Submitted by LAURA DENISE MENDES DA SILVA null (laurabiomedicina@gmail.com) on 2016-03-08T14:18:39Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO DEFESA VERDADEIRA 1.pdf: 2757941 bytes, checksum: a9f82a822862214aa32b687d969f2b0d (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-09T17:06:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_ldm_me_bot.pdf: 2757941 bytes, checksum: a9f82a822862214aa32b687d969f2b0d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-09T17:06:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_ldm_me_bot.pdf: 2757941 bytes, checksum: a9f82a822862214aa32b687d969f2b0d (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A doença de Chagas (DC), causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi (T. cruzi), é uma doença negligenciada e considerada um grave problema de saúde pública. A sua evolução no individuo infectado ocorre em duas fases distintas: a fase aguda que dura de 2 a 4 meses, caracterizada pela alta parasitemia, mas ausência de sinais e sintomas específicos, o que dificulta sua detecção, e a fase crônica na qual a maioria dos indivíduos é diagnosticada. Nessa fase, uma boa parte dos indivíduos apresenta a forma indeterminada ou assintomática da doença. No entanto, cerca de 30 a 40% dos indivíduos infectados desenvolvem a DC sintomática, que pode se apresentar na forma de doença cardíaca ou doença digestiva. Um dos desafios mais importantes no estudo da DC é a determinação dos mecanismos relacionados à resposta imune do hospedeiro que levam a essas diferentes apresentações clinicas. A resposta imune celular via liberação das citocinas pró-inflamatórias como IFN-y, TNF-α e IL-17 é considerada determinante na resistência do hospedeiro. No entanto, um fino controle da liberação dessas citocinas deve ocorrer para que a resposta não se intensifique ou não se perpetue e resulte em lesão tecidual, o que ocorre através da ativação de citocinas anti-inflamatórias como a IL-10 e o TGF-y. Esse controle de resposta seria responsável pelo não aparecimento de sintomas nos indivíduos com doença de Chagas assintomática. Os receptores de reconhecimento padrão (PRRs), particularmente os Toll-Like Receptors (TLRs) são extremamente importantes na definição do perfil de citocinas que será liberado em resposta a um microrganismo. Assim, a nossa hipótese foi de que pacientes com as formas sintomáticas e assintomáticas da doença liberam um padrão de citocinas mais inflamatório e anti-inflamatório respectivamente, devido ao fato de que os TLRs envolvidos na produção desses dois tipos de citocinas, com enfoque para o TLR2 e o TLR4, seriam diferentemente expressos ou ativados nesses dois grupos. Como esperado, detectamos que, células mononucleares de pacientes com a forma cardíaca liberam predominantemente IFN-y, TNF-α e IL-17 quando comparados com os demais grupos. Diferentemente, pacientes com a forma assintomática liberam níveis maiores de IL-10 e TGF-β. Detectamos ainda que o TLR2 e o TLR4 estão envolvidos tanto na produção de citocinas pró como anti-inflamatórias, detectadas respectivamente pelos pacientes sintomáticos e assintomáticos, o que nos permite concluir que a estimulação dos mesmos receptores pode levar a liberação de um padrão diferente de citocinas na dependência do grupo de pacientes testados. Os prováveis mecanismos que levam a essas diferenças são discutidos. / Chagas disease (CD), caused by the protozoan Trypanosoma cruzi (T. cruzi), is a neglected disease and considered a serious problem of public health. Its evolution in a infected host occurs in two distinct stages: the acute stage which lasts 2 to 4 months and is characterized by high parasitemia, but no detection of specific signs and symptoms, which difficult its detection, and the chronic stage in which most individuals are diagnosed. At this second stage, most individuals present the indeterminate or asymptomatic chronic disease. However, about 30 to 40% of them become symptomatic and present the cardiac or digestive disease. One of the most important challenges in the CD study is to determine the mechanisms related to the host immune response that lead to these different clinical manifestations. The cellular immune response characterized by the release of pró-inflammatory cytokines such as IFN-y, TNF-α and IL-17 is considered crucial in host resistance. However, it is suggested that a fine control of this response must occur in order to avoid a perpetuated inflammatory process which results in tissue injury. This control was found to be responsible by the absence of clinical symptoms in individuals with the indeterminate chronic form and depends on activation of anti-inflammatory cytokines such as IL-10 and TGF-β. The pattern recognition receptors (PRRs), particularly the Toll-Like Receptors (TLRs) are extremely important in defining the cytokine profile that will be released in response to a microorganism. Therefore, our hypothesis was that patients with symptomatic and asymptomatic disease release different profile