o clínico. -Las diferentes áreas de actividad científica más productivas detectadas en la revista ponen de manifiesto la diversidad de actividades científico profesionales en las que se ven implicados los psicomotricistas, que contribuyen con ello al desarrollo de la Psicomotricidad como disciplina científica y aplicada. / This thesis deals with building a comprehensive and systematic view of the psychomotor in the Spanish context through the scientific production of the magazine "Psychomotor: Review of studies and experiences," edited by Citap (Technical Research Centre Applied to Psychomotor) from its appearance in 1981-1996. It examines the main variables related to bibliometric research, examines significant trends and techniques applied bibliometric and content analysis to evaluate the information contained in the documents. The analysis of the characteristics and evolution of the literature included in the journal provides an approximation to this field from a perspective that allows the definition of the scope of the study and identification of thematic categories.

La utilización de bacterias iniciadoras de fermentación maloláctica es de fundamental importancia para los elaboradores de vino comprometidos con la producción de vinos de alta calidad y sin riesgos para la salud, ya que estas bacterias han sido seleccionadas como poco productoras de aminas biógenas. Sin embargo, en ciertas condiciones se obtienen vinos con altos niveles de aminas biógenas, aun cuando estos vinos han sido inoculados con bacterias seleccionadas. En el presente trabajo, con la tipificación de bacterias aisladas de la fermentación maloláctica usando un método basado en RAPD-PCR, se demostró que el estárter maloláctico puede tener diferentes niveles de implantación y que a su vez, esto se correlaciona con la producción de aminas biógenas durante la fermentación maloláctica, lo cual explicaría los altos niveles de aminas obtenidos en vinos inoculados con estárteres malolácticos. Para entender como las diferentes prácticas enológicas afectan la implantación del estárter maloláctico, lisozima, nutrientes, co-inoculación con levaduras, o siembra del estárter por diferentes métodos (inoculación directa o pie de cuba) fueron estudiados respecto al nivel de implantación y producción de aminas biógenas. Luego de la fermentación maloláctica, las aminas biógenas pueden aumentar, degradarse o estar constantes durante el almacenamiento del vino una vez que este ha sido embotellado. Esto puede crear incertidumbre respecto al nivel que las aminas biógenas tendrán en el momento de su comercialización. En la segunda parte de esta tesis, se puso en evidencia la presencia de microorganismos y enzimas libres en el vino embotellado capaces de producir histamina durante su almacenamiento; también se sospecha la presencia de enzimas capaces de degradar histamina. Se estudió la relación entre esto, y el contenido de aminas al final de un año de almacenamiento; diferentes perfiles de vinos se identificaron: histaminogénicos, histaminoliticos e histamin-estables. Indicadores para estimar el riesgo de producción de histamina fueron propuestos. Siguiendo con el interés de investigar tecnologías que ayuden a producir vinos sin peligro para la salud del consumidor, el uso de técnicas biológicas para reducir los niveles de ocratoxina A (OTA) en vinos fue investigado. En la tercera parte de esta tesis, estárteres malolácticos fueron evaluados respecto a su capacidad para reducir OTA durante la fermentación maloláctica. Algunos estárteres, fueron capaces de reducir OTA en vinos conteniendo 13% de etanol. La reducción de OTA parece relacionarse con el pH del vino. La interacción entre la formación de aglomerados de protein-polifenoles en función del etanol y pH, y la interacción que esto podría tener en la capacidad de adopción fue discutido. La modificación de la pared celular debido al proceso de liofilización de los estárteres como causa posible de la capacidad reductora de los estárteres fue también abordado. Los resultados son prometedores, sin embargo, sería necesario profundizar en la investigación para entender los mecanismos ligados a la reducción de OTA producido por los