Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-12Bitstream added on 2014-06-13T19:51:38Z : No. of bitstreams: 1 martinez_mg_me_botfm.pdf: 823731 bytes, checksum: 14318dd910b1fde35bc83924fa448a33 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / As serpentes Crotalus durissus terrificus possuem cabeça triangular, olhos pequenos com pupila em fenda, fosseta loreal e guizo na cauda. O veneno é uma mistura complexa constituído de cátions metálicos, enzimas, peptídeos e toxinas. Os acidentes em seres humanos e em animais no Estado de São Paulo, Brasil estão em ascensão. Apesar da devastação ambiental, o número de serpentes que são capturadas e doadas aos Institutos de pesquisa também está aumentando. A questão é: Como estes animais conseguiram se adaptar e procriar apesar destas novas condições ambientais adversas? Para responder esta questão avaliou-se o nível de Carbono 13 (13C), por meio de técnica de espectrometria de massa, nos segmentos dos guizos de serpentes Crotalus durissus terrificus (Cdt) adultas e filhotes, bem como no alimento oferecido. Esta pesquisa foi baseada no conhecimento de que as plantas existentes na terra apresentam rotas bioquímicas diversas, absorvendo isótopos estáveis nas suas moléculas principalmente o Carbono (12C, 13C), o Hidrogênio (1H, 2H), o Oxigênio (16O, 17O, 18O), o Nitrogênio (14N, 15N) e o Enxofre (32S, 33S, 34S, 36S). Durante a síntese dos açúcares, quando o primeiro composto orgânico sintetizado for açúcar contendo três átomos de carbono, estas são denominadas de plantas do ciclo fotossintético C3. Quando os primeiros açúcares formados apresentam quatro átomos de carbono, estas são denominadas de plantas do ciclo fotossintético C4. No grupo C3 encontram-se aproximadamente 86% das espécies vegetais, tais como, as madeiras de lei, as leguminosas e as árvores frutíferas. No grupo C4, destacam-se principalmente as gramíneas, milho e cana-de-açúcar. A análise dos resultados em seu conjunto permitiu tecer as seguintes considerações: as serpentes Crotalus durissus terrificus se alimentam de animais provenientes tanto do ambiente C3 quanto... / The Crotalus durissus terrificus serpents possess triangular head, small eyes with pupil in crack, little loreal pit and rattle in its tail. The poison is a complex mixture constituted of metallic cations, enzymes, peptides and toxins. The accidents with human beings and animals in Sao Paulo State, Brazil are in ascension. Although the environment devastation, the number of serpents captured and donated to the research institutes is also increasing. The question is: How these animals had managed to adapt themselves and to procreate in spite of these new adverse environmental conditions? To answer this question it was evaluated the Carbon 13 level (13C), through of mass spectrometry technique, in the segments of the rattles of adults and nestlings Crotalus durissus terrificus serpents (Cdt), as well as in the offered food. This research was based on the knowledge of that the existing plants in the world present diverse biochemists routes, absorbing stables isotopes in its molecules mainly the Carbon (12C, 13C), the Hydrogen (1H, 2H), the Oxygen (16O, 17O, 18O), the Nitrogen (14N, 15N) and the Sulphur (32S, 33S, 34S, 36S). During the sugars synthesis, when the first synthesized organic composition was sugar contained three carbon atoms, these are called of plants of the C3 photosynthetic cycle. When the first formed sugars present four carbon atoms, these are called of plants of the C4 photosynthetic cycle. About 86% of the vegetal species are found in the C3 group, such as, the hardwoods, the vegetables species and fruitful trees. In the C4 group, the grass species, maize and sugar cane are mainly distinguished. The analysis of the results allowed the following considerations: the Crotalus durissus terrificus serpents eat animals proceeding from the C3 and C4 ambient; the complete turnover tax of the nestlings born in captivity until reaching the balance level varied between... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: A administração de soros heterólogos de origem eqüina constitui o único tratamento para os acidentes ofídicos, porém estes são capazes de induzir reações de hipersensibilidade. Novos processos de hiperimunização em animais alternativos vêm sendo desenvolvidos, juntamente à ferramentas de destoxificação dos venenos e novas alternativas de adjuvantes. No presente trabalho, foi utilizado veneno de Crotalus durissus terrificus nativo (VN) e irradiado com Co60 (VIr), em quatro diferentes protocolos de hiperimunização, para uma avaliação quinzenal do perfil imunológico dos grupos de ovinos pela técnica de ELISA. Os animais foram avaliados clinicamente todos os dias e pesados a cada 14 dias. Ao final, foram inspecionados em frigorífico para aprovação de consumo e os rins, analisados histologicamente. Os soros obtidos foram avaliados quanto à capacidade de neutralização por meio de testes "in vitro". O momento quatro (M4) apresentou o maior nível de titulação nos