of cytokines, i.e pró-inflammatory and anti-inflammatory respectively, because TLRs involved in the production of each profile of cytokines, would be differently expressed or activated in these two groups. As expected, we found that mononuclear cells of patients with the cardiac form release predominantly IFN-y, TNF-α and IL-17 when compared with other groups . In contrast, patients with asymptomatic disease release predominantly IL-10 and TGF-β. Of note, TLR2 and TLR4 were involved in the production of both, inflammatory and anti-inflammatory cytokines detected in symptomatic and asymptomatic patients, respectively. We conclude that stimulation of these receptors may lead to release of different profiles of cytokines in a dependency of the patients group that is being evaluated. Probable mechanisms involved in such differences are discussed.

Submitted by Renata Oliveira Samuel null (re_samuel@hotmail.com) on 2016-05-09T13:56:38Z No. of bitstreams: 1 Tese Doutorado Renata - 04-05-16.pdf: 2214962 bytes, checksum: b43400238a9850e49f42a7d10d876c58 (MD5) / Approved for entry into archive by Felipe Augusto Arakaki (arakaki@reitoria.unesp.br) on 2016-05-12T17:47:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 samuel_ro_dr_araca.pdf: 2214962 bytes, checksum: b43400238a9850e49f42a7d10d876c58 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-12T17:47:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 samuel_ro_dr_araca.pdf: 2214962 bytes, checksum: b43400238a9850e49f42a7d10d876c58 (MD5) Previous issue date: 2016-03-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi colaborar com o entendimento dos mecanismos que envolvem a relação entre as infeções de origem endodôntica e o estado de homeostasia corpórea. Para isso investigamos o perfil inflamatório local da periodontite apical induzida e relacionamos com alterações no perfil sistêmico em ratos portadores de uma ou múltiplas infecções de origem endodôntica. Foram utilizados 30 ratos da linhagem Wistar distribuídos em 3 grupos de 10 animais: ratos saudáveis; 1AP – ratos com infecção endodôntica em um elemento dentário; 4AP ratos com infecções endodônticas em 4 elementos dentários. Após 30 dias, foi coletado sangue por punção cardíaca para a realização do hemograma (hemácias, volume globular, hemoglobina, VCM, CHCM, leucócitos, neutrófilos, linfócito, monócito, eosinófilo, basófilo e plaquetas); da quantificação sérica das citocinas pró-inflamatórias (TNF-α, IFNγ, IL-6, IL-17, IL-23) por ELISA e da quantificação de óxido nítrico (NO). Após coleta sanguínea, os animais foram sacrificados, as maxilas e mandíbulas foram processadas para análise em microscopia de luz em coloração de H.E. e para marcação imunoistoquímica dos mediadores inflamatórios supracitados. Os resultados das diferentes análises e a relação entre os achados locais e sistêmicos foram analisados por testes estatísticos específicos para cada caso (p<0,05). Nas análises histológicas, foi confirmada a presença de periodontites apicais no 1AP e 4AP, com infiltrado inflamatório moderado. Além disso, foi observado aumento de todos os mediadores supracitados nas lesões quando comparado aos tecidos saudáveis (p<0.05). Nas análises séricas, foi observado aumento linfócitos, leucócitos, TNF-α, IL-6, IL-17 e IL-23 no 4AP quando comparado aos ratos saudáveis (p<0.05). Além disso, houve diminuição do NO no 1AP e 4AP quando comparados aos ratos saudáveis (p<0.05). O nível de IFNγ não foi diferente entre os grupos (p>0.05). Conclui-se que a presença de periodontite apical em múltiplos elementos dentários pode levar a alterações séricas importantes decorrentes do aumento de linfócitos, leucócitos e das citocinas pró-inflamatórias TNF-α, IL-6, IL-17 e IL-23. Além disso, a periodontite apical em um ou em múltiplos elementos dentários leva a diminuição sérica dos metabólitos do NO. / The aim of this work will contribute to understanding of the mechanisms that involve the relationship between infections of endodontic origin and state of bodily homeostasis. Thus, we propose to investigate the profile of local inflammatory induced apical periodontitis and correlate with changes in the profile systemic model with a onlyl or multiple endodontic infections. It were used 30 Wistar rats divided into three groups of 10 animals each: healthy rats; 1AP - rats with only endodontic infection; 4AP rats with multiple endodontic infections. After 30 days, blood was collected by cardiac puncture for complete blood count (RBCs, packed cell volume, hemoglobin, mean corpuscular volume, mean corpuscular hemoglobin concentration, leukocytes, neutrophil, lymphocyte, monocyte, eosinophil, basophil and platelets), serum quantification of proinflammatory cytokines (IL-17, IL-23, IL-6, TNF-α, IFN-γ) by ELISA and nitric oxide. After blood collection, the animals were killed, the jaws were processed for light microscopy in HE staining and immunohistochemical staining of inflammatory mediators above. The results of the different analyzes and the