O auxílio terapêutico exercido pelas própolis de abelhas Apis mellifera é conhecido desde tempos imemoriais e suas propriedades têm sido amplamente estudadas. Contudo, as própolis produzidas por abelhas sem ferrão foram ainda pouco investigadas. Desta forma, este trabalho se propôs a avaliar algumas características químicas e atividades biológicas de própolis de abelhas sem ferrão da espécie Frieseomelitta varia obtidas em épocas e locais diferentes. Para tanto, obtiveram-se extratos etanólicos de própolis coletadas na região de Alfenas-MG (Fv1, Fv2 e FvA), os quais foram avaliados quanto ao perfil de absorção da luz UV visível, composição por flavonoides (com base em quercetina), compostos fenólicos (com base em ácido gálico) e perfil químico por cromatografia em camada delgada (CCD). Adicionalmente, Fv1, Fv2 e FvA foram submetidos a testes in vitro que analisaram suas atividades antimicrobiana, antioxidante e antiproliferativa. O espectro de absorção da luz UV visível apresentou picos característicos de fenólicos e flavonoides e os testes quantitativos mostraram baixos valores destes compostos fitoquímicos. A CCD, por sua vez, revelou a presença de terpenoides em todas as amostras. Quanto às propriedades biológicas, verificou-se baixa atividade antioxidante. As atividades antimicrobiana e antiproliferativa, no entanto, foram bastante relevantes. A amostra Fv1 mostrou capacidade para inibir totalmente o crescimento de células de câncer de ovário multirresistente a drogas em uma concentração de 7,6µg/mL, valor inferior ao necessário do padrão Doxorrubicina para inibir esta mesma linhagem celular. Nos testes de atividade antimicrobiana, Fv1 também se destacou por sua ação bactericida sobre Streptococcus agalactiae em concentração contida entre 15,62-31,25µg/mL, valor também inferior ao obtido com o padrão Cloranfenicol. Os resultados encontrados nesta pesquisa evidenciam o grande potencial biológico das própolis de Frieseomelitta varia, que pode se modificar conforme local e época de coleta. / The therapeutic aid exercised by propolis of honeybee Apis mellifera is known since immemorial times and their properties have been widely studied. However, the stingless bee propolis has been little investigated. In this way, this work proposed to assess some chemical characteristics and biological activities of propolis produced by Frieseomelitta varia stingless bees. The samples (Fv1, Fv2 and FvA) were obtained in different times and places in the city of Alfenas-MG. Extraction were made with them in ethanol and the resultant extracts were submitted to some evaluations: UV-visible absorption profile, composition by flavonoids (quercetin), phenolic compounds (based on Gallic acid) and chemical profile by thin-layer chromatography (TLC). Additionally, Fv1 Fv2 and FvA were examined by in vitro biological assays, such as antimicrobial, antioxidant and antiproliferative activities. The absorption spectrum of UV-visible light showed characteristic peaks of phenolic compounds and flavonoids, on the other hand, the quantitative tests showed low values of these phytochemicals. The TLC result revealed the presence of terpenoides in all the samples. With regard to biological properties, low antioxidant activity was found. However, the antimicrobial and antiproliferative results, were quite relevant. The sample Fv1 showed ability to inhibit fully the growth of ovarian cancer cells resistant to drugs at a concentration of 7.6µg/mL, below the required value of the standard Doxorubicin to inhibit this same cell line. In the antimicrobial assays, Fv1 also stood out for its bactericidal action on Streptococcus agalactiae in concentration contained between 15.62 -31.25µg/mL, also lower than the value obtained with the standard Chloramphenicol. The results found in this research show the great biological properties of Frieseomelitta varia propolis, which can change according to location and time of collection. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A espécie Leonotis nepetifolia é amplamente distribuída no Brasil e no mundo, é uma erva daninha utilizada com diversas finalidades terapêuticas pela população, porém há poucos estudos a cerca de sua composição química e atividade biológica. O presente estudo tem a finalidade de caracterizar quimicamente os extratos hidroetanólicos de caule, folhas, glomérulo e raízes de L. nepetifolia e avaliar a atividade biológica destes. A caracterização química foi realizada em cromatógrafo líquido de alta eficiência acoplado ao detector de arranjo de diôdos. Quanto o perfil químico dos extratos, foi quantificado o teor de fenóis e flavonoides totais. A atividade antirradicalar foi avaliada pelos testes de DPPH˙ e poder redutor dos extratos. A atividade antimicrobiana foi avaliada pelo teste de microdiluição em placa para fungos e bactérias. Foi realizada a triagem dos extratos quanto a atividade antileishmania, atividade antiamastigota e antipromastigota em Leishmania amazonensis. A atividade citotóxica dos extratos foi avaliada em macrófagos peritoneais murinos. Os cromatogramas e os espectros em UV/vis revelaram a presença de polifenóis e flavonoides em maior abundancia nos extratos das folhas e glomérulo, comparados com as raízes e caule. Os extratos de folhas e glomérulos apresentaram maior atividade antirradicalar, poder redutor e concentrações quantificadas de compostos polifenólicos e flavonoides. Todos os extratos inibiriam o crescimento de 50% da população bacteriana sendo que extrato do caule apresentou maior atividade frente a bactérias Gram-positivas, principalmente para Bacillus cereus. Todos os extratos foram capazes de inibir o crescimento de 50% e 100% da população fúngica, os extratos das folhas e raízes demonstraram maior atividade contra formas promastigotas e amastigotas de L. amazonensis sendo que o extrato das raízes apresentou maior potencial citotóxico em macrófagos murinos. Os extratos brutos de L. nepetifolia apresentaram atividades significantes que se relacionam com os metabólitos secundários presentes na espécie principalmente os polifenóis e flavonoides caracterizados no presente estudo. / The specie Leonotis nepetifolia is widely distributed in Brazil and worldwide, is a weed treatments used for various purposes by the population, but there are few studies about its chemical composition and biological activity. The purpose of this study is to characterize chemically hydroethanolic extracts of stem, leaves, inflorescences glomerulus and roots of Leonotis nepetifolia and evaluate