quatro grupos, porém o G1, inoculado com VN associado ao adjuvante incompleto de Freund (AIF), apresentou o maior nível quando comparados com os demais grupos, inoculados com VN associado à sílica nanoestruturada SBA-15 (G2), VIrr associado ao AIF (G3) e VIrr associado a SBA-15. Não houve diferença estatística entre os grupos em relação ao ganho de peso. Apenas um animal apresentou lesão no local de aplicação. Todos as carcaças obtiveram um carimbo de aprovação para consumo do Serviço de Inpeção Federa (SIF)l. Não houve alterações histológicas renais características de envenenamento crotálico. Os soros produzidos pelos quatro grupos foram capazes de neutralizar o efeito letal do veneno de Crotalus durissus terrificus, observados pelos testes de neutralização. O protocolo convencional de imunização utilizado no grupo um (G1) mostrou-se mais eficiente na neutralização do efeito letal quando comparados com os demais protocolos. / Abstract: The administration of heterologous antivenoms raised in horses is considered the only treatment for envenoming by venomous animals. However, it causes hypersensitivity reactions. New hyperimmunization processes in alternatives animals have been developed, associated to detoxication of venoms an new alternatives of adjuvants. In the present study it was used the natural (NV) and Co- 60-irradiated (IrrV) Crotalus durissus terrificus venom, in four differents protocols for a evaluation every fifteen days of the immunological response of the four ovine groups by the ELISA test. The clinical evaluation of the animals was performed and the weigth obteined every fourteen days, submited to a frigorific inspection and histological kidneys analysis. The neutralization capacity of the serum produced was evaluated in "in vitro" test. The fourth moment presented the major titles for all groups. However, the first group (G1), inoculated with NV associated with Freund's incomplet adjuvant (FIA) and aluminiun hidroxide presented the major titles when compared with the other ones, inoculated with NV associated to SBA-15 (G2), IrrV associated with FIA (G3) and IrrV associated with SBA-15 (G4). There was no estatistic difference between the groups concerning the weigth analysis. Only one animal presented lesion at the inoculation site. All the carcass obtained the consume aprovation stamp of the Federal Inspection Service (FIS). There was no kidney lesions on histological analysis. The four serum produced were able to neutralize the letal effect of Crotalus durissus terrificus venom, showed by the neutralization test. The convencional immunization protocol used for the first group (G1) showed more efficient neutralization capacity when compared with the others groups. / Orientador: Benedito Barravieira / Coorientador: Rui Seabra Ferreira Junior / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Nancy do Nascimento / Mestre

Orientador: Raghuvir K. Arni / Banca: Patrick Jack Spencer / Banca: Solange M. T. Serrano / Banca: José Ramón B. Abrego / Banca: Roberto da Silva / Resumo: / Abstract: / Doutor

Orientador: Raghuvir Krishnaswamy Arni / Banca: Patrick Jack Spencer / Banca: Marcos Roberto de Mattos Fontes / Banca: João Ruggiero Neto / Banca: Gustavo Orlando Bonilla Rodriguez / Resumo: Corynebacterium pseudotuberculosis (C. pseudotuberculosis) é o agente etiológico da linfadenite caseosa (CLA), uma doença que afeta diferentes grupos de animais em todo o mundo, especificamente áreas de produção de ovinos e caprinos, que causam perdas econômicas significativas. Estas bactérias podem infectar humanos, e 25 casos de infecções em humanos foram relatados na literatura. Atualmente, não há nenhum tratamento eficiente para esta doença e também não existem estruturas cristalográficas de proteínas de C. pseudotuberculosis que possam ajudar a compreender melhor o mecanismo de ação desse patógeno. No presente estudo, foram expressas e purificadas proteínas-chave que desempenham papéis importantes no metabolismo deste patógeno. Três proteínas de C. pseudotuberculosis foram expressas e purificadas. Triose fosfato isomerase (TIM) é uma enzima ativa da via glicolítica, sendo uma das principais enzimas envolvidas no fornecimento de energia para o organismo. Esta enzima foi expressa purificada e cristalizada. Tiorredoxina redutase (TrxR) e Tioredoxina (Trx) participam do sistema tioredoxina (redox), em que o Trx atua como um substrato para o TrxR. Estas enzimas têm diversas funções nos organismos. Estas enzimas foram expressas, purificadas e caracterizadas. A estrutura cristalográfica da TIM foi determinada a 2,5 Å. Proteínas de veneno de serpente, também foram investigados neste estudo, e cinco proteínas diferentes do gênero Bothrops foram purificados e cristalizadas. A estrutura cristalina da Atroxlysin-I foi determinada a 1,8 Å de resolução e foi comparada com diferentes metaloproteinases-I que foram depositados no PDB / Abstract: Corynebacterium pseudotuberculosis (C. pseudotuberculosis) is the etiological agent of Caseous Lymphadenitis (CLA), a disease that