estárteres malolácticos en vinos. / Malolactic bacterial starters are used in the production of high quality and safe wines because of their capabilities to produce low levels of biogenic amines and perform the malolactic fermentation under controlled conditions. However, in certain conditions, inoculated wines can have high biogenic amines content which is in contradiction with the expected performance of the bacterial starter. In the present work, it was demonstrated, by typification of bacterial strains using RAPD-PCR, that malolactic starters can present different levels of implantations and this is correlated with the biogenic amines produced during the malolactic fermentation, which can explain the unexpected results when malolactic starters are used. In order to understand how the implantation is affected by oenological practices, lysozyme, nutrients, co-inoculation with yeast, or application of different seeding methods (direct inoculation or pied de cuve) were studied regarding their impact on the level of implantation and biogenic amines production. On the other hand, biogenic amines in bottled wine evolve all along the storage period. Their content increase, decrease or stay constant, which creates incertitude regarding the levels of biogenic amines that the wine will have in the moment of its commercialization. In the second part of this thesis, we demonstrated the presence of microorganisms with decarboxylase capabilities and exocellular amine-decarboxylase enzymes in the bottled wine. The presence of amine-degrading enzymes is also suspected. The link between the latter and the biogenic amines found at the end of a year of storage were related and different histamine profiles were determined for the wines: histaminolitic, histaminogenic and histamine-stable. Some indicators to measure the risk of histamine development are proposed. In the search for technological means to help wine-makers to elaborate safe wines, the use of biological tools to reduce the levels of ochratoxin A (OTA) in wines was investigated. In the third part of this thesis, malolactic starters were screened by their property to reduce OTA during the malolactic fermentation. Some malolactic starters were able to obtain high OTA reductions in wines containing 13% ethanol. OTA reduction by starters seems to be related to the pH. The interaction between protein-polyphenols haze formation as function of ethanol and pH and the interaction that this might have on absorption phenomenon is discussed. Modification of cell wall by lyophylization process and its consequences on adsorption properties are also analyzed. The results are encouraging but more investigation is needed to understand OTA reduction mechanism carried-out by malolactic bacterial strains in wines.

La leche y los productos lácteos son alimentos con un alto valor nutritivo pero también susceptibles de contaminación y principales vehículos de introducción de aflatoxina M1 (AFM1) en la dieta, ya que no es destruida por los tratamientos convencionales térmicos de pasteurización o esterilización usados en la industria láctea para higienizar estos productos, y así puede estar presente en yogurt, queso, leche deshidratada y otros productos lácteos. La International Agency for Research on Cancer (IARC) de la OMS, ha categorizado la AFM1 como carcinogénica y tóxica para humanos en el Grupo 1. En este trabajo se analizó la presencia de AFM1 en leche y productos de base láctea comercializados en el área metropolitana de Monterrey, N.L., México, y se evaluaó el consumo de estos productos susceptibles de contaminación por AFM1 en la población por grupos de edad, así como el índice de riesgo carcinogénico. En el primer muestreo se analizaron 84 muestras por la técnica ELISA, de las cuales 20 fueron leche pasteurizada y 64 con proceso térmico UHT, de las cuales 48 fueron leches con presencia de grasa butírica y 16 producto lácteo con presencia de grasa vegetal. Las leches pasteurizadas presentaron un 100% de presencia de AFM1, con una media de 0,39 μg/L y un 20% de las muestras por encima de lo que establece la NOM-243-SSA1-2010 (0,5 μg/L), mientras que de los productos UHT, todas mostraron presencia de