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Modulação colinérgica da secreção de insulina em ilhotas de ratos alimentados com dieta hipoprotéicaFerreira, Fabiano 03 January 2002 (has links)
Orientador: Everardo Magalhaes Carneiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T06:09:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2002 / Resumo: Sabe-se que 50% da insulina secretada no periodo pós-prandial imediato depende da estimulação colinérgica e que no diabetes tipo 2, a fase rápida da secreção de insulina é a primeira a desaparecer. Ilhotas de ratos desnutridos também apresentam perfil de secreção de insulina sem o padrão bifásico. Até o momento, pouco se sabe a respeito da regulação autonômica, especialmente da modulação colinérgica da secreção de insulina, em ilhotas de Langerhans de ratos submetidos à restrição protéica. Assim, o presente projeto tem como objetivo estudar o efeito da restrição protéica sobre a modulação colinérgica da secreção de insulina em ilhotas isoladas de ratos. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, um grupo controle tratado com dieta normoprotéica (NP) (17%) e outro grupo desnutrido tratado com dieta hipoprotéica (LP) (6%). Após dois meses de desnutrição os animais foram sacrificados para o início dos experimentos. Nossos resultados indicaram que a dieta hipoprotéica induz uma diminuição na massa corpórea dos animais. A albuminemia está diminuída no grupo tratado com dieta hipoprotéica. O grupo LP mostrou níveis de ácidos graxos livres aumentados no plasma e redução dos níveis de proteínas totais em relação ao grupo NP, caracterizando o quadro de desnutrição. A insulinemia está reduzida nos animais LP e a glicemia mantida, sugerindo uma maior sensibilidade dos animais LP ao hormônio. A resposta secretória de insulina pelas ilhotas LP foi menor que a resposta secretória das ilhotas NP, quando estimuladas com o agonista muscarinico carbacol (CCh) e o forbol éster (PMA) em presença glicose (G). A curva dose resposta para o carbacol mostrou que as ilhotas de ratos submetidos a restrição protéica são menos sensíveis que as ilhotas dos animais controle (LP Ecso= 4.64:t0.98 e NP Ecso= 2.15:tO.70 (p<0.05)). Quando as ilhotas foram estimuladas com PMA (200"M) the increased in insulin secretion was higher in NP islets (3.04 fold for 8.3 mM ofG and 1.50 fold for 16.7 mM of G) (p<0.05). A monitoração do efluxo de cálcio mostrou um maior efluxo de cálcio nas ilhotas de animais LP estimuladas com CCh e PMA em presença de glicose. A técnica de imunohistoquímica, mostrou uma diminuição na quantidade da proteína quinase C alfa (pKCa) que foi confirmada utilizando-se a técnica de Western Blotting, onde encontramos PKCa e fosfolipase C betal (PLC_I) diminuídas em ilhotas isoladas de ratos LP (p<0.05). o RT -PCR mostrou uma diminuição na quantidade de mRNA para a enzima PKCa, o que nos sugeriu uma possível relação entre a restrição protéica a qual o animal foi submetido e alterações na transcrição de genes que codificam enzimas relacionadas com o processo secretório estimulado com glicose e potencializadas com CCh. Até o momento podemos concluir que, a alteração no conteúdo destas enzimas neste modelo experimental permite explicar, pelo menos em parte, a pobre resposta secretória encontrada frente a G, e a associação de CCh e PMA. Mais ainda, a restrição protéica efetuada no período pós desmame poderia estar induzindo modificações importantes em enzimas envolvidas com a transdução de sinais no sistema colinérgico da ilhota, repercutindo na fase adulta do animal. / Abstract: We studied the effects of carbamy1choline (CCh) and Phorbol 12-Myristate 13 Acetate (PMA), in insulin secretion of isolated Largerhans islets of male Wistar rats maintained with normal protein diet (17% of protein =NP) or low protein diet (6% of protein =LP). Islets isolated by collagenase digestion of pancreata, were incubated (lh) in Krebs medium with 8.3 mM or 16.7 mM of glucose (G), with or without CCh and PMA. The insulin content of media was available by radioimunoassay. Concentrations of CCh (O, l-I 000 j..lM) increased insulin secretion in both groups. Stimulation with CCh shifted the LP dose-response curve to the right (LP Ecso = 4.64:tO,98 and NP Ecso = 2.15 0,70) (p<0,05). When the islets were stimulated with PMA (20011M) the increased in insulin secretion was higher Ín NP islets (3.04 fold for 8.3 mM ofG and 1.50 fold for 16.7 mM of G) (p<0.05). Immunocitoquemical showed a decrease in PKCa content in LP islets and Western blot analysis revealed that PKCa and PLCf31 expression in LP isolated rat islets, after 2.5 h of incubation in 8.3 mM glucose media, were lower than NP (p<0.05) and RTPCR showed a decrease in rnRNA levels to PKCa (p<0.05). Low protein intake is associated with a lowered PKCa and PLCf31 expression in Langerhans islets. This alteration may be one factor involved in reduced insulin secretion by LP animals isolated islets, when stimulated with CCh and PMA in presence of glucose. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular
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Densidade mineral ossea de pacientes com fibrose cisticaCunha, Carolina de Azevedo Pedrosa 28 October 2005 (has links)