affects different groups of animals worldwide, specifically sheep and goat production areas, which result a significant economic losses. These bacteria even infect humans; to date 25 different cases of infections in humans are reported in the literature. Currently, no efficient treatment for this disease is available neither a crystallographic structure of any protein from C. pseudotuberculosis that could assist in better understanding of the mechanism of action of this pathogen. In the present study, we have expressed and purified key proteins that play a major role in the metabolism of this pathogen. Plasmids of three different proteins from C. pseudotuberculosis were designed. Triose phosphate isomerase (TIM) is an active enzyme of glycolytic pathway, which is one of the main energy supplier enzymes for the organisms. This enzyme was expressed, purified and crystallized, the crystal structure was determined at 2.5 Å. Thioredoxin reductase (TrxR), and Thioredoxin (Trx) are the part of thioredoxin (redox) system, in which the thioredoxin act as a substrate for the TrxR. These enzymes have a diverse function in organisms. These enzymes were expressed, purified and characterized. Snake venom proteins were also investigated in this study; five different proteins from genus Bothrops were purified and crystallized. The crystal structure of Atroxlysin-I was determined at 1.8 Å resolutions and compared with different metalloproteinases-I, deposited to PDB / Doutor

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2017-02-02T12:54:14Z No. of bitstreams: 1 DanielleDeMedeirosSousa_DISSERT.pdf: 2502131 bytes, checksum: 9ea08ef102256a0ca6e977592cbfd887 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2017-02-07T19:54:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 DanielleDeMedeirosSousa_DISSERT.pdf: 2502131 bytes, checksum: 9ea08ef102256a0ca6e977592cbfd887 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-07T19:54:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielleDeMedeirosSousa_DISSERT.pdf: 2502131 bytes, checksum: 9ea08ef102256a0ca6e977592cbfd887 (MD5) Previous issue date: 2016-03-22 / Erc?lia Nogueira Cobra foi uma escritora que causou pol?mica no in?cio do s?culo XX com o lan?amento de dois livros (Virgindade Anti-Higi?nica, preconceitos e conven??es hip?critas e Virgindade In?til, novela de uma revoltada) que traziam, como tema principal, a dupla moral que a sociedade brasileira articulava para homens e para mulheres, separadamente. Seus textos, considerados fora da ordem vigente da ?poca no qual foram lan?ados, acabariam sendo marginalizados, exclu?dos e classificados como perigosos devido ao teor de suas reivindica??es que advogavam pela emancipa??o feminina. Erc?lia tamb?m seria classificada como m?, demon?aca, pornogr?fica e subversiva. Presa e torturada fugiu sem deixar rastros, enquanto seus livros eram censurados e tirados fora de circula??o. Com o passar dos anos que se seguiram ao lan?amento dos seus textos, vemos como a ordem dominante constr?i uma bolha de sil?ncio que os traga, dando a impress?o de que nem ela nem seus livros ? sequer ? tenham existido. D?cadas depois, ? ?poca da consolida??o dos estudos feministas no pa?s, entretanto, Erc?lia reaparece n?o mais como mulher m? e depravada, mas como uma mulher corajosa que desafiou uma ?poca em que ser mulher e ser escritora era algo duplamente dif?cil. Nosso trabalho, portanto, busca entender esses dois momentos: os motivos que levaram a constru??o desse sil?ncio ao qual os textos ercilianos foram envoltos e como, d?cadas depois, a figura de Erc?lia volta como uma das pioneiras mais radicais do Movimento Feminista Brasileiro. / Erc?lia Nogueira Cobra was a writer who caused controversy at the beginning of the twentieth century with the launch of two books (Virginity Anti-Hygienic, prejudices and hypocritical conventions and Virginity Worthless, soap opera of a rebellious) who brought, as its main theme, the double standards that Brazilian society articulated for men and women separately. Her writings, considered out of order dominate, eventually being marginalized and excluded. The books were classified dangerous because they advocated in favor of women's emancipation. Erc?lia would also be classified as evil, demonic, pornographic and subversive. She was arrested and tortured fled without a trace. Meanwhile, his books were censored and taken out of circulation. Over the years, we see how the ruling order builds a bubble of silence that brings them, giving the impression that neither she or her books ever existed. Decades later, at the time of consolidation of feminist studies in the country, Erc?lia reappears not as evil and depraved woman, but as a brave woman who defied a time when being a woman and being a writer was something very difficult. Our work therefore seeks to understand these two moments: the reasons that led the construction of this silence around Erc?lia and how, decades later, she reappears as one of the most radical pioneers of Brazilian Feminist Movement.