the biological activity of these. The chemical characterization was performed in HPLC - UV on the chemical profile of the extracts was quantified the level of total phenols and flavonoids. The antioxidant activity was assessed for DPPH˙ and reduce power of the extracts. The microbial activity test was used for broth microdilution methods for bacteria and fungi. We performed screening of the extracts and the activity against promastigotes e amastigotes forms of Leishmania amazonensis. The cytotoxic activity of the extracts was evaluated in murine peritoneal. The chromatograms and UV spectra revealed the presence of polyphenols and flavonoids in greater abundance in extracts of leaves and inflorescences glomerulus, compared with the roots and stem the quantitative analyses showed the same result. The extracts of the stem showed higher activity against Gram positive bacteria, mainly Bacillus cereus, all extracts inhibited the growth of 50% of the bacterial population , all extracts were able to inhibit the growth of 50% and 100% of the extract showed no fungal growth and extracts of the leaves and roots showed greater activity against promastigotes and amastigotes forms of L. amazonensis and the roots extracts showed greater cytotoxic potential in murine macrophages. The crude extracts from Leonotis nepetifolia showed significant activities that relate to the secondary metabolites present in the species mainly polyphenols and flavonoids, performed int this study. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Euphorbia cotinifolia apresenta muitas atividades biológicas sendo utilizada na medicina popular para cauterizar feridas e como um purgante em pequenas doses. O presente estudo teve como objetivo determinar o teor de compostos fenólicos e flavonoides, a atividade antimicrobiana, antioxidante e a toxicidade dos extratos hidroetanólicos de raiz, caule, folha e fruto de E. cotinifolia. Foi realizada triagem fitoquímica, dosagem de compostos fenólicos pelo método de Folin-Ciocalteau, flavonoides pelo método de cloreto de alumínio e análise química por CLAE. A atividade antimicrobiana foi determinada pela técnica de difusão em ágar e a determinação da concentração inibitória mínima (CIM) pela técnica de diluição em caldo utilizando cepas padrões. Foi determinada também a concentração microbicida mínima (CMM). A atividade antioxidante foi determinada pelo método do sequestro do radical livre DPPH. A citotoxicidade foi avaliada pelo método MTT em cultura celular BHK. Todos os extratos hidroetanólicos de Euphorbia cotinifolia apresentaram compostos fenólicos, bem como a presença de metabólitos secundários como taninos e flavonoides, atividade antimicrobiana e antioxidante. A análise em CLAE sugeriu a presença de ácido cafeico para os extratos de folha fresca e seca e demonstrou uma maior concentração de compostos fenólicos na folha seca. Nenhum dos extratos apresentou atividade antimicobacteriana e citotoxicidade in vitro. / Euphorbia cotinifolia has many biological activities being used in folk medicine to cauterize wounds and as a purgative in small doses. The present study aimed to determine the content of phenolic compounds and flavonoids, antimicrobial and antioxidant activity and toxicity of hydroethanolic extracts of root, stem, leaf and fruit of E. cotinifolia. Was performed chemical screening, measurement of phenolic compounds by Folin-Ciocalteau reagent method, flavonoids by aluminum chloride method, chemical analysis by HPLC. The antimicrobial activity was determined by agar diffusion and minimum inhibitory concentration (MIC) by broth dilution technique using standard strains. The minimum microbicidal concentration (CMM) was also determined. The antioxidant activity was determined by the kidnapping of DPPH free radical method. Cytotoxicity was assessed by the MTT method in BHK cell culture. All hydroethanolic extract of Euphorbia cotinifolia presented phenolic compounds, as well as presence of secondary metabolites such as tannins and flavonoids, antimicrobial and antioxidant activity. The HPLC analysis suggested the presence of caffeic acid for extracts of dry leaf and fresh. Dry leaf showed a higher concentration of phenolic compounds. None of the extracts showed antimicrobial activity and cytotoxicity in vitro. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

As espécies da família Annonaceae são amplamente utilizadas na medicina popular para diversos fins terapêuticos. Pesquisas têm demonstrado que o marolo (Annona crassiflora Mart.) contém muitas classes de fitoquímicos biologicamente ativos. Neste contexto, este estudo teve por objetivo realizar as análises fitoquímicas e avaliar as atividades antimicrobianas, leishmanicidas, antioxidantes e antidiabéticas do extrato hidroetanólico 70% (v/v), das frações hidroetanólicas e do extrato acetato de etila. A obtenção do extrato hidroetanólico 70% (v/v) ocorreu por percolação, às frações hidroetanólicas por cromatografia em coluna (Sephadex LH-20) e o extrato acetato de etila por maceração. As folhas de Annona crassiflora Mart foram o material de escolha para esse estudo. Inicialmente, realizou-se uma triagem fitoquímica preliminar, por meio da Cromatografia em Camada Delgada, tanto dos extratos como das frações, que permitiram a detecção de compostos como: alcaloides, flavonoides, taninos, terpenos, ácidos fenólicos e catequinas. Posteriormente, os extratos e as frações foram analisados em espectrômetro de massas, no modo full scan negativo e positivo, podendo sugerir alguns constituintes químicos, baseando-se na massa molecular e nos mecanismos de fragmentação propostos pela literatura, como os flavonoides, ácidos fenólicos, procianidinas e alcaloides. As análises químicas quantitativas demonstraram que os teores de fenóis no extrato seco hidroetanólico 70% (v/v) (262,02 ± 0,20 mg EAG/g) foram superiores à concentração obtida nas frações hidroetanólicas. Os teores de flavonoides também foram superiores no extrato hidroetanólico 70% (v/v) (27,56 ± 0,40 mg EQ/g). Nas avaliações da atividade antioxidante observou-se que o pontecial das frações hidroetanólicas demonstraram resultados mais significativos em relação ao extrato hidroetanólico e acetato de etila, sendo que a fração hidroetanólica FHsdx2: 12-17 apresentou os melhores resultados. A atividade antioxidante in vivo foi realizada pelo método da peroxidação lipídica, no homogeneizado renal e hepático, através da determinação das substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico. A administração do