El sorgo granífero (Sorghum bicolor (L.) Moench) es habitualmente utilizado como diferido por el ganado bovino en la región sudoeste de la Pcia. de Bs. As. De esta manera es posible minimizar el déficit de forraje que se presenta frecuentemente durante el período invernal debido a limitantes de temperatura y humedad. Este cultivo presenta una gran adaptabilidad a las condiciones climáticas de la región, desarrollando altas tasas de crecimiento durante la época estival, dando la posibilidad de transferir un gran volumen de forraje en pie para ser utilizado en la época invernal. El sorgo granífero diferido (SGD) se caracteriza por tener valores de proteína bruta que se consideran limitantes para el óptimo crecimiento de novillos a pastoreo. La suplementación nitrogenada puede subsanar esta carencia, mejorando la utilización de este forraje. El objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la adición de proteína suplementaria sobre el consumo voluntario, la tasa de crecimiento, y parámetros de digestión y metabolismo ruminal en novillos que pastorean SGD. El sorgo granífero SG 9538 fue sembrado el 22/11/2005 y la totalidad de la biomasa producida durante el ciclo de crecimiento, incluido el grano, fue diferida hacia el otoño para ser utilizada por los animales a partir del mes de junio de 2006. Se utilizaron doce novillitos Aberdeen Angus de 224  8 Kg de peso, que fueron asignados al azar a tres tratamientos durante 100 días. Los tratamientos fueron: Control (CON) = pastoreo de sorgo granífero diferido sin restricción, (GS) = SGD sin restricción + 1,257 Kg MS/d de grano de soja entero y (HG) = SGD sin restricción + 1,353 Kg MS/d de harina de girasol. Ambos suplementos fueron calculados de manera de cubrir el desbalance de proteína degradable en el rumen (- 203 g/d) que se genera en el animal al suministrarle la dieta de sorgo granífero diferido. La cantidad de proteína bruta que proporcionan ambos suplementos es de 0,450 kg/día, lo que equivale al 70% de los requerimientos diarios de proteína total de un novillo de 250 kg PV que gana 700 gr/d (NRC, 2000). El sistema de pastoreo del SGD fue frontal con cambios diarios, mediante el empleo de alambre eléctrico. Si bien los animales de todos los tratamientos pastorearon en forma conjunta, los suplementos fueron suministrados en comederos individuales diariamente a las 9:00 h. La composición química del sorgo granífero diferido fue de 71,6; 62,4; 33,0; 3,2 y 7,2%, para materia seca (MS), fibra detergente neutro (FDN), fibra detergente ácido (FDA), lignina detergente ácido (LDA) y proteína bruta (PB), respectivamente. La disponibilidad del cultivo diferido de sorgo granífero fue de 7775,0 kg MS/ha. Los suplementos proteicos presentaron valores de PB de 32,3 y 35,6% para la harina de girasol y el grano de soja, respectivamente. El consumo voluntario de materia seca (CVMS) de sorgo diferido disminuyó (p<0,01) en los animales que fueron suplementados con grano de soja con respecto al control, pasando de 5,1 a 4,6 kg MS/d, observándose un efecto de sustitución del forraje por grano de soja de 0,4 kg de forraje por cada Kg de suplemento suministrado, mientras que los animales suplementados con harina de girasol se mantuvieron con el mismo consumo de sorgo que el grupo control. De esta forma, el consumo total de HG y GS, superó significativamente (p<0,01) al consumo total de CON, con valores de 6,3; 5,9 y 5,1 kg MS/d, respectivamente. Las ganancias de peso vivo (GDP) fueron mayores (p<0,01) en ambos tratamientos suplementados con respecto a CON, no encontrándose diferencias significativas entre ellos. El tratamiento CON ganó 300 g/d, mientras que en los tratamientos HG y GS se determinaron ganancias de 625 y 700 g/d, respectivamente. El peso final de los animales que recibieron suplementación proteica fue 38 y 41 kg superior al control, luego de 100 días de ensayo, para los tratamientos HG y GS, respectivamente. GS fue más eficiente (p<0,01) para convertir alimento en peso vivo que HG y ambos superaron a su vez al grupo control sin suplementar. El grupo control registro una eficiencia de conversión alimenticia (ECA) equivalente a 17,1 mientras que para HG y GS fue de 9,9 y 8,3, respectivamente. Los parámetros sanguíneos analizados mostraron diferencias (p< 0,01) entre el testigo y los tratamientos suplementados en proteína total (6,27, 6,56 y 6,57 g/dl); Urea (11,67, 25,17 y 28,67 mg/dl) y P (6,48, 7,86 y 7,14 mg/dl) para CON, HG y GS, respectivamente. La digestibilidad de la dieta presenta diferencias altamente significativas (p<0,01) entre los tratamientos, siendo mayor en los grupos GS y HG con relación al grupo control, 62,5 y 59,8 vs 53,3%. El consumo de materia seca digestible fue significativamente mayor con el agregado de proteína a la dieta (p<0,01), superando al control en un 41 y 37% para el tratamiento HG y GS. No se han hallado diferencias significativas (p>0,19) entre los distintos tratamientos en lo que respecta a la proporción de grano de sorgo recuperado en heces. A pesar de esto se observa una tendencia a pasar una mayor proporción de grano entero