No Brasil, 90% dos acidentes por serpentes peçonhentas são causadas por Bothropsafin (Bothrops, Bothropoides, Bothriopsis, Bothrocophias e Rhinocerophis), com predominância nos meses quentes e chuvosos, atingindo principalmente trabalhadores rurais do sexo masculino. Na região Sudeste, a serpente peçonhenta mais encontrada são as da espécie Bothropoides jararaca, devido ao fato de possuírem grande capacidade adaptativa. Os acidentes são classificados em leve, moderado e grave, porém números desconhecidos de acidentes não causam envenenamento. Este trabalho foi realizado entre 1990 a 2004, no Hospital Vital Brasil, em pacientes picados por Bothropoides jararaca (n = 792) através de prontuários médicos. A maioria dos acidentes foi causada por serpentes fêmeas e filhotes. A ausência de conteúdo estomacal foi encontrada em 93,4% dos espécimes de serpentes. Não houve diferença estatística entre a ocorrência de picadas de seca e da maturidade da serpente. Observou-se que a necrose foi mais comum nos dedos dos pés e mãos (4,8%) em comparação com as outras regiões do corpo (1,8%). Houve diferença significativa entre a gravidade e o intervalo de tempo entre a picada e a admissão hospitalar superior a seis horas. Foi encontrada associação significativa entre gengivorragia e incoagulabilidade sanguínea. Nos acidentes causados por serpentes adultas, a necrose foi mais freqüente (7,2%) quando comparado aos acidentes causados por filhotes (1%). Neste trabalho destaca-se a associação entre alguns dados epidemiológicos e biológicos em relação ao quadro clínico nos acidente botrópicos, contribuindo para a melhoria do atendimento desses acidentes / In Brazil, 90% of the venomous snake bites are caused by Bothrops, Bothropoides, Bothriopsis, Bothrocophias and Rhinocerophis, predominantly from hot and rainy months. Bothropoides jararaca is widespread in the south, southeastern and part of the northeastern Brazil. Due to the fact they have great adaptative capacity, it is the predominate species in São Paulo City and neighborhood. A retrospective study was made in patients bitten by Bothropoides jararaca (n= 792) between 1990 to 2004 in Hospital Vital Brazil, São Paulo, Brazil. The data was obtained from medical records. The majority of the cases in this study were caused by female and juvenile snakes. No stomach contents were found in 93.4% of the snake specimens. There was no statistical difference found between the occurrence of dry bites and the maturity or sex of the snake. We observed that necrosis was more common in the digits of the feet and hands (4.8%) compared to the other body regions (1.8%). Significant difference was found between severity and time interval greater than 6 hours between the bite and hospital admission. We found a significant association between gingival bleeding and abnormal blood coagulability. It was observed that in accidents caused by adult snakes, necrosis was more frequent (7.2%) when compared to accidents caused by juvenile snakes (1%). On this work we highlight the association between some epidemiological data and biological parameters evolved in the clinical picture of Bothrops-like accidents, contributing to improvement of the snake bite assistance

Orientador: Albetiza Lobo de Araujo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T20:58:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sant'Ana_ChristinaMariade_M.pdf: 302187 bytes, checksum: 422061925f0c5378a445c566afe71b75 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O envenenamento botrópico leva ao desenvolvimento de eventos como necrose, hemorragia e distúrbios da coagulação, gerando um quadro fisiopatológico de grande complexicidade. O trabalho de Lôbo de Araújo et al. de 1998 descreveu uma proteína de cadeia polipeptídica simples (PII1A), a qual apresentou atividade enzimática tipo esterolítica, proteína esta, proveniente do veneno da Bothrops lanceolatus, uma serpente habitante da ilha da Martinica, no Caribe. A imunodifusão e a imunoeletroforese apresentaram uma linha simples de imunoprecipitado. A fração em questão ainda hidrolisou as cadeias a e b do fibrinogênio, o que levou a classificar esta proteína como uma enzima fibrino(geno)lítica. No presente trabalho, nos propusemos a dar continuidade ao estudo desta proteína parcialmente purificada e caracterizada e investigar sua atividade como ativadora de plasminogênio ou portadora de atividade fibrinolítica, assim a atividade plasmina símile foi determinada pela ação da proteína diretamente sobre substrato cromogênico específico (S-2251ä), estando de acordo com achados publicados por Lôbo de Araújo et al (1998) e que revelou também discreta atividade ativadora de plasminogênio, quando compara-se incubação na presença e ausência deste. Determinamos 71% da seqüência de aminoácidos da PII1A por espectrometria de massa ¿ Q-tof, este método revelou um peso molecular de 28.360 kDa. A análise da seqüência em base de dados mostrou homologia com outras proteínas se serpentes e com