Orientador: Antonio Fernando Ribeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T04:14:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2005 / Resumo: Fibrose cística (FC) é uma doença genética autossômica recessiva, mais freqüente na população caucasóide. As principais manifestações clínicas da FC incluem doença pulmonar crônica, insuficiência pancreática, elevação dos eletrólitos no suor e esterilidade masculina. Apesar dos avanços no tratamento clínico e nutricional dos últimos anos, complicações não relacionadas com a fisiopatogenia da FC têm sido descritas como a redução importante da densidade mineral óssea (DMO). O objetivo deste trabalho foi avaliar a DMO de pacientes com fibrose cística e correlacionar os achados com as variáveis estudadas. O estudo foi descritivo do tipo transversal com os indivíduos acompanhados regularmente no Hospital de Clínicas da UNICAMP. Foram selecionados 29 pacientes com idade igual ou superior a 10 anos e diagnóstico firmado de FC. A avaliação do estado nutricional foi feita pelos indicadores antropométricos peso/idade, altura/idade e pelo índice de massa corporal (IMC em kg/m2). A densidade mineral óssea da coluna lombar (segmento L2-L4), do fêmur e do corpo total foram avaliadas por meio do exame de densitometria de duplo feixe de raios X (DEXA). Esse exame também possibilitou a determinação dos valores das massas magra e gorda (kg). A ingestão dietética diária foi determinada pelo registro alimentar de 3 dias e a prova de função pulmonar foi utilizada para obtenção dos valores diretos da capacidade vital forçada e do fluxo expiratório forçado no primeiro segundo. A média de idade da população estudada foi de 14,4 anos (±3,85) com predomínio do gênero masculino (58,6%). O escore de desvio padrão peso/idade e altura/idade demonstraram percentuais de desnutrição elevados: 60,9% e 65,2%, respectivamente. Com relação a densitometria óssea, 58,6% dos pacientes apresentaram redução da DMO para coluna lombar e 42,3% para o corpo total. Houve correlação positiva entre a DMO da coluna lombar, do fêmur e do corpo total com a idade, índice de massa corporal e massa magra (p< 0,05). A gravidade da doença pulmonar e a insuficiência pancreática não apresentaram correlação com a alteração da DMO observada. O inquérito alimentar revelou percentuais de adequação para os nutrientes estudados acima de 100% da recomendação nutricional preconizada pelo Consenso Europeu de Fibrose Cística. Os resultados desse trabalho apresentaram alteração significativa na DMO e estão em concordância com os achados da literatura científica. A manutenção do estado nutricional adequado pode ter efeito protetor para a massa óssea nas regiões da coluna lombar e do corpo total. A prevenção do déficit ósseo se faz importante nesses pacientes, pois pode reduzir o risco de fraturas / Abstract: Cystic fibrosis (CF) is a genetic autossomic recessive disease more frequently diagnosed in the caucasian population. The major clinical manifestations of CF are pulmonary chronic disease, pancreatic insufficiency, increase of the electrolytes levels in the sweat and male infertility. Despite the advances in clinical and nutritional treatments in the last years, complications not related to the physiopathogeny of CF are described such as a significant reduction of the bone mineral density (BMD). The objective of this study was the evaluation of the BMD in patients with CF and its association with the variables examined. This study was transversal descriptive type involving CF patients regularly attending the Clinical Hospital at Unicamp. Twenty-nine individuals 10 years old or older with a confirmed cystic fibrosis diagnosis were selected. Their nutritional status was assessed by anthropometrics indices weight/age, height/age and body mass index (kg/m2). The BMD of lumbar spine (segment L2-L4), femur and whole body was evaluated by a dual-energy x-ray absorptiometry (DEXA). This exam also allows the measurement of both lean and fat mass (kg). The dietary food intake was determined using a three day period registration and a pulmonary function test was used for assessing direct values of the forced vital capacity and the forced expiratory volume at the first one second. The mean age of the studied population was 14.4 years old (±3.85) with prevalence of the male gender (58.6%). The weight/age and height/age Z-scores demonstrated high percentage of malnutrition: 60.9% and 65.2%, respectively. The evaluation of bone densitometry determined that 58.6% of the patients had reduced bone mineral density at the lumbar spine and 42.3% of them had it on the entire body. There was a positive correlation between BMD of the lumbar spine, femur and whole body and age, body mass index and lean mass (p< 0.05). The severity of the pulmonary disease and the pancreatic insufficiency had no association to the bone mineral density observed. The dietary food intake revealed adequate values for nutrients that were beyond a 100% of the European Consensus on Cystic Fibrosis recommendation. The results on this study demonstrated a significant change in BMD and this finds are in concordance to the scientific literature. The maintenance of an adequate nutritional status may guarantee effective protection for bone mass loss at the lumbar spine and at the whole body. A prevention bone mineralization is important in CF patients because it might reduce fracture risk / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestre em Saude da Criança e do Adolescente