hacia las heces con el agregado de proteína a la dieta. La proporción media de grano que transitó por el tracto sin degradar fue del 27% aproximadamente. Para realizar las evaluaciones de ambiente ruminal se utilizaron 3 novillos fistulados Aberdeen Angus de 550 kg de peso los cuales recibieron los mismos tratamientos que en el ensayo de respuesta productiva, en un diseño de cuadrado latino con tres tratamientos y tres períodos de evaluación. La concentración de N-NH3 se duplico en aquellos animales suplementados con grano de soja y se cuadruplico en los que recibieron harina de girasol luego de que transcurrieran 2 horas desde la entrega del alimento. Luego del pico de concentración de N-NH3, 11,64 y 22,65 mg/dl para GS y HG, respectivamente, los valores comienzan a disminuir paulatinamente a medida que transcurre el tiempo, hasta el punto en que no se observan diferencias significativas entre las distintas dietas más allá de las 6 horas. La concentración de N-NH3 más baja fue observada alrededor de las 24 h, inmediatamente antes de la nueva comida. La concentración de AGV total aumentó (p<0,05) en el orden del 30% con el agregado a la dieta de harina de girasol, mientras que en la dieta con grano de soja si bien el nivel fue superior al control, no alcanzó para detectar diferencias significativas. La proporción relativa de ácido propiónico tendió a aumentar (p=0,08) en las dietas con suplementación proteica y, en consecuencia, se observa una tendencia a disminuir (p=0,10) la proporción de ácido acético. En ningún caso estas diferencias llegaron a ser significativas. En conclusión, la suplementación con proteína de alta degradabilidad ruminal, como es el caso del grano de soja entero o la harina de girasol, mejora la eficiencia de utilización de la dieta, el consumo total de materia seca y, en consecuencia, incrementa la respuesta productiva, cuando es suministrada a novillos que pastorean sorgo granífero diferido. Mayores concentraciones de N-NH3 y AGV totales, además de una tendencia a aumentar la relación A:P, demuestran el efecto beneficioso del grano de soja y la harina de girasol sobre la eficiencia de utilización de la dieta. No se diferenciaron la harina de girasol del grano de soja en la suplementación de sorgo granífero diferido, y se presentan como alternativas a ser consideradas en programas de alimentación bovina para el sudoeste bonaerense. / Grain sorghum (Sorghum bicolor (L.) Moench) is usually used as deferred forage for beef cattle at the southwestern Buenos Aires province. Thus, the impact of forage deficit frequently occurring during winter because of limiting weather conditions can be minimized. This crop is highly adapted to the climatic conditions of the area with high summer growing rates; which make it possible to transfer large amounts of forage to the winter time. The CP content of deferred sorghum grain (SGD) is limiting for optimum growth of steers grazing this pasture. Protein supplementation could improve its utilization. The objective of this study was to evaluate the effects of supplementary protein addition upon voluntary intake of SGD, animal growth rate, digestive and ruminal parameters of steers grazing on SGD. The grain sorghum SG 9538 was seeded on 22/11/2005, and the total biomass yielded during the plant growth cycle, including the grain, was deferred to fall to be grazed from June 2006. Twelve Aberdeen Angus steers (224 8 kg BW) were randomly assigned to three treatments for 100 d. Treatments were: Control (CON) = SGD without restriction to grazing, (GS) = SGD without restriction to grazing + 1,257 kg DM daily of whole soybean grain and (HG) = SGD without restriction to grazing + 1,353 kg DM daily of sunflower meal. Both supplements were designed to provide 450 g of CP, which is equivalent to 50% of daily protein requirements of the animals included in the study. The grazing system was in strip grazing by means of electric fencing with daily changes of the paddock. Although all treatments grazed jointly the same paddock, supplements were offered in individual feeders at 0900 daily. The chemical composition of SGD was 71,6; 62,4; 33,0; 3,2 and 7,2 %, for DM, NDF, ADF, ADL and CP respectively. Mean forage availability of SGD was 7775,0 kg DM/ha. Protein supplements were 32,3 and 35,6% of CP on a DM basis for sunflower meal and soybean grain respectively. The DM intake of SGD decreased (p<0,01) in animals receiving GS compared to CON, from 5,1 to 4,6 kg DM daily; with a substitution of 0,4 kg of forage for each kg of supplement fed. While animals supplemented with HG exhibited a forage intake similar to CON. However, total dietary DM intake in HG and GS were higher than CON (p<0,01), with values of 6,3; 5,9 and 5,1 kg DM per day for HG, GS and CON respectively. Daily weight gains (GDP) increased (p<0,01) with both supplemented treatments compared to CON, however no differences were detected between themselves. An average of 300 g/d was exhibited by the control group, while treatments HG and GS showed GDPs of 625 and 700 g/d respectively. Obviously, these improved