AFM1, siendo la leche que contiene grasa butírica la que en promedio se encontró dentro de la NOM con 0,45 μg/L y un 38% de las muestras sobre el límite marcado por la NOM, mientras que el producto lácteo mostró un promedio de 0,66 μg/L y un 69% de las muestras por encima de lo que establece la NOM. En el segundo muestreo se analizaron 162 muestras de leche, incluyendo leche bronca (n = 51), fórmula infantil (n = 55), leche deshidratada (n = 15) y leche y producto lácteo UHT (n = 41), colectadas en supermercados y analizadas por extracción en columnas de inmunoafinidad con anticuerpos monoclonales y cuantificadas mediante HPLC con detector de fluorescencia. Con el objetivo de determinar la ingesta promedio diaria de AFM1 por grupos de edad y poder establecer el índice de riesgo carcinogénico se utilizó la encuesta ENSANUT-2012 correspondiente a Nuevo León, aplicando la fórmula descrita por Kuiper-Goodman (1994). De las 51 muestras de leche bronca analizadas, 16 de éstas resultaron positivas (31%), obteniéndose 2 muestras (4%) por encima del límite máximo que establece la NOM y una media de 0,07 μg/kg. De las 55 fórmulas infantiles analizadas, 11 de éstas mostraron resultados positivos a la presencia de AFM1, mostrando todas valores por encima de lo que establece el Códex Alimentarius (0,025 μg/kg) y una media de 0,04 μg/kg. De las 15 muestras de productos deshidratados, 12 fueron leche (con grasa butírica) y 3 producto lácteo (con grasa vegetal), con una media de 0,13 μg/L y 10 de éstas tuvieron presencia de AFM1. De las 41 muestras UHT, 27 fueron leche y 14 producto lácteo, con una media de 0,30 μg/L y 26,8% de las muestras con niveles de AFM1 por encima de lo establecido por la NOM. Según los datos obtenidos de la ingesta promedio diaria de AFM1 por grupos de edad, se observó que los niños de edades comprendidas entre recién nacidos y edad escolar (0 - 11 años) fue el grupo poblacional que presentó los niveles más elevados de ingesta de AFM1, ya que en este grupo se encuentran los lactantes cuya principal dieta hasta los 6 meses es a base de leche materna o bien leches maternizadas, presentando niveles de ingesta de AFM1 (4,40 ng/kg PCP/día) por encima del límite de índice de riesgo carcinogénico (2 ng/kg PCP/día). Aunque en la población pre-escolar y escolar se modifica la frecuencia, el tipo y el consumo de leche y productos lácteos, el peso corporal todavía no es suficientemente alto para revertir los valores de ingesta promedio diaria de AFM1 presentando niveles elevados de riesgo carcinogénico (5,01 ng/kg PCP/día). Al disminuir la ingesta de leche y productos lácteos por la población adolescente, adulta y adulta mayor y al relacionar esta ingesta con el peso corporal, la ingesta promedio diaria de AFM1 (0,68 ng/kg PCP/día) se encontró por debajo del índice de riesgo carcinogénico, no representando riesgo a este respecto. / Milk and dairy products are foods with a high nutritional value but also susceptible to contamination and main vehicle entry of aflatoxin M1 (AFM1) in the diet because it is not destroyed by the conventional thermal treatments such as sterilization or pasteurization usually used in the dairy industry to sanitize these products, and thus may be present in yogurt, cheese, dried milk and other dairy products. The International Agency for Research on Cancer (IARC) of WHO has categorized the AFM1 as carcinogenic and toxic to humans in Group 1. This paper analyzed the presence of AFM1 in milk and milk-based products marketed in the metropolitan area of Monterrey, NL, Mexico, and the consumption of these products, which are susceptible to contamination by AFM1 was evaluated in the population by age group and as the index of carcinogenic risk. In the first sampling, 84 samples were analyzed by ELISA, of which 20 were pasteurized milks and 66 were UHT-treated products, including 48 milks containing butyric fat and 16 milk products containing vegetable fat. The pasteurized milks showed 100% presence of AFM1, with an average of 0.39 μg/L and 20% of the samples above the provisions of the NOM-243-SSA1-2010 (0,5 μg/L), while UHT products, all showed the presence of AFM1, with milk containing butyric fat which on average