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Alterações induzidas pela desnutrição pos-natal nos efeitos comportamentais deantagonistas dopaminergicos em ratos jovensSantos, José Eduardo Tanus dos 25 September 1997 (has links)
Orientador: João Batista Teixeira da Rocha / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-22T22:14:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 1997 / Resumo: A desnutrição durante períodos críticos do desenvolvimento pode induzir alterações nas respostas comportamentais às drogas de ação central. Neste estudo, avaliaram-se os efeitos da desnutrição pós-natal sobre as respostas comportamentais de ratos com 21 dias de idade a antagonistas dopaminérgicos. Utilizou-se clorpromazina (O, 2,5, 5, 10 and 20 mg/kg), haloperidol (O, 0,125, 0,25, 0,5, 1 or 2 mg/kg) e SCH23390 (O, 0,3, 0,6 and 1,2mg/kg). Avaliou-se a atividade locomotora 1 h 3~min, 4h 30min, 7h 30min e 10h 30min após a injeção de clorpromazina ou haloperidol. A catalepsia induzida por estas drogas foi avaliada 3h, 6h e 9h após a injeção. Os efeitos SCH23390 foram avaliados 25 min, 1 h 10 min, 1 h .55min e 2h 40min após a injeção. Todas as droga~ foram injetadas em dois dias consecutivos. No primeiro dia, os ratos desnutridos tratados com salina apresentaram atividade locomotora mais intensa do que os normais. A inibição da atividade locomotora foi menos intensa nos ratos desnutridos do que nos animais normais 4h 30min após a injeção de clorpromazina e 7h 30min após a injeção de haloperidol. O SCH23390 produziu efeitos similares sobre a atividade locomotora do~ animais normais e desnutridos. No segundo dia. houve uma tendência a respostas menos intensas dos animais desnutridos em comparação com os normais, apenas para os animais que receberam 5 mg/kg de clorpromazina ou 0,5 , 1 e 2 mg/kg de haloperidol. No primeiro dia, os animais desnutridos tiveram respostas cataleptogênicas menos intensas à clorpromazina e ao haloperidol 6h após a injeção. Os efeitos cataleptogêni,ÇO'S do SCH23390 foram menos intensos nos animais desnutridos 1 h 55miQ após a injeção. No segundo dia, os efeitos das três drogas sobre a catalepsia foram menos intensos nos animais desnutridos, porém as diferenças não foram tão evidentes quanto aquelas notadas no primeiro dia. Estes resutados sugerem que os efeitos comportamentais da clorpromazina, haloperidol e SCH23390 sejam menos persistentes nos ratos desnutridos quando comparados com os efeitos em animais normais. Estas diferenças podem ser devidas a alterações farmacocinéticas induzidas pela desnutrição / Abstract: Undernutrition during critical periods of development may cause changes in the behavioral responses of rats to centrally acting drugs. In the present study, the effects of undernutrition during suckling on the behavioral responses of 21-days-old rats to chlorpromazine (O, 2.5, 5, 10 and 20 mg/kg) or haloperidol (O, 0.125, 0.25, 0.5, 1 or 2 mg/kg) were ex~mined. Locomotion was assessed at 1 h30min, 4h30min, 7h30min and 10h30min, and catalepsy was scored at 3h, 6h and 9h after drug administration. Drug was injected on two consecutive days. On day 1, saline-treated undernourished rats showed significant greater locomotion activity than did normal rats. The neurolepticinduced inhibition of locomotor activity in undernourished rats was significantly less than that observed in normal rats from 4h30min to 10h30min (chlorpromazine) or from. 7h30min to 10h30min (haloperidol). On day 2, a similar trend was observed but only in rats injected with 5 mg/kg chlorpromazine or 0.5, 1, and 2 mg/kg haloperidol. On day 1, the catalepsy scores at 3 h revealed no significant difference between nutritional groups, but at 6h. undernourished rats responded significantly less to chlorpromazine or haloperidol. On day 2, undernourished rats were less responsive to neuroleptics than normal rats, but the effect was not so evident as observed on day 1. The present results suggest. that the behavioral effects of chlorpromazine and haloperidol are less persistent in undernourished rats, possib/y due to differences in drug distribution and elimination, when compared to well-nourished rats / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências
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Efeito diabetogenico da aloxana em ratos submetidos a desnutrição proteicaPrada, Francisco Jose Andriotti 01 April 2000 (has links)