gains in the supplemental treatments affected the final liveweights where animals in treatments HG and GS were 38 and 41 kg respectively heavier than CON after 100 d of trial. Additionally, the treatment GS resulted more efficient p<0,01) in feed to gain ratio than HG, but both HG and GS overcome CON. Thus the feed to gain ratio resulted 17,1 for CON vs 9,9 and 8,3 for HG and GS respectively. There were differences in blood parameters between the control group and the supplemented treatments in the contents of: total protein (6,27, 6,56 and 6,57 g/dl); urea (11,67, 25,17 and 28,67 mg/dl) and P (6,48, 7,86 and 7,14 mg/dl) for CON, HG and GS respectively. As far as diet digestibility concerns, the observed results have shown highly significant differences (p<0,01) among treatments, being highest for GS (62,5 %) and HG (59,8 %) vs CON (53,3 %). These results influenced the consumption of total digestible DM, which was higher with addition of protein to the diet (p<0,01), being 41 and 37% for HG and GS better than CON. No differences among the experimental treatments were found for the amount of whole sorghum grain coming from SGD which was recovered in feces (p>0,19). However, there was a marked trend to recover more whole grain in the treatments receiving protein supplementation. Anyhow, the mean proportion of grain passing through the digestive tract without apparent degradation was 27% of the total grain estimated to be consumed. To determine ruminal parameters, three ruminally cannulated Aberdeen Angus steers (550 kg BW) were used. They received the same treatments described for the first experiment in a latin square design (3 treatments and three periods). The NH3-N concentration increased more than 2 times in those animals supplemented with soybean grain and more than 4 times in those receiving sunflower meal as protein supplements after 2 h since the supplements were fed. After a peak was reached there was a progressive decrease in the ruminal NH3-N concentration with time. The decrease was so sharp that no significant differences were observed after 6 h. The lowest NH3-N levels were observed at 24 h, immediately before the supplement was fed again. The total VFA concentration increased (p<0,05) 30% with the addition of sunflower meal. Although the total VFA was also numerically larger than CON the differences were not significant. It was observed a non significant trend to enhance the relationship propionate to acetate with protein supplementation. In conclusion, highly degradable protein supplementation as in HG and GS when fed to steers grazing SGD improved productivity parameters such efficiency of diet utilization and voluntary consumption of digestible nutrients. Higher concentration of NH3-N and total VFAs proved the benefit of feeding either soybean grain or sunflower meal. No meaningful differences between supplementation strategies were found for productivity, and both feeding programs can be considered as alternative to supplement SGD in southwestern Buenos Aires Province.

Eragrostis curvula (Schrad.) Nees, conocida vulgarmente como pasto llorón, es una gramínea forrajera, de origen sudafricano, extensamente cultivada en la zona semiárida templada de Argentina. Es una especie morfológicamente diversa y posee un amplio potencial genético para mejorar las características de resistencia a sequía, frío, productividad y palatabilidad. Desde el punto de vista citogenético se trata de un complejo polimórfico, ya que es un grupo poliploide donde la mayoría de sus miembros se reproducen en forma apomí-ctica. La apomixis es una forma de reproducción asexual (agámica) a través de semillas, que conduce a la generación de progenies genéticamente idénticas a la planta madre. Ha sido descripta en más de 400 especies de angiospermas. La apomixis gametofítica ocurre generalmente en grupos poliploi-des y se cree que ésta probablemente se originó a través de mutaciones en genes de la vía sexual. En el Laboratorio de Biotecnología y Genética Vegetal (CERZOS-Departamento de Agronomía, UNS) se obtuvo, por cultivo in vitro de inflores-cencias de un cultivar tetraploide de pasto llorón, Tanganyika (T), una planta diploide (UNST1122, D). Semillas de esta plan-ta se trataron con colchicina y se obtuvieron dos plantas tetraploides (colchiploides) con un alto grado de sexualidad [UNST1131 (C) y UNST1112 (M)]. Esta serie de plantas per-mite estudiar tanto variaciones producidas por cambio de ploidía como por cambios en el modo reproductivo. El objetivo planteado para esta tesis fue realizar un análisis global del transcriptoma derivado de ovarios diplospóricos y meióticos de esta serie isogénica de pasto llorón, y también del tejido de hoja, de manera de aislar los transcriptos diferenciales por mo-do reproductivo y por cambios de ploidía, y así poder realizar asociaciones genéticas y funcionales sobre los factores deter-minantes de la diplosporía en la especie, especialmente el factor ploidía. A fin de lograr este objetivo se realizó la construcción de bibliotecas de ADNc de la serie euploide isogé-nica (tres bibliotecas