Orientadora : Profª. Drª. Iara José de Messias-Reason / Co-orientadores : Prof. Dr. Renato Mitsunori Nisihara e Prof. Dr. Mario Teruo Sato / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Medicina Interna. Defesa : Curitiba, 27/08/2014 / Inclui referências : f. 58-64 / Resumo: Introdução: A Degeneração Macular Relacionada a Idade (DMRI) é a principal causa de cegueira no ocidente em pessoas acima de 65 anos de idade. Nos EUA, estima-se que mais de 8 milhões de pacientes tenham DMRI. A idade é o principal fator de risco e com o aumento da expectativa de vida, espera-se maior número de casos nos próximos anos. A atividade inflamatória na fisiopatologia da DMRI tem sido cada vez mais estudada e cresce em importância a cada dia, com vários mecanismos propostos, com especial atenção ao sistema complemento. Objetivos: Avaliação do papel da lectina ligante de manose (MBL) do sistema complemento em pacientes com DMRI. Pacientes e Métodos: Foram avaliados 136 indivíduos (60 homens e 76 mulheres), com idade acima de 55 anos. Dentre eles, 68 eram portadores de DMRI e 68 eram controles. Esses foram pareados com os pacientes de acordo com idade, sexo, características étnicas, socioeconômicas e origem geográfica. A concentração sérica de MBL foi avaliada através do método TRIFMA. O estudo foi realizado no Centro da Visão do Hospital de Clínicas da Universidade Federal do Paraná e compreendeu: consulta oftalmológica completa (exame oftalmológico, tomografia de coerência óptica com protocolo específico); coleta de sangue, análise laboratorial e estatística. Resultados: As concentrações de MBL não mostraram diferenças significantes quanto a etnia, idade, sexo, IMC ou tabagismo entre grupos de pacientes e controles. A mediana da MBL para os casos foi de 608 ng/mL (30 - 3415ng/mL) e controles 739 ng/mL (30 - 6039 ng/mL); p = 0,4770. Comparando-se DMRI exsudativa com a forma seca, observou-se menor concentração de MBL na forma exsudativa (476 ng/mL) em relação a forma seca (893 ng/mL). Entretanto, esses resultados não mostraram diferença estatisticamente significante (p = 0,1011). Houve discreta diminuição, não significativa, dos níveis de MBL com o avanço da idade nos controles. Conclusões: Os resultados obtidos não demonstraram associação entre a concentração sérica de MBL e a DMRI ou com suas formas clinicas exsudativa e seca. Palavras-chave: Degeneração macular relacionada a idade. Sistema complemento. MBL. Marcadores inflamatórios. / Abstract: Introduction: Age Macular Degeneration (AMD) is the leading cause of blindness in the Western population over 65 years. In the U.S., more than 8 million patients have some degree of AMD. The major risk factor for AMD is the age and due to the increase in the global life expectancy, a higher number of cases are expected. The inflammatory activity in the pathophysiology of the disease has been studied for years, gaining importance in the recent years. Several mechanisms have been proposed with special attention paid to the complement system. Objectives: To evaluate the role of mannose-binding lectin (MBL) of complement system in AMD patients. Patients and Methods: A total of 136 subjects with age over 55 years were evaluated (68 patients with AMD and 68 controls). All subjects were followed up at the Vision Centre of the Hospital de Clínicas - Federal University of Paraná in Curitiba - Brazil. For all individuals complete ophthalmologic exams and optical coherence tomography using a specific protocol were performed. Blood samples were collected for MBL measurement. Results: There was no difference regarding ethnicity, age, gender, BMI or smoking habits between patients and controls. The median MBL levels for AMD patients was 608 ng /mL (30-3415 ng/mL -) and for the controls 739 ng/mL (30-6039 ng/mL), with no statistically significant difference (p= 0,4770). There was no difference either when comparing exudative with dry AMD, with median MBL of 476 ng/mL in the exudative form and 893 ng/mL in the dry form (p=0,1011). There was no difference between men and women regarding MBL serum levels and a not significant decrease in MBL levels was observed with aging in controls. Conclusions: There was no association between MBL serum levels and AMD or with the exudative and dry clinical forms of AMD. Keywords: Age macular degeneration, complement system, MBL, inflammatory markers.