were within the NOM with 0.45 μg/L and 38% of the samples above the limit set by the NOM, while the dairy product showed an average of 0.66 μg/L and 69% of the samples above the provisions of the NOM. In the second sampling, 162 milk samples were analyzed, including raw milk (n = 51), infant formula (n = 55), milk powder (n = 15) and UHT-treated products (n = 41), collected from supermarkets and analyzed by extraction in immunoaffinity columns containing monoclonal antibodies, and quantified by HPLC with fluorescence detection. In order to determine the average daily intake of AFM1 by age group and to establish the carcinogenic risk index, ENSANUT corresponding 2012 survey was used to Nuevo León, applying the formula described by Kuiper-Goodman (1994). Among the 51 raw milk samples analyzed, 16 were positive (31%), obtaining 2 samples (4%) above the maximum limit established by the NOM and an average of 0.07 μg/kg. Among the 55 infant formulas analyzed, 11 were positive for the presence of AFM1, showing all values above that established by the Codex Alimentarius (0.025 μg/kg) and a mean of 0.04 μg/kg. Among the 15 dehydrated samples, 12 were milk (milk fat) and 3 milk products (vegetable fat), with an average of 0.13 μg/L and 10 had presence of AFM1. Among the 41 UHT samples 27 were milk and 14 dairy product, with a mean of 0,30 μg/L and 26,8% of samples above the AFM1 levels established by the NOM. According to the data of the average daily intake of AFM1 by age group, it was observed that children aged between newborn and school age (0 - 11 years) was the population group that had the highest intake levels of AFM1, since in this group of infants whose main diet is up to 6 months is breast milk or milk-based infant formula presented AFM1 intake levels of 4.40 ng/kg PCP/day over the limit carcinogenic risk index (2 ng/kg PCP/day). Although the pre-school and school population the frequency, type and consumption of milk and milk products is changed, the body weight is not yet high enough to reverse the values of average daily intake of AFM1 presenting high levels of carcinogenic risk (5.01 ng/kg PCP/day). By reducing the intake of milk and dairy products by the adolescent, adult and older adult population and to relate this intake to body weight, average daily intake of AFM1 (0.68 ng/kg PCP/day) was below the carcinogenic risk index, and representing no risk in this regard.

Les molècules adaptadores són essencials en l'organització de les molècules de senyalització i en la coordinació i compartimentació de la seva activitat . 3BP2 és una proteïna adaptadora citoplasmàtica expressada ubiqüament però principalment en cèl·lules hematopoètiques. S'ha demostrat que actua com un regulador positiu transduïnt la senyal cel·lular en cèl·lules T , B i NK. 3BP2 és un important regulador en l’alliberació de grànuls citotòxics en les cèl·lules NK. Els mastòcits es desgranulen de manera similar després de l'agregació depenent d'antigen de l'alta afinitat del receptor per IgE (FceRI) a la superfície cel·lular. L'activació d'aquestes cèl·lules indueix l'alliberament de mediadors inflamatoris preformats i la síntesi de novo i també la secreció de citocines i quimiocines. El receptor KIT forma part dels receptors factors de creixement tirosin cinasa. El lligand de KIT és el SCF (stem cell factor), considerat com el factor de creixement més rellevant en mastòcits. L’activació de KIT a través del SCF és crucial per al desenvolupament, la diferenciació i la supervivència dels mastòcits, així com per a una òptima desgranulació depenent d'IgE i producció de citocines. En aquesta tesis s’estudia el paper del 3BP2 en la regulació de l’activitat cel·lular a través dels receptors de membrana, FcepcilonRI i KIT. Amb els resultats podem concloure que el 3BP2 és necessari per obtenir una òptima resposta del mastòcit, tan a nivell de les respostes immediates, com la desgranulació, com en les respostes tardanes com la secreció de IL-8 i de GM-CSF. En la transducció de senyals a traves del FceRI, el 3BP2 és un important regulador de l’activació de mastòcits humans. Per tant, 3BP2 podria ser una diana terapèutica potencial per les malalties inflamatòries mediades