de inflorescencias inmaduras pertene-cientes a los genotipos T, D y C, y una biblioteca de hoja del genotipo T), se secuenciaron ESTs de dichas bibliotecas y se hicieron análisis de las ESTs. Además se realizaron estudios de Display Diferencial (DD) de inflorescencias y hojas de la misma serie de plantas, y se secuenciaron y analizaron los transcrip-tos diferenciales por ploidía y modo reproductivo para comple-mentar el estudio de las bibliotecas. De la secuenciación de las bibliotecas se obtuvieron 12.295 ESTs de buena calidad. Luego del ensamblado y agrupamiento, se obtuvieron 8.884 unigenes, incluyendo 1.490 contiguos y 7.394 singletons. El algoritmo BLASTX fue utilizado para el análisis de homología de los unigenes de E. curvula contra la base de datos de Swiss-Prot. Cuarenta y tres por ciento de los genes de Eragrostis encontraron homología con secuencias de trigo (391.939 genes anotados) y cebada (50.423 genes anotados), 49,25% con genes de avena (89.147 genes anotados) y 46,48% con genes de maíz (58.582 genes anotados). Además se detec-taron 254 microsatélites (EST-SSRs) que facilitarán el mapeo utilizando poblaciones segregantes para el carácter apomixis u otros caracteres de calidad forrajera. En los ensayos de DD de inflorescencias inmaduras se generaron en total 4.242 transcriptos y para los experimentos de hoja 7.622. Del total de transcriptos, aproximadamente un 14% de inflorescencias y un 10% de hojas fueron diferenciales entre los distintos genotipos. Estos transcriptos diferenciales integraron tres grupos: los diferenciales por modo reproductivo, los diferen-ciales por ploidía y un grupo particular, los inesperados, que estaban integrados por transcriptos en los que el patrón de expresión era el mismo entre la planta apomíctica tetraploide y diploide sexual, pero distinto en la planta tetraploide sexual. Sesenta (60) bandas de inflorescencias y 42 de hoja fueron clonadas y secuenciadas con éxito. Este número representa un 10,83% y 5,68% del total de bandas diferenciales de inflorescencias y hojas, respectivamente. De los 60 transcrip-tos secuenciados a partir de inflorescencias, 39 (65%) mostraron homología significativa con genes de función conocida. De los 42 transcriptos secuenciados a partir de hojas, 14 (33,33%) mostraron homología con genes de función conocida. Tanto en el análisis de las ESTs como en los DD se mostró que los patrones de expresión de las plantas tetraploides están muy relacionados, mientras que la expresión del genotipo diploide fue significativamente diferente, mostrando que el perfil de expresión, al menos para un gran número de genes, depende del nivel de ploidía. Este comportamiento en la expresión de genes se correlaciona muy bien con la estructura genética y epigenética de la serie en la prueba clásica y parcial de Mantel. Durante la conversión tetraploide-diploide se produce una proporción significativa de modificaciones genéticas y epigenéticas que revierten durante la conversión diploide-tetraploide, lo cual sugiere que algunos loci mantienen una secuencia particular y/o una cierta condición de metilación dependiente del nivel de ploidía. Estas variaciones genéticas y epigenéticas ocurren en un escenario particular de expresión que depende del nivel de ploidía. Sin embargo, un grupo particular de genes mostraron un comportamiento curioso. Ellos se encontraron principalmente silenciados en los genotipos 2x sex. y 4x apo. Este grupo de genes se detectó tanto en los análisis de ESTs como en los realizados mediante la técnica de DD. Ya que las plantas 2x sex. y 4x apo. presentan diferente ploidía y modo reproduc-tivo, el patrón de expresión de estos genes es intrigante. Estos genes candidatos fueron denominados de patrón inesperado o inesperados. La mayoría de los genes de este grupo están sobreexpresados en la planta 4x sex, mientras que están reprimidos en los genotipos 4x apo. y 2x sex. Para explicar la existencia de este grupo de genes inesperados y la relación que podrían llegar a tener con la apomixis y la poliploidía, se plantea que para mantener la sexualidad a nivel tetraploide se requiere de la activación de un grupo de genes en la conversión 2x a 4x, y que esta activación estaría bloqueada (o silenciada) en el genotipo 4x apo, lo que explicaría el grupo de genes silenciados que comparten este genotipo y el diploide sexual. / Eragrostis curvula (Schrad.) Nees, commonly known as "weeping lovegrass" is a forage grass native from South Africa and widely cultivated in temperate semiarid regions of Argentina. It is a morphologically diverse species and has a large genetic potential for improving the characteristics of drought and cold resistance, productivity and palatability. Cytogenetically it constitutes a polymorphic complex, since it is a polyploid group where most members reproduce by apomixis. Apomixis is an asexual reproduction mode through seeds, which leads to the generation of progeny genetically identical to the maternal plant. Apomixis was described in over 400 species of angiosperms. Gametophytic apomixis generally occurs in polyploid groups and