extrato hidroetanólico 70% (v/v) reduziu a peroxidação lipídica no fígado e rins de animais tratados. A análise da atividade antimicrobiana revelou que o extrato hidroetanólico 70% (v/v) teve menores valores de concentração inibitória mínima (MIC) obtidos para Candida albicans (7,81 µg.mL-1), Candida tropicali (15,62 µg.mL-1), Candida glabrata (3,90 µg.mL-1) e Candida parapsilosis (7,81 µg.mL-1). A Candida krusei foi mais susceptível a fração hidroetanólica FHsdx2: 70-104, apresentando MIC de 3,90 µg.mL-1. Para avaliar o possível efeito da espécie Annona crassiflora em ratos diabéticos, determinou-se os níveis glicêmicos, as concentrações de frutosamina, uréia, creatinina, ASL e ALT em amostras de soro de animais tratados com 300 mg/kg do extrato hidroetanólico 70% (v/v). Essas análises bioquímicas foram realizadas em aparelho automatizado Humanstar 80. Com base nos resultados obtidos, pode-se avaliar que o a administração do extrato, conforme o protocolo adotado, não alterou os parâmetros bioquímicos analisados no soro de ratos normais e diabéticos. A atividade leishmanicida foi realizada utilizando placas de 96 poços. Na atividade leishmanicida, o extrato acetato de etila apresentou-se ativo contra as formas promastigotas e amastigotas de Leishmania amazonensis com IC50 respectivamente de 4,35 µg.mL-1 e 42,50 µg.mL-1. Utilizou-se o método colorimétrico MTT para avaliação da citotoxicidade do extrato acetato de etila frente aos macrófagos peritoniais de ratos Wistar. Os resultados mostraram redução de 86 % dos macrófagos. Por fim, os resultados obtidos podem fornecer informações relevantes, não somente para os estudos relacionados à prevenção e/ou tratamento de patologias associadas ao estresse oxidativo, leshmanioses e antimicrobianas, como também para assegurar o consumo racional de plantas medicinais. / The species of Annonaceae family are broadly used in popular medicine for several therapeutic purposes. In this context, this study aimed to perform chemical analysis and evaluate the antimicrobial, leishmanicidal, antioxidant and anti-diabetic activiteis of hydroethanolic extract 70% (v/v), of hydroethanolic fractions and extract ethyl acetate. A obtaining of extract hydroethanolic 70% (v/v) by percolation, of hydroethanolic fractions obtained by chromatography (Sephadex LH-20) and of ethyl acetate extract by maceration. The leaves of Annona crassiflora Mart. were material of choice for this study. Initially, the phytochemical’s screening preliminary was performed by Thin Layer Chromatography, thus the extracts as fractions, it allowing the detection of compounds such as: alkaloids, flavonoids, tannins, terpenes, phenolic acids and catechins. Subsequently, the extracts and fractions was analyzed in mass spectrometer, in full scan mode negative and positive, some chemical constituents can been suggest, based in molecular mass and fragmentation mechanisms proposed in the literature such as flavonoids, phenolic acids, procyanidins and alkaloids. Quantitative chemical analyses have showed that phenol contents in the dry extract hydroethanolic 70% (v/v) (262.02 ± 0.20 mg GAE/g) was higher than the concentration obtained in hydroethanolic fractions. The flavonoid levels were also higher in hydroethanolic extract 70% (v/v) (27.56 ± 0.40 mg EQ/g). it was observed in the evaluations of antioxidant activity that the pontecial the hydroethanolic fractions and ethyl acetate showed results more significant in regarding the hydroethanolic extract, where in the fractions hydroethanolic FHsdx2: 12-17 showed the best results. The antioxidant activity in vivo was realized by the method of lipid peroxidation, in kidney and liver homogenized, through determination of reactive substances to thiobarbituric acid. The administration of the hydroethanolic extract 70% (v/v) reduced the lipid peroxidation in liver and kidneys of animals treated. The analysis of antimicrobial activity revealed that the hydroethanolic extract 70% (v/v) had lower values of the minimum inhibitory concentration (MIC) obtained for Candida albicans (7.81 µg.mL-1), Candida tropicalis (15.62 µg.mL-1), Candida glabrata (3.90 µg.mL-1) and Candida parapsilosis (7.81 µg.mL-1). Candida krusei was more susceptible to hydroethanolic fraction FHsdx2: 70-104, with MIC of 3.90 µg.mL-1. To evaluate the possible effect of Annona crassiflora Mart. species, in diabetic rats, blood glucose levels, concentrations of fructosamine, urea, creatinine, ASL and ALT was determined in serum samples from animals treated with 300mg/kg of hydroethanolic extract 70 % (v/v) of the sheets. These biochemical analyzes was performed by automated apparatus Humanstar 80. Based on the results obtained in this study, the administration of the extract could be evaluated, as the protocol adopted, don’t change the biochemical parameters analyzed in the serum of normal and diabetic rats. The antileishmanial activity was performed using 96-well plates. In leishmanicidal activity, the ethyl acetate extract up showed active against Leishmania amazonensis promastigotes and amastigotes forms with IC50 respectively 4.35 µg.mL-1 and 42.50 µg.mL-1. We used the method colorimetric MTT for evaluating the cytotoxicity of the ethyl acetate extract front of peritoneal macrophages from Wistar rats. The results showed a reduction of 86% of macrophages. Finally, the results can provide relevant information, not only for studies related to the prevention and/or treatment of diseases associated with oxidative stress, leishmaniasis and diseases caused by yeast, as well to human ensure and rational use of medicinal plants. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A Garcinia brasiliensis, conhecida como Bacupari, é uma espécie que se destaca por apresentar metabólitos secundários com várias atividades biológicas. Porém, na natureza a produção destes compostos é muito pequena. Para aumentar a produção de metabólitos secundários, de interesse econômico ou medicinal, vem sendo estudadas estratégias biotecnológicas como produção destes compostos in vitro. A adição de elicitores, tais qual o ácido salicílico (AS) e o ácido jasmônico (AJ), no meio de cultura em cultivo de células pode ser uma alternativa para maximizar a produção destes compostos. Neste contexto, o trabalho teve como objetivo avaliar o efeito elicitor do AS e do AJ na produção de compostos fenólicos e flavonoides totais em calos de embriões zigóticos de G. brasiliensis. Para calogênese foram testadas diferentes combinações da 2-iP (0; 9; 18; 36; 72 µM e 2,4-D (0; 2,05; 10,26; 18,47; 28,73 µM) em meio de cultura Wood Plant Medium (WPM). Cortes de calos com 20 dias foram corados com azul de toluidina e lugol para avaliações histológicas. As áreas cobertas por calos nos explantes foram medidas por meio do programa ImageJ®. Para indução da produção de compostos fenólicos e flavonoides totais os calos foram subcultivados em meio WPM contendo AS (0,1; 1; 10; 100 µM) na ausência de 2-iP e 2,4-D e AS (0,1; 1; 10; 100 µM) com presença de 72 µM de 2-iP e 28,73 µM de 2,4-D e AJ nas concentrações 0,1; 1; 10; 100 µM. Os calos ficaram incubados por 150 dias, a 25º C e ausência de fotoperíodo. A cada 30 dias, calos foram submetidos à análise de conteúdo de fenólicos e flavonoides totais. Para determinação da cinética dos calos, estes foram pesados a cada 30 dias (para tratamentos com AS) e 15 dias (para tratamentos com AJ), traçando-se a curva de crescimento. Os calos com 30 e 90 dias de incubação foram analisados quanto ao teor de fukugetina e 7-epiclusianona. Ao fazer as avaliações histológicas pode-se notar que as células dos calos expostos as concentrações que proporcionaram maior calogênese (72 µM de 2-iP com 28,73 µM de 2,4-D) se mostraram de tamanhos bem variados e com espaço intercelular, caracterizando um tecido desorganizado. Quanto a área dos calos, constatou-se que o tratamento que melhor proporcionou calogênese foi 72 µM de 2-iP com 28,73 µM de 2,4-D. Na elicitação, altas concentrações de AS (10 e 100 µM) e maior tempo de exposição (120 e 150 dias) não implicaram maior acúmulo de compostos fenólicos e flavonoides totais. A concentração de 0,1 µM de AS foi eficiente na produção de fukugetina e 7-epiclusianona quando os calos ficam expostos 30 dias em meio de cultura. Porém, quando o AS foi adicionado ao meio juntamente com 2-iP e 2,4-D, a concentração que mais elicitou à produçao de fukugetina e 7-epiclusianona foi 10 µM de AS com 90 dias de exposição. A concentração de 0,1 µM de AJ promoveu o incremento da massa dos calos de G. brasiliensis e, com aumento do tempo de exposição, foi favorável a produção de fenóis e de flavonoides. As maiores concentrações testadas de AJ (10 e 100 µM) foram as mais eficientes na estimulação da produção da fukugetina e 7-epiclusianona quando os calos permaneceram 90 dias expostos ao elicitor. Para a produção de fukugetina, a condição mais favorável foi a exposição por 30 dias em meio de cultura WPM contendo 10 µM de AJ. Enfim, pode-se concluir que para obter melhor calogênese em embriões de Bacupari é necessário altas concentrações de 2-iP e 2,4-D. O AS e o AJ demonstraram serem elicitores abióticos eficiente na otimização de metabólitos secundários em calos de G. brasiliensis. Levando em consideração a curva de crescimento dos calos de Bacupari, pode-se concluir que o melhor período para a extração dos metabólitos secundários dos calos de G. brasiliensis foi o início da fase estacionária. / Garcinia brasiliensis, known as Bacupari, is a species that stands out for presenting secondary metabolites with different biological activities. However, the nature of the production thereof is very small. To increase production of secondary metabolites, economic and medical interest, biotechnological strategies have been studied as production of these compounds in vitro. The addition of elicitors, such that salicylic acid (SA) and jasmonic acid (AJ), in the culture medium for cell culture may be an alternative to maximize the production of these compounds. In this context, the work was to evaluate the effect of elicitor AS and AJ in the production of phenolics and total flavonoids in callus of zygotic embryos of G. brasiliensis. For callus induction were tested different combinations of 2-iP (0; 9; 18; 36; 72 µM) and 2,4-D (0; 2.05; 10.26; 18.47; 28.73 µM) in the medium of culture Wood Plant Medium (WPM). Callus with 20 days were stained with toluidine blue and lugol for histological evaluation. The areas covered by callus on explants were measured through ImageJ® program. For induction of phenolic compounds and total flavonoid callus were subcultured on WPM containing AS (0.1, 1, 10, 100 µM) in the absence of 2-iP and 2,4-D and AS (0.1, 1, 10, 100 µM) with presence of 72 uM 2-iP and 28.73 mM of 2,4-D and AJ in concentrations 0.1, 1, 10;. 100 uM. The callus were incubated for 150 days at 25 ° C and absence of photoperiod. Every 30 days, callus were subjected to phenolic content analysis and total flavonoid. To determine the kinetics of calluses, these were weighed every 30 days (for treatments with AS) and 15 days (for treatments AJ) to the growth curve. Callus with 30 and 90 days of incubation were analyzed for content of fukugetin and 7-epiclusianone. By making the histological evaluations can be noted that the cells of calluses exposed to the conditions that gave greater callus formation (72 µM of 2-iP with 28.73 µM of 2,4-D) have proved very varied sizes and intercellular space, featuring a disorganized tissue. The area of ​​callus, it was found that the treatment gave better callus induction was 72 uM 2-iP with 28.73 uM 2,4-D. In elicitation, high concentrations of AS (10 and 100 µM) and longer exposure time (120 and 150 days) did not entail greater accumulation of phenolic compounds and total flavonoids. The concentration of 0.1 µM AS was efficient in producing fukugetina and 7-epiclusianone in callus when they are exposed 30 days in culture medium. But when the AS was added to the medium with 2-iP and 2,4-D, the concentration that elicited the production of more fukugetina and 7-epiclusianone was 10 uM AS with 90 days of exposure. The concentration of 0.1 µM AJ promoted the increase of the mass of calluses and G. brasiliensis, increasing the exposure time was favorable production of phenols and flavonoids. The highest concentrations tested AJ (10 and 100 µM) were more efficient in stimulating the production of fukugetina and 7-epiclusianone when the calli 90 days remained exposed to the elicitor. For the production of fukugetin, the most favorable condition for the exposure was 30 days in WPM containing 10 µM of AJ. Anyway, it can conclude that for better callus induction in Bacupari embryos is necessary high concentrations of 2-iP and 2,4-D. The AS and AJ shown to be effective abiotic elicitors on the optimization of secondary metabolites in callus of G. brasiliensis. Taking into account the growth curve of bacupari callus, it can be concluded that the best period for the extraction of secondary metabolites of G. brasiliensis callus was the early stationary phase.