Orientador: Ricardo Renzo Brentani / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-21T09:57:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Graner_Edgard_D.pdf: 4098288 bytes, checksum: 90e9e5ee2f3fe892829a219199b0b25b (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Prions são partículas protéicas infecciosas, compostas por isoforma anormal (PrPsc) de uma proteína expressa constitutivamente no sistema nervoso central (PrPc), que causam doenças neurodegenerativas no homem e em animais. Estas doenças são caracterizadas pela deposição de material amilóide, degeneração espongiforme do tecido cerebral e perda neuronal (PRUSINER e cols., 1991). Baseado na presença de uma fase aberta de leitura na fita de DNA complementar àquela que codifica o PrPc e na teoria da hidropaticidade complementar dos amino ácidos (BLALOCK e SMITH, 1984), este trabalho descreve uma proteína de 60-66 kDa, presente na membrana celular de neurônios e células gliais de camundongos e ratos. Para isto utilizou-se um soro produzido em camundongos através da imunização com o peptídeo HVATKAPHHGPCRSSA, deduzido a partir da fita de DNA complementar ao gene que codifica o PrPc. Foi demonstrado também, através de experimentos de ligação in vi tro, que esta proteína tem a capacidade de se ligar ao PrPc. A distribuição da proteína de 60-66 kDa no cérebro de camundongos e ratos foi estudada através de reações imunohistoquímicas, que mostraram positividade principalmente no hipocampo, tálamo e nas células de Purkinje do cerebelo, áreas do cérebro freqüentemente afetadas pelas doenças causadas por prions, sugerindo sua participação na patogênese destas doenças. A glicoproteína de membrana basal laminina também foi detectada nestas mesmas regiões do cérebro, assim como a capacidade de interação desta com PrPsc demonstrada através de experimentos de ligação in vitro. Estes dados sugerem a participação desta proteína de matriz extracelular na formação dos depósitos amilóides das doenças causadas por prions / Abstract: Prions are slow infectious pathogens which cause transmissible neurodegenerative Jackob disease, diseases in both humans (kuru, Creutzfeldt-Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome and familial fatal insomnia) and animals (scrapie, bovine spongiform encephalopaty, transmissible mink encephalopaty and chronic wasting disease). The infectious prion protein (Prpsc) is an isoform of a cell membrane glycoprotein (Prpc) with unknown function. Prpsc probably induces conformational changes in Prpc resulting in intra and extracellular deposition of insoluble proteinaceous material. This material contains both protease resistant PrP (PrP 27-30) and PrPsc, shows amyloid properties (Congo red staining and birefringence under polarization microscopy) and induces vacuolar degeneration of the brain (PRUSINER, 1991). In this work we demonstrated the existence of a 60-66 neuron surface protein that binds prions in vitro, using the complementary hydropathy concept (BLALOCK e SMITH, 1984). This protein was detected in mouse and rat brain, by immunoperoxidase technique, in the tha1amus, hippocampus and Purkinje cells of the cerebellum, regions of the brain where PrPsc accumulates in prion diseases both infectious or inherited. This fact suggests a role for the 60-66 kDa protein in the pathogenesisof prion diseases. The same regions of the brain were strongly positive for the basement membrane glycoprotein laminin. In addition, we demonstrated that purified PrPsc binds to nondenaturated laminin in ligand blot assays. Our results suggest that the 60-66 kDa cell surface protein can play a role in the prion internalization and that laminin possibly mediates the PrP amyloid formation and deposition / Doutorado / Patologia / Doutor em Ciências

Orientador : Francesco Langone / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T21:34:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RodriguezdelaHoz_CristianeLucia_M.pdf: 7821796 bytes, checksum: 830e73a32d4dfd4b30ff2ee2154ef71d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A axotomia em um nervo periférico leva ao desencadeamento do processo degenerativo na porção distal à lesão, denominado degeneração Walleriana (DW). Macrófagos e células de Schwann fagocitam e removem os axônios e a mielina em degradação. Além disso, tais células também são responsáveis pela preparação do microambiente adequado à regeneração axonal, através da produção de moléculas com propriedades neurotróficas e neurotópicas. Dentre essas moléculas destacamse as citocinas, produzidas principalmente pelos macrófagos, os fatores neurotróficos e componentes da matriz extracelular, produzidos pelas células de Schwann. Recentemente, foram obtidas evidências de que o óxido nítrico (NO) estaria também envolvido no desenvolvimento da DW e, conseqüentemente, no processo de regeneração axonaL Contudo, pouco ainda se sabe sobre a participação dos macrófagos e células de Schwann na produção do NO no decurso da DW. Alguns trabalhos relataram que camundongos adultos da linhagem C57BU6J apresentam menor capacidade regenerativa axonal, após lesão do nervo ciático, quando comparados a outras linhagens isogênicas. O objetivo deste trabalho foi investigar possíveis diferenças no padrão temporal degenerativo das linhagens C57BU6J e