probably was origi-nated through mutations of genes from the sexual pathway. In the Laboratory of Plant Genetics and Biotech-nology (CERZOS-Department of Agronomy, UNS), a diploid plant (UNST1122, D) was obtained by in vitro culture of inflores-cences from plants of the tetraploid cultivar Tanganyika (T). Seeds of the diploid plant were treated with colchicine and DMSO and two plants were obtained, both tetraploids (colchi-ploids), with a high level of sexual reproduction [UNST1131 (C) and UNST1112 (M)]. This series of plants allowed the study of genetic and epigenetic variations caused by changes of ploidy and/or by changes in the reproductive mode. The aim of this thesis was to conduct a comprehensive transcrip-tome analysis of meiotic diplosporous ovaries and leaf tissue of the isogenic series, and to isolate the transcripts that are differential by the reproductive mode and/or by ploidy in order to find out the genetic and functional associations on diplos-pory determinant factors in the species, especially ploidy. To achieve this goal the cDNA libraries of the isogenic euploid series were constructed (three of them from immature inflores-cences belonging to the genotypes T, D and C, and one library of leaves of genotype T), ESTs were sequenced and analysed. Studies of Differential Display (DD) of inflorescences and leaves of the same series of plants were also carried out and differential transcripts related to ploidy and the reproduc-tive mode were sequenced and analyzed in order to comple-ment the study of the libraries. A relatively high number of good quality ESTs (12,295) was obtained. After assembly and clustering, 8,884 unigenes were obtained, including 1,490 contigs and 7,394 singletons. Blastx was used for the analysis of homology of the E. curvula unigenes against SwissProt database. Forty-three percent of the Eragrostis genes found homology with sequences of wheat (391,939 annotated genes) and barley (50,423 annotated genes), 49.25% with oat genes (89,147 genes annotated) and 46.48% with Maize genes (58,582 annotated genes). In addition 254 microsa-tellites (EST-SSRs) were detected that will facilitate the mapping for apomixis or other traits like forage quality using segregating populations. In DD experiments 4,242 transcripts of immature inflorescences and 7,622 from leaf were gene-rated. From these transcripts, approximately 14% from inflo-rescences and 10% from leaves were differentials between genotypes. These differential transcripts were divided into three groups: differential related to the reproductive mode, differential between ploidy levels and unexpected, a particular group which were composed of transcripts in which the expression pattern was similar in the tetraploid apomictic and in the diploid sex plant, but different in the sexual tetraploid plant. Sixty (60) bands from inflorescences and 42 from leaves were successfully cloned and sequenced. This number represents a 10.83% and 5.68% of the total differential bands from flowers and leaves, respectively. Thirty nine (39, 65%) out of 60 sequenced transcripts from inflorescences showed significant homology with genes of known function. Fourteen (14, 33.33%) out of 42 sequenced transcripts from leaves showed homology with genes of known function. ESTs and DD analysis showed that the expression patterns of tetraploid plants are closely related, whereas the expression of the diploid genotype was significantly different, showing that the expression profile, at least for a large number genes, depends on the ploidy level. This behavior in gene expression correla-tes well with the genetic and epigenetic structure of the series in classical and partial Mantel test. During the conver-sion tetraploid-diploid a significant proportion of genetic and epigenetic changes are produced that revert during the convertion diploid-tetraploid, suggesting that some loci have a particular sequence and / or a certain condition of methy-lation-dependent on the ploidy level. These genetic and epigenetic changes occur in a particular stage of expression that depends on the ploidy level. However, a particular group of genes showed a curious behavior. They were mainly silenced in the 2x sex and 4x apo genotypes. This group of genes was detected in both ESTs and DD analysis. Since 2x sex and 4x apo plants have different ploidy level and different reproductive mode, the expression pattern of these genes is intriguing. These candidate genes were called "unexpected". Most genes in this group are overexpressed in the 4x sex plant, while being repressed in the 4x apo and 2x sex genoty-pes. To explain the existence of this group of "unexpected" genes and the relationship that might have with apomixis and polyploidy, we suggest that to maintain active the sexual reproduction at the tetraploid level the activation of a gene cluster is required, and that this activation would be blocked (or silenced) in the 4x apo genotype, explaining the silenced group of genes found in these genotype. The candidates genes were in silico mapped onto the rice and maize chromosomes.