A incidência da obesidade tomou proporções epidêmicas nos últimos anos, atingindo bilhões de indivíduos mundialmente. A DHGNA é uma manifestação hepática das alterações metabólicas causadas pela obesidade e os casos desta doença vêm crescendo cada vez mais. Alternativas capazes de reduzir estas alterações são fundamentais para minimizar o impacto na qualidade de vida da população e na economia do país. Diversos estudos têm mostrado que os compostos bioativos de alimentos possuem efeitos benéficos à saúde. O camu-camu (Myrciaria dubia (H. B. K). Mc Vaugh) é um fruto nativo da região amazônica com potencial agroeconômico ainda inexplorado, que contém um grande número de compostos fitoquímicos que podem atuar sobre o metabolismo corporal. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito dos compostos fenólicos do camu-camu no desenvolvimento da DHGNA em camundongos C57BL/6 que receberam dieta rica em lipídios e sacarose (HFS). O extrato rico em compostos fenólicos da polpa comercial deste fruto foi obtido através de extração em fase sólida e caracterizado por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE/DAD). Os extratos obtidos foram testados em doses de 7 mg e de 14 mg equivalentes de ácido gálico/Kg de peso corporal. Foram investigados os efeitos destes compostos sobre as homeostases glicídica e lipídica através de análises séricas, testes de tolerância à insulina e à glicose e conteúdo de glicogênio e triacilglicerol intra-hepático. O extrato do camu-camu apresentou flavonóis, ácido elágico e elagitaninos em sua composição. A suplementação com extrato fenólico de camu-camu diminuiu a intolerância à glicose, independente da dose administrada, e melhorou a sensibilidade à insulina e regulou o conteúdo de glicogênio intra-hepático na maior dose. Não foi observado efeito sobre os lipídios plasmáticos. Entretanto, nota-se que houve uma melhora na função hepática em decorrência da redução da atividade da alanina aminotransferase (ALT), indicadora de dano celular, independente da dose. Além disso, a suplementação com extratos fenólicos do camu-camu na maior dose reduziu o conteúdo de triacilglicerol intra-hepático (p = 0,0001) e de biomarcadores inflamatórios, como Proteína - C Reativa (PCR) (p = 0,0359) e prostaglandina E2 (PGE2) (p = 0,004). Estes efeitos foram associados, principalmente, à menor ingestão alimentar. Portanto, neste estudo, os compostos fenólicos do camu-camu foram eficientes em prevenir a progressão da DHGNA em camundongos alimentados com dieta HFS. / Obesity has reached epidemic proportions in recent years, affecting billions of people worldwide. Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) is a hepatic disorder induced by the metabolic changes caused by obesity and its incidence has been growing increasingly. Alternatives designed to reduce such changes are crucial to minimize their impact on the population´s quality of life and countries economy. Several studies have shown that food bioactive compounds have beneficial effects on health. Camu-camu (Myrciaria dubia (H. B. K.) Mc Vaugh) is a native fruit from Amazonan, with unexplored agroeconomic potential, which contains a large number of phytochemical compounds that can act on body metabolism. Therefore, this study was designed to assess the effect of the phenolic compounds of camu-camu in the development of NAFLD in C57BL/6 mice fed with a lipid and saccharose-rich diet (HFS). The phenolic compound-rich extract was obtained from the commercial pulp of this fruit using solid-phase extraction and high-performance liquid chromatography with diode array detector (HPLC/DAD). The resulting extracts were tested at 7 mg and 14 mg gallic acid equivalents/kg body weight. The effects of these compounds on glucose and lipid homeostasis were investigated by serum analyses, insulin and glucose tolerance tests and intrahepatic content of glycogen and triacylglycerol. Camu-camu extract presented flavonols, ellagic acid and ellagitannins in its composition. Supplementation with camu-camu phenolic extract decreased glucose intolerance, regardless the dose, improved insulin sensitivity and normalized the intra-hepatic glycogen content at the highest dose. No effects on plasma lipid were found. However, an improvement in liver function due to the decrease in alanine aminotransferase (ALT) was observed, suggestive of cell damage, regardless the dose. Moreover, the supplementation with phenolic extracts of camu-camu at the highest dose decreased the intrahepatic content of triacylglycerol (p = 0.0001) and inflammatory biomarkers, such as C-reactive protein (CRP) (p = 0.0359) and prostaglandin E2 (PGE2) (p = 0.004). Such effects were primarily associated with lower food intake. Therefore, in this study, the phenolic compounds of camu-camu have shown to be effective in preventing the progression of NAFLD in mice fed with HFS (high-fat/sucrose) diet.