Orientador: Maria Alice Rostom de Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T05:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2000 / Resumo: A desnutrição infantil pode predispor ao diabetes em adultos, pois afeta a secreção de insulina e o metabolismo de carboidratos. Por outro lado estudos com ratos mostram que a desnutrição protéica pode atenuar a manifestação do diabetes aloxânico. O presente estudo tem como objetivo ampliar o conhecimento sobre os efeitos da ingestão crônica precoce da dieta hipoprotéica sobre a ação diabetogênica da aloxana, em modelo experimental. Foram utilizados ratos Wistar (21 dias), separados em 2 grupos, de acordo com a dieta recebida: controle (C)- dieta normo (17%) e desnutridos (D)- dieta hipo (6%) protéica, por 60 dias. Ao final, parte dos animais recebeu injeção de aloxana (40mg/kg,i.v.) para indução do diabetes. Foram avaliados in vivo: ganho de peso corporal, glicemia basal, insulinemia basal, ingestão hídrica, ingestão alimentar, incidência de diabetes (glicemia > 13,75 mM), área sob a curva de glicose (AG) e insulina (AI), taxa de remoção da glicose (KITT), insulina do soro e do pâncreas. Em ilhotas isoladas tratadas in vitro com aloxana verificamos: secreção de insulina estimulada por glicose e por arginina e oxidação de glicose. O ganho de peso foi maior nos animais O (1,49 :!: 0,42) do que nos C (-0,57 :t 0,72 g). A glicemia basal foi menor nos D (106,6 :!: 5,86) que nos C (351,6 :!: 49,7 mg/dl) e a insulinemia semelhante nos 2 grupos (C= 0,80 :!: 0,10; 0= 1,05 :!: 0,12 ng/ml). A ingestão hídrica foi maior no grupo C (116,6 :!: 44,7) do que no O (81,9 :!: 14,7 ml/kg), assim como a ingestão alimentar neste grupo (C= 95,4 :!: 44,1; 0= 47,2 :!: 16,9 g/kg). A incidência de diabetes foi maior no C(84,6%) do que no 0(25%). A insulina do pâncreas foi maior no grupo O (36,52 :!: 11,88) do que no grupo C (12,05 :!: 4,65 ng/mL). A AG após administração de aloxana foi maior no grupo C(41889,9 :!: 9264) do que no grupo 0(17858,2 :!: 2974,5 mmol/U120 min.), não havendo diferença significativa entre os AI de ambos os grupos (C = 83,3:!: 13,6 e D = 78,4:!: 19,1 mmol/U120 min.). O tratamento com aloxana in vitro reduziu: (1) a liberação de insulina pelas ilhotas C (78%) e O (47%), estimuladas por glicose 22.0 mM; (2) a oxidação de glicose pelas ilhotas C (53%) e D (33%) na presença de glicose 16.7 mM e (3) a liberação de insulina pelas ilhotas C (53%) e D (33%) estimuladas por arginina (20.0 mM).Este resultados sugerem que a restrição protéica precoce atenuou a severidade do diabetes manifestado pelos animais em conseqüência de adaptações tanto no processo secretório de insulina pelas ilhotas pancreáticas quanto na ação periférica do hormônio / Abstract: In the present study we examined the effect of protein dietary levei on pancreatic function evaluated by measurements, of serum glucose levels in the fed state, serum glucose and insulin levels during an oral glucose tolerance test, and serum glucose levels during a subcutaneous insulin tolerance test performed after administration of a single endovenous, dose or alloxan to rats fed a low (6%) or a normo (17%) protein. In a separate set of experiments, we examined insulin release in response to glucose and arginine and glucose oxidation rates in pancreatic islets treated "in vitro" with alloxan, isolated from rats fed the low and the normo protein diets. After alloxan administration the incidence of mild hyperglycemia in the fed state (diabetes) was higher among rats fed normo protein diet than among those fed low protein diet. After glucose load the area under serum glucose cUlve (AG) was lower in low protein rats than in normal proteins rats, while then were no differences between the two groups in the area under serum insulin curve (AI). In addition, after an insulin load, the serum glucose disappearance rate (KITT) was higher in lower protein than in normal protein rats. Alloxan induced significant decrease in glucose oxidation and in glucose induced and arginine induced insulin release by islets isolated from normal and low protein rats. The decrease in both insulin release and glucose oxidation was greater in normo than in low protein rat islets. In summary, alloxan was less effective in producing hyperglycemia (diabetes) in rats fed low protein diet than normo protein diet. This protection was associated to an increased peripheral sensibility to insulin action and a better préservation of glucose oxidation and glucose induced insulin release by pancreatic islets exposed to alloxan in protein restricted than in normal protein rats / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular
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Nutrição e AIDS : aspectos epidemiologicos do estado nutricional de pacientes portadores do HIV/AIDS, acompanhados no Hospital das Clinicas da UNICAMPMagro, Daniéla Oliveira, 1971- 30 July 2001 (has links)
Orientadores : Djalma de Carvalho Moreira Filho, Monica Jacques de Moraes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T10:09:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2001 / Resumo: Este traballio relaciona o estado nutricional de indivíduos infectados pelo HIV/AIDS, em diferentes fases da doença. Foi desenvolvido um estudo analítico, longitudinal prospectivo de coortes dinâmicas de portadores de HIV/AIDS, acompanhados no Hospital das Clinicas da UNICAMP, entre os anos de 1998 a 2000. Foram avaliados 310 pacientes por até 4 vezes. As avaliações englobaram variáveis antropométricas, bioquímicas e imunológicas. Segundo a classificação da infecção pelo HIV, nas categorias predominantes neste estudo, A2 (assintomáticos) e A3 e C3 (doentes de AIDS), a maioria dos indivíduos apresentou-se com peso adequado ao longo do seguimento, independentemente da fase da doença. A introdução do tratamento com antiretrovirais modificou o perfil nutricional de pacientes infectados pelo HIV/AIDS. Atualmente, a desnutrição é menos prevalente (10% dos casos) nos indivíduos tratados com antiretrovirais, quando comparamos com o período pré-antiretroviral (60% dos casos).