En el Valle Inferior del río Negro aproximadamente el 20% de la superficie total bajo riego se destina al cultivo de alfalfa (Medicago sativa L.). Esto contribuye a mantener la oferta anual de forraje con heno de calidad, principal fuente de alimentación de los sistemas de invernada. El elevado potencial productivo de este cultivo en la región ocasiona una alta extracción de nutrientes, particularmente fósforo (P) y azufre (S), los que podrían reponerse mediante una adecuada fertilización con el objeto de maximizar la producción y la calidad del forraje. El trabajo de tesis se llevó a cabo durante 2010-2014 en la Estación Experimental Valle Inferior del INTA en Viedma, provincia de Río Negro, sobre un ensayo productivo de alfalfa bajo riego. Los objetivos fueron: 1. Evaluar la producción de materia seca del cultivo de alfalfa en respuesta a la fertilización fosforada y azufrada en suelos de textura fina bajo condiciones de riego, durante cuatro ciclos de producción. 2. Determinar el contenido de proteína bruta del forraje en cada estación de crecimiento (primavera-verano-otoño). 3. Determinar la concentración y el contenido de nutrientes de alfalfa en el estado fenológico de 10% de floración, en todos los cortes durante los dos primeros ciclos del cultivo. 4. Cuantificar la evolución del carbono orgánico total (COT), el carbono orgánico particulado (COP) del suelo y la concentración de P y S totales en la fracción de la materia orgánica (MO) particulada en los dos primeros ciclos de producción. Se utilizó un diseño en bloques completos aleatorizados con parcelas divididas, donde se distribuyeron los 10 tratamientos con P y S. Se aplicaron cinco dosis de P (0, 20, 40, 80 y 160 kg ha-1) combinados con dos dosis de S (0 y 24 kg ha-¹). En el cultivo se evaluó la producción de forraje por corte, y la acumulada en cada ciclo (Mg MS ha¯¹); la concentración de proteína bruta (%PB) y el contenido de nutrientes en el forraje (kg MS ha¯¹). En el suelo se determinó: COT, COP y contenido de P y S totales en la fracción particulada. En el período correspondiente a los cinco cortes de primavera y verano se produjo el 89% del forraje total del ciclo. Sólo los cortes 1, 4 y 6 mostraron diferencias respecto al tratamiento sin fertilizante, con altas dosis de P, con respuestas entre 33 y 40%. La fertilización combinada con P+S incrementó la producción anual acumulada de forraje a partir del 2º ciclo de estudio; en el 3º y 4º ciclo únicamente las dosis más altas de P (con y sin S) produjeron los mayores aumentos de forraje. El porcentaje de PB fue de 18% en los cortes de primavera y verano y del 23% en otoño. Los tratamientos con P y S produjeron mayor % PB en forraje respecto al testigo en los cortes de primavera y otoño. En la época estival cuando se presentaron los menores valores de PB, la fertilización no generó cambios en los porcentajes. Los mayores valores proteicos se observaron en otoño. El forraje producido luego de la fertilización fósforo azufrada, mostró niveles suficientes de N, Ca y B y ligeras deficiencias de P, K y S. Cuando los resultados se expresaron en kg ha-1, no se detectaron diferencias significativas de los contenidos de N, S y B entre tratamientos. Sólo en el primer ciclo los valores de P, K y Ca fueron más altos con dosis iguales o mayores a 20 kg P ha-1 (con y sin S). En los dos ciclos estudiados los niveles de COT fueron semejantes en todos los tratamientos fertilizados. La fertilización no modificó el contenido de COP, Pt y St de la fracción gruesa en ambos ciclos con diferencias entre ciclos. La disminución de la MOP en 19% durante el segundo ciclo productivo explicaría el menor contenido de COP, Pt y St de la fracción gruesa en ese período. El contenido de St de la fracción gruesa presentó diferencias entre los dos ciclos mientras que el Pt se mantuvo. La aplicación de 24 kg S ha-1 disminuyó el contenido de Pt de dicha fracción como consecuencia de una mayor extracción de P por parte del cultivo. La relación S:P mostró un enriquecimiento de S. La relación de estratificación indica una mayor acumulación de COP en la profundidad de suelo 0-10 cm respecto a 0-5 cm, debido a la mayor acumulación de raíces en este espesor. En general, en todos los tratamientos, esta relación fue mayor que 2, lo que sugeriría un efecto beneficioso de la pastura sobre la calidad del suelo. / In the Lower Valley of Río Negro (VIRN) approximately 20% of the total area under irrigation is used for alfalfa (Medicago sativa L.) cultivation. This contributes to maintaining the annual supply of forage with better quality, which is the main source of feed for wintering systems. The high productive potential of this crop in the region causes a high extraction of nutrients, particularly phosphorus (P) and sulfur (S), which could be recovered by means of an adequate fertilization in order to maximize forage production and quality. This thesis was carried out during 2010-2014 period at the Lower Valley Experiment Station of INTA in Viedma, Río Negro province, on a productive trial of alfalfa under irrigation. The objectives were: 1. To evaluate the dry matter production of alfalfa in response to phosphorus and sulfur fertilization in fine textured soils under irrigation conditions during four production cycles. 