pels mastòcits dependents d'IgE. Per altre banda, el silenciament del 3BP2 redueix l’expressió del receptor KIT, tant en la superfície com a nivell transcripcional, això implica un paper del 3BP2 en aquest procés. De fet, el silenciament del 3BP2 condueix a una reducció de MITF, factor de transcripció implicat en l’expressió de KIT. Les mutacions d’activació en KIT s'han associat amb diverses malalties com la mastocitosi, per tant analitzem la capacitat de 3BP2 per regular l'expressió de KIT en la línia cel·lular HMC-1 on KIT es troba mutat. Trobem que el silenciament de 3BP2 en aquestes cèl·lules també redueix l’expressió de KIT. Curiosament el silenciament de KIT i la inhibició de l’activitat cinasa del receptor redueix l’expressió de 3BP2, tot això suggereix una estreta relació entre ambdues molècules. Per tant, 3BP2 podria ser una possible diana terapèutica, en malalties inflamatòries mediades per mastòcits i en trastorns on el KIT esta desregulat. Una d’aquestes malalties associades a la desregulació del receptor KIT son els tumors de cèl·lules de l'estroma gastrointestinal (GIST). La majoria dels GIST presenten mutacions en KIT (85%) o en el receptor PDGFRa (5%) que comporten un increment de l’activitat cinasa d’ambdós receptors. En el present treball es mostra que 3BP2 s'expressa en línies cel·lulars procedents de pacients amb GIST i que la reducció de l’expressió de 3BP2 indueix un decrement de l’expressió del KIT. Curiosament, el silenciament de 3BP2 també redueix l’expressió de PDGFRa. Per altre part, 3BP2 coprecipita amb els receptors KIT i PDGFRa indicant que la molècula pot ser mediador de la senyalització d’ambdós receptors. Aquests nous resultats destaquen la importància del 3BP2 en la regulació de l’expressió i senyalització d’aquests dos receptors oncogènics, mostrant un paper com a possible diana terapèutica en GIST, especialment rellevant en els casos de pacients que han adquirit resistència als inhibidors de l’activitat cinasa d’aquests receptors. / 3BP2 is a cytoplasmic adaptor protein mainly expressed by haematopoietic cells that has been shown to act as a positive regulator in T, B and NK cell signal transduction. 3BP2 is an important regulator of cytotoxic granule release in NK cells. Mast cells similarly degranulate following antigen-dependent aggregation of the high affinity receptor for IgE (FceRI) on the cell surface. Activation of these cells induces the release of preformed inflammatory mediators and the de novo synthesis and secretion of cytokines and chemokines. The KIT receptor whose ligand is the stem cell factor (SCF) is necessary for mast cell development, proliferation and survival as well as for optimal IgE dependent signal. This thesis studied 3BP2 role in regulating cellular activity through membrane receptors, FcepcilonRI and KIT. Our findings point to a requirement for 3BP2 in optimal immediate and late mast cells responses such as degranulation and IL-8 or GM-CSF secretion. In signal transduction through FceRI, 3BP2 is an important regulator of the activation of human mast cells. Moreover 3BP2 silencing reduces expression of KIT receptor both on the surface and at the transcriptional level, this implies a role in this process 3BP2. In fact, the silencing of 3BP2 leads to a reduction in MITF, transcription factor involved in expression of KIT. Our results suggest a potential of 3BP2 as a therapeutic target in mast cell-mediated inflammatory diseases and deregulated KIT disorders. One of this disorders are gastrointestinal stromal tumors (GIST). Most GISTS contain oncogenic gain-of­function of KIT (85%) or PDGFRa receptor (5%) which is accompanied by strong expression of the protein products of these oncogenes. We show that 3BP2 is also expressed in cell lines form GIST patients and there are an interaction with3BP2 and both receptors. Interestingly, silencing of 3BP2 reduce oncogenic KIT and PDGFRa expression. These novel findings highlight the importance of 3BP2 in the regulation of the two oncogenic receptors expression and signalling indicating a role as a potential target in GIST, including those cases containing mutations that confer resistance to the KIT/ PDGFRa kinase inhibitors.