Ocorreram mudanças qualitativas na prevalência dos distúrbios nutricionais e atualmente encontramos 30% de sobrepeso e obesidade. Observou-~e, nesta coorte, melhora dos estados imunológico, clinico e nutricional, concomitante ao uso da terapia antiretroviral combinada de alta potência (HAART), com baixa probabilidade de morte por AIDS em 12 meses (0,49%). Porém, estes dados mostram que a desnutrição está associada a um risco 4 vezes maior de morrer de AIDS, quando comparada a outros estados nutricionais. A análise de regressão linear múltipla mostrou que o estado nutricional dos sujeitos infectados pelo
HIV/AIDS deve ser mantido, segundo o!MC (índice de massa corpórea), por volta de 22 a 23 Kg/m2(peso adequado), pois os indivíduos que se encontravam nesta faixa apresentaram menos co-fatores clinicos, bioquímicos e imunológicos associados a imunodeficiência. O estado nutricional não interferiu nos níveis plasmáticos de vitaminas lipossolúveis, como também a imunodeficiência não foi um co-fator associado à diminuição sérica de vitaminas. A dislipidemia e as alterações na redistribuição de gordura corporal, devem ser diagnosticadas e tratadas rotineiramente na infecção pelo HIV/AIDS, por fazerem parte do
atual espectro de manifestações da infecção, seja pelo prolongamento da sobrevida, seja por ação das drogas atualmente utilizadas / Abstract: This study is a report on the nutritional status of individuals infected by mv /AIDS at various stages of the disease. It is an analytical, prospective longitudinal study of dynamic cohorts of individuals with HIV/AIDS, conducted ftom 1998 to 2000, at the Hospital das Clinicas,UNICAMP. This study consisted of310 patients who were each evaluated up to 4 times at four-month intervals. The assessments covered anthropometric, biochemical and immunologicalvariables. During folIow-up, most of the individuais in the here most ftequent categories of the classification of mv infection, which were A2(asymptomatic), A3, and C3(patients with AIDS), presented adequate weight, independent of the disease stage. The introduction of antiretroviral treatment modified the nutritional profile of mv /AIDS infected patients. Nowadays, malnutrition is less prevalent in patients treated with antiretroviral drugs (10%) in comparison with the antiretroviral perlod (60%). Qualitative changes have taken place and at present; there is a 30% prevalence of overweight and obesity. In this cohort study it was observed that concomitandy with the use of HAART, the immunological, clinical and nutritional condition improved and in 12 months the death probability due to AIDS was low (0.49%). However, these data demonstrate that malnutrition is related to a death risk 4 times greater in the case of AIDS than in other nutritional conditions. The multiple linear regression analysis demonstrated that jf the BMI of individuals infected with mv /AIDS was maintained at 22 to 23 Kglm2 (adequate weight) , the individuais presented less clinical, biochemical and immunological co-factors associated with immunodeficiency. The nutritional conditions did not affect the plasmatic levels of liposoluble vitamins and immunodeficiencywas also not found to be associated with the vitamin serum reduction. In order to prolong survival and to enhance the action of the drugs now being used in patients with mv/ AIDS, alterations like the redistribution of body fat (dislipidemia) should be
routinely diagnosed and treated because they are part of the present spectrum of this infectious disease manifestations / Doutorado / Doutor em Saude Coletiva
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Participação das proteinas quinases C e A na modulação da secreção de insulina em ilhotas de Langerhans de ratos submetidos a restrição proteicaFerreira, Fabiano 03 August 2018 (has links)
Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:28:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2004 / Resumo: A regulação da secreção de insulina em resposta à alimentação é determinada pela ação direta de nutrientes sobre as células B pancreáticas e pelos efeitos indiretos mediados pela ativação hormonal e neural. Sabe-se que 5()o,Io da insulina secretada no período pós-prandial imediato depende da estimulação colinérgica e que no diabetes tipo 2, a fase rápida da secreção de insulina é a primeira a desaparecer. llhotas de ratos desnutridos também apresentam perfil de secreção de insulina sem o padrão bifãsico. Sabe-se que a regulação da secreção de insulina estimulada por glicose pode ser modulada pelas vias que envolvem a ativação das proteínas quinas e C e A (pKC e PKA). Assim, o presente trabalho teve como objetivo estudar a participação das proteínas PKA e PKC na modulação do processo secretório de insulina em ilhotas isoladas de ratos submetidos à restrição protéica. Os animais foram divididos em dois grupos experimentais, um