2. Determine the crude protein content (%PB) of the forage at each growing season (spring-summer-autumn). 3. Determine the concentration and nutrient content of alfalfa at 10% flowering phenological state, in all forage cuts during the first two crop cycles. 4. To quantify the total organic carbon (TOC) evolution, particulate organic carbon (POC) and total P and S concentration in the coarse fraction of organic matter (OM) in the first two production cycles. A randomized complete block design with split plots was used to distribute ten P and S treatments. Five doses of P (0, 20, 40, 80 and 160 kg ha-1) were applied in combination with two doses of S (0 and 24 kg ha-1). In the crop, the forage production per cut, the accumulated in each cycle (Mg MS ha-1), the % PB and the nutrient content (kg DM ha-1) were evaluated. In the soil, TOC, POC and total P and S content in the particulate fraction were also determined. The 89% of total forage was produced in the period corresponding to five cuts of spring and summer of the alfalfa cycle. Only 1, 4 and 6 cuts showed differences regarding treatment without fertilizer, when high doses of P were used, which responses were from 33 to 40%. Combined P + S fertilization increased the annual accumulated forage production from the 2nd cycle of study; in the 3rd and 4th cycle only the highest doses of P (with and without S) produced the highest forage increases. The PB content was 18% in the spring and summer cuts and 23% in the corresponding autumn. The P and S treatments produced higher %PB than the control in the spring and autumn cuts. In the summer when the lowest %PB values were obtained, the fertilization did not produce changes in these values. The highest %PB were observed in autumn. The forage produced after sulfur and phosphorus application, showed sufficient levels of N, Ca and B and small P, K and S deficiencies. When the results were expressed in kg ha-1, no significant differences of N, S and B contents between treatments were observed. Only in the first cycle the P, K and Ca values were higher with doses equal or greater than 20 kg P ha-1 (with and without S). In the two cycles evaluated the TOC levels were similar in all fertilized treatments. The fertilization did not modify the POC, Pt and St contents in the coarse soil fraction in both cycles with differences between them. The 19% decrease of the MOP during the second productive cycle would explain the lower content of POC, Pt and St of the coarse fraction in that period. The St content of the coarse fraction showed differences between the two cycles while the Pt remained constant. The application of 24 kg S ha-1 decreased the Pt content of this fraction as consequence of higher extraction of phosphorus by the crop. The S: P ratio showed an S enrichment. The stratification ratio indicated a higher accumulation of POC in the 0-10 cm compared to 0-5 cm soil depth, due to the greater roots accumulation in this thickness. In all treatments this ratio was greater than 2, which would suggest a beneficial effect of pasture on soil quality.

Eragrostis curvula (Schrad.) Nees, pasto llorón, es una gramínea forrajera, de origen sudafricano, extensamente cultivada en la zona semiárida templada de Argentina. El pasto llorón es un complejo polimórfico donde la mayoría de sus miembros se reproducen por apomixis diplospórica, tipo de reproducción asexual a través de semillas, que conduce a la generación de progenies genéticamente idénticas a la planta madre. Los pasos de la apomixis implican evitar la meiosis para generar un saco embrionario no reducido (apomeiosis), desarrollo del embrión sin fecundación de la ovocélula (partenogénesis) y formación de endospermo viable de una manera dependiente o independiente de la fertilización de los núcleos polares. El objetivo general de esta tesis es estudiar la herencia de la diplosporía en Eragrostis curvula y localizar la/s región/nes condicionantes de la misma a través de la obtención de una población de mapeo a nivel tetraploide, segregante para el modo reproductivo, y de la construcción de un mapa genético de alta densidad, basado en marcadores moleculares. El primer paso de trabajo de esta tesis fue obtener una población de mapeo tetraploide proveniente del cruzamiento entre un genotipo sexual (OTA-S, accesión PI574506 del USDA) con un genotipo apomíctico facultativo (cv. Don Walter-INTA). La caracterización fenotípica de los híbridos F1, realizada mediante análisis citoembrológicos, dio como resultado una proporción 1:1 de plantas apomícticas vs. sexuales (34:27, Chi2 = 0,37), lo que concuerda con un modelo de herencia genética de un solo factor dominante. La población segregante para este carácter permitió construir el primer mapa de ligamiento saturado de E. curvula a nivel tetraploide utilizando marcadores moleculares tradicionales (AFLP y SSR) y derivados de secuenciación (GBS-SNP) en el cual se identificó el locus que controla la diplosporía. Se construyeron mapas de ligamiento para cada uno de los parentales por separado con 1.114 marcadores para OTA-S y 2.019 para Don Walter, construyendo en ambos 40 grupos de ligamiento, lo que concuerda con el número de cromosomas al nivel tetraploide. El largo total del mapa de OTA-S fue de 1.335 cM, con una densidad promedio de marcadores 1,22 cM/marcador. La longitud del mapa de Don Walter fue de 1.976,2 cM, con una densidad de promedio de marcadores de 0,98 cM/marcador. El locus responsable de la diplosporía fue mapeado en el grupo de ligamiento 3 de Don Walter. Mediante análisis de sintenia, comparando las secuencias de los marcadores GBS-SNP con genomas completos de especies relacionadas (Oropetium thomaeum, Cenchrus americanus, Setaria italica, Zea mays, Panicum hallii y Oryza sativa) se logró establecer cuáles de los grupos de ligamiento de cada parental corresponderían a los grupos de homólogos / homeólogos. El mapa de ligamiento genético que se logró alcanzar en esta tesis es el primer mapa de este tipo para E. curvula, es el mapa más saturado para el género Eragrostis y uno de los mapas más saturados para entre las gramíneas poliploides forrajeras. / Eragrostis curvula (Schrad.) Nees (weeping lovegrass) is an apomictic species native to Southern Africa that is used as forage grass in semiarid regions of Argentina. Apomixis is a mechanism for clonal propagation through seeds that involves the avoidance of meiosis to generate an unreduced embryo sac (apomeiosis), parthenogenesis, and viable endosperm formation by in a fertilization-dependent or -independent manner. In this thesis, the first saturated linkage map of tetraploid E. curvula is informed, using both traditional (AFLP and SSR) and high-throughput molecular markers (GBS-SNP), and the locus controlling diplospory is identified. Also syntenic relationships with genomes of other grass species are established to identify homologs/homeologs groups. A tetraploid mapping population was obtained from the cross between a sexual genotype (OTA-S) with a facultative apomictic individual of cv. Don Walter. Phenotypic characterization of F1 hybrids by cytoembryological analysis yielded a 1:1 ratio of apomictic vs. sexual plants (34:27, Chi2 = 0.37), which agrees with the model of inheritance of a single dominant genetic factor. The final number of markers was 1,114 for OTA-S and 2,019 for Don Walter. These markers were distributed into 40 linkage groups per parental genotype, which is consistent with the number of E. curvula chromosomes (containing 2 to 123 markers per linkage group). The total length of the OTA-S map was 1,335 cM, with an average marker density of 1.22 cM per marker. The Don Walter map was 1,976.2 cM, with an average marker density of 0.98 cM/marker. The locus responsible for diplospory was mapped on Don Walter linkage group 3. Syntenic analysis , comparing GBS-SNP markers sequences with complete genomes of related species (Oropetium thomaeum, Cenchrus americanus, Setaria italica, Zea mays, Panicum hallii y Oryza sativa) allowed to establish the homologs/homeologs groups for each linkage map and the relationships between both linkage maps. The genetic linkage maps reported in this study, the first such map for E. curvula, is the most saturated map for the genus Eragrostis and one of the most saturated maps for a polyploid forage grass species.

En la Pampa deprimida de la Provincia de Buenos Aires se ubica una de las principales zonas de cría de ganado vacuno, en la cual existen problemas de salinidad y alcalinidad en las partes más bajas. Allí se encuentra Lotus tenuis como especie herbácea naturalizada y muy valorada por su aporte a la oferta forrajera de los sistemas ganaderos de la región. Existe la necesidad de incrementar la producción de especies forrajeras adaptadas a condiciones edáficas cada vez más estresantes. En este sentido, en este trabajo se destacó la búsqueda, caracterización y selección de germoplasma productivo de Lotus tenuis, ya adaptado a dichas áreas marginales. Específicamente se evaluó la respuesta a estrés salino impuesto por shok y por aclimatación en dos estadíos de la etapa vegetativa, contemplando los cambios morfo-fisiológicos y bioquímicos resultantes. Se identificaron y seleccionaron individuos de una población con variabilidad en la tolerancia al estrés salino y se incrementó la búsqueda de recursos genéticos, incluyendo en las evaluaciones a distintas especies del género Lotus (las especies L.corniculatus y L. creticus, y especies consideradas modelo: Lotus japonicus MG20, Lotus japonicus Gifu, Lotus filicaulis, Lotus burtii), a varias poblaciones naturales de L. tenuis, y a tres variedades comerciales de L. tenuis, con el fin de ser utilizadas en un futuro en los programas de mejora. En ninguna de las especies evaluadas y en ninguno de los dos estados fenológicos estudiados, la salinidad provocó la muerte de las plantas. Las mayores disminuciones de peso fresco y de peso seco se detectaron cuando los tratamientos salinos se aplicaron en plantas de temprana edad (dos hojas verdaderas). Los parámetros de crecimiento que explicaron dicha disminución fueron, principalmente la disminución de la cantidad de tallos y ramificaciones por planta, y el diámetro del tallo principal. El área foliar bajo condiciones salinas sólo disminuyó en dos poblaciones de L. tenuis, de las 19 / Pesqueira, J. (2009). Cambios bioquímicos, morfológicos y ecofisiológicos en plantas del género Lotus bajo estrés salino [Tesis doctoral]. Universitat Politècnica de València. https://doi.org/10.4995/Thesis/10251/5765