correlation between the local and systemic findings were analyzed by statistical tests specific to each case (p<0,05). Histological analysis confirmed the presence of apical periodontitis in 1AP and 4AP, with moderate inflammatory infiltrate. Furthermore, it was observed increase of all above mediators in lesions when compared to healthy tissue (p <0.05). In serum analysis, 4AP showed lymphocytes, leukocytes, TNF-α, IL-6, IL-17 and IL-23 increase when compared to healthy rats (p <0.05). Furthermore, there was a decrease of NO in 4AP and 1AP when compared to healthy rats (p <0.05). IFN-γ level was not different between the groups (p>0.05). It is concluded that the presence of apical periodontitis in multiple teeth can lead to significant alterations from increased serum lymphocytes, leukocytes and pro-inflammatory cytokines TNF-α, IL-6, IL- 17 and IL-23. Furthermore, apical periodontitis in only or multiple teeth leads to decrease of serum levels of NO. / FAPESP: 2013/23358-8

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-28Bitstream added on 2014-06-13T19:13:53Z : No. of bitstreams: 1 fernandes_rk_me_botfm.pdf: 1449236 bytes, checksum: 7642944fe5ad7bf06d645c01bd3ea971 (MD5) / O fungo Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da Paracoccidioidomicose, uma micose sistêmica, endêmica na América Latina. As células dendríticas (DCs) desempenham papel crucial na detecção de patógenos, desencadeamento de uma resposta inicial do hospedeiro, assim como na instrução da resposta imune adaptativa. Mediadores liberados pelas DCs, de uma forma autócrina, modulam as suas funções. Entre esses, destacamos as prostaglandinas e leucotrienos. Assim, avaliamos se DCs humanas produzem PGE2 e LTB4 em resposta ao fungo, a participação de receptores de reconhecimento de padrões moleculares (PRRS) nessa produção, assim como o papel modulador desses eicosanóides sobre a maturação fenotipica dessas células e a produção das citocinas IL-6, IL-10, IL-12, IL-23 e TNF-α. DCs humanas imaturas (CD14- / CD1ahigh / CD83 low) obtidas a partir da diferenciação de monócitos cultivados com GM-CSF e IL-4 (7 dias) liberaram substanciais concentrações de PGE2 e LTB4 que aumentaram significativamente, no caso da PGE2, com incubação com LPS durante 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 18h, 24h ou 48h. No entanto, os níveis de PGE2 e LTB4 foram significativamente inibidos após o desafio com as duas cepas do fungo. Ensaios de bloqueio dos PRRS mostraram que o processo de inibição de PGE2 envolveu o receptor de manose. Adicionalmente, ensaios de fenotipagem mostraram que após o desafio com o fungo, as DCs não alteraram o seu fenótipo de imaturas para o de células maduras. Assim, detectamos uma clara associação entre inibição da produção de PGE2 e LTB4 e a incapacidade do fungo em induzir a maturação de DCs. Ensaios utilizando PGE2 ou LTB4 exógenos confirmaram essa associação. Estas células ainda produzem altos níveis de IL-6... / The fungus Paracoccidioides brasiliensis is the etiological agent of paracoccidioidomycosis, a systemic mycosis, endemic in Latin America. Dendritic cells (DCs) play a crucial role in the detection of pathogens, triggering an initial response from the host as well as the instruction of the adaptive immune response. Mediators released by DCs, by an autocrine way, modulate their functions. Among these, we highlight the prostaglandins and leukotrienes. We therefore assessed whether human DCs produce PGE2 and LTB4 in response to fungus, the participation of recognition receptors of molecular patterns (PRRS) in this production, as well as the modulating role of these eicosanoids on phenotypic maturation of these cells and the production of the cytokines IL-6, IL-10, IL-12, IL-23 e TNF-α. Human immature DCs (CD14-/ CD1ahigh/CD83low) derived from the differentiation of monocytes cultured with GMCSF and IL-4 (7 days) released substantial concentrations of PGE2 and LTB4 which increased significantly in the case of PGE2, with incubation with LPS for 1h, 2h, 4h, 8h, 12h, 18h, 24h or 48h. However, the levels of PGE2 and LTB4 were significantly inhibited after challenge with two different strains of the fungus. Trials have shown that blockade of PRRS process involved the inhibition of PGE2 mannose receptor. Additionally, phenotyping assays showed that after challenge with the fungus, DCs did not change their phenotype of immature cells to mature ones. Accordingly, we detected a clear association between inhibition of the production of PGE2 and LTB4 fungus and inability to induce maturation of DCs. Assays using exogenous PGE2 and LTB4 confirmed this association. These cells also produce high levels of IL-6 in response to fungus, which, however, were not associated with inhibition of the production of eisosanóides. Rather than that, these DCs do not produce... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-25Bitstream added on 2014-06-13T20:55:08Z : No. of bitstreams: 1 benzatti_fp_me_arafcf.pdf: 749824 bytes, checksum: ea3c2dd33180f3a4b393912a5145397a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O câncer é o principal problema mundial de saúde e nos últimos anos o Brasil obteve um avanço considerável no índice de mortalidade por câncer. O câncer de cólon afeta igualmente homens e mulheres, sendo uma doença tratável e freqüentemente curável. O sistema imune é responsável pela defesa do organismo contra patógenos e alguns tumores, que desencadeiam uma resposta imune especifica na tentativa de suprimir seu crescimento. Associado à atuação dos macrófagos, o consumo de produtos derivados da soja está sendo muito difundido atualmente, podendo diminuir o risco de determinadas doenças, inclusive dos tumores, melhorando as condições de saúde. As bactérias ácido láticas são utilizadas em alimentos probióticos e são capazes de promover uma estimulação do sistema imune, influenciando através do aumento da fagocitose de patógenos e também quanto à produção de citocinas. Neste trabalho, avaliou-se a resposta imune no desenvolvimento de câncer de cólon induzido quimicamente com 1,2 dimetilhidrazina em ratos que receberam produto de soja fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp. jugurti 416, os quais foram suplementados ou não com cálcio. Os animais com e sem tumores receberam o produto fermentado de soja ou o produto fermentado de soja suplementado com cálcio. Aos controles não foi administrado o produto fermentado de soja ou suplementado. Estes grupos tiveram a atividade imunológica avaliada através da produção de mediadores como peróxido de hidrogênio (H2O2), óxido nítrico (NO), interleucina (IL)-1 , fator de necrose tumoral-a (TNF-a) e IL-6, produzidos pelos macrófagos, e interferon- (IFN-g) e IL-4 produzidos pelas células esplênicas. Os resultados demonstram que com... / Cancer is the main problem of health and in the last years Brazil had a considerable progress in the mortality rate for cancer. Colon cancer affects men and women equally, and it is a treatable and frequently curable disease. Immune system is responsible for the organism defense against pathogenic substances and some tumors that unchain a specific immune response in the attempt of suppressing its growth. Combined the macrophages performance, the consumption of products derived from soy is being very spread now, could reduce the risk certain diseases, including tumors, improving health condition. Lactic acid bacteria is utilized in probiotic food and can promote a stimulation of immune system influencing through the increase of the pathogen phagocytosis and also the cytokines production. In this work, the immune response was evaluated in the development of colon cancer induced chemically with 1,2 dimethylhydrazine in rats that received soy product fermented with Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus ssp. jugurti 416; which were supplemented or not with calcium. Animals with or without tumors that received the fermented soy product or the fermented soy product supplemented with calcium and to controls groups that didn t receive the fermented soy product or supplement with calcium. In these groups the immunological activity was evaluated through production of mediators such as hydrogen peroxide (H2O2), nitric oxide (NO), interleukin (IL)-1 , tumoral necrosis factor- (TNF- ) and IL-6, produced by macrophages, and interferon- (IFN- ) and IL-4, produced by spleen cells. Results demonstrate that in tumor presence and fermented product there is a higher immune system stimulation observed in H2O2 production, as well as the animals without tumor and that received soy treatment. In the animals with tumors that... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-26Bitstream added on 2014-06-13T20:15:33Z : No. of bitstreams: 1 matos_dc_me_arafcf.pdf: 757860 bytes, checksum: 63d655076a69ffcf61cab1e27565ce3c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O câncer é a segunda maior causa de morte em países industrializados, sendo superado somente para as doenças cardíacas. Os dois tipos de cânceres de maior incidência no homem são o de próstata e de pulmão, e entre as mulheres são de mama e de cólon do útero. Abrina, ricina e pulchelina são proteínas inativadoras de ribossomos do tipo II (RIPs), possuidoras de duas cadeias polipeptídicas, uma com atividade enzimática N-glicosidase e a outra lectínica. Neste trabalho, a resposta imune desencadeada pelas RIPs e a atividade anti-proliferativa contra células tumorais de mama (LM3) e de pulmão (LP07) foram avaliadas. Abrina, ricina e pulchelina mostraram-se muito tóxicas aos macrófagos (IC50 = 6,4 ± 1,53, 11,8 ± 1,66 e 19,3 ± 4,0, respectivamente), sendo a abrina a mais tóxica de todas, seguida pela ricina e esta pela pulchelina. As proteínas não estimularam a produção de NO e H2O2 em células do exsudato peritoneal, mas causaram leve inibição da produção de NO estimulada por LPS e uma forte inibição da produção de H2O2 estimulada pelo PMA. As proteínas testadas estimularam resposta do tipo Th1 e Th2, pois induziram a