grupo controle tratado com dieta normoprotéica (NP) (17%) e outro grupo desnutrido tratado com dieta hipoprotéica (LP) (6%). Após dois meses de desnutrição os animais foram sacrificados para o início dos experimentos. llhotas isoladas do pâncreas destes animais foram utilizadas para protocolos de secreção estática e dinâmica de insulina, imunohistoquímica para as enzimas PKA e PKC e análise da expressão gênica para as proteínas em questão. Nossos resultados demonstraram que a dieta LP reduziu a massa corpórea e a albuminemia dos animais. O grupo de animais submetidos a dieta LP mostrou níveis !elevados de ácidos graxos livres no plasma e redução dos níveis de proteínas totais em relação ao grupo NP, caracterizando o quadro de desnutrição. A insulinemia no período alimentado apresentou-se reduzida nos animais LP e a glicemia mantida, sugerindo uma maior sensibilidade dos animais LP ao hormônio insulina.. A resposta secretória de insulina pelas ilhotas LP foi menor que a resposta das ilhotas NP, quando estimuladas com o forbol éster (PMA), um potente estimulador da PKC e Forskolin, um potente estimulador da PKA .Quando ilhotas foram estimuladas com PMA (400 11M) o aumento da secreção de insulina foi significativamente maior no grupo NP quando comparado ao grupo LP. A técnica de imunohistoquímica, revelou uma diminuição na quantidade das enzimas PKA e PKC, estes resultados foram confirmados utilizando-se a técnica de Westem Blotting, onde foram encontrados níveis reduzidos da PKC e PKA em aproximadamente 30% no grupo LP (p<0.05). RT -PCR mostrou uma diminuição também na quantidade de mRNA para ambas as enzimas em estudo, o que nos sugeriu uma possível relação entre a restrição protéica, a qual o animal foi submetido, e alterações na transcrição de genes que codificam enzimas relacionadas com o processo secretório. Até o momento podemos concluir que, a alteração no conteúdo destas enzimas neste modelo experimental permite explicar, pelo menos em parte, a diminuição na resposta secretória encontrada na estimulação com glicose, PMA e F orskolin. Mais ainda, a restrição protéica no período pós-desmame induziu modificações transcricionais para enzimas chave no processo secretório de insulina / Abstract: The effects of carbamylcholine (CCh) and phorbol12-myristate 13-acetate (PMA) on insulin secretion were studied in pancreatic islets from rats maintained on a normal (17%; NP) or low (6%; LP) protein diet. Isolated islets were incubated for 1 h in Krebs-bicarbonate solution containing 8.3 mmol/L glucose, with orwithoutPMA (400 J.UI1ol/L) and CCh. Increasing concentrations ofCCh (0.1-1 000 _mol/L) dose dependent1y increased the insulin secretion by islets from both groups of rats. However, the dose--response curve to CCh was shifted to the right in LP islets with an ECso of2.15 :t: 0.7 and 4.64:t: 0.1 _mol CCh/L in NP and LP islets, respectively (P < 0.05). The PMA-induced insulin secretion was three-fold higher in NP compared to LP islets. Western bloting revealed that the PKCa. and PLCJ31 contents ofLP islets were 300,10 lower than in NP islets (P < 0.05). In addition, PKCa. mRNA expression was reduced by 50% in islets from LP rats. In conclusion, a reduced expression ofPKCa. and PLCJ31 may be involved in the decreased insulin secretion by islets from LP rats following stimulation with CCh and PMA. We also investigated the efIects offorskolin, a stímulator ofadenylyl cyc1ase, on insulin secretíon by pancreatic islets from rats fed a normal (17%; NP) or low (6%; LP) protein diet for 8 weeks. Isolated islets were incubated for 1 h in Krebs-bicarbonate solution containing 8.3 mmol glucose/L, with or without 10 J.UI101 forskolin/L. The forskolin-induced insulin secretion was higher in NP than in LP islets (P < 0.05). Western Iblotting revealed that the amount of the alpha cata1ytic subunit of protein kinase A (pKAa.) was 35% lower in LP compared with NP islets (P < 0.05). Moreover, PKAa. MRNA expression was reduced by 300.10 in islets from LP rats (P < 0.05). Our results indicated a possible relationship between a low protein diet and a reduction ofPKAa. expression. These alterations in PKAa. may be partly responsible for the decreased insulin secretion by islets from rats fed a low protein diet / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular
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Modulação colinergica da secreção de insulina em presença de leucina em ilhotas de ratos submetidos a restrição proteicaFiliputti, Eliane 13 February 2003 (has links)