Tesi realitzada al Benaroya Research Institute and University of Washington, Seattle / Allergies are emerging as a major public health concern in the westernized world as they are increasing for reasons that remain poorly understood. Allergies involving polysensitization and multiple organ involvement result in decreased quality of life, increased morbidity and mortality. Allergic subjects can be poly-sensitized to different allergens due to phylogenetic relatedness; several species contain shared allergenic epitopes. This phenomenon occurs both at the IgE as the T cell level. While IgE cross-reactivity has been well documented, T-cell cross-reactivity has not been thoroughly studied. Well-designed studies that underlie the T-cell mechanisms that accompany allergic inflammation are highly useful in future design for successful immunotherapy as T-cells play a crucial role in the perpetuating cycle of allergic response. Cross-reactivity at the T-cell level was studied with the use of HLA class II Tetramers in two distinct models: grass-pollen and tree nut allergy. In the first study, grass pollen from the Pooideae subfamily was studied. We identified that Timothy grass derived epitopes did not cross-reacted with all homologous epitopes from distinct grass-pollen species indicating that timothy grass alone does not cover the whole set of epitopes. Moreover, these minimally cross-reactive epitopes were detected with comparable frequency, phenotype and functionality to Phl p-specific T-cells, suggest that a multiple allergen system should be considered for immunotherapy instead of a mono allergen system. In the tree nut allergy model, we used cashew as a model to study tree-nut cross-reactivity against hazelnut, pistachio and walnut at the T-cell level. T-cell-clones specific to 7 out of 12 were generated to assess cross-reactivity by tetramer co-staining and proliferation experiments. TCC specific to cashew derived epitopes could readily proliferate with hazelnut and pistachio but not walnut peptides. This study leads to the conclusion that exposure to other tree nut allergens can trigger cashew-specific T-cell responses in these cashew allergic subjects. Strict avoidance of other tree nuts should be recommended in cashew allergic subjects. Food allergies have become a major public health concern as they can cause severe and sometimes fatal reactions. Nonetheless, food allergy-specific T-cell epitopes remain unidentified and uncharacterized. In the food allergy characterization study, we examined walnut allergen-specific T-cells. T-cell reactivity towards Jug r 1 and Jug r 2, as their corresponding allergens in peanut, 2S albumin (Ara h 2) and 7S vicilin-like seed storage protein (Ara h 1) respectively, are highly immunogenic in peanut allergic subjects. Jug r 3 was also studied since we have a small cohort of samples from Spain, where LTP is the major plant food allergen. We initially investigated Jug r 1 Jug r 2 and Jug r 3-specific T-cell responses using CD154 activation assay. Jug r 2, but neither Jug r 1 nor Jug r 3, elicited dominant T-cell responses in allergic subjects. Several Jug r 2 derived epitopes were then identified by using tetramer-guided epitope mapping (TGEM). The magnitude and phenotype of the response of Jug r 2-specific CD4+ T-cells in allergic and non-allergic subjects were determined directly ex-vivo. The predominant phenotype for Jug r 2 reactive T-cells is central memory phenotype. Results show that allergic subjects have a predominant TH2 phenotype, however, TH17 responses in some individuals were also observed. T-cells with CCR4+CD27+, CCR4+CD27-, CCR4+CCR6+ and CCR4+CCR6- surface phenotypes were detected in allergic subjects. T-cells from non-allergic subjects have a TH1 and TH1/TR1 phenotypes characterized by surface expression of CXCR3. Similar observations were observed in the cashew model. Both Cashew and Walnut-specific T-cells with TH2, TH17 and TH2/TH17 phenotypes could be detected in non-asthmatic and asthmatic walnut allergic subjects. Understanding this T-cell heterogeneity may improve our understanding of disease manifestation. / Las alergias están aumentando por razones que aun son desconocidas. Los alérgenos, pueden actuar al nivel de IgE como al nivel de células T. Generalmente, los pacientes alérgicos están polysensitizados a distintas especies que contienen alérgenos debido a su relación filogenética. Aunque la reactividad cruzada ha sido estudiada a nivel de IgE, la misma ha sido poco estudiada a nivel de células T. En este estudio utilizamos tetrámeros de clase II para estudiar este fenómeno en dos modelos: uno de gramíneas y otro de frutos secos. Para el primero encontramos que un sistema de especies múltiples debería de ser utilizado, debido a que células que mínimamente reactivas están presentes con fenotipos, frecuencias y funcionalidad a la de la gramínea Timothy. Para los frutos secos encontramos que los clones de células T derivados de anacardos reconocen y tienen capacidades funcionales hacia pistacho y almendra pero no a la nuez. Evitar estos alimentos debería de ser estrictamente sugerido. Finalmente, nuestro estudio que se baso en la caracterización de células T especificas contra alimentos fue enfocado en la alergia a la nuez. Encontramos que los pacientes alérgicos contienen una variedad heterogenia en la respuesta celular T, caracterizada por respuestas TH2, TH2/TH17 y TH17, mientras que los pacientes no alérgicos tenían una frecuencia de células T baja o ausente y un fenotipo TH1. Además, la mayoría de las células tienen un fenotipo de memoria central. El entendimiento de esta heterogeneidad debería de ser aplicado para la mejora de tratamientos.