Os grãos de quinoa possuem excelente balanço nutricional além das propriedades funcionais, comparativamente superior à dos cereais. A quinoa é cultivada em diversos países e, devido às suas características, têm aumentado o interesse de pesquisadores e consumidores. A quinoa contém pericarpo branco, no entanto, existem grãos com pericarpo vermelho e preto, e todos os tipos são utilizados como alimento em diferentes preparações. Com o objetivo de avaliar as características de grãos de quinoa, amostras de cor branca, preta e vermelha foram analisadas quanto às propriedades físico-químicas e funcionais dos grãos e do amido extraído das diferentes amostras. O amido, extraído pelo método alcalino, foi submetido as análises de teor de amilose, difração de raios X, microscopia eletrônica de varredura (MEV), propriedades térmicas (por DSC-Differential Scanning Calorimeter) e propriedades de pasta (por RVA- Rapid Visco Analyser), além de suscetibilidade à hidrólise enzimática e cor. A composição físico-química dos grãos de quinoa apresentou como principais diferenças o teor de cinzas, fibras e amido. O teor de amilose variou de 13,6% a 21,3%, entre as amostras de amido; os padrões de cristalinidade dos amidos foram de tipo A, típico dos cereais; e, a cristalinidade relativa variou de 25,4 a 29,6 %; as micrografias obtidas por MEV apresentaram as formas poliédricas dos grânulos de amido. Os viscoamilogramas, obtidos para os diferentes amidos, mostraram um comportamento semelhante entre as amostras brancas e pretas. As propriedades térmicas de retrogradação das amostras de quinoa vermelha apresentaram uma menor taxa de retrogradação que variou de 7,5 a 8,5 %; as cultivares brancas apresentaram as maiores taxas de retrogradação de 19,0 a 25,4 %. A hidrólise enzimática dos grânulos de amido, analisada em equivalentes de maltose, variou de 7,2 a 8,7 mg/mL, com uma velocidade maior para a cultivar BSyB, em 60 minutos. O amido extraído das amostras brancas de quinoa apresentou valor de luminosidade de 99,0 e os amidos extraídos das amostras de cor vermelha e preta apresentaram em torno de 97,0. As análises realizadas neste estudo ampliam o conhecimento das características da quinoa de cor branca, vermelha e preta, além de mostrar que a cultivar brasileira (BSyB) apresenta características diferenciadas em vários parâmetros. Devido as suas propriedades todas as amostras analisadas possuem potencial para futuras aplicações tecnológicas. / The quinoa grain have excellent nutritional balance beyond functional properties, comparatively higher than that of cereals. Quinoa is cultivated in many countries and due to its characteristics; this has increased the interest of researchers and consumers. Quinoa contains white pericarp, however, there are red and black grain pericarp and all of kinds are used as food in different preparations. In order to evaluate the quinoa grain characteristics, samples of white, black and red color were analyzed for physical-chemical and functional properties of the grains and starch extracted from different samples, aiming a future technology use. Starch from quinoa grains was extracted by the alkaline method and analyzed for amylose content, X-ray diffraction, scanning electron microscopy (SEM), thermal properties (by Differential Scanning Calorimeter, DSC) and properties folder (by Rapid Visco Analyser, RVA), susceptibility to enzymatic hydrolysis and color. The physicochemical composition of quinoa grains presents major differences as the ash content, fiber and starch. The amylose content ranged from 13.6% to 21.3% among starch samples; patterns crystallinity of starches of type A were typical cereal; and the relative crystallinity ranged from 25.4 to 29.6%; SEM micrographs obtained showed the polyhedral forms of starch granules. The viscoamilogramas obtained for the different starches, show a similar behavior between the white and black samples. The thermal properties of retrogradation of red quinoa samples showed less retrogradation rate ranged from 7.5 to 8.5%; white cultivars showed the highest rates of downgrading from 19.0 to 25.4%. The enzymatic hydrolysis of the starch granules analyzed to maltose equivalents, ranged from 7.2 to 8.7 mg / ml, at a higher speed for cultivating BsyB in 60 minutes. The starch extracted from samples of white quinoa showed 99.0 brightness value and starches extracted from samples of red and black color had around 97.0. The analyzes performed in this study extend the knowledge of quinoa characteristics of white, red and black, in addition to showing that the Brazilian cultivar (BsyB) has different characteristics on various parameters. Because of their properties, all samples have the potential for future technological applications.

Os chás destacam-se como a segunda bebida mais consumida no mundo. Além disso, seu consumo tem se modernizado, adequando-se aos anseios dos consumidores. São uma boa fonte de compostos com atividade antioxidante, os quais podem trazer benefícios à saúde humana pelo retardamento do processo de envelhecimento, assim como pela prevenção de doenças crônicas, tais como o câncer e doenças cardiovasculares. Infusões de ervas processadas e frescas foram estudadas quanto a teor de compostos fenólicos totais, perfil de flavonóides e atividade antioxidante. Os teores de compostos fenólicos totais, determinados pelo método de Folin–Ciocalteu, variaram de zero a 46,46 mg/g. Os flavonóides miricetina, quercetina e campferol foram identificados e quantificados por cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) nos chás preto, verde e de camomila. A atividade antioxidante foi avaliada pelo método do seqüestro do radical 2,2'-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH) e pelo sistema modelo β-caroteno/ácido linoléico (BCAL), usando hidroxitolueno butilado (BHT) e α- tocoferol como padrões. As maiores atividades encontradas pelo sistema modelo BCAL foram para as infusões de chá preto, mate, capim-limão, camomila e funcho, enquanto as infusões de ervas frescas apresentaram as menores atividades. Entretanto, quando a atividade antioxidante foi avaliada pelo método do DPPH, as infusões de ervas frescas de menta e funcho foram as que apresentaram as maiores atividades. Os chás processados que apresentaram os menores valores de IC50 foram verde e preto (147,63 µg/mL e 288,60 µg/mL, respectivamente). Os resultados obtidos demonstraram que as infusões analisadas são boas fontes de compostos com atividade antioxidante. / Teas are the second most consumed beverage in the world. Besides this, their consumption has been modernized to suit the consumers? desires. They are a good source of compounds presenting antioxidant activity, which can bring benefits to human health by retarding the process of aging, as well as by preventing chronic diseases, such as cancer and cardiovascular diseases. Processed teas and herbal infusions were studied for their total polyphenol content, flavonoid profile, and antioxidant activity. Total phenolics, determined by Folin?Ciocalteu procedure, ranged from zero to 46.46 mg/g. Flavonoids myricetin, quercetin, and kaempferol were identified and quantified by High Efficiency Liquid Chromatography (HPLC) in black, green, and chamomile tea. Antioxidant activity was evaluated using 2,2 Diphenyl-1-picryl-hydrazyl method (DPPH) and β-carotene bleaching test (BCB), with butylated hydroxytoluene (BHT) and α-tocopherol as reference substances. The highest activities using BCB were found for infusions of black tea, maté, lemongrass, chamomile, and fennel, whereas fresh herbal infusions presented the lowest activities. However, when the antioxidant activity was evaluated by DPPH, fresh herbal infusions of mint and fennel presented the highest activities. Processed teas with the lowest IC50 values were green and black (147.63 µg/mL and 288.60g/mL and 288.60 µg/mL, respectively). The results obtained demonstrate that the infusions analyzed are good sources of compounds presenting antioxidant activity.

As plantas medicinais têm sido utilizadas como uma importante fonte de prevenção e tratamento de doenças para a população pobre dos países em desenvolvimento. A literatura apresenta resultados que demonstram a atividade de proteínas e flavonóides presentes nas folhas, sementes e cascas do caule de Bauhinia forficata Link com ação hipoglicemiante. Este trabalho tem como objetivo estabelecer um protocolo para a obtenção das células em cultura de B. forficata para posterior produção de compostos fenólicos e proteínas com atividade hipoglicemiante. Assim, inicialmente, foram padronizadas as condições para obtenção da cultura in vitro de B. forficata Link. Realizou-se a indução da calogênese (indução máxima 77%) utilizando-se folhas como explantes em meio MS suplementado com ácido 2,4-diclofenoxiacético 1 mg/L, cinetina 1 mg/L e 3% (m/v) de sacarose. A cultura de células em suspensão foi estabelecida a partir da transferência de inóculos de calos frescos (2g) para a 40 mL de meio MS. Após a padronização realizou-se elicitações, com MeJA e AS 1 mol/L, nos tempo de 0, 3, 6, 9 e 12 dias, monitoradas pelo teor de compostos fenólicos e proteínas totais no meio intra e extracelular. Avaliou-se também o efeito da suplementação com sacarose (20, 30 e 40 g/L) sobre o sistema celular. O MeJA causou um aumento de composto fenólicos no meio extracelular de 105% e de 126% no meio intracelular, em 6 dias. O AS, em 9 dias de indução, aumentou esse compostos em 106,5% e 132,6% no meio extra e intracelular, respectivamente. Em 6 dias obteve-se o melhor tempo de elicitação das proteínas extracelulares com MeJA (81%) e de 9 dias para AS (41%). A presença desses elicitores, em 6 e 9 dias, foram capazes de aumentar a atividade das enzimas fenilalanina amônia liase (FAL) e tirosina amônia liase (TAL) no meio intracelular. Os resultados obtidos demonstraram que AS e MeJA podem modular a liberação de compostos fenólicos e proteínas para o meio extracelular, sendo os tempos de 6 e 9 dias os mais eficientes. A suplementação do meio com sacarose contribui para esta liberação, sendo a melhor concentração de sacarose 30 g/L. Portanto, as condições estabelecidas foram eficientes para obtenção da suspensão celular de Bauhinia forficata Link e modulação de compostos fenólicos e proteínas neste sistema. / The medicinal plants have been used as a major source of prevention and treatment of diseases for the poor population in the developing countries. Hypoglycaemic bioactive compounds have been found in leaves, seeds and barks of Bauhinia forficata. The aim for this work was to establish a protocol to obtain the B. forficata cell culture and to product phenolic compounds and proteins with hypoglycaemic activities. The callogenesis induction (maximum response: 77%) was developed using leaves as explants on MS medium supplemented with 1mg/L 2,4-diclorophenoxiacetic acid (2,4-D) and 1mg/L kinetin plus 3% sucrose (w/v). The cell suspension culture was established by transferring an inoculum of fresh callus (2 g) to 40 mL liquid MS medium. The effects of 1 mol/L methyl jasmonate (MeJA) or salicylic acid (AS) in the cell culture, supplemented with sucrose (20, 30 and 40 g/L), was evaluated by monitoring the proteins and phenolic compounds in the extra and intra cellular medium after 0, 3, 6, 9 and 12 days. In the extracellular fractions, the best time for phenolic compounds induction in the presence of MeJA (105%) and AS (106.5%) was 6 and 9 days, respectively. In the intracellular fractions, the highest effect was observed 6 days after induction in the presence of MeJA (126%) or AS (132.6%). The best time for protein induction in the extracellular medium was 6 days in the presence of MeJA (81%) and 9 days in the presence of AS (41%). In addition, the activity of phenylalanine ammonia lyase (PAL) and tyrosine ammonia lyase (TAL) increased in the intracellular medium in the presence of MeJA and AS after 6 and 9 days, respectively. In conclusion, the conditions we used were efficient for obtention of cell suspension culture of B. forficata. MeJA and AS can be used as elicitors of phenolic compounds and protein in this cellular system.