enzimas como tripsina e fatores da cascata de coagulação / Abstract: The main symptoms following bothropic envenoming are necroses, hemorrhage and coagulopathies, originating a characteristic and complex phisiopathology. The work of Lôbo de Araújo et al. (1998) described a single polipeptide chain protein (PII-1A) purified from Bothrops lanceolatus venom, a snake inhabitant of the Martinica island. The immunodiffusion and immunoeletrophoresis analysis showed a single immunoprecipitin line. This protein was characterized as a fibrino(geno)lytic enzyme since was able to hydrolyze the a and b chains of fibrinogen. Using synthetic substrates, the authors demonstrated a strong sterolytic activity against p-TAME. In the present work we continue to study this protein (PII-1A) investigating its activity to activate plasminogen or to present a direct fibrinolytic activity using S-2251ä substrate. The determination of its partial sequence, including N-terminal, was carried through by mass spectrometry - Q-tof that showed molecular weight 28.369 kDa / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Some animals present natural resistance to the effects of snake venoms that can be explained by the presence of neutralizing factors in their blood serum. The resistance of South American Didelphis marsupialis, against crotalid venoms, especially of the genus Bothrops, of utmost medical importance in Brazil, has been object of investigation in the last few years. Bothrops erythromelas, known as âjararaca-da-secaâ or âjararaca-malha-de-cascavelâ is responsible for a great deal of snakebites in Northeastern Brazil. The venom of this snake induces acute renal failure (Wen et al., 1989). In this work, we examined the action of the antibothropic factor isolated from Didelphis marsupialis on the renal effects of B. erythromelas venom in the absence of systemic interactions. Isolated kidneys from Wistar rats, weighing 260 to 300g, were perfused with Krebs-Henseleit solution containing 6g% of bovine serum albumin, Bothrops erythromelas venom (10mg/mL), antibothropic factor from Didelphis marsupialis (10mg/mL), antibothropic factor from Didelphis marsupialis (10mg/mL) incubated with Bothrops erythromelas venom (10mg/mL) and antibothropic factor from Didelphis marsupialis (30mg/mL) incubated with Bothrops erythromelas venom (10mg/mL). The parameters studied included perfusion pressure (PP), renal vascular resistance (RVR), glomerular filtration rate (GFR), urinary flow (UF), percent sodium, potassium and chloride tubular transport (%TNa+, %TK+ and %TCl-), and osmotic clearance (Cosm). The control group perfused with albumin was functionally stable for over 120 min. The administration of antibothropic factor from Didephis marsupialis (10Âg/mL) did not modify the functional kidney parameters when compared with control group. The infusion of B. erythromelas venom (10Âg/mL) caused a significant decrease (p< 0,05*) in perfusion pressure and renal vascular resistance at 60, 90 and 120 min. with maximum effect at 90 min. (PP&#8594; ct90 = 108.70 Â 5.1 mmHg vs vBE90 = 65.20 Â 5.6* mmHg) and (RVR&#8594; ct90 = 5.76 Â 0.65 mmHg/mL.g-1.min-1. vs vBE90 = 3.10 Â 0.45* mmHg/mL.g-1.min-1). The glomerular filtration rate decreased at 60 min. and increased at 90 and 120 min (ct120 = 0.72 Â 0.10 mL.g-1.min-1. vs vBE120 = 1.24 Â 0.26* mL.g-1.min-1). After administration of the venom, the urinary flow increased at 90 and 120 min when compared with control group (ct120 = 0.14 Â 0.07 mL.g-1.min-1. vs vBE120 = 0.47 Â 0.08* mL.g-1.min-1). Sodium transport percent decreased at 90 and 120 min. (ct90 = 79.18 Â 0.88% vs vBE90 = 58.35 Â 4.86* %). Potassium transport percent decreased at 90 and 120 min. (ct90 = 67.20 Â4.04% vs vBE90 = 57.32 Â 5.28* %). Chloride transport percent decreased at 60, 90 and 120 min. (ct90 = 77.32 Â 2.22% vs vBE90 = 55.97 Â 5.52* %). The osmotic clearance increased at 90 and 120 min. (ct120 = 0.13 Â 0.01 mL. g-1.min-1 vs vBE120 = 0.42 Â 0.07* mL.g-1.min-1). The antibothropic factor from Didelphis marsupialis (10Âg/mL) incubated with B. erythromelas venom (10Âg/mL) blocked only the effects promoted by venom in the perfusion pressure and in the renal vascular resistance, whereas the highest concentration of the antibothropic factor from Didelphis marsupialis (30Âg/mL) reversed the effects on renal vascular resistance, urinary flow, glomerular filtration rate, percent sodium potassium and chloride tubular transport (%TNa+, %TK+ and %TCl-), and osmotic clearance (Cosm). In conclusion, B. erythromelas venom altered all the renal functional parameters evaluated and the antibothropic factor from D.marsupialis was able to inhibit the effects induced by the venom in rat isolated kidney. / Some animals present natural resistance to the effects of snake venoms that can be explained by the presence of neutralizing factors in their blood serum. The resistance of South American Didelphis marsupialis, against crotalid venoms, especially of the genus Bothrops, of utmost medical importance in Brazil, has been object of investigation in the last few years. Bothrops erythromelas, known as âjararaca-da-secaâ or âjararaca-malha-de-cascavelâ is responsible for a great deal of snakebites in Northeastern Brazil. The venom of this snake induces acute renal failure (Wen et al., 1989). In this work, we examined the action of the antibothropic factor isolated from Didelphis marsupialis on the renal effects of B. erythromelas venom in the absence of systemic interactions. Isolated kidneys from Wistar rats, weighing 260 to 300g, were perfused with Krebs-Henseleit solution containing 6g% of bovine serum albumin, Bothrops erythromelas venom (10mg/mL), antibothropic factor from Didelphis marsupialis (10mg/mL), antibothropic factor from Didelphis marsupialis (10mg/mL) incubated with Bothrops erythromelas venom (10mg/mL) and antibothropic factor from Didelphis marsupialis (30mg/mL) incubated with Bothrops erythromelas venom (10mg/mL). The parameters studied included perfusion pressure (PP), renal vascular resistance (RVR), glomerular filtration rate (GFR), urinary flow (UF), percent sodium, potassium and chloride tubular transport (%TNa+, %TK+ and %TCl-), and osmotic clearance (Cosm). The control group perfused with albumin was functionally stable for over 120 min. The administration of antibothropic factor from Didephis marsupialis (10Âg/mL) did not modify the functional kidney parameters when compared with control group. The infusion of B. erythromelas venom (10Âg/mL) caused a significant decrease (p< 0,05*) in perfusion pressure and renal vascular resistance at 60, 90 and 120 min. with maximum effect at 90 min. (PP&#8594; ct90 = 108.70 Â 5.1 mmHg vs vBE90 = 65.20 Â 5.6* mmHg) and (RVR&#8594; ct90 = 5.76 Â 0.65 mmHg/mL.g-1.min-1. vs vBE90 = 3.10 Â 0.45* mmHg/mL.g-1.min-1). The glomerular filtration rate decreased at 60 min. and increased at 90 and 120 min (ct120 = 0.72 Â 0.10 mL.g-1.min-1. vs vBE120 = 1.24 Â 0.26* mL.g-1.min-1). After administration of the venom, the urinary flow increased at 90 and 120 min when compared with control group (ct120 = 0.14 Â 0.07 mL.g-1.min-1. vs vBE120 = 0.47 Â 0.08* mL.g-1.min-1). Sodium transport percent decreased at 90 and 120 min. (ct90 = 79.18 Â 0.88% vs vBE90 = 58.35 Â 4.86* %). Potassium transport percent decreased at 90 and 120 min. (ct90 = 67.20 Â 4.04% vs vBE90 = 57.32 Â 5.28* %). Chloride transport percent decreased at 60, 90 and 120 min. (ct90 = 77.32 Â 2.22% vs vBE90 = 55.97 Â 5.52* %). The osmotic clearance increased at 90 and 120 min. (ct120 = 0.13 Â 0.01 mL. g-1.min-1 vs vBE120 = 0.42 Â 0.07* mL.g-1.min-1). The antibothropic factor from Didelphis marsupialis (10Âg/mL) incubated with B. erythromelas venom (10Âg/mL) blocked only the effects promoted by venom in the perfusion pressure and in the renal vascular resistance, whereas the highest concentration of the antibothropic factor from Didelphis marsupialis (30Âg/mL) reversed the effects on renal vascular resistance, urinary flow, glomerular filtration rate, percent sodium potassium and chloride tubular transport (%TNa+, %TK+ and %TCl-), and osmotic clearance (Cosm). In conclusion, B. erythromelas venom altered all the renal functional parameters evaluated and the antibothropic factor from D.marsupialis was able to inhibit the effects induced by the venom in rat isolated kidney

Orientadores: Gilberto de Nucci, Elen Cristina Teizem Landucci / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T21:27:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_Tatiane_M.pdf: 838991 bytes, checksum: fcfc9182e3cb79df03511f3867236e61 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A habilidade do veneno bruto de Lachesis muta muta e da fosfolipase A2 básica (LmTX-I) de induzir aumento da permeabilidade microvascular na pata e pele de ratos foi investigada nesse trabalho. O veneno bruto ou LmTX-I foi injetado subplantar ou intradermicamente e o edema foi medido após intervalos de tempo específicos. O volume da pata foi medido usando um hidropletismômetro, enquanto o extravasamento na pele foi medido através do acúmulo de albumina humana marcada com 125I (injetada previamente i.v.) nos sítios de pele. A liberação de histamina dos mastócitos de ratos foi medida por espectrofluorometria. O veneno bruto (0,3-3 µg/pata) ou LmTX-I (0,1-1 µg/pata) induziu edema de pata de maneira dose-dependente. A injeção intradérmica do veneno bruto (0,003-10 µg/sítio) ou LmTX-I (0,003-0,3 µg/sítio) na pele dorsal também resultou em extravasamento de proteínas plasmáticas de maneira dose-dependente. O extravasamento plasmático induzido pelo veneno bruto foi significativamente diminuído pelo tratamento com mepiramina (antagonista de receptor H1, 6 mg/kg), ciproeptadina (antagonista H1 e 5-HT2, 2 mg/kg), LNAME (inibidor não seletivo da síntese de óxido nítrico, 100 nmol/sítio), SR140333 (antagonista de receptor NK1, 1 nmol/sítio), icatibant (antagonista de receptor B2, 0,6 mg/kg) e indometacina (inibidor não seletivo das cicloxigenases, 5 mg/kg), mas não pelo tratamento com PCA4248 (antagonista de receptor de PAF, 5 mg/kg). O extravasamento na pele induzido pela LmTX-I foi significativamente inibido pela ciproeptadina, mepiramina, indometacina e PCA4248, enquanto que L-NAME, SR140333 e icatibant não tiveram efeito. Tanto o veneno bruto quanto a LmTX-I induziram a liberação de histamina de mastócitos peritoneais de ratos de maneira concentração-dependente. Em conclusão, o veneno de L. m. muta e a LmTX-I aumentam a permeabilidade microvascular por mecanismos envolvendo a ativação de mastócitos e a formação de metabólitos do ácido araquidônico. A resposta induzida pelo veneno bruto também envolve liberação de substância P, bradicinina e óxido nítrico enquanto a resposta induzida pela LmTX-I conta com a participação do PAF. / Abstract: The ability of crude venom and a basic phospholipase A2 (LmTX-I) from Lachesis muta muta venom to increase the microvascular permeability in the rat paw and skin has been investigated. Crude venom or LmTX-I were injected subplantarly or intradermically, after which oedema was measured at selected times thereafter. Paw volume was measured using a hydropletismometer, whereas skin extravasation at the skin sites was measured as accumulation of i.v. injected 125I-human serum albumin. Histamine liberation from rat mast cell was measured spectrofluorometrically. Crude venom (0.3-3 µg/paw) or LmTX-I (0.1-1 µg/paw) induced a dose-dependent rat paw oedema. Intradermal injection of crude venom (0.03-10 µg/site) or LmTX-I (0.003-0.3 µg/site) in the dorsal skin also resulted in dosedependent plasma extravasation. Crude venom-induced plasma extravasation was significantly inhibited by the histamine H1 receptor antagonist mepyramine (6 mg/kg), the histamine/5-hydroxytriptamine antagonist cyproheptadine (2 mg/kg), the nitric oxide synthesis inhibitor N?-L-nitro-arginine methyl ester (L-NAME; 100 nmol/site), the tachykinin NK1 receptor antagonist SR140333 (1 nmol/site), the bradykinin B2 receptor antagonist Icatibant (0.6 mg/kg) and the cyclooxygenase inhibitor indomethacin (5 mg/kg). The platelet-activating factor receptor antagonist PCA4248 (5 mg/kg) had no significant effect. LmTX-I-induced skin extravasation was significantly inhibited by cyproheptadine, mepyramine, indomethacin and PCA4248, while L-NAME, SR140333 and Icatibant had no effect. Additionally, both Lachesis muta muta venom and LmTX-I concentration-dependently induced histamine release from rat peritoneal mast cells. In conclusion, Lachesis muta muta venom and LmTX-I increase microvascular permeability by mechanisms involving mast cell activation and both had arachidonic acid metabolites participation. Crude venom-induced responses also involves substance P, bradykinin and nitric oxide release, whether LmTX-I-induced response involves PAF. / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-08-24T20:25:23Z No. of bitstreams: 1 viniciusjosepilate.pdf: 4576162 bytes, checksum: b62d296b1537238b9c96d99b034cb665 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-08-25T12:05:45Z (GMT) No. of bitstreams: 1 viniciusjosepilate.pdf: 4576162 bytes, checksum: b62d296b1537238b9c96d99b034cb665 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-25T12:05:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 viniciusjosepilate.pdf: 4576162 bytes, checksum: b62d296b1537238b9c96d99b034cb665 (MD5) Previous issue date: 2017-07-05 / Sibynomorphus neuwiedi e Sibynomorphus mikanii são serpentes de pequeno porte, conhecidas como cobras dormideiras, noturnas, não peçonhentas e malacófagas. Ambas ocorrem em áreas florestais de Mata Atlântica e ambientes alterados, porém S. mikanii ocorre mais frequentemente no Cerrado. Estudos parasitológicos, biológicos, ecológicos e morfológicos envolvendo essas espécies ainda são escassos. Os objetivos do presente estudo foram analisar a ecologia de helmintos, a dieta e a ecomorfologia das serpentes S. neuwiedi e S. mikanii de Minas Gerais, Brasil, registrar a helmintofauna de suas presas, verificar os efeitos da sazonalidade e do sexo, estado reprodutivo, tamanho e massa corporal destas serpentes, assim como do tamanho dos órgãos parasitados, sobre seus helmintos, e verificar os efeitos ecológico, filogenético e sexual na variabilidade morfométrica. As 39 serpentes analisadas de S. neuwiedi e as 49 de S. mikanii da Coleção Herpetológica da UFJF – Répteis tiveram aferidos comprimento e largura da cabeça, largura interocular, comprimentos rostro-cloacal, da cauda e total, e massa corporal. Posteriormente foram necropsiadas, sexadas e analisadas quanto à maturidade, tendo a cavidade corporal, órgãos e conteúdos digestórios analisados em busca de helmintos e presas. Órgãos parasitados foram medidos. Foram coletados 30 espécimes de moluscos da família Veronicellidae, eutanasiados, fixados, conservados e, somados aos espécimes encontrados nos estômagos das serpentes, foram dissecados e examinados para a identificação e em busca de helmintos. Os helmintos encontrados nas serpentes e nos moluscos foram lavados, fixados, conservados, quantificados, identificados e fotografados. Foi realizada a morfometria de trematódeos e nematoides. As comunidades de metazoários parasitos das serpentes foram formadas apenas por endoparasitos dos grupos dos helmintos e apresentaram riqueza e diversidade baixas, padrão de distribuição agregado, caráter isolacionista, especificidade quanto aos sítios de infecção e predominância de apenas um táxon parasitário por infracomunidade. As prevalências foram medianas. Ambas espécies de serpentes foram parasitadas por dois táxons de trematódeos, enquanto a serpente S. neuwiedi também apresentou três táxons de nematoides e S. mikanii, quatro (dois em comum entre estas serpentes). Os táxons parasitários predominantes foram Rhabdias sp. e Strongyluris sp. em ambas espécies de serpentes, e Mesocoelium sibynomorphi em S. neuwiedi, não apresentando o tamanho deste último helminto nesta serpente relação de intensidade-dependência. As serpentes apresentaram dietas semelhantes: moluscos de espécies da família Veronicellidae, sendo registradas as espécies-presas Sarasinula linguaeformis na serpente S. neuwiedi e Latipes erinaceus e Sarasinula sp. na serpente S. mikanii. Larvas de nematoides Strongyluris sp. foram os helmintos em comum entre essas serpentes e suas presas. A variação na sazonalidade, o sexo, o estado reprodutivo, o tamanho e a massa corporal de S. neuwiedi e S. mikanii, e o tamanho dos órgãos parasitados, não exerceram influência sobre as comunidades de helmintos destas serpentes. Essas espécies não apresentaram dimorfismo sexual. O habitat não influenciou a morfologia dessas serpentes, enquanto a filogenia influenciou a morfologia de fêmeas adultas, o que não ocorreu em fêmeas jovens e machos. / Sibynomorphus neuwiedi and Sibynomorphus mikanii are small sized snakes, known as sleepy snakes, nocturnal, non-venomous and snail eaters. Both occurs in Mata Atlânica forests and impacted environments, however S. mikanii is more frequently found in Cerrado. Studies about parasitology, biology, ecology and morphology of both species are scarce. The goals of the present study where to analize ecology of helminths, the diet and ecomorphology of the snakes S. neuwiedi and S. mikanii from Minas Gerais, Brazil, register the helminths presentes in their preys, verify the effects of seazonality and gender, reproductive state, size and body mass of these snakes, so as the size of parasitized organs, on their helminths, and verify the ecological, phylogenetic and sexual effects at morphometric variation. The 39 analyzed individuals of S. neuwiedi and the 49 specimens of S. mikanii from the Herpetological Collection of the UFJF – Reptiles have had measured their length and width of head, length between eyes, rostrum-cloacal length, tail and total, and body mass. Subsequently where necropsied, sexed and analyzed the maturity, the body cavity, organs and digestive contents searched in search of helminths and preys. Parasitized organs were measured. It were colected 30 specimens of snails from Veronicellidae family, euthanasia was realized and the animal fixed, conserved and, added to the specimens found in snakes stomach, these were dissected and examined to identification and pursuit of helminths. The helminths found in the snakes and in molluscs were washed, fixed, conserved, quantified, identified and photographed. It was realized morphometry of trematodes and nematodes. The metazoans parasites communities of the snakes where composed only by endoparasites from helminths group and presents low richness and diversity, distribution patttern assembled, isolacionist profile, specificity to infection sites and predominance of only one parasite taxon by infracommunity. The prevalences were average. Both species of snakes were parasitized by two taxa of trematodes, while S. neuwiedi presented also three taxa of nematodes and S. mikanii, four (two in common amongst these snakes). The prevailing parasites taxa were Rhabdias sp. and Strongyluris sp. in both species of snakes, and Mesocoelium sibynomorphi in S. neuwiedi, do not presenting the size of this last helminth in this snake relation of intensity-dependency. The snakes presented similar diet: molluscs from species of Veronicellidae family, being registered the prey-species Sarasinula linguaeformis in S. neuwiedi and Latipes erinaceus and Sarasinula sp. in S. mikanii. Larval forms from the nematode Strongyluris sp. was the common helmint between these snakes and their prey. The seazonality variation, gender, reproductive state, size and body mass of S. neuwiedi and S. mikanii, and the size of parasitized organs, did not influenced the helminth communities of these snakes. These species did not present sexual dimorphism. The habitat did not influence the morphology these snakes, while the phylogeny influenced the morphology of adult females, what did not occurred in young females and male.