Orientador: Everardo Magalhães Carneiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:28:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2003 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo estudar alguns dos possíveis determinantes da resposta pancreática deficiente à estimulação com leucina (L) e a associação com agente colinérgico carbacol (CCh), tendo os ratos submetidos à dieta hipoprotéica como modelo experimental. Os sinais de desnutrição tais como: baixo peso corporal, hipoalbuminemia, teores elevados de glicogênio e de gordura hepática, estiveram presentes nos animais que receberam dieta hipoprotéica. Esses animais apresentaram ainda menores níveis de insulina plasmática. A análise do aminograma mostrou que aminoácidos importantes com leucina, valina, arginina e taurina estão reduzidos neste modelo experimental, tanto no jejum como no alimentado. Por outro lado, os estudos "in vitro" demonstraram menor oxidação de leucina em ilhotas de rato hipoprotéicos. A monitorização do efluxo de cálcio mostrou aumentado em ilhotas LP em presença de L e CCh. Contudo a resposta secretória de insulina das ilhotas LP foi menor, comparada com a dos animais NP quando estimulada com leucina, potássio na ausência ou na presença de CCh. O mesmo resultado foi observado quando foram utilizados os agentes potencializadores tais como: gliceraldeído, cetoisocaproato, IBMX e PMA em presença de leucina. Com o uso da técnica de Westem Blotting observamos redução na quantidade de proteína p70S6K e AKT e por RT-PCR diminuição da quantidade de mRNA para a p70S6K. Diante disso o período de restrição protéica a que foram submetidos esses animais alterou em ilhotas pancreáticas a oxidação da leucina, o movimento de cálcio, e conseqüentemente a secreção de insulina frente à leucina, potássio, agentes potencializadores e CCh. Por fim, a associação destes resultados com a redução de proteínas como a p70S6K e AKT em ilhotas desses animais pode explicar, pelo menos em parte, a pobre secreção de insulina observada neste modelo experimental / Abstract: The aim of the present work was to study the effect of low protein diet (LP), m particular the role of reduced intake of the amino acid leucine (L) m the mechanism of pancreatic islet insulin secretion. Male Wistar rats submitted to LP (6% protem) were compared to age and gender matched controls maintamed with normal protein diet (NP) (17% protein). Pancreatic islets isolated from NL and LP groups were submitted to various glucose concentrations and stimulatory drugs to compare the amount of the insulin secretion. The insulin was measured by radioimunoassay. The level of leucine oxidation and 45Ca outflow were also compared by 14(:02 output and 45Ca efflux, respectively. Western Blottillg was applied to compare the levels of p70S6k.l and Akt and RT- PCR to evaluate the levels ofp70S6k.1 mRNA in both groups. LP rats presented with significantly lower body weight, serum protein and albumin, but higher glycogen and liver fat. No differences in serum glucose levels were observed. The aminogram analysis from serum demonstrated that LP groups either fasted or fed had significantly lower levels of leucine, valine, arginine, taurine compared to NP. In vitro insulin secretion in the LP group was significantly lower in the basal situation and in response to stimulation with carbachol, potassium, gliceraldeid, PMS, KIC, IBMX. The addition of the amino acids leucine in the media did not elevated the insulin secretion in the LP group to levels comparable to NP group. In addition, leucine oxidation and calcium out flow from pancreatic islets of LP group were significantly lower. The p70S6k-l and Akt protein expression and p70S6k-1 mRNA levels were lower in LP group as revealed by Westem Blotting and RT-PCR analysis, respectively. These findings indicate that LP diet let to pancreatic islets dysfunction and that correlated with reduced calcium outflow and decreased leucine oxidation in those cells. The mechanisms may involve lower systemic leucine levels, and lower expression of the signaling elements p70S6k.1 and Akt / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular
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Atividade oxidante-antioxidante de macrófagos alveolares em ratos endotoxêmicos submetidos à desnutrição neonatalFélix de Melo, Juliana January 2007 (has links)
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Previous issue date: 2007 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A endotoxemia está associada a uma ampla e inespecífica cascata de
eventos. Isto resulta na secreção de uma variedade de potentes mediadores próinflamatórios
e citocinas produzidos primariamente por macrófagos e monócitos
ativados. Na desnutrição, a maioria dos mecanismos de defesa do organismo está
prejudicada. Assim, a infecção é a maior causa de morbidade e mortalidade em
indivíduos severamente desnutridos. O presente trabalho tem por objetivo revisar
mecanismos patogênicos da endotoxemia na desnutrição precoce seguida de
recuperação nutricional
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Repercussão do treinamento físico moderado e intenso nos mecanismos de defesa de ratos adultos desnutridos precocementeMaria Barros Delmondes, Glívia 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Objetivo: Analisou-se o impacto do treinamento físico moderado (TFM) e intenso (TFI)