produção de IL-1β, TNF-α, IFN-γ, IL-12 e IL-10. As células LM3 (adenocarcinoma de mama murino) e LP07 (adenocarcinoma de pulmão murino) foram mais sensíveis ao potencial tóxico de abrina, ricina e pulchelina do que do Taxol após 24 e 48 horas de incubação. / Cancer is the second major cause of death in industrialized countries, second only to cardiac diseases. The two more incident cancer types in men are prostate and lung cancer, and in women are breast and colon cancer. Abrin, ricin and pulchellin are type II ribosome inactivating proteins (RIPs); they have two polypeptide chains, one with N-glycosidase activity, and the other lectinic. In this research, we evaluated the immune response induced by these RIPs and the anti-proliferative activity against tumoral cells of breast (LM3) and lung (LP07). Abrin, ricin and pulchellin showed citotoxicity to exsudate peritoneal cells (IC50 = 6.4 ± 1.53, 11.8 ± 1.66 e 19.3 ± 4.0, respectively). The abrin was the most toxic of all, followed by ricin and pulchellin. Abrin, ricin and pulchellin didn’t stimulate NO and H2O2 production in PEC, although they caused a low inhibition of LPS’ NO production stimulation, and a high inhibition of PMA’s H2O2 production stimulation. The proteins induced a Th1 and Th2 response; characterized by their ability to stimulated IL-1β, TNF-α, IFN-γ, IL-12 e IL-10 production. The LM3 cells (murine breast adenocarcinoma) and LP07 cells (murine lung adenocarcinoma) were more sensible to the proteins’ citotoxicity than Taxol’s citotoxicity after 24 and 48 hours of incubation.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-28Bitstream added on 2014-06-13T20:15:34Z : No. of bitstreams: 1 vieira_ep_me_botfm.pdf: 369040 bytes, checksum: 5915a57d72f07e1e5440fa8514d1edc8 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A rotura prematura de membranas pré-termo (RPM-PT), é uma das principais causas de prematuridade, ocorrendo em 30% a 40% dos nascimentos prematuros. Sua etiologia está relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Quantificar a expressão de IL-18 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com a presença de corioamnionite histológica. Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto. Como grupo controle, foram avaliadas 30 gestantes normais, fora de trabalho de parto, que tiveram indicação de cesárea para resolução da gestação de termo. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm de interleucina (IL)-18 pela técnica de PCR em tempo real. Outros fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2%. A presença de corioamnionite foi de 44% no grupo RPM-PT. A concentração relativa de RNAm de IL-18 não foi estatisticamente diferente nos grupos estudados. Não houve relação entre concentração relativa de RNAm de IL-18 e presença de corioamnionite. Conclusão: A RPM-PT não é capaz de induzir aumento na concentração relativa de RNAm de IL-18 e não existe relação entre expressão relativa dessa citocina e corioamnionite. / Preterm premature rupture of the membranes (PPROM) is one of the major causes of prematurity, accounting for 30-40% of all preterm births. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. To quantify the expression of the inflammatory cytokine interleukin-18 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the correlation of this expression with the presence of the chorioamnionitis present in the membranes. Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 normal pregnant that underwent selective cesarean section without labor were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. In the study period, the incidence of PPROM was 6.2% and in 44% of these samples the presence of chorioamnionitis was observed. mRNA expression of IL-18 was not statistically different in the groups studied. No difference occurred in the presence of chorioamnionitis in the membranes and the concentration of IL-18 mRNA. Conclusion: The concentration of IL-18 mRNA in the chorioamniotic membranes was not statistically different in the groups studied and this cytokine in PPROM is not related with the presence of the chorioamnionitis in the membranes.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-04-28Bitstream added on 2014-06-13T19:54:57Z : No. of bitstreams: 1 pereira_ac_me_botfm.pdf: 434651 bytes, checksum: 3c30a9ed577db22f98db92a5a9549e4d (MD5) / A Rotura Prematura de Membranas Pré-Termo (RPM-PT) é um dos principais problemas da Clínica Obstétrica, com etiologia relacionada à ascensão bacteriana do trato genital inferior para a decídua e membranas corioamnióticas. Objetivo: Quantificar a expressão de interleucina (IL)-4 e IL- 10 pelas membranas corioamnióticas de gestantes com RPM-PT e avaliar a relação dessa expressão com presença de corioamnionite. Material e Foram incluídas no estudo 30 gestantes com RPM-PT em trabalho de parto (RPM-PT em TP) e 20 gestantes com RPM-PT fora do trabalho de parto (RPM-PT fora de TP). Como grupo controle foram avaliadas 30 gestantes em trabalho de parto prematuro (TPP) e bolsa das águas íntegra. No momento da resolução da gestação, após a dequitação, foram retirados fragmentos das membranas corioamnióticas e acondicionados em RNA later para posterior quantificação do RNAm das citocinas pela técnica de PCR em tempo real. Fragmentos das membranas foram submetidos à análise histopatológica para avaliação da presença de corioamnionite. No período do estudo, a incidência de RPM-PT foi de 6,2% e de TPP foi de 5,5%. Para a IL-10, a concentração relativa de RNAm foi estatisticamente superior nas membranas corioamnióticas de gestantes do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupoTPP. Em relação à IL-4 não houve diferença significativa entre os grupos estudados. A presença de corioamnionite foi de 44,0% no grupo RPM-PT e de 66,7% no grupo TPP. A análise estatística não apontou diferença significativa entre a expressão de IL-4 e IL-10, na presença ou ausência de corioamnionite, nos grupos estudados. A concentração relativa de RNAm de IL-10 é superior nas membranas corioamnióticas do grupo RPM-PT fora de TP em relação ao grupo TPP e entre os grupos RPM-PT e TPP a expressão de IL-4 é similar. Não existe relação entre a expressão de IL-4 e IL-10 e corioamnionite. / The preterm premature rupture of membranes (PPROM) is one of the major problems of Clinical Obstetrics. Its etiology is related to the ascending pathway of bacteria from the lower genital tract to the decidua and chorioamniotic membranes. Objective: To quantify the expression of the interleukin (IL)-4 and IL-10 in the chorioamniotic membranes of pregnant women with PPROM and evaluate the relation of this expression with the presence of chorioamnionitis. Material and Methods: Thirty PPROM women in labor and 20 PPROM without labor women were studied. As a control group 30 pregnant women in premature labor (PTL) were studied. After delivery, samples of the chorioamniotic membranes were collected for histopathological analyses and others fragments were conditioned in RNA later for posterior quantification of cytokine mRNA expression by real time PCR. Results: In the study period, the incidence of PPROM was 6,2% and 5,5% for PTL. For IL-10, the expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the groups with PTL. mRNA expression of IL-4 was not statistically different in the groups studied. In 44,0% of samples in PPROM group the presence of chorioamnionitis was observed and for PTL group the incidence was 66,7%. No difference occurred in the expression of cytokine mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis in the groups studied. Conclusion: The expression of mRNA was statistically higher in the PPROM without labor group in relation to the group with PTL and among the PPROM and PTL groups mRNA expression of IL-4 was not statistically different. No difference occur in the expression of IL-4 and IL-10 mRNA in relation to the presence of chorioamnionitis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-02-26Bitstream added on 2014-06-13T20:41:51Z : No. of bitstreams: 1 almeida_ramb_dr_botfm.pdf: 853261 bytes, checksum: 866edf2277c1ac0e74ea9c48e8cb31a9 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Iniciativas como a “WHO/UNAIDS ‘3 by 5’ permitiram que se atingisse, no ano de 2007, a marca de 3 milhões de pessoas com acesso à terapia antiretroviral (TARV) em países de baixa e média renda. O aumento da cobertura nestes países demanda custos importantes com anti-retrovirais, porém também levanta outro problema, que é o monitoramento da terapia em localidades de poucos recursos. Há consenso no fato de que devem ser pesquisados marcadores de eficácia da TARV mais acessíveis. Considerando o comportamento da β-2 microglobulina sérica e das citocinas séricas TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10 com relação à atividade inflamatória induzida pela replicação do HIV-1, o objetivo deste estudo foi o de verificar o comportamento destas substâncias como indicadores da presença, ou não, de falha terapêutica à HAART. Entre agosto de 2004 e novembro de 2005, 89 indivíduos infectados pelo HIV-1, atendidos pela Área de Doenças Tropicais da Faculdade de Medicina de Botucatu-UNESP, e 20 indivíduos normais, doadores de sangue do Hemocentro de Botucatu [43 mulheres e 66 homens; idade média = 39,7 anos (22 - 66 anos)] foram divididos em 4 grupos: G1- 15 indivíduos infectados pelo HIV-1, virgens de tratamento ou sem HAART há pelo menos seis meses e com contagens de linfócitos T CD4 + menores que 350 células/mm3; G2- 31 indivíduos infectados pelo HIV-1, em uso de HAART e sem falha terapêutica virológica (FT); G3- formado por 43 indivíduos infectados pelo HIV-1, em uso de HAART e com FT, e GC- formado por 20 indivíduos normais, não infectados pelo HIV-1, que serviram de controles para as citocinas séricas. Foram revisados os dados demográficos, clínicos e de HAART e realizados os exames β-2 microglobulina sérica, citocinas séricas (TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 e IL-10), genotipagem do HIV-1, carga viral plasmática (CV) e linfócitos T CD4 + e T CD8 +. Para... / Initiatives such as WHO/UNAIDS ‘3 by 5’ made it possible to achieve the figure of 3 million people with access to antiretroviral therapy (ART) in middle- and low-income countries in 2007. The increase in these countries’ coverage leads to important expenditure on antiretroviral drugs; however, it also raises another problem, which is therapy monitoring in low-income locations. There is agreement on the fact that more accessible ART efficacy markers must be studied. By considering the behavior of serum β-2 microglobulin and serum cytokines TNF-α, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10 in relation to inflammatory activity induced by HIV-1 replication, the objective of this study was to assess the behavior of such substances as indicators of the presence, or not, of antiretroviral therapeutic failure (TF). From August 2004 to November 2005, 89 HIV-1-infected individuals assisted by the Tropical Diseases Sector of the Botucatu School of Medicine – UNESP and 20 normal blood donors at the Blood Transfusion Center of Botucatu [43 female and 66 male; mean age = 39.7 years (22 - 66 years)] were divided into 4 groups: G1- 15 HIV-1-infected individuals, previously untreated or without HAART for at least six months and CD4 + < 350 cells/mm3; G2- 31 HIV-1-infected individuals undergoing HAART without virological therapeutic failure (TF), G3- 43 HIV-1-infected individuals undergoing HAART with TF, and CG- 20 normal individuals who served as controls for serum cytokines. Demographic, clinical and HAART data were reviewed, and serum β-2 microglobulin, serum cytokines (TNFα, IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-10), HIV-1 genotyping, plasma viral load (VL) and T CD4 + and T CD8 + lymphocytes tests were performed. The Mann-Whitney test for independent samples was used for between-group comparison in the case of numeric variables, and Fisher’s exact test was applied for category variables. Statistical difference... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-25Bitstream added on 2014-06-13T20:02:02Z : No. of bitstreams: 1 geraix_j_dr_botfm.pdf: 538830 bytes, checksum: a76b460005466efa7d2941012c34da2d (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O advento da utilização da terapia antiretroviral de alta atividade (HAART), a partir de 1996, representou um profundo impacto na história natural da infecção pelo HIV, promovendo uma importante e sustentada supressão na replicação viral, elevando a sobrevida e a qualidade de vida dos pacientes soropositivos. No entanto, gradualmente, foi se observando que a terapia antiretroviral é acompanhada de alterações metabólicas, como dislipidemia, principalmente hipertrigliceridemia, resistência insulínica, hiperglicemia e lipodistrofia, isto é, redistribuição da gordura corporal. Ensaios epidemiológicos demonstram correlação entre os níveis elevados de triglicerídeos (TG) e maior incidência de doença arterial coronariana (DAC). Autores sugerem a intervenção dietética como parte do tratamento da hiperlipidemia, incluindo aumento da ingestão de fibra solúvel (10g-25g/dia). Há estudos demonstrando que tanto o colesterol quanto os triglicerídeos séricos diminuem com a utilização de fibra alimentar. Alguns observaram redução apenas nos níveis séricos de triglicerídeos, enquanto que outros não verificaram alteração no metabolismo lipídico. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da fibra solúvel (goma guar parcialmente hidrolisada) suplementar sobre a hipertrigliceridemia e o perfil imunológico de indivíduos HIV positivo em tratamento com HAART. Foram estudados 19 pacientes HIV positivo com hipertrigliceridemia (níveis séricos ³ 150 a < 500mg/dL), sendo 63,16% do sexo masculino e 36,84% feminino, com média de idade de 43,52 ± 9,22 anos. Esses indivíduos utilizavam o mesmo esquema HAART há pelo menos seis meses, sem mudança da terapia durante o estudo e receberam 20g de fibra solúvel por dia, durante quatro meses... / The advent of highly active antiretroviral therapy (HAART), since 1996, represented a profound impact on the natural history of HIV-infection by promoting important and sustainable viral replication suppression and increasing survival and quality of life among seropositive patients. Nonetheless, antiretroviral therapy has been observed to be accompanied by metabolic alterations such as dyslipidemia, especially hypertriglyceridemia, insulin resistance, hyperglycemia and lipodystrophy (body fat redistribution). Epidemiological studies have demonstrated a correlation between high triglyceride (TG) levels and higher incidence of coronary artery disease (CAD). Some investigators suggest dietary intervention as part of hyperlipidemia treatment, including an increase in soluble fiber intake (10-25g/day). Whereas some studies have demonstrated that both cholesterol and serum triglyceride levels decrease with the use of food fiber, others have shown just a serum triglyceride decrease, and others failed to observe any alteration in lipid metabolism. The purpose of this study was to assess the effect of soluble fiber® (partially hydrolyzed guar gum) supplementation on hypertriglyceridemia and immune profile in HIV-positive individuals on HAART. Nineteen HIV-positive individuals with hypertriglyceridemia (serum levels 150 to < 500 mg/dL) were studied. Of these individuals, 63,16% were males and 36,84% females, with mean age of 43,52 ± 9,22 years. These individuals had been on the same HAART regimen for at least 6 months, had no change in therapy during the study and received 20g/day of soluble fiber for four months at pre-established times. Clinical-nutritional, biochemical (total proteins, albumin, globulin, total cholesterol, LDL-c, HDL-c, TG, TG/HDL-c and LDL-c/HDL-c)... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-03Bitstream added on 2014-06-13T18:43:11Z : No. of bitstreams: 1 garbelini_rcbs_dr_botib.pdf: 487851 bytes, checksum: d58b1e0c9d0eba6f910c42755bfed845 (MD5) / O estudo objetivou avaliar os efeitos de reguladores vegetais na emergência e no desenvolvimento de plantas de macadâmia (Macadamia integrifolia Maiden & Betche). Para o estudo da emergência de plântulas de macadâmia, as sementes foram tratadas com: T1- água (testemunha) sob Sombrite®; T2- GA4+7 + N-(fenilmetil)- aminopurina (Promalin®) a 200 mg L-1 sob Sombrite®; T3- GA4+7 + N-(fenilmetil)- aminopurina (Promalin®) a 400 mg L-1 sob Sombrite®; T4- GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 5 mL kg-1 sementes sob Sombrite®; T5- GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 10 mL kg-1 sementes sob Sombrite® e T6-água (testemunha) sem Sombrite®. Os efeitos dos reguladores vegetais foram avaliados pelo número e porcentagem de emergência de plântulas de cada tratamento. Foram utilizados 6 tratamentos com 450 sementes cada. Os resultados permitiram concluir que o tratamento que promoveu os melhores resultados na emergência de plântulas foi com GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina (Promalin®) a 400 mg L-1 sob Sombrite®. Sete meses após o transplantio das plantas jovens de macadâmia, estas foram tratadas com os seguintes tratamentos através de pulverização foliar: Testemunha (água); T2- GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina (Promalin®) a 200 mg L-1 em 1, 2 e 3 aplicações; GA4+7 + N-(fenilmetil)-aminopurina (Promalin®) a 400 mg L-1 em 1, 2 e 3 aplicações; GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 2,5 mL L-1 em 1, 2 e 3 aplicações; GA3 + IBA + Kt (Stimulate®) a 5,0 mL L-1 em 1, 2 e 3 aplicações. Nos tratamentos com 2 ou 3 aplicações, foram realizadas a intervalo de 21 dias. As características avaliadas foram comprimento de caule, diâmetro do caule, teor de clorofila, taxa de assimilação de CO2 (A), condutância estomática (gs), transpiração (E) e concentração interna de CO2 na câmara subestomática (Ci). As avaliações de comprimento e diâmetro do caule foram realizadas antes da aplicação... / This study aimed to evaluate the effect of plant growth regulators on seed germination and development of macadamia nut trees (Macadamia integrifolia Maiden & Betche). For germination, seeds were treated with: T1- water (control) under shading screen; T2- GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 200 mg L-1 under shading screen; T3- GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 400 mg L-1 under shading screen; T4- GA3 + IBA + Kt at 5 mL kg-1 seeds under shading screen; T5- GA3 + IBA + Kt at 10 mL kg-1 seeds under shading screen, and T6-water (control) without shading screen. The effect of plant growth regulators was evaluated based on the number and percentage of emerged seedlings under each treatment. Experimental design was completely randomized, including 5 treatments with 450 seeds each. The greatest seedling emergence was detected with GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6- amine at 400 mg L-1 under shading screen. At seven months after transplanting, young macadamia nut trees were subjected to 1, 2 and 3 leaf applications of: water (control); T2- GA4+7 + N-(phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 200 mg L-1; GA4+7 + N- (phenylmethyl)-1H-purine-6-amine at 400 mg L-1; GA3 + IBA + Kt at 2.5 mL L-1; GA3 + IBA + Kt at 5.0 mL L-1. The second and the third applications were performed at 21- days intervals. Shoot length, stem diameter, chlorophyll levels, net CO2 assimilation rate (A), stomatal conductance (gs), transpiration (E), and CO2 concentration inside the substomatal chamber (Ci) were evaluated. Plant height and stem diameter were measured before application of treatments and at 21-day intervals, considering the difference among evaluations. Gas exchange evaluations were performed at the 1st and at the 150th days after application of plant growth regulators. Experimental design was in completely randomized blocks, in the factorial arrangement 4 (4 treatments) x 3 (frequency of ... (Complete abstract click electronic access below)