AIJ, utilizando o modelo de seção do nervo ciática e impedindo-o de regenerar. Neste sentido, analisamos inicialmente o desaparecimento dos neurofilamentos axonais, a fragmentação e degradação da bainha de mielina e a atividade da NADPH-diaforase no coto distal do nervo após 1, 3, 5 e 7 días da axotomia. A quantificação estereológica dos neurofilamentos marcados imunoistoquimicamente mostrou que a defosforilação e degradação são mais precoces na linhagem C57BU6J do que na linhagem AIJ. A histoquímíca do Sudan BJack não revelou diferenças temporais na fragmentação da bainha de mielina entre as linhagens. Porém, evidenciou a presença de um maior número de células envolvidas na degradação da mielina nos camundongos C57BU6J, 3 e 5 dias após a lesão. Por sua vez, a técnica histoquímica para NADPH-diaforase, indicadora da produção de NO, revelou que células presentes no coto distal em degeneração expressaram atividade NADPH-diaforase do 1° ao 7° dia após axotomia, em ambas as linhagens. Contudo, 5 dias após a lesão, as células NADPH-diaforase positivas na linhagem C57BU6J apresentaram, predominantemente, uma marcação intensa e bem delimitada, ao passo que na linhagem AlJ foram mais abundantes aquelas com marcação granular e dispersa. Com o objetivo de melhor compreender a participação do NO na DW, utilizamos técnicas de imunofluorescência e microscopia confocal para identificar as células envolvidas na produção de NO e também analisar a expressão temporal e espacial da isoforma induzível da óxido nítrico sintase (iNOS) após a seção do nervo ciático. Observou-se que a imunoreatividade para iNOS foi intensa em macrófagos e menos evidente nas células de Schwann, estando presente em ambos tipos celulares desde o 10 ao 70 dia após a lesão, para ambas linhagens. Contudo, os macrófagos constituíram o mais abundante contingente celular expressando iNOS. Além disso, na linhagem C57BU6J parece ter havido um ligeiro retardo para o início do recrutamento e ativação dos macrófagos quanto à expressão de iNOS no decorrer da DW, comparativamente à linhagem AIJ. Nossos resultados revelaram diferenças entre as linhagens AIJ e C57BU6J quanto a importantes eventos da DWe que parecem refletir diferentes propriedades intrínsicas dos axônios, bem como diferenças comportamentais em algumas células, talvez sob a ação de citocinas. Tais diferenças entre as linhagens devem ser consideradas em trabalhos de degeneração e regeneração nervosa periférica / Abstract: Axotomy of a peripheral nerve leads to a degenerative process in the distal stump known as Wallerian degeneratíon (DW), in which macrophages and Schwann cells participate ín phagocytosis ofaxon and myelin debris. Such cells are also responsible for preparing a favorable microenvironment to axonal regeneration through production of neurotrophic and neurotopic substances. Among these substances are cytokines produced mostly by macrophages and neurotrophic factors and components of extracellular matrix produced by Schwann ceUS. Recently, evidence emerged showing that nitric oxide (NO) would also be involved in DWand, consequently in lhe axonal regeneration processo However, partícipation of macrophages and Schwann cells in NO production during DW remains to be investigated . It has been reported in the literature that adult C57BU6J mire have a lower axonal regeneration potential afier sciatic nerve lesion when compared to olher ísogenic strains. The aim of this work was to investigate possíble differences in time course of some events in DW process between C57BU6J and AIJ strains, by using complete sciatic nerve transection model with prevented axonal regeneration. First, we studied the time course of neurofilament breakdown, fragmentation and clearance of myelin sheath and NADPH-diaphorase activity in the distal stump, 1, 3, 5, and 7 days afier axotomy. The stereologicaJ analysis of immunoreactive neurofilaments showed lhat the dephosphorylation and degradation process of these elements in C57BU6J strain is faster than in AIJ strain. On the olher hand, Sudan Black histochemistry did noí show differences between strains as regards the time course of myelin sheath fragmentation. However, jt was evident that a higher number of cells were involved in myelin degradation in C57BU6J mice at 3 and 5 days post-surgery. NADPH-diaphorase histochemistry, a marker for NO production, showed positivecells in the distal stump of both strains from the first to the seventh day afier lesion. Positive-cells in C57BU6J strain showed predominantty an intense and well defined labeling 5 days afier transection, while in AlJ strain granular and dispersed labeling were more abundant. With the goal of better understanding NO involvement in DW, immunofluorescence techniques and confocal microscopy were used to identify ceUs related to NO production and to examine the spacial and temporal expression of inducible nitric oxide synthase (iNOS) afier sciatic nerve transection. Immunoreactivity for iNOS was intense in macrophages and less evident in Schwann cells, but it was present in both cells trom the first to the seventh day afier transection in both strains. Macrophages were the main source of iNOS. We noted a delay in macrophage recruitment and activatíon of iNOS expression in the dista! stump of C57BU6J mire when compared to AJJ mies. These differences in DW between C578U6J and AIJ mice may reflect intrinsic properties ofaxons and/or behavioral dífferences in some cells, probably due influence of cytokines. These dífferences between strains should be taken into account in studies of degeneration and regeneration of the peripheral nervous system / Mestrado / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Márcio Benchimol Barros / Banca: Andrey Ivanov / Banca: José Fernander Weber / Resumo: Esta pesquisa possui o intento de investigar a noção de décadence na filosofia Nitzschiana, especificamente em sua obra tardia, uma vez que é neste período de sua filosofia que o conceito possui maior ocorrência. Para tal tarefa, buscase primeiro compreender qual a relação entre a fisiologia e o conceito em questão, só depois então passaremos a analisar o processo de décadence, que teve início com a razão socrática e posteriormente sua continuação com o cristianismo, até culminar na modernidade, onde Nietzsche aponta a arte Wagneriana como a arte da décadence. Abordaremos as obras: Além do Bem e do mal, Assim falou Zaratustra, Anticristo, Crepúsculo dos Ídolos, Ecce Homo, O Caso Wagner e os Fragmentos Póstumos, todas escritas entre o ano de 1883 a 1888. Pensamos que o estudo do conceito se torna indispensável para uma melhor compreensão da filosofia tardia de Nietzsche, principalmente para entender a crítica dos valores que ele conduz contra a sociedade moderna ocidental, sendo assim, este trabalho também contribui com a pesquisa Nietzsche. / Abstract: This research intends to investigate the notion of décadence in Nietzsche 's philosophy, specificalli in his late work, since it occurrence. For this task, we firts try to understand the relation between physiology and the concept approached, then we Will analyze the process of décadence, which began with the Socratic reason and then its continuation with Christianity, culminating in modernity where Nietzsche points to Wagnerian art as the décadence's art. We will discuss the works: Beyond Good na Evil, Thus Spoke Zarathustra, Antchrist, Twilight of Idols, Ecce Homo, The Wagner Case and The Posthumos Fragments, all written between the year 1883 and 1888. We think that the study of de concept becomes indispensable for a better understanding of Nietzsche's late philosophy, especially in ordem to understand the critique of values that He conducts against modern western society, therefore this work also contributes to the Nietzsche research. / Mestre

Orientador: Milton Lahuerta / Banca: Maria Alice Rezende Carvalho / Banca: Maria Teresa Miceli Kerbauy / Banca: Marco Aurélio Nogueira e Silva / Banca: Rubem Barboza Filho / Resumo: Esta tese de doutorado é resultado de uma pesquisa, onde executamos uma investigação sociológica sobre o pensamento político do jurista brasileiro, Raymundo Faoro (1925/2003). Intelectual versado nas mais influentes áreas das ciências sociais, entendemos, seus trabalhos expressam uma interpretação do Brasil, no qual a colonização portuguesa, foi decisiva para o estabelecimento de um Estado, elaborado para atuar como protagonista da organização social, muitas vezes, em detrimento do liberalismo e da própria democracia. Neste sentido, propomos uma tese acadêmica, que teve como fim responder a questão: qual o significado da colonização portuguesa, na avaliação realizada por Raymundo Faoro, em sua interpretação da formação social do Brasil? Com isso, buscamos as singularidades de forma e conteúdo da sua narrativa, o inserindo em uma tradição de interpretes brasileiros e portugueses, destacados por apontar o patrimonialismo, como o principal legado do período em que fizemos parte do Império ultramarino lusitano. Em nossa tese, Raymundo Faoro, ao abordar a herança colonial ibérica, como o principal fator causador do nosso atraso político e social, realiza uma interpretação negativa da cultura ibérica portuguesa, assim, como também estritamente cética, quanto as possibilidades da sociedade civil brasileira, em superar esse obstáculo. O analisamos abordando seu trabalho elementar: "Os Donos do Poder: formação do patronato político brasileiro" (1958), num processo de comunicação entre... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Résumé: Cette thèse de doctorat est le résultat d'une recherche, où nous proposons une enquête sociologique sur la pensée politique du juriste brésilien, Raymundo Faoro (1925/2003). Intellectuelle versés dans les domaines les plus influents des sciences sociales, nous comprenons, ses œuvres expriment une interprétation du Brésil, où la colonisation portugaise, a été décisive pour la mise en place d'un État prêt à agir en tant que protagoniste de l'organisation sociale, souvent au détriment du libéralisme et la démocratie elle-même. En ce sens, nous proposons une thèse universitaire, qui vise à répondre à la question: quel est le sens de la colonisation portugaise dans l'évaluation par Raymundo Faoro, dans son interprétation de la formation sociale du Brésil? Avec cela, nous cherchons les singularités de la forme et le contenu de son récit, l'entrée dans une tradition d'interprètes brésiliens et portugais, mis en évidence en pointant patrimonialisme, comme le principal héritage de cette période, alors que nous faisions partie de l'empire d'outre-mer portugais. Dans notre thèse, Raymundo Faoro, s'adressant à l'héritage colonial ibérique, comme la principale cause de notre retard politique et social, porte une interprétation négative de la culture ibérique portugais, sceptique, aussi, sur les possibilités de la société civile brésilienne, pour surmonter cette obstacle. Nous l'analyserons dans son travail élémentaire: "Les Propriétaires du Pouvoir: Formation du Patronage Politique Brésil... (Résumé complet accès életronique ci-dessous) / Doutor