sobre os mecanismos de defesa em ratos adultos desnutridos precocemente. Métodos:
Utilizou-se 59 ratos machos Wistar, em que no período de aleitamento foram divididos em
dois grupos: Desnutrido, amamentados por mães alimentadas com a dieta hipoprotéica
(Dieta Básica Regional, com 7,87% de proteína) e Nutrido, amamentados por mães
submetidas à dieta normoprotéica (Labina, com 23% de proteínas mistas). Aos 60 dias de
vida, metade dos animais de cada grupo foi submetida ao TFM e TFI, constituindo os
grupos: Nutrido Controle (NC), Nutrido treinado moderado (NTM), Nutrido treinado
intenso (NTI), Desnutrido Controle (DC), Desnutrido treinado moderado (DTM) e
Desnutrido treinado intenso (DTI). O TFM foi através da natação (6 semanas/ 5
dias/semana; 45 min/dia), com aumento progressivo da carga conforme o peso corporal, até
atingir um máximo de 3%, e o TFI (6 semanas/ 5 dias/semana; 90 min/dia) com aumento
progressivo até atingir um máximo de 5%. Realizaram-se coletas de sangue para contagem
total (CT) e diferencial (CD) de leucócitos, 24 horas após o último treino, e, na sexta
semana, realizou-se lavado broncoalveolar para determinar a taxa de fagocitose e a
produção de óxido nítrico (ON) de macrófagos. Resultados: Após o TFM, o grupo NTM
apresentou valores maiores da CT e CD de leucócitos, taxa de fagocitose e produção de ON
em relação ao controle e ao DTM. O grupo DTM apresentou valores maiores da CT e CD,
em algumas células após a 5ª semana, e taxa da fagocitose em relação ao DC. Enquanto
que, após o TFI, os grupos NTI e DTI apresentaram menor taxa de fagocitose, aumento da
produção de ON e valores maiores de CT e CD no inicio com redução desses valores ao
final do treino e em comparação ao controle. Conclusão: O TFM proporcionou melhora
nos mecanismos de defesa nos animais nutrido, já no grupo desnutrido esses efeitos
benéficos apresentaram um retardo na resposta de algumas células do sistema imune.
Enquanto que, no TFI observou-se aumento de algumas destas variáveis, possivelmente
induzidas por adaptações fisiológicas, e diminuição de outras funções celulares, o que
poderia indicar prejuízo na resposta imunológica
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Desnutrição neonatal: aspectos estruturais e biomecânicos do desenvolvimento da atividade locomotora em ratosMônica Ferraz Teixeira de Barros, Karla January 2006 (has links)
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Previous issue date: 2006 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Para avaliar os efeitos da desnutrição neonatal sobre o desenvolvimento motor, foram avaliadas a ontogênese
dos reflexos, a atividade locomotora e as propriedades mecânicas dos músculos esqueléticos. Ratos
Wistar foram divididos em grupos normais e desnutridos, de acordo com a dieta oferecida as lactantes
durante o período de aleitamento (1° ao 21° dias p6s-natais - PN). Ap6s o desmame, os filhotes receberam
dieta normal. A avaliação dos reflexos foi realizada diariamente, ate o 21° PN. A atividade locomotora foi
avaliada no 8°, 14°, 17° e 21° PN. A avaliação biomecânica dos diferentes componentes do musculo
( contrátil/CC, elástico em serie/CES e elástico em paralelo/CEP) foi realizada oas 25 e 90 PN, nos
músculos solear e extensor longo dos dedos (EDL). Uma análise histoquímica (coloração ATPase) foi também
realizada. A desnutrição induziu atrasos na maturação dos reflexos de aversão ao precipício, geotaxia
negativa, endireitamento em queda livre, colocação pelas vibrissas e resposta ao susto. A atividade
locomotora sofreu alterações devido a desnutrição: encontrou-se redução na distância e velocidade
no 8° e
14° PN, seguida por um aumento aos 17 e 21 PN. O tempo de imobilidade mostrou-se reduzido nos desnutridos
aos 17 e 21 PN. A análise biomecânica demonstra que a desnutrição induziu a: redução da força em ambos os
músculos estudados, aumento na velocidade máxima de encurtamento aos 25 dias em ambos os músculos, aumento
na resistência a fadiga no solear a 25 PN, e aumento na resistência ao estiramento passivo em ambos os
músculos, aos 25 PN. Os parâmetros do CES não foram afetados. Não se observaram diferenças em relação a
proporção de tipos de fibra musculares, porem a desnutrição induziu a uma redução na área de secção
transversa, com exceção do EDL aos
25 PN. Os resultados permitem concluir que as modificações observadas em algumas propriedades mecânicas
tem origem na desnutrição imposta no período neonatal, sendo provavelmente devidas a alterações nos
processos de maturação muscular. As influencias dos retardos nos processos de maturação sobre o
desenvolvimento e organização da atividade locomotora são aqui discutidas
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