Submitted by Eunice Novais (enovais@uepg.br) on 2018-02-20T17:13:34Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Zielinski, A. A. F..pdf: 1279368 bytes, checksum: 9aeb8abdda7a1295b105c032fb907f32 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-20T17:13:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Zielinski, A. A. F..pdf: 1279368 bytes, checksum: 9aeb8abdda7a1295b105c032fb907f32 (MD5) Previous issue date: 2013-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A indústria de processamento de suco de frutas teve um desenvolvimento espantoso ao longo dos últimos 100 anos e invariavelmente enzimas participaram deste fenômeno, podendo ser utilizadas na maceração, na extração e na clarificação. O objetivo deste trabalho foi verificar o impacto da aplicação de preparações enzimáticas (Ultrazym AFP L, Pectinex Ultra Clear, Pectinex SMASH XXL, Panzym YieldMASH) comerciais para auxiliar a etapa de maceração visando aumentar a produção no processamento de suco de maçã sobre as características físico e químicas dos produtos. O suco, obtido por maceração com adição de enzimas na polpa, foi extraído por força centrífuga das cultivares Fuji Suprema e Lis Gala.Esse processamento associado ao uso de técnicas estatísticas multivariadas (PCA e HCA) permitiu verificar a ação das preparações enzimáticas nos parâmetros de físico e químicos avaliados (rendimento, viscosidade, pH, açúcares, ácido D-galacturônico, acidez total, turbidez, cor, perfil de compostos fenólicos, compostos fenólicos totais e capacidade antioxidante). O uso das técnicas estatísticas multivariadas permitiu explorar e classificar de maneira a concluir a semelhança ou a diferença entre os produtos obtidos com ou sem as preparações enzimáticas. As frutas processadas em estádio de pré-maturação da cultivar Lis Gala não apresentaram mudanças nos parâmetros físicos e químicos analisados. O uso da preparação Pectinex® SMASH XXL não ocasionou mudanças na maioria dos sucos em relação aos controles (sem enzimas). As outras preparações testadas (Pectinex Ultra Clear, Ultrazym AFPL, Panzym YieldMASH) causaram alterações nesses parâmetros para todos os estádios de maturação da cultivar Fuji Suprema e para os estádios maduro e senescente da cultivar Lis Gala. O interesse nos compostos fenólicos está vinculado à sua capacidade antioxidante, a qual contribui para a proteção dos efeitos prejudiciais do estresse oxidativo na saúde humana. De acordo com o PCA e HCA, as quatro preparações enzimáticas utilizadas foram efetivas nos estádios verde e maduro da cultivar Lis Gala para aumentar a extração dos compostos fenólicos e a capacidade antioxidante (FRAP). Para a Fuji Suprema todas as enzimas foram efetivas no estádio de pré-maturação, enquanto para o estádio maduro apenas Pectinex Ultra Clear e Panzym YieldMASH foram capazes de aumentar a concentração de fenólicos e atividade antioxidante. No estádio senescente dos frutos não foi observada alteração com a aplicação das preparações enzimáticas, devido ao fato da presença das enzimas endógenas, que podem minimizar ou inibir a ação da preparação adicionada. Com os resultados encontrados destaca-se a importância de se conhecer o estádio de maturação e a cultivar selecionada no processamento de suco para a seleção adequada da preparação enzimática, visando atender a eficiência do processo e as características do produto final. / Industrial processing of fruit juices had an amazing development over the past 100 years and invariably enzymes participated in this phenomenon, they can be used in the maceration, extraction and clarification. The aim of this study was to verify the impact of the application of commercial enzymatic preparations (Ultrazym AFP L, Pectinex Ultra Clear, Pectinex SMASH XXL, Panzym YieldMASH) in the apple juice processing on the physical and chemical characteristics of the products. The juice obtained by enzymatic maceration of the pulp and extracted by centrifuge force associate to the use of multivariate statistical techniques (PCA and HCA) showed the action of the enzymatic preparations in the parameters evaluate (yield, viscosity, pH, sugars, D-galacturonic acid, total acidity, color, individual phenolic compounds, total phenolic compounds and antioxidant capacity). The use of multivariate statistical techniques allowed exploring and classifying of way to conclude that the juices obtained with or without the enzymatic preparations showed similarity or difference between them. The fruits processed in unripe stage of Lis Gala variety did not showed changes in physical and chemicals parameters evaluated. As well as, the use of Pectinex SMASH XXL did not cause changes in most juices in relation to controls (without enzymes). The other tested preparations (Pectinex Ultra Clear, Ultrazym AFPL, Panzym YieldMASH) caused changes in these parameters for all ripening stages of Fuji Suprema variety and ripe and senescent stages of Lis Gala variety. Currently the interest in phenolic compounds is attached in theirs antioxidant capacity, which contributes to the protection from the harmful effects of oxidative stress on human health. According to the PCA and HCA the four enzymatic preparations used were effective in the unripe and ripe stage for Lis Gala variety to increase the phenolic compounds and the antioxidant capacity (FRAP). For Fuji Suprema all enzymes were effective at the unripe stage, while for ripe stage only Pectinex Ultra Clear and Panzym YieldMASH were able to increase the phenolic and antioxidant properties. In senescent stage of fruits were not observed change with the application of the enzymatic preparations, due to the fact of presence of endogenous enzymes that may minimize or inhibit the action of preparation added. Based on the results found, highlights that it is necessary to know the ripening stage and the variety selected in the juice processing to proper selection of the enzymatic preparation to attend the efficiency of process and the characteristics of the final product