Made available in DSpace on 2016-08-29T15:37:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_6105_DISSERTAÇÃO - MARCELO CHAMELETE.pdf: 666740 bytes, checksum: 2059fc425fdbafd74ebe3793f976627d (MD5) Previous issue date: 2012-03-30 / Das doenças cardíacas caninas, a degeneração valvar mixomatosa é a de maior prevalência na rotina da clínica médica, podendo levar a insuficiência cardíaca. Sabe-se que é uma doença de caráter crônico e progressivo sem cura, cujo controle depende, principalmente da inibição da ativação dos mecanismos compensatórios neuroendócrinos. A melhor estratégia da terapia depende da gravidade da doença e fatores individuais, tornando o tratamento da doença desafiador, e precipitando a necessidade de monitorização constante do paciente. Um bloqueio da ativação de mecanismos compensatórios mais amplo tem sido utilizado em insuficientes cardíacos humanos com os fármacos bloqueadores de receptores de angiotensina II (BRAs). Muitas são as pesquisas demonstrando os benefícios da utilização dos BRAs em insuficientes cardíacos humanos, porém em cães a pesquisa ainda é escassa. No presente trabalho objetivou-se revisar a degeneração valvar mixomatosa em cães e o tratamento padrão, assim como revisar a utilização dos BRAS. Objetivou-se também com essa pesquisa, avaliar os efeitos do bloqueador de receptor de angiotensina II, o valsartan em 20 semanas em cães com degeneração valvar mixomatosa. Foram obtidos dados clínicos, eletrocardiográficos, ecocardiográficos, laboratoriais antes da introdução do valsartan a 0,5 mg/kg a cada 24 horas e a cada quatro semanas até completarem-se 20 semanas. Pode-se notar que a relação Ae/Ao em nenhum momento foi maior que 1,7, apesar do constante remodelamento, não havendo diferença significativa entre o momento inicial e o final. O índice de volume sistólico se manteve aumentado durante todo o experimento, e o índice de volume diastólico aumentou no M3 mas retornou ao valor semelhante igual ao do início. A pressão arterial sistêmica sistólica não apresentou alteração estatística. Não houve alteração de valores hematológicos, porém a elevação das as enzimas hepáticas sugeriram sobrecarga hepática. A ausência de efeitos colaterais e a manutenção de fatores clínicos, eletrocardiográficos, laboratoriais e ecocardiográficos, importantes para o bom prognóstico, revela que o valsartan na dose de 0,5 mg/kg pode ser uma opção eficaz e segura em cães com insuficiência cardíaca congestiva de corrente da doença valvular crônica.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2015. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2016-04-05T17:22:12Z No. of bitstreams: 1 2016_GabrielAvohayAlvesCampos_Parcial.pdf: 296772 bytes, checksum: e004e390adc429a7c62acd3c1277343a (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2016-04-06T11:11:15Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_GabrielAvohayAlvesCampos_Parcial.pdf: 296772 bytes, checksum: e004e390adc429a7c62acd3c1277343a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-06T11:11:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_GabrielAvohayAlvesCampos_Parcial.pdf: 296772 bytes, checksum: e004e390adc429a7c62acd3c1277343a (MD5) / A Doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa implacável e fatal, progressivamente debilitante e que causa uma série de prejuízos para os seus portadores, tanto econômicos quanto sociais e psicológicos. As principais características patológicas da DP são a degeneração de neurônios dopaminérgicos dos Núcleos da Base, em especial da Substância Negra (SN), e a presença de corpos de inclusão eosinófilos no citoplasma dos neurônios, os chamados Corpos de Lewy. A ausência de medicamentos aprovados para uso em humanos capazes de modificar a progressão da doença, somada aos efeitos adversos associados às terapias existentes, traz urgência no desenvolvimento tanto de novas ferramentas no estudo da DP quanto de novos tratamentos mais eficazes ou que modifiquem o curso da doença. Este trabalho teve como objetivo, portanto, avaliar a atividade antiparkinsoniana do peptídeo sintético Neurovespina, análogo a um peptídeo isolado de vespa social, no modelo murino da Doença de Parkinson por injeção unilateral intraestriatal da neurotoxina 6-OHDA. Foram utilizados ensaios para avaliar, após três administrações do peptídeo e durante 22 dias, o efeito de três diferentes doses da Neurovespina. Para tal finalidade, foram realizados os seguintes procedimentos: avaliação do comprometimento motor no equipamento RotaRod, avaliação sensório-motora no teste de remoção de fita, teste de rotações induzidas por apomorfina, além da marcação imunoistoquímica da enzima tirosina hidroxilase (TH) na região da SN (e da região VTA anexa à SN) e de projeções dopaminérgicas na região do estriado (Densidade Ótica estriatal). Avaliando-se o comprometimento motor dos animais por meio da aferição da latência de queda dos animais no aparelho RotaRod, o tratamento com Neurovespina nas doses de 7mg/kg e de 4mg/kg resultou em uma diminuição do comprometimento motor induzido pela administração de 6-OHDA, de forma persistente ao longo de todo o período experimental. Na avaliação sensitivo-motora, somente foi possível observar diferenças significativas do grupo Sadio e o tratado com 4mg/kg em comparação com o grupo Lesado no último dia de experimento. O teste de rotações induzidas por apomorfina demonstrou diferença significativa somente entre os controles Sadio e Lesado, além de uma leve diminuição na média de rotações do grupo tratado com 7mg/kg (não significativa). Na análise de neurônios THr remanescentes (porcentagem em relação ao lado contralateral) na SN, foi observada diferença significativa entre as médias do tratamento com 4mg/kg e o controle Lesado, indicando ação neuroprotetora do peptídeo em neurônios dopaminérgicos nessa dose. O mesmo, entretanto, não foi observado para a região VTA, tão pouco para a análise Densidade Ótica. Estes dados mostraram que a administração do peptídeo Neurovespina na dose de 4mg/kg foi capaz não só de diminuir a descoordenação motora gerada pela infusão intraestriatal de 6-OHDA como também foi capaz de proteger os neurônios dopaminérgicos da SN, se mostrando uma potencial ferramenta para o estudo da DP e potencial fármaco-modelo para o desenvolvimento de novas moléculas neuroativas. / Parkinson's Disease (PD) is a relentless, progressively debilitating and fatal neurodegenerative disorder that causes both economic, social and psychological damage in patients with this disorder. The main pathological features of PD are the degeneration of dopaminergic neurons of the basal ganglia, especially the Substantia Nigra (SN), and the presence of eosinophilic inclusion bodies in the cytoplasm of neurons, the so-called Lewy bodies. In addition to the fact that there is no drug approved for use in humans able to modify the progression of the disease, the standard treatment for PD is associated with several adverse effects. This scenario brings urgency in the development of new tools for the study of PD, as well as new treatments that are more effective and able to modify the course of degeneration. Therefore, this study evaluated the antiparkinsonian activity of the synthetic peptide Neurovespina, analogous to a peptide isolated from a social wasp, in the murine model of PD by intrastriatal unilateral injection of the neurotoxin 6-OHDA. For this purpose, several assays were conducted, after three administrations of the peptide and for 22 days, to assess the effect of three different doses of Neurovespina. For such purposes, the following procedures were performed: assessment of motor impairment on the RotaRod equipment, motor-sensory evaluation in the adhesive tape removal test, apomorphine induced rotations test and immunohistochemical labelling of the enzyme tyrosine hydroxylase (TH) of the SN (and VTA region near the SN) and dopaminergic projections into the striatum region (striatum Optical Density). Evaluating motor impairment by measuring the animal’s latency to fall in the RotaRod apparatus, Neurovespina at the doses of 7mg/kg and 4 mg/kg resulted in a decrease of the motor impairment induced by the administration of 6-OHDA. Moreover, this effect was persistent throughout the experimental period. In the sensory-motor evaluation by the tape removal test, significant difference between the group treated with 4 mg/kg and the Lesioned group was observed only in the last of three evaluations. The apomorphine-induced rotations test showed a significant difference only between the Sham and Lesioned controls, plus a slight decrease in the average rotations of the group treated with 7 mg / kg (not significant). Analysis of the remaining THr neurons in SN showed significant difference between the treatment with 4 mg / kg and the Lesioned control, indicating a neuroprotective action of the peptide on dopaminergic neurons at this dose. In account of the VTA region and striatal Optical Density, there was no difference between the Lesioned group and the treatments. These data showed that the administration of the Neurovespina peptide at a dose of 4 mg/kg not only reduced the motor impairment generated by intrastriatal infusion of 6-OHDA, but also protected dopaminergic neurons in the SN. This indicates Neurovespina as a potential tool for the study of PD and a potential template molecule for the development of novel neuroactive compounds.

Tese de Doutorado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade do Extremo Sul Catarinense – UNESC, para obtenção do título de Doutora em Ciências da Saúde. / Sepsis survivors have cognitive impairments associated with decreased quality of life and increased long-term morbidity. Some of these changes are similar to the pathophysiology of neurodegenerative diseases. The receptor for advanced glycation end product ( RAGE) has been associated with progression of neuronal death in many neurodegenerative diseases such as Alzheimer's, and is an important pro- inflammatory mediator. Previous studies have shown that the use of metalloproteinase inhibitor or antioxidant can assist in reducing cognitive impairment. We analyzed biochemical parameters related to neurodegeneration in animal sepsis survivors and the possible involvement of RAGE, the inhibitory avoidance test and use of Metalloproteinase Inhibitor and Antioxidant in animals surviving sepsis. The animals were subjected to sepsis by cecal ligation and puncture ( CLP ) and thirty days after induction, hippocampus and prefrontal cortex were isolated. In the first experiment the immunocontent the _ - amyloid peptide ( Aß ), _ - synuclein, synaptophysin and phosphorylated tau were analyzed by western blot. Furthermore, it was found that the RAGE immunocontent the presence of S100_. An increase of _ -synuclein, tau and phosphorylated Ab and the hippocampus, but not in the prefrontal cortex. The immunocontent RAGE was increased in the two structures and S100_ showed no differences compared to controls in both structures. In the second experiment, we determined the levels of Aß and synaptophysin ( identical to experiment 01 procedures ) and performed the inhibitory avoidance, where the data showed that the inhibitory avoidance latency was significantly reduced in sepsis group compared to sham, suggesting damage to the memory aversive. In the third experiment procedures as experiment 01 were adopted for the animals, except for a few animals that were immediately treated the induction of sepsis with ATX and MMP 2-9 and subsequently testing the inhibitory avoidance (as experiment 02 ). Despite the fact that the inhibitory avoidance task to be a dependent of the hippocampus, it was not possible to determine a decrease in the levels of synaptophysin in the hippocampus or a relationship of increased levels of Aß and RAGE in the hippocampus with test performance of inhibitory avoidance. In the prefrontal córtex synaptophysin levels drop and small increase in their levels of treatment was observed, improved deseempenho memory. The early treatment with antioxidants can decrease cognitive impairment in long-term animals. We concluded that the brains of animals surviving sepsis have several markers of neurodegeneration and performance in the inhibitory avoidance test seems to be dependent on the levels of some of these markers, suggesting a neurodegenerative phenomenon this may be an important factor in cognitive impairment associated with long term rat sepsis survivors. / Sobreviventes a sepse apresentam danos cognitivos associados com a diminuição da qualidade de vida e aumento da morbidade a longo prazo. Algumas destas alterações se assemelham aos mecanismos fisiopatológicos de doenças neurodegenerativas. O receptor para produto final de glicolização avançada (RAGE) vem sendo associado à progressão de morte neuronal em muitas doenças neurodegenerativas, como o Alzheimer, além de ser um importante mediador próinflamatório. Estudos anteriores mostraram que o uso de Inibidor de metaloproteinase de matriz (MMP) ou antioxidante (ATX) podem auxiliar na redução do dano cognitivo. Analisaram-se parâmetros bioquímicos relacionados à neurodegeneração em animais sobreviventes a sepse e o possível envolvimento do RAGE; o teste de esquiva inibitória e uso de Inibidor de MMP e ATX em animais sobreviventes a sepse. Os animais foram submetidos à sepse por ligação cecal e punção (CLP) e trinta dias após a indução, hipocampo e córtex pré-frontal foram isolados. No primeiro experimento o imunoconteúdo do peptídeo amilóide-_ (A_), _-sinucleína, sinaptofisina e tau fosforilada foram analisados por western blot. Além disso, verificou-se o imunoconteúdo de RAGE e a presença de S100_. Houve aumento de _-sinucleína, A_ e tau fosforilada no hipocampo, mas não no córtex pré-frontal. O imunoconteúdo de RAGE esteve aumentado nas duas estruturas e S100_ não apresentou diferenças quando comparadas ao controle, em ambas as estruturas. No segundo experimento, foram determinados os níveis de A_ e sinaptofisina (procedimentos idênticos ao experimento 01) e realizada a esquiva inibitória, onde os dados mostraram que a latência na esquiva inibitória foi significativamente reduzida no grupo sepse quando comparados ao sham, sugerindo dano na memória aversiva. No terceiro experimento foram adotados procedimentos conforme experimento 01 quanto aos animais, com exceção de alguns animais que foram tratados imediatamente a indução da sepse com ATX e inibidor de MMP 2-9 e posteriormente o teste da esquiva inibitória (conforme experimento 02). Apesar do fato de a esquiva inibitoria ser uma tarefa dependente do hipocampo, não foi possível determinar uma diminuição nos níveis de sinaptofisina no hipocampo ou uma relação do aumento dos níveis de A_ e RAGE no hipocampo com desempenho no teste da esquiva inibitória. No córtex pré-frontal foi observada queda dos níveis de sinaptofisina e com pequeno aumento nos seus níveis de tratamento, melhorou o desempenho da memória. O tratamento com ATX precoce pode diminuir o deficit cognitivo a longo prazo em animais. Conclui-se que o cérebro dos animais sobreviventes a sepse apresentam vários marcadores de neurodegeneração e o desempenho no teste de esquiva inibitória parece ser dependente dos níveis de alguns destes marcadores, sugerindo um fenômeno neurodegenerativo podendo este ser um fator importante na associação com dano cognitivo a longo prazo em ratos sobreviventes a sepse.

Made available in DSpace on 2014-06-12T16:25:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3196_1.pdf: 1609060 bytes, checksum: 56d061c007d949c235169a3a4808b5b6 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Objetivo: Avaliar a microbiota bacteriana da conjuntiva e sua sensibilidade aos antibióticos em portadores de degeneração macular relacionada à idade (DMRI) exsudativa, comparando com a de portadores de catarata. Métodos: Realizou-se estudo prospectivo, observacional, analítico, com corte transversal em duas populações de estudo. Foram constituídos dois grupos: grupo I (DMRI exsudativa ativa com indicação de injeção intravítrea de bevacizumab) com 16 olhos de 16 pacientes (oito do sexo masculino e oito do feminino) com média de idades de 71,3±9,9 anos; grupo II (catarata em pré-operatório para cirurgia) com 27 olhos de 27 pacientes (nove do sexo masculino e 18 do feminino) com média de idades de 67,6±7,9 anos. Os grupos foram homogêneos em relação à idade (p=0,180) e ao sexo (p=0,280). Foi realizada coleta de secreção do fundo de saco inferior da conjuntiva, através de swab, e imediatamente colocado em tubo contendo meio líquido BHI (brain heart infusion). As amostras foram processadas conforme técnicas laboratoriais padrão e realizado antibiograma de cada colônia isolada. Resultados: Houve crescimento de 17 colônias bacterianas no grupo I, com um olho não apresentando crescimento e 30 colônias no grupo II. Houve maior frequência de bactérias Gram positivas nos dois grupos: 14/17 colônias (82,3%) no grupo I e 29/30 colônias (96,7%) no grupo II, com predomínio de Staphylococcus aureus em ambos os grupos, com oito amostras (47,1%) e 17 (56,7%), respectivamente. Staphylococcus coagulase negativa foi a segunda bactéria mais identificada, com 23,5% no grupo I e 20,0% no grupo II. Nenhuma diferença de freqüência entre os grupos alcançou significância estatística. Não foi observada diferença estatisticamente significante na sensibilidade das bactérias aos antibióticos testados entre os dois grupos, entretanto houve tendência para maior resistência à oxacilina nos portadores de DMRI (p=0,081). Conclusão: Não houve diferença na distribuição das bactérias e sensibilidade aos antibióticos da microbiota conjuntival em portadores de DMRI exsudativa, comparada com a de catarata

Orientador: Iscia Lopes Cendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T00:30:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_FlaviaChagas_M.pdf: 2665617 bytes, checksum: b552b22eff093aa5e800faf30ad82041 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: As ataxias espinocerebelares (ABC) formam um grupo heterogêneo de doenças degenerativas que envolvem o sistema nervoso central. Esse grupo se caracteriza clinicamente por apresentar disfunção cerebelar manifestada por ataxia de marcha, incoordenação e disartria. Nos casos familiares, o padrão de herança é variável, podendo ser compatível com herança autossômica dominante (HAD) ou herança autossômica recessiva (HAR). Para as ataxias espinocerebelares com HAR existem três lócus identificados até o momento: ataxia de Friedreich (AP) no cromossomo 9q; ataxia com deficiência de vitamina E (ADVE) no cromossomo 8q,. e uma forma muito rara de início da inf'ancia, IOSCA (Infantile Onset Spinocebellar Ataxia) no cromossomo 10q. A maioria dos casos de AP é causada por uma expansão em homozigose do trinucleotídeo (GAA)n localizado no primeiro ÍI1tron do gene -125. Esse gene codifica uma proteína de 210 aminoácidos denominada de Frataxina, com alvo mitocondrial. Alelos normais variam de sete a 30 unidades (GAA)n enquanto que alelos expandidos' variam de 100 a 1700 (GAA)n. A ADVE é clinicamente semelhante à AP, sendo que a maneira mais confiável de realizar o diagnóstico diferencial entre essas duas formas de ataxia é através da análise molecular. A ADVE é causada por mutações de vários tip?s ,e~ontradas no gene a-TTP, que codifica a proteína transportadora do alfa-tocoferol, com 278 aminoácidos. Pelo menos 13 tipos de mutações foram descritas até o momento. Neste estudo, foram genotipados 97 indivíduos pertencentes a 58 famílias não relacionadas. Uma freqüência de 15% de indivíduos afetados com a mutação AP foi encontrada Este é um estudo pioneiro no Brasil, onde estudamos a freqüência das mutações responsáveis pelas ataxias espinocerebelares com fIAR determinamos as características das mutações encontradas e realizamos estudos de correlação entre o genótipo e características feno típicas desses pacientes / Abstract: The spinocerebellar ataxia form a group of neurodegenerative disorders with clínical heterogeneity. They are characterized by cerebelIar dysfunction with progressive ataxia, incoordenation and dysarthria. Familial cases show variable pattem of inheritance: autossomal dominant (AD) or autossomal recessive (AR). To date, thereare four loci described for the spinocerebelIar ataxia with AR: Friedreich ataxia (F A) on chromosome 9q; ataxia with vitamin E deficiency (ADVE) on chromosome 8q, the lnfantile Onset SpinocerebelIar Ataxia (IOSCA) on chromosome 10q and ataxia telangiectasia on chromosome llq. the %25 gene. This gene encodes for a 210 aminoacids protein named Frataxin, with mitochondrial target. Normal (GAA)n alleles range ITom seven to 30 (GAA)n units and expanded (GAA)n alleles have 200 to 1700 (GAA)n units. ADVE is clinically identical to the FA,-and the best way to di:fferentiate between the two forms is by molecular testing. ADVE is caused by di:fferent types of mutations, found in the a-TTP gene, with codes for alpha tocopherol transfer protein, with 278 aminoacids. To date, there are 13 di:fferent mutations reported in a-TTP. We studied 97 individuais, belonging to 58 unrelated families. The ITequency of patients with FA mutation was 15% among our patients. No mutations were found in a-TTP gene by SSCP ana1ysis. This is the first report on the fTequency of different mutations causing spinocerebellar ataxia with AR inheritance in the Brazilian population. In addition, we analyzed the molecular characteristics of the mutations